实验七 酵母菌细胞大小的测定
酵母菌的形态观察与微生物大小的测定
酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别,微生物测量技术,显微镜直接计数法一、实验目的1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
2．了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法.3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。
二、实验原理染色：美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。
因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
测量：微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。
用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
计数：每一个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0．1mm，所以计数室的容积为0．1mm3。
在计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。
下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数因1ml=1cm3=1000mm3，三、实验仪器1 菌种: 培养48h的酵母菌．２染色液和试剂：0.05%、0.1%吕氏碱性美蓝．3 器材：显微镜、血球计数板、目镜测微尺、镜台测微尺、盖玻片、吸水纸、计数器、移液器、擦镜纸。
4、酵母大小及数量测定
实验四 酵母细胞的大小及数量测定 一、实验内容：
测定酵母细胞的大小，单位体积内的细胞数量
二、实验材料：1、菌种：酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae ）
2、器材：显微镜、血球计数板、镜台测微尺、目镜测微尺 三、实验步骤：
（一）细胞大小测定 1、对目镜测微尺的校正 镜台测微尺有刻度的一面朝上，置显微镜载物台上（目镜测微尺已 在镜筒中），先用10x找到镜台尺刻度，然后在40x进行目镜测微尺校正。 2、细胞大小的测量 酵母菌悬液滴在载玻片上，盖上盖玻片，置显微镜载物台上。显 微镜光圈调暗， 用目镜测微尺测量细胞宽和长。
（二）细胞数量测定 在血球计数板计数区滴加菌悬液后再盖上盖玻片。显微镜光圈调暗，
于10 X 找到计数区，再在10 X 或 40 X 下计数。（数3个大格）。
四、作 业
（一）微生物细胞大小测定
1、目镜测微尺校正：在40x下，目镜测微尺 格与镜台测微尺 格
相当，因为镜台测微尺1小格＝10 μm，故目镜测微尺1小格＝
μm
2、酵母菌大小测定：
平均格数
平均长度
1 2 3 4 5 (精确到 0.1格) （单位:μm )
长（格数）
宽（格数）
（二）细胞数量测定 1、统计3个大格中的细胞数量 计数大格 1 2 3
细胞数量
2、 酵母菌悬液浓度 =
(计算过程) ＝
个 / mL (科学计数法)
盖玻片
计数区， 高度0.1mm
放大
实验七微生物数量的测定
五、实验报告
1、结果记录： 将计数结果记录下表。A表示五个中方格 中的总菌数。B稀释倍数为102。
注:1 mL菌液总数=A/5×25×104×B=5×107×A
五、实验报告
1、思考题： （1）在显微镜下直接测定微生物数量有什么优 缺点？
（2）根据你的体会，说明用血球计数板计数的误 差主要来自哪些方面？应如何尽量减少误差，力 求准确？ （3）某单位要求知道一种干酵母粉的活菌存活率 请设计1-2种可行的检测方法。
5. 计算方法：
酵母菌细胞数/mL= （X1+X2+X3+X4+X5） 25（或16）X 10 X 1000 x 稀释倍数 X 5
6. 注意事项：压在方格线上的菌体，以压在底线和 右侧线上的菌体计入本格内；遇到有芽体的酵母时， 若芽体超过母体一半以上，就按单个酵母计数。 7. 计数完毕后，血球计数板要立即清洗干净，并用 吸水纸吸干，最后用擦镜纸擦干净，并放回盒内。
下次实验：微生物大小的测定
ห้องสมุดไป่ตู้
1. 取清洁无油的血球计数板（在显微镜下检查，如不 干净清水冲洗，不可用硬毛刷刷洗），在计数室上面 加盖玻片。
2. 取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴， 使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。 3. 静止5min后，用低倍镜观察并将计数室移至视野 中央。 4. 在高倍镜下计数：随机计数五个中格的平均值， 然后求得每个中格的平均值。乘上16（或25）就得出 一大格中的总菌数，最后再换算到每mL菌液中的含菌 数。
