凝血四项操作规程教学文稿
凝血四项操作规程
凝血四项操作规程1.目的规范凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）的测定。
2.实验原理凝固法原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂后，采用波长为660nm的光照射样本。
凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。
从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method法求得血液凝固时间。
3.标本要求3.1.标本准备：采用塑料采血管或硅化玻璃注射器静脉采血，针头必须为21号以上，儿童可用23号。
采血技术熟练，采血时止血带不可束缚过紧，并且以1分钟完成为宜，最多不宜超过3分钟以免某些凝血因子及纤溶因子活化。
3.2.抗凝剂选择：以109mmol/L枸椽酸钠溶液为佳，血与抗凝剂按9：1混合。
建议用已加有抗凝剂的硅化真空采血管。
也可用带盖塑料管或硅化玻璃管，但应保证血与抗凝剂的比例正确。
3.3.收到血标本后应尽快离心分离血浆，并尽快测量，全血储存在4-8℃不应超过2小时，室温下富含血小板血浆可存放3小时，去血小板血浆可存放2小时；4小时内不能测定的血浆应冷藏；不要把血浆置于37℃条件下超过10分钟。
应了解不同存放温度和时间对各种凝血因子活性检测的影响。
4.材料4.1.试剂的选择一方面要根据所用检测仪器，例如：光电检测法的凝血仪不宜用透光度差的试剂；另一方面要根据实验试剂对疾病的敏感性，例如APTT试剂中所用活化剂不同（可用白陶土、硅藻土和鞣花酸），该试剂对肝素、凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ缺乏及狼疮样抗凝物敏感性不同，所以需根据检测项目来选择不同活化剂。
(例如常用的APTT试剂的活化剂，以白陶土对凝血因子敏感，硅土对因子及肝素均敏感，鞣花酸对狼疮样抗凝物敏感性较强.PT试剂的选择也一样,例如对口服抗凝药物(华法令)检测应选择ISI与1.0接近的PT试剂。
)血栓与止血检验应尽可能选用仪器生产厂家推荐的配套试剂，并选择使用与仪器原理相匹配的试剂。
凝血四项精品PPT课件
同的实验室，用不同的ISI试剂检测，PT值 结果差异很大，但测的INR值相同，这样， 使测得结果具有可比性。目前国际上强调 用INR来监测口服抗凝剂的用量，是一种较 好的表达方式。
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凝血酶原时间是监测口服抗凝剂的常用指 标，在ISI介于2.2-2.6时,凝血酶原时间比值 在1.5-2.0 INR在3.0-4.5用药为合理和安全. 世界卫生组织（WHO）规定应用口服抗凝 剂时INR的允许范围如下：非髋部外科手 术前 1.5—2.5； 髋部外科手术前 2.0—3.0 ； 深静脉血栓形成 2.0—3.0 ；治疗肺梗塞 2.0—4.0 ；预防动脉血栓形成 3.0—4.0 ； 人工瓣膜手术 3.0—4.0
凝血四项临床意义
1
一 血浆凝血酶原时间（prothrombin time，PT）
正常参考值：12-16秒。
临床应用：凝血酶原时间是检查外源性凝 血因子的一种过筛试验，是用来证实先天 性或获得性纤维蛋白原、 凝血酶原、和凝 血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的缺陷或抑制物的存在， 同时用于监测口服抗凝剂的用量，是监测 口服抗凝剂的首选指标。还可作为肝脏合 成蛋白质功能的检测。据报道，在口服抗 凝剂的过程中，维持PT在正常对照的1-2倍 最为适宜。
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增加：纤维蛋白原是一种急性时相蛋白,其 增加往往是机体的一种非特异反应,常见于 下列疾病:
①机体感染；毒血症、肺炎、轻度肝炎、 胆囊炎及长期局部炎症
②无菌性炎症：糖尿病、肾病综合症、尿 毒症、风湿热、恶性肿瘤、风湿关节炎
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③糖尿病酸中毒 ④心血管疾病：动脉硬化症、脑血栓、血
栓静脉炎、心肌梗塞、放射治疗 ⑤妇女经期、妊趁晚期、妊高症及剧烈运
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③血循环中有抗凝药物存在：如抗凝因子 Ⅷ或因子Ⅸ抗体等；
凝血四项解读PPT课件
2、外源性凝血途径：来自血液之外的组织因子暴 露于血液而启动。
凝血的过程
凝血因子按一定顺序相继激活生成凝血酶，最终使 纤维蛋白原变为纤维蛋白
凝血四项：
1、凝血酶原时间（PT） 2、活化部分凝血活酶时间（APTT） 3、凝血酶时间（TT） 4、纤维蛋白原（FIB）
