实验四 酵母菌细胞大小的测定
实验四放线菌、霉菌、酵母菌形态及大小观察
气生菌丝发育到一定阶段，其上可 气生菌丝发育到一定阶段， 分化出形成孢子的菌丝，即孢子丝， 分化出形成孢子的菌丝，即孢子丝， 又称产孢丝或繁殖菌丝。 又称产孢丝或繁殖菌丝。其形状和 排列方式因种而异， 排列方式因种而异，常被作为对放 线菌进行分类的依据。 线菌进行分类的依据。 营养菌丝发育到一定阶段， 营养菌丝发育到一定阶段，伸向空 间形成气生菌丝， 间形成气生菌丝，叠生于营养菌丝 可覆盖整个菌落表面。 上，可覆盖整个菌落表面。在光学 显微镜下观察，颜色较深， 显微镜下观察，颜色较深，直径较 ），有的产色素 粗（1-1.4 µm），有的产色素。 ），有的产色素。 营养菌丝生长于培养基内或紧贴表 吸收营养，也称基内菌丝。 面，吸收营养，也称基内菌丝。一 般无隔膜，直径0.2-0.8 µm，长度差 般无隔膜，直径 ， 别很大，有的可产生色素。 别很大，有的可产生色素。
实验四 放线菌、霉菌、酵母菌 放线菌、霉菌、 形态（及大小） 形态（及大小）观察
一、实验目的
• • 观察了解放线菌、 观察了解放线菌、霉菌及酵母菌的形态 特征 掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方 法
二、实验原理
• （一）放线菌 • 单细胞、多核区、丝状的革兰氏阳性细菌。 单细胞、多核区、丝状的革兰氏阳性细菌。 在形态上具有分枝状菌丝， 在形态上具有分枝状菌丝，以孢子进行繁 殖。放线菌实际上是属于细菌范畴内的原 核微生物
四、实验内容及操作
• • • • （一）放线菌形态观察（插片法） 放线菌形态观察（插片法） （二）霉菌形态观察 （三）酵母菌形态观察 （四）微生物大小测定
--
融合
子囊孢子
酵母菌菌落特征
与细菌菌落类似，但一般较细菌菌落大且厚， 与细菌菌落类似，但一般较细菌菌落大且厚，表面 湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色。 湿润，粘稠，易被挑起，多为乳白色，少数呈红色。
4、酵母大小及数量测定
实验四 酵母细胞的大小及数量测定 一、实验内容：
测定酵母细胞的大小，单位体积内的细胞数量
二、实验材料：1、菌种：酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae ）
2、器材：显微镜、血球计数板、镜台测微尺、目镜测微尺 三、实验步骤：
（一）细胞大小测定 1、对目镜测微尺的校正 镜台测微尺有刻度的一面朝上，置显微镜载物台上（目镜测微尺已 在镜筒中），先用10x找到镜台尺刻度，然后在40x进行目镜测微尺校正。 2、细胞大小的测量 酵母菌悬液滴在载玻片上，盖上盖玻片，置显微镜载物台上。显 微镜光圈调暗， 用目镜测微尺测量细胞宽和长。
（二）细胞数量测定 在血球计数板计数区滴加菌悬液后再盖上盖玻片。显微镜光圈调暗，
于10 X 找到计数区，再在10 X 或 40 X 下计数。（数3个大格）。
四、作 业
（一）微生物细胞大小测定
1、目镜测微尺校正：在40x下，目镜测微尺 格与镜台测微尺 格
相当，因为镜台测微尺1小格＝10 μm，故目镜测微尺1小格＝
μm
2、酵母菌大小测定：
平均格数
平均长度
1 2 3 4 5 (精确到 0.1格) （单位:μm )
长（格数）
宽（格数）
（二）细胞数量测定 1、统计3个大格中的细胞数量 计数大格 1 2 3
细胞数量
2、 酵母菌悬液浓度 =
(计算过程) ＝
个 / mL (科学计数法)
盖玻片
计数区， 高度0.1mm
放大
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目的了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理，掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺（图-1 ）是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上（此处正好与物镜放大的中间像重叠）来测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求岀在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。
镜台测微尺（图20-2 ）是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将Imm等分为100格，每格长I0 μm （即0.0lmm ）,是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求岀目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1 .活材料：酿酒酵母（SaCCharomyCeS CereViSiae ）、枯草杆菌（BaCCiIlUS SUbtiliS ）染色标本片。
