药物对离体豚鼠回肠收缩的作用 PPT课件
药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
实验报告
针对实验数据,进行结果描述 针对实验数据, 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体 豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2 对离体豚鼠 回肠平滑肌的作用机理。 3. 参考文献 如:[1]陆源,夏强. 生理科学实验. 浙江大学出版社, 2004,245-247
肠管
观察项目
记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。 记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。 基础张力 加入10 换液。 加入 -2 g/L Ach 0.2ml,观察并记录曲线,作用明显时换液。 ,观察并记录曲线,作用明显时换液 重复以上Ach剂量,待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml, 剂量,待收缩到最高点时加入 重复以上 剂量 阿托品 , 观察曲线,此时不换液,待曲线基本稳定后, 观察曲线,此时不换液,待曲线基本稳定后,再加入相同量的 Ach,观察并记录收缩曲线,换液。 ,观察并记录收缩曲线,换液。 加入10 换液。 加入 -2 g/L组胺 0.3ml,作用明显时迅速换液。 组胺 ,作用明显时迅速换液 预先加入10 扑尔敏0.2 , 预先加入 -2 g/L扑尔敏 ml,5 min后(不换液)加入同量组 扑尔敏 后 不换液)加入同量组 换液。 胺,观察并记录收缩曲线 ,换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml,当作用达到最高点,加入1 g/L阿托 加入 溶液 ,当作用达到最高点,加入 阿托 品 0.2 ml,观察并记录收缩曲线。 ,观察并记录收缩曲线。
标本准备( ) 标本准备(2)
取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对 取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对 角处分别用缝针穿线 并打结。一端系于浴槽固定钩 分别用缝针穿线, 角处分别用缝针穿线,并打结。一端系于浴槽固定钩 另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 张力换能器的悬臂梁上 上,另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器
药物对离体豚鼠回肠的作用
注意事项
• 冲洗和分离肠管时动作应轻柔,尽量避免牵拉 肠管。肠管两端穿线时,切勿将肠管缝死,只 需穿过一层肠壁。 • 台氏液应保持在37±0.5 °C,换液时,台氏液 亦应38±0.5 °C 。 • 加药时不要把药液直接加到回肠上,以免影响 结果。 • 浴温和肠肌的张力均可影响实验结果,应注意 调节。
方法和步骤
• 实验装置准备和仪器参数设置
– 麦氏浴槽内稳度:37 °C – 通气:95%O2+5%CO2 (1-2个气泡/秒)
• 标本制备
– 击昏豚鼠,剖开腹腔,在离回盲部1 cm处剪 取回肠(长约10 cm),置于氧饱和的冷台 氏液中,除去肠系膜,将回肠剪成数小段 (长约1-1.5 cm),用注射器冲洗干净,换 以新鲜台氏液备用。勿牵拉肠段。 – 在肠管两端对角处用线打结。注意保持肠管 通畅。肠管一端系于浴槽固定钩上,然后放 入浴槽中。另一端系于张力换能器,调节张 力至2-3 g。
观察项目
(1)稳定10-30 min后,记录一段正常收缩曲线。 然后用注射器依次向麦氏浴槽中滴加药液。每加 一组药时立即标记,并观察、记录收缩幅度。 (2)加入Ach 0.2 ml,观察2-3 min后换液(3次) (3)重复以上Ach剂量,待收缩到最高点时,加 入atropine 0.2 ml。不换液,待平滑肌收缩曲线 稳定后,再加入Ach 0.2 ml,观察2-3 min后换 液
• 先给乙酰胆碱,是因为乙酰胆碱是一种完全拟 胆碱药,作用于M受体产生M样作用,兴奋平 滑肌,使回肠肌收缩,描笔曲线呈现上升。 • 给阿托品后,由于阿托品能竞争性阻断M受体, 对抗乙酰胆碱的M样作用,对内脏平滑肌有松 弛作用,因此给阿托品后曲线下降到正常状况。 • 氯化钡不作用于受体,而是直接作用于肠管, 使肠管受到钡离子的刺激后产生收缩,曲线呈 上升,此时再加阿托品,不能拮抗,曲线无变 化。