管血栓而消耗大量凝血因子
d、新生儿自然出血症、先天性凝血酶原缺
乏抗凝治疗。
血浆凝血酶原时间（PT)
二、缩短见于：
a、血液呈高凝状态时、为弥散性血管内凝
血早期。
b、血栓性疾病
凝血酶时间（TT）
简介：是指在血浆中加入标准化的凝血酶后血液凝 固的时间。在共同凝血途径中，所生成的凝血酶使 纤维蛋白原转化为纤维蛋白，可用凝血酶时间（TT） 来反映。由于纤维蛋白（原）降解产物（FDP）能 使TT延长，故也有人将TT作为纤溶系统的筛选试验。
疾病状态
预防静脉血栓形成；治 疗静脉血栓形成；治疗 肺栓塞；预防体循环栓 塞；生物瓣换瓣；急性 心肌梗死（预防体循环 栓塞）；瓣膜病房颤
机械瓣换瓣（高危）； 急性心肌梗死（预防心 肌梗死复发）；某些血 栓病人和抗磷脂抗体综 合征
主动脉双叶机械性瓣膜
INR INR 2.0-3.0
INR 2.5-3.5 INR 2.0-3.0
情况。
血栓性疾病：心肌梗死、不稳定性心绞痛、脑血管病变、
糖尿病伴血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成。
关于APTT的评价：
（1）因APTT对肝素的敏感性高，目前已广泛用于 普通肝素的抗凝治疗监测中（倍为宜），但对于低 分子肝素的监测，APTT不敏感。
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临床意义：
肝硬化； TT：主要反映纤维蛋白原转为 纤维蛋白的时间。增高见于DIC纤溶亢进 期；降低血液中有钙离子存在，或血液呈 酸性等。
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正常值：
一.凝血因子测定： 1活化部分凝血 活酶时间（APTT）：秒数:25-37 2凝血酶 原时间（PT）：秒数:11-14 活动度:80120% INR:0.8-1.2 3纤维蛋白原（FIB）： 2-4 g/L 二.纤维蛋白溶解检测： 4凝血 酶时间（TT）：秒数:12-16。
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简介：
IB），目的是在术前了解患者的止血功能 有无缺陷，以事先有所准备，防止术中大 出血而措手不及。人体的止血功能十分重 要。当人意外受伤流血时，止血功能迅速 发挥作用，使血液凝固堵住伤口而止血， 避免血液大量丢失。当患者需要手术时， 医师必须事先了解患者的止血功能，如止 血功能不健全，患者术中可能
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相关疾病：
弥漫性血管内凝血、遗传性凝血因子Ⅴ缺 乏症、遗传性凝血因子Ⅶ缺乏、遗传性凝 血因子Ⅹ缺乏、遗传性凝血因子Ⅺ缺乏、 遗传性凝血因子ⅩⅢ缺乏、遗传性抗凝血 酶Ⅲ缺乏症、获得性维生素K依赖性凝血 因子异常、严重肝病引起获得性凝血因子 异常、播散性血管内凝血、老年人播散性 血管内凝血、产科播散性血管内
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相关检查： 全血还原黏度、全血比黏度、纤维蛋白肽 Bβ1～42、α2-纤溶酶抑制抗原、纤维蛋 白肽A、活化部分凝血活酶时间（APTT）。
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凝血四项标准操作程序
凝血四项标准操作程序（SOP）实验室名称项目编号制定日期安徽济民肿瘤医院临检室凝血四项标准操作程序（SOP）2014年月日【测试项目】PT凝血酶原时间APTT活化部分凝血活酶时间FIB纤维蛋白原TT凝血酶时间【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报述人员批准签字：专业主管、科主任。
【适用范围】本产品适用于检测凝血因子。
【操作步骤】1、使用1：9枸橼酸钠抗凝管采血2ML，离心速度为3000转/分，10分钟取用上层血浆。
2、用加珠器在每个样品杯中放一粒钢珠，把样本杯置于预温槽内。
3、进入主菜单，用光标键移动光标，选择“测试”，按键“确认”，进入实验菜单。
4、将试剂放于相应位置，预温孔或室温孔。
5、将标本加入样品杯（PT50ul，APTT50ul,FIB20ul血浆加180ulFIB稀释液再取100ul，TT100ul）按预温槽相应的ABCD键，计时启动。
6、当达到预温时间时，发出嘟嘟声通知操作者，将样品杯从预温槽中移至测试槽中，加入试剂（PT100ul，APTT50ul氯化钙，FIB100ul，TT100ul）进行测试。
7、使用联动加样器时，加试剂的同时，仪器自动启动计时器开始计时。
8、实验完成，记下各结果。
【维护与保养】1，维护和保养方法保持清洁，特别是测试孔内的清洁尤为重要，严禁有异物进入。
防止受潮，腐蚀，远离强电磁场干扰源。
应使用干燥的软布进行仪器表面的清洁，不得使用强酸或强碱消毒剂擦拭仪器表面。
