脂肪酶、淀粉酶测定方法

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脂肪酶测定标准操作程序

脂肪酶测定标准操作程序1. 摘要脂肪酶检测用于定量测定人血清或血浆中脂肪酶的活力，用于临床相关疾病的辅助诊断。

2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中LPS 的浓度。

3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定LPS 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的二脂肪酶监测试剂盒采用的是酶法。

5. 原理1，2-领-二月桂基-消旋-甘油-3戊二酸（6-甲基试卤素灵）酯−−→−脂肪酶1，2-领-二月桂基-消旋-甘油+戊二酸+6-甲基试卤素灵 1，2-领-二月桂基-消旋-甘油-3戊二酸（6-甲基试卤素灵）酯在样本中的脂肪酶的作用下水解生成1，2-领-二月桂基-消旋-甘油、戊二酸以及红色的6-甲基试卤素灵。

由于甲基试卤素灵在波长570nm 附近处有吸收峰所以在一定脂肪酶活力范围内，570nm 处吸光度的变化值与样本中脂肪酶活力成正比。

6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：R1：Good ’s 缓冲液、共脂肪酶、脱氧胆酸钠、乙酸钙R2：酒石酸缓冲液、1，2-领-二月桂基-消旋-甘油-3戊二酸（6-甲基试卤素灵）酯、牛脱氧胆酸钠。

7.3 试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。

试剂不可冰冻。

试剂开瓶后冷藏于分析仪中可以保存14天。

7.4 试剂准备：试剂为即用式。

8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

淀粉酶活力的测定方法

淀粉酶活力的测定方法淀粉酶是一种能够降解淀粉的酶类。

测定淀粉酶活力的方法主要有光密度法、滴定法、浊度法、电极法等。

下面将详细介绍这几种方法。

一、光密度法光密度法是利用淀粉酶在一定温度和pH值条件下降解淀粉产生的葡萄糖，与p-二硫化苯胺生成的被称为多脱氧萘酚蓝的有色物质在特定波长下的吸光度变化来测定淀粉酶活力。

测定步骤：1. 准备试剂：液体缓冲液、淀粉溶液、pH 7.0缓冲液、2%～4%淀粉溶液、0.1% p-二硫化苯胺、1%酶液。

2. 在试管中加入2 mL pH 7.0缓冲液、2 mL 2%～4%淀粉溶液和1 mL 酶液，置于37恒温槽中培养10分钟。

3. 取出试管后，立即加入5 mL p-二硫化苯胺试剂和1 mL液体缓冲液，混匀后，放置15分钟使产生的多脱氧萘酚蓝发色充分。

4. 测定吸光度：使用特定波长的光源（通常为540 nm）对反应液进行吸光度测定。

5. 用纯水代替酶液重复上述步骤，结果作为对照组。

6. 计算淀粉酶活力：对照组的吸光度减去实验组的吸光度，乘以吸光度系数K （由标准淀粉酶活力校准得出），即可得出淀粉酶的活力。

二、滴定法滴定法是通过滴定试剂滴定淀粉酶产生的葡萄糖来测定淀粉酶活力的方法。

测定步骤：1. 准备试剂：碘滴定剂（0.02 mol/L碘酸钾，0.2 mol/L硫酸），0.1 mol/L氢氧化钠溶液，0.1%淀粉溶液。

2. 取一定量的淀粉酶加入试管中。

3. 预热培养：将试管放置于37水浴中预热，约5分钟。

4. 添加滴定剂：将试管中的淀粉加入10 mL淀粉溶液中，迅速搅拌。

5. 滴定：在反应时加入少量滴定剂，然后滴定到反应性红色消失的那一点为止。

6. 计算淀粉酶活力：滴定所使用的硫酸溶液的体积与滴定所使用的碘滴定剂的体积之间的比值即为滴定效价，根据滴定效价计算淀粉酶的活力。

三、浊度法浊度法是通过测定淀粉酶降解淀粉导致溶液浑浊度变化来测定淀粉酶活力的方法。

测定步骤：1. 准备试剂：0.1 mol/L淀粉溶液，0.1 mol/L缓冲液，1%淀粉酶溶液。

淀粉酶和脂肪酶联合测定对诊断胰腺炎的作用

２－１２ｈ开始升高，１２ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ２４ｈ达高峰，４８ｈ开始下降，持续３—５天。淀粉酶升高的程度和胰腺损伤的程度不一定成正相关，但是升高程度越大，即表明急，申子瑜．全国临床检验操作规程【Ｍ】．第３版．福建：
东南大学出版社，２００６，４２５，４３３．
炎的可能性就越大。血清脂肪酶常在起病后４—８ｈ内活性增高。２４ｈ达峰值，【３】杨贵英．王继贵，杨泽民．血清脂肪酶和淀粉酶对急性胰腺炎的比价研究
持续１０—１５天，在急性胰腺炎时，脂肪酶多和淀粉酶平行升高．且升高的程度较大。可达参考值的２—４０倍。脂肪酶持续时间较长。对于就诊较晚的急性胰腺炎患者有诊断价值，而且从上两表可以看出．脂肪酶的特异性是优于淀粉酶的，因为淀粉酶的升高也可常见于一些非胰腺疾病：例如流行性腮腺炎、巨淀
【关键词】逆行交锁髓内钉；股骨远端骨折；临床疗效
股骨远端骨折则是指人体股骨下端处１５ｅｒａ内的部位出现了骨折，因为该缝合。术后还要对患者的患肢进行石膏固定 …。
部分的骨骼结构比较复杂，同时骨骼外皮比较薄弱，周厨保护组织较少，因此
２、结果
即胰腺各种消化酶被异常激活而产生胰酶自身消化、胰管阻塞，阻碍了酶进入肪酶和淀粉酶以提高胰腺炎诊断效率是非常有实用价值的。
十二指肠，从而反流入血，使其各自在血中的浓度骤然上升【４】。因此，检测
血中相关酶的浓度变化即可诊断出胰腺炎。３．２现在淀粉酶的测定是诊断胰腺炎最常用的，血清淀粉酶在起病后