药物对离体豚鼠回肠的作用
将RM6240系统处 在记录状态;
将回肠标本的上 端连线打一活 结,勾在张力换 能器的悬臂梁钩 上
2. 方法
2.5 RM6240系统的使用:
剪辑
1.实验---生理科学实 验--- 肠肌 2.记录、实验中用暂 停, 实验结束用停 止,停止后一定要 另存为d或e盘。 3.标记:在标记窗内 打上药名,加药时
1. 摘要(目的、方法、结果、结论) 2. 材料和方法: 3. 实验结果:
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图(图题在图的下方) 3.2 表1 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
3.3 结果
• 观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体 拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏)对乙酰 胆碱、组胺的拮抗作用。
实验原理
1. 乙酰胆碱:小剂量时有M胆碱受体激动作用。Ach与M受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流↑,肌浆 [Ca2+]↑,平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有.N胆碱 受体激动作用,使胃肠道平滑肌兴奋。
注意事项:
实验结束将资料另存为D盘或E盘,不要存在C盘或桌面,以免误退出 程序时实验数据丢失。
3. 结果
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图 3.2 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响 (数据ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ计表)
收集数据
离 体 豚 鼠 回 肠 实 验 10个 小 组 的 原 始 数 据 列 表
收 缩 幅 度 ( g)
收 缩 幅 度 ( g)
阿托品
氯苯那敏
实验小组 Ach
Ach
His
H is
1
2
实验15药物对离体豚鼠回肠的作用 (2)
药物对离体豚鼠回肠的作用【摘要】目的:了解胆碱能神经递质乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)和局部炎症介质组胺(histamine)对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的阻断作用。
方法:取离体豚鼠回肠1cm,利用RM6240系统和张力换能器,分别检测乙酰胆碱,组胺,阿托品,扑尔敏和BaCl2作用前后,回肠平滑肌张力的变化。
结果:乙酰胆碱和组胺能使离体豚鼠回肠平滑肌的收缩幅度增高,用阿托品处理标本后,乙酰胆碱的收缩平滑肌效应被阻断(P<0.01);用扑尔敏处理标本后,组胺的收缩平滑肌效应被阻断(P<0.01);BaCl2能使离体豚鼠回肠平滑肌大幅度收缩,再用阿托品处理标本,BaCl2的收缩平滑肌效应被部分阻断。
结论:乙酰胆碱为M胆碱受体激动药,组胺为H1受体激动药,BaCl2为肌肉兴奋剂,三者分别作用与回肠平滑肌时,使平滑肌收缩。
阿托品为M胆碱受体阻断药,扑尔敏为H1受体阻断药,两者可以分别阻断乙酰胆碱和组胺对平滑肌的激动作用。
【关键词】乙酰胆碱组胺阿托品扑尔敏 M胆碱受体 H1受体胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。
Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。
Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。
Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂,能阻断histamine与H1受体的结合,从而产生抗histamine作用。
BaCl2为肌肉兴奋剂,能够使平滑肌强烈收缩[1]。