实验七
微生物数量的测定
一、目的要求
1．明确血细胞计数板计数的原理 2．掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的 方法。
二、基本原理
微生物个体生长的时间较短，很快进入分裂 繁殖阶段，个体生长难以测定。它们的生长一般 以繁殖即群体生长作为微生物生长的指标。群体 生长表现为细胞数目的增加或细胞物质的增加。 测定数目的方法有显微镜直接计数法、平板计数 法、光电比浊法等。 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液 置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上， 于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的 方法。
观察酵母实验报告
一、实验目的本次实验旨在通过观察酵母菌的形态、生长特点以及繁殖方式，了解酵母菌的基本生物学特性，并探究酵母菌在不同环境条件下的生长情况。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，属于真核微生物。
在适宜的条件下，酵母菌能够进行出芽生殖，即通过产生新的细胞壁和细胞膜，使子细胞从母细胞上分离出来。
此外，酵母菌在发酵过程中，可以将糖类物质转化为酒精和二氧化碳，这一过程在食品、酿酒和生物工程等领域有着广泛的应用。
三、实验材料与方法1. 实验材料- 酵母菌培养基- 培养皿- 显微镜- 显微镜玻片- 接种环- 酒精- 美蓝染液- 碘液2. 实验方法（1）酵母菌培养将酵母菌接种于培养基中，在适宜的温度和湿度条件下培养，使其生长繁殖。
（2）酵母菌形态观察用显微镜观察酵母菌的形态，包括细胞大小、形状、细胞壁结构、细胞质结构等。
（3）酵母菌繁殖方式观察观察酵母菌的出芽生殖过程，记录子细胞从母细胞上分离出来的时间、数量和速度。
（4）酵母菌生长情况观察在不同环境条件下（如温度、pH值、营养物质等），观察酵母菌的生长情况，记录其生长曲线。
四、实验结果1. 酵母菌形态观察酵母菌呈椭圆形或卵圆形，细胞壁厚，细胞质均匀。
在显微镜下，可见细胞核位于细胞中央，细胞质内含有一定数量的内质网、线粒体等细胞器。
2. 酵母菌繁殖方式观察酵母菌主要通过出芽生殖进行繁殖。
在适宜的条件下，母细胞在细胞壁上形成新的细胞壁和细胞膜，子细胞从母细胞上分离出来。
观察结果显示，子细胞从母细胞上分离出来的时间为10-15分钟，平均每10分钟产生一个子细胞。
3. 酵母菌生长情况观察（1）温度对酵母菌生长的影响在不同温度条件下，酵母菌的生长速度存在差异。
实验结果显示，在28-30℃的温度范围内，酵母菌生长速度最快；当温度低于15℃或高于35℃时，酵母菌生长速度明显减慢。
（2）pH值对酵母菌生长的影响酵母菌在pH值为4.5-5.5的环境中生长最佳。
实验结果显示，当pH值低于4.5或高于5.5时，酵母菌生长速度明显减慢。
酵母菌大小的测定及计数实验流程
酵母菌大小的测定及计数实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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实验七酵母菌的形态观察、死活细胞鉴定及血球计数法
通过血球计数板对酵母菌进行计数，我们得到了每毫升菌 液中酵母菌的数量。结果显示，菌液中酵母菌的数量在合 理范围内，计数结果准确可靠。
对实验过程的反思与总结
实验操作方面
在实验过程中，我们需要注意无菌操作 ，避免杂菌污染。同时，需要准确配制 试剂，保证实验结果的准确性。
VS
实验设计方面
在实验设计时，需要考虑实验的可行性和 可重复性。本实验中，血球计数法的操作 较为简便，且结果准确可靠，是一种有效 的计数方法。
死活细胞鉴定结果分析
死活细胞鉴定结果
通过染色法和荧光染色法，我们成功地对酵母菌的死活细胞进行了鉴定。活细胞能够吸 收染料并发出荧光，而死细胞则不能。在显微镜下观察，活细胞呈现明显的荧光，而死
细胞则无荧光。
分析
死活细胞鉴定结果表明，大部分酵母菌为活细胞，仅有少量酵母菌为死细胞。这说明在 实验过程中，酵母菌的生长条件较为适宜，且培养基的营养成分能够满足酵母菌生长的
实验七酵母菌的形 态观察、死活细胞 鉴定及血球计数法
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
CATALOGUE
实验目的
掌握酵母菌的形态观察方法
了解酵母菌的形态特征
通过显微镜观察，了解酵母菌的单细 胞形态，包括其形状、大小、细胞壁 、细胞膜等结构特点。
学习染色法
THANKS
感谢观看
酵母菌是单细胞真菌，通常呈卵圆形或圆柱形，具有细胞壁、细胞膜、细胞质和 细胞核等基本结构。通过显微镜观察酵母菌的形态，可以了解其生长状态和繁殖 方式。
