沉默S100A4基因对人膀胱癌T-24细胞生物学特性的影响

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S100A4蛋白的生物学功能研究进展

S100A4蛋白的生物学功能研究进展尚禹东;杨艳玲;赵海平;李春义【摘要】S100A4 belongs to S100 protein family ,which is a sort of calcium binding protein with EF double helix domain .S100A4 expresses in kinds of tumor and stem cells of human rather than normal somatocytes .Related investigation suggested that the expression of S 100A4 is relative to paraplasm of cells and development of tumor .S100A4 also involves in the invasion and metastasis of tumor cell .Besides ,it can promote the formation of blood vessel in tumor region .Our research group found that S100A4 presents in cervinus antlerogenic periosteum (AP) and pedicle periosteum(PP) tissues .The processes of proliferation ,growth and differentiation are controlled strictly from velvet stem cell to antler with regu-lar shape ,but without abnormal invasion and metastasis ,which are different from tumor cells doing .Antler is the unique organ regenerating in-termitly among mammals ,which attracts more and more attention to the mechanism of regeneration .As a multiple functional protein highly ex-pressing in rapid proliferative cells ,S100A4 brings us a new research direction for development and regeneration mechanism ofantler .%S100A4是S100蛋白家族成员之一，是一种具有EF双螺旋结构域的Ca2＋结合蛋白。

shRNA沉默基因DNMT1的表达对膀胱癌T24细胞增殖与凋亡的影响

ＵｉｅｓｙｏｃｅｃａｄＴｃｎｌｇＷｕａ３０２ｎｖｒｉｆＳｉｅｎｅｏｏｙ，ｈｎ４０２ｔｎｈ
ＡｂｔａｔＯｂｅｔｖＴｏｉｖｓｉａｅｔｅｉｆｕｎｅｆｓｌｎｉｇＤＮＭＴ１ｇｎｙＲＮＡｔｒｅｅｃ（ｓｒｃｊｃｉｅｎｅｔｔｈｌｅｃｓｏｉｃｎｇｎｅｅｅｂｉｅｆｒｎｅＲＮＡｉｎｔｅｐｏｉｒ — ｎ）ｏｈｒｌｅａｆ
干扰序列的质粒）ｐｈＡ— ＮＭＴ１；规培养膀胱癌Ｔ２及ｓＲＮＤ组常４细胞株，脂质体Ｌｐｆｃａｎ００将构建成功的重用ｉｅｔｍｉｅ２０ｏ
组质粒ｐｈＮＡＤＮｓＲ — ＭＴ１染进入Ｔ２转４细胞，后进行ＲＴＰＲ、ｅｔｒｌ检测各组Ｄ然 — ＣＷｓｅｎｂｏｔＮＭＴ１ｍＲＮＡ及蛋白质水平
ｓＲＮＡ沉默基因ＤＮＭＴ１的表达对膀胱癌ｈＴ２４细胞增殖与凋亡的影响＊
张士龙曾甫清彭世波董继华
泌尿外科
廖贵益
汪良
４０２３０２
华中科技大学同济医学院附属协和医院
。中心实验室，汉武
第３卷第２期第１５页８６
２００９年４月
华中科技大学学报（医学版）
ＡｃａＭｅｎｖＳｉｃｎｌＨｕｚｏｇｔｄＵｉｃＴｅｈｏａｈｎ
Ｖｏ．８Ｎｏ２Ｐ１５１３．．６

膀胱移行细胞癌中S100A4蛋白表达及意义

癌组织中Ｓ１００Ａ４蛋白水平明显明显高于癌旁膀胱组织Ｐ＜０．０５，且在膀胱移行细胞癌组织中的表达与肿瘤病理分级
Ｐ＜０．０５、临床分期Ｐ＜０．０５呈正相关，与有无淋巴结转移相关Ｐ＜０．０５。结论ｓ１０ｏＡ４蛋白在膀胱移行细胞癌组织中
ｏｆｔｈｅｂｌａｄｄｅｒ（ＴＣＣＢ）ａｎｄｄｉｓｃｕｓｓｉｔｓｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅｉｎｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆＴＣＣＢ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ
＝Ｉｌ
ＪＩＡＮＧＸｉａｏ－ｌｅｉ，ＬＵＤ０ｎｇ，ＷＵＭｉｎｇ．ｈｕｉ，ｅｔａ１．ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＡｉｌｆｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮｏｒｔｈＳｉｃｈｕａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｍｉａｎｙａｎｇ，Ｓｉｃｈｔｕｍ
ｓｕｉｓｔｌ＇ｈｅｏｓｐｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＳ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｉｎｉｎＴＣＣＢａｎｄｎｏｎ・ｃａｎｃｅｒｏｕｓｔｉｓｓｕｅｓｗａｓ５５．３％（２１／３８）ａｎｄ０．Ｏ％（０／３８）ｒｅｓｐｅｃ－ｔｉｖｅｌｙ．ｒｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆＳ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｉｎｉｎＴＣＣＢｗｓａｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｉｎｎｏｎ－ｃａｎｃｅｒｏｕｓｔｉｓｓｕｅｓ（Ｐ＜０．０５），ａｔｔｈｅｓａｍｅｉｔ

S100A4基因在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

Ｉ］ＹｓｉａａＴｕｕａａＫｏａａｈＯ，ｔ．ｌｓｎｅｔｔｎ７ｏｈｋｗＴ，ｓｂｒｙＡ，ｂｙｓｉｅａＰａｍａｏｃｎｒｉｓ１ｃａｏ
ＬＵＤｏｇ．ｔｎｅ
（ｅａｔｅｔｆＵｏｏｙｔｅｉｔｆｌｅｏｐｔ，ｈｎｑｎＤｐｒｎｒｌ，ｒＡｆｉｄＨｓｉｌＣｏｇｉｍｏｇｈＦｓｉ￣ａｇＭｅｉａＵｉｒｉ）ｄｃｎｖｓｙｌｅｔ
作者介绍：东（９５）男，卢１７一，医师，士，硕
或抑制，而且全身毒副作用少，后５年生存率明术
庆【版社，０４３３叶｜２０．．９
显高于全身静脉用化疗药。
总之，中ＲＩ术ＡＣ可有效降低术中残留的癌细胞Ｋ一７ＶＧｉ６、ＥＦ的表达并降低癌细胞的活性术中ＲＩＡＣ操作简便，济，经不需要特殊设备，择性强，选药物集中，全身毒副反应小，因此可作为胃癌手术的重要辅助治疗手段，高手术的疗效，善病人提改
行上皮组织（．０）Ｒ００５。其中膀胱移行细胞癌组织中Ｓ０Ａ１０４基因的表达率随肿瘤分级、分期的增高及淋巴结转移而相应增高
（＜．）结论：１０４基因表达与移行膀胱癌分化有关，Ｐ００。５Ｓ０Ａ癌组织Ｓ０Ａ１０４基因有可能成为膀胱癌的一个新的肿瘤标记物；Ｓ０Ａ１０４基因差异表达与移行膀胱癌侵袭和转移明显相关，移行膀胱癌组织中Ｓ０Ａ１０４基因可望作为移行膀胱癌的病情发展及指导临床治疗的标记物之一。

ABCE1基因沉默对人膀胱癌 T24细胞增殖和迁移能力的影响

ABCE1基因沉默对人膀胱癌 T24细胞增殖和迁移能力的影响李强;王九江;罗水发;朱俊杰【摘要】目的：本实验通过沉默ABCE1基因在人膀胱癌T24细胞中的表达，探讨ABCE1基因对细胞的生长、细胞周期及迁移等方面的作用。

方法：设计及合成ABCE1的siRNA序列，LipofectamineTM 2000转染T24细胞。

采用RT-PCR和Western blot法检测基因沉默后ABCE1 mRNA和蛋白的表达情况，采用流式细胞术检测T24细胞周期。

并通过CCK-8增殖实验、划痕愈合实验和细胞侵袭实验评价沉默ABCE1基因对T24细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。

结果：沉默ABCE1基因48 h后， T24细胞ABCE1 mRNA及蛋白表达明显降低，差异有统计学意义。

T24的细胞周期被阻滞于G0／G1期，且S期的细胞数减少，差异有统计学意义。

与对照组和空白组相比，CCK-8增殖实验显示，实验组T24细胞的增殖受到明显抑制。

划痕愈合实验显示，实验组迁移能力显著下降，差异有统计学意义。

Transwell小室法示，实验组T24细胞的侵袭能力显著下降，差异有统计学意义。

结论：特异性干扰ABCE1基因表达可抑制人膀胱癌T24细胞的迁移能力，并抑制肿瘤细胞增殖，因此，ABCE1的siRNA序列可能成为治疗膀胱癌的有效靶点。

%AIM:To investigate the effect of small interfering RNA ( siRNA)-mediated ABCE1 knockdown on the survival, cell cycle and invasion of human bladder cancer cell line T24.METHODS:The siRNA against ABCE1 was constructed and transfected into the T24 cells with LipofectamineTM 2000.The expression of ABCE1 was detected by RT-PCR and Westernblot.Flow cytometry was used to detect the cell cycle.The effects of ABCE1 gene silencing on prolifera-tion, migration and invasion of T24 cells were evaluated by CCK-8 assay, wound-healing assay and Transwell invasion as-say, respectively.RESULTS: Compared with control group and blank group, the mRNA and protein levels of ABCE1 were significantly decreased in experimental group after transfected with ABCE1 siRNA.The cell cycle was arrested at G0/G1 phase and the cell number in S phase was decreased in the T24 pared with control group and blank group, the proliferation of T24 cells in experimental group was inhibited significantly, and the migration and invasion abilities of T24 cells in experimental group decreased significantly.CONCLUSION:Knockdown of ABCE1 gene may decrease migration, invasion and proliferation abilities in T24 cells.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】5页(P929-933)【关键词】膀胱癌;ABCE1基因;T24细胞;细胞增殖【作者】李强;王九江;罗水发;朱俊杰【作者单位】宁波明州医院泌尿外科，浙江宁波315000;宁波明州医院泌尿外科，浙江宁波 315000;宁波明州医院泌尿外科，浙江宁波 315000;宁波明州医院泌尿外科，浙江宁波 315000【正文语种】中文【中图分类】R730.23膀胱癌是我国临床泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，同时也是全身10大常见的肿瘤之一［1］。