2 •器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法1•目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。
先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使两尺重叠，再使两尺的“ 0”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
酵母菌大小的测定及计数实验流程
酵母菌大小的测定及计数实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor.I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!酵母菌大小的测定及计数实验流程详解酵母菌，作为一种单细胞微生物，广泛应用于食品、药品和生物技术等领域。
微生实验报告 2012.10.31 实验四 酵母菌的形态观察及细胞死活的鉴别,微生物细胞大小的测定
微生实验报告姓名：王晶晖专业年级：2011级生物技术学号：040312011032实验四酵母菌的形态观察及细胞死活的鉴别，微生物细胞大小的测定一、实验目的1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
2．了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法.3．了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。
二、实验原理美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。
因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。
用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的专用载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长10μm，每格长（0.01mm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的实际长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物细胞大小。
酵母菌大小测定及显微镜直接计数[指南]
![酵母菌大小测定及显微镜直接计数[指南]](https://img.taocdn.com/s3/m/455b9f37ae45b307e87101f69e3143323968f51b.png)
实验一：酵母菌大小测定一、实验器材1、菌种：酵母菌液体培养物2、仪器和其他物品目镜测微尺，镜台测微尺，普通光学显微镜，擦镜纸，载玻片，滴管等。
二、实验目的及要求1、学习并掌握使用显微测微尺测定微生物大小的方法。
2、掌握对不同形态细菌大小测定的分类学基本要求，增强对微生物细胞大小的感性认识。
三、基本原理微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
微生物大小测定需借助测微尺---目镜测微尺和镜台测微尺，两者配合使用。
镜台测微尺是一个在特制载玻片中央封固的标准刻尺，其尺度总长为1mm，精确分为10个大格，每个大格又分为10个小格，共100个小格，每个小格10μm。
镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小，而是用于校正目镜测微尺每格地相对长度。
目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，一般有等分为50小格和100小格两种。
测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微镜放大后的细胞物像。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。
因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，即可计算出细胞实际大小。
四、操作步骤1、装目镜测微尺(换目镜)把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝上放在目镜镜筒内的格板上，然后旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。
