乳腺癌淋巴道转移潜能与癌细胞中钙粘素及金属蛋白酶的关系
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《癌症 》$%&’()( *+,-’./ +0 $.’1(-2 34432 35 6 ! 7 ： !"# 8 !"!
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乳腺癌淋巴道转移潜能与癌细胞中钙粘素 及金属蛋白酶的关系
王丽辉 5， 刘大渔 3， 陈英杰 5， 候 力 5， 王 波 5， 毛利民 5， 吕 申 D!
（5E 大连医科大学病理教研室，辽宁 大连 55"43<； 3E 中国科学院大连化学物理研究所 5>4< 组，辽宁 大连 55"43D； DE 大连医科大学附属第二医院实验中心，辽宁 大连 55"43< ）
随访截止于 J!!! 年 J; 月 >J 日，随访率为 ">C !W （K" X :;） ， 中位生存时间 :; 个月。 !" # 试剂 抗 34E&0 单克隆抗体 （Y84MM!;6 北京中山公 司， 稀释度 J Z JMM） ； 抗 74E&0 单克隆抗体 = ![4N;"6 日本， 稀释度 J Z JMM B ； 抗 8894! 单克隆 \PR 公司， （Y84M>>L6 北京中山公司 6 工作液） 抗体 。 !" $ 方法 JC >C J 免疫组化染色：将标本制成 K S L !- 的连 续切片， 二甲苯脱蜡， 梯度酒精水化， 微波抗原修复 （解冻档 JM -./，切片放入 1T "C M 的枸橼酸缓冲液 （按说明书） 中） 。 采用 ]9 法染色 ， 苏木素 ^_P 显色。 复染。取已知阳性组织作阳性对照，以 9P] 替代一 抗作空白对照。 JC >C ; 结果判定：阳性表达以细胞膜和 X 或细胞 浆内出现棕黄色颗粒为准。 计数 L 个高倍视野或 J M 分为无色， J 分为 MMM 个细胞。按染色强度计分： 淡黄色， ; 分为棕黄色。按阳性细胞所占百分比计 分： M 分为阴性， J 分为阳性细胞 $ JMW ， ; 分为阳 性细胞 JJW S LMW ， > 分为阳性细胞 LJW S :LW ， K 分为阳性细胞 ‘ :LW 。染色强度与阳性细胞所 占百分比乘积 > S L 分记为 （ a ） ， " S ! 分为 （ a
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材料和方法
研究对象 :; 例乳腺癌组织选自 J!N: 年 S J!!> 年大连
医科大学附属第二医院存档石蜡包埋标本，其中无 淋巴结转移者 >> 例， 有淋巴结转移者 >! 例。 患者年 龄 ;K S :M 岁， 中位年龄 L; 岁， 均为女性， 获取可用 标本均为乳腺浸润性 于实验的癌转移淋巴结 ;L 枚。 （单纯癌和硬癌 >" 例， 癌， 其中浸润性导管癌 "N 例 其 他类型 >; 例） ， 浸润性小叶癌 K 例。患者术前未经任 何抗肿瘤治疗， 术后放、 化疗时间不等， 所有标本均在 《 T3 染色，光镜观察的基础上依据 肿瘤病理学》标 准进行组织学分级 U J V ，并选择细胞生长状况良好部 位进行免疫组织化学染色。 随访时间 :; S J;J 个月，
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，肿瘤转移 是导致其临床治疗失败的主要原因。乳腺癌早期转 移的途径为淋巴道，癌细胞转移至淋巴结后不但可 以造成局部组织的破坏， 而且能够在淋巴结中隐匿， 成为其他脏器转移的发源地。因此，乳腺癌淋巴道 转移相关因素的阐明，对采取有效遏制其淋巴道转 移的措施、判断预后及选择治疗方案均具有重要意 义。癌细胞脱离原发灶和降解细胞外基质都是完成 （ E&0$%*./6 E&0） 是粘附分 转移的关键步骤。