薄层层析法测定海藻糖
糖类的提取分离与薄层层析分析实验步骤
实验1 糖类的提取分离与薄层层析分析实验简介：薄层层析(thin layer chromatography, TLC)是在吸附剂或支持介质均匀涂布的薄层上进行的，是一种广泛应用于氨基酸、多肽、核苷酸、脂肪酸、脂肪类、糖类、磷脂和生物碱等多种物质的分离和鉴定的层析方法。
本实验是从水果中提取单糖、双糖和多糖组分，采用硅胶G薄层层析法分析糖类成分。
一、实验目的1．了解并初步掌握从水果中分离提取单糖、蔗糖及淀粉的原理。
2．学习薄层层析的一般操作及定性鉴定的方法。
二、实验原理1．单糖及多糖的提取凡不能水解为更小分子的糖即为单糖。
单糖种类很多，其中以葡萄糖分布最为广泛，存在于各种水果、谷类、蔬菜和动物血液中。
由于单糖分子中有多个羟基，增加了它的水溶性，尤其在热水中溶解度很大；在乙醇中也有很好溶解性，但不溶于乙醚、丙酮等有机溶剂中。
而蔗糖等双糖分子也易溶于水和乙醇中。
因此，单糖和双糖一般可用热水或乙醇将其提取出来。
多糖是由多个单糖分子失水缩合而成的大分子化合物。
在自然界中分子结构复杂而多种多样，有不溶性的结构多糖如植物纤维素、半纤维素，动物的几丁质等；另有一些为贮存物质如淀粉、糖原等；还有一些多糖具有复杂的生理功能。
多糖中的淀粉不溶于冷水及乙醇，但可溶于热水中形成胶体溶液。
因此可以用乙醇提取单糖及低聚糖，然后提取淀粉等多糖。
2．薄层层析薄层层析的主要原理是根据各组分在溶剂中的溶解度不同和吸附剂对样品各组分的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列的斑点。
糖的分离鉴定可用吸附层析或分配层析，吸附层析常用的吸附剂为硅胶，分配层析常用的支持剂是硅藻土。
在吸附剂或支持剂中添加适宜的黏合剂后再涂布于支持板上，可使薄层粘牢在玻璃板(或涤沦片基)这类基底上。
硅胶G是一种已添加了黏合剂—石膏(CaSO4)的硅胶粉，糖在硅胶G薄层上的移动速度与糖的相对分子质量和羟基数等有关，经适当的溶剂展开后，糖在硅胶G薄板上的移动距离为戊糖＞己糖＞双糖＞三糖。
酶法生产海藻糖的定量分析方法
（ ）前言 一
海藻糖 （ｒ ｈ ｌ ｓ ） ｔ ｅ ａ ｏ ｅ ，化 学名称 为 Ｑ—Ｄ一吡喃葡糖基
一
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甲酸 ： ＝７ １ １ ，酚水 的上 层饱和液 。为 了将海藻糖 、 水 ５： ５： ０ 糖 原 和 葡 萄 糖 分 开 ， 可 改 良展 开 剂 为 正 丁 醇 ： 酮 ： ： 丙 水 醋 酸＝ ０： ６： ，海藻糖在此展 开剂中的 Ｒ 值 为 ０ ２ 。改进 １ ６： ２ ｆ ．５ 的显色剂 由 Ａ液和 Ｂ液组成 ，Ａ液 ：Ａ Ｎ ３的水一 ｇ０ 丙酮饱和溶 液 （ ： 水 丙酮＝ ２ ） １： ０ ，Ｂ液 ：将 ｌ ａ Ｈ晶体溶 于 １０ ｇ Ｏ Ｎ ０ ｇ乙醇
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方法如下 ：