脂肪酶测定标准操作规程

血清脂肪酶测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清脂肪酶(缩写LPS)测定；组合项目申请：胰腺炎检测。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1天，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。

-20℃可保存数月；-70℃至少可保存半年；应避免标本反复冻溶。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。

抽血前3天内避免高脂饮食，24小时内不饮酒。

2.3.2如果使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

EDTA、草酸盐、氟化钠、枸橼酸对酶有抑制作用。

2.1.5 抽血前最好停用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。

3 方法原理采用1,2-邻-二月桂宗甘油－3-戌二酸－(6'-甲基试卤灵）-酯作为底物，OH－脂肪酶1,2-邻-二月桂宗甘油－3-戌二酸－(6'-甲基试卤灵)-酯 ----------1,2-邻-二月桂宗甘油 + 戌二酸 + 甲基试卤灵在570nm波长下，根据产物红色的甲基试卤灵生成速率测定脂肪酶的活性。

脂肪酶活测定

一．脂肪酶活测定原理：脂肪酶在一定条件下，将甘油三酯水解。

在不同水解阶段可分别产生脂肪酸、甘油二酯、甘油一酯及甘油。

水解所产生的脂肪酸可以用标准的氢氧化钠滴定，用滴定值表示酶活力。

酸碱滴定法 :酶活力以国际单位表示，即在一定条件下，脂肪酶水解脂肪每分钟产生1微克分子脂肪酸的酶量定为一个国际单位。

脂肪酶活力单位＝(A-B)*nf/t*v式中：A为样品耗碱液ml数，B为对照组耗碱液ml数，n为每毫升碱液微克分子数(n=cM=0.05x23x1000)，f为稀释倍数，t为作用时间(分),v:反应的酶液的体积二．挥发性脂肪酸（VFA）的测定滴定法分析1原理：将废水以磷酸酸化后，从中蒸发出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用NaOH 溶液滴定馏出液。

废水中的氨态氮可能对测定形成干扰，因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮。

4．计算挥发性脂肪酸含量计算如下：VFA=V (NaOH)*C*1000/Vs (mmol/L)式中：V(NaOH)-----滴定消耗的NaOH标准溶液的体积，ml;c ------ 滴定消耗的NaOH标准溶液的准确浓度，mol/L;Vs--------被测废水水样的体积，ml.酶活力定义：40℃,ph为5.6的条件下，每分钟酶解淀粉释放出lmg的还原糖(葡萄糖)所需酶量为一个酶活力单位。

1U=1mg还原糖\min.ml酶三．淀粉水解酶活性原理：淀粉的水解产物麦芽糖及其他还原性糖能与3，5-二硝基水杨酸试剂反应，使其还原生成红色3-氨基-5-硝基水杨酸。

在一定范围内，其颜色深浅与淀粉酶水解产物的浓度成正比，可用麦芽糖(或葡萄糖)浓度表示，用比色法测定淀粉生成的还原糖的量，以单位体积样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。

四.纤维素酶酶活力测定：原理：纤维素酶水解纤维素，产生的纤维二糖、葡萄糖等还原糖，能将3,5-二硝基水杨酸中硝基还原成橙黄色的氨基化合物，在550nm波长处有最大光吸收，在一定的范围内，还原糖的量与反应液的颜色强度成比例关系，利用比色法测定其还原糖的量就可测定纤维素酶的活力。

血清淀粉酶和脂肪酶联合检测在急性胰腺炎诊断中的效果及检出率评价

血清淀粉酶和脂肪酶联合检测在急性胰腺炎诊断中的效果及检出率评价摘要：目的：研究血清淀粉酶和脂肪酶联合检测在急性胰腺炎诊断中的效果及检出率评价。

方法：试验时间段为2019年4月～2021年4月，选取来我院消化内科94例胰腺炎患者，分别采用血清淀粉酶方法和脂肪酶联合血清淀粉酶方法，统计所有患者检出率。

结果：联合检测方法检出率高于单一检测方法，两者差异具有统计学方面意义（P＜0.05）。

结论：在临床上对于急性胰腺炎患者采用脂肪酶联合血清淀粉酶方法可以有效提升检出率，为今后的治疗提供了有力依据，在诊断方面具有良好的应用前景。

关键词：脂肪酶；血清淀粉酶；急性胰腺炎；检出率急性胰腺炎作为一种常见的消化内科疾病，在发作时会导致患者产生各种躯体不适，其中包括上腹部剧烈疼痛感、恶心、呕吐等，严重甚至还会引发胰腺炎、肾功能衰竭等并发症，对患者生命健康产生了严重威胁。

