药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
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实验结果
Ach
换液
Ach 阿
Ach
换液 His
换液
扑
His
Bacl2
阿
稳定20min 稳定
(每次换液后稳定15min) 每次换液后稳定 每次换液后稳定
注意事项
注意保持肠管通畅,勿使其封闭。 注意保持肠管通畅,勿使其封闭。 不要把药物直接滴加到回肠上。 不要把药物直接滴加到回肠上。 每次加的台氏液量保持相等。 每次加的台氏液量保持相等。 加的台氏液量必须预先加热到37℃ 加的台氏液量必须预先加热到 ℃。 药物作用明显后,尽早冲洗。 药物作用明显后,尽早冲洗。 每次换液后稳定 - 每次换液后稳定10-20min。 换液后稳定 。
标本准备( ) 标本准备(2)
取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对 取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对 角处分别用缝针穿线 并打结。一端系于浴槽固定钩 分别用缝针穿线, 角处分别用缝针穿线,并打结。一端系于浴槽固定钩 另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 张力换能器的悬臂梁上 上,另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器
标本准备( ) 标本准备(1)
•
找到盲肠,在离回盲部 处剪断, 找到盲肠,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约 处剪断 取出回肠约10cm 左右一段,置于盛有冰冷台氏液的培养皿中,冲洗干净, 左右一段,置于盛有冰冷台氏液的培养皿中,冲洗干净, 将回肠剪成1-1.5cm的几小段。 的几小段。 将回肠剪成 的几小段
原 理(3) )
氯化钡:肌肉兴奋剂。 氯化钡:肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通 道进入胞浆,使肌浆[Ba2+]↑,平滑 道进入胞浆,使肌浆 , 肌收缩幅度增高,但泵出障碍; 肌收缩幅度增高,但泵出障碍;另 一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体,使 能兴奋胆碱能受体, 一方面 平滑肌收缩幅度增高。
材 料
豚鼠1只 豚鼠 只:WT为300 g左右 为 左右 麦氏浴槽,生物信号采集系统,张力换能器。 麦氏浴槽,生物信号采集系统,张力换能器。 台氏液, 硫酸阿托品、 台氏液, 10-2 g/L乙酰胆碱 、1 g/L硫酸阿托品、 乙酰胆碱 硫酸阿托品 10-2 g/L组胺, 10-3 g/L扑尔敏、10 g/L BaCl2 组胺, 扑尔敏、 组胺 扑尔敏 溶液。 溶液。
肠管源自文库
观察项目
记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。 记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。 基础张力 加入10 换液。 加入 -2 g/L Ach 0.2ml,观察并记录曲线,作用明显时换液。 ,观察并记录曲线,作用明显时换液 重复以上Ach剂量,待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml, 剂量,待收缩到最高点时加入 重复以上 剂量 阿托品 , 观察曲线,此时不换液,待曲线基本稳定后, 观察曲线,此时不换液,待曲线基本稳定后,再加入相同量的 Ach,观察并记录收缩曲线,换液。 ,观察并记录收缩曲线,换液。 加入10 换液。 加入 -2 g/L组胺 0.3ml,作用明显时迅速换液。 组胺 ,作用明显时迅速换液 预先加入10 扑尔敏0.2 , 预先加入 -2 g/L扑尔敏 ml,5 min后(不换液)加入同量组 扑尔敏 后 不换液)加入同量组 换液。 胺,观察并记录收缩曲线 ,换液。 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml,当作用达到最高点,加入1 g/L阿托 加入 溶液 ,当作用达到最高点,加入 阿托 品 0.2 ml,观察并记录收缩曲线。 ,观察并记录收缩曲线。
原 理(1) )