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藻糖具有优 良的在逆性环 境下保护 生物 体细胞膜和 蛋 白质等 活性大分 子的功能 ，在 生物制 品、化 妆品 、食 品中有广泛 的
辅酶类酶制剂篇全国第三届功能性生物制品生产与应用技术交流会论文集酶法生产海藻糖的定量分析方法马少敏1农桂峰2韦朝英11南宁邦尔克生物技术有限责任公司南宁5300032南宁中诺生物工程有限责任公司南宁530003摘要本文对酶法生产海藻糖的定量分析方法进行了介绍并给出了层析法比色法高效液相色谱法的具体的操作方法
时 ，其 问 每 隔 ６小 时摇 匀 一 次 。将 此 洗 脱 液 用 蒽 酮法 测 定 海
纸层析分离洗脱法定量测定海藻糖
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项目三 薄层色谱法鉴定果汁中的糖
项目三薄层色谱法鉴定果汁中的糖一．实验目的了解薄层色谱法的分离原理，掌握薄层色谱法鉴定果汁中的糖的操作技术。
二．实验原理对多组分的复杂混合物，无论是有机物或无机物，薄层色谱法是有效的分离手段之一。
硅胶是常用的吸附剂，使用与酸性和中性物质的分离，在一定条件下，硅胶对各种糖分的吸附能力不同。
同时，选择适当的展开剂，利用各种糖分的分配系数的差异，从而达到分离。
显色后得到色谱图，与在相同条件下已知糖分的色谱图比较就能鉴定果汁中的糖分。
未知物组分的鉴定是通过在同一块薄层板上分别点上标准样品和未知样品，通过比较斑点的比移值来定性鉴定。
其中比移值Rf计算公式为：Rf原点至斑点中心的距离/ 原点至展开剂前沿的距离由于在相同条件下，物质的Rf值是一定的，因而比移值Rf可以进行物质的定性分析。
分离之后，可以用适当的方法定量测定，如刮下有色斑点。
将被测物浸取后用比色法测定其含量，或用薄层扫描仪扫描直接测出被测物的含量。
三. 实验器材层析缸（筒）（10cm×10cm）；微量注射器，若仅作定性鉴定，则可用玻璃毛细管来替代；薄层板：用10×10cm玻璃板制作硅胶板、可剪截型薄层层析板（10 cm × 10 cm，0.2-0.25 mm铝基硅胶G板，天津市天河医疗有限公司）；吸附剂：硅胶G（(青岛海洋化工有限公司生产，200～260 目，化学纯）展开剂1：正丁醇：丙酮：水＝4：3：1展开剂2：正丁醇：乙酸：水=8：3：2显色剂1：苯胺－二苯胺磷酸（临用时配制：2g二苯胺、2ml苯胺、20ml85％磷酸，与200ml丙酮混溶）显色剂2：：把10ml硫酸缓慢倒入90rnl乙醇中混合冷却，制得10％的硫酸溶液标准糖溶液：鼠李糖、乳糖、葡萄糖醛酸、木糖、果糖、葡萄糖，分别溶于10％异丙醇中，使其浓度为100mg/ml新鲜果汁、蜂蜜、无水乙醇四. 实验步骤（1）制作薄层板将玻璃板洗净至不挂水，晾干后置于干燥洁净处备用。
麦角硫因的提取及纯化方法
麦角硫因的提取及纯化方法麦角硫因，又称麦角胺，是一种乙醇胺类化合物。
由于其具有很强的致幻作用和毒性，被禁止用于医学和化妆品领域。
但是，麦角硫因也具有广泛的研究价值和药用价值，因此其提取和纯化方法十分重要。