※双目显微镜的左目镜通常配有屈光度调节环，不能被取下，因此使用双目显微镜时目镜测微尺一般都安装在右目镜中。
2、校正目镜测微尺（1）放镜台测微尺将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。
（2）校正先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。
微生物细胞大小的测定方法
微生物细胞大小测定一、实验目得了解目镜测微尺与镜台测微尺得构造与使用原理,掌握微生物细胞大小得测定方法. 二、实验原理微生物细胞得大小就是微生物重要得形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。
用于测量微生物细胞大小得工具有目镜测微尺与镜台测微尺。
目镜测微尺（图－1)就是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍm长度刻成50等分，或把10 mｍ长度刻成1０0等分。
测量时，将其放在接目镜中得隔板上（此处正好与物镜放大得中间像重叠)来测量经显微镜放大后得细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合得放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示得长度也不一样,因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上得镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表得相对长度.镜台测微尺（图２0-2）就是中央部分刻有精确等分线得载玻片，一般将ｌmm等分为10０格，每格长l0μm(即０、0ｌmm）,就是专门用来校正目镜测微尺得.校正时,将镜台测微尺放在载物台上，图1目镜测微尺图2 镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本就是处于同一位置,都要经过物镜与目镜得两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数得放大而放大，因此从镜台测微尺上得到得读数就就是细胞得真实大小，所以用镜台测微尺得已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表得长度,然后移去镜台测微尺，换上待测标本片,用校正好得目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验器材1.活材料：酿酒酵母（Sacchaｒomyces ｃerｅvisｉae)、枯草杆菌（Bacｃiｌlｕｓｓubｔili ｓ)染色标本片。
2。
器材：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、擦镜纸。
四、实验方法１．目镜测微尺得校正把目镜得上透镜旋下，将目镜测微尺得刻度朝下轻轻地装入目镜得隔板上，把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上.先用低倍镜观察，对准焦距，视野中瞧清镜台测微尺得刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺得刻度平行,移动推动器,使两尺重叠，再使两尺得“0”刻度完全重合,定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合得刻度,计数两重合刻度之间目镜测微尺得格数与镜台测微尺得格数.因为镜台测微尺得刻度每格长ｌ0μｍ,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表得长度.例如目镜测微尺5小方格正好与镜台测微尺5小方格重叠,已知镜台测微尺每小方格为l0μm，则目镜测微尺上每小方格长度为=5×10μｍ/5＝10μm用同法分别校正在高倍镜下与油镜下目镜测微尺每小方格所代表得长度。
酵母菌大小实验报告
酵母菌大小实验报告酵母菌大小实验报告引言：酵母菌是一种单细胞真菌，广泛存在于自然界中。
酵母菌在食品工业、酿酒业、生物学研究等领域具有重要的应用价值。
而酵母菌的大小对其生物学特性和功能具有一定的影响。
本实验旨在通过观察不同条件下酵母菌的大小变化，探究其生长与环境因素的关系。
材料与方法：1. 酵母菌培养基：含有葡萄糖、酵母提取物、氨基酸等营养成分的培养基。
2. 培养皿：用于培养酵母菌的平底玻璃容器。
3. 显微镜：用于观察酵母菌的大小。
4. 显微镜片：用于制作酵母菌样本。
5. 酵母菌悬浮液：用于制作酵母菌样本。
实验步骤：1. 准备酵母菌培养基，并将其倒入培养皿中，使其均匀分布。
2. 用显微镜片取一滴酵母菌悬浮液，滴在培养基上。
3. 将培养皿放置在恒温培养箱中，温度设定为28摄氏度。