临床对于该疾病通常选择对症治疗、药物治疗，虽然可以缓解症状，但是却无法达到改善营养状态的目的，在治疗期间容易引发各种并发症，增加了治疗难度。

基于此，应当及时对患者进行诊断，第一时间发现患者病情进展，为后续的治疗奠定基础，保证患者的生命长度。

有研究表示脂肪酶联合血清淀粉酶可以提升诊断结果的准确率，减少了漏诊的概率，使得医生能够据此及时制定出正确的临床治疗方案，但是关于这方面的研究较少，还需要进一步探索。

接下来，本文将就血清淀粉酶与脂肪酶联合血清淀粉酶两种方法应用于急性胰腺炎患者诊断中的效果做出对比研究：1资料与方法1.1一般资料选取2019年4月～2021年4月来我院胰腺炎患者94例，对照组男女（46/48）例，年龄40~70岁，平均年龄（55.00±5.00）岁，病程为4~7年，平均病程为（5.50±0.50）年。

纳入标准：①患者及其家属对于试验知情并同意。

②患者无合并重度基础病。

③患者可以顺利配合实验，配合度符合试验标准。

排除标准：①患者具有全身感染性疾病。

血清脂肪酶操作程序

血清脂肪酶操作程序1.目的规范血清脂肪酶(LPS)检测试验，确保检测结果准确性和重复性。

2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。

3.术语4．测定原理比浊法LPS甘油三酯 + 2 H 2O单酸甘油酯+2脂肪酸在上述反应中，通过在340nm 波长处测定吸光度的下降速率，即可测得样本中LPS 的活力。

5. 标本采集与处理5.1标本类型：标本最好不要溶血。

留取标本后请尽快分离血清/血浆。

5.2标本稳定性：血清标本在室温下保存可稳定5天，在20-25℃稳定24h 。

6. 试剂6.1试剂：本科使用朗道试剂盒，干粉试剂。

试剂内主要成分如下：规格: 20×2.5ml6．2试剂准备试剂为液体单试剂，缓冲液溶解后即用。

6．3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定至有效期。

试剂开瓶溶解后2～8℃稳定7天。

7.仪器参数设定AU2700参数设定：朗道试剂仪器参数具体参加试剂厂家提供的相应仪器的参数说明书.8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。

8.1.2仪器经过大保养后。

8.1.3挪动仪器的安装地点。

8.1.4更换试剂批号。

8.1.5室内质控失控。

8．2 AU2700朗道试剂系统的校准：8.2.1 准备：朗道配套校准物,3ml蒸馏水溶解.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存至有效期,溶解后2～8℃稳定5天.8.2.3保存位置：2号冰箱。

8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的相应位置放定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。

9．室内质控及失控纠正：见临床生化室内质控程序9．1质控物来源：柏乐液体质控品(批号:45612/45613)。

9．2质控物储存条件及准备：-15～-20℃保存至有效期，从低温冰箱取出后室温平衡30分钟。

脂肪酶的测定及临床意义

脂肪酶的测定及临床意义
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脂肪酶的测定及临床意义
脂肪酶是一种水解长链脂肪酸甘油酯的酶，血清中的脂肪酶主要来自于胰腺，也有一些来自于其他组织，如胃，小肠黏膜，肺等处者；此外，在白细胞，脂肪细胞，乳汁中也可测到脂肪酶活性。

脂肪酶可由肾小球滤过，并被肾小管全部回吸收，所以尿中测不到脂肪酶活性。

参考值：BMD浊度法（30℃）：成人：30～109U/I．
＞60岁：18～180U/L．
滴定法：0～0.7U/ml 1．5U以上有意义。

血清脂肪酶活性测定可用于胰腺疾病诊断，特别是在急性胰腺炎时，发病后4～8h内血清脂肪酶活性升高，24h达峰值，一般持续8～14天。

脂肪酶活性升高多与淀粉酶并行，但可能开始升高地时间更早、持续时间更长、升高的程度更大。

有报告患急性胰腺炎时脂肪酶比淀粉酶更敏感和特异，因而认为脂肪酶活性升高更有诊断意义，最好是同时检测淀粉酶和脂肪酶。

因脂肪酶活性升高持续的时间较长，所以在疾病的后期测定可能更有意义。

此外血清脂肪酶升高也可见于急腹症、慢性肾病等，但患腮腺炎和巨淀粉酶血症时不升高，此点与淀粉酶不同，可用于鉴别。

测定脂肪酶可用橄榄油或三油酸甘油酯做底物，脂肪酶只作用在脂-水界面，因此，所用之底物必须呈乳胶状态，其反应速度将随乳状液之分散度（表面积）而增加。

由胰腺分泌的共酯酶连于胆酸盐表面，形成共酯酶-胆酸盐复合物，再附着于底物表面，这种形式的底物和脂肪酶有很高的亲和力。

虽然脂肪酶对急性胰腺炎诊断比较特异和灵敏，但以前由于方法学问题，未得到临床普遍应用。

现已有试剂盒供应，有利于临床推广应用。

酶样品测定方法

酶样品待测酶液制备方法磷酸缓冲液的制备中性蛋白酶（pH=7.5）准确称取磷酸氢二钠6.02g和磷酸二氢钠0.5g，加水定容至1000ml，配好后用pH计校正。

淀粉酶（pH=6）称取磷酸氢二钠45.23g，柠檬酸8.07g，用水溶解并定容于1000ml，配好后用pH计校正。

脂肪酶（pH=7.5）称取磷酸二氢钾1.96g，十二水磷酸氢二钠39.62g，用水溶解并定容于500ml，配好后用pH计校正。

酶液的制备称取样品1.000g至10ml试管中，加入磷酸缓冲液5ml，置于高速匀浆机捣碎，然后连残渣一起倒入100ml容量瓶中定容，室温静置1h，期间反复震荡3次，然后取4ml在16000r/min下离心5分钟，取上清液4℃保存待测。