一、麦角硫因的提取方法1.传统方法传统的麦角硫因提取方法主要是采用麦角提取物作为原料，经过浸提、提纯和过滤等步骤，得到麦角硫因。
麦角提取物通常以苯为溶剂，将其与麦角粉末进行浸泡，然后进行过滤、还原、提纯等步骤，得到纯净的麦角硫因。
2.微生物发酵法近年来，微生物发酵法备受关注。
这种方法是采用麦角提取物为原料进行发酵，先采用放线菌和拟青霉菌等微生物进行转化，酵母菌和嗜热菌等微生物再将其转化为麦角硫因。
这种方法效率高，可同时得到多种相关产物。
二、麦角硫因的纯化方法1.柱层析法柱层析法是将提取出的物质在固定的柱子内进行波动，去除次要成分，留下纯净的麦角硫因。
常用的固定相包括硅胶、脱硅的硅胶、聚酰胺胶、氧化铝，可根据需要选择不同的固定相。
2.薄层色谱法薄层色谱法是将提取出的物质点滴在含有固定相的光滑玻片上，然后在温和的温度下进行传递，去除其他化合物，留下纯净的麦角硫因。
常用的固定相包括硅胶、脱硅硅胶和铝箔等。
3.逆流色谱法逆流色谱法是提取物在悬浮液的基础上进行，可以在室温下进行操作。
提取物在悬浮液中传递并在固定相上沉淀，去除其他杂质，留下纯净的麦角硫因。
常用的固定相包括活性炭、硅胶、脱硅硅胶或海藻糖。
4.凝胶过滤法凝胶过滤法是将提取物置于凝胶层中，随着发生的扩散，染料将在凝胶层中根据其分子量的不同而发生分化。
可以针对形态或生化制品进行高分辨率分析。
常用的固定相包括葡聚糖真菌和DEAE纤维素膜。
结论：总之，麦角硫因的分离和提纯方法在实际研究和应用中具有广泛的应用价值。
根据其实际需求，可以选择不同的提取和分离纯化方法来得到纯净的麦角硫因。
酶法合成海藻糖的HPLC测定
检 测 仪 ， Ｌ一 ９ ０ 色 谱 数 据 工 作 站 软 件 ， 色 谱 柱 ： Ｔ ９０ ＲＥＺ ＥＸ ＲＮＭ Ｃ ＡＲＢｏＨＹＤＲ ： ０ ， 样 量 １ ｌ ， ． ｍｌ ｍｉ 柱 ７ ℃ 上 ０ 。
半 缩 醛 羟 基 缩 合 而成 的 非 还 原性 二 糖 ，无 毒 无 害， 甜 度 为 蔗 糖 的 ４ ％ ， 体 内 可 被 酶 水 解 为 葡 萄 糖 。它 倍 ５ 在 受 瞩 目的 原 因 ， 要 是 该 糖 可 以 在 细 胞 处 于 饥 饿 、 主 干 燥 、 温 、 渗 透 压 及 有 毒 试 剂 等 胁 迫 环 境 时 ， 效 高 高 有
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分 析检测
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１ 材 料 与 方 法
１１ 实 验 材 料 ．
淀粉 北京粉丝厂 ； Ｓｓ ＭＴ ａ ｅ和 ＭＴ ｓ Ｈａ ｅ 本 实验
海藻糖检测
海藻糖检测
海藻糖(Trehalose)，又称为漏芦糖、蕈糖，是由两个葡萄糖分子组成的一个非还原性双糖，广泛存在于细菌、酵母、真菌和藻类以及一些昆虫、无脊椎动物和植物中，具有独特的生物学功能，能在逆境中有效地维持细胞内生物膜和蛋白质、活性肽的稳定性和完整性，被赞誉为生命之糖，可广泛用于生物制剂、医药、食品、保健品、精细化工、化妆品、饲料及农业科学等各个领域。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和生化法，可高效、精准的检测海藻糖的含量变化。