酵母菌在生长过程中，会经历由单倍体到二倍体的过程，通过观察其形态变化， 可以了解其生长周期和繁殖特点。
实 验7 酵母菌的形态观察
实验7酵母菌的形态观察、大小测定和直接计数一、实验目的酵母菌的形态及出芽生殖，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；学习并掌握用测微尺测定微生物大小和使用血球计数板进行微生物计数的方法。
二、实验原理1.酵母菌形态观察酵母菌个体较大，常规涂片方法可能损伤细胞，因此用美蓝染液水浸片法观察其出芽生殖。
美蓝染液的氧化形式蓝色，还原形式无色。
活细胞由于新陈代谢，细胞内还原性物质还原美蓝而呈现无色，死细胞或代谢能力弱的细胞不能将美蓝还原呈现蓝色。
2.细胞大小测量微生物大小的测定需借助测微尺：目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺用于矫正目镜测微尺，总长1mm，分100个小格，每小格10μm。
目镜测微尺是一块可放入目镜的圆形玻片，有50小格和100小格2种。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，计算出细胞的实际大小。
3.细胞计数血细胞计数板，大格1.0mm，体积0.1m3。
三、步骤1.酵母菌观察1)在载玻片中央加一滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液，用滴管取1滴酵母菌菌液于染液中，混合均匀。
2)加盖玻片。
3)将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并根据颜色区别死、活细胞。
4)染色约0.5h后再次进行观察，观察死细胞数量是否增加。
5)形态记录，计算0.5h后酵母菌的死亡率。
2.细胞大小测量1)装目镜测微尺：把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的格板上，然后旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。
2)校正目镜测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。
校正：先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。
实验七 酵母菌细胞大小的测定
实验七酵母菌细胞大小的测定一、实验目的1.了解测量微生物大小的原理；2.学习并掌握接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定方法，增强微生物细胞大小的感性认识。
二、实验材料1.菌种：啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌悬液2.仪器或其他用具：显微镜，接目测微尺，镜台测微尺，载玻片，盖玻片三、实验原理微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
微生物细胞个体较小，需要在显微镜下借助于特殊的测量工具—测微尺来测定其大小。
测微尺包括镜台测微尺和接目测微尺。
镜台测微尺是一张中央部分刻有精确等分线的载玻片，专门用于校定接目镜测微尺每小格的相对长度。
通常，刻度的总长是1mm，被等分为100格，每格0.01mm（即10μm）。
镜台测微尺不直接用来测量细胞的大小。
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。
在测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上，即可来测量经显微镜放大后的细胞物象。
也有专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺。
由于接目测微尺所测量的是经显微镜放大后的细胞物象，因此，在不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。
所以，在用接目测微尺测量微生物大小之前，必须先用镜台测微尺校定接目镜测微尺，以确定该显微镜在特定放大倍数的目镜和物镜下，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度，然后根据微生物细胞相当于的接目镜测微尺格数，计算出微生物细胞的实际大小。
图7-1测微尺的安装图7-2目镜测微尺图7-3用镜台测微尺校正接目测微尺四、操作步骤1.装接目测微尺：取下显微镜的目镜，换上专用目镜。
如果没有专用的目镜，则取下显微镜的目镜，旋下透镜，将接目镜测微尺刻度朝下放在接目镜的隔板上，再旋上目镜透镜，将装有测微尺的目镜装回镜筒。