酶活测定淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶采用建成生物工程研究所试剂盒测定，中性蛋白酶采用福林酚法测定。

淀粉酶原理：淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖及糊精，在底物浓度已知并且过量的情况下，加入碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物，根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量，从而计算出淀粉酶的活力。

单位定义：在37℃、pH6.0下，与底物作用30分钟，水解10mg淀粉定义为1个淀粉酶活力单位。

分析方法：计算：酶活力（U/g）= (空白管吸光度-测定管吸光度)/空白管吸光度×(0.4×0.5/10) ×(30分钟/7.5分钟) ÷（取样量×酶液浓度）脂肪酶原理：甘油三酯和水制成乳化液，因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状，胶束中的甘油三酯在脂肪酶的作用下发生水解，使胶束分裂，散射光或浊度因而降低，降低的速率与脂肪酶活力有关。

单位定义：在37℃条件下，在反应体系中与底物反应1分钟，每消耗lμmol 底物为1个脂肪酶活力单位。

分析方法：1、将分光光度计在420nm处以Tris缓冲液调零。

2、将底物缓冲液在37℃预温5分钟。

3、在试管中加入0.025ml待测样本，再加入试剂四0.025ml，然后加入4ml预温的底物缓冲液，盖住管口，颠倒混合5次，在420nm处比浊，读取吸光度值A1。

淀粉酶、脂肪酶联合测定在胰腺疾病诊断中的意义

李
忠：东莞市石排医院
广东东莞
５３３２３０
维普资讯
现代医院２００８年２月第８卷第２期
专业技术篇
ＭｏｅＨｏｉｌＦｂ２０ｏｏ２ｄｍｓｔｅ０８ＶｌＮｐａ８
高胰腺炎的诊断有很好的作用。
２倍。尿淀粉酶在急性胰腺炎时，２— ４ｈ开始增高，１２下降比血清淀粉酶慢。因此，Ｊ在血淀粉酶正常时，检查尿淀粉
酶可能更有意义Ｊ但尿淀粉酶值受患者尿量的影响。淀，粉酶是诊断胰腺炎的重要依据，其特异性差。如果与脂肪但
表１胰腺炎组病程中淀粉酶、肪酶阳性的动态变化（）脂％
态检测，比较分析，为临床诊断提供实验室诊断依据，现报告分析如下。
１材料与方法１１检测对象．
表２淀粉酶和脂肪酶联合检测对胰腺炎的诊断价值
２结果
流入血，使其各自的血浓度骤然升高Ｊ。因此测定血液中
的相关酶的浓度变化即可诊断出胰腺炎。
临床诊断８Ｏ例需测淀粉酶的病人中，非胰腺炎者淀粉
酶增高不大，２例被诊断为胰腺炎者淀粉酶和脂肪酶测定４结果见表１。可以看出，急性胰腺炎时ＡＭＹ（淀粉酶）急剧升高，以后慢慢下降，ｉ（Ｌｐ脂肪酶）升高稍慢，但下降幅度没
【关键词】脂肪酶淀粉酶胰腺炎
急性胰腺炎是一种胰腺及周围组织被胰腺分泌的消化酶自身消化的化学性炎症。发病急，和其他急腹症较难鉴别，少数病情重，胰腺出血坏死，伴腹膜炎、休克等各种并发症，病死率高，医疗风险大。为提高胰腺炎的诊断和治疗效果，科同时对患者的血、淀粉酶和血脂肪酶同时进行动我尿

浅谈淀粉酶的临床检验

浅谈淀粉酶的临床检验摘要】目的讨论淀粉酶检验。

方法测定血清淀粉酶方法很多，目前提倡采用EPS-PNPG7法，即P硝基苯酚-麦芽7糖淀粉酶法。

结论血清淀粉酶在血中8～12h开始升高，48h后下降，3～5d后恢复正常。

持续高至l周以上者，常表示病变的继续、扩大、进展或复发。

病程中数值波动很大，在早期进行多次测定甚为重要。

【关键词】淀粉酶检验1 生化特性及病理生理在临床检查中，胰腺最主要有三种胰酶，即胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶(α-amylase)。

