[优质文档]生化试剂产品及临床意义介绍

• 升高：Hodgkin病（恶性淋巴瘤的一种 独特类型 ）
胆红素代谢检查
▪ 胆红素主要是在网状内皮系统中，由衰 老RBC的血红蛋白分解后形成
▪ 生成后在血液中与白蛋白聚合，此时尚 未与其它化合物结合，称为非结合胆红 素（间接胆红素IBIL或游离胆红素）
▪ 非结合胆红素被转运到肝脏，经肝细胞 摄取后，通过肝脏的生物转化作用，与 葡萄糖醛酸结合后 称为结合胆红素（直 接胆红素DBIL）
肾功能 心肌酶谱 血脂
UA,BUN,CR,B2-MG,NAG，mALB,UP,CSF,CYC LDH-L，HBDH，CK，CK-MB,LDH1 TG，TCH，HDL-C，LDL-C，APOA1，APOB，LP（a）
风湿三项 ASO,RF,CRP
血糖
GLU,GSP,HBA1C,1,5-AG,D3-H
心血管 HS-CRP，ACE
GGT、）
蛋白质代谢功能检查
▪ 肝脏是蛋白质代谢的主要的器官，许多蛋白质如白蛋 白、糖蛋白、凝血因子、纤溶因子及各种转运蛋白等 都由肝细胞合成，当肝细胞受损时，合成上述蛋白的 功能降低，蛋白质的合成量就减少；
▪ -球蛋白虽然不是肝细胞合成，但当肝实质细胞受损， 间质细胞增生时，球蛋白的生成增加；
▪ 因此，在肝脏疾病时，可表现出血液中蛋白质质和量 的改变；
血症 • 营养不良：摄入不足 • 丢失过多：肾病、烧伤、大出血 • 消耗增加：结核、甲亢、恶性肿瘤
▪ 血清总蛋白与白蛋白升高
• TP＞80g/L（高蛋白血症）
• A ＞35g/L（高球蛋白血症）
• 慢性肝病、M蛋白血ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ、自身免疫性疾病、慢性炎 症和感染如结核、麻风、慢性血吸虫病
▪ 血清TP降低
• 生理性减少（e.g.<3y）、免疫功能抑制、先天性 低TP
¨ 溴甲酚绿法除与白蛋白结合外，还与部 分球蛋白结合，对血清白蛋白特异性较 溴甲酚紫法稍差
¨ 溴甲酚绿法测定白蛋白具有高灵敏度
临床意义
▪ 血清总蛋白与白蛋白升高
• 急性失水、肾上腺皮质功能亢进
▪ 血清总蛋白与白蛋白降低
• 肝细胞损害合成减少：肝炎、肝硬化、肝癌 • 总蛋白＜60g/L,白蛋白＜25 g/L，低蛋白
[优质文档]生化试剂产品及临床意义介绍
生化试剂分类：
¨ 酶类：
AMY，CK，CK-MB，HBDH，LDH，LDH1，ALT，AST，ALP，GGT，AFU，CHE， 5’-NT，ADA，NAG，ACE，GPDA
¨ 基质类：
TP，ALB，GLU，GSP，TBIL，DBIL，UA，BUN，CR，TBA 1,5-AG，D3-H，CSF，CYS-C，TRP，
思考题 1.肝损害蛋白检查的意义。 2.血清酶学在肝胆疾病检查的意义。 名词解释 1.结合胆红素 2.非结合胆红素
肾脏疾病 的生物化学检测
肾脏的生理功能
1. 排泄水分、代谢 产物、废物，保 留有用物质
2. 调节水分和渗透 压
2. 对肝脏疾病诊断意义的分类
▪ 反映肝细胞病变和坏死的酶（ALT， AST）
▪ 反映肝、胆淤滞的酶 ▪ 反映肝纤维化的酶 ▪ 反映肝细胞合成功能的酶（CHE）
反映肝细胞病变和坏死的酶
谷氨酸氨基转移酶（谷丙转氨酶，ALT）