对于稀有的糖代谢物，如提供标准样品，迪信泰检测平台可提供定制检测。
对于无法用HPLC检测的样品，迪信泰检测平台可提供定制检测或试剂盒代测定服务。
此外，我们还提供其他糖代谢物检测服务，以及海藻糖检测试剂盒产品，以满足您的不同需求。
样品制备
糖代谢物提取方法（此部分涉及到公司的核心工艺，以下提供常规的提取工艺）
1）称取500 mg的固体样品；
2）加入5 mL去离子水；
3）超声处理30 min；
4）取2 mL，用乙腈定容至10 mL；
5）用HPLC-ELSD检测。
HPLC测定海藻糖样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 海藻糖含量信息。
活性污泥海藻糖含量的测定方法与设计方案
本技术涉及一种活性污泥海藻糖含量的测定方法，属于环境工程学科中的污水生物处理技术领域。
为了实现海藻糖在污水生物处理技术领域内的应用，本技术以蒽酮比色法为基础，对活性污泥微生物细胞内的海藻糖进行三氯乙酸-超声联合提取，海藻糖遇浓硫酸脱水生成糠醛及其衍生物，该衍生物与蒽酮发生反应，反应后溶液呈蓝绿色，在610nm处比色测定活性污泥中海藻糖的含量。
本技术的积极效果是该法安全可靠、简单易行，成本较低，测定精度高，可实现活性污泥中海藻糖的准确快速测定。
技术要求1.本技术的使用特征是：活性污泥海藻糖含量的测定过程中，取0.8mL的活性污泥混合液置于离心机中离心，用蒸馏水冲洗、搅拌离心所得活性污泥再离心，去掉上清液后加入三氯乙酸溶液，通过超声处理后离心，取其上清液加入蒽酮试剂，冷却后置于沸水浴中6min，再冷却，用1cm比色皿在610nm波长下测定吸光度，最后根据吸光度和污泥称重结果计算活性污泥细胞内海藻糖含量。
技术说明书一种活性污泥海藻糖含量的测定方法技术领域本技术属于环境工程学科中的污水生物处理技术领域，具体涉及一种活性污泥海藻糖含量的测定方法。
背景技术海藻糖(Trehalose)是一种非还原性二糖，由2个葡萄糖分子以α，α，1，1-糖苷键连接而成，分子式为C12H22O11·2H2O，相对分子量为378.33，白色结晶，化学性质极其稳定，无毒无害，不会焦糖化。
研究表明，海藻糖对生物体具有神奇的保护作用，是生物体应对外界环境刺激的一种重要代谢产物。
生物体在恶劣环境下表现出的抗逆耐受力与它们体内存在的海藻糖含量密切相关，生物体可以通过调节合成体内海藻糖来抵御外界伤害。
目前，生物体海藻糖分析测定技术已广泛应用于食品、医药、化妆品等产业领域，但在环境工程领域内至今没有得到应用。
由于在实际运行的污水生物处理系统中活性污泥时刻承受着因负荷变化、环境温度变化、pH值变化等带来的冲击，这种冲击也会反映在污水生物处理工艺中活性污泥的海藻糖含量水平上，因此通过分析测定活性污泥微生物细胞内海藻糖含量，可以准确地表征出活性污泥受到外界环境刺激的程度，并可寻找利用外援海藻糖强化活性污泥应激能力的技术方法。
107707-生物制药工艺学实验6
南京师范大学生命科学学院 张茵 2015.5.