2.接目测微尺的标定：1)放镜台测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上固定在显微镜的载物台上，注意不可放反。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目得了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺（图－1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍm长度刻成50等分，或把10 mｍ长度刻成1０0等分。
测量时，将其放在接目镜中得隔板上（此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.镜台测微尺（图２0-2）就是中央部分刻有精确等分线得载玻片，一般将ｌmm等分为10０格，每格长l0μm(即０、0ｌmm）,就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大，因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小，所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺，换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料：酿酒酵母（Sacchaｒomyces ｃerｅvisｉae)、枯草杆菌（Bacｃiｌlｕｓｓubｔili ｓ)染色标本片。
2。
器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法１．目镜测微尺得校正把目镜得上透镜旋下，将目镜测微尺得刻度朝下轻轻地装入目镜得隔板上，把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上.先用低倍镜观察，对准焦距，视野中瞧清镜台测微尺得刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺得刻度平行,移动推动器,使两尺重叠，再使两尺得“0”刻度完全重合,定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合得刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺得格数与镜台测微尺得格数.因为镜台测微尺得刻度每格长ｌ0μｍ,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表得长度.例如目镜测微尺5小方格正好与镜台测微尺5小方格重叠,已知镜台测微尺每小方格为l0μm，则目镜测微尺上每小方格长度为=5×10μｍ/5＝10μm用同法分别校正在高倍镜下与油镜下目镜测微尺每小方格所代表得长度。
酵母菌大小实验报告
酵母菌大小实验报告酵母菌大小实验报告引言：酵母菌是一种单细胞真菌，广泛存在于自然界中。
酵母菌在食品工业、酿酒业、生物学研究等领域具有重要的应用价值。
而酵母菌的大小对其生物学特性和功能具有一定的影响。
本实验旨在通过观察不同条件下酵母菌的大小变化，探究其生长与环境因素的关系。
材料与方法：1. 酵母菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸等营养成分的培养基。
2. 培养皿：用于培养酵母菌的平底玻璃容器。
3. 显微镜：用于观察酵母菌的大小。
4. 显微镜片：用于制作酵母菌样本。
5. 酵母菌悬浮液：用于制作酵母菌样本。
实验步骤：1. 准备酵母菌培养基，并将其倒入培养皿中，使其均匀分布。
2. 用显微镜片取一滴酵母菌悬浮液，滴在培养基上。
3. 将培养皿放置在恒温培养箱中，温度设定为28摄氏度。
4. 每隔一定时间，取出培养皿，用显微镜观察酵母菌的大小，并记录下来。
实验结果：经过一段时间的观察，我们得到了以下实验结果：1. 酵母菌的大小随着时间的推移而增加。
初始时，酵母菌呈现较小的圆形单细胞状态，随着细胞分裂的进行，酵母菌逐渐变大。
2. 酵母菌的大小受到温度的影响。
在较低温度下，酵母菌的生长速度较慢，细胞大小也相对较小；而在较高温度下，酵母菌的生长速度加快，细胞大小也相对较大。
3. 酵母菌的大小受到培养基中营养物质的影响。
添加了更多的营养物质的培养基中，酵母菌的生长速度更快，细胞大小也更大。
讨论与分析：通过本实验，我们可以得出以下结论：1. 酵母菌的生长速度与其细胞大小呈正相关。
随着酵母菌的细胞分裂，其细胞大小逐渐增加。
这与酵母菌的生物学特性相符合，也说明了酵母菌在发酵过程中产生的气泡越大。
2. 温度是影响酵母菌大小的重要因素之一。
较高的温度可以促进酵母菌的生长，使其细胞大小增加；而较低的温度则会减缓酵母菌的生长速度，导致细胞大小较小。
3. 营养物质的供应对酵母菌的大小也有影响。