1.材料和方法1.1 实验动物豚鼠1只(雄性,健康)1.2 仪器离体装置,麦氏浴槽(25ml),HSS-1(B)超级恒温器(成都仪器厂),张力换能器,RM6240BD型生物信号采集处理系统(成都仪器厂),移液器20~200μl,100~1000μl 各一把(Finnipipette),手术器械一套。
离体回肠
四.实验方法
(1)预热,打开恒温槽电源,设定37℃(已设定,勿动 (2)清洗麦氏槽,加入约20ml台式液。 (3)调节空气泵:1-2气泡/秒。 (5)开启电脑及ASB240U生物信号处理系统,设定参 数。 (6)离体回肠标本制备与连结. (7)给药观察药物作用. (8)实验结果保存、编辑打印。
停止实验 保存在E盘:我的实验文件夹中,请老师打印。
药物对豚鼠离体回肠的作用
一、实验目的:
1、掌握离体平滑肌实验方法。 2、观察药物对豚鼠离体回肠平滑肌的作用效 应,并分析其作用机制。
二、实验原理:
ACh
阿托品
回肠M受体 组胺
苯海拉明
H1受体
平滑肌收缩↑ 平滑肌收缩↑
氯化钡 Ba2+经钙通道进入胞浆 触发肌浆网释放Ca2+
肌浆[Ca2+] ↑ 平滑肌收缩↑
管,置于台式液中,冲洗剪成2cm段备用。
离体回肠标本连结 离体回肠两端各系一线,一段于换能器尖
端,另一端过浴槽横杆固定于支架上,给予 1g外力,观察电脑显示器波形波动。
动作应轻柔,尽量避免牵拉肠管
给药方法
第一组
阿托品0.1ml
苯海拉明0.1ml
乙酰胆碱0.2m
四.实验方法
(1)预热,打开恒温槽电源,设定37℃(已设定,勿动 (2)清洗麦氏槽,加入约20ml台式液。 (3)调节空气泵:1-2气泡/秒。 (5)开启电脑及ASB240U生物信号处理系统,设定参 数。 (6)离体回肠标本制备与连结. (7)给药观察药物作用. (8)实验结果保存、编辑打印。
ASB240U生物信号系统使用方法
磷酸组织胺0.2m
第三组
氯化钡0.2m 苯海拉明0.1ml 阿托品0.2m
药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
详细描述
平滑肌细胞的动作电位是肌肉收缩的 电生理基础,药物可以通过改变平滑 肌细胞的动作电位,影响肌肉细胞的 兴奋性和收缩性,进一步影响离体豚 鼠回肠的收缩活动。
04 药物作用效果评价
药物作用的量效关系评价
量效关系
药物作用的强弱与其剂量或浓度呈正相关,通过观察不同剂量或浓 度的药物对离体豚鼠回肠收缩的影响,可以确定药物的量效关系。
长的段。
药物处理
将待测试的药物加入灌流液中 ,观察回肠收缩情况。
数据记录
使用生物信号采集系统记录回 肠收缩的幅度和频率,观察药 物对回肠收缩的作用。
结果分析
对实验数据进行统计分析,比 较不同药物对回肠收缩的影响
。
02 实验结果
药物对离体豚鼠回肠收缩的影响
01
药物对离体豚鼠回肠收缩具有显著影响,可引起收缩幅度和频 率的变化。
生理盐水
用于维持离体回肠的正常生理环境。
药物
待测试的药物,如阿托品、肾上腺素等。
实验设备
01
02
03
离体器官灌流系统
用于维持离体器官的正常 生理环境,提供恒温、恒 流的灌流液。
生物信号采集系统
用于记录离体器官的收缩 活动。
显微镜
观察离体器官的形态变化。
实验方法
离体器官制备
将豚鼠处死后取出回肠,去除 周围组织,将回肠剪成约2cm
02
某些药物可增强回肠收缩,而另一些药物则可能抑制收缩。
不同药物对回肠收缩的作用机制可能不同,涉及神经调节、平
03
滑肌细胞膜电位变化等多种因素。
不同浓度药物对回肠收缩的影响
1
随着药物浓度的增加,其对回肠收缩的影响程度 也会发生变化。
药物对豚鼠离体回肠的作用
药物对离体肠管的作用 参数:电流:DC 灵敏度:3.8克 滤波:50HZ 走纸速度:12.5s/div
(三)离体回肠标本的连结
离体回肠两端各系一线,一端挂于换能器尖端, 另一端绕过浴槽内铁丝钩自由悬垂,给予1g外力, 使波形上升1-2格,固定于铁架台上
【预习要求】
1.预习相关理论 2.实验方法与步骤 3.预测实验结果。
下次实验内容磺胺嘧啶钠在兔体内的药物动 力学。
(二) ASB240U生物信号处理系统的设定
(三) 离体回肠标本的连结
(四) 给药
(一) 仪器准备
(1)打开恒温水浴箱电源开关,预热 (注意:已设定37±0.5 ℃ ,勿动)
(2)清洗麦氏槽,加入约20ml台式液
(注意:打开空气泵再清洗)
(3)调节空气泵:呈细密小气泡
(二) ASB240U生物信号处理系统的设定
(固定)
(连换能器)
动作应轻柔,尽量避免牵拉肠管
(四)给药
氯化钡0.2ml
乙酰胆碱0.2ml
.