siRNA靶向沉默TrkB基因对人膀胱癌细胞株T24生长和转移的影响及其分子机制

［摘要］目的研究ｓｉＲＮＡ靶向沉默酪氨酸激酶受休（Ｔｒｋ）Ｂ基因对人膀胱癌细胞株３＂２４生长和转移的影响及其分子机制。方法用ｓｉＲＮＡ敲低Ｔ２４细胞ＦｒｋＢ基因表达，通过ＭｒＩｒｒ法、软琼脂克隆形成试验、吖啶橙（ＡＯ）／溴乙锭（ＥＢ）双染色法、划痕试验、Ｆｒａｎｓｗｅｌｌ试验评价靶向沉默ＴｒｋＢ基因后膀胱癌Ｔ２４细胞的增殖及转移侵袭能力，并以Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测其磷脂酰肌醇３激酶（ＰＩ３Ｋ）一蛋白激酶Ｂ（Ａｋｔ）信号转导通路活性及：皮间质转化（ＥＭＴ）相关蛋白的表达水平。结果与ＮＴ—ｓｉＲＮＡ组相比，ｓｉＲＮＡ靶向沉默膀胱癌ｑ＇２４细胞ＴｒｋＢ基因后，其增殖能力、克隆形成能力、抗失巢凋亡能力、迁移及侵袭能力显著下降，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；在ＰＩ３Ｋ—Ａｋｔ信号转导通路及ＥＭＴ的相关蛋白中，Ｅ一钙黏蛋白（ｃａｄｈｅｒｉｎ）的表达水平明显提高，而ｐ－Ａｋｔ、Ｎ—ｃａｄｈｅｒｉｎ、波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ）、扭曲蛋白（Ｔｗｉｓｔ）、Ｓｎａｉｌ、Ｓｌｕｇ表达水平显著下降，差异均有统计学意义（均Ｐ＜０．０５）。结论ｓｉＲＮＡ靶ｒ口】沉默ＴｒｋＲ叮通过降低膀胱癌Ｔ２４细胞ＰＩ３Ｋ—Ａｋｔ信号转导通路的活性进而抑制ＥＭＴ，从而降低肿瘤细胞增殖，６乏转移侵袭能力
１材料和方法１．１材料（１）细胞株：人膀胱癌３＂２４细胞购自中国典型培养物保藏中心（ＣＣＴＣＣ）。（２）主要耗材及试剂：超低黏附培养板购自美国Ｃｏｍｉｎｇ公司；人重组脑源性神经营养因（ｒｈＢＤＮＦ）购自美国Ｒ＆Ｄ公司；．ｐｏｆｅｅｔａｍｉｎ２０００购自美国Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司；委托广州锐博生物科技有限公司设计和合成ｓｉＲＮＡＯｌｉｇｏ；一抗和二抗均购自美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司。１．２细胞培养将膀胱癌Ｔ２４细胞培养于含１０％胎牛血清（ＦＢＳ）的ＲＰＭＩ１６４０培养液，置于３７℃ 、５％ＣＯ，培养箱中培养，待细胞近９０％融合时用胰蛋白酶消化传代。１．３Ｔ２４细胞的ｓｉＲＮＡ转染ＴｒｋＢ（ＮＴＲＫ２）一ｓｉＲ— ＮＡ１：上游５一ＣＣＧＵＣＡＣＣＵＵＧＡＣＵＵＧＵＣＵ３ｑ＇一３，下游５一ＡＧＡＣＡＡＣＵＣＡＡＧＣＵＧＡＣＧＧＴＴ一３；ＴｒｋＢ（ＮＴＲＫ２）一ｓｉＲＮＡ２：上游５一ＣＣＡＣＧＡＡＣＡＧＡＡＧＵＡＡＵＧＡＴＦ一３，下游５－ｕＣＡｕｕＡＣｕｕＣｕＧｕｕＣＧｕＣＧＴＴ＿３；ＴｒｋＢ（ＮＴＲＫ一２）．ｓｉＲＮＡ３：上游５一ＧＣＧＣＵＵＣＡＧＵＧＧＵＵＣＵＡＵＡＴＦ一３，下游５一ｕＡｕＡＧＡＡｃＣＡＣｕＣＡＡＧＣＧＣＩＴＩＩ．３；阴性对照组：上游５．ＵＵＣＵＣＣＧＡＡＣＧｕＧＵｃＡＣＧｕ１Ｔｒ－３，下游５ＡＣＧＵＧＡＣＡＣＧＵＵＣＧＧＡＧＡＡＴＩ＇．３。按Ｌｉｐｏｆｅｅｔａｍｉ一

