实验七 酵母菌细胞大小的测定
微生物实验7 酵母菌
微生物实验报告
酵母菌的培养及观察实验
刘欣怡201100140057
生物科学基地班
组别：周一下午三组
同组者：曹平平，周楠，
刘艺，刘希伟
实验完成时间：2012年11月19号
一、实验目的
1、了解酵母菌的形态及出芽方式
2、学习区分酵母菌的死细胞和活细胞
3、掌握酵母菌子囊孢子的观察方法
4、巩固显微镜操作技术和无菌操作技术
二、实验器材
1．菌种：
酿酒酵母7d麦氏培琼脂（产孢培养基）斜面培养物，酿酒酵母2d YPD（酵母合成培养基）液体培养物。
2. 培养基：
酵母合成培养基，麦氏琼脂斜面
3、试剂：
0.01%美蓝水溶液，5%孔雀绿水溶液，0.5%番红水溶液，95%乙醇，蒸馏水、香柏油、去离子水等。
4. 仪器
试管，锥形瓶，酒精灯，显微镜，擦镜纸，酒精灯，载玻片，盖玻片，双层瓶，接种环，滴管，滤纸，镊子、培养皿等。
三、实验原理
1、培养基：
酵母菌的能源主要是糖，一般用麦芽汁琼脂培养基培养。但实验要求不是很严格时，可以用由酵母膏、蛋白胨、葡萄糖配置的培养基来培养；但酵母菌子囊孢子的观察要用麦氏培养基，其有利于子囊孢子的形成。
2、酵母菌：
酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物，细胞核与细胞质已有明显的分化，菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖，仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。
3、酵母菌的形态、大小、结构：
酵母菌是单细胞真菌，并非系统演化分类的单元；
酵母菌细胞的形态通常为圆形、卵圆形或椭圆形。也有特殊形态，如柠檬形、三角形、藕节状、腊肠形，假菌丝等；
实验七 酵母菌细胞大小的测定
实验七酵母菌细胞大小的测定
一、实验目的
1.了解测量微生物大小的原理；
2.学习并掌握接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定方法，增强微生物细胞大小的感性认识。
二、实验材料
1.菌种：啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌悬液
2.仪器或其他用具：显微镜，接目测微尺，镜台测微尺，载玻片，盖玻片
三、实验原理
微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物细胞个体较小，需要在显微镜下借助于特殊的测量工具—测微尺来测定其大小。测微尺包括镜台测微尺和接目测微尺。
镜台测微尺是一张中央部分刻有精确等分线的载玻片，专门用于校定接目镜测微尺每小格的相对长度。通常，刻度的总长是1mm，被等分为100格，每格0.01mm（即10μm）。镜台测微尺不直接用来测量细胞的大小。
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。在测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上，即可来测量经显微镜放大后的细胞物象。也有专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺。
由于接目测微尺所测量的是经显微镜放大后的细胞物象，因此，在不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。所以，在用接目测微尺测量微生物大小之前，必须先用镜台测微尺校定接目镜测微尺，以确定该显微镜在特定放大倍数的目镜和物镜下，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度，然后根据微生物细胞相当于的接目镜测微尺格数，计算出微生物细胞的实际大小。
【推选文档】子情境：活性干酵母发酵过程检验—酵母细胞大小的测量PPT
三、接目测微尺的标定并记录标定结果
微生物分类鉴定的重要依据
酵母菌细胞大小测量的步骤
或者专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺 酵母菌细胞大小测量的步骤
要求：
2、酵母水浸片的制作 或者专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺 微生物分类鉴定的重要依据
无气泡产生 吸取多余水分
微生物分类鉴定的重要依据
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。
高倍镜下测量菌体的长 、宽
使接目测微尺与镜台测微尺的刻度相平行。
4
低倍镜下找到目的物 2、酵母水浸片的制作
1、制备酵母菌悬液
5
在测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上，即可来测量经显微镜放大后的细胞物象。
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。