酵母细胞中海藻糖的提取和鉴定
实验目的
掌握从酵母中提取海藻糖的方法； 掌握旋转薄膜蒸发器的原理和操作； 掌握薄层层析的原理和操作。
实验材料
试剂：60%乙醇溶液； 固体试剂：粉末状活性炭； 树脂：717强碱性阴离子交换树脂，732强酸
收集海藻糖
5000rpm离心15min，收集沉淀，沉淀用约3mL蒸馏水溶解。 薄层层析 ✓ 配制展开剂：正丁醇：乙醇：水=2：1：1（v：v：v），混合均
匀后，倒入层析缸，让蒸汽充满层析缸。 ✓ 用毛细管点样
样品：提取的海藻糖溶液，1.5mg/mL标准海藻糖溶液， 2.0mg/mL标准海藻糖溶液 ✓ 待溶剂前沿至薄层板边缘约1cm后，停止层析。 ✓ 取出薄层板，吹干，均匀地喷15%硫酸溶液，置烘箱80度显色。
性阳离子交换树脂。 仪器：旋转薄膜蒸发仪
背景知识
✓ 海藻糖是由两个葡萄糖分子通过半缩醛羟基缩 合而成的非还原性双糖，它的分子式为 C12H22O11·2H2O，相对分子质量约为378。
✓ 海藻糖易溶于水，热乙醇，不溶于丙酮； ✓ 海藻糖广泛存在于自然界，尤其在酵母等真菌
中含量较高； ✓ 海藻糖对酸、热较稳定; ✓ 海藻糖作为一种应激代谢物，能够保护生物体
抵抗恶劣环境，在体外也可以保护生物大分子。
旋转薄膜蒸发
工作原理：水泵或者油泵将系 统的压力降低，恒速旋转的蒸 发瓶在加热槽（水浴）中恒温 加热， 瓶内的液体随着蒸发瓶的旋转 在瓶内壁形成薄膜，不仅使液 体受热均匀，而且增大了蒸发 面积，提高了蒸发效率。
应用：适用于在常压浓缩时未 达溶剂的沸点，即已受热分解、 氧化或聚合的溶质。
✓ 用薄层色谱扫描仪在480nm下扫描薄层板，通过比较标准品和样 品的积分面积，计算海藻糖的浓度。
海藻糖检测标准
海藻糖检测标准
一、含量检测
海藻糖的含量检测主要采用高效液相色谱法（HPLC），通过色谱柱分离样品中的海藻糖和其他成分，然后通过检测器测定海藻糖的含量。
在此过程中，需要注意样品的处理和提取方法，以避免海藻糖的损失和干扰。
二、稳定性检测
海藻糖的稳定性检测主要包括热稳定性和存储稳定性。
热稳定性可以通过加热试验来评估，即将海藻糖在不同温度下加热一定时间，然后测定其含量和分子量变化。
存储稳定性则可以通过将海藻糖在不同环境条件下存储一定时间，然后测定其含量和分子量变化来评估。
三、安全性检测
海藻糖的安全性检测主要包括急性毒性试验和亚慢性毒性试验。
急性毒性试验主要是通过给小鼠注射一定剂量的海藻糖，观察其急性毒性反应。
亚慢性毒性试验则是通过给小鼠喂食不同剂量的海藻糖，观察其长期毒性反应。
此外，还需要对海藻糖进行微生物检测和重金属检测等安全性检测。
四、吸湿性检测
海藻糖的吸湿性检测主要是通过将海藻糖置于湿度较高的环境中，测定其吸湿程度和吸湿速度。
该项检测可以评估海藻糖在湿度较高环境下的稳定性和使用性能。
五、玻璃化转化温度检测
海藻糖的玻璃化转化温度可以通过差示扫描量热法（DSC）进行检测。
在此过程中，需要注意控制升温速度和样品量，以获得准确的玻璃化转化
温度数据。
六、化学成分定性定量检测
海藻糖的化学成分定性定量检测主要是通过红外光谱法、核磁共振波谱法和质谱法等手段进行测定。
该项检测可以了解海藻糖的化学组成和分子结构信息，为其应用和研究提供依据。
[整理]实验二植物组织中可溶性糖的薄层层析分离与鉴定
![[整理]实验二植物组织中可溶性糖的薄层层析分离与鉴定](https://img.taocdn.com/s3/m/07704d8e50e79b89680203d8ce2f0066f533644c.png)