仪器应放置在平稳的工作台面上，不得摇晃与振荡。
避免阳光直晒，远离强热物体。
电源电压：220V,频率：50HZ，如当地电压不稳定，应使用稳压电源。
输入功率：不大于100VA(W),不与大功率电器共线并用。
熔断器的更换：当用户更换熔断器内的保险管时，应先关闭本系统，拔下电源线，并严格按熔断器座旁标记的规格型号进行更换（熔断器规格：2A/250V/20mm）仪器内△标记警告用户：仪器装有加热装置，保持设定的恒温+℃，请不要在通电情况下触及。
凝血四项操作方法
凝血四项操作方法凝血四项是一种常用的血液检查项目，用于评估出血和血液凝聚功能。
其包括四个指标：凝血酶原时间（PT），活化部分凝血活酶时间（APTT），纤维蛋白原（FIB）和血小板计数（PLT）。
操作方法如下：1. 凝血酶原时间（PT）：- 准备一根清洁的皮肤穿刺器、一支无菌试管和一根无菌的塑料吸管。
- 用皮肤穿刺器抽取适量的患者静脉血样。
- 将血液样本滴入无菌试管中。
- 在试管中加入适量的凝血酶原时间试剂，并迅速混匀。
- 将试管放入恒温水浴中，在37摄氏度下孵育一定时间后，观察凝血的时间。
2. 活化部分凝血活酶时间（APTT）：- 准备一根清洁的皮肤穿刺器、一支无菌试管和一根无菌的塑料吸管。
- 用皮肤穿刺器抽取适量的患者静脉血样。
- 将血液样本滴入无菌试管中。
- 在试管中加入适量的活化部分凝血活酶时间试剂，并迅速混匀。
- 开始计时，同时观察试管中血液凝聚的时间。
3. 纤维蛋白原（FIB）：- 准备一根清洁的皮肤穿刺器、一支无菌试管和一根无菌的塑料吸管。
- 用皮肤穿刺器抽取适量的患者静脉血样。
- 将血液样本滴入无菌试管中。
- 在试管中加入适量的纤维蛋白原试剂，并迅速混匀。
- 观察试管中血液中纤维蛋白原的凝聚情况。
4. 血小板计数（PLT）：- 准备一根清洁的皮肤穿刺器、一支无菌试管和一根无菌的塑料吸管。
- 用皮肤穿刺器抽取适量的患者静脉血样。
- 将血液样本滴入无菌试管中。
- 使用血小板计数仪具体测量血液中的血小板计数。
需要注意的是，以上方法仅为一般操作流程，具体操作需根据实验室设备和试剂的要求进行。
在操作过程中需要保持操作无菌、准确掌握试剂用量、注意操作时间等，以确保检测结果的准确性。
此外，还需要合理的样本采集、保存和处理，以确保血液样本的完整性和稳定性。
最后，操作完毕后要对操作用具进行适当的处理和清洁，以防止交叉感染的发生。
凝血四项解读护理课件
Fbg升高或降低的护理处理
要点一
总结词
要点二
详细描述
Fbg是纤维蛋白原，其升高或降低可能提示凝血系统异常 或纤溶系统异常。
对于Fbg升高，应警惕血栓形成的风险，加强监测，并采 取预防措施，如适当运动和调整饮食。对于Fbg降低，应 观察患者是否有出血症状，如皮肤瘀斑、牙龈出血等，并 注意避免创伤和手术。同时，补充相关凝血因子，如纤维 蛋白原酶等，以促进凝血。
凝血四项解读护理课 件
目 录
• 凝血四项检查介绍 • 凝血四项检查的指标解读 • 凝血四项检查的护理注意事项 • 凝血四项检查异常的护理处理 • 凝血四项检查的护理案例分享
01
凝血四项检查介绍
凝血四项检查的定义
凝血四项检查是指通过实验室检测，对血液凝固机制中的四个关键指标进行评估 ，以了解患者的凝血功能状况。
详细描述
Fbg增高常见于急性感染、损伤、恶性肿瘤等；Fbg减低则常 见于DIC、消耗性凝血障碍等。
TT（凝血酶时间）解读
总结词
凝血酶时间是反映纤维蛋白原转化为纤维蛋白的时间，正常值约为10-16秒。
详细描述
TT延长常见于DIC、肝素增多等；TT缩短则常见于高凝状态、血栓性疾病等。
03
凝血四项检查的护理注意事项
采血前的护理准备
01
02
03
评估患者情况
了解患者的病情、用药情 况、家族史等，评估采血 风险。
告知患者注意事项
向患者说明凝血四项检查 的必要性和注意事项，消 除患者的紧张情绪。
准备采血器材
确保采血器材的清洁、干 燥、无菌，准备好足够的 采血管和采血针。
采血过程中的护理要点
选择合适的采血部位
一般选择肘静脉或股静脉，确 保血管明显、充盈良好。
检验科凝血四项检验操作规程
检验科凝血四项检验操作规程
全血凝固时间检验（CT）
【标本】
静脉取血3ml。
【方法与操作】
试管法、硅管法操作参见《全国临床检验操作规程》（第二版）。
【附注】
1.静脉取血要一针见血，尽量减少组织液和空气混入。
2.水浴箱温度要恒定，过高或过低，可影响结果。
活化部分凝血活酶时间测定（APTT）
【标本】
自静脉取血，用109mmol/L枸椽酸钠作1:9抗凝。
【试剂】
市售成套试剂。
【方法与操作】
按试剂及有关仪器说明书要求进行。
【附注】
1.标本应及时检测，最迟不超过2h。
2.分离血浆应在3000r/min，离心10min。
3.本试验较试管法全血凝血时间敏感，能检出因子Ⅷ：C＜25％轻型血友病。
血浆凝血酶原时间测定（PT，一期法）
【标本】
静脉血1.8ml，用109mmol/L枸椽酸钠0.2ml抗凝。
