Clin Cancer Res-狩猎循环肿瘤细胞
麻醉药物对肿瘤影响的研究新进展
麻醉药物对肿瘤影响的研究新进展黄翔【摘要】Tumor is one of the common diseases of the world, which has a higher incidence and mortality, the treatment of which is mainly resection, but the operation treatment may increase the recurrence and metastasis. Recent studies have shown that, in clinical anesthesia drugs can influence the recurrence and metastasis of tumor, which has been more and more widely used in treating tumors, and suitable perioperative anaesthetic drugs can reduce the recurrence and metastasis,though the mechanism is not very clear so far,waiting for further exploration.%肿瘤是世界各国常见的疾病之一,其有着较高的发生率和病死率,肿瘤治疗的方法多以手术切除为主,而手术治疗可增加肿瘤的复发和转移.近年来研究表明,麻醉药物可影响肿瘤的复发和转移.麻醉药物在治疗肿瘤中的应用越来越广泛,围术期选择合适的麻醉药物可能会降低肿瘤的复发和转移.目前其对肿瘤的影响机制仍未明确,有待进一步探讨.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)016【总页数】3页(P2629-2631)【关键词】麻醉药;肿瘤;复发;转移【作者】黄翔【作者单位】徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室,江苏,徐州,221000【正文语种】中文【中图分类】R614肿瘤是世界各国常见的疾病之一，其发病率和病死率呈持续上升趋势。
肿瘤评价标准
免疫相关疗效评价标准的更新
评价 WHO Immune-related Response Criteria (irRC)
在Ipilimumab的CA184Nivolumab
超声检查
价格低廉，原理简单， 对机体无任何损害 通过代谢状态间接反映 血管分布和生成
PET成像
Chen B, et al. J Med Postgra 2011; 24(2):196-202.
临床特殊瘤种现有RECIST以外的评价标准
治疗药物 肿瘤类型 评估标准
伊马替尼
GIST
缓解不良
符合以下任一标准： 1. 肿瘤大小增大20%，且不伴有肿瘤中心坏死或 密度降低 2. 新发转移灶，肿瘤中心变实a，或治疗前密度较低 无增强的病灶出现密度升高
PFS：RECIST标准下，PR与SD患者无差异
中心变实是指治疗前肿瘤中心坏死，治疗后肿瘤中心完全或接近完全密度升高(增强CT)
Smith AD, et al. AJR 2010;194:1470-1478.
K K
受体酪氨酸激酶抑制剂 (TKIs) (瑞格非尼, 舒尼替尼, 索拉 非尼, 帕唑帕尼， 凡德他尼 , 阿帕替尼 法米替尼)
PI3K
MEK
Akt
MAPK
信号传导
细胞存活
细胞增殖
Modified from Tabernero, J et al. Ann Oncol 2005；Jain RK. J Clin Oncol 2013; 31:22052218; Ciardiello F. and Tortora G. NEJM 2008;358:1160-74
疗效表现： 作用于肿瘤微环境 vs 直接作用于肿瘤细胞
前列腺癌循环肿瘤细胞临床应用研究进展_苏晓娜
·4291·
monitoring and prognosis of non small cell lung cancer． Preliminary report［J］． Anticancer Ｒes，1998，18（ 1B） ： 631-634. ［15］ 赵肖，王孟昭． 肺癌血清肿瘤标志物的临床意义［J］． 