实验二植物组织中可溶性糖的薄层层析分离与鉴定[实验目的]糖类是自然界存在的数量最多的有机化合物，它既是植物躯体和细胞的结构成份，又是生命活动能量的主要来源，并且与植物体内各类物质的代谢密切相关，分离鉴定植物组织中可溶性糖的种类及其变化，对了解植物体内的组织代谢和农产品的品质，具有重要意义。
本实验采用硅胶G薄层层析法，分离鉴定植物组织中可溶性糖的种类，要求通过本实验，学习提取植物材料中可溶性糖的一般方法，掌握吸附薄层层析的原理，操作及其在糖类鉴定中的作用。
[实验原理]植物组织中的可溶性糖可用一定浓度的乙醇提取出来，经除去杂质，即可获得较纯的可溶性糖混合物。
薄层层析是层析法的一种，层析法是利用被分离样品混合物中各组分的物理、化学差别，使各组分以不同程度分布在两个相中，这两个相通常使一个被固定在一定的支持物上的，称为固定相；另一个是移动的，称为流动相；当流动相流过固定相时，在移动过程中由于各组分在两相中的分配情况不同，或吸附性质不同，或电荷分布不同，或离子亲和力不同等，而以不同速度前进，从而达到分离的目的。
薄层层析是一种快速而微量的层析方法，它是将一种固定支持物均匀地涂在薄板上，对物质进行层析的方法，本实验只讨论吸附薄层层析，即所有支持物是吸附剂(如硅胶粉)，层析时，主要是根据吸附剂对样品中各组分的吸附能力不同，因此个组分的移动速度不同，从而达到分离混合物的目的。
糖为多羟基化合物，具有较强的极性，在硅胶G薄板上展层时，糖与硅胶分子有一定的吸附力。
硅胶分子与糖的吸附能力大小取决于糖的分子量和羟基数目，不同的糖分子由于分子量及羟基数的不同，因而它与硅胶分子间的吸附力不同。
造成各种糖分子在展层过程中移动的距离不同，从而将各种糖分离出来，一般吸附力的大小为：三糖>双糖>己糖>戊糖。
其中各种糖移动的速率可用Rf值表示。
通过与标准糖的Rf值比较。
即可鉴定出植物组织提取液中糖的种类。
溶质斑点中心到样点的距离：Rf( 值) = 溶剂前沿到点样点的距离[器材与试剂]1、材料：苹果或其他植物材料2、仪器：离心机及离心管、天平、研钵、量筒（25ml)、移液管（10ml）、恒温水浴、毛细管、层析缸、吹风机、烘箱、喷雾器、烧杯、铅笔，尺子，硅胶GF254薄层层析板。
海藻糖无机试剂
海藻糖无机试剂
海藻糖是一种天然产物，在食品工业和医药工业中都有广泛的应用。
为了检测和分析海藻糖的含量，需要使用适当的无机试剂进行定量分析。
目前常用的海藻糖无机试剂包括：安替滴定法、离子色谱法、高效液相色谱法等。
这些方法都具有准确性高、灵敏度好、操作简便等优点，能够满足不同场合的分析需求。
安替滴定法是一种常用的海藻糖无机试剂，它是利用亚硫酸盐还原海藻糖，并用碘量定亚硫酸盐的滴定法。
这种方法操作简单，结果准确可靠，适用于海藻糖含量较低的样品分析。
离子色谱法是一种高效的海藻糖无机试剂，它是利用离子交换柱分离海藻糖，并用电化学检测器检测其浓度的方法。
这种方法通常适用于高含量海藻糖的样品分析。
高效液相色谱法也是一种常用的海藻糖无机试剂，它是利用高效液相色谱仪分离海藻糖，并用紫外检测器检测其浓度的方法。
这种方法操作简单，结果准确可靠，适用于不同含量海藻糖的样品分析。
总之，选择适当的无机试剂，能够为海藻糖的分析和检测提供准确可靠的数据支持，为相关领域的研究和生产提供有力的保障。
- 1 -。
海藻糖检测标准
海藻糖检测标准海藻糖是一种常用的食品添加剂，广泛应用于食品工业中，用来增加甜味和提升口感。
为了确保海藻糖添加剂的质量和安全性，需要建立相应的检测标准。
本文将讨论海藻糖检测标准的制定过程、重要参数的选择和分析方法的优化等内容。
1. 简介海藻糖是一种双糖类物质，化学名称为1-葡萄糖基-1-葡萄糖基-1-葡萄糖。
它由三个葡萄糖分子通过1-4糖苷键连接而成，具有甜味，并且在水中具有良好的溶解性。