【试剂】
1.组织凝血活酶浸出液；
2.0.025mol/LCaCl2液；
【方法与操作】
见《全国临床检验操作规程》（第二版）。
【附注】
1.采血后宜在1h内完成，置冰箱4℃保存,不应超过4h，-20℃下可放置2周，-70℃可放置6个月。
2.水温箱控制在37℃±1℃，过高过低均影响结果。
简易凝血活酶生成试验（STGT）
【标本】
取全血0.04ml加5ml蒸馏水，混匀，即成溶血液，备用。
【方法与操作】
见《全国临床检验操作规程》（第二版）。
凝血四项操作规程
血浆凝血酶时间测定（TT）
• 方法原理：在凝血酶作用下，待检血浆中 纤维蛋白原转变成纤维蛋白，使血浆浊度 及粘稠度增加直至凝固。 • 临床意义：延长，见于肝素增多或者类肝 素抗凝物质存在、纤维蛋白原产物增多及 弥散性血管内凝血、低纤维蛋白原血症； 缩短，见于高纤维蛋白原血症。
血浆D-二聚体测定（DD）
血浆活化部分凝血活酶时间测定 （APTT）
• 方法原理：用部分凝血活酶代替血小板膜磷脂， 为凝血提供催化表面。用激活剂激活12、11凝血 因子。待检血浆中加入足量的激活剂、部分凝血 活酶悬液和钙离子用来启动内源凝血系统来形成 纤维蛋白，使血浆浊度、粘稠度增加直至凝固。 • 临床意义：延长，见于内源凝血系统因子（12、 11、10、9、8、5、2、1）先天性减少、缺乏， 纤溶亢进、维生素K缺乏症、严重肝脏疾病及血 中抗凝物质增加；缩短，见于先天性因子5增多、 口服避孕药和血栓形成性疾病。（APTT是监测肝 素治疗剂量的首选指标）
血浆凝血酶原时间测定（PT）
• 方法原理：待检血浆加入过量组织凝血酶和适量的钙离子， 使凝血酶原转变为凝血酶。凝血酶激活纤维蛋白原转变成 纤维蛋白，纤维蛋白的形成使得血浆的浓度、稠度增加直 至凝固。 • 方法：光学法（通过凝固血浆对光散射或透射产生的改变 来测定）和磁珠法（通过测试槽两侧独立线圈产生的磁场， 使特制的小铁球来回恒定摆动的振幅改变进行测定） • 临床意义：PT时间延长，先天性见于2、5、7、10凝血因 子缺乏症和低纤维蛋白原血症。获得性见于弥散性血管内 凝血、原发性纤溶症、维生素K缺乏症、肝脏疾病以及口 服抗凝物质（口服抗凝药进行抗凝治疗患者PT最佳延长 为INR2~3。
• 方法原理：待测标本中加入含抗D-二聚体单克隆 抗体的乳胶微粒子试剂，使标本中的D-二聚体与 抗D-二聚体形成抗原-抗体乳胶微粒子复合物，复 合物的聚集使反应液浊度增加，而浊度高低与标 本中的D-二聚体含量成正比。通过透射比浊法测 定加入乳胶试剂后吸光度改变与校准品的比较得 到其含量。 • 临床意义：1，血栓前状态，血栓性疾病和弥散性 血管内凝血时，DD含量显著增高。是诊断弥散性 血管内凝血的重要依据！2，DD是鉴别继发性纤 溶（升高）与原发性纤溶（正常）的重要依据。3， 溶栓治疗时，DD升高表明溶栓治疗有效。
凝血四项PowerPoint演示文稿
凝血 四项
1.活化部分凝血活酶时间（APTT）：
主要反映内源性凝血系统状况，常用于监测肝素用量。
2.凝血酶原时间（PT）：
主要反映外源性凝血系统状况，其中INR常用于监测口服抗凝剂。
3. 纤维蛋白原（FIB）：主要反映纤维蛋白原的含量。
4. 凝血酶时间（TT）：主要反映纤维蛋白原转为纤维蛋白的时间。 1
APPT ：测定值较正常对照延长超过10s以上，才有病理意义。
增高：最常见疾病为血友病，还见于血浆因子Ⅷ、因子Ⅸ
和因子XI水平减低：如血友病A、血友病B及因子XI缺乏症。
降低：见于高凝状态：促凝物质进入血液及凝血因子的活性增高等。
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2. 凝血酶原时间（PT）
凝血酶原时间（PT）主要反映外源性凝血是否正
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4. 凝血酶时间（TT）
增高：血浆纤维蛋白原减低或结构异常 见于纤溶亢进期，低纤维蛋白原血症，临床应用肝素，或在肝 病、肾病及系统性红斑狼疮时的肝素样抗凝物质增多；
肝素作用：
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常。
原理: 是在抗凝血中，加入足够量的组织凝血活酶（组织因
子，TF）和适量的钙离子，满足外源性凝血条件，从加入
钙离子到血浆凝固所需的时间即为PT
PT是反映肝脏合成功能、储备功能、病变严重程度及预后
凝血酶原时间（PT）
PT延长：
• 先天性凝血因子缺乏：如凝血酶原（因子Ⅱ）、因子Ⅴ、因子 Ⅶ、因子Ⅹ及纤维蛋白原缺乏。
凝血 机制
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1. 活化部分凝血活酶时间（APTT）
APPT主要反映内源性凝血是否正常。 原理: 37℃条件下，以白陶土激活Ⅻ，以脑磷脂（部分凝血 活酶）代替血小板第三因子，在Ca2+参与下，观察血浆凝 固所需的时间，即为APPT。 APPT是内源凝血系统较敏感和最为常用的筛选试验。 。