中国肺 癌杂志，2013，14（ 3） ： 286-291. ［16］ Chansky K，Sculier JP，Crowley JJ，et al． The International Association for the Study of Lung Cancer Staging Project： prognostic factors and pathologic TNM stage in surgically managed non-small cell lung cancer［J］． J Thorac Oncol，2009，4（ 7） ： 792-801. ［17］ Mizuguchi S，Nishiyama N，Iwata T，et al． Serum Sialyl Lewis x and cytokeratin 19 fragment as predictive factors for recurrence in patients with stage I non-small cell lung cancer［J］． Lung Cancer， 2007，58（ 3） ： 369-375. ［18］ Pang L，Wang J，Jiang Y，et al． Decreased levels of serum cytokeratin 19 fragment CYFＲA 21-1 predict objective response to chemotherapy in patients with non-small cell lung cancer［J］． Exp Ther Med，2013，6（ 2） ： 355-360. ［19］ Wang J，Yi Y，Li B，et al． CYFＲA21-1 can predict the sensitivity to chemoradiotherapy of non-small-cell lung carcinoma［J］． Biomarkers，2010，15（ 7） ： 594-601. ［20］ Bastawisy AE，Azzouny ME，Mohammed G，et al． Serum cytokeratin 19 fragment in advanced lung cancer： could we eventually have a serum tumor marker［J］． Ecancermedicalscience，2014，8： 394. ［21］ Pujol JL，Molinier O，Ebert W，et al． CYFＲA 21-1 is a prognostic determinant in non-small-cell lung cancer： results of a meta-analysis in 2063 patients［J］． Br J Cancer，2004，90（ 11） ： 2097-2105. ［22］ Bonner JA，Sloan JA，Ｒowland KM Jr，et al． Significance of neuronspecific enolase levels before and during therapy for small cell lung
关于循环肿瘤细胞(CTC)的一些认识
关于循环肿瘤细胞（CTC）的一些认识摘要：通常把进入人体外周血的肿瘤细胞称为循环肿瘤细胞（circulating tumor cell）。
随着人们对循环肿瘤细胞研究的深入，尤其是伴随现代检测技术的广泛应用，CTC逐渐被人们所重视。
循环肿瘤细胞的检测可有效地应用于体外早期诊断，化疗药物的快速评估，个体化治疗包括临川筛药、耐药性的检测，肿瘤复发的监测以及肿瘤新药物的开发等。
检测CTC 有着良好的应用前景，随着这一研究领域的不断发展，必将产生新的诊疗手段，从而使肿瘤的治疗提高到一个崭新的阶段。
关键词：循环肿瘤细胞；CTC；检测方法；临床意义早在1896年，Ashworth曾报道1例因癌症死亡的患者外周血中发现了类似肿瘤的细胞，并首次提出循环肿瘤细胞（circulating tumor cell, CTC）的概念[1]。
随着人们对循环肿瘤细胞研究的深入，尤其是伴随现代检测技术的广泛应用，CTC逐渐被人们所重视。
1、概述CTC指自发或因诊疗操作进入外周血循环的肿瘤细胞。
随着肿瘤细胞的不断增殖,部分细胞可以通过分泌一种抑制黏附因子表达的物质,增加其运动能力并使之与肿瘤母体脱离。
这些脱落的肿瘤细胞再分泌一种蛋白溶解酶，以破坏周边宿主结缔组织并进入脉管系统。
诊疗操作也可使肿瘤细胞扩散进入外周血循环。
2、检测方法2.1免疫细胞化学（immunocytochemistry, ICC）这一检测方法基于抗原抗体结合反应的原理，利用单克隆抗体（McAb）与特异的肿瘤标记物结合，并通过酶与底物反应显色来判断肿瘤细胞的存在。
检测的肿瘤标志物主要分三类：①上皮细胞角蛋白（CK），如CK19；②上皮细胞膜特异性抗原，如黏蛋白类，包括EMA、HMFG、HEA125等；③肿瘤相关糖蛋白（TAG），如TAG12。
1980年，Sloane等首次采用ICC的方法检测乳腺癌患者骨髓中的肿瘤细胞。