4. 每隔一定时间，取出培养皿，用显微镜观察酵母菌的大小，并记录下来。
实验结果：经过一段时间的观察，我们得到了以下实验结果：1. 酵母菌的大小随着时间的推移而增加。
初始时，酵母菌呈现较小的圆形单细胞状态，随着细胞分裂的进行，酵母菌逐渐变大。
2. 酵母菌的大小受到温度的影响。
在较低温度下，酵母菌的生长速度较慢，细胞大小也相对较小；而在较高温度下，酵母菌的生长速度加快，细胞大小也相对较大。
3. 酵母菌的大小受到培养基中营养物质的影响。
添加了更多的营养物质的培养基中，酵母菌的生长速度更快，细胞大小也更大。
讨论与分析：通过本实验，我们可以得出以下结论：1. 酵母菌的生长速度与其细胞大小呈正相关。
随着酵母菌的细胞分裂，其细胞大小逐渐增加。
这与酵母菌的生物学特性相符合，也说明了酵母菌在发酵过程中产生的气泡越大。
2. 温度是影响酵母菌大小的重要因素之一。
较高的温度可以促进酵母菌的生长，使其细胞大小增加；而较低的温度则会减缓酵母菌的生长速度，导致细胞大小较小。
3. 营养物质的供应对酵母菌的大小也有影响。
富含营养物质的培养基可以提供更多的能量和营养物质，促进酵母菌的生长，使其细胞大小增大。
实验4 微生物大小的测定
实验四微生物大小的测定一、实验目的1. 学习测微尺的使用和计算方法；2. 学习利用测微尺测定酵母菌的大小。
二、实验原理（阅读实验指导P40-41，图15-1）测微尺包含镜台测微尺和目镜测微尺。
镜台测微尺是一个中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般是将1mm等分为100格，每格长10μm。
目镜测微尺是一块可放在目镜内隔板上的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格两种，测量前先用镜台测微尺校正目镜测微尺每格所代表的真实长度，然后用目镜测微尺测量经显微镜放大后的微生物细胞大小。
两重合线间镜台测微尺格数×10μm 目镜测微尺每格长度(μm) =两重合线间目镜测微尺格数三、实验器材酵母菌悬液、显微镜、测微尺、载玻片、盖玻片、擦镜纸等。
四、实验步骤（观看教学辅助光盘）1．酵母菌水浸片的制备：取0.05%美兰染液和酵母菌悬液各一滴于载玻片中央，染色2~3min后加盖玻片（注意：不能产生气泡）。
2．校正目镜测微尺：分别测出10×、40 ×、100 ×镜头下，两重合线之间两尺分别所占的格数。
3．计算：利用公式分别计算出不同放大倍数下，目镜测微尺每格所代表的长度，将目镜测微尺校正结果填入表中。
接物镜目镜测微尺格数镜台测微尺格数目镜测微尺每格代表的长度/ μm 10×40×100×4．微生物大小的测定：在高倍镜下测定10个酵母菌的大小，将测定结果填入下表。
酵母菌目镜测微尺每格代表的长度宽长菌体大小范围目尺格数微米数目尺格数微米数12345678910五、预习思考题当接目镜不变，目镜测微尺也不变，只改变接物镜（放大倍数），目镜测微尺每格所量的物体的实际长度是否相同？为什么？。
实验四 酵母菌的形态观察
实验四酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别,微生物测量技术,显微镜直接计数法生物科学贺冰冰 040012010025 周二 9、0 节一实验目的1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。
2.了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法 .3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。
二实验原理美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。
用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。
因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。
用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把 10 mm长度刻成 100等分。
测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。
由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的专用载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长10μm，每格长（0.01mm），是专门用来校正目镜测微尺的。
校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的实际长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物细胞大小。