或者专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺
放大倍数不同，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。
使用前应标定
❖测微尺的使用方法
1、装接目测微尺
2、接目测微尺的标定
使接目测微尺与镜台测微尺的刻度相平行。两尺在某一区域 内两线完全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺 和接目测微尺所占的格数。
❖酵母菌细胞大小测量的步骤
高倍镜下测1量、菌体制的长备、酵宽 母菌悬液
微生物实验7酵母菌
微生物实验报告
酵母菌的培养及观察实验
刘欣怡0057
生物科学基地班
组别：周一下午三组
同组者：曹平平，周楠，
刘艺，刘希伟
实验完成时间：2012年11月19号
一、实验目的
1、了解酵母菌的形态及出芽方式
2、学习区分酵母菌的死细胞和活细胞
3、掌握酵母菌子囊孢子的观察方法
4、巩固显微镜操作技术和无菌操作技术
二、实验器材
1．菌种：
酿酒酵母7d麦氏培琼脂（产孢培养基）斜面培养物，酿酒酵母2d YPD（酵母合成培养基）液体培养物。
2. 培养基：
酵母合成培养基，麦氏琼脂斜面
3、试剂：
0.01%美蓝水溶液，5%孔雀绿水溶液，0.5%番红水溶液，95%乙醇，蒸馏水、香柏油、去离子水等。
4. 仪器
试管，锥形瓶，酒精灯，显微镜，擦镜纸，酒精灯，载玻片，盖玻片，双层瓶，接种环，滴管，滤纸，镊子、培养皿等。
三、实验原理
1、培养基：
酵母菌的能源主要是糖，一般用麦芽汁琼脂培养基培养。但实验要求不是很严格时，可以用由酵母膏、蛋白胨、葡萄糖配置的培养基来培养；但酵母菌子囊孢子的观察要用麦氏培养基，其有利于子囊孢子的形成。
2、酵母菌：
酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物，细胞核与细胞质已有明显的分化，菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖，仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。
3、酵母菌的形态、大小、结构：
酵母菌是单细胞真菌，并非系统演化分类的单元；
酵母菌细胞的形态通常为圆形、卵圆形或椭圆形。也有特殊形态，如柠檬形、三角形、藕节状、腊肠形，假菌丝等；
微生物细胞大小和数量的测定
实验程序
测定微生物的大小 测定微生物数量
实验程序Ⅰ （测定微生物的大小）
测定的工具：目镜测微尺 镜台测微 尺
实验程序Ⅱ
（测定微生物的大小）
目镜测微尺的校正：在高倍镜下，看清镜台测微尺的刻 度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行， 移动推动器，使目镜测微尺的0点与镜台测微尺的某一刻度 重合，然后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计算 两刻度间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。由于镜 台 测 微 尺 的 刻 度 每 格 长 1 0 µm ， 所 以 可 得 ： 目镜测微尺每格长度（ µm）=（镜台测微尺格数×10）/目 镜测微尺格数 注意：校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件（特 定的接物镜、接目镜、镜筒长度等）进行，而且只能在这 特定的情况下才可重复使用。
微生物细胞大小和数量 的测定
2021年8月23日星期一
微生物细胞大小和数量的测 定
目的要求 实验材料 实验程序 思考题
目的要求
学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在 显微镜下测定微生物大小的方法。 学习使用血球记数板测定微生物数量 的方法。
实验材料
显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、 细菌染色片、血球记数板、酵母菌悬 液、盖玻片、无菌滴管、西水纸、擦 镜纸、香柏油、二甲苯。
（测定微生物数量）
本实验用血球计数板计数酵母菌的数量
1. 取清洁无油的血球计数板，在计数室上面 加盖玻片。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定
一、实验目得
了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理
微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺（图－1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍm长度刻成50等分，或把10 mｍ长度刻成1０0等分。测量时，将其放在接目镜中得隔板上（此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.