富含营养物质的培养基可以提供更多的能量和营养物质，促进酵母菌的生长，使其细胞大小增大。
酵母菌细胞数和发芽率的测定、微生物细胞大小的测定实验报告
酵母菌细胞数和发芽率的测定、微生物细胞大小的测定实验报告实验报告一、实验目的1.了解酵母菌的基本结构和特点，能够通过显微镜观察和测量微生物的大小。
2.了解酵母菌的生长规律和判断细胞数量的方法。
3.学习正确使用显微镜、计数盘等工具的方法和技能。
二、实验原理1.酵母菌细胞数量的测定酵母菌生长的过程中，细胞数量会不断增加。
在进行数量的测定时，可以使用计数盘的方法，将酵母菌培养液进行稀释后，挑取一定数量的细胞在计数盘中进行计数，从而得出总细胞数。
计算公式：N=Nv/(Vs某d)其中，N为总细胞数，Nv为计数盘中可数的细胞数，Vs为取自培养液的样品体积，d为稀释倍数。
2.酵母菌发芽率的测定酵母菌发芽率是指在特定条件下发芽的酵母菌占总酵母菌数量的百分比。
测定方法为：将稀释后的培养液分别在不同的温度和时间条件下进行培养，待观察到发芽的细胞数后再进行计算。
计算公式：G=Nf/Nt某100%其中，G为发芽率，Nf为观察到发芽的细胞数，Nt为总细胞数。
三、实验步骤1.酵母菌细胞数量的测定（1）将酵母菌液稀释至合适浓度，取出10μl滴于计数盘的盆2中。
（2）低倍镜下计数，计算得到总细胞数。
2.酵母菌发芽率的测定（1）将酵母菌液稀释至合适浓度，分别放置于不同的温度和时间条件下培养。
（2）观察不同条件下的发芽情况，计算得到发芽率。
四、实验结果与分析1.酵母菌细胞数量的测定（1）计算盘的小方格数为16，每个小方格的面积为0.010mm²。
（2）经过计数后得到的样品的平均值为32个/小方格，计算得到总细胞数为32某16/(0.01某10)=5120个/mL。
2.酵母菌发芽率的测定（1）在不同的温度条件下，观察到的发芽率分别为：30℃1h（90%）、35℃1h（75%）、40℃1h（60%）。
（2）在不同的时间条件下，观察到的发芽率分别为：30℃1h（90%）、30℃2h（80%）、30℃3h（70%）。
五、实验思考通过本次实验，我们了解到了酵母菌的基本结构和特点，学会了正确使用显微镜、计数盘等工具的方法和技能，并且能够通过显微镜观察和测量微生物的大小。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺与镜台测微尺的构造与使用原理,掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小就是微生物重要的形态特征之一,由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺(图-1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5mm长度刻成50等分,或把10 mm长度刻成100等分。
测量时,将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺(图20-2)就是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格,每格长l0μm(即0、0lmm),就是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时,将镜台测微尺放在载物台上,图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、枯草杆菌(Baccillus subtilis)染色标本片。
2.器材:显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1.目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。
先用低倍镜观察,对准焦距,视野中瞧清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“0”刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数与镜台测微尺的格数。
微生物学实验报告
微生物学实验报告（格式标准）(生命科学专业)*****目录索引实验一油镜的使用和细菌的简单染色法 3实验二细菌的革氏染色与芽孢染色 5实验三常用培养基的配制7实验四酵母菌霉菌的形态结构观察及酵母死活细胞的鉴别8实验五、微生物大小的测定与显微计数10实验六环境中微生物的检测和分离纯化11实验七细菌鉴定中常用的生理生化反应12实验八（综合实验）化能异养微生物的分离与纯化13课程名称：微生物学实验班级：化生系生命科学本科实验日期：指导教师：黎勇实验一油镜的使用和细菌的简单染色法〔目的要求〕学习并熟练掌握油镜的使用技术；观察细菌的基本形态；学习观察细菌的运动性的基本方法。
〔基本原理〕1. N·A=n·sinα2. D=λ/2N.A3. 目镜可提高放大倍数，但有效放大率取决于镜口率。