s100a4在结直肠癌组织及细胞系中的表达水平及与临床病理特征的相关性

ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００２－７３８６.２０１９.２４.００４论著Ｓ１００Ａ４在结直肠癌组织及细胞系中的表达水平及与临床病理特征的相关性刘伟㊀王勇㊀丁妍㊀马建亭作者单位:０５００１１㊀河北省石家庄市第三医院普外科(刘伟㊁马建亭)ꎻ河北省衡水市第四人民医院(王勇)ꎻ河北医科大学第四医院病理科(丁妍)通讯作者:马建亭ꎬ０５００００㊀河北省石家庄市第三医院普外科ꎻＥ￣ｍａｉｌ:７９３２２６１２＠ｑｑ.ｃｏｍ㊀㊀ʌ摘要ɔ㊀目的㊀探讨结直肠癌组织及细胞系中Ｓ１００Ａ４蛋白的表达水平以及与结直肠癌患者临床病理特征的相关性ꎮ方法㊀选择７０例结直肠患者患者作为研究对象ꎬ采用免疫组化法检测肿瘤组织和癌旁组织中Ｓ１００Ａ４蛋白的表达水平ꎬ采用实时荧光定量ＲＴ￣ＰＣＲ法测定Ｓ１００Ａ４在结直肠癌细胞系中的表达及Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ表达ꎻ分析其与年龄㊁性别等临床病理特征的相关性ꎮ结果㊀Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ在ＳＷ６２０㊁ＳＷ４８０㊁ＨＣＴ１１６㊁ＨＴ２９㊁ＬｏＶｏ㊁中均呈阳性ꎬ在ＬＳ１７４Ｔ中阴性ꎬ表明Ｓ１００Ａ４在多数结直肠癌组织细胞中均有所表达ꎻＳ１００Ａ４蛋白在结直肠组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(Ｐ<０.０１)ꎻＳ１００Ａ４蛋白表达及Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ水平与患者性别㊁年龄㊁部位无明显相关性(Ｐ>０.０５)ꎻ但与分化程度㊁浸润程度及淋巴结转移有相关性(Ｐ<０.０５)ꎮ结论㊀Ｓ１００Ａ４在结直肠癌组织及细胞系中均存在ꎬＳ１００Ａ４蛋白在结直肠癌细胞中的表达水平明显高于癌旁组织ꎬＳ１００Ａ４蛋白与结直肠癌的分化㊁浸润㊁转移呈相关性ꎬ是反映结肠癌恶性程度的生物学指标ꎬ可作为患者临床诊断和预后判断的参考ꎮʌ关键词ɔ㊀Ｓ１００Ａ４蛋白ꎻ结直肠癌ꎻ癌旁组织ʌ中图分类号ɔ㊀Ｒ７３５.３㊀㊀ʌ文献标识码ɔ㊀Ａ㊀㊀ʌ文章编号ɔ㊀１００２－７３８６(２０１９)２４－３６９９－０５ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＳ１００Ａ４ｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｃｅｌｌｌｉｎｅｓａｎｄｉｔｓｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｆｅａｔｕｒｅｓ㊀ＬＩＵＷｅｉ∗ꎬＷＡＮＧＹｏｎｇꎬＤＩＮＧＹａｎꎬｅｔａｌ.∗ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｅｎｅｒａｌＳｕｒｇｅｒｙꎬＴｈｅＴｈｉｒｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇＣｉｔｙꎬＨｅｂｅｉꎬＳｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００１１ꎬＣｈｉｎａʌＡｂｓｔｒａｃｔɔ㊀Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＳ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｃｅｌｌｌｉｎｅｓａｎｄｉｔｓｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ｓｅｖｅｎｔｙｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄａｓｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｂｊｅｃｔｓ.ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｕｍｏｒｔｉｓｓｕｅｓａｎｄａｄｊａｃｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ.ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳ１００Ａ４ｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳ１００Ａ４ｍＲＮＡｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｒｅａｌ￣ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＲＴ￣ＰＣＲ.ＭｏｒｅｏｖｅｒｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＳ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｉｎＳＷ６２０ꎬＳＷ４８０ꎬＨＣＴ１１６ꎬＨＴ２９ꎬＬｏＶｏａｎｄＬＳ１７４ＴꎬｈｏｗｅｖｅｒꎬｗｈｉｃｈｗａｓｎｅｇａｔｉｖｅｉｎＬＳ１７４ＴꎬｗｈｉｃｈｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔＳ１００Ａ４ｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｍｏｓｔｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ.ＴｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｒａｔｅｏｆＳ１００Ａ４ｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｔｉｓｓｕｅｓｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎａｄｊａｃｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓ(Ｐ<０.０１).ＴｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＳ１００Ａ４ａｎｄｓｅｘꎬａｇｅａｎｄｔｕｍｏｒｌｏｃａｔｉｏｎｏｆｐａｔｉｅｎｔｓ(Ｐ>０.０５)ꎬｈｏｗｅｖｅｒꎬｗｈｉｃｈｗａｓｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅｇｒｅｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎꎬｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎａｎｄｌｙｍｐｈｎｏｄｅｍｅｔａｓｔａｓｉｓ(Ｐ<０.０５).Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀Ｓ１００Ａ４ｅｘｉｓｔｓｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｃｅｌｌｌｉｎｅｓ.ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＳ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎａｄｊａｃｅｎｔｔｉｓｓｕｅｓ.ＴｈｅｒｅｉｓａｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＳ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎꎬｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒꎬｗｈｉｃｈｃａｎｂｅｒｅｇａｒｄｅｄａｓａｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｉｎｄｅｘｒｅｆｌｅｃｔｉｎｇｔｈｅｍａｌｉｇｎａｎｔｄｅｇｒｅｅｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄａｓａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓｊｕｄｇｅｍｅｎｔ.ʌＫｅｙｗｏｒｄｓɔ㊀Ｓ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｉｎꎻｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒꎻｐａｒａｃａｎｃｅｒｏｕｓｔｉｓｓｕｅｓ㊀㊀结直肠癌是临床常见的恶性肿瘤ꎬ近年来随着饮食结构㊁生活习惯的改变ꎬ结直肠癌的发病率和病死率呈上升趋势ꎬ因此早诊断早治疗是结直肠癌防治研究的重要内容[１]ꎮ恶性肿瘤的侵袭㊁分化与转移是其重要的生物学特征ꎬ患者治疗后的５年生存率与肿瘤的侵袭㊁转移等因素具有密切相关性ꎬ因此ꎬ临床一直致力于研究能够反映结直肠癌细胞侵袭㊁转移的有效标志物ꎬ通过标记物检测对患者早期确诊㊁病情判断㊁临床治疗及预后均有重要作用[２]ꎮＳ１００Ａ４是Ｓ１００钙离子结合蛋白超家族的成员之一ꎬ是由１０１个氨基酸所组成的１１ｋＤａ小分子蛋白ꎬ通过钙离子信号转导途径在细胞基因表达㊁细胞增殖分化㊁细胞凋亡等过程中均发挥重要作用ꎮＳ１００Ａ４基因及表达产物不会引发肿瘤ꎬ但是控制Ｓ１００Ａ４蛋白的表达可以有效改变肿瘤细胞的侵袭及转移能力ꎮ以往研究证实Ｓ１００Ａ４在肺癌㊁肝癌㊁乳腺癌等多种肿瘤组织中表达水平较高ꎬ且与患者的预后密切相关[３ꎬ４]ꎮ但是国内关于Ｓ１００Ａ４蛋白与结直肠癌的研究较少ꎬ本研究采用免疫组化法检测肿瘤组织和癌旁组织中Ｓ１００Ａ４蛋白的表达水平ꎬ采用实时荧光定量ＲＴ￣ＰＣＲ法测定Ｓ１００Ａ４在结直肠癌细胞系中的表达及Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ表达ꎻ分析其与年龄㊁性别等临床病理特征的相关性ꎬ分析其与年龄㊁性别等临床病理特征的相关性ꎬ为结直肠癌的临床治疗和预后判断提供更多参考ꎮ１㊀资料与方法１.１㊀一般资料㊀选择２０１２至２０１７年在石家庄市第三医院治疗的结直肠癌患者７０例作为研究对象ꎬ其中男３８例ꎬ女３２例ꎻ年龄３９~７０岁ꎬ平均年龄(５２.６９ʃ１１.２６)岁ꎻ结肠肿瘤３８例ꎬ直肠肿瘤３２例ꎻ分化程度:高分化１２例ꎬ中分化３４例ꎬ低分化２４例ꎻ病理检查淋巴结转移３１例ꎬ未转移３９例ꎮ１.２㊀纳入与排除标准１.２.１㊀纳入标准:①经病理检测确诊为结直肠癌ꎻ②年龄>１８岁ꎻ③首次确诊ꎻ④在我院行根治术治疗ꎻ⑤术前未经过放化疗及免疫治疗ꎻ⑥病理类型为腺癌ꎻ⑦患者及家属知情并签署同意书ꎮ１.２.２㊀排除标准:①合并其他恶性肿瘤患者ꎻ②炎症性肠道疾病患者ꎻ③精神疾病患者ꎻ④正在进行或依据进行放化疗治疗的患者ꎮ所有入组患者手术切除结直肠癌组织标本及距肿块ȡ５ｃｍ正常结直肠黏膜组织ꎬ病理证实无浸润ꎬ将所得组织标本经１０％中性甲醛溶液固定ꎬ常规脱水ꎬ石蜡包埋ꎬ４μｍ厚连续切片ꎮ１.