镜台测微尺（图２0-2）就是中央部分刻有精确等分线得载玻片，一般将ｌmm等分为10０格，每格长l0μm(即０、0ｌmm）,就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上，
图1目镜测微尺图2 镜台测微尺
由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大，因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小，所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺，换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材
1.活材料：酿酒酵母（Sacchaｒomyces ｃerｅvisｉae)、枯草杆菌（Bacｃiｌlｕｓｓubｔili ｓ)染色标本片。
微生物实验7酵母菌
微生物实验报告
酵母菌的培养及观察实验
刘欣怡0057
生物科学基地班
组别：周一下午三组
同组者：曹平平，周楠，
刘艺，刘希伟
实验完成时间：2012年11月19号
一、实验目的
1、了解酵母菌的形态及出芽方式
2、学习区分酵母菌的死细胞和活细胞
3、掌握酵母菌子囊孢子的观察方法
4、巩固显微镜操作技术和无菌操作技术
二、实验器材
1．菌种：
酿酒酵母7d麦氏培琼脂（产孢培养基）斜面培养物，酿酒酵母2d YPD（酵母合成培养基）液体培养物。
2. 培养基：
酵母合成培养基，麦氏琼脂斜面
3、试剂：
0.01%美蓝水溶液，5%孔雀绿水溶液，0.5%番红水溶液，95%乙醇，蒸馏水、香柏油、去离子水等。
4. 仪器
试管，锥形瓶，酒精灯，显微镜，擦镜纸，酒精灯，载玻片，盖玻片，双层瓶，接种环，滴管，滤纸，镊子、培养皿等。
三、实验原理
1、培养基：
酵母菌的能源主要是糖，一般用麦芽汁琼脂培养基培养。但实验要求不是很严格时，可以用由酵母膏、蛋白胨、葡萄糖配置的培养基来培养；但酵母菌子囊孢子的观察要用麦氏培养基，其有利于子囊孢子的形成。
2、酵母菌：
酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物，细胞核与细胞质已有明显的分化，菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖，仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。
3、酵母菌的形态、大小、结构：
酵母菌是单细胞真菌，并非系统演化分类的单元；
酵母菌细胞的形态通常为圆形、卵圆形或椭圆形。也有特殊形态，如柠檬形、三角形、藕节状、腊肠形，假菌丝等；
实验七 酵母菌的形态观察、死活细胞鉴定及血球计数法
表1 显微计数结果
各中格的格数 A
1 2 345
B
两室平 菌（孢子） 均 值 数/mL
酿酒 酵母
第1室 第2室
下次实验课需要准备的材料
6套培养皿 1套用于PDA薄的琼脂块的制作； 1套用于放线菌的扦片法； 2套培养皿分别放入2块载玻片、2块盖玻片和
2个湿棉球，用于根霉、青霉的载玻片培养 观察； 最后2套：1套用于青霉的3点接种；1套用于 根霉的接种。
实验七 酵母菌的形态观察、死活细 胞鉴定及血球计数
一、实验目的
1、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学 习区分酵母菌死活细胞的实验方法；
2、掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌 的区别；
3、明确血细胞计数板计数的原理，以及使 用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
实验七 酵母菌的形态观察、死活细 胞鉴定及血球计数
二、实验原理 以25个中方格的计数板为例，设5个中方格中的
总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则：
1ml菌液中的总菌数=A/5×25×104×B=50 000AB
以16个中方格的计数板为例，设5个中方格中的 总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则：
1ml菌液中的总菌数=A/5×16×104×B=32 000AB
实验七 酵母菌的形态观察、死活细 胞鉴定及血球计数
二、实验原理 本实验以最常用的血细胞计数板为例，对显微
酵母菌大小实验报告
酵母菌大小实验报告
酵母菌大小实验报告
引言：
酵母菌是一种单细胞真菌，广泛存在于自然界中。酵母菌在食品工业、酿酒业、生物学研究等领域具有重要的应用价值。而酵母菌的大小对其生物学特性和功
能具有一定的影响。本实验旨在通过观察不同条件下酵母菌的大小变化，探究
其生长与环境因素的关系。
材料与方法：
1. 酵母菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸等营养成分的培养基。