该方法可以进行形态学分析，但是检测的细胞量少，敏感性只有10－4～10－5（即在1万~10万个单核细胞中发现一个肿瘤细胞），而且许多分化差的肿瘤不能表达目标抗原，而非上皮细胞中细胞角蛋白和上皮细胞抗原亦可能阳性,故特异性不高。
乳腺癌的肿瘤免疫治疗研究进展
乳腺癌的肿瘤免疫治疗研究进展引言：乳腺癌作为妇女中最常见的癌症之一，对女性健康构成了重大威胁。
目前，传统的治疗方式包括手术切除、化疗和放疗，虽然在提高存活率和生活质量方面取得了显著成果，但仍然存在一些难题。
近年来，肿瘤免疫治疗作为一种新兴的治疗手段，受到了广泛关注。
本文将介绍乳腺癌肿瘤免疫治疗的研究进展。
一、肿瘤免疫治疗的原理肿瘤免疫治疗是利用人体免疫系统对肿瘤发起攻击的治疗方法。
主要有两种方式：一种是通过增强机体免疫力，提高肿瘤免疫杀伤作用；另一种是针对肿瘤细胞的免疫逃避机制，通过激活免疫细胞来识别和攻击肿瘤细胞。
二、乳腺癌肿瘤免疫治疗的研究进展1. 免疫检查点抑制剂免疫检查点抑制剂是最常见的肿瘤免疫治疗药物之一。
PD-1和PD-L1是肿瘤和免疫细胞之间的重要信号通路，肿瘤细胞通过PD-L1与PD-1结合，抑制免疫细胞的攻击能力。
免疫检查点抑制剂能够阻断这一信号通路，激活免疫细胞对肿瘤细胞的攻击。
在乳腺癌中，乳腺癌患者中PD-L1表达增加与预后恶化相关，免疫检查点抑制剂作为一线治疗手段已经得到广泛应用。
2. 肿瘤疫苗肿瘤疫苗是利用肿瘤细胞或其产物作为抗原，激活机体免疫细胞对肿瘤细胞的攻击。
乳腺癌肿瘤疫苗主要是通过提取患者自身肿瘤组织，制备个体化肿瘤疫苗，激活机体免疫系统。
研究表明，乳腺癌肿瘤疫苗能够提高患者的免疫应答和存活率，且具有较好的安全性。
3. CAR-T细胞疗法CAR-T细胞疗法是一种新兴的免疫治疗技术，通过修饰患者自身的T细胞，使其携带肿瘤细胞识别的特异性受体，从而实现患者对肿瘤细胞的攻击。
乳腺癌CAR-T细胞疗法是近年来兴起的研究热点。
三、乳腺癌肿瘤免疫治疗面临的挑战虽然肿瘤免疫治疗在乳腺癌治疗中的研究取得了一些进展，但仍然面临一些挑战。
首先，乳腺癌肿瘤异质性导致免疫治疗的效果具有不稳定性。
其次，免疫治疗药物的不良反应需要得到更好的控制和管理。
此外，肿瘤免疫逃避机制的研究还需要进一步深入。
肿瘤免疫逃逸机制及治疗新思路
肿瘤免疫逃逸机制及治疗新思路肿瘤免疫逃逸（Tumor escape）是指肿瘤细胞通过多种机制逃避机体免疫系统识别和攻击，从而得以在体内生存和增殖的现象。
机体免疫系统具有免疫监视功能，当体内出现恶变细胞时，免疫系统能够识别并通过免疫机制特异地清除这些“非己”细胞，抵御肿瘤的发生发展。
然而，恶变细胞在某些情况下能通过多种机制逃避机体的免疫监视，在体内迅速增殖，形成肿瘤。
也就是说：一方面，机体可通过天然和获得性免疫抵抗肿瘤的发生；另一方面，肿瘤细胞可通过多种机制逃避机体免疫的识别和攻击。
肿瘤的发生与否及转归如何都取决于这两方面的总体作用。
肿瘤免疫逃逸机制的深入研究，为探讨肿瘤免疫治疗提供了新思路。
目前有很多致力于逆转体内肿瘤免疫逃逸的免疫治疗方案，其中相当一部分已经应用于临床。
本文简要阐述了近年来肿瘤免疫逃逸机制和免疫治疗的研究进展。
多种机制参与了肿瘤免疫逃逸。
其中免疫监视的免疫“选择”也促使了肿瘤得以逃避免疫攻击。
免疫监视学说的新观点认为，机体免疫系统可清除机体中对免疫应答敏感的肿瘤细胞，而对免疫应答不敏感的肿瘤细胞则被“选择性”的存留下来并得以快速增殖。
因此认为免疫监视一方面也促使这些具有免疫逃逸能力的肿瘤细胞快速增殖，机体抗肿瘤免疫能力越来越弱。
然而，免疫“选择”的前提是肿瘤细胞获得抵御免疫攻击和/或抑制机体免疫应答的能力，即获得免疫逃逸的能力。
免疫耐受、免疫抑制和免疫衰老是肿瘤获得免疫逃逸能力的主要机制。
1. 分泌免疫抑制因子或激活免疫抑制细胞研究发现，某些肿瘤细胞能通过自分泌或旁分泌形式分泌免疫抑制因子，如转化生长因子β（TGF-β）、白细胞介素-6（IL-6）和前列腺素E（PGE2）等，能抑制机体对肿瘤细胞的杀伤。
肿瘤可诱导机体产生免疫抑制细胞，对机体抗肿瘤免疫应答起着负性调节作用，是肿瘤免疫逃逸的主要机制之一。
研究证实，肿瘤患者血液和肿瘤组织中存在能够抑制机体抗肿瘤免疫应答的调节性T细胞（Regulatory T cells, Treg）[1]。
2013循环肿瘤细胞检测及其特性_杨卓
离的 CTCs 具有活性，且可以发现成团存在的 CTCs 微 栓子，利用自动荧光检测系统结合人工镜检，将 2 个或 以上CK + / CD45 － 的 CTCs 聚集在一起判定为 CTC 微栓 子。在 86 例患者中 43% 均检测到 CTC 微栓子， 其中
【关键词】 循环肿瘤细胞； 分离； 鉴定； 循环肿瘤干细胞 【中图分类号】 R446. 11 【文献标志码】 A 【文章编号】 16749081 （ 2013 ） 02-0191-04 DOI： 10. 3969 / j. issn. 16749081. 2013. 02. 023