凝血四项操作规程
临检室作业指导书版本/修订号；1/0主题内容凝血四项操作规程生效日期：20150101 页码；第 1页共5页凝血四项操作规程1.目的规范凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）的测定。
2.实验原理凝固法原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂后，采用波长为660nm 的光照射样本。
凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。
从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method法求得血液凝固时间。
3.标本要求3.1.标本准备：采用塑料采血管或硅化玻璃注射器静脉采血，针头必须为21号以上，儿童可用23号。
采血技术熟练，采血时止血带不可束缚过紧，并且以1分钟完成为宜，最多不宜超过3分钟以免某些凝血因子及纤溶因子活化。
3.2.抗凝剂选择：以109mmol/L枸椽酸钠溶液为佳，血与抗凝剂按9：1混合。
建议用已加有抗凝剂的硅化真空采血管。
也可用带盖塑料管或硅化玻璃管，但应保证血与抗凝剂的比例正确。
3.3.收到血标本后应尽快离心分离血浆，并尽快测量，全血储存在4-8℃不应超过2小时，室温下富含血小板血浆可存放3小时，去血小板血浆可存放2小时；4小时内不能测定的血浆应冷藏；不要把血浆置于37℃条件下超过10分钟。
应了解不同存放温度和时间对各种凝血因子活性检测的影响。
4.材料4.1.试剂的选择一方面要根据所用检测仪器，例如：光电检测法的凝血仪不宜用透光度差的试剂；另一方面要根据实验试剂对疾病的敏感性，例如APTT试剂中所用活化剂不同（可用白陶土、硅藻土和鞣花酸），该试剂对肝素、凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ缺乏及狼疮样抗凝物敏感性不同，所以需根据检测项目来选择不同活化剂。
(例如常用的APTT试剂的活化剂，以白陶土对凝血因子敏感，硅土对因子及肝素均敏感，鞣花酸对狼疮样抗凝物敏感性较强.PT试剂的选择也一样,例如对口服抗凝药物(华法令)检测应选择ISI与1.0接近的PT试剂。
凝集试验(四项)PPT课件
注意事项
❖ 玻片应洁净、干燥、中性，以防止和减少非 特异性凝集。
❖ 室温低于10℃时，易出现冷凝集而造成假阳 性结果。
间接凝集试验
❖ 将可溶性抗原（或抗体）吸附于一种与免疫无关的、适当的 大小的载体微粒表面，再与相应抗体（或可溶性抗原）在适 宜条件下相互作用，经一定时间出现肉眼可见的凝集现象， 这种方法称为间接凝集试验，又称被动凝集试验。
❖ 如将抗原包被于载体微粒表面以检测抗体，称为（正向）间 接凝集试验；
❖ 如将抗体吸附于载体微粒表面以检测抗原，则称为反向间接 凝集试验。
❖ 实验室常用的载体有红细胞、胶乳颗粒、活性碳、SPA菌体 等，其中以红细胞为载体的间接凝集试验称为间接血凝试验， 以胶乳为载体的间接凝集试验称为间接胶乳凝集试验。
❖ 间接凝集反应 正向间接凝集试验－－测RF 反向间接凝集试验－－测HBsAg 间接凝集抑制试验－－测HCG 协同凝集反应
直接凝集试验--测ABO血型
原理（玻片法）
❖ 天然的颗粒性抗原（如红细胞，白细胞，细 菌等）与相应抗体在适宜条件下反应，出现 肉眼可见的凝集物，称为直接凝集反应。玻 片法属于定性试验。
间接凝集抑制试验—测HCG
步骤
❖ 将阳性尿、阴性尿（用生理盐水代替）、待检尿液 分别滴一滴在玻片上
❖ 然后分别滴一滴诊断血清（用HCG免疫动物得到的 抗血清），分别用牙签搅匀，手持玻片，前后旋转 摇动1min
❖ 在上述三滴上各加一滴胶乳抗原，用牙签混匀，在 轻摇2～3min，观察结果。
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
最新整理凝血四项检查说课讲解
凝血四项检查APTT【检验原理】37℃下，在待检血浆中加入APTT试剂，即以脑磷脂作为血小板的替代物加入贫血小板血浆中，在Ca2+的参与下，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝块，测定凝固所需要的时间，即为待测血浆的APTT。
【样本制备】1.采血与抗凝：采血后立即与抗凝剂充分混合，血液与抗凝剂（0.109mmol/L枸橼酸钠）比例为9：1。
2.离心：抗凝血以2500xg离心10分钟，用微量移液器吸出待测血浆。
3.保存：血浆样本应立即测试。
22～24℃条件下保存，应2小时内测定，2～4℃条件下保存，应3小时内测定。
【检验方法】1.仪器预热：开机，按照仪器使用说明书预热，达到要求稳定温度，进入正常工作状态。