正常情况下，有一部分胰酶可移行至血液中，然后再从尿液中排泄。

胰腺有病变时，胰酶在血液及尿液中均增加。

其中最常用于临床检查的是淀粉酶。

淀粉酶能将淀粉、直链淀粉、淀粉粒纤维素等多糖类分解为糊精，再作用使其变为麦芽糖、异酶麦芽糖、葡萄糖。

淀粉酶不仅在胰腺疾患、非胰腺疾患、唾液腺疾患的诊断中有价值，而且是腹部疾患、巨淀粉酶血症等诊断上的重要指标。

但是淀粉酶升高不是胰腺炎等胰腺疾病诊断的特有依据。

血清淀粉酶来自胰腺、腮腺和肝脏组织，由肝肾代谢、排泄，上述几个器官病变可以影响血清淀粉酶活力。

血清淀粉酶在血中8～12h开始升高，48h后下降，3～5d后恢复正常。

持续高至l周以上者，常表示病变的继续、扩大、进展或复发。

病程中数值波动很大，在早期进行多次测定甚为重要。

尿淀粉酶l2～24h开始升高，可高出参考范围l倍，较为不规则，且不灵活，不如血清可靠，有的单位已经不开展尿淀粉酶检查。

脂肪酶(1ipase)血清正常值为28～280U/L，3d后才开始增高，维持较久，早期诊断帮助不大。

非胰腺疾患，如肺脂肪栓塞、骨折(脂肪细胞坏死)、腹部手术等，脂肪酶活性也增高。

腹痛患者疑为胰腺炎时，即便是发病小于8h，也可查血清淀粉酶。

如淀粉酶不能除外急性胰腺炎，可作为对比检查的基础，待超过8h后再进行复查，明确诊断。

除做血清淀粉酶检查外，还要做B超、腹腔镜、CT检查。

2 血清淀粉酶的检测2.1测定方法：测定血清淀粉酶方法很多，目前提倡采用EPS-PNPG7法，即P硝基苯酚-麦芽糖淀粉酶法。

脂肪酶淀粉酶

淀粉酶和脂肪酶是两个经常一起出现的检验项目，经常用于胰腺炎的诊断，胰腺炎中两者均会升高，在胰腺炎的诊断中同时测定两种酶的活性可以提高诊断的敏感性及特异性，但两者也存在着差异，今天就和大家一起学习下两种酶。

基本情况淀粉酶顾名思义是分解淀粉和糖原的酶，主要由胰腺和唾液腺分泌，因此可以分为唾液型淀粉酶（S-AMS）和胰腺型淀粉酶（P-AMS）。

淀粉酶分子量较小，可以通过肾小球的滤过在尿中出现，因此可以在尿中测到淀粉酶，这也是淀粉酶与脂肪酶的区别之一。

脂肪酶是消化脂类的水解酶，主要由胰腺分泌，胰腺组织中脂肪酶的浓度是血清脂肪酶的20000 倍，其他器官如食管、胃和小肠也可以分泌脂肪酶。

胰腺的脂肪酶主要由腺泡细胞的顶部分泌入腺腔，脂肪酶在胰腺中以酶原的形式存在，大部分脂肪酶均经过腺腔转运至小肠，在小肠中被肠激酶激活成为有活性的脂肪酶，参与脂类的消化。

仅有很少一部分（约1%）脂肪酶会通过腺泡细胞的基底部分泌入淋巴管和毛细血管，从而进入血液循环中。

一部分血清脂肪酶会由肾脏分泌，通过肾小球滤过，但在肾小管被重吸收，因此不会出现在尿里，尿中测不到脂肪酶活性。

升高的意义急性胰腺炎是引起淀粉酶升高的最常见原因，胰腺炎时病变的胰腺可以释放过多的淀粉酶入血，导致血淀粉酶升高。

一般急性胰腺炎发病后2-12 小时血淀粉酶开始升高，持续3-5 天。

但并不是所有胰腺炎的病人淀粉酶都会增高，也有少部分胰腺炎病人淀粉酶正常或仅轻度增高，因此还要更加临床症状及影像学特征做出诊断。

腮腺炎时由于腮腺型淀粉酶释放入血过多，也会引起血淀粉酶增高，此时脂肪酶通常不高。

一些恶性肿瘤如肺癌、卵巢癌、胃癌、多发性骨髓瘤等，由于癌组织的异位分泌，也可以导致淀粉酶升高。

另外一些消化系统疾病如胆囊炎、胆石症以及肾脏疾病导致淀粉酶排除障碍也可以引起淀粉酶升高。

还有一种比较少见的巨淀粉酶血症，由于淀粉酶与免疫球蛋白结合成为大分子，而不能从肾脏排出，从而使血淀粉酶升高，此时尿淀粉酶通常降低。

血清淀粉酶和脂肪酶联合检测在急性胰腺炎诊断中的应用

血清淀粉酶和脂肪酶联合检测在急性胰腺炎诊断中的应用摘要目的探讨血清淀粉酶联合脂肪酶检测诊断急性胰腺炎的价值。

方法选取48例急性胰腺炎患者作为观察对象，对其进行血清淀粉酶、脂肪酶检测，统计单独淀粉酶检测的阳性率，单独脂肪酶检测的阳性率及脂肪酶联合淀粉酶检测的阳性率，比较其差异性。

结果患者血清淀粉酶阳性例数为27例，阳性率为56.25%；血清脂肪酶的阳性例数为26例，阳性率为54.17%；联合检测的阳性例数为38例，阳性率为79.17%；血清脂肪酶与血清淀粉酶的阳性率相比差异无统计学意义（P>0.05）。

血清淀粉酶联合血清脂肪酶检测的阳性率明显高于血清脂肪酶的阳性率及血清淀粉酶的阳性率，差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论联合检测血清淀粉酶及脂肪酶的阳性率明显高于单独检测淀粉酶及脂肪酶的阳性率，可提高急性胰腺炎的诊断率，在临床中应推广应用。

关键词血清淀粉酶；脂肪酶；联合检测；急性胰腺炎；诊断急性胰腺炎是临床急重症，发病初都以急性腹痛为主要症状，容易与胃病、阑尾炎等急腹症患者相混淆造成误诊，延误患者的治疗，由于急性胰腺炎进展极快，治疗不及时会危及患者的生命。