肿瘤转移是导致肿瘤患者死亡的重要原因 ， 现有 影像学手段及传统肿瘤标志物不能辅助医生尽早发现 肿瘤转移并判断预后 。外周血循环肿瘤细胞 （ circulating tumor cells，CTCs） 存在于肺癌、 乳腺癌 、 前列腺 癌、结直肠癌 、膀胱癌和卵巢癌等多种恶性肿瘤中 ， 与患者的临床分期、 无进展生存期 、 总生存期 、 药物 疗效以及早期复发和转移均密切相关 ， 因有望成为实 时的 “液体活检 ” 而备受关注
［67 ］
54% 乳腺癌、50% 非小细胞肺癌、22% 胰腺癌、93% 前 列腺癌中检出 CTC 微栓子，CTC 微栓子中的细胞与散
［ 13 ］ 在的 CTC 相 比 体 积 较 小， 但 是 核 质 比 相 似 ； 而
CellSearch 方法 则 无 检 出 微 栓 子 的 报 道 。 然 而 ， ISET 不适用于体积较小的细胞 ， 如小神经内分泌肿瘤细胞 的检测 ，体积小的 CTCs 有漏检的可能 ， 造成假阴性 。 同时 ，也不适用于具有异质性的肿瘤细胞检测 。
循环肿瘤细胞捕获技术的研究进展
·学术讲座·AcademicLecture·从肿瘤组织脱落后进入外周血的细胞称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs),在1869年由Ashworth [1]首次提出。
CTCs 从肿瘤原发灶或转移灶逃逸后通过血管壁进入脉管系统[2],也可能通过蛋白水解或其他已存在的组织结构形成的通道移动[3]。
CTCs 在上皮-间质转化(epithelial-mes⁃enchymal transition,EMT)的过程中获得间质表型,变得更具有侵袭性[4-5]。
有研究证明肿瘤细胞必须经历间充质向上皮转化(mesenchymal-epithelial tran⁃sition,MET)后才能获得增殖能力,形成转移性肿瘤。
因此,有学者认为具有中间表型的肿瘤细胞可以最有效地在远处扩散和生长[6]。
CTCs 在外周血中数量极少,每105~107个血细胞中有1个CTC [7],因此捕获CTCs 成为一个挑战。
然而,CTCs 可以提供许多与疾病有关的信息,并且对临床诊疗有很高的参考价值。
现已经开发许多捕获方法,如目前唯一经美国FDA 批准用于检测的Cellsearch 系统,可以捕获外周血中的CTCs 并计数,用以研究CTCs 与肿瘤临床病理特性的相关性[8]。
肿瘤确诊往往依赖于组织活检,但这种有创操作无法反复实施[9]。
而CTCs 检测作为一种相对无创并可以重复进行的液体活检技术,在临床应用上有很好的潜在价值[10]。
目前富集CTCs 的技术大致可分为两类。
一类是根据CTCs 的表面抗原或其物理性质进行分选,而后通过识别表面的生物标记进行检测[11],即正性富集方式;另一类则是利用抗体与白细胞表面的CD45抗原结合后而被消耗,未被捕获的便是CTCs,即负性富集方式,这种方式可以避免细胞被损伤。
由于外周血中CTCs 的数量极少[7],因此理想的CTCs 捕获平台应该具有高捕获效率、高纯度和高产量的特性,并且一次可以处理较多的外周血量。
6循环肿瘤细胞分型检测与肿瘤实时个体化治疗-蔡贞
数据来源：益善医学检验所 仅列出检测例数较多的癌肿，其余未列出
CTCs精准分型深入评估复发转移风险
间质型CTCs转移能力比上皮型、混合型CTCs强 CTM的转移成瘤能力是单个CTCs的20-50倍
CTCs在肿瘤实时监测临床应用中需考虑
1. CTCs数量变化 2. CTCs表型变化 3. CTM 数量变化
Has my cancer spread?
Has my cancer come back?
Risk Assessment
Screening
Differential Diagnosis
Staging
Prognosis
Therapy Selection
Therapy Monitoring Surveillance
Min Yu, et al. Science. 2013;339:580-584.
CTCs numbers and M+/E+ ratios as indicators of treatment response and disease progression
Min Yu, et al. Science. 2013;339:580-584.
CTC分型典型病例
CTC分型典型病例
挑战
• 需要对循环肿瘤细胞作用 于疾病的机制进一步研究； • 转化医学思维：研究成果 更好为临床服务； • 依赖对外周循环肿瘤细胞 分离及检测技术的提高 ； • 外周循环肿瘤细胞分离及 鉴定技术需标准化。
Thanks!