2.试剂配制：严格按照标示量加入蒸馏水复溶试剂，将试剂瓶直立在18～25℃中静置30分钟，使用前轻轻旋转试剂瓶至完全溶解，勿剧烈振摇。
氯化钙用前应放入仪器37℃预温槽。
3.正常质控血浆制备：按照质控血浆试剂盒使用说明书。
4.测定：以半自动高性能血凝仪为例：①将测试杯置于预温槽中，用加珠器在每个测试杯中放一粒钢珠。
②试剂放相应位置，37℃预温，需混匀放搅拌子。
③将待测血浆100μl（患畜或者质控血浆）加入测试杯，再将APTT试剂100μl加入测试杯，混匀，启动预温时间计时，37℃，5分钟，将测试杯从预温槽移至测试槽。
④使用联动加样器加入氯化钙100μl，仪器自动启动计时器开始计时并自动打印结果。
【正常值参考范围】犬：10.0～18.0秒，建议各实验室建立自己的正常值参考范围。
【检验结果解释】APTT延长见于ＦⅧ、ＦⅨ、ＦⅪ血浆水平减低。
APTT缩短见于高凝状态、血栓性疾病。
口服避孕药会影响检测结果。
PT【检验原理】在待检血浆中加入过量的组织凝血活酶和钙离子，使凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶使纤维蛋白原转变为纤维蛋白凝块，测定凝固所需要的时间，即为待测血浆的凝血酶原时间（PT）。
PT与血浆中的外源性凝血因子含量呈负相关。
凝血操作规程意外事处理
凝血操作规程意外事处理
《凝血操作规程意外事处理》
在医疗操作中，难免会遇到一些意外事故，尤其是在凝血操作过程中。
在这种情况下，及时的应对措施十分关键，可以有效地减轻事故的影响或避免事故的进一步恶化。
下面我们将介绍一些凝血操作规程意外事处理的基本流程。
首先，当发生凝血操作意外事故时，立即停止操作，确保患者的安全。
然后将患者转移到安全的地方，并迅速进行伤情评估。
在评估的过程中，要尽可能减少患者的出血量，并保持其生命体征的稳定。
其次，通知医院的急救团队和相关医护人员，为患者寻求及时的治疗和救助。
在等待急救团队到达之前，可以根据患者的伤情进行简单的急救处理，例如进行止血护理或给予输液。
同时，及时记录事故发生的情况、处理的过程和结果，并向相关部门进行报告。
这样一来可以为后续的处理和跟踪提供重要的参考信息，并对类似事故的再次发生进行预防和管理。
最后，在处理完凝血操作意外事故后，要进行事后的评估和总结，找出事故的原因和具体的处理不当之处，并对相关的操作规程进行修订和完善，以避免类似的事故再次发生。
在医疗操作中，特别是在凝血操作过程中，任何意外事故都可能对患者的生命健康造成严重的影响，因此要时刻保持警惕，
严格遵守操作规程，减少操作风险，确保患者的安全。
同时，如果不幸遇到意外事故，要迅速、有效地应对，最大限度地减少事故带来的不良影响。
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临检室作业指导书版本/修订号；1/0主题内容凝血四项操作规程生效日期：20150101 页码；第 1页共5页凝血四项操作规程1.目的规范凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）的测定。
2.实验原理凝固法原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂后，采用波长为660nm 的光照射样本。
凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。
从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过Percentage Detection Method法求得血液凝固时间。
3.标本要求3.1.标本准备：采用塑料采血管或硅化玻璃注射器静脉采血，针头必须为21号以上，儿童可用23号。
采血技术熟练，采血时止血带不可束缚过紧，并且以1分钟完成为宜，最多不宜超过3分钟以免某些凝血因子及纤溶因子活化。
3.2.抗凝剂选择：以109mmol/L枸椽酸钠溶液为佳，血与抗凝剂按9：1混合。
建议用已加有抗凝剂的硅化真空采血管。
也可用带盖塑料管或硅化玻璃管，但应保证血与抗凝剂的比例正确。
3.3.收到血标本后应尽快离心分离血浆，并尽快测量，全血储存在4-8℃不应超过2小时，室温下富含血小板血浆可存放3小时，去血小板血浆可存放2小时；4小时内不能测定的血浆应冷藏；不要把血浆置于37℃条件下超过10分钟。
应了解不同存放温度和时间对各种凝血因子活性检测的影响。
4.材料4.1.试剂的选择一方面要根据所用检测仪器，例如：光电检测法的凝血仪不宜用透光度差的试剂；另一方面要根据实验试剂对疾病的敏感性，例如APTT试剂中所用活化剂不同（可用白陶土、硅藻土和鞣花酸），该试剂对肝素、凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ缺乏及狼疮样抗凝物敏感性不同，所以需根据检测项目来选择不同活化剂。