组胺0.2ml 阿托品0.1ml
苯海拉明0.1ml 乙酰胆碱0.2ml 组胺0.2ml
苯海拉明0.1ml
阿托品0.1ml
给药注意事项
1.每次给药后立即打标记,观察,待曲线稳定后 (走2-3格)再加入另一种药物
组胺
待作用稳定后,加入苯海拉明0.1ml。
2.注意清洗针管,加药时勿将药液直接加到 肠管上或将药物沾染到浴槽壁 3.做完后点 结束实验,结果存到E:/我的实验
组胺
苯海拉明
【实验结果打印说明】
1.实验结果保存在E:/我的实验 2.打开数据文件 →右键显示所有数据 →通过⊕放大选中波段,调整图形至最佳 通过⊕放大坐标轴 →剪切图片 →右键输出图形到Word →打印结果
实验13 药物对离体豚鼠回肠的作用
实验13 药物对离体豚鼠回肠的作用目的观察acetylcholine、histamine和BaCl2 等药物对离体豚鼠回肠平滑肌的作用,以atropine及chlorpheniramine两药为工具,初步分析上述三药作用原理。
材料豚鼠;小剪刀,小镊子,培养皿,麦氏浴槽,胶管,通气钩,气泵,棉线,木槌;气泵,张力换能器,超级恒温器,PcLab生物信号采集处理系统;台氏溶液,acetylcholine chloride溶液(1:10万),0.1% atropine sulfate溶液,histamine phosphate溶液(1:10万)(临用时新鲜配制)、chlorpheniramine溶液(1:100万)、1%BaCl2 溶液。
方法和步骤1.离体肠管描记装置的准备(见图10-13-1)。
(1)麦氏浴槽中充以台氏液至固定水平面,调节超级恒温器的温度至37℃,保证麦氏浴槽内37℃±0.5℃恒温。
(2)胶管的一端接气泵出口,胶管的另一端连接通气钩。
2.PcLab参数设置:(1)按图10-13-1连接装置。
将张力换能器固定于铁支柱上,换能器输出线接微机生物信号处理系统第二通道(亦可选择其它通道),选择直流耦合方式(DC)。
(2)微机生物信号处理系统参数设置:采样间隔2ms;连续记录显示模式,压缩比100:1,第二通道放大倍数200~500、高频滤波选择“无”。
3.取豚鼠一只,用木槌击其头部处死,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于盛有充以空气的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成数小段(每小段1-1.5cm),用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,换以新鲜台氏液备用。
注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。
4.取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。
注意保持肠管通畅,勿使其封闭。
肠管一端连线系于通气钩钩上,然后放入37℃麦氏浴槽中。
1.药物对豚鼠离体回肠的影响ppt课件
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1
二、实验原理
阿托品
Ach
回肠M受体
组胺
H1受体
苯海拉明
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平滑肌收缩↑ 平滑肌收缩↑
3
氯化钡 (Bacl2) Ba2+经钙通道进入胞浆
触发肌浆网释放Ca2+ 肌浆[Ca2+] ↑ 平滑肌收缩↑
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胆碱能神经释 放ACh
4
三、材料与仪器
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(一)仪器准备
1.打开恒温水浴箱电源开关,预热。 (注意:已设定37±0.5℃ ,勿动)
2.清洗麦氏槽,加入约20ml台式液。 3.调节空气泵:呈细密小气泡,1~2个/s。
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(二)ASB240U生物信号系统的设定
ASB240U生物信号系统 实验模块 药理学实验 药物对离体肠管的作用
参数:电流:DC 灵敏度:3.8g 滤波:50HZ 走纸速度:12.5s/div