肿瘤常见诊疗手段存在的问题
常规诊断手段 影像学检查 血清标志物 组织病理 局限性 肿瘤信息获取滞后 对身体的辐射性伤害 特异性不足 有创操作 无法作为实时监测手段
肿瘤分子诊断
循环肿瘤细胞（CTC） 保险公司
基因多态性检测 mRNA表达检测 体细循胞环基因肿突瘤变细检胞测 （CTC)检测
体细胞基因突变检测
EGFR, K-RAS, B-RAF，C-KIT
—— qPCR-HRM（可用于血浆标本检测） —— Taqman-ARMS（与国际获批的技术相当） —— DNA测序（基因突变检测的金标准技术）
肿瘤分子诊断服务介绍
标准化用药
标准化用药
个体化用药
个体化用药
标准疗法1 标准疗法2 标准疗法3
2
肿瘤药物与相关靶标
如何实现个体化用药？
分子分型
药物疗效
4
目前的服务
肿瘤 感染性疾病 新生儿筛查
目前的平台
目前的客户
TaqMan-ARMs 测序 实时定量PCR qPCR-HRM
医院 健康管理公司 研究所 药厂
最常见的基因多态性 SNP
单核苷酸多态性（SNP）是最常见的基因变异
绝大多数人群
至少1%的人群
G to C
共有序列
变异的序列
SNP 位点
19
2020/11/12
为什么 SNPs 重要?
个体 1
个体 2
基因 A
基因 B
SNP标志基因 A
SNP 可能使基因 B 产生变 异的蛋白质分子
= SNP variations in DNA
临床意义
HNPCC风险评估 明确是否检测MMR突变
HNPCC鉴别诊断 确定突变位点，评估家族中高危个体
风险
确定家族中是否存在已知的突变
检测名称
MSI检测 MLH1,MSH2,MSH6
基因突变检测
标本热要点突求变检测
肿瘤基因突变检测标本要求
肿瘤比例：标识肿瘤丰富的区域，提高肿瘤细胞比例用于检测
▪ 尽量去除非肿瘤组织及细胞，提高检测的敏感性
▪ 不同敏感性的检测方法对肿瘤比例要求不一样
▪ 测序法：〉10%
▪ ARMS法：〉1%
.
12
.
13
细胞学标本
胸水、肺泡冲洗液和痰液标本：肿瘤细胞含量不确定，通常很少
血液标本
血清、血浆标本：含肿瘤DNA，但含量不稳定，DNA片段化 循环血肿瘤细胞：可得较高质量肿瘤DNA，但量很少
1. Dacic S. Adv Anat Pathol 2008; 15(4):241-247.
2. Sequist LV, et al. Clin Cancer Res 2006; 12(14S):4403s-4406s.
.
11
标本的病理评估内容
诊断：确保肿瘤组织是非小细胞性肺癌
肿瘤量：确保有足够的肿瘤组织用于突变检测 ▪ 尽量保证200-400个肿瘤细胞 ▪ 对技术成熟的实验室，可以尝试进行<200个肿瘤细胞的标本检测 ▪ 5-10uM 10张切片能满足突变检测需求 ▪ 当细胞数较少时,可以适当增加切片数,以满足检测需求
肿瘤基因突变检测标本
.
1
用于突变检测的标本
病理评估合格的 标本适用于EGFR
基因突变检测
.