¨ 连续监测法 （IFCC）
¨ ALT催化L-丙氨酸的氨基转移，生成丙 酮酸。丙酮酸与NADH在LDH的催化下 反应生成乳酸和NAD+。NADH在 340nm处有特异吸收峰，其被氧化的速 率与血清中ALT的活性成正比，在 340nm处测定NADH下降速率，即可测 出ALT活性。
下，被化学氧化剂氧化，生成胆绿素，测定 450nm处吸光度的减少与直接胆红素的浓度 成正比。
化学氧化剂 pH3.0 胆红素 ——————————→ 胆绿素
间胆抑制剂
与重氮盐法的比较
¨ 重氮法中的改良J-G法有较高的灵敏度、 精密度和较宽的线性，但试剂无法长期 稳定，溶血有负干扰，且叠氮钠作为防 腐剂时能破坏偶氮试剂，导致呈色不完 全；
胆红素代谢检查
▪ 结合胆红素由胆道排入肠腔，被细菌还原成尿 胆原
▪ 尿胆原一部分被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞 摄取，其中大部分又转变成胆红素随胆汁排入 肠腔，形成“肝肠循环”
▪ 残留肠腔的尿胆原氧化后，以粪胆素排出 ▪ 因此，当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结
合、转运、排泄等过程发生障碍，可导致血中 胆红素增高，形成黄疸。
以AST>ALT多见 ▪ 一些药物或毒物所致升高：氯丙嗪、异烟肼、
奎宁和酒精、铅、汞、四氯化碳、有机磷中毒
¨ 腺苷脱氨酶（ADA） 酶比色法
ADA ¨ 腺嘌呤核苷+ H2O————→次黄嘌呤核苷+NH3
PN 次黄嘌呤核苷+Pi————→次黄嘌呤+磷酸核糖
XOD 次黄嘌呤+2H2O+2O2 ———→2H2O2+尿酸
酶循环法测定反应式
Thio-NAD+
Thio-NADH + H+
胆汁酸
3α-羟基类固醇脱氢酶
3-酮类固醇
NAD+
NADH + H+
临床意义
▪ 总胆汁酸升高
• 肝损害：肝炎、肝硬化、肝癌 • 胆道阻塞：胆管梗阻引起的胆汁淤积 • 小肠污浊综合症
与第一代胆汁酸测定试剂相比
成倍提高了测定灵敏度，克服了第一代酶 比色法试剂在测定低值标本时的重复性差的问 题。
临床意义
• 胆道阻塞性疾病 • 急、慢性病毒性肝炎、肝硬化 • 酒精性肝炎 • 其他：脂肪肝、胰腺炎、前列腺肿瘤
其它酶类
¨ 酶类肿瘤标志物检测
– -L-岩藻糖苷酶（AFU）与原发性肝癌诊 断标志（81.2%）， 与甲胎蛋白（AFP） 联合检测可提高肝癌检出率
¨ 肝纤维化的酶学检查
– 单氨氧化酶 – 腺苷脱氨酶 （ADA）
总胆红素(T-BIL)
¨ 改良化学氧化法 ¨ 总胆红素在表面活性剂存在下，被化学
氧化剂氧化，生成胆绿素，测定450nm 处吸光度的减少与总胆红素的浓度成正 比。
化学氧化剂 pH8.2 胆红素————————→胆绿素
表面活性剂
直接胆红素(D-BIL)
¨ 改良化学氧化法 ¨ 直接胆红素在间胆抑制剂和表面活性剂的存在
¨ 血脂类：
TG，TCH，HDL-C，LDL-C，APOA1，APOB，LP（a）
¨ 电解质：
Ca，Mg，P，Cl，Cu，Fe，Zn，CO2
¨ 免疫类：
ASO，RF，CRP，B2-MG，HBA1C，C3，C4，IgA，IgG，IgM，PA，MALB，AFP