已经分辨的物体不放大看不清，未分辨物放得再大也看不清。
4. 用悬滴法或凹玻片法观察细菌的运动性时，可以通过真运动能定向地由一处快速运动来区别于颗粒的布朗运动。
〔器材用具〕显微镜、载玻片、凹玻片、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯、凡士林、吸水纸、擦镜纸；细菌、放线菌等固定装片；培养18小时左右的B.subtilis. S.arueus 菌斜面培养物；无菌水、生理盐水。
〔方法步骤〕：（一）油镜的使用镜检装片在中倍（或高倍镜）下找到目的物，并使位于视野正中聚光镜上升到最高位置，虹彩光圈开到最大，镜头转开成八字形在玻片的镜检部位（光斑处）滴一滴香柏油油镜转入正下方侧视小心上升载物台（缩短镜头与装片距离，镜头浸入油中，至油圈不扩大为止镜头几与装片接触）粗调器徐徐下降载物台（密切注视视野，当捕捉到物像时，立即用细调器校正）仔细观察并绘图取出装片，清洗油镜：擦镜纸拭去镜头上的香柏油擦镜纸沾少许二甲苯擦去残留（用手指辅助，迅速拭擦一、二次）用清洁擦镜纸仔细擦干二甲苯（2-3次）。
（二）细菌的简单染色法：涂片干燥火焰固定染色水洗干燥油镜观察（三）细菌运动性的观察取洁净盖玻片，四周涂上凡士林滴加一小滴菌悬液凹玻片的凹窝向下盖于盖玻片上翻转观察〔结果分析〕1、画一圆圈表示视野，选取所观察的微生物绘图，注意特殊结构、形状和排列。
实验七 微生物细胞大小测定
实验七微生物细胞大小测定实验目的1．了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造。
2．掌握用显微测微尺测量微生物细胞大小的方法。
实验材料1．菌种啤酒酵母菌24h液体培养物；2．其它光学显微镜、镜台测微尺、目镜测微尺、盖玻片、载玻片、香柏油、擦镜纸。
实验原理在一定条件下，各种微生物细胞的大小，是微生物形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。
由于微生物细胞很小，只能在显微镜下测量，一般采用显微测微尺来测量。
显微测微尺有镜台测微尺和目镜测微尺两个部件。
镜台测微尺是在中央部分刻有精度等分线的载玻片。
一般将1mm等分为100格，每格长度为10 m，用于校正目镜测微尺。
目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形玻片，其中央一般有100等分的小格。
目镜测微尺可直接用于测量细胞的大小。
由于不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞的相对大小。
球菌用直径来表示大小，杆菌用宽和长的范围来表示。
如金黄色葡萄球菌直径约为0.8微米，枯草芽孢杆菌大小为0.7-0.8*2-3微米。
实验内容（一）目镜测微计的校正1．放置目镜测微尺取出目镜，旋开目镜，将目镜测微尺放在目镜的隔板上（有刻度的一面向下），然后旋上目镜，最后将此目镜插入目镜镜筒内。
2．放置镜台测微尺把镜台测微计放在显微镜载物台上（有刻度的一面向上）。
3．校正目测微尺用低倍物镜观察，对准焦距，通过调焦能看清镜台测微计的刻度；移动镜台测微尺和转动目测微尺使两者刻度平行；转动推进器从而使两测微尺某段起、止线完全重合，数出两条重合线之间的格数。
用同法分别校正在高倍镜和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。
观察时光线不宜过强，否则难以找到镜台测微尺的刻度；换高倍镜和油镜时，防止物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头。
微生物实验报告——真菌的观察
⑴.在载玻片中央滴加一滴 0.1%吕氏碱性美兰染液，无菌操作用接种环从酿酒酵母斜面培养物挑去少量 菌体于染液中，混合均匀。 ⑵.在液滴上轻轻加盖一张盖玻片。 ⑶．将载玻片放置 3min 后，用显微镜观察酵母菌的形态、出芽生殖和假菌丝，根据酵母菌的颜色区分 细胞死活。 ⑷.染色 30min 后再次观察，注意死活细胞的比例是否变化。 ⑸.用 0.05%吕氏美兰染液做对照重复上述实验。 2. 酵母菌大小测定。 ⑴.将镜台微尺和目微尺分别正确装到显微镜的镜台和目镜上。 ⑵.在低倍镜下转动目镜将两个微尺的刻度调整平行，移动镜台微尺使两尺在某一区域内刻度线重合， 然后分别数出两重合线之间镜台微尺和目微尺所占的格数。用同样的方法分别测出高倍镜和油镜下重合 线之间两尺分别所占的格数。
微生物学实验报告
酵母菌形态观察、大小测定和计数，放线菌和霉菌形态观察
2012/4/26 实验目的： 1. 观察酵母菌的形态和出芽生殖，学习显微镜镜台测微尺和目镜测微尺的使用，并掌握用测微尺测定微生
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实验七酵母菌细胞大小的测定
一、实验目的
1.了解测量微生物大小的原理；