建议采用灵敏度 高的ARMS检测
方法
2
肿瘤基因突变检测标本类型
冰冻组织
外科手术标本：最好标本，可得高质量肿瘤DNA 支气管镜、穿刺活检测标本：量少，但肿瘤DNA质量仍好
固定包埋组织
外科手术标本：可得足量肿瘤DNA，但DNA片段化 支气管镜、穿刺活检测标本：可得肿瘤DNA量少且片段化
2019CSCO 乳腺癌指南骨转移、脑转移等指南
CTC发展历程
1869年CTC检测
2004年CellSearch
2013年单细胞测序
首次从尸检 中发现CTC
“种子和土壤” 假说，成为 CTC 发 展 的 重 要支撑
CTC数目可以反 应患者等预后， 数目变化可以 预测疗效
分子表型可以 提供肿瘤信息， 并揭示肿瘤演 进
利用CTC进行 单细胞测序
医学发展
骨活检
•单发可疑病灶，且有条件活检的患者
，可考虑骨活检
CT/X线 •对ECT扫面一场的患者，应针对可疑骨 转移灶部位行CT（骨窗）及X线检查， 以确认骨转移情况，并了解骨破坏的严 重程度
PET/CT • 与ECT相似的灵敏度，但在骨转移诊
断的价值有待进一步评估
CSCO乳腺癌指南 2019
骨转移的治疗
入
SRT
• 局部控制率可达 98% • 适用范围广 • 不良反应轻，缓解症状快 • 可单用，也可与全脑放疗
联用或用于全脑放疗后再 复发的治疗
CSCO乳腺癌指南 2019
脑转移药物治疗
化疗或靶向治疗 • 可能有效药物包括：卡培他滨、拓扑替康、替莫唑胺等 • HER2阳性患者可考虑拉帕替尼联合卡培他滨
CSCO乳腺癌指南 2019
乳腺癌脑转移GAP评分 （breast cancer graded prognostic analysis）
0
0.5
RTOG预后评分
KPS
≤50
60
评分 1.0
70-80
分子分型
TNBC
-
HR阳性
年龄
≥60岁
RTOG预后评分后的MDACC再评估
KPS
≤50
＜60岁 60
循环肿瘤细胞可预测转移性乳腺癌女性的生存期
循环肿瘤细胞可预测转移性乳腺癌女性的生存期
佚名
【期刊名称】《基础医学与临床》
【年(卷),期】2006(26)10
【摘要】美国密歇根大学医院的Daniel F．Hayes博士及其同事在7月15日的《临床癌症研究》（Clin Cancer Res，2006；12：4218—4224）上报告，转移性乳腺癌女性循环肿瘤细胞的数目可预测生存期。
作者总结当前分析的结果提示，转移性乳腺癌患者临床过程中的任何时间，循环肿瘤细胞水平升高是促发肿瘤进展的先兆。
【总页数】1页(P1098-1098)
【关键词】循环肿瘤细胞;转移性乳腺癌;生存期;女性;预测;临床过程;乳腺癌患者;大学医院
【正文语种】中文
【中图分类】R739.91
【相关文献】
1.探析循环肿瘤细胞动态变化对转移性乳腺癌患者治疗反应及预后的预测价值 [J], 杨志勇
2.探析循环肿瘤细胞动态变化对转移性乳腺癌患者治疗反应及预后的预测价值 [J], 杨志勇;
3.转移性乳腺癌循环肿瘤细胞的上皮间质转化水平对化疗疗效的预测意义 [J], 赵丽娜;李鹏飞;蔡莉;杨春雨;刘娜
4.循环肿瘤细胞动态变化对转移性乳腺癌患者治疗反应及预后的预测价值 [J], 边莉;刘毅;王涛;张少华;邵志敏;佟仲生;宋尔卫;王晓稼;廖宁
5.循环肿瘤细胞评估行新辅助化疗转移性乳腺癌患者人类表皮生长因子受体2表达水平与疗效及预后关系研究 [J], 苏猛;张星
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
循环肿瘤DNActDNA检测策略及临床意义
J Clin Pathol 2013;66:775-778
American Journal of Clinical Pathology 2015; 143(1):18-24. PLoS One. 2015; 10(4): e0108247.
2
cfDNA完整性
3
ctDNA突变频率
4
ctDNA甲基化频率
5
微卫星杂合性
乳腺癌病人（尤其在转移性 乳腺癌）的血浆cfDNA的完 整性显著下调，而血浆 cfDNA的浓度显著上调，可 作为早期诊断的标志物，具 有较好的敏感度和特异性。
l肝癌病人的血浆中存在两种不同长度的DNA分子：短链DNA分子（<150bp）和长链 DNA分子（ >180bp ）； l短链DNA分子与ctDNA突变率及拷贝数异常相关，且与ctDNA浓度正相关； l长链DNA分子不携带肿瘤相关ctDNA特征，且与ctDNA浓度负相关。