３㊀免疫组化法㊀采用ＳＰ免疫组化法对Ｓ１００Ａ４蛋白在结直肠癌组织中的表达进行检测ꎮ首先ꎬ将切片在修复液中煮１ｈꎬ对结肠癌组织切片进行修复抗原ꎻ加入３ɢ过氧化氢室温孵育１０ｍｉｎꎬ加入一抗兔抗人多克隆抗体Ｓ１００Ａ４(ＡｂｃａｍＬｔｄ公司)ꎬ滴入二抗抗兔ＩｇＧ(Ｄａｋｏ公司)ꎬ使用加强型二氨基联苯胺显色剂(福州迈新公司)显色ꎬ使用苏木素复染ꎮ由２名高年资病理医师对每一张切片进行观察ꎬ每例切片随机选取１０个高倍视野(４００倍)实验对照ꎬＡｂｃａｍＬｔｄ公司公司提供阳性对照片ꎻＰＢＳ缓冲液代替一抗作阴性对照ꎮ根据阳性细胞百分率及显色深度进行评分:①阳性百分率:未见阳性细胞计０分ꎻ阳性细胞数<２５％计１分ꎻ阳性细胞数<７５％计２分ꎻ阳性细胞数>７５％计３分ꎮ②着色深浅:不显色计０分ꎻ浅黄色计１分ꎻ棕黄色计２分ꎻ棕褐色计３分ꎮ两项得分相加ꎬ总分ɤ１分为阴性(－)ꎻ弱阳性(＋)总分２~３分ꎻ中阳性(＋＋)总分４~５分ꎻ强阳性(＋＋＋)>５分ꎮ其中根据总分判断阴性和弱阳性为低表达ꎬ中阳性和强阳性为高表达ꎮ１.４㊀ＲＴ￣ＰＣＲ法㊀①Ｓ１００Ａ４在细胞系中的表达:将６个人类结直肠癌细胞系ＳＷ６２０㊁ＳＷ４８０㊁ＬＳ１７４Ｔ㊁ＨＴ２９㊁ＨＣＴ１１６㊁ＬｏＶｏ在３７ħ温度下ꎬ５％ＣＯ２细胞培养箱内使用１０％胎牛血清的ＲＰＭＩ１６４０培养基进行培养ꎬ当细胞覆盖在８０％以上时进行ＲＮＡ分离ꎮ采用Ｔｒｉｚｏｌ试剂(Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司)从６个细胞结直肠癌组织细胞系中分离总ＲＮＡꎬ提取细胞总ＲＮＡ值严格按照试剂盒进行操作ꎮＲＴ￣ＰＣＲ扩增ꎬ参照马栋等[３]操作方式ꎬ上下游引物分别是５￣ＴＣＡＧＡＡＣＴＡＡＡＧＧＡＧＣＴＧＣＴＧＡＣＣ￣３ ꎬ５￣ＴＴＴＣＴＴＣＣＴＧＧＧＣＴＧＣＴＴＡＴＣＴＧＧ￣３ ꎬ５０ħ的条件下行检测３０ｍｉｎꎬ在９９ħ的条件下５ｍｉｎ后终止ꎮ②采用ＲＴ￣ＰＣＲ法检测所有受试者的Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡꎬ参照上述ＲＴ￣ＰＣＲ法提取总ＲＮＡ后ꎬ将各样本的ＲＮＡ逆转录成ｃＤＮＡꎬ分别用相应的引物扩增Ｓ１００Ａ４及ＧＡＰＤＨꎬＰＲＣ４０个４循环反应结束后ꎬＲＴ￣ＰＣＲ相对定量结果采用２￣ΔΔＣｔꎬ其表示的是实验组目的基因的表达相对于对照组的变化倍数ꎮ１.５㊀统计学分析㊀应用ＳＰＳＳ２１.０统计学软件ꎬ计量资料以ｘʃｓꎬ采用ｔ检验ꎬ计数资料使用非参数检验ＷｉｌｃｏｘｏｎＺ检验ꎬ以Ｐ<０.０５为差异有统计学意义ꎮ２㊀结果２.１㊀Ｓ１００Ａ４在结直肠癌细胞系中的表达㊀经ＲＴ￣ＰＣＲ法ꎬＳ１００Ａ４ｍＲＮＡ在ＳＷ６２０㊁ＳＷ４８０㊁ＨＣＴ１１６㊁ＨＴ２９㊁ＬｏＶｏ㊁中均呈阳性ꎬ在ＬＳ１７４Ｔ中阴性ꎬ表明Ｓ１００Ａ４在多数结直肠癌组织细胞中均有所表达ꎮ见图１ꎮ图１㊀ＲＴ￣ＰＣＲ法检测Ｓ１００Ａ４在多数结直肠癌组织细胞中均有所表达２.２㊀Ｓ１００Ａ４蛋白在癌旁组织和结直肠癌中的表达㊀Ｓ１００Ａ４蛋白表达主要定位于细胞质ꎬ在显微镜下结直肠癌组织细胞质呈现黄色㊁棕黄色或者棕褐色颗粒状ꎮ在７０例结直肠癌组织中ꎬ阴性１０例ꎬ弱阳性１１例ꎬ中阳性２７例ꎬ强阳性２２例ꎻ在７０例结直肠癌旁组织中阴性３８例ꎬ弱阳性１８例ꎬ中阳性１３例ꎬ强阳性１例ꎻＳ１００Ａ４蛋白在结直肠组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(Ｐ<０.０１)ꎮ见图２~６ꎬ表１ꎮ２.３㊀Ｓ１００Ａ４蛋白与临床病理特征的相关性分析㊀Ｓ１００Ａ４蛋白与患者性别㊁年龄㊁部位无明显相关性(Ｐ>０.０５)ꎻ但与分化程度㊁浸润程度及淋巴结转移具图２㊀Ｓ１００Ａ４在结直肠癌组织中阴性(免疫组化ˑ４００)图３㊀Ｓ１００Ａ４在结直肠癌组织中弱阳性(免疫组化ˑ４００)图４㊀Ｓ１００Ａ４在结直肠癌组织中中阳性(免疫组化ˑ４００)图５㊀Ｓ１００Ａ４在结直肠癌组织中强阳性(免疫组化ˑ４００)图６㊀Ｓ１００Ａ４在结直肠癌旁正常组织中阴性(免疫组化ˑ４００)表１㊀Ｓ１００Ａ４蛋白在癌旁组织和结直肠癌中的表达ｎ＝７０ꎬ例㊀组别Ｓ１００Ａ４蛋白阴性弱阳性中阳性强阳性Ｚ值Ｐ值结直肠癌组织１０１１２７２２４０.０９７<０.００１癌旁组织３８１８１３１有相关性(Ｐ<０.０５)ꎮ见表２ꎮ２.４㊀Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ与临床病理特征的相关性分析㊀高分化程度㊁侵及全层及淋巴结转移的结直肠癌患者Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ水平明显高于低分化程度㊁侵及肌层以及未出现淋巴转移的患者(Ｐ<０.０５)ꎮ见表３ꎮ３㊀讨论㊀㊀Ｓ１００蛋白家族是一类钙离子结合蛋白ꎬ成员有２０余种ꎬ虽然Ｓ１００蛋白家族的各个成员在序列和结构方面具有相似性ꎬ但是不同种类成员之间的功能却存在普遍的差异[５]ꎮＳ１００Ａ４是Ｓ１００蛋白家族的成员之一ꎬ是由１０１个氨基酸组成的ꎬＳ１００Ａ４蛋白能够在细胞内外均可发挥作用ꎬ在多种疾病中都发现了Ｓ１００Ａ４蛋白的参与ꎮ李江涛等[６]研究指出细胞内的Ｓ１００Ａ４表２㊀Ｓ１００Ａ４蛋白与临床病理特征的相关性分析例㊀项目Ｓ１００Ａ４蛋白低表达高表达Ｚ值Ｐ值性别㊀男(ｎ＝３８)１１２７０.０４４０.８３４㊀女(ｎ＝３２)１０２２年龄(岁)㊀<６０(ｎ＝３４)８２６１.３１８０.２５１㊀ȡ６０(ｎ＝３６)１３２３部位㊀结肠(ｎ＝３８)１２２６０.０９９０.７５３㊀直肠(ｎ＝３２)９２３分化程度㊀低(ｎ＝１２)９３１３.９６６０.００１㊀中(ｎ＝３４)７２７㊀高(ｎ＝２４)５１９浸润程度㊀侵及肌层(ｎ＝３５)１６１９８.２３１０.００４㊀侵及全层(ｎ＝３５)５３０淋巴结转移㊀无(ｎ＝３１)１５１６８.９５８０.００３㊀有(ｎ＝３９)６３３表３㊀Ｓ１００Ａ４蛋白与临床病理特征的相关性分析ｘʃｓ㊀项目Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡｔ(Ｆ)值Ｐ值性别㊀男(ｎ＝３８)０.８２ʃ０.１６０.０２３０.８２７㊀女(ｎ＝３２)０.７９ʃ０.１４年龄(岁)㊀<６０(ｎ＝３４)０.８１ʃ０.１５０.２６９０.３９４㊀ȡ６０(ｎ＝３６)０.８０ʃ０.１６部位㊀结肠(ｎ＝３８)０.８１ʃ０.１４０.３０８０.３８０㊀直肠(ｎ＝３２)０.８０ʃ０.１３分化程度㊀低(ｎ＝１２)０.６５ʃ０.０９６.１２１０.０００㊀中(ｎ＝３４)０.７９ʃ０.１２㊀高(ｎ＝２４)０.９１ʃ０.１７浸润程度㊀侵及肌层(ｎ＝３５)０.７４ʃ０.１３３.１９７０.００１㊀侵及全层(ｎ＝３５)０.８６ʃ０.１８淋巴结转移㊀无(ｎ＝３１)０.６３ʃ０.０９６.５４００.０００㊀有(ｎ＝３９)０.９５ʃ０.２６蛋白能刺激内皮细胞释放基质金属蛋白酶ꎬ重塑细胞外基质ꎬ进而导致血管生成ꎬ因此其在心血管受损的心肌损伤的大鼠细胞中表达较高ꎮ近年来ꎬＳ１００Ａ４蛋白与肿瘤的相关性研究开始成为研究的重要课题ꎬ有研究表明Ｓ１００Ａ４蛋白的表达与肿瘤发生发展密切相关ꎬ而且在多种肿瘤组织中均发现了Ｓ１００Ａ４的高表达[７]ꎮ邓瑰等[８]研究发现Ｓ１００Ａ４蛋白在子宫内膜癌组织中的表达明显升高ꎬ且参与了肿瘤的发生㊁进展㊁浸润㊁转移过ꎮ田胜国等[９]研究指出Ｓ１００Ａ４蛋白在非小细胞肺癌组织中也有较高水平的表达ꎬ且与分化程度㊁ＴＮＭ分期及淋巴结转移有显著性相关ꎮ李新华等[１０]研究发现Ｓ１００Ａ４蛋白在喉鳞癌组织中切片中高表达ꎬ而且低分化组的喉鳞癌患者Ｓ１００Ａ４阳性表达率明显高于中分化组ꎮ㊀㊀Ｓ１００Ａ４蛋白在肿瘤发生发展中的机制尚不完全明确ꎬ研究表明Ｓ１００Ａ４在肿瘤中主要起到激活肿瘤细胞㊁增强肿瘤细胞的侵袭和活动能力ꎮ谢坤鹏等[１１]指出Ｓ１００Ａ４之所以能够导致肿瘤发生ꎬ最主要的原因在于其能够促使细胞增殖或细胞周期失控ꎬ翻译错误的细胞继续存活ꎻＤｏｒｏｕｄｇａｒ等[１２]则认为Ｓ１００Ａ４的促血管生成作用ꎬ使其能够参与到肿瘤发生㊁进展及转移的全部过程ꎮＳ１００Ａ４与ＲＡＧＥ之间能够起到相互作用ꎬ增强了结直肠癌的侵袭㊁转移能力ꎮＤａｈｌｍａｎｎ等[１３]研究指出Ｓ１００Ａ４￣ＲＡＧＥ相互介导可增强结直肠癌细胞的活性ꎬ通过阻断二者的信号可限制Ｓ１００Ａ４的阳性率ꎮ有研究认为Ｓ１００Ａ４还可通过活化Ｉ３Ｋ/ＡＫＴ/ｍＴＯＲ/ｐ７０Ｓ６Ｋ信号通路导致结直肠细胞中的ＶＥＧＦ与Ｅ￣ｃａｄ水平升高ꎬ加之Ｓ１００Ａ４本身作用促血管发生因子ꎬ可促进血管的生成ꎬ促进肿瘤的生长和远处转移[１４]ꎮ肖开提阿卜杜哈德尔等[１４]研究发现Ｓ１００蛋白可以通过与多种靶蛋白酶㊁受体㊁转录因子等相互作用ꎬ从而参与了细胞的增殖㊁分化和凋亡过程ꎻ而Ｓ１００Ａ４蛋白则是通过钙离子信号传导途径参与了肿瘤细胞的增殖㊁分化㊁黏附以及细胞凋亡过程并发挥作用ꎮ刘建捷等[１５]研究指出Ｓ１００Ａ４蛋白在结直肠癌组织中具有高表达水平ꎬ且与肿瘤细胞的分化㊁转移具有相关性ꎮ㊀㊀近年来ꎬ随着结直肠癌发病率与病死率的不断上升ꎬ关于结直肠癌的相关研究日益丰富ꎮ有学者开始关注Ｓ１００Ａ４蛋白与结直肠癌发生发展的相关性ꎮ本研究采用免疫组化法检测肿瘤组织和癌旁组织中Ｓ１００Ａ４蛋白的表达水平ꎬ采用实时荧光定量ＲＴ￣ＰＣＲ法测定Ｓ１００Ａ４在结直肠癌细胞系中的表达及Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ表达ꎻ结果表明Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ在ＳＷ６２０㊁ＳＷ４８０㊁ＨＣＴ１１６㊁ＨＴ２９㊁ＬｏＶｏ㊁中均呈阳性ꎬ在ＬＳ１７４Ｔ中阴性ꎬ表明Ｓ１００Ａ４在多数结直肠癌组织细胞中均有所表达ꎻＳ１００Ａ４蛋白在结直肠组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(Ｐ<０.０１)ꎮ任延松等[１６]通过采用ＲＴ￣ＰＣＲ法对６个结直肠癌组织细胞系中的表达进行了分析ꎬ结果表明ꎬＳ１００Ａ４蛋白在多数的结直肠癌细胞中都有所表达ꎮ本研究通过采用ＲＴ￣ＰＣＲ法对Ｓ１００Ａ４蛋白在６个结直肠癌细胞系中的表达进行检测发现除了在ＬＳ１７４Ｔ中呈阴性外ꎬ在其他５个细胞系中均呈阳性ꎬ而表达水平直接与细胞系的侵袭能力一致ꎬ因此可以表明Ｓ１００Ａ４蛋白表达水平越高其侵袭能力越强ꎮ而且由于Ｓ１００Ａ４的表达高低ꎬ直接与肿瘤细胞的侵袭能力相关ꎬ有研究指出如果在细胞系中敲除Ｓ１００Ａ４基因ꎬ肿瘤的侵袭能力及生长速度均能够有效放缓[１７]ꎮ曹家庆等[１８]研究指出ꎬ结直肠癌组织中的Ｓ１００Ａ４表达水平明显高于癌旁正常组织ꎬ而且与结直肠癌的转移密切相关ꎬ其认为Ｓ１００Ａ４蛋白可抑制肌浆蛋白重链蛋白激酶Ｃ的磷酸化ꎬ抑制肌球蛋白聚集ꎬ促进细胞运动增强细胞转移能力ꎮ同时ꎬＳ１００Ａ４还可通过活化Ｉ３Ｋ/ＡＫＴ/ｍＴＯＲ/ｐ７０Ｓ６Ｋ信号通路导致结直肠细胞中的ＶＥＧＦ与Ｅ￣ｃａｄ水平升高ꎬ加之Ｓ１００Ａ４本身作用促血管发生因子ꎬ可促进血管的生成ꎬ促进肿瘤的生长和远处转移ꎮ本研究通过分析Ｓ１００Ａ４表达与结直肠癌临床症状的相关性认为ꎬＳ１００Ａ４蛋白表达及Ｓ１００Ａ４ｍＲＮＡ水平与患者性别㊁年龄㊁部位无明显相关性(Ｐ>０.０５)ꎻ但与分化程度㊁浸润程度及淋巴结转移具有相关性(Ｐ<０.