胃肠平滑肌收缩的自动节律性(慢波理论: 胃肠平滑肌收缩的自动节律性(慢波理论: 自动节律性 Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果)。 细胞的生电性钠泵活动的结果)。 细胞的生电性钠泵活动的结果
原 理(2) )
乙酰胆碱: 胆碱能受体激动药 胆碱能受体激动药。 乙酰胆碱 : M胆碱能受体激动药 。 Ach与 M受 与 受 体结合,使平滑肌 2+通道开放,Ca2+内流 , 内流↑, 体结合,使平滑肌Ca 通道开放, 肌浆[Ca2+]↑,平滑肌收缩幅度增高。 增高。 肌浆 ,平滑肌收缩幅度增高 阿托品: 胆碱能受体阻断药 胆碱能受体阻断药。 阿托品 : M胆碱能受体阻断药。 阿托品与平滑 肌细胞膜M受体结合 , 阻断乙酰胆碱与M受体 肌细胞膜 受体结合, 阻断乙酰胆碱与 受体 受体结合 结合,阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用 结合,阻断乙酰胆碱与 受体的激动作用。 乙酰胆碱与 受体的激动作用。
方 法
1. 实验装置准备: 实验装置准备: 打开恒温水浴37℃ 加台氏液于麦氏浴槽中 于麦氏浴槽中---95% 打开恒温水浴 ℃---加台氏液于麦氏浴槽中 O2+5%CO2持续通气(气泡一个个逸出为宜)。 持续通气(气泡一个个逸出为宜)。 2. 标本准备: 标本准备: 击昏豚鼠---开腹 减取回肠---冲洗内腔 截取肠段--开腹---减取回肠 冲洗内腔---截取肠段 击昏豚鼠 开腹 减取回肠 冲洗内腔 截取肠段 肠段两 对角穿线--- 固定于麦氏浴槽和换能器上。 端对角穿线 固定于麦氏浴槽和换能器上。 3. 实验记录: 实验记录: 打开配置(药物对离体豚鼠回肠的作用) 零点设置---调节 零点设置 打开配置(药物对离体豚鼠回肠的作用)---零点设置 调节 稳定10-30分钟(基线和收缩幅度稳定) 分钟(基线和收缩幅度稳定) 换能器张力 g ---稳定 换能器张力2 张力 稳定 分钟
实验报告
针对实验数据,进行结果描述 针对实验数据, 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体 豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨论和结论 分析Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2 对离体豚鼠 回肠平滑肌的作用机理。 3. 参考文献 如:[1]陆源,夏强. 生理科学实验. 浙江大学出版社, 2004,245-247
1.
原 理(2) )
组胺: 激动平滑肌细胞膜H1受体 通过激活G 受体, 组胺 : 激动平滑肌细胞膜 受体 , 通过激活 蛋白-磷脂酶 C 系统 使细胞内Ca 增高, 蛋白 - 磷脂酶C系统 , 使细胞内 Ca2+ 增高 , 导致 磷脂酶 系统, 平滑肌收缩。 平滑肌收缩。 扑尔敏: 受体阻断药 受体阻断药。 扑尔敏: H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细胞 受体结合, 受体结合, 膜H1受体结合,阻断组胺与 受体结合,从而 受体结合 阻断组胺与H1受体结合 阻断组胺对H1受体的激动作用。 阻断组胺对 受体的激动作用。 受体的激动作用
药物对离体豚鼠回肠收缩的作用
张 雄 浙江大学医学院生理教研室
目 的
学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 观察小肠平滑肌的自律性收缩,理解其原理。 观察小肠平滑肌的自律性收缩,理解其原理。 观 察 药 物 acetylcholine (Ach 、 乙 酰 胆 碱 ) , histamine (His、组胺),BaCl2分别对离体豚鼠 、组胺) 并以atropine( 阿 托品 、 托品) 回肠 平 滑肌 的 作用 , 并以 chlorpheniramine(氯苯那敏 、 扑尔敏 ) 为工具 氯苯那敏、 扑尔敏) 氯苯那敏 药,初步分析以上药物的作用原理。 初步分析以上药物的作用原理。
实验结果( ) 实验结果(1)
曲线描记:标上加药时间点,药物名, 曲线描记:标上加药时间点,药物名,洗脱时 间点。 间点。
对曲线进行测量:基础张力,收缩张力。 对曲线进行测量:基础张力,收缩张力。填入 表格。 表格。
实验结果( ) 实验结果(2)
表3. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响
组别 乙酰胆碱 阿托品+乙酰胆碱 组胺 扑尔敏+组胺 BaCl2 BaCl2+阿托品 标本数 基础张力( ) 收缩幅度( ) 基础张力(g) 收缩幅度(g)