影像学诊断(超声，CT，MRI，PET，PET-CT) 循环肿瘤细胞（circulating tumor cell , CTC） 循环肿瘤DNA（ circulating tumor DNA，ctDNA）
循环肿瘤DNA(ctDNA)
人体血液循环系统中不断流动的携带一 定特征（包括突变，缺少，插入，重排， 拷贝数异常，甲基化等）来自肿瘤基因 组的DNA片段；
l 利用肿瘤组织进行sanger测 序定义肿瘤组织的基因突 变；
l 再利用Beaming技术检测18 例癌症病人中192份血浆样 本中ctDNA的突变情况， 检测灵敏度可达到0.005%。
循环肿瘤细胞的研究进展及其在宫颈癌的研究前景
374West China Medical Journal , Vol.29, No.2 Feb. 2014 华西医学 2014, 29（2）循环肿瘤细胞的研究进展及其在宫颈癌的研究前景杨光琼，杨沛【摘要】 宫颈癌是女性恶性肿瘤中最常见的肿瘤之一。
目前，宫颈癌的治疗手段是手术辅以放射治疗（放疗）加化学治疗（化疗），且术后复发率较高。
在宫颈癌早期可选用手术治疗，同步放、化疗适合于肿瘤各期；部分患者术后根据病理结果，如有高危因素者可能需要补充放、化疗。
但现在尚无可靠的无创性指标来预测该疾病的复发，转移和预后。
循环肿瘤细胞（CTCs ）是存在于患者外周血循环的肿瘤细胞，是肿瘤发生转移的关键。
因此，宫颈癌外周血CTCs 的检测将有助于临床工作者制定更加个体化的治疗方案，减少复发和转移，改善患者预后。
本文就CTCs 的研究进展及在宫颈癌的发展前景作一综述。
【关键词】 宫颈癌；循环肿瘤细胞；研究进展【文献标志码】 A DOI: 10.7507/1002-0179.20140115综 述【基金项目】 四川省科技厅科技支撑项目（2009SZ00141）【作者单位】 四川大学华西妇产儿童医院妇科（成都，610041）【作者简介】 杨光琼（1987－），女，云南昭通人，医师，在读硕士，E-mail ：****************【通讯作者】 杨沛，E-mail ：****************【网络出版时间】 2014-02-14 17:48【网络出版地址】 /kcms/doi/10.7507/1002-0179.20140115.html宫颈癌是女性恶性肿瘤，其发病率及死亡率位居第二的，仅次于乳腺癌。
随着医疗技术的发展，宫颈癌在诊断治疗方面取得一定进展，但大多数宫颈癌患者在初治两年内会复发和转移。
据统计各种治疗方法总共约有35%会复发[1]，7%～21%的会发生远处转移[1]。
影响宫颈癌复发和转移的因素很多，但究其根源，这主要和外周循环肿瘤细胞（CTCs ）有关。
循环中的肿瘤标志物
Rev Cancer, 2006. 6(4): p. 259-69.
19
.
2.2.2MicroRNA与肿瘤
Cortez, M.A., et al., MicroRNAs in body fluids--the mix of hormones and biomarkers. Nat
Rev Clin Oncol, 2011. 8(8): p. 467-77.
循环中的肿瘤标志物
.
circuiting protein circuiting nucleotide
2
.
循环中的蛋白肿瘤标志物
肿瘤组织产生
分化抗原（CD系列）； 胚胎抗原（AFP，CEA）； 同工酶（NSE）； 激素（β-HCG）； 组织特异性抗原（PSA, free
PSA）； 糖蛋白（CA系列）； 癌基因及其产物（Her-2）
.
2.1.3不同肿瘤患者中cfDNA变化检测
Schwarzenbach, H., D.S. Hoon, and K. Pantel,. Nat Rev Cancer, 2011. 11(6): p. 426-37. .
2.2 循环中的MicroRNA
MicroRNA（miRNAs ）
是一种广泛存在于
肿瘤与宿主相互作用 产生
血清铁蛋白（Ferritin）； 免疫复合物； 急性时相蛋白（CRP）； 同工酶； 白细胞介素受体（ILR）； 肿瘤坏死因子（TNF）
3
.
肿瘤标志物的检查
敏感性和特异性的限制， 对早期肿瘤的检出阳性率 较低
单一选用一种肿瘤标志物 对肿瘤进行诊断、监测是 不够的
patients. Nat Rev Cancer, 2011. 11(6): p. 42613-37.