2. 培养皿：用于培养酵母菌的平底玻璃容器。
3. 显微镜：用于观察酵母菌的大小。
4. 显微镜片：用于制作酵母菌样本。
5. 酵母菌悬浮液：用于制作酵母菌样本。
实验步骤：
1. 准备酵母菌培养基，并将其倒入培养皿中，使其均匀分布。
2. 用显微镜片取一滴酵母菌悬浮液，滴在培养基上。
3. 将培养皿放置在恒温培养箱中，温度设定为28摄氏度。
4. 每隔一定时间，取出培养皿，用显微镜观察酵母菌的大小，并记录下来。
实验结果：
经过一段时间的观察，我们得到了以下实验结果：
1. 酵母菌的大小随着时间的推移而增加。初始时，酵母菌呈现较小的圆形单细
胞状态，随着细胞分裂的进行，酵母菌逐渐变大。
2. 酵母菌的大小受到温度的影响。在较低温度下，酵母菌的生长速度较慢，细
胞大小也相对较小；而在较高温度下，酵母菌的生长速度加快，细胞大小也相
对较大。
3. 酵母菌的大小受到培养基中营养物质的影响。添加了更多的营养物质的培养
基中，酵母菌的生长速度更快，细胞大小也更大。
讨论与分析：
通过本实验，我们可以得出以下结论：
1. 酵母菌的生长速度与其细胞大小呈正相关。随着酵母菌的细胞分裂，其细胞
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定
一、实验目的
了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理，掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理
微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图-1）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图20-2）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm（即0.0lmm），是专门用来校正目镜测微尺的。校正时，将镜台测微尺放在载物台上，
图1目镜测微尺图2 镜台测微尺
由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材
1．活材料：酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。2．器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
酵母菌细胞数和发芽率的测定、微生物细胞大小的测定实验报告
酵母菌细胞数和发芽率的测定、微生物细胞大小的测定
实验报告
实验报告
一、实验目的
1.了解酵母菌的基本结构和特点，能够通过显微镜观察和测量微生物的大小。
2.了解酵母菌的生长规律和判断细胞数量的方法。
3.学习正确使用显微镜、计数盘等工具的方法和技能。
二、实验原理
1.酵母菌细胞数量的测定
酵母菌生长的过程中，细胞数量会不断增加。在进行数量的测定时，可以使用计数盘的方法，将酵母菌培养液进行稀释后，挑取一定数量的细胞在计数盘中进行计数，从而得出总细胞数。
计算公式：N=Nv/(Vs某d)
其中，N为总细胞数，Nv为计数盘中可数的细胞数，Vs为取自培养液的样品体积，d为稀释倍数。
2.酵母菌发芽率的测定
酵母菌发芽率是指在特定条件下发芽的酵母菌占总酵母菌数量的百分比。测定方法为：将稀释后的培养液分别在不同的温度和时间条件下进行培养，待观察到发芽的细胞数后再进行计算。
计算公式：G=Nf/Nt某100%
其中，G为发芽率，Nf为观察到发芽的细胞数，Nt为总细胞数。
三、实验步骤
1.酵母菌细胞数量的测定
（1）将酵母菌液稀释至合适浓度，取出10μl滴于计数盘的盆2中。
（2）低倍镜下计数，计算得到总细胞数。
2.酵母菌发芽率的测定
（1）将酵母菌液稀释至合适浓度，分别放置于不同的温度和时间条
件下培养。
（2）观察不同条件下的发芽情况，计算得到发芽率。
四、实验结果与分析
1.酵母菌细胞数量的测定
（1）计算盘的小方格数为16，每个小方格的面积为0.010mm²。
（2）经过计数后得到的样品的平均值为32个/小方格，计算得到总
细胞数为32某16/(0.01某10)=5120个/mL。
微生物生理生化和酵母细胞大小的测定
05
酵母细胞大小与工业应用
酵母细胞大小对酒精发酵的影响
1 2
酒精发酵效率
较大的酵母细胞通常具有更高的发酵效率，因为 它们具有更大的体积和更多的酶，能够更快地分 解糖分。
产物浓度
酵母细胞的大小会影响酒精的产量和浓度，因为 较大的细胞内有更多的酶，可以产生更多的酒精。
3
发酵周期
较小的酵母细胞可能需要更长的发酵周期，因为 它们内部的酶较少，分解糖分速度较慢。
微生物生理生化和酵母细胞大 小的测定
目
CONTENCT
录
• 微生物生理生化基础 • 酵母细胞大小的测定方法 • 酵母细胞生长的生理生化变化 • 酵母细胞大小的遗传和环境因素 • 酵母细胞大小与工业应用
01
微生物生理生化基础
微生物的代谢
微生物的能量代谢
微生物通过氧化还原反应将有机物或无机物转化为 能量，用于自身的生长和繁殖。
释放能量供细胞使用。
乙醇发酵