０５)ꎬ这与现有研究结果一致ꎮ但是张荣君等[１９]通过对Ｓ１００Ａ４在大肠癌组织中的表达研究认为ꎬＳ１００Ａ４蛋白在肿瘤组织中的表达与分化程度㊁淋巴结转移无关ꎬ这与本研究结果不一致ꎮ其原因可能在肿瘤的类型不同ꎬＳ１００Ａ４蛋白在肿瘤中发挥的作用存在一定的差异ꎬ另外还可能是由于样本量偏少ꎬ影响了相关性结果分析ꎮ这也是本研究的不足之处ꎬ在以后的研究中还需进一步加大样本量ꎬ进行相关研究分析ꎮ㊀㊀此外ꎬ本研究受条件所限未对Ｓ１００Ａ４蛋白对结直肠癌患者的预后情况进行研究分析ꎮ张天彪等[２０]对Ｓ１００Ａ４蛋白对胃癌患者５年累积生存率的影响进行了分析ꎬ指出ꎬＳ１００Ａ４蛋白低表达的患者其５年累积生存率明显高于高表达患者ꎬ肯定了Ｓ１００Ａ４蛋白对肿瘤预后的影响ꎮ研究指出由于Ｓ１００Ａ４蛋白参与了血管的形成ꎬ那么抑制Ｓ１００Ａ４蛋白的表达ꎬ可以对肿瘤血管生长速度进行调控ꎬ可有效控制病情进展ꎮ另外ꎬＳ１００Ａ４可能是通过活化ＰＩ３Ｋ/ＡＫＴ/ｍＴＯＲ/ｐ７０Ｓ６Ｋ信号通路发挥诱导结直肠癌细胞生存㊁转移ꎬ起到对肿瘤细胞的调控作用ꎬ那么在临床治疗中可以考虑控制或影响该信号通路ꎬ则能够有效起到调控肿瘤生长和转移的作用ꎮ目前ꎬ对于Ｓ１００Ａ４蛋白对肿瘤预后和临床治疗的研究还尚未开展ꎬ这可能是该领域未来发展的重要方向ꎮ㊀㊀综上所述ꎬＳ１００Ａ４在结直肠癌组织及细胞系中均存在ꎬＳ１００Ａ４蛋白在结直肠癌细胞中的表达水平明显高于癌旁组织ꎬＳ１００Ａ４蛋白与结直肠癌的分化㊁浸润㊁转移呈相关性ꎬ可作为患者临床诊断㊁治疗和预后判断的参考ꎮ参考文献１㊀赵云红ꎬ徐琳ꎬ张丽娟ꎬ等.Ｓ１００Ａ４和ＨＩＦ￣ｌα蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及相关性研究.昆明医科大学学报ꎬ２０１４ꎬ３５:１１１￣１１６.２㊀ＯｃｈｉｙａＴꎬＴａｋｅｎａｇａＫꎬＥｎｄｏＨ.ＳｉｌｅｎｃｉｎｇｏｆＳ１００Ａ４ꎬａｍｅｔａｓｔａｓｉｓ￣ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎꎬｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｉｎｈｉｂｉｔｓｔｕｍｏｒａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｇｒｏｗｔｈ.Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓꎬ２０１４ꎬ１７:１７￣２６.３㊀马栋ꎬ孙学军.结肠癌细胞系及结肠癌组织中Ｓ１００Ａ４基因的表达及临床意义.西藏医药ꎬ２０１５ꎬ３６:８￣１０.４㊀曹睿杰ꎬ张玲ꎬ周敏ꎬ等.Ｓ１００Ａ４㊁ＶＥＧＦ在非小细胞肺癌中的表达及其相关性的研究.临床肺科杂志ꎬ２０１７ꎬ２２:１１９７￣１２００.５㊀林名岛ꎬ林洁.Ｓ１００Ａ４基因在肿瘤中作用机制的研究进展.广东医学ꎬ２０１６ꎬ３７:１２５１￣１２５３.６㊀李江涛ꎬ张国珺ꎬ严鹏.大鼠心肌损伤后Ｓ１００Ａ４的表达变化及其意义.中西医结合心脑血管病杂志ꎬ２０１７ꎬ１５:３１３￣３１６.７㊀赵云霞ꎬ陈雪ꎬ刘畅ꎬ等.Ｓ１００Ａ７和Ｓ１００Ａ４在外阴鳞癌与外阴硬化性苔藓中的表达及意义.现代肿瘤医学ꎬ２０１８ꎬ２６:１５７３￣１５７６.８㊀邓瑰ꎬ龙慧.子宫内膜癌组织中Ｓ１００Ａ４表达的临床意义.包头医学院学报ꎬ２０１６ꎬ３２:５￣６.９㊀田胜国ꎬ李作生ꎬ王国臣ꎬ等.非小细胞肺癌患者血清中Ｓ１００Ａ４和Ｓ１００Ａ６表达及其临床意义.实用癌症杂志ꎬ２０１６ꎬ３１:８８６￣８８８.１０㊀李新华ꎬ李军ꎬ裴卓ꎬ等.喉鳞癌组织中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ㊁Ｂｃｌ￣２与Ｓ１００Ａ４的表达水平与其临床病理意义.临床与实验病理学杂志ꎬ２０１７ꎬ１６:２０２３￣２０２６.１１㊀谢坤鹏ꎬ刘平ꎬ王新.转移相关基因ｒａｎ２３㊁ｐ５３和ＳＩ００Ａ４在结膜黑色素瘤中的表达及其与侵袭转移的关系.中华实验眼科杂志ꎬ２０１８ꎬ３６:７５６￣７６０.１２㊀ＤｏｒｏｕｄｇａｒＳꎬＱｕｉｊａｄａＰꎬＫｏｎｓｔａｎｄｉｎＭ.Ｓ１００Ａ４ｐｒｏｔｅｃｔｓｔｈｅｍｙｏｃａｒｄｉｕｍａｇａｉｎｓｔｉｓｃｈｅｍｉｃｓｔｒｅｓｓ.ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒ＆ＣｅｌｌｎｌａｒＣａｒｄｉｏｌｏｇｙꎬ２０１６ꎬ６:５４￣６３.１３㊀ＤａｈｌｍａｎｎＭꎬＯｋｈｒｉｍｅｎｋｏＡꎬＭａｒｃｉｎｋｏｗｓｋｉＰꎬｅｔａｌ.ＲＡＧＥｍｅｄｉａｔｅｓＳ１００Ａ４￣ｉｎｄｕｃｅｄｃｅｌｌｍｏｔｉｌｉｔｙｖｉａＭＡＰＫ/ＥＲＫａｎｄｈｙｐｏｘｉａｓｉｇｎａｌｉｎｇａｎｄｉｓａｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｂｉｏｍａｒｋｅｒｆｏｒｈｕｍａｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓ.Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔꎬ２０１４ꎬ５:３２２０￣３２３３.１４㊀肖开提阿卜杜哈德尔ꎬ王理ꎬ高华ꎬ等.结肠癌组织中Ｓ１００Ａ４的表达情况及其与淋巴结转移的关系.新疆医学ꎬ２０１４ꎬ４４:６３￣６６.１５㊀刘建捷ꎬ高华ꎬ许新才ꎬ等.结肠癌中ＡＧＲ２和Ｓ１００Ａ４的表达及临床意义.临床与实验病理学杂志ꎬ２０１８ꎬ３４:４３６￣４３９.１６㊀任延松ꎬ王博ꎬ顾页ꎬ等.结直肠癌中Ｓ１００Ａ４的表达及意义.临床与实验病理学杂志ꎬ２０１６ꎬ３２:１０８４￣１０８８.１７㊀ＭａｔｈｉａｓＤꎬＤｅｎｎｉｓＫꎬＷｏｌｆｇａｎｇＷꎬｅｔａｌ.Ｓ１００Ａ４ｉｎｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓ:Ｗｎｔｓｉｇｎａｌｉｎｇ￣ｄｒｉｖｅｎｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓｆｏｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ.Ｃａｎｃｅｒｓꎬ２０１６ꎬ８:５９.１８㊀曹家庆ꎬ郑杨ꎬ何楠ꎬ等.Ｓ１００Ａ４和ｎｍ２３Ｈ１在结直肠癌组织中的表达及其临床意义.广东医学ꎬ２０１１ꎬ３２:６１２￣６１５.１９㊀张荣君ꎬ邹德龄ꎬ刘维波大肠癌中Ｐ７３㊁Ｓ１００Ａ４蛋白的表达及意义.中医药临床杂志ꎬ２０１７ꎬ２９:８６６￣８６９.２０㊀张天彪ꎬ宿文辉ꎬ赵滢ꎬ等.Ｓ１００钙结合蛋白Ａ４在胃癌组织中的表达及意义.中国癌症杂志ꎬ２０１５ꎬ２５:４２４￣４３１.(收稿日期:２０１９－０７－０８)(上接３６９８页)１３㊀ＭｃＱｕａｒｒｉｅＥＰꎬＭａｃｋｉｎｎｏｎＢꎬＳｔｅｗａｒｔＧＡꎬｅｔａｌ.ＭｅｍｂｒａｎｏｕｓｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙｒｅｍａｉｎｓｔｈｅｃｏｍｍｏｎｅｓｔｐｒｉｍａｒｙｃａｕｓｅｏｆｎｅｐｈｒｏｔｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅｉｎａｎｏｒｔｈｅｒｎＥｕｒｏｐｅａｎＣａｕｃａｓｉａｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ.ＮｅｐｈｒｏｌＤｉａｌＴｒａｎｓｐｌａｎｔꎬ２０１０ꎬ２５:１００９￣１０１０ꎻａｕｔｈｏｒｒｅｐｌｙ１０１０￣１００１.１３㊀魏昕ꎬ陈钦开.膜性肾病诊疗进展.江西医药ꎬ２０１８ꎬ５３:１３５５￣１３５８.１４㊀ＬｉｕＹꎬＬｉＸꎬＭａＣꎬｅｔａｌ.Ｓｅｒｕｍａｎｔｉ￣ＰＬＡ２Ｒａｎｔｉｂｏｄｙａｓａｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｂｉｏｍａｒｋｅｒｏｆｉｄｉｏｐａｔｈｉｃｍｅｍｂｒａｎｏｕｓｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ:Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｕｔ￣ｏｆｆｖａｌｕｅｆｏｒＣｈｉｎｅｓｅｐａｔｉｅｎｔｓ.ＣｌｉｎＣｈｉｍＡｃｔａꎬ２０１８ꎬ４７６:９￣１４.１５㊀王青青ꎬ李胜开.瑞舒伐他汀钙在特发性膜性肾病降脂治疗中的效果分析.现代医学ꎬ２０１７ꎬ４５:５６７￣５７１.１６㊀俞燮龑ꎬ王珑玲ꎬ张晓兴ꎬ等.子痫前期患者１２ｈ尿蛋白定量与２４ｈ尿蛋白定量的相关性分析.中国乡村医药ꎬ２０１８ꎬ２５:４８￣４９.１７㊀王雪ꎬ崔燕ꎬ赵永利ꎬ等.胱抑素Ｃ在肾脏疾病的研究进展.中国中西医结合肾病杂志ꎬ２０１７ꎬ１８:８３￣８５.１８㊀黄云桃ꎬ李晖.血清胱抑素Ｃ的水平在临床疾病中的研究进展.世界最新医学信息文摘ꎬ２０１８ꎬ１８:１０３￣１０４.１９㊀程创业ꎬ张道友.胱抑素Ｃ的临床应用研究进展.国际检验医学杂志ꎬ２０１５ꎬ３６:６７７￣６７９.２０㊀郑蓉ꎬ邓跃毅ꎬ朱戎ꎬ等.血清胱抑素Ｃ与特发性膜性肾病风险分组的关系.中国中西医结合肾病杂志ꎬ２０１６ꎬ１７:６７８￣６８１.２１㊀ＺｈｕＨꎬＨａｎＱꎬＺｈａｎｇＤꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｍｅｍｂｒａｎｏｕｓｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ.ＩｎｔＪＮｅｐｈｒｏｌＲｅｎｏｖａｓｃＤｉｓꎬ２０１８ꎬ１１:３３￣４０.２２㊀黄其鹏ꎬ徐高四ꎬ王芳ꎬ等.血清磷脂酶Ａ２受体抗体与膜性肾病临床和病理的相关性.赣南医学院学报ꎬ２０１８ꎬ３８:６４６￣６５０.２３㊀马丹娜ꎬ郑亚莉.特发性膜性肾病临床病理特点及治疗分析.宁夏医学杂志ꎬ２０１６ꎬ３８:２５０￣２５２.２４㊀刘晓斌ꎬ张秋花ꎬ陈勇ꎬ等.特发性膜性肾病临床㊁病理特点及Ｍ型磷脂酶Ａ２受体表达的相关分析.实用医学杂志ꎬ２０１７ꎬ３３:２５２０￣２５２４.２５㊀刘冉冉ꎬ鄂静ꎬ郑亚莉.膜性肾病的临床及病理特点分析.宁夏医学杂志ꎬ２０１７ꎬ３９:２３３￣２３８.２６㊀邱明珠ꎬ郑智勇.原发性膜性肾病研究新进展.临床与实验病理学杂志ꎬ２０１８ꎬ３４:８８９￣８９２.２７㊀ＤｅＶｒｉｅｓｅＡＳꎬＧｌａｓｓｏｃｋＲＪꎬＮａｔｈＫＡꎬｅｔａｌ.ＡＰｒｏｐｏｓａｌｆｏｒａＳｅｒｏｌｏｇｙ￣ＢａｓｅｄＡｐｐｒｏａｃｈｔｏＭｅｍｂｒａｎｏｕｓＮｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ.ＪＡｍＳｏｃＮｅｐｈｒｏｌꎬ２０１７ꎬ２８:４２１￣４３０.２８㊀ＧｕｅｒｒｙＭＪꎬＶａｎｈｉｌｌｅＰꎬＲｏｎｃｏＰꎬｅｔａｌ.Ｓｅｒｕｍａｎｔｉ￣ＰＬＡ２Ｒａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｍａｙｂｅｐｒｅｓｅｎｔｂｅｆｏｒｅｃｌｉｎｉｃａｌｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓｏｆｍｅｍｂｒａｎｏｕｓｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ.ＫｉｄｎｅｙＩｎｔꎬ２０１６ꎬ８９:１３９９.２９㊀李伟皓ꎬ崔宝玲ꎬ高伟ꎬ等.血清ＰＬＡ２Ｒ抗体评估原发性膜性肾病病情的临床价值研究.国际检验医学杂志ꎬ２０１８ꎬ３９:２８８９￣２８９２ꎬ２８９６.３０㊀周广宇ꎬ郭莹ꎬ王婉宁ꎬ等.Ｍ型磷脂酶Ａ２受体及其抗体在特发性膜性肾病诊断中作用的研究进展.吉林大学学报(医学版)ꎬ２０１７ꎬ４３:６５１￣６５５.３１㊀ＩｎｋｅｒＬＡꎬＳｃｈｍｉｄＣＨꎬＴｉｇｈｉｏｕａｒｔＨꎬｅｔａｌ.ＥｓｔｉｍａｔｉｎｇｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｒａｔｅｆｒｏｍｓｅｒｕｍｃｒｅａｔｉｎｉｎｅａｎｄｃｙｓｔａｔｉｎＣ.ＮＥｎｇｌＪＭｅｄꎬ２０１２ꎬ３６７:２０￣２９.(收稿日期:２０１９－０５－１０)。