循环肿瘤细胞在临床应用中的挑战
循环肿瘤细胞在临床应用中的挑战赵建华【摘要】循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的临床应用价值已经得到广泛认可,尤其作为“液体活检”的主要贫源用于肿瘤精准医疗备受关注.然而,CTCs在患者血液中的含量极为稀少,灵敏度一直是CTCs检测及应用的主要瓶颈.目前,CTCs分离、富集、体外原代培养技术,获得细胞的生物学特性研究及其临床应用价值都还在不断探索和发展中,对它们的深层次和全方位的分析将有助于指导并推动CTCs的临床应用.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2017(035)008【总页数】3页(P561-563)【关键词】循环肿瘤细胞;精准医疗;生物学特征【作者】赵建华【作者单位】江苏省肿瘤医院/江苏省肿瘤防治研究所/南京医科大学附属肿瘤医院,江苏省临床检验中心,南京210009【正文语种】中文【中图分类】Q291肿瘤转移是癌症患者死亡的主要原因。
由于大部分远端转移都是通过血液循环完成的，因此血液中存在的肿瘤细胞，即循环肿瘤细胞(circulating tumor cells，CTCs)，被认为是肿瘤复发转移的关键因素[1]。
然而，CTCs在患者血液中的含量非常稀少，一般每106个白细胞中仅夹杂1个至几个CTCs，灵敏度一直是CTCs 检测及其应用的主要障碍。
迄今为止，尚未发现一项CTCs分离与检测技术能全面满足临床需求，CTCs分离、富集、体外原代培养、分子表观遗传特征的研究及其临床应用价值都还在不断探索和发展中，对它们的深层次和全方位的分析将有助于指导并推动CTCs的临床转化及应用。
目前临床上主要是通过CTCs的计数来预测肿瘤患者的复发、转移和生存。
现阶段普遍使用的CTCs分离技术大致分为两类：基于细胞表面蛋白质表达的生物分离技术和基于肿瘤细胞物理学特点的物理分离技术。
第一类技术中，以CellSearch平台为代表的阳性磁分离法使用最早且较广泛。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Clin Cancer Res：狩猎循环肿瘤细胞
作者：Beyond 来源：生物谷 2012-10-30 10:29:06
2012年10月30日讯 /生物谷BIOON/ --标准样品管中7.5毫升血液用于检测转移性
乳腺癌，前列腺癌，大肠癌患者的血液中循环肿瘤细胞（CTCs）是远远不够的。
这些CTCs是癌症患者转移的主要原因。
如果它们的特征可以被有效地研究分析，那么是可以确定最有效的治疗手段，改善患者预后的。
然而，检测一类特定的细胞受到患者透
析全部血液量的影响。
Frank Coumans等在杂志Clinical Cancer Research上发表最新研究证实了上述观点。
循环肿瘤细胞（CTCs）的标准测试要用到7.5毫升的血液样品，具体是使用磁性粒子
从血液中将CTC与其它组分分离开来。
但是， Coumans博士发现，这种方法无法检
测到到所有癌症患者体内的循环肿瘤细胞，成功率估计只有一半左右。
因此，对于这
些患者中，该方法是转移评价不充分可靠的指标。
循环肿瘤细胞检测中用到几个具体指标，其中之一是上皮细胞粘附分子（EpCAM），
这类粘附分子在正常血细胞中不存在。
其他指标还包括细胞角蛋白和CD45，但任何白血细胞意外含有微量EpCAM和细胞角蛋白，都可能会被错误地计算成为循环肿瘤细胞。
研究组通过使用一种改进的CellSearch分析仪改进循环肿瘤细胞检测。
然而，根据医
生Coumans表示，只有这样才能检测样品中99％的CTC。
但这种方法需要使用额外
的技术，最好是使用新鲜血液。
博士Coumans的研究是欧洲研究项目的一部分，他预计这一方法将可能进入临床测试阶段。
（生物谷：）
Clin Cancer Res. 2012 Oct 15;18(20):5711-8. doi: 10.1158/R-12-1585. Epub 2012 Sep 25.
Challenges in the enumeration and phenotyping of CTC.
Coumans FA, Ligthart ST, Uhr JW, Terstappen LW.
Source
Department of Medical Cell BioPhysics, MIRA institute, University of Twente, Enschede, The Netherlands.
Abstract
PURPOSE:
Presence of circulating tumor cells (CTC) in metastatic carcinoma is associated with poor survival. Phenotyping and genotyping of CTC may permit "real-time" treatment decisions, provided CTCs are available for examination. Here, we investigate what is needed to detect CTC in all patients.
EXPERIMENTAL DESIGN:
CTCs enumerated in 7.5 mL of blood together with survival from 836 patients with metastatic breast, colorectal, and prostate cancer were used to predict the CTC concentration in the 42% of these patients in whom no CTCs were found and to establish the relation of concentration of CTCs with survival. Influence of different CTC definitions were investigated by automated cell recognition and a flow cytometric assay without an enrichment or permeabilization step.
RESULTS:
A log-logistic regression of the log of CTC yielded a good fit to the CTC frequency distribution. Extrapolation of the blood volume to 5 L predicted that 99% of patients had at least one CTC before therapy initiation. Survival of patients with EpCAM+, cytokeratin+, CD45- nucleated CTCs is reduced by 6.6 months for each 10-fold CTC increase. Using flow cytometry, the potential three-fold recovery improvement is not sufficient to detect CTC in all patients in 7.5 mL of blood.
CONCLUSIONS:
EpCAM+, cytokeratin+, CD45- nucleated CTCs are present in all patients with metastatic breast, prostate, and colorectal cancer and their frequency is proportional to survival. To serve as a liquid biopsy for the majority of patients, a substantial improvement of CTC yield is needed, which can only be achieved by a dramatic increase in sample volume.。