由于其甜味纯度高、安全性好、热稳定性强等特点，海藻糖被广泛用作食品添加剂，尤其适用于制作低糖或无糖食品。
2. 检测标准的制定海藻糖检测标准的制定需要考虑的因素包括法规、安全性、质量要求等。
一般而言，制定海藻糖检测标准的目的是为了保护消费者的健康、规范市场秩序和促进产业发展。
首先，需要参考国家和地区的法规标准。
不同国家和地区对食品添加剂的使用有不同的规定，海藻糖作为一种食品添加剂也需要遵守相应的法规。
例如，欧盟对食品添加剂的使用数量、纯度、清晰度等方面都有详细的规定，制定海藻糖检测标准时应考虑这些法规的要求。
其次，需要考虑海藻糖的安全性。
海藻糖经常用于食品中，如果存在安全隐患，则可能对消费者的健康造成危害。
因此，在制定检测标准时，需要参考相关的毒理学和安全性评估数据，确定合理的海藻糖使用限量和残留限量。
此外，还需要考虑海藻糖的质量要求。
海藻糖作为一种食品添加剂，其质量直接关系到最终食品产品的品质。
质量要求包括海藻糖的纯度、含量、溶解性等参数。
制定检测标准时，需要选取合适的参数作为评估和判定海藻糖质量的依据。
3. 检测参数的选择海藻糖检测的主要参数包括纯度、含量和溶解性。
这些参数的选择应基于海藻糖的特性和应用需求。
纯度是指海藻糖中海藻糖分子的含量，通常用百分比表示。
纯度的高低直接影响到海藻糖的甜味强度和食品制品的质量。
含量是指海藻糖在特定样品中的浓度，通常以克/升或克/千克表示。
溶解性是指海藻糖在水或其他溶剂中的溶解能力，其溶解度对于海藻糖的应用和加工有着重要的影响。
薄层色谱糖类 -回复
薄层色谱糖类 -回复
薄层色谱（Thin-layer chromatography, TLC）是一种常用于分
离和检测化合物的色谱技术。
薄层色谱可以应用于各种不同类型的化合物，包括糖类物质。
在薄层色谱分析中，首先将待测试的样品溶解在适当的溶剂中，并通过玻璃棒或微量注射器在薄层色谱板上均匀地涂布一层薄层吸附剂，常用的吸附剂是硅胶或氧化铝。
然后将薄层色谱板置于槽中，其中槽中的混合溶液或气相通过上升或下降的方式进行色谱分离。
当混合物中的化合物在薄层吸附剂上被分离后，可以使用物理、化学或者生物方法进行检测。
对于糖类的分析，薄层色谱可以用于确定糖类的种类、结构和含量。
糖类在薄层色谱中的分离依赖于它们在薄层吸附剂上的亲和性差异，通过改变溶剂的组成、浓度和涂布的方式等条件，可以优化糖类的分离效果。
常用的糖类检测方法包括利用显色剂的染色法、利用特定反应的显色反应法、利用尺寸分离的色谱法等。
总之，薄层色谱是一种有效的用于分离和检测糖类的色谱技术，可以被广泛应用于糖类的分析。
一种制备海藻糖的方法
一种制备海藻糖的方法
海藻糖是一种从海藻中提取的天然甜味剂。
以下是制备海藻糖的一种常见方法：
材料:
- 红藻类海藻（如鳨尾藻、柳枝藻等）
- 纯净水
- 碱性溶液（如氢氧化钠）
- 酸性溶液（如盐酸）
- 活性炭或其它吸附剂
步骤:
1. 将海藻洗净并切碎成小块，然后浸泡在纯净水中，浸泡的时间可以根据需要调整，通常为数小时至一整夜。
这个过程有助于将海藻中的杂质去除。
2. 将藻体与纯净水混合物过滤，以去除残留的固体颗粒。
3. 取过滤后的水中加入碱性溶液（如氢氧化钠），以改变溶液的pH值。
碱性溶液的加入有助于溶解和释放藻体中的多糖类物质。
4. 通过搅拌和加热将溶液中的多糖物质完全溶解。
5. 将溶液过滤去除残留的固体颗粒。
6. 取过滤后的液体加入酸性溶液（如盐酸），以改变溶液的pH值。
酸性溶液的加入有助于使多糖物质凝聚和析出。
7. 过滤和洗涤析出的多糖物质，以去除多余的盐酸和杂质。
8. 将析出的多糖物质进行干燥，可以使用低温真空干燥法或喷雾干燥法等方法。