目前临床上诊断急性胰腺炎以检查血清淀粉酶为主，但由于发病时间等原因，造成单纯检查血清淀粉酶阳性率不高。

故如何提高急性胰腺炎的诊断率，改善患者的预后已经成为临床研究的热点。

有学者提出血清淀粉酶联合脂肪酶可提高急性胰腺炎的诊断率[1]，但对此的研究却相对较少，故为探讨血清淀粉酶联合脂肪酶检测对诊断急性胰腺炎的价值，作者回顾性分析2014年1月～2015年1月在本院进行治疗的48例急性胰腺炎患者的临床资料，取得了良好效果，现将经验报告如下。

1 资料与方法1. 1 一般资料本组研究资料为2014年1月～2015年1月在本院进行治疗的48例急性胰腺炎患者，所有患者都经B超、CT等实验室检查及临床症状及体征确诊为急性胰腺炎，且符合1996年外科学分会推荐的胰腺炎诊断标准[2]，且通过彩超排除胆结石、胰腺癌、严重肝肾功能损害等影响研究的疾病。

淀粉酶及脂肪酶联合检测在急性胰腺炎早期诊断中的作用

淀粉酶及脂肪酶联合检测在急性胰腺炎早期诊断中的作用摘要】探讨联合检测淀粉酶及脂肪酶对儿童急性胰腺炎的临床诊断价值。

选择39例将急性胰腺炎患者为观察组，39例同期健康体检为对照组以确定AMY及LIP 参考范围。

比较两组AMY及LIP水平，分析两种指标单独及联合检测的诊断性能。

AMY及LPA的阳性率随着发病时间的延长有逐步升高的趋势。

在２～４ｈ时AMY、LPA联合检测，阳性率增至16.07％（9／56）。

16～24ｈ时LPA阳性率明显高于AMY；２～４ｄ后，AMY阳性率明显降低，而LPA的阳性率始终保持在较高水平。

LPA对ＡＰ的诊断灵敏度及特异性明显高于AMY。

单独检测时，LIP的诊断特异性及准确性高于AMY;AMY 及LIP的联合检测具有较高敏感性及阴性预测值，优于单独检测，对急性胰腺炎的诊断及排除具有一定的应用价值。

【】急性胰腺炎淀粉酶脂肪酶【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）33-0270-02急性胰腺炎（AP）是常见病，半个多世纪以来，腹痛加淀粉酶（AMY）升高成为诊断ＡＰ的重要依据，但在其他一些急腹症中ＡＭＹ也可增高。

ＡＰ的临床表现与其他急腹症容易混淆，为导致误诊或漏诊。

脂肪酶（LIPA）测定用于临床诊断ＡＰ，可以增高其灵敏度、特异度。

血淀粉酶（SAMY）、尿淀粉酶（UAMY）和LIPA 测定均可作为ＡＰ的实验室诊断指标。

但由于与ＡＭＹ在胰腺炎患者中升高的时间较短，且存在于多个器官，而UAMY虽在患病时升高持续时间较长，但发病时升高较晚；同时在其他消化道疾病也出现一定程度的升高，故诊断的特异度受到一定限制；而LIPA 在AP时出现较晚，影响早期诊断的灵敏度。

笔者通过联合检测，探讨其在ＡＰ诊断中的意义，现报道如下。

1.资料与方法1.1一般资料选择39例将急性胰腺炎患者为观察组，同期健康体检儿童39例为对照组，其中观察组男20例，女19例；年龄24～57岁，平均（38.1±3.6）岁。

脂肪酶、淀粉酶测定方法

脂肪酶测定——采用p-NPP法取0.5g样品，加去离子水10mL，40℃水浴浸泡2h，过滤。

取滤液1mL于试管中，加入pH8.0缓冲液3mL和1mmol/L p-NPP溶液0.1mL 于40℃下精确反应3min，迅速置于冰上终止反应。

在波长405nm处测定吸光度值。

对照管酶液用等体积去离子水代替，其余试剂相同。

Npp标准曲线Y=0.287x+0.0861（y：吸光度x：NPP浓度（umol/L））试剂配制：1mmol/L p-NPP溶液：称取0.0378g pNPP，加入1mL曲拉通-100与5mL异丙醇，用Tris-HCL（pH8.0）定容至100mL。

pH8.0 Tris-HCl：50mL 0.1M tris碱溶液与29.2mL 0.1M HCl溶液混合，加蒸馏水定容至100mL。

淀粉酶测定称取六神曲0.5g，研细，用20mL去离子水40℃浸泡1h，过滤。

取2只250mL的碘瓶，各加入5%的淀粉液25mL，10mL醋酸钠缓冲液（pH4.5），10mL蒸馏水，摇匀，40℃水浴预热5min。

A管中加入滤液5mL，准确反应1h，立即加2mol/L HCl 1mL终止反应，B管中先加入HCl，再加滤液5mL。

2只碘瓶分别加入0.05mol/L碘液10mL，0.1mol/L氢氧化钠45mL，边滴边振摇，暗处放置20min，加入1mol/L 硫酸2mL，用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定至无色。