(例如常用的APTT试剂的活化剂，以白陶土对凝血因子敏感，硅土对因子及肝素均敏感，鞣花酸对狼疮样抗凝物敏感性较强.PT试剂的选择也一样,例如对口服抗凝药物(华法令)检测应选择ISI与1.0接近的PT试剂。
)血栓与止血检验应尽可能选用仪器生产厂家推荐的配套试剂，并选择使用与仪器原理相匹配的试剂。
4.2.正常对照血浆：正常对照血浆有商品供应，多为冻干品，也可自制，要求采集20份以上男女各半，年龄在18-25岁之间的健康个体，删除服药者，须在平静状态下采血，血液经抗凝离心后分离血浆。
取等量的各份个体血浆进行混匀，然后分装小瓶，冻存于-80℃或冷冻干燥备用。
4.3.参比血浆或称标准血浆（质控血浆）：为了使检测结果在同一实验室的不同时期或不实验室间具有可比性，就要使用标准品。
5.仪器与试剂5.1仪器：深圳锦瑞CA-54半自动化血凝分析仪。
5.2试剂：上海太阳生物技术有限公司。
5.3仪器安装后应对其主要性能参数进行评价，内容包括精密度、线性范围、可比性、抗干扰试验试验等。
评价结果应在仪器说明书标示范围之内。
临检室作业指导书版本/修订号；1/0主题内容凝血四项操作规程生效日期：20150101页码；第 2 页共5 页5.4 仪器在测定常规标本前应使用配套的校正物建立标准曲线，在更换新批号的试剂或仪器维修后，要重新建立标准曲线。
无校正物的测定项目，可伤使用配套的定值质控物进行测定，测定结果应在定值质控物标示的允许范围内。
5.5 每台仪器上使用的凝血活酶试剂应有特定的ISI（国际敏感指数）值，这样才能使患者INR（国际标准化凝血酶原时间）比值的结果有可比性。
自动终点测定目前得到广泛应用，仪器有半自动和全自动两种类型。
仪器应用的检测系统有化学的、机械的或电子等，形成凝块所需时间也有差异。
对每种方法都应建立自己正常参考范围，一些光学系统进行测定的仪器对血脂高、溶血、黄疸血浆不易得出精确的检测结果。
6.操作步骤6.1 PT 检测步骤6.1.1 打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，然后按“1”进入“测量标本”子菜单。
6.1.2 设置测试项目和病人编号：按”1“键设置测试项目，按“←”“→”选择“PT”，确认请按“确认/ENTER”键，取消请按“菜单/MENU”键。
按“2”键设置病人编号，直接输入病人号后，确认请按“确认/ENTER”键，取消请按“菜单/MENU”键。
6.1.3 将PT应用试剂根据测试样本多少取适量于试剂预温位预热至37C6.1.4 加血浆20ul于空比色杯内（样本应加入杯子底部，不能有气泡），置于测试通道或预温位预温2分钟。
6.1.5 当预温到时后，将已预温的比色杯放入测试通道内，按“通道1”键，屏幕提示“请加入试剂”时，用联机加样枪吸取40ulPT工作试剂加入比色杯中，当加样器按到底后松开时仪器自动开始计时检测，最后显示和打印测量结果。
6.1.6质控品、正常对照血浆：操作方法同样品。
6.1.7关机：按“菜单/MENU”键，退回到主菜单后即可关机。
6.2 APTT检测步骤6.2.1 打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，然后按“1”进入“测量标本”子菜单。
6.2.2 设置测试项目和病人编号：方法同6.1.26.2.3 加血浆20ul于空比色杯内，再取APTT试剂20ul加入比色杯内，混匀后，置于测试通道或预温位预温3分钟。
6.1.4 当预温到时后，将已预温的比色杯放入测试通道内，按“通道3”键，屏幕提示“请加入试剂”时，用联机加样枪吸取20ul CaCl2（CaCl2预温3分钟）加入比色杯中，当加样器按到底后松开时仪器自动开始计时检测，最后显示和打印测量结果。
6.1.5 质控品、正常对照血浆：操作方法同样品。
6.1.6 关机：按“菜单/MENU”键，退回到主菜单后即可关机。
6.3 TT检测步骤6.3.1 打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，然后按“1”进入“测量标本”子菜单。
临检室作业指导书版本/修订号；1/0主题内容凝血四项操作规程生效日期：20150101页码；第 3 页共5 页6.3.2 设置测试项目和病人编号：方法同6.1.26.3.3 加血浆30ul于空比色杯内，置于测试通道或预温位预温2分钟。
6.1.4 当预温到时后，将已预温的比色杯放入测试通道内，按“通道4”键，屏幕提示“请加入试剂”时，用联机加样枪吸取30ul 已预温好的TT试剂加入比色杯中，当加样器按到底后松开时仪器自动开始计时检测，最后显示和打印测量结果。
6.1.5 质控品：操作方法同样品。
6.1.6 关机：按“菜单/MENU”键，退回到主菜单后即可关机。
6.3 FIB检测步骤6.3.1 打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，然后按“1”进入“测量标本”子菜单。
6.3.2 设置测试项目和病人编号：方法同6.1.26.3.3 加血浆40ul于空比色杯内，置于测试通道或预温位预温3分钟。