钙粘素 子家族中的一种，其正常表达对维持正常的细胞粘 附和组织结构的完整有重要作用。基质金属蛋白酶 （-&(*., -%(&@@)1*)(%./&+%+6 889+） 可以降解多种细 胞外基质， 帮助肿瘤细胞突破基底膜屏障， 进出淋巴 管完成转移。本实验利用免疫组织化学方法检测了 （34E&0） 、 神经性钙粘素 乳腺癌细胞中上皮性钙粘素 （8894!） 的表达情 = 74E&0 B 和基质金属蛋白酶 4! 况，探讨它们的表达与乳腺癌肿瘤细胞浸润及转移 的相关性，旨在为有效治疗这一肿瘤提供一些理论 依据。
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王丽辉， 等 C 乳腺癌淋巴道转移潜能与癌细胞中钙粘素及金属蛋白酶的关系
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【摘 要 】 背景及目的： 目前尚缺少有效评价乳腺癌淋巴道转移潜能的理想指标。 本研究旨在通过检测上皮性
、神经性钙粘素 （H91.G%(-&’2 H9$.G）和基质金属蛋白酶 9! 6 B.F-&@ B(F.//+I-+F(&’.)(9!2 钙粘素 （A91.G%(-&’2 A9$.G） 方法：采用免疫组织化学 LK JJK9! 7 基因产物在乳腺癌组织中表达的情况来探讨它们与乳腺癌浸润和转移的关系。 （其中淋巴结转移 D! 例， 方法检测 A9$.G、 无淋巴结转移 DD 例 ） 中的表达， 并用 H9$.G 和 JJK9! 在 <3 例乳腺浸润癌 结果：A9$.G 表达在淋巴结转移组和无淋巴结转移组乳腺癌肿瘤细胞中 多因素 $+@ 比例风险模型分析患者的预后。 （ ! M 4E 445 ） 的平均秩次分别为 3!E 5! ， 两组差异显著 ， ;#E 5; ， A9$.G 表达与乳腺癌转移呈负相关； H9$.G 和 JJK9! 在淋巴结转移组乳腺癌细胞中的平均秩次分别为 ;4E 4; 和 ;3E !< ；在无淋巴结转移组乳腺癌肿瘤细胞中的平均秩 （ ! M 4E 4# ） 二者在淋巴结转移组与无淋巴结转移组的表达均具有显著性差异 ， 与乳腺癌 次分别为 D3E D3 和 3>E ># 。 淋巴结转移呈正相关。 结论：乳腺癌的淋巴道转移与 A9$.G、 A9$.G 高表达者生存时间长。 H9$.G 和 JJK9! 的表达具 有显著相关性， 检测这几种蛋白表达将有助于判断乳腺癌的转移潜能及预后。 关键词： 乳腺肿瘤: 淋巴道转移 : 上皮性钙粘素 : 神经性钙粘素 : 基质金属蛋白酶 9! 中图分类号： N<D<E ! 文献标识码： O （3443 ） 文章编号： 5444 8 ;"<P 4! 8 4!"# 8 4#
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" 分为低表达。 JC >C > 统计学处理：分析各蛋白表达与肿瘤淋巴 结转移情况，患者年龄，肿瘤大小、病理分型及组 织学分级的相互关系采用成组设计两样本比较 （ 8&//4b$.(/%A #%+( ） 秩 和 检 验 ， 多 个 样 本 比 较 （ [*’+I&@4b&@@.+ ） 秩和检验， 各蛋白表达的相关性采 用 ]1%&*-&/ 等级相关检验。多因素 E), 比例风险 （ 8’@(.D&*.&(*.D% E), 1*)1)*(.)/&@ $&F&*0+ -)0%@ ） 模型 分析各因素对生存期的影响， 所有数据处理均应用 ]9]]JMC M 进行运算。
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乳腺癌淋巴道转移潜能与癌细胞中钙粘素 及金属蛋白酶的关系
王丽辉 5， 刘大渔 3， 陈英杰 5， 候 力 5， 王 波 5， 毛利民 5， 吕 申 D!