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(三)离体回肠标本的连结
离体回肠两端各系一线,一端挂于换能器尖端,另 一端绕过浴槽内铁丝钩自由悬垂,给予1g外力,使 波形上升1格半, 固定于铁架台上。
(固定)
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ(连换能器)
动作应轻柔,尽量避免牵拉肠管
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1.实验动物 豚鼠
2.药品与试剂
0.01%磷酸组胺溶液, 0.01%苯海拉明溶液,
0.01%乙酰胆碱溶液, 0.01%阿托品溶液,
10% BaCl2 溶液,
台氏液。
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5
3.实验仪器
恒温水浴箱、麦氏浴槽、 ASB240U生物信号处理系统
药物对离体豚鼠回肠的作用ppt课件
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10
2. 观察项目
2.1 ACh → 洗脱 2.2 ACh → atropine → 洗脱 2.3 histamine → 洗脱 2.4 chlorpheniramine → histamine → 洗脱 2.5 BaCl2 → atropine
药物对离体豚鼠回肠的作用
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1
实验原理(Principle)
ACh
阿托品
回肠M受体
平滑肌Ca2+通道开放
Ca2+内流↑
胞浆Ca2+ ↑
平滑肌收缩↑
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2
扑尔敏
组胺 H1受体
G蛋白
肌浆网释放Ca2+ 平滑肌收缩
Ca2+通道 外Ca2+内流精选课件 Nhomakorabea3
氯化钡 Ba2+经钙通道进入胞浆 触发肌浆网释放Ca2+
肌浆[Ca2+] ↑ 平滑肌收缩↑
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胆碱能神经释 放ACh
4
实验目的(Objectives):
1.掌握豚鼠离体肠肌灌流方法
2.熟悉乙酰胆碱和组胺对肠道平滑肌M 胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它 们的受体拮抗剂阿托品和扑尔敏的阻断 作用。
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5
1. 材料与方法(materials and methods):
1.1 实验动物 豚鼠
1.2 药品与试剂 10-2g/L acetylcholine chloride溶液, 1g/L atropine sulfate溶液,10-2 g/L histamine phosphate溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、 10g/L BaCl2 溶液、台氏液。
实验15药物对离体豚鼠回肠的作用 (2)
2 2.810.1032.230.564
3 3.430.1253.070.111
4 3.260.1873.460.394
5 1.340.2712.160.776
62.150.1202.980.230
7 3.34-0.083.010.418
8 3.460.1542.590.103
3.讨论
3.1M受体激动药及拮抗药对平滑肌的药理作用
M胆碱受体激动药可分为两类,即胆碱酯类和天然形成的拟胆碱生物碱。乙酰胆碱属于胆碱酯类药物[2],小剂量时为M胆碱受体激动作用。Ach与M胆碱能受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流增加,肌浆Ca2+浓度增大,平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有N胆碱受体激动作用,使胃肠道平滑肌兴奋。Atropine为M胆碱受体阻断药,其与平滑肌细胞膜M-受体结合,本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断乙酰胆碱与M-受体结合,阻断乙酰胆碱与M-受体的激动作用[3]。