当氧气供应不足时，酵母细胞会进 行乙醇发酵，将丙酮酸转化为乙醇 和二氧化碳。
脂肪酸合成
在某些条件下，酵母细胞可以合成 脂肪酸，作为储存能量的形式。
酵母细胞生长过程中的细胞器变化
线粒体
高尔基体
随着酵母细胞的生长，线粒体的数量 和大小也会增加，以满足细胞对能量 的需求。
高尔基体在酵母细胞的分泌活动中起 重要作用，随着细胞的生长，高尔基 体的数量和形态也会发生变化。
酵母菌细胞数量和大小的测定
1mm/20格
5X4
每个大方格均被分成400个小方格；根据规定每个大方格的 边长为1mm，则每一个大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片 后，在盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm，所以计数室的 容积为0.1 mm3（万分之一毫升）。
1、用血球计数板进行酵母菌液计数并记录结果。 一般在每个计数室中取5个中方格(左上、左下、右上、右下、 中间）进行计数，数两个计数室。可拍照后在电脑上数。
1、记录目镜测微尺的标定结果，以及所测
量的酵母细胞大小。
物镜 4× 10× 40× 目尺格数 小方格数 目尺校正值（μm）
40 100 100
20 20 5
25 10 2.5
显微镜下对应的测微尺格数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均值（μm）
长 宽
实训五 酵母菌细胞数量、大小
的测定
一、实验目的
1、学习利用血球计数板直接计数微生物细胞的方法 2、学习测定微生物细胞大小的方法
二、实验材料
1、菌种：酿酒酵母培养液 2、器材：血球计数板、目镜测微尺
三、实验原理及结果记录
1、显微直接计数法 （血球计数板）
血球计数扳的构造
0.1毫米
a.平面图(中间平台分为两半，各刻有一个方格网)
各中格中的菌数 1 第一室 第二室 2 3 4 5 菌数 /ml 二室 平均数
实验七微生物血球计数板直接计数法和测微技术
酵母的直径大小测定结果
目镜测微尺格数
实际直径/µ m
10
• 2. 显微计数结果
记录于下表中。T表示五个中方格中的总菌数； D表示菌液稀释倍数。
各中格中菌数
12345
第一 室
第二 室
TD
二室 个/ 平均 ml 值
11
问题与讨论
• 1、为什么更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须用镜台测微尺重新对目镜测微 尺进行效正？P48 (1)
目尺每格长度(µm)=（台尺格数×10）/目尺格 数(10×10/60)
2)菌体大小的测定：制作一片酵母菌的盖片，取 下镜台测微尺，将盖片置于载物台上，然后 在40×镜下用目镜测微尺测量菌体的长和宽9。
实验结果
1.目镜测微尺标定结果：
40×镜下 倍目镜测微尺每格长度是 μm。
菌号
1 2 3 4 5 均值
实验七 微生物血球 计数板直接计数法和
测微技术
2021/8/11
1
实验目的
1．明确显微镜计数的原理并学习使用血球计数板进行微生物计数的方法。 2．学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法，增强微生物细胞大小的感性认
识。
2
二、基本原理
1．血球计数板计数原理
血球计数板是一块特制的载玻片，由四条槽构
成三个平台，中间较宽的又被一短的横槽隔成
• 2、某单位要求知道一种干酵母粉中的活菌存活率，请设计1-2中可行的检测方法。 P92(2)
微生物大小的测定实验报告
微生物大小的测定实验报告实验室报告
微生物大小的测定实验报告
实验目的：
本实验旨在通过显微镜观察和测量不同大小微生物的大小，以便更好地了解它们的特殊特征以及对它们的分类。
实验方法：
1. 准备照相显微镜和放大物体；
2. 将待观测微生物置于干净的载玻片上；
3. 加入少量染料并将其涂匀覆盖；
4. 将载玻片移至显微镜下，红外线光源下控制光线的亮度，将微生物的图像放大至目标大小；
5. 使用图像处理软件对目标大小进行计算，并记录下其测量结果；
实验结果:
使用上述实验方法，共分别对霉菌、酵母菌和细菌进行大小测量，并得到如下的实验结果：
表1. 不同菌株微生物大小测量结果
菌株 | 菌丝长度(μm) | 菌孢长度(μm) | 细菌长度(μm)
-----------------------------------------------
A | 50-60 | | |
B | 30-40 | 5-6 | |
C | 20-25 | 2-3 | 1.2-1.5 |
D | | | 3.5-4.5 |
以上数据表显示了不同微生物的大小范围。其中，实验发现，霉菌的菌丝长度最大，而酵母菌和细菌则相对较小。
小结：
本实验给出了微生物大小的基本测量数据，并且证明了不同微生物的大小是有区别的。这对于更深入地了解微生物的特征起到了极为重要的作用。本实验也为生物学的研究提供了重要原始数据。
参考文献：
[1] 桑巴斯瓦央蒂, 金钱龙. 显微镜下的电荷力显微镜图像微生物大小特征研究[J]. 桑巴氏微生物学报, 2015, 15(2): 56-63.