每份样品测定3次。

记录消耗硫代硫酸钠的体积，计算得淀粉酶活力。

淀粉酶活力是指1g六神曲粉末在一定条件下(T=40℃，pH=5.0)，1h 内催化可溶性淀粉水解生成葡萄糖的毫克数。

计算公式:淀粉酶活力=［c×(vB－vA)·M·N］/2×m·t式中:c为硫代硫酸钠的浓度(mol/L)，M为葡萄糖的摩尔质量(g/mol)，N为酶液稀释倍数，V A为样品滴定值(mL)，VB为空白滴定液(mL)，m为六神曲的取样量(g)，t为反应时间(h)，淀粉酶活力单位为mg/(g·h) 。

酶活测定方法

酶活测定方法还原法酶与底物在特定的条件下反应,酶可以促使底物释放出还原性的基团。

在此反应体系中添加化学试剂,酶促反应的产物可与该化学试剂发生反应,生成有色物质。

通过在特定的波长下比色,即可求出还原产物的含量,从而计算出酶活力的大小。

色原底物法通过底物与特定的可溶性生色基团物质结合,合成人工底物。

该底物与酶发生反应后,生色基团可被释放出来,用分光光度法即可测定颜色的深浅,在与已知标准酶所做的曲线比较后,即可求出待测酶的活力。

粘度法该法常用于测定纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶的活力。

木聚糖和β-葡聚糖溶液通常情况下可形成极高的粘度,当酶作用于粘性底物时木聚糖和β-葡聚糖会被切割成较小的分子使其粘度大为降低。

基于Poiseuille定律我们知道,只要测定一定条件下溶剂和样品溶液的运动粘度,便可计算特性粘数,并以此来判断酶的活力。

高压液相色谱法酶与其底物在特定的条件下充分反应后,在一定的色谱条件下从反应体系中提取溶液进行色谱分析,认真记录保留时间和色谱图,测量各个样的峰高和半峰高,计算出酶促反应生成物的含量,从而换算出酶活力的数值。

免疫学方法常用于酶活性分析的免疫学方法包括:免疫电泳法、免疫凝胶扩散法。

这两种方法都是根据酶与其抗体之间可发生特定的沉淀反应,通过待测酶和标准酶的比较,最终确定酶活力。

免疫学方法检侧度非常灵敏,可检侧出经过极度稀释后样品中的酶蛋白,但其缺点是不同厂家生产的酶产品需要有不同特定的抗体发生反应。

琼脂凝胶扩散法将酶作用的底物与琼脂混合熔融后,倒入培养皿中或载波片上制成琼脂平板。

用打孔器在琼脂平面上打出一个约4-5mm半径的小孔。

在点加酶样并培养24h以后,用染色剂显色或用展开剂展开显出水解区,利用水解直径和酶活力关系测定酶活力。

蛋白酶活力的测定随着生物技术的发展及环保要求的提高，越来越多的酶制剂应用于制革生产中。

比如浸水，脱毛，软化，脱脂等工序都用到大量的酶制剂，从酶的作用性质来看制革生产中用到的主要是蛋白酶和脂肪酶。

饲用酶制剂的酶活检测方法及评定

饲用酶制剂的酶活检测方法及评定随着我国畜牧业的发展和生物工程技术的不断进步，酶制剂在饲料工业中的应用越来越多。

由于酶制剂能够消除饲料中的某些抗营养因子的负面作用，提高饲料消化率，改善动物生产性能，降低生产成本，因此日益受到饲料界的重视。

但是，由于酶制剂来源比较复杂、分子结构不明确，分离提纯困难等多种原因，使这类产品有国家标准的不多，即使有国标也存在一些问题。

给广大养殖用户和生产企业带来很大不便。

本文简单介绍一下常用的酶活测定方法及测定过程的影响因素，仅供广大饲料工作者提供参考。

1 酶制剂的定义及分类所谓的酶制剂就是通过产酶微生物发酵工程或含酶的动、植物组织提取技术生产加工而成，具有一种或多种底物清楚的酶催化活性，有助于改善动物对饲料营养成分的消化、吸收等，并有功效的生物学评定依据，符合安全性要求，作饲料添加剂用的酶制剂产品（NY/T 722-2003）。

工业上应用的酶制剂大多为水解酶，按作用底物的不同，可分为淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。

按动物体内是否分泌，分为消化酶和非消化酶两大类。

消化酶指动物自身能够分泌的淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等，在幼龄动物或特殊生理阶段时，动物也存在消化酶分泌不足需要外源供给的情况。

非消化酶是指动物自身不能够分泌或很少分泌，必须由外源供给的酶，这类酶能消化动物自身不能消化的物质或降解一些抗营养因子，主要有植酸酶、木聚糖酶、果胶酶、葡聚糖酶、纤维素酶等。

2 常见的酶活测定方法通常酶制剂活性的检测是采用实验室分析手段来进行评价，它可以用来筛选优质酶制剂、确定复合酶制剂的最佳组方及确定产品的最佳添加量等，酶制剂实验室评价技术是目前饲料厂家应用最为广泛的一种方法。