酵母菌细胞数和发芽率的测定、微生物细胞大小的测定实验报告
酵母菌细胞数和发芽率的测定、微生物细胞大小的测定实验报告实验报告一、实验目的1.了解酵母菌的基本结构和特点，能够通过显微镜观察和测量微生物的大小。
2.了解酵母菌的生长规律和判断细胞数量的方法。
3.学习正确使用显微镜、计数盘等工具的方法和技能。
二、实验原理1.酵母菌细胞数量的测定酵母菌生长的过程中，细胞数量会不断增加。
在进行数量的测定时，可以使用计数盘的方法，将酵母菌培养液进行稀释后，挑取一定数量的细胞在计数盘中进行计数，从而得出总细胞数。
计算公式：N=Nv/(Vs某d)其中，N为总细胞数，Nv为计数盘中可数的细胞数，Vs为取自培养液的样品体积，d为稀释倍数。
2.酵母菌发芽率的测定酵母菌发芽率是指在特定条件下发芽的酵母菌占总酵母菌数量的百分比。
测定方法为：将稀释后的培养液分别在不同的温度和时间条件下进行培养，待观察到发芽的细胞数后再进行计算。
计算公式：G=Nf/Nt某100%其中，G为发芽率，Nf为观察到发芽的细胞数，Nt为总细胞数。
三、实验步骤1.酵母菌细胞数量的测定（1）将酵母菌液稀释至合适浓度，取出10μl滴于计数盘的盆2中。
（2）低倍镜下计数，计算得到总细胞数。
2.酵母菌发芽率的测定（1）将酵母菌液稀释至合适浓度，分别放置于不同的温度和时间条件下培养。
（2）观察不同条件下的发芽情况，计算得到发芽率。
四、实验结果与分析1.酵母菌细胞数量的测定（1）计算盘的小方格数为16，每个小方格的面积为0.010mm²。
（2）经过计数后得到的样品的平均值为32个/小方格，计算得到总细胞数为32某16/(0.01某10)=5120个/mL。
2.酵母菌发芽率的测定（1）在不同的温度条件下，观察到的发芽率分别为：30℃1h（90%）、35℃1h（75%）、40℃1h（60%）。
（2）在不同的时间条件下，观察到的发芽率分别为：30℃1h（90%）、30℃2h（80%）、30℃3h（70%）。
五、实验思考通过本次实验，我们了解到了酵母菌的基本结构和特点，学会了正确使用显微镜、计数盘等工具的方法和技能，并且能够通过显微镜观察和测量微生物的大小。
酵母细胞计数与大小测量
答：血细胞计数的误差分别来源于技术误差和固有误差。其中由于操作人员采血不顺利，器材处理、使用不当，稀释不准确，细胞识别错误等因素所造成的误差属技术误差；而由于仪器（计数板、盖片、吸管等）不够准确与精密带来的误差称仪器误差，由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差属于分布误差或计数域误差（filed error）。仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差。技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正，但细胞分布误差却难于彻底消除。减少误差可以通过：①避免技术误差，纠正仪器误差；②缩小计数域误差或分布误差；③排除异常标本的干扰。
6.5
7.2
6.4
7.5
7.6
6.4
7.5
6.8
数据的格数为目镜测微尺上对应的格数
长轴
7.8
8.5
8.8
8.3
9.2
8.4
8.3
7.8
9.3
8.5
短轴
5.7
6.3
7.2
6.6
7.4
6.2
6.3
5.8
7.6
6.3
酵母菌长轴平均值（um）= 8.53um
酵母菌短轴平均值（um）= 6.75um
3.酵母菌稀释液的计数
三、实验仪器、材料和用具
1.实验用具
载玻片、盖片、200uL移液器及tip、擦镜纸、 装有蒸馏水的洗瓶。
2.实验仪器
普通生物显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、手动计数器。
3.菌种
稀释20倍的酿酒酵母溶液。
四、实验操作步骤
1.稀释：
1.1200rpm,28℃, 24h,用YPD培养基稀释15~25倍。(助教统一完成)
04微生物细胞大小的测定和显微镜直接计数
实验四微生物细胞大小的测定和显微镜直接计数一、实验目的1.学习接目测微计的校正方法，了解血球计数板的构造和计数原理2. 学习使用显微镜测微尺测定微生物细胞大小，掌握用血球计数板测定微生物细胞总数的方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物分类鉴定的重要依据之一。
微生物个体微小，必须借助于显微镜才能观察，要测量微生物细胞大小，也必须借助于特殊的测微计在显微镜下进行测量。
显微测微计由镜台测微计和目镜测微计两部分组成。
后者可直接用于测量细胞大小。
它是一块圆形玻片，其中央有精确等分到度，测量时将其放在接目镜中的隔板上。