【关键词】乙酰胆碱组胺阿托品扑尔敏M胆碱受体 H1受体
胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂,能阻断histamine与H1受体的结合,从而产生抗histamine作用。BaCl2为肌肉兴奋剂,能够使平滑肌强烈收缩[1]。
如上histamine同样具有使回肠平滑肌收缩的能力,作用前后其张力变化幅度为2.76±0.618,经扑尔敏作用后,再加入histamine平滑肌的收缩幅度变为0.37±0.213,用t检验得P<0.01,两者差异显著。说明扑尔敏具有对抗histamine的作用,主要是阻断了肠道上的H1受体。
药物对离体豚鼠回肠的作用
药物对离体豚鼠回肠的作用摘要目的观察胆碱能神经递质乙酰胆碱,炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。
观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和H1受体阻断剂扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的阻断作用。
方法以离体豚鼠回肠为材料,研究乙酰胆碱、组胺对肌张力的影响及阿托品、扑尔敏对其的阻断作用。
结果在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时(P<0.01);加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时(P<0.01);BaCl2 处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降结论阿托品具有强抗胆碱作用;扑尔敏具有部分拮抗组胺作用;阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。
关键词豚鼠回肠肌张力乙酰胆碱阿托品组胺扑尔敏BaCl21.材料和方法1.1实验动物Dunkin-Hartley 豚鼠1.2 药品0.01g/L氯化乙酰胆碱溶液1g/L硫酸阿托品溶液0.01g/L磷酸组织胺溶液0.001g/L氯苯那敏溶液10g/L BaCl2溶液台氏液1.3 器材双层玻璃浴槽(20ml)张力换能器恒温水浴箱多通道生理信号采集处理系统RM6240生物信号采集处理系统1.4 制备豚鼠离体回肠标本取豚鼠一只,以木槌击打头部致昏死,立刻剖开腹腔,在离回盲部1cm处剪断,取长约10cm左右的回肠一段,置于氧饱和的台氏液中,沿肠壁去除肠系膜,将回肠剪成1-1.5cm左右的小段,用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。
1.5 仪器连接和参数清洗浴槽后,将台氏液装至刻度,调节水浴箱温度为37℃±0.5 ℃,通气管接95% O2+5%CO2混合气体,调节至浴槽中气泡一个个溢出为止。
将回肠标本一端固定在通气钩上置于浴槽中,另一端固定在换能器上与多通道生理信号采集处理系统连接。
连接RM6240生物信号采集处理系统,仪器参数:通道时间常数直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。
1.6 测定药物影响快速归零后调节前负荷为1g。
药物对离体豚鼠回肠的作用
药物对离体豚鼠回肠的作用消化道平滑肌除具有肌肉的共性,如兴奋性、传导性和收缩性以外,尚具有自动节律性收缩(其特点是收缩缓慢而不规则)、伸展性较大、具有紧张性收缩以及对化学刺激、温度改变和牵张刺激敏感等特性。
本实验采用离体小肠平滑肌灌流的方法,观察acetylcholine (乙酰胆碱),histamine (组胺)对离体豚鼠回肠平滑肌的作用,以atropine (阿托品)、chlorpheniramine (氯苯那敏、扑尔敏)为工具药,初步分析以上二药的作用原理。
1 材料和方法1.1 材料豚鼠,改良式离体组织灌流装置、生物信号采集处理系统、张力传感器(量程为10克)、铁支架、微调固定器、温度计、1ml注射器、腰穿长针头、烧杯、台氏溶液、10-2 g/L乙酰胆碱、1 g/L硫酸阿托品、10-2 g/L组胺磷酸盐, 10-3 g/L扑尔敏溶液等。
1.2 方法1.2.1 改良式离体组织灌流装置的准备在改良式离体组织灌流装置(图9.3-1)中事先向中心管内加台氏液10ml。
开启恒温槽,使其温度保持于37℃。