超声微泡沉默S100A4基因对胃癌干细胞干性和上皮间质转化的调控

Chinese Journal of Tissue Engineering Research ｜Vol 25｜No.25｜September 2021｜4025超声微泡沉默S100A4基因对胃癌干细胞干性和上皮间质转化的调控徐桂兰1，宋建生2，杨世疆2文题释义：超声靶向破坏微泡技术：是利用超声介导微泡靶向释放所携带基因，超声波的空化效应可以导致组织细胞膜的通透性增加，从而使目的基因容易进入组织细胞内，增强基因的转染及表达。

S100A4的功能：S100A4属于钙离子结合蛋白S100蛋白家族，该家族成员均可参与细胞骨架及胞膜的相互作用以及钙离子信号传递和细胞的分化等。

S100A4在肿瘤中的作用主要表现为促进肿瘤进展，导致肿瘤细胞的侵袭和活动能力增强。

摘要背景：S100A4是钙离子结合蛋白S100家族的一员，可以与相应的靶蛋白结合，进而对肿瘤细胞、多能干细胞的增殖与转移产生重要的影响，近年研究表明超声靶向破坏微泡技术能增强基因转染效率。

目的：探讨超声靶向破坏微泡技术沉默S100A4基因对胃癌干细胞干性、上皮间质转化的影响。

方法：取对数生长期的人胃癌细胞株SGC-7901，采用无血清悬浮培养法分离肿瘤干细胞球，流式细胞仪检测肿瘤干细胞表面标记EpCAM +CD44+表达。

构建靶向S100A4基因的shRNA 表达质粒，超声微泡介导转染至EpCAM +CD44+胃癌干细胞。

转染后48 h ，Western blot 检测S100A4的表达；采用CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell 小室检测胃癌干细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力；采用Western blot 与qRT-PCR 检测上皮-间质转化相关标记物的表达。

结果与结论：流式细胞仪检测结果显示，在胃癌干细胞富集培养后表达EpCAM +CD44+细胞的比例明显高于富集培养前(P < 0.05)。

超声微泡转染S100A4-shRNA 质粒48 h 后S100A4的蛋白表达量明显低于未转染组(P < 0.01)。

TPX2_基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24

第 50 卷第 2 期2024年 3 月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.50 No.2Mar.2024DOI：10.13481/j.1671‐587X.20240207TPX2基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/DDP顺铂化疗敏感性的增强作用及其机制张鹰1, 蒋先训1, 万朝辉2（1. 南华大学衡阳医学院附属第二医院重症医学科，湖南衡阳421001；2. 南华大学衡阳医学院附属第二医院急诊科，湖南衡阳421001）［摘要］目的目的：探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白（TPX2）基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂（DDP）的化疗敏感性的影响，并阐明其作用机制。

方法方法：采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP，将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。

MTT法检测各组细胞增殖活性，并根据半数抑制浓度（IC50）值计算耐药指数（RI）；实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法和Western blotting法检测细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平。

通过小干扰RNA（siRNA）沉默T24/DDP 细胞中TPX2基因表达，再将细胞分为空白对照组、阴性对照干扰（si-NC）组、TPX2沉默（si-TPX2）组、si-NC+DDP（2 mg·L－1DDP）组和si-TPX2+DDP（2 mg·L－1DDP）组。

RT-qPCR法和Western blotting法检测转染后细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平，MTT法检测各组细胞增殖活性，流式细胞术检测各组凋亡细胞率和细胞周期G2/M期百分率，Transwell小室实验检测各组迁移细胞数和侵袭细胞数，Western blotting法检测各组细胞中Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路相关蛋白β-catenin、P-糖蛋白（P-gp）、锌指蛋白转录因子1（Snail1）和Survivin蛋白表达水平。

SOCS1基因沉默对人膀胱癌T24细胞增殖、侵袭及化疗敏感性的影响

SOCS1基因沉默对人膀胱癌T24细胞增殖、侵袭及化疗敏感性的影响闫骏;朱小军;斯钦布和;王国强;陈利刚;黄勇【摘要】目的探讨细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)基因沉默对人膀胱癌细胞增殖、侵袭及化疗敏感性的影响.方法将培养好的人膀胱癌T24细胞随机分为三组,用Lip02000将重组质粒pU-SOCS1-siRNA(沉默SOCS1基因)、阴性对照质粒分别转染至干扰组、对照组,空白组不做任何处理.基因沉默后,用RT-PCR技术检测细胞中SOCS1 mRNA表达;Western blotting法检测细胞中SOCS1蛋白表达;MTT法检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期及化疗药物诱导的细胞凋亡率;Transwell小室模型检测细胞侵袭能力;MTT法检测细胞化疗敏感性.结果与其他两组比较,干扰组SOCS1基因沉默后SOCS1 mRNA和蛋白表达降低(P均＜0.05);细胞增殖率降低(P均＜0.05);G0/G1期细胞增多,S、G2/M期细胞减少(P均＜0.05);吉西他滨诱导的细胞凋亡率升高(P＜0.05);体外侵袭能力减弱(P均＜0.05);对化疗药物卡铂和吉西他滨的敏感性增强(P均＜0.05).结论 SOCS1基因沉默后,人膀胱癌细胞T24的增殖、体外侵袭能力下降,化疗敏感性增强.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2016(056)037【总页数】4页(P21-24)【关键词】膀胱肿瘤;细胞因子信号转导抑制因子1;基因沉默;细胞增殖;细胞侵袭;化疗敏感性【作者】闫骏;朱小军;斯钦布和;王国强;陈利刚;黄勇【作者单位】内蒙古医科大学附属医院,呼和浩特010050;内蒙古医科大学附属医院,呼和浩特010050;内蒙古医科大学附属医院,呼和浩特010050;内蒙古医科大学附属医院,呼和浩特010050;内蒙古医科大学附属医院,呼和浩特010050;内蒙古医科大学附属医院,呼和浩特010050【正文语种】中文【中图分类】R737.14细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)在肿瘤中既可作为原癌基因也可作为肿瘤抑制因子发挥作用。