由于目镜测微计所测量的是微生物细胞经过显微镜放大之后所成像的大小，刻度实际代表的长度随使用的目镜和物镜放大倍数及镜筒的长度而改变，所以，使用前须先用镜台测微计进行标定，求出某一放大率下，目镜测微计每一小格所代表的长度，然后用目镜测微计直接测被测对象的大小。
镜台测微计是一块中央有精确刻玻片，刻度的总长为lmm，等分为100小格，每小格长10um，专用于对目镜测微计进行标定的。
三、材料3.1 器械：显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺，载玻片、盖玻片、血球计算板、擦镜纸、吸水纸、玻片架、肾形盘、洗瓶、接种环、酒精灯、火柴、滴管。
3.2 菌种：培养48h的啤酒酵母斜面菌体和菌悬液。
3.3 革兰氏染液四、实验步骤（一）微生物菌体大小的测定1.目镜测微尺的校正（1）更换目镜镜头：更换目镜测微尺镜头（标记为PF）；或者取下目镜上部或下部的透镜，在光圈的位置上安上目镜测微尺，刻度朝下，再装上透镜，制成一个目镜测微尺的镜头。
（2）某一倍率下标定目镜刻度：将镜台测微尺置于载物台上，使刻度面朝上，先用低倍镜对准焦距、看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器使两尺重叠，并使二尺的左边的某一刻度相重合，向右寻找另外二尺相重合的刻度。
记录两重叠刻度间的目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。
微生物学实验报告
微生物学实验报告（格式标准）(生命科学专业)*****目录索引实验一油镜的使用和细菌的简单染色法 3实验二细菌的革氏染色与芽孢染色 5实验三常用培养基的配制7实验四酵母菌霉菌的形态结构观察及酵母死活细胞的鉴别8实验五、微生物大小的测定与显微计数10实验六环境中微生物的检测和分离纯化11实验七细菌鉴定中常用的生理生化反应12实验八（综合实验）化能异养微生物的分离与纯化13课程名称：微生物学实验班级：化生系生命科学本科实验日期：指导教师：黎勇实验一油镜的使用和细菌的简单染色法〔目的要求〕学习并熟练掌握油镜的使用技术；观察细菌的基本形态；学习观察细菌的运动性的基本方法。
〔基本原理〕1. N·A=n·sinα2. D=λ/2N.A3. 目镜可提高放大倍数，但有效放大率取决于镜口率。
已经分辨的物体不放大看不清，未分辨物放得再大也看不清。
4. 用悬滴法或凹玻片法观察细菌的运动性时，可以通过真运动能定向地由一处快速运动来区别于颗粒的布朗运动。
〔器材用具〕显微镜、载玻片、凹玻片、盖玻片、接种环、香柏油、二甲苯、凡士林、吸水纸、擦镜纸；细菌、放线菌等固定装片；培养18小时左右的B.subtilis. S.arueus 菌斜面培养物；无菌水、生理盐水。
〔方法步骤〕：（一）油镜的使用镜检装片在中倍（或高倍镜）下找到目的物，并使位于视野正中聚光镜上升到最高位置，虹彩光圈开到最大，镜头转开成八字形在玻片的镜检部位（光斑处）滴一滴香柏油油镜转入正下方侧视小心上升载物台（缩短镜头与装片距离，镜头浸入油中，至油圈不扩大为止镜头几与装片接触）粗调器徐徐下降载物台（密切注视视野，当捕捉到物像时，立即用细调器校正）仔细观察并绘图取出装片，清洗油镜：擦镜纸拭去镜头上的香柏油擦镜纸沾少许二甲苯擦去残留（用手指辅助，迅速拭擦一、二次）用清洁擦镜纸仔细擦干二甲苯（2-3次）。
（二）细菌的简单染色法：涂片干燥火焰固定染色水洗干燥油镜观察（三）细菌运动性的观察取洁净盖玻片，四周涂上凡士林滴加一小滴菌悬液凹玻片的凹窝向下盖于盖玻片上翻转观察〔结果分析〕1、画一圆圈表示视野，选取所观察的微生物绘图，注意特殊结构、形状和排列。
实验 微生物的大小测量
实验四微生物的大小测量、微生物的计数一、实验目的和要求1.了解测微尺的构造和原理,学习接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定。
2.学习利用血球计数板对微生物进行计数的原理和方法。
二、实验原理微生物细胞的大小是微生物形态特征之一.也是分类鉴定的依据之一.其大小的测量是在显微镜下用接目测微尺来测量.由于在目镜中观测到的是显微镜放大后的物像,又因为放大倍数不同时,目镜测微尺每格实际代表的长度也随之变化,因此目镜测微尺在使用前必须用标准物镜尺进行校正.接目测微尺是一块圆形玻璃片,其中央尺等分成100格.物镜测微尺又称标准尺.是一块中央刻有精确刻度的载玻片,放在载物台上使用的,专用于校正接目测微尺.常用的是0.01毫米物镜测微尺.是将长1毫米的直线等分成100个小格,每格长度即为0.01毫米(10微米),利用血球计数板在显微镜下直接计数,是一种常用的微生物计数方法.此法是将单细胞微生物的菌悬液或孢子悬液,注入血球计数板与盖玻片之间的计数室中,在显微镜下在进行计数的.由于计数室的容积是一定的,所以可根据显微镜下观察的微生物的数量计算出单位体积内的微生物总数.血球计数板的计数室如下图所示,其中央为计数室,通常有两种规格25×16型或16×25型.