9. 将干燥的多糖物质进行研磨和精炼，以获得纯净的海藻糖。
这是一种常用的制备海藻糖的方法，但具体的步骤和条件可能会因制备人员和实验条件的不同而有所变化。
确保操作过程中的卫生和安全，并根据自己的需要和实际情况进行调整。
药用级海藻糖用途性质
药用级海藻糖用途性质药用级海藻糖用途性质海藻糖又称为漏芦糖、蕈糖，是由两个葡萄糖分子组成的一个非还原性双糖。
常常以二水化合物存在。
海藻糖是一种典型应激代谢物，能够在高温、高寒、高渗透压及干燥失水等恶劣环境条件下在细胞表面形成的爱护膜，有效地爱护生物分子结构不被破坏，从而维持生命体的生命过程和生物特性。
海藻糖是自然双糖中稳定的一类。
由于不具有还原性，对热和酸碱都具有特别好的稳定性【检查】酸度取本品1.0g（按无水物计算），加水10ml使溶解，依法测定（通则0631），pH值应为4.5～6.5。
溶液的澄清度与颜色取本品33.0g（按无水物计算），置100ml量瓶中，加新沸放冷的水充分振摇使溶解，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在420nm与720nm波特长测定吸光度。
在720nm波特长的吸光度值不得过0.033，420nm与720nm波特长的吸光度差值不得过0.067。
氯化物取本品0.40g，依法检查（通则0801），与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对比液比较，不得更浓（0.0125%）。
硫酸盐取本品1.0g，依法检查（通则0802），与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对比液比较，不得更浓（0.020%）。
可溶性淀粉取本品l.0g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，不得显蓝色。
有关物质取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对比溶液。
照含量测定项下的色谱条件，取对比溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，主成分峰高的信噪比应大于10；再精密量取供试品溶液和对比溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
供试品溶液色谱图中，除溶剂峰外，供试品溶液主峰之前、之后的杂质峰面积之和分别不得大于对比溶液主峰面积的0.5倍（0.5%）。
水分取本品，照水分测定法（通则0832）测定，含水分应为9.0%～11.0%；如为无水物，含水分不得过1.0%。
薄层层析法分析多糖成分
薄层层析法分析多糖的成分薄层层析是一种微量而快速的层析方法。
最早是Izmailov和Schraiber在1938年采用氧化铝薄层分离了植物提取液。
层析是在吸附剂或支持剂均匀涂布的薄层上进行的，故称薄层层析。
为了使所要分析的样品各组分得到分离，必须选择合适的吸附剂。
硅胶、氧化铝和聚酰胺是广泛采用的吸附剂，硅藻土和纤维素是分配层析中最常用的支持剂，在吸附刘或支持剂中添加了适合的粘合剂再涂布，可使薄层粘牢在玻璃板（或涤纶片基）这类基底上。
硅胶G是一种添加了粘合剂的硅胶粉，约含12%-13%的石膏（CaSO4）,它可以把一些物质从溶液中吸附于自身的表面上，利用它对各种物质的吸附能力不同，再用适当的溶剂系统展层使不同的物质得以分离。
例如糖在硅胶G薄层上的移动速度与糖的分子量和羟基数有关，经过适当的溶剂展开后，糖在薄板上的移动速度是戊糖>己