沉默细胞周期检测点激酶l基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

沉默细胞周期检测点激酶l基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响姜明哲;李国忠【摘要】目的探讨沉默细胞周期检测点激酶1(Chk1)基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响.方法培养人膀胱癌T24细胞,根据转染物的不同,将细胞分为siRNA-Chk1组、siRNA-对照序列组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR检测各组细胞中Chk1基因表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡,利用流式细胞术检测各组细胞周期,利用Western blot法检测各组细胞中Chk1、Cdc25C和Cyclin B1蛋白表达.结果与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞中Chk1 mRNA相对表达量降低(F=43.813,P=0.000);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞24h、48h、72h和96h时吸光度A值均降低(P<0.05);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞凋亡率显著增加(F=90.736,P=0.000);流式细胞术检测结果显示,siRNA-Chk1组G0/G1期和S期高于siRNA-对照序列组和空白对照组,而G2/M期低于siRNA-对照序列组和空白对照组(P<0.05);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞中Chk1、Cdc25C和Cyclin B1蛋白相对表达量均降低(P<0.05).结论特异性沉默Chk1基因可抑制人膀胱癌T24细胞增殖,加速细胞凋亡,其机制可能与抑制Chk1/Cdc25C/CyclinB1通路而减少细胞G2/M期阻滞有关.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2017(021)010【总页数】4页(P1834-1837)【关键词】膀胱癌;细胞周期检测点激酶l;细胞增殖;细胞凋亡【作者】姜明哲;李国忠【作者单位】天津市第五中心医院,天津300450;天津市第五中心医院,天津300450【正文语种】中文【中图分类】R737.14细胞周期检测点激酶1(checkpoint kinase 1，Chk1)作为高度保守的一种丝氨酸/苏氨酸激酶，在维持正常的细胞周期及基因组稳定、调控细胞凋亡中具有重要作用[1]，有研究指出[2]，Chk1在多种恶性肿瘤中表达上调，与肿瘤发生及进展过程密切相关。

S100A4蛋白在妇科恶性肿瘤中的研究进展

S100A4蛋白在妇科恶性肿瘤中的研究进展钱秀艳;张淑兰【摘要】S100A4蛋白是钙结合蛋白家族成员之一,其通过对钙离子的调节及与靶蛋白的相互作用在体内发挥多种生物学作用,如参与细胞周期活动、细胞分化、肿瘤生长以及细胞外基质分泌活动等过程.近年大量研究表明,S100A4蛋白在多种肿瘤中呈现高表达且具有细胞和组织的分布特异性,并与肿瘤的浸润和转移密切相关,因而备受关注.就S100A4蛋白的分子生物学特点,在调节肿瘤细胞的转移方式和功能方面及其在妇科肿瘤中的作用做文献综述.【期刊名称】《国际妇产科学杂志》【年(卷),期】2010(037)002【总页数】4页(P108-111)【关键词】S100A4;宫颈癌;卵巢癌;子宫内膜癌【作者】钱秀艳;张淑兰【作者单位】110004,沈阳,中国医科大学附属盛京医院妇产科;110004,沈阳,中国医科大学附属盛京医院妇产科【正文语种】中文S100A4（S100 calcium binding protein A4）蛋白是钙结合蛋白中最大的亚类S100蛋白家族的成员之一，能够活化并参与形成具有肿瘤特性的反应通路，同时还能激活由调节细胞正常和异常增殖，凋亡和生长以及分化等相关因子构成的信号通路，这种信号通路能够改变细胞膜和细胞外基质结构，调节细胞骨架结构以及增强侵袭能力和诱导血管的形成［1］。

因此，S100A4蛋白将是在改变和调节大多数肿瘤表型上具有相当大的潜在生物学行为能力的分子靶点，其在肿瘤的发生和发展方面发挥着重要的作用。

深入研究S100A4蛋白有助于提供肿瘤治疗的新靶点。

S100A4是S100蛋白家族的21个成员之一，又称钙结合蛋白18A2，42A，转移相关蛋白 Mtsl，Pel98，成纤维细胞特异蛋白（fibroblast-specific protein1，FSP1）等。

基因定位于人染色体1q21，在细胞的运动、侵袭和微管蛋白的聚合中发挥作用［2］。

其编码蛋白是由101个氨基酸组成的多肽，分子质量为11.5 ku。

miRNA沉默ILK基因对人膀胱癌T24细胞侵袭功能的影响

miRNA沉默ILK基因对人膀胱癌T24细胞侵袭功能的影响易正金;何云锋;王勇;高飞;雷波【期刊名称】《生命科学研究》【年(卷),期】2012(16)2【摘要】To explore the effect of (he invasion function of bladder cancer cell T24 after gene silenced integrin linked kinase(ILK) gene. ILKmiRNA(micro RNA) were constructed, then transfected into bladder cancer cell lines T24. The change of ILK gene and protein was delected by RT-PCR (reverse transcriptase-poly-raerase chain reaction) and Western blot. The change of invasion function were measured by heterogeneous adhesion experiment and Transwell. The ILK gene and protein was decreased after ILK miRNA was transfected. The A value of heterogeneity adhesion was 0.21 ±0.05 in miRNA plasmid group. The A value of heterogeneity adhesion was 0.67+0.08 and 0.63±0.04 in negative plasmi d group and untransfected group (P＜0.05). The cell number of invasion was (7.2±1.1) cells/HP in miRNA plasmid group, but in negative plasmid group and untransfected group was (15.4±1.6) cells/HP and (13.2±1.2) cells/HP (P＜0.05). The results indicated that silencing ILK would decrease the invasion fuction of bladder cancer cell line T24.%探讨基因沉默整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILK)基因后,对膀胱癌T24细胞侵袭功能的影响.将构建的ILK mi RNA (ILK micro RNA)转染质粒转染膀胱癌细胞株T24,RT-PCR (reverse transcriptasepolymerase chain reaction)检测质粒转染后ILK基因的表达变化,Western blot检测蛋白的表达变化,异质粘附实验和Transwell小室实验检查ILK基因沉默后膀胱癌侵袭作用的变化.结果发现实验组ILK基因和蛋白表达明显下降,异质粘附实验结果显示实验组干吸光度A值为0.21±0.05,而阴性质粒组和空白对照组吸光度A值分别为0.67±0.08和0.63±0.04,有统计学意义(P＜0.05).Transwell小室实验结果显示,实验组细胞穿膜教为(7.2±1.1)/HP.而阴性质粒组和空白对照组细胞穿膜数分别为(15.4±1.6)/HP和(13.2±1.2)/HP,有统计学意义(P＜0.05).结果表明沉默ILK能降低膀胱癌细胞株T24的侵袭力.【总页数】5页(P164-168)【作者】易正金;何云锋;王勇;高飞;雷波【作者单位】攀枝花钢铁公司总医院泌尿外科中国四川攀枝花617023;重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,中国重庆400016;攀枝花钢铁公司总医院泌尿外科中国四川攀枝花617023;攀枝花钢铁公司总医院泌尿外科中国四川攀枝花617023;攀枝花钢铁公司总医院泌尿外科中国四川攀枝花617023【正文语种】中文【中图分类】R737.14【相关文献】1.ABCE1基因沉默对人膀胱癌 T24细胞增殖和迁移能力的影响 [J], 李强;王九江;罗水发;朱俊杰2.沉默GRP78／BIP表达对人膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及机制 [J], 伍家燕;樊建军;曾帆;李海玉;李韵;张寒韬;白鑫;刘革力;宋方洲3.siRNA靶向沉默TrkB基因对人膀胱癌细胞株T24生长和转移的影响及其分子机制 [J], 邢增术;张冲;刘振湘;白志明4.SOCS1基因沉默对人膀胱癌T24细胞增殖、侵袭及化疗敏感性的影响 [J], 闫骏;朱小军;斯钦布和;王国强;陈利刚;黄勇5.RNA干扰沉默Fra-1基因对膀胱癌T24细胞侵袭和迁移的影响 [J], 谢海峰;张宏波;乔庆东;马小芳;孟翔宇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

沉默Robo基因对人膀胱移形上皮癌细胞T24增殖的影响

沉默Robo基因对人膀胱移形上皮癌细胞T24增殖的影响王晗;姚狮章;朱朝阳;程晓晖;田素民;李国营【期刊名称】《中山大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2016(037)004【摘要】[目的]研究Robo蛋白在人膀胱移形上皮癌细胞(T24)中的表达及沉默Robo基因对T24细胞增殖的影响.[方法]实验分为两组,对照组(不转染载体)和转染组(转染复合载体),每组20例.对照组体外培养T24细胞,用免疫组织化学、免疫荧光和蛋白质印迹检测是否有Robo蛋白的表达及其表达亚型;转染组利用RNA干扰技术,寻找表达基因的沉默位点,构建合理的表达载体,转染T24细胞,免疫荧光化学观察细胞转染结果,蛋白质印迹来检测该表达基因沉默后蛋白表达的变化,MTT检测该表达基因沉默后细胞存活率变化.[结果]①免疫组化和免疫荧光检测显示T24细胞中有Robo1和Robo4表达,且表达差异无统计学意义(P=0.363和P=0.241),而正常膀胱移行上皮细胞中无表达,蛋白质印迹证实了免疫组化结果(P=0.205).②沉默Robo基因后,T24细胞中Robo1和Robo4的表达受到抑制,尤其是Robo1的表达几乎受到全部抑制(免疫荧光P=0.002,蛋白印迹P=0.0001),MTT法检测显示Robo1干扰组细胞的存活率明显下降,与对照组及Robo4组相比差异有显著性(分别为P=0.012和P=0.023).[结论]T24细胞中存在Robo1和Robo4两种蛋白受体,沉默Robo基因后,Robo1的表达和T24细胞的存活率明显下降.【总页数】8页(P514-521)【作者】王晗;姚狮章;朱朝阳;程晓晖;田素民;李国营【作者单位】广东药科大学基础学院,广东广州510006;佛山市南海区第四人民医院泌尿外科,广东佛山528211;河南大学附属淮河医院泌尿外科,河南开封475000;广东药科大学基础学院,广东广州510006;广东药科大学基础学院,广东广州510006;广东药科大学基础学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】R737.14【相关文献】1.ABCE1基因沉默对人膀胱癌 T24细胞增殖和迁移能力的影响 [J], 李强;王九江;罗水发;朱俊杰2.siRNA靶向沉默TrkB基因对人膀胱癌细胞株T24生长和转移的影响及其分子机制 [J], 邢增术;张冲;刘振湘;白志明3.上调microRNA-101沉默EZH2基因表达对人膀胱癌T24细胞系增殖和凋亡的影响 [J], 王海峰;杨宏;胡礼炳;霍倩;雷永虹;秦扬;李俊;毕城伟;4.SOCS1基因沉默对人膀胱癌T24细胞增殖、侵袭及化疗敏感性的影响 [J], 闫骏;朱小军;斯钦布和;王国强;陈利刚;黄勇5.BIRC5基因沉默对人膀胱癌细胞系T24增殖抑制的研究 [J], 杨锐;王岩;李一夫;高永涛;于时良;安瑞华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