常用的为25×16型,其长和宽各为1毫米,盖上盖玻片后,其间的距离为0.1毫米,因此计数室的容积为0.1立方毫米.细胞数（CFU/mL）=50000×A×B式中：A－5个中方格中细胞总数B－菌液的稀释倍数血球计数扳的构造a.平面图(中间平台分为两半，各刻有一个方格网)b.侧面图(中间平台与盖玻片之间有高度为0.1毫米的间隙)血球计数板计数网的分区和分格三、实验材料和器材1、菌种: 固体斜面培养18-24小时酵母菌2、培养基及试剂:马铃薯固体培养基、二甲苯、95％乙醇、苯酚等3、器材及耗材:双目显微镜、恒温培养箱、恒温干燥箱、洁净工作台、紫外线灯管、紫外线灭菌手推车、血球计数板、接种环、试管、酒精灯、滤纸、擦镜纸、盖玻片、载玻片、打火机、棉花、滴瓶、圆塑料篓、长塑料篓、血红蛋白吸管、10mL 塑料离心管、物镜物镜测微尺、目镜测微尺等四、实验操作步骤一）微生物大小测量1.校正目镜测微尺：将目镜头上的透镜旋下，把目镜测微尺裝入镜筒内，在显微镜里看到目镜测微尺的刻度。
微生物生理生化和酵母细胞大小的测定
酵母细胞的大小还可能在其他工业应用中发挥潜在价值，如食品添加 剂、酶的生产等。
THANK YOU
感谢聆听
详细描述
图像分析法是一种基于计算机视觉技术的测量 方法，通过图像处理软件对酵母细 胞图像进行分析和测量。该方法具有自动化、高效率的优点，但需要特定的软件 支持，且对图像质量要求较高。
03
酵母细胞生长的生理生化变化
酵母细胞生长过程中的代谢变化
糖酵解
在酵母细胞生长过程中，糖酵解 是主要的能量来源。糖酵解过程 中，葡萄糖被分解为丙酮酸，并
释放能量供细胞使用。
乙醇发酵
当氧气供应不足时，酵母细胞会进 行乙醇发酵，将丙酮酸转化为乙醇 和二氧化碳。
脂肪酸合成
在某些条件下，酵母细胞可以合成 脂肪酸，作为储存能量的形式。
酵母细胞生长过程中的细胞器变化
线粒体
高尔基体
随着酵母细胞的生长，线粒体的数量 和大小也会增加，以满足细胞对能量 的需求。
高尔基体在酵母细胞的分泌活动中起 重要作用，随着细胞的生长，高尔基 体的数量和形态也会发生变化。
05
酵母细胞大小与工业应用
酵母细胞大小对酒精发酵的影响
1 2
酒精发酵效率
较大的酵母细胞通常具有更高的发酵效率，因为 它们具有更大的体积和更多的酶，能够更快地分 解糖分。
产物浓度
酵母细胞的大小会影响酒精的产量和浓度，因为 较大的细胞内有更多的酶，可以产生更多的酒精。
3
发酵周期
较小的酵母细胞可能需要更长的发酵周期，因为 它们内部的酶较少，分解糖分速度较慢。
营养条件
营养物质的供应对酵母细胞大小有显著影响。在营养充足的 环境下，细胞生长迅速，体积较大；而在营养受限的环境中 ，细胞生长速度减慢，体积相对较小。
实验四 微生物大小的测定和酵母菌死活细胞鉴定
放台尺→调焦→低倍镜下，使目尺与台尺零点对齐， 并在某一刻度上完全重合（准焦）→低倍、高倍、油镜 下分别计算目尺每格所代表的长度。
2. 制作酵母的美蓝水浸片 在载片上加一滴美蓝染液，挑取酵母与之混匀。用
镊子取盖片，注意避免产生气泡
3. 菌体大小测定 校正完毕，移走台尺，换上制好的面包酵母的水浸
片，先低倍后高倍。面包酵母几乎圆形，测其直径占目 尺多少格，将格数乘上目尺每格代表的长度，即为面包 酵母的实际大小
4. 计算菌体大小 将目尺取出放入盒内保存
五 实验结果1 目尺校正结果Fra bibliotek接物镜
放大倍数
低倍镜 高倍镜
目尺格数
台尺格数 目尺每格代表 的长度（μm）
2 面包酵母的大小：￠ ＝ ？μm
六 注意事项：
1.使用镜台测微尺进行校正时，若一时无法直接找到测微 尺，可先对刻尺外的圆圈线进行准焦后再通过移动标本 推进器进行寻找。
2.细菌的个体微小，在进行细胞大小测定时一般应选用油 镜，以减小误差。
3.进行显微镜计数时应先在低倍镜下寻找大方格的位置， 找到计数室后将其移至视野中央，再换高倍镜观察和计 数。
4.酵母菌计数加样品前，一定将菌液摇匀。
七、思考题：
1.更换不同放大倍数的目镜和物镜时，为什么必须用 台尺重新校正目尺？
2.目镜和目尺不变，改用不同放大倍数的物镜来测同 一细菌时，其测定结果是否相同？为什么？
• 美蓝作为无毒性染料，其氧化型呈蓝色，还原型呈无色。 活的酵母细胞具有新陈代谢活性，能使美蓝由氧化型（蓝） 变为还原型（无色），染约3 min，死的酵母或衰老的细 胞代谢能力弱，菌体呈蓝色或浅蓝色。据此区分死活酵母。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
时间：2014年4月21日班级：食检133 学号：1201131344 姓名：袁蕊
实验四酵母菌细胞大小的测定
一、实验目的
1. 了解测量微生物大小的原理；
2. 学习并掌握接目测微尺的校正方法及微生物大小的测定方法，增强微生物细胞大小的感性认识。
二、实验原理
微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征，也是分类鉴定的依据之一。