生化试剂临床应用
肝功能
TP,ALB,TBIL,DBIL,ALT,AST,ALP,GGT; TBA,AFU,AFP,ADA,CHE,5’-NT,GPDA,PA
¨ 改良化学氧化法与J-G法有很好的相关性 （R=0.994）；抗溶血（Hb≤7.4）； 不受脂肪乳、VitC、肝素等干扰因素的 影响； 双试剂可以长期保持稳定
临床意义
¨ 增高：见于肝脏疾病，如原发性胆汁性
肝硬化、急性黄疸性肝炎、慢性活动性
肝炎、病毒性肝炎、阻塞性黄疸、肝硬
化
；
肝外疾病如溶血性黄疸、新生儿黄疸、
¨ 连续监测法 （IFCC） 无色的对-硝基苯磷酸二钠在ALP作用下， 生成在405nm处有特异吸收峰的淡黄色 对-硝基苯酚，通过测定在405nm处吸 光度的变化速率计算ALP活性。
临床意义
• 肝胆系统疾病：阻塞性黄疸、急、慢 性黄疸肝 炎、肝癌
• 黄疸的鉴别 • 骨骼疾病：纤维性骨炎、佝偻病、骨
POD 2H2O2+4-AAP+TOOS————→醌化合物
在波长546nm处测定醌化合物生成速率，计算 出ADA活力。
临床意义
类似ALT，对反映急性肝损害的残存病变 和慢性肝损害比ALT为先，（并且ADA 在鉴别结核性和非结核性胸腹腔积液上 也有应用）。
反映肝细胞合成功能的酶
¨ 胆碱酯酶（CHE)
软化病、骨转移癌、骨折愈合期 • 生理性升高：生长期的儿童和青少年
γ-谷氨酰转肽酶（GGT）
¨ 连续监测法
-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺和双甘肽在 -GT作用下，生成对硝基苯胺及 -谷氨 酰双甘肽，所释放出的对硝基苯胺与GT 活 性 成 正 比 ， 通 过 在 405nm 处 测 定 对硝基苯胺的变化，可求出-GT活力。
天门冬氨酸氨基转移酶（谷草转氨酶， AST）
¨ 连续监测法 （IFCC）
¨ AST催化L-天冬氨酸的氨基转移与MDH 催化的反应偶联，使NADH氧化生成 NAD+。NADH在340nm处有特异吸 收峰，其被氧化的速率与血清中AST的 活性成正比，在340nm处测定NADH下 降速率，即可测出AST活性。
▪ A/G倒置
• 肝功能损伤、M蛋白血症。如慢性肝炎、肝硬化、 肝癌、多发性骨髓瘤
血清前白蛋白测定
¨ 免疫比浊法 ¨ 标本中PAB与特异性抗体反应形成不溶
性复合物，可在340nm测定该复合物的 浊度，与同样处理的标准品比较，得出 标本中PAB的含量。
临床意义
• 降低：见于慢性感染、肿瘤、肝炎、肝 硬化、肝癌，(因为半衰期比ALB短，PA 的变化远较ALB敏感)，故对早期肝炎、 急性重肝具有特殊诊断价值
▪ 其主要表现为白蛋白减少，纤维蛋白原减少，球蛋白 的增多等；
▪ 因此，测定血清中蛋白质含量和分析其组分的变化， 可以了解肝脏蛋白质代谢的功能。
1.总蛋白、白蛋白的检测
总蛋白的检测
¨ 双缩脲法 ¨ 蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相互结
合而成的，二价铜离子在碱性溶液中与 蛋白中的肽发生反应形成紫红色络合物， 在540nm有吸收峰，并与蛋白含量 成正 比。 ¨ 蛋白+ Cu2+→ Cu –蛋白络合物（紫红色）