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实验七酵母菌细胞大小的测定
一、实验目的
1.了解测量微生物大小的原理；
2.学习并掌握接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定方法，增强微生物细胞大小的感
性认识。
二、实验材料
1.菌种：啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌悬液，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）
染色标本片。
2.仪器或其他用具：显微镜，接目测微尺，镜台测微尺，载玻片，盖玻片
三、实验原理
微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。微生物细胞个体较小，需要在显微镜下借助于特殊的测量工具—测微尺来测定其大小。测微尺包括镜台测微尺和接目测微尺。
镜台测微尺是一张中央部分刻有精确等分线的载玻片，专门用于校定接目镜测微尺每小格的相对长度。通常，刻度的总长是1mm，被等分为100格，每格0.01mm（即10μm）。镜台测微尺不直接用来测量细胞的大小。
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。在测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上，即可来测量经显微镜放大后的细胞物象。也有专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺。
由于接目测微尺所测量的是经显微镜放大后的细胞物象，因此，在不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。所以，在用接目测微尺测量微生物大小之前，必须先用镜台测微尺校定接目镜测微尺，以确定该显微镜在特定放大倍数的目镜和物镜下，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度，然后根据微生物细胞相当于的接目镜测微尺格数，计算出微生物细胞的实际大小。
图7-1测微尺的安装
图7-2目镜测微尺图7-3用镜台测微尺校正接目测微尺
四、操作步骤
1.装接目测微尺：取下显微镜的目镜，换上专用目镜。如果没有专用的目镜，则取下显微
镜的目镜，旋下透镜，将接目镜测微尺刻度朝下放在接目镜的隔板上，再旋上目镜透镜，将装有测微尺的目镜装回镜筒。
2.接目测微尺的标定：
1)放镜台测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上固定在显微镜的载物台上，注意不可放反。
2)标定：将低倍镜转入光路，镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当
清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使接目测微尺与镜台测微尺的刻度相平
行。利用移动钮移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完全重合，然后分别数
出两重合线之间镜台测微尺和接目测微尺所占的格数。（使接目测微尺的一条刻度
线与镜台测微尺的一条刻度线相重合，再寻另一重合线，分别数出其间镜台测微尺
和接目测微尺所占的格数）
3)用同样的方法，分别在高倍镜和油镜下对接目测微尺进行标定。（观察时光线不宜
过强，否则难以找到镜台测微尺的刻度，换高倍镜和油镜标定时，务必十分细心，
防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头）
4)计算：已知镜台测微尺每格长10μm，根据下列公式即可分别计算出在不同放大倍
数下，接目测微尺每格所代表的长度。
接目测微尺每格长度（μm）=10n/m
n：两重合线间镜台测微尺格数
m：两重合线间接目测微尺格数
3.微生物细胞大小的测量
接目测微尺标定完毕后，取下镜台测微尺，换上微生物标本片，将其固定在载物台上，先用低倍镜找到标本片图象，然后根据不同的微生物对象分别转换到高倍镜或油镜下，用接目测微尺测量微生物细胞的直径或宽和长所占的格数，再依据所标定的高倍镜或油镜下每一格的实际长度计算细胞的实际大小。
通常测定对数生长期菌体来代表该菌的大小，为了尽量减小实验误差，应在同一标本片上测量10~20个细胞，取其平均值作为该菌的大小。
维护：测量完毕，换上原有的显微镜目镜（或取出接目测微尺，目镜放回镜筒），用擦镜纸将测微尺擦拭干净后放回盒内保存，并按照显微镜的使用和维护方法擦拭物镜。
五、实验内容
1.分别在低倍镜、高倍镜下对接目测微尺进行标定。
2.高倍镜下测定酿酒酵母细胞的大小。
六、实验报告
1.目镜测微尺标定结果：
低倍镜下倍目镜测微尺每格长度是μm。
高倍镜下倍目镜测微尺每格长度为μm。
2.菌体大小测定结果：
3.为什么随着显微镜放大倍数的改变，接目测微尺每小格代表的实际长度也会改变？