（5E 大连医科大学病理教研室，辽宁 大连 55"43<； 3E 中国科学院大连化学物理研究所 5>4< 组，辽宁 大连 55"43D； DE 大连医科大学附属第二医院实验中心，辽宁 大连 55"43< ）
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乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，肿瘤转移 是导致其临床治疗失败的主要原因。乳腺癌早期转 移的途径为淋巴道，癌细胞转移至淋巴结后不但可 以造成局部组织的破坏， 而且能够在淋巴结中隐匿， 成为其他脏器转移的发源地。因此，乳腺癌淋巴道 转移相关因素的阐明，对采取有效遏制其淋巴道转 移的措施、判断预后及选择治疗方案均具有重要意 义。癌细胞脱离原发灶和降解细胞外基质都是完成 （ E&0$%*./6 E&0） 是粘附分 转移的关键步骤。钙粘素 子家族中的一种，其正常表达对维持正常的细胞粘 附和组织结构的完整有重要作用。基质金属蛋白酶 （-&(*., -%(&@@)1*)(%./&+%+6 889+） 可以降解多种细 胞外基质， 帮助肿瘤细胞突破基底膜屏障， 进出淋巴 管完成转移。本实验利用免疫组织化学方法检测了 （34E&0） 、 神经性钙粘素 乳腺癌细胞中上皮性钙粘素 （8894!） 的表达情 = 74E&0 B 和基质金属蛋白酶 4! 况，探讨它们的表达与乳腺癌肿瘤细胞浸润及转移 的相关性，旨在为有效治疗这一肿瘤提供一些理论 依据。
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【摘 要 】 背景及目的： 目前尚缺少有效评价乳腺癌淋巴道转移潜能的理想指标。 本研究旨在通过检测上皮性
、神经性钙粘素 （H91.G%(-&’2 H9$.G）和基质金属蛋白酶 9! 6 B.F-&@ B(F.//+I-+F(&’.)(9!2 钙粘素 （A91.G%(-&’2 A9$.G） 方法：采用免疫组织化学 LK JJK9! 7 基因产物在乳腺癌组织中表达的情况来探讨它们与乳腺癌浸润和转移的关系。 （其中淋巴结转移 D! 例， 方法检测 A9$.G、 无淋巴结转移 DD 例 ） 中的表达， 并用 H9$.G 和 JJK9! 在 <3 例乳腺浸润癌 结果：A9$.G 表达在淋巴结转移组和无淋巴结转移组乳腺癌肿瘤细胞中 多因素 $+@ 比例风险模型分析患者的预后。 （ ! M 4E 445 ） 的平均秩次分别为 3!E 5! ， 两组差异显著 ， ;#E 5; ， A9$.G 表达与乳腺癌转移呈负相关； H9$.G 和 JJK9! 在淋巴结转移组乳腺癌细胞中的平均秩次分别为 ;4E 4; 和 ;3E !< ；在无淋巴结转移组乳腺癌肿瘤细胞中的平均秩 （ ! M 4E 4# ） 二者在淋巴结转移组与无淋巴结转移组的表达均具有显著性差异 ， 与乳腺癌 次分别为 D3E D3 和 3>E ># 。 淋巴结转移呈正相关。 结论：乳腺癌的淋巴道转移与 A9$.G、 A9$.G 高表达者生存时间长。 H9$.G 和 JJK9! 的表达具 有显著相关性， 检测这几种蛋白表达将有助于判断乳腺癌的转移潜能及预后。 关键词： 乳腺肿瘤: 淋巴道转移 : 上皮性钙粘素 : 神经性钙粘素 : 基质金属蛋白酶 9! 中图分类号： N<D<E ! 文献标识码： O （3443 ） 文章编号： 5444 8 ;"<P 4! 8 4!"# 8 4#
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" 分为低表达。 JC >C > 统计学处理：分析各蛋白表达与肿瘤淋巴 结转移情况，患者年龄，肿瘤大小、病理分型及组 织学分级的相互关系采用成组设计两样本比较 （ 8&//4b$.(/%A #%+( ） 秩 和 检 验 ， 多 个 样 本 比 较 （ [*’+I&@4b&@@.+ ） 秩和检验， 各蛋白表达的相关性采 用 ]1%&*-&/ 等级相关检验。多因素 E), 比例风险 （ 8’@(.D&*.&(*.D% E), 1*)1)*(.)/&@ $&F&*0+ -)0%@ ） 模型 分析各因素对生存期的影响， 所有数据处理均应用 ]9]]JMC M 进行运算。