6.1.4 当预温到时后，将已预温的比色杯放入测试通道内，按“通道2”键，屏幕提示“请加入试剂”时，用联机加样枪吸取20ul 已预温好的FIB试剂加入比色杯中，当加样器按到底后松开时仪器自动开始计时检测，最后显示和打印测量结果。
6.1.5 质控品：操作方法同样品。
6.1.6 关机：按“菜单/MENU”键，退回到主菜单后即可关机。
7.质量控制7.1质控品跟随常规标本一起测定，意即质控品必须与患者标本在同样条件下进行检测，建立质控图信息后，以判断结果是否在控。
7.2为了使检测结果在同一实验室的不同时期具有可比性，必须使用标准品或参比血浆进行室内质量控制。
8.参考区间PT：10-14秒。
待检者的测定值较正常对照延长3秒以上有临床意义。
APTT：22-38秒。
待检者的测定值较正常对照延长10秒以上有临床意义。
TT：10-16秒FIB：200-400mg/dl9.注意事项9.1血栓与止血实验的质量控制和标准化是实验结果可靠性、可比性的基本保证。
其实验项目繁多，现阶段大部分是应用形成可见的纤维蛋白丝为终点。
这种方法所采用的均为生物性材料，其凝血活性或抗凝、纤溶活性可随时间、温度、生理变化、个体差异而变化，故其质量控制更为重要。
9.2 要重视检测前的质量控制，包括合理的标本采集和处理；试剂的选择；器材、仪器、质控品、正常对照品的质量保证。
9.3 实验操作时应警惕许多实验误差来源于技术错误。
在实验技术、试剂、温度及PH值上微小的变化都有导致试验结果明显的变化。
例如，在一期法PT测定时孵育时间和温度应严格控制。
血浆绝不能在37℃放置超过10分钟；凝血活酶放置时间也不能超过说明书所规定的期限。
昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号；SZKL-LJ-03 版本/修订号；1/0主题内容凝血四项操作规程生效日期：20150101页码；第 4 页共5 页血浆凝固主要是酶催化的反应。
PH环境和溶液离子强度在实验过程中要严格控制，反应混合物PH必须处于7.2-7.4之间.每次APTT实验时,活化部分凝血活酶试剂和血浆混合物的孵育时间决定了APTT试验中接触活化的量,所以其混合的时间和技术对检测结果影响很大.9.4 实验前应检查血浆是否有溶血、黄疸、脂血和出现凝块。
红细胞膜含有磷脂，溶血标本具有与血小板第3因子（磷脂）相似的凝血活性，能缩短溶血血浆的APTT值。
9.5 标本中如出现凝块，无论多小的凝块均会影响实验结果。
9.6 APTT、TP需去血小板血浆，一般3000r/min离心10min后分离血浆。
10.临床意义：10.1 PT检测的临床意义10.1.1 PT延长a.外源凝血系统的因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ和纤维蛋白原减低，如先天性某因子缺乏症和低（无）纤维蛋白原血症，但均很少见，获得性的见于DIC、原发性纤溶、维生素K缺乏症、肝脏疾病等。
b.血循环中抗凝物质增加，如肝素或FDP增多等。
10.1.2 PT缩短口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。
10.1.3 用于香豆素类等口服抗凝剂的监控10.1.3.1一般认为以维持PT值在参考值的2倍左右（1.3—2.5倍）即25—30s，或PT R为1.3—1.5（最大不超过2）为宜。
10.1.3.2 PT%应控制在40%以上，减低到40%有出血倾向。
10.1.3.3不同情况下口服抗凝药治疗的最佳抗凝强度时INR的范围：a.术前两周或术中口服抗凝药，INR为1.5—3.0；b.原发或继发静脉血栓的预防，INR为2—3；c.活动性静脉血栓、肺梗塞、复发性静脉血栓的预防，INR为2—4；d.动脉血栓栓塞的预防，心脏换瓣术后，INR为3—4.5。
10.2 APTT检测的临床意义10.2.1.受检者的测定值较正常对照延长超过10s以上才有病理意义。
10.2.2 对内源凝血途径因子（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ）缺乏较CT敏感（血小板异常不影响APTT）能检出Ⅷ：C小于25%的轻型血友病。
对凝血酶原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感，故APTT延长的最常见疾病为血友病。
此时可进一步做纠正试验，即于患者血浆中加入1/4量的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清（试剂参见凝血酶原消耗试验的纠正试验），再做APTT，如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正，则为因子Ⅷ缺乏；如吸附血浆不能纠正，其余两者都能纠正，则为因子Ⅸ缺乏；如三者都不能纠正，则为病理性循环抗凝物质。