灌流槽内通以5%CO2和95%O2,使逸出的气泡细小而均匀。
图9.3-1 改良式离体组织灌流装置1.2.2 制备标本将豚鼠执于手中倒悬,用木槌猛击后脑部,使其昏迷,立即剖开腹腔,找出胃幽门与十二指肠交界处,以此处为起点取长20~30cm的肠管。
用台氏液冲洗肠段内容物,置于低温(4~6℃)的台氏液内。
实验时剪取一段长约2cm的肠段,用细丝线于其两端各扎一结,一端系于固定钩上,另一端与张力传感器相连。
适当调节传感器高度,使其与标本之间松紧度合适。
并且注意连线垂直,不得与浴槽的管壁接触,以避免磨擦。
1.2.3 连接实验装置将张力传感器的输入插头与生物信号采集处理系统的信号放大器输入通道相连,并设置好放大器、采样和刺激器参数。
1.2.4 实验观察(1)待离体回肠稳定20~30 min后,记录一段正常收缩曲线,依次向麦氏浴槽内加下列药物。
药物对豚鼠离体回肠的作用
药物对豚鼠离体回肠的作用讨论:1,从受体学说角度,讨论分析实验结果。
(1)1)消化道平滑肌的一般特性有,兴奋性较骨骼肌低,不规则的节律性、紧张性、伸展性,对刺激的特异敏感性即对牵张、温度和化学刺激敏感而对切割、电刺激等不敏感。
当施加1g的力时牵张刺激使平滑肌反射性收缩。
2)豚鼠消化道平滑肌上有H1受体,是组织胺受体的一种。
组织胺是组织胺受体H1的激动剂,与细胞上的组织胺受体结合可以引起平滑肌收缩。
因此加入0.2ml磷酸组织胺后豚鼠消化道平滑肌强烈收缩,描计曲线上升。
拮抗剂能与受体结合,具有较强亲和力而无内在活性。
H1受体阻断药苯海拉明对组织胺具有竞争性拮抗作用,可以竞争性地拮抗组织胺对豚鼠消化道平滑肌的收缩作用,使消化道平滑肌松弛,曲线下降到正常状况。
(2)肠肌稳定后,再加入0.2ml的磷酸组织胺,则消化道平滑肌收缩作用小于“(1)”中加入组织胺的结果。
这可能是因为在“(1)”中细胞内的储备受体已经被苯海拉明占领,再次加入组织胺后组织胺结合的受体数量很少,故收缩作用远不如第一次强。
也可能是再次加入激动剂后消化道平滑肌的反应性降低所致。
(3)胆碱能受体广泛分布与中枢和周围神经系统,分为M受体和N受体。
豚鼠消化道平滑肌上存在M受体,M受体激活后可产生一系列自主神经反应,包括平滑肌收缩。
加入0.2ml乙酰胆碱,乙酰胆碱是一种完全拟胆碱药,作用于M受体产生M样作用,兴奋平滑肌,使回肠肌收缩,描笔曲线呈现上升。
给阿托品后,阿托品的作用机制为竞争性拮抗乙酰胆碱或胆碱受体激动药对M 胆碱受体的激动作用。
阿托品与M胆碱受体结合,因内在活性很小,一般不产生激动作用,却能阻断乙酰胆碱或胆碱受体激动药与受体结合,结果拮抗了它们的作用。
对内脏平滑肌有松弛作用,因此给阿托品后曲线下降到正常状况。
(4)肠肌稳定后,再加入0.2ml的乙酰胆碱,消化道平滑肌收缩作用小于“(3)”中加入乙酰胆碱的结果。
这可能是因为在“(3)”中细胞内储备的M受体已经被阿托品占领,再次加入乙酰胆碱可以结合的M受体数量减少,故收缩作用远不如第一次强。
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药,初步分析以上药物的作用原理。
原 理(1)
胃肠平滑肌收缩的自动节律性(慢波理论: Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果)。
原 理(2)
乙酰胆碱: M 胆碱能受体激动药。 Ach 与 M 受
体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流↑,
针对实验数据,进行结果描述 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体 豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 分析 Ach 、阿托品、 His 、扑尔敏、 BaCl2 对离体豚鼠 回肠平滑肌的作用机理。 3. 参考文献 如:[1]陆源,夏强. 生理科学实验. 浙江大学出版社, 2004,245-247
材 料
豚鼠1只:WT为300 g左右
麦氏浴槽,生物信号采集系统,张力换能器。
台氏液, 10-2 g/L乙酰胆碱 、1 g/L硫酸阿托品、
10-2 g/L组胺, 10-3 g/L扑尔敏、10 g/L BaCl2
溶液。
方 法