微生物细胞个体较小，需要在显微镜下借助于特殊的测量工具—测微尺来测定其大小。
测微尺包括镜台测微尺和接目测微尺。
镜台测微尺是一张中央部分刻有精确等分线的载玻片，专门用于校定接目镜测微尺每小格的相对长度。
通常，刻度的总长是1mm，被等分为100格，每格0.01mm（即10μm）。
镜台测微尺不直接用来测量细胞的大小。
接目测微尺是一块可以放入接目镜的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格的两种。
在测量时将接目测微尺放在目镜的隔板上，即可来测量经显微镜放大后的细胞物象。
也有专用的目镜，里面已经安放好了接目测微尺。
由于接目测微尺所测量的是经显微镜放大后的细胞物象，因此，在不同的显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度也不一样。
所以，在用接目测微尺测量微生物大小之前，必须先用镜台测微尺校定接目镜测微尺，以确定该显微镜在特定放大倍数的目镜和物镜下，接目镜测微尺每一小格所代表的实际长度，然后根据微生物细胞相当于的接目镜测微尺格数，计算出微生物细胞的实际大小。
三、实验仪器及试剂
1. 菌种：酵母菌悬液
2. 仪器或其他用具：显微镜，接目测微尺，镜台测微尺，载玻片，盖玻片
四、实验步骤
1. 装接目测微尺：取下显微镜的目镜，换上专用目镜。
如果没有专用的目镜，则取下显微镜的目镜，旋下透镜，将接目镜测微尺刻度朝下放在接目镜的隔板上，再旋上目镜透镜，将装有测微尺的目镜装回镜筒。
2. 接目测微尺的标定：
1) 放镜台测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上固定在显微镜的载物台上，注意不可放反。
2) 标定：将低倍镜转入光路，镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当
清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使接目测微尺与镜台测微尺的刻度相平行。
利用
时间：2014年4月21日班级：食检133 学号：1201131344 姓名：袁蕊移动钮移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺和接目测微尺所占的格数。
（使接目测微尺的一条刻度线与镜台测微尺的一条刻度线相重合，再寻另一重合线，分别数出其间镜台测微尺和接目测微尺所占的格数）
3) 用同样的方法，在高倍镜下对接目测微尺进行标定。
（观察时光线不宜过强，否则
难以找到镜台测微尺的刻度，换高倍镜标定时，务必十分细心，防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头）
4) 计算：已知镜台测微尺每格长10μm，根据下列公式即可分别计算出在不同放大倍
数下，接目测微尺每格所代表的长度。
接目测微尺每格长度（μm）=10n/m n：两重合线间镜台测微尺格数m：两重合线间接目测微尺格数
3. 微生物细胞大小的测量
接目测微尺标定完毕后，取下镜台测微尺，换上微生物标本片，将其固定在载物台上，先用低倍镜找到标本片图象，然后根据不同的微生物对象分别转换到高倍镜下，用接目测微尺测量微生物细胞的直径或宽和长所占的格数，再依据所标定的高倍镜每一格的实际长度计算细胞的实际大小。
通常测定对数生长期菌体来代表该菌的大小，为了尽量减小实验误差，应在同一标本片上测量10~20个细胞，取其平均值作为该菌的大小。
维护：测量完毕，换上原有显微镜目镜（或取出接目测微尺，目镜放回镜筒），用擦镜纸将测微尺擦拭干净后放回盒内保存，并按照显微镜的使用和维护方法擦拭物镜。
五、数据记录和处理
菌号酵母菌细胞测定结果
目镜测微尺格数实际长度
长长
1 6 0.024
2 3 0.012
3 3 0.012
4 2 0.008
5 4 0.016
6 2 0.008
7 2 0.008
8 3 0.012
9 4 0.016
10 2 0.008
时间：2014年4月21日班级：食检133 学号：1201131344 姓名：袁蕊平均值 2.7 0.011
六、实验心得
1.接目测微尺的标定时接目测微尺的一条刻度线与镜台测微尺的一条刻度线相重合，再寻另一重合线，分别数出其间镜台测微尺和接目测微尺所占的格数。
2.观察时光线不宜过强，否则难以找到镜台测微尺的刻度，换高倍镜标定时，务必十分细心，防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头。
七、实验考核
表2 实验成绩自评及组评成绩表
序号学号姓名得分组评均分
1
2
3
4
5
自评成绩：自评+组评成绩求和：教师评分：注：自评20%，组评
30%，教师评价50%，
共计100%。
总评成绩：
八、实验纪实。