2.学习并掌握接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定方法，增强微生物细胞大小的感
性认识。
二、实验材料
1.菌种：啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌悬液，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）
染色标本片。
2.仪器或其他用具：显微镜，接目测微尺，镜台测微尺，载玻片，盖玻片
三、实验原理
微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
微生物细胞个体较小，需要在显微镜下借助于特殊的测量工具—测微尺来测定其大小。
测微尺包括镜台测微尺和接目测微尺。
镜台测微尺是一张中央部分刻有精确等分线的载玻片，专门用于校定接目镜测微尺每小格的相对长度。
通常，刻度的总长是1mm，被等分为100格，每格0.01mm（即10μm）。
镜台测微尺不直接用来测量细胞的大小。
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。
在测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上，即可来测量经显微镜放大后的细胞物象。
也有专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺。
由于接目测微尺所测量的是经显微镜放大后的细胞物象，因此，在不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。
所以，在用接目测微尺测量微生物大小之前，必须先用镜台测微尺校定接目镜测微尺，以确定该显微镜在特定放大倍数的目镜和物镜下，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度，然后根据微生物细胞相当于的接目镜测微尺格数，计算出微生物细胞的实际大小。
图7-1测微尺的安装
图7-2目镜测微尺图7-3用镜台测微尺校正接目测微尺
四、操作步骤
1.装接目测微尺：取下显微镜的目镜，换上专用目镜。
如果没有专用的目镜，则取下显微
镜的目镜，旋下透镜，将接目镜测微尺刻度朝下放在接目镜的隔板上，再旋上目镜透镜，将装有测微尺的目镜装回镜筒。
2.接目测微尺的标定：
1)放镜台测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上固定在显微镜的载物台上，注意不可放反。
2)标定：将低倍镜转入光路，镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当
清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使接目测微尺与镜台测微尺的刻度相平
行。
利用移动钮移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完全重合，然后分别数
出两重合线之间镜台测微尺和接目测微尺所占的格数。
（使接目测微尺的一条刻度
线与镜台测微尺的一条刻度线相重合，再寻另一重合线，分别数出其间镜台测微尺
和接目测微尺所占的格数）
3)用同样的方法，分别在高倍镜和油镜下对接目测微尺进行标定。
（观察时光线不宜
过强，否则难以找到镜台测微尺的刻度，换高倍镜和油镜标定时，务必十分细心，
防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头）
4)计算：已知镜台测微尺每格长10μm，根据下列公式即可分别计算出在不同放大倍
数下，接目测微尺每格所代表的长度。
接目测微尺每格长度（μm）=10n/m
n：两重合线间镜台测微尺格数
m：两重合线间接目测微尺格数
3.微生物细胞大小的测量
接目测微尺标定完毕后，取下镜台测微尺，换上微生物标本片，将其固定在载物台上，先用低倍镜找到标本片图象，然后根据不同的微生物对象分别转换到高倍镜或油镜下，用接目测微尺测量微生物细胞的直径或宽和长所占的格数，再依据所标定的高倍镜或油镜下每一格的实际长度计算细胞的实际大小。
通常测定对数生长期菌体来代表该菌的大小，为了尽量减小实验误差，应在同一标本片上测量10~20个细胞，取其平均值作为该菌的大小。
维护：测量完毕，换上原有的显微镜目镜（或取出接目测微尺，目镜放回镜筒），用擦镜纸将测微尺擦拭干净后放回盒内保存，并按照显微镜的使用和维护方法擦拭物镜。
五、实验内容
1.分别在低倍镜、高倍镜下对接目测微尺进行标定。
2.高倍镜下测定酿酒酵母细胞的大小。
六、实验报告
1.目镜测微尺标定结果：
低倍镜下倍目镜测微尺每格长度是μm。
高倍镜下倍目镜测微尺每格长度为μm。
2.菌体大小测定结果：
3.为什么随着显微镜放大倍数的改变，接目测微尺每小格代表的实际长度也会改变？。