S100A4基因表达在肿瘤转移中的作用

S100A4基因表达在肿瘤转移中的作用白阳;孔民;王敬泽【期刊名称】《细胞生物学杂志》【年(卷),期】2004(26)5【摘要】肿瘤转移是细胞恶性的重要标志之一,有许多基因和因子都参与这一过程。

对S100A4基因的研究发现,它可参与细胞周期调控、细胞增殖与分化、血管生成、细胞外基质重建等多种生命过程,调控细胞的生长和运动。

在某些特定的肿瘤细胞内,它的表达含量的增加可促进肿瘤细胞发生转移,并与癌症的发生具有某些相关性,可能对人类癌症的发生具有预后作用。

现就S100A4基因表达与肿瘤转移的关系进行初步的探讨,以期对癌症的临床诊断提供一些参考。

【总页数】4页(P475-478)【关键词】S100A4;基因表达;肿瘤转移;肿瘤细胞;癌症【作者】白阳;孔民;王敬泽【作者单位】中国科学院动物研究所生物膜与膜工程国家重点实验室【正文语种】中文【中图分类】Q279;R73【相关文献】1.S100家族中S100A4,S100A6基因表达与肿瘤转移的研究进展 [J], 迮仁浩;杨述华;刘勇2.转移相关基因nm23和P53及S100A4在晚期胃癌中的表达及与侵袭转移的相关性研究 [J], 于观贞;王杰军;陈颖;倪灿荣;朱明华3.转移相关基因nm23、p53和S100A4在结膜黑色素瘤中的表达及其与侵袭转移的关系 [J], 谢坤鹏;刘平;王新4.转移相关基因nm23、p53和S100A4在结膜黑色素瘤中的表达及其与侵袭转移的关系 [J], 谢坤鹏; 刘平; 王新5.Smad4基因在人卵巢癌高、低转移细胞系HO-8910和HO-8910PM中的表达及其对肿瘤转移作用的研究 [J], 陈琛; 叶冬梅; 邵淑娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

RNAi沉默人膀胱癌T24细胞VEGF-C基因表达的实验研究的开题报告

RNAi沉默人膀胱癌T24细胞VEGF-C基因表达的实验研
究的开题报告
1. 研究背景和意义
人膀胱癌是一种常见的泌尿系恶性肿瘤，其诱因多种多样。

膀胱癌细胞具有高度的侵袭性和转移性，其中VEGF-C是膀胱癌侵袭和转移的重要因子。

因此，研究VEGF-C的表达对膀胱癌治疗和预后具有重要意义。

RNA干扰（RNAi）技术是现代分子生物学的重要工具，可以通过靶向基因的特异性抑制，进而调控靶基因的表达。

RNAi技术已被广泛用于癌症研究和治疗。

本研究旨在通过RNAi技术抑制VEGF-C基因表达，探索其在人膀胱癌治疗中的作用。

2. 研究内容和方法
本研究将利用siRNA技术抑制T24细胞中VEGF-C基因的表达，观察其对T24细胞增殖、侵袭和转移能力的影响，同时通过Western blotting和RT-qPCR技术验证VEGF-C的表达情况，并通过细胞周期分析和裂解活动检测等方法评估RNAi对细胞周期和凋亡的影响。

3. 预期结果和意义
预计研究结果将明确RNAi技术对膀胱癌细胞中VEGF-C的调控作用，为膀胱癌治疗提供新的思路和方法。

同时，研究结果也可为更深入的研究提供重要的基础和优化RNAi技术的思路。

S100A4基因表达与胃癌生物学行为的关系

S100A4基因表达与胃癌生物学行为的关系
陶致侃
【期刊名称】《中国老年学杂志》
【年(卷),期】2011(031)014
【摘要】目的探讨胃癌组织中S100A4基因表达与胃癌生物学行为的关系.方法收集45例进展期胃癌手术切除标本,以RT-PCR法检测病灶中S100A4 mRNA的表达.按不同临床病理因素和TNM分期进行分组,比较不同组间S100A4 mRNA的表达水平.结果 S100A4 mRNA表达水平与胃癌的大体类型、浸润深度(P＜0.01)及淋巴结转移程度(P＜0.05)密切相关.TNM Ⅲ/Ⅳ期病例的S100A4表达水平明显高于Ⅰ/Ⅱ期病例(P＜0.01).结论 S100A4表达与胃癌生物学行为密切相关,其高表达是胃癌高侵袭能力和预后不良的标志之一.
【总页数】2页(P2651-2652)
【作者】陶致侃
【作者单位】沈阳医学院沈洲医院普外科,辽宁,沈阳,110002
【正文语种】中文
【中图分类】R735.2
【相关文献】
1.Cyclin D1、p53及c-myc基因表达与胃癌生物学行为的关系 [J], 景丽;张建中;郭风英;秦憬
2.胃癌相关基因表达与其生物学行为关系研究 [J], 许静洪;魏晓丽;张晓华
3.nm23基因表达与胃癌生物学行为的关系 [J], 林炳煌;王进胜;耿峻峰
4.p53、bcl-2、nm23基因表达与胃癌生物学行为关系的研究 [J], 朱新勇;张同全;王福春;方驰华;曹瑞;马俊勋;张伟
5.基质金属蛋白酶-7基因表达与胃癌生物学行为及腹膜转移的关系 [J], 冯众一;徐惠绵;黄宝俊
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S100 A4在肺鳞癌与肺腺癌细胞中的表达差异和生物学作用

S100 A4在肺鳞癌与肺腺癌细胞中的表达差异和生物学作用罗旭;王聪;范宁;罗文超;徐飞;李岩【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2015(000)002【摘要】Objective To explore the expression of S100A4 in lung squamous carcinoma and adenocarcinoma cells and its effection in proliferation,metastasis,invasion.Meth ods RT-PCR and Western Blot were used to detect the expression of S100A4 in lung squamous carcinoma NCI-H520 and adenocarcinoma SPC-A-1 cell lines,using siRNA to knockdown S100A4 in these two cell lines and CCK-8,wound healing assay and transwell experiment were used to detect the cell pro-liferation,migration and invasion.Results The expression of S100A4 was different in these two cell lines and the expression was lower in squamous carcinoma than adenocarcinoma (P<0.05).The transfection efficiency was detected by immuno-fluorescence,Western Blot and RT-PCR.Knocking down S100A4 significantly reduced the cell proliferation,migration which was confirmed by CCK-8,wound healing and transwell assay (P<0.05).Conclusion Expression of S100A4 in lung squamous carcinoma NCI-H520 was significantly lower than adenocarcinoma SPC-A-1 cell line.Knocking down S100A4 reduced the lung cancer cell malignant and may be a potential target for lung cancer treatment.%目的：研究S100A4在肺鳞癌与肺腺癌细胞系中的表达及对细胞增殖、转移、侵袭功能的影响。

S100A4基因沉默抑制晚期糖基化终产物诱导内皮细胞钙化的作用

S100A4基因沉默抑制晚期糖基化终产物诱导内皮细胞钙化的作用岳温恒;厉娜;汪沁沁;梁春【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2016(036)007【摘要】目的通过干扰人脐静脉内皮细胞(HUVEC) S100A4基因表达,探讨其对晚期糖基化终产物(AGE)诱导HUVEC钙化的影响.方法用重组病毒转染体外培养的HUVEC抑制S100A4的表达.用AGE刺激转感染后的HUVEC,建立糖尿病细胞模型.通过检测细胞内钙离子水平,Western blotting测定基质Gla蛋白(MGP)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、碱性磷酸酶(ALP)的表达水平,以及茜素红染色评估HUVEC钙化水平.结果在AGE的刺激下HUVEC内钙离子浓度显著升高.沉默S100A4基因后,可以反转AGE诱导的MGP高表达,以及BMP2、ALP的低表达(均P＜0.01);且茜素红染色面积明显降低.结论用重组病毒沉默S100A4基因可以降低AGE诱导的HUVEC钙化水平.S100A4基因可能成为治疗糖尿病血管钙化的一个潜在的靶点.【总页数】6页(P974-979)【作者】岳温恒;厉娜;汪沁沁;梁春【作者单位】上海第二军医大学附属长征医院心内科,上海200003;上海第二军医大学附属长征医院心内科,上海200003;上海第二军医大学附属长征医院心内科,上海200003;上海第二军医大学附属长征医院心内科,上海200003【正文语种】中文【中图分类】R543.5【相关文献】1.球状脂联素上调脂联素受体1抑制晚期糖基化终产物诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的初步研究 [J], 赵宏宇;郑强;张锦2.丁基苯酞抑制晚期糖基化终产物诱导的内皮细胞损伤及其机制 [J], 赵振华;陈枝挺;刘昌云;吴小敏;李元霄;林汉斌;车春晖;黄华品3.siRNA基因沉默ASIC1a对过敏性紫癜(HSP)患儿血清IgA1诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用 [J], 闫波;袁丽萍;张琴;华冉;李玉飞;戴寒晶4.西红花酸对晚期糖基化终产物诱导牛血管内皮细胞E-选择素表达的抑制作用 [J], 向敏;周成华;钱之玉5.西红花酸对晚期糖化终产物诱导内皮细胞晚期糖基化终产物受体表达的抑制作用(英文) [J], 向敏;钱之玉;周成华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。