其操作相对简单，检测所用时间短，便于生产实践应用。

酶活测定结果虽不能完全反映酶的使用效果，但通过检测至少可以避免使用劣质的酶制剂。

我国饲料工业标准中已经确立了饲用植酸酶（GB/T 18634）、纤维素酶（NY/T912）、β—葡聚糖酶（NY/T 911）的测定方法。

淀粉酶,脂肪酶,正常范围

淀粉酶,脂肪酶,正常范围
淀粉酶和脂肪酶是两种常见的消化酶，在人体内都具有很重要的作用。

淀粉酶主要负
责分解碳水化合物，而脂肪酶则主要负责分解脂肪，两者都是消化过程中不可或缺的酶类
之一。

本文将对淀粉酶、脂肪酶及其正常范围做出详细解释。

一、淀粉酶
淀粉酶，也叫淀粉酶、糜烂酶，是一种能够分解淀粉质及其水解物的酶类。

人体内主
要由胰腺分泌，也有一些由唾液腺分泌。

淀粉酶能够将淀粉和糖化淀粉水解为葡萄糖和其
它低聚糖，常常用于检验和诊断胰腺炎等疾病。

正常人淀粉酶值是10-130U/L，当值超过 normal 上限，则意味是可能发生了胰腺炎、甲状腺功能低下等疾病，若值低于正常值，道则意味其胰腺功能不达标准。

二、脂肪酶
脂肪酶也叫脂肪水解酶、甘油三酯脂肪酶，是一种能够催化三酸甘油酯水解成甘油和
脂肪酸的酶类。

在人体内，脂肪酶主要由胆囊和胰腺分泌，也可以在肠道中产生。

脂肪酶
作用于乳脂、羊毛脂、动物脂肪等，将它们分解为甘油和脂肪酸，因此脂肪酶的作用是人
体消化和吸收脂肪所必需。

正常人体内脂肪酶的值为15-60U/L，异常的上升可能发生在胆道梗阻、胆囊炎、胰腺炎等疾病时，而当值达到 normal 的上限，则意需要警惕的是尿毒症等慢性疾病。

总体来说，淀粉酶和脂肪酶是消化过程中不可或缺的酶类，它们对人体的消化和吸收
起到至关重要的作用，因此，我们在平时要注意保护我们消化系统的健康，以保证这些消
化酶的正常运转。

如果发现相关指标超出正常范围，一定要及时去医院接受相关检查和诊治。

大米发酵液酶活

大米发酵液中的酶活包括多种酶，如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等。

这些酶在发酵过程中起着不同的作用，如淀粉酶可以将淀粉分解成糖，蛋白酶可以将蛋白质分解成氨基酸和肽，脂肪酶则可以将脂肪分解成脂肪酸和甘油。

在制作大米发酵液的过程中，这些酶的活性会有所不同，因此对大米发酵液中的酶活进行测定，可以帮助了解发酵过程的进行情况。

此外，测定酶活还可以帮助控制发酵过程，提高大米发酵液的质量和产量。

目前，大米发酵液中酶活的测定方法主要有滴定法、分光光度法、高效液相色谱法等。

这些方法各有优缺点，需要根据具体情况选择合适的方法进行测定。

同时，还需要注意样品的采集和处理方式，避免对测定结果造成影响。

总的来说，大米发酵液中的酶活是一个重要的指标，对于了解发酵过程和控制发酵过程具有重要意义。

在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的测定方法和处理方式，以保证测定结果的准确性和可靠性。

血清淀粉酶(AMY)的检测及临床意义

血清淀粉酶（AMY）的检测及临床意义一、概述1、淀粉酶（AMY）是催化多糖化合物1，4-糖苷键水解的一组酶，可催化淀粉、糊精和糖原水解。

2、淀粉酶存在于体内的多个器官和组织中，主要由外分泌腺的胰腺和唾液腺产生。

3、淀粉酶相对分子量小，可以从肾小球滤过出现在尿液中，其中50%被肾小管重吸收，随尿液排出的淀粉酶，称尿淀粉酶，淀粉酶是唯一能在正常时出现于尿液中的血清酶。

二、检测方法血清淀粉酶测定曾出现众多方法，目前应用最多的以经修饰的麦芽七糖为底物的方法。

三、参考区间成人（20～79岁）血清淀粉酶：35～135U/L。

四、临床意义1、急性胰腺炎在急性胰腺炎中，淀粉酶、脂肪酶、弹性酶和胰蛋白酶同时被释放到血液中。

血清淀粉酶水平通常在6～12 h内升高，24～48 h达到峰值，在随后的3～7 d内降至正常或接近正常水平。

脂肪酶在4～8 h 内上升，24 h达到峰值，在接下来的8～14 d内下降到正常或接近正常水平。

血清脂肪酶被认为是比血清淀粉酶更可靠的急性胰腺炎诊断生物学标记物。

在急性胰腺炎中，约75%的患者在发病后24小时内淀粉酶升高超过正常值上限3倍。

在急性胰腺炎时尿淀粉酶升高较晚，发病后12～14小时开始升高，下降缓慢，可持续1～2周（尿淀粉酶值会受患者尿量的影响）。

因此在急性胰腺炎病程早期检测血清淀粉酶更加灵敏，而在病情后期血清淀粉酶降至正常时，还可通过检测尿淀粉酶辅助诊断。

2、淀粉酶活性高低与病情不呈相关性，血清淀粉酶是否降至正常不能作为判断病情程度或患者是否恢复饮食的依据。

3、急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后等均可引起血清淀粉酶增高，但一般低于500U/L。

4、正常人血清中淀粉酶主要由肝脏产生，因此血清与尿中淀粉酶同时减低主要见于肝炎、肝硬化、肝癌及急性和慢性胆囊炎等。

肾功能严重障碍时，血清淀粉酶升高，但尿淀粉酶降低。

五、注意事项1、血清淀粉酶比较稳定，室温下可保存4天，4℃下2周，-20℃以下可保存数年。