1. 实验装置准备: 打开恒温水浴37℃---加台氏液于麦氏浴槽中---95% O2+5%CO2持续通气(气泡一个个逸出为宜)。 2. 标本准备: 击昏豚鼠---开腹---减取回肠---冲洗内腔---截取肠段--- 肠段两 端对角穿线--- 固定于麦氏浴槽和换能器上。 3. 实验记录: 打开配置(药物对离体豚鼠回肠的作用)---零点设置---调节 换能器张力2 g ---稳定10-30分钟(基线收缩幅度稳定)
标本准备(1)
•
找到盲肠,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm 左右一段,置于盛有冰冷台氏液的培养皿中,冲洗干净, 将回肠剪成1-1.5cm的几小段。
标本准备(2)
取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对 角处分别用缝针穿线,并打结。一端系于浴槽固定钩 上,另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器
实验结果(1)
曲线描记:标上加药时间点,药物名,洗脱时 间点。 对曲线进行测量:基础张力,收缩张力。填入 表格。
实验结果(2)
表3. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响
组别
乙酰胆碱 阿托品+乙酰胆碱 组胺 扑尔敏+组胺 BaCl2 BaCl2+阿托品
标本数
基础张力(g) 收缩幅度(g)
实验报告
实验结果
Ach
换液
Ach 阿
Ach
换液 His
换液
扑
His
Bacl2
阿
稳定20min
(每次换液后稳定15min)
注意事项
注意保持肠管通畅,勿使其封闭。
不要把药物直接滴加到回肠上。
每次加的台氏液量保持相等。
加的台氏液量必须预先加热到37℃。
药物作用明显后,尽早冲洗。
每次换液后稳定10-20min。
扑尔敏: H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细胞 膜H1受体结合,阻断组胺与H1受体结合,从而 阻断组胺对H1受体的激动作用。
原 理(3)
氯化钡:肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通
道进入胞浆,使肌浆[Ba2+]↑,平滑
肌收缩幅度增高,但泵出障碍;另
一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体,使
平滑肌收缩幅度增高。
1.
药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
张 雄 浙江大学医学院生理教研室
目 的
学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 观察小肠平滑肌的自律性收缩,理解其原理。
观 察 药 物 acetylcholine (Ach 、 乙 酰 胆 碱 ) ,
histamine (His、组胺),BaCl2分别对离体豚鼠
回肠 平 滑肌 的 作用 , 并以 atropine( 阿 托品 ) 、
肠管
观察项目
记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。
加入10-2 g/L Ach 0.2ml,观察并记录曲线,作用明显时换液。
重复以上Ach剂量,待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml, 观察曲线,此时不换液,待曲线基本稳定后,再加入相同量的 Ach,观察并记录收缩曲线,换液。 加入10-2 g/L组胺 0.3ml,作用明显时迅速换液。 预先加入10-2 g/L扑尔敏0.2 ml,5 min后(不换液)加入同量组 胺,观察并记录收缩曲线 ,换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml,当作用达到最高点,加入1 g/L阿托 品 0.2 ml,观察并记录收缩曲线。
肌浆[Ca2+]↑,平滑肌收缩幅度增高。
阿托品: M 胆碱能受体阻断药。阿托品与平滑 肌细胞膜 M 受体结合,阻断乙酰胆碱与 M 受体 结合,阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用。
原 理(2)
组胺:激动平滑肌细胞膜 H1 受体,通过激活 G 蛋白 - 磷脂酶 C 系统,使细胞内 Ca2+ 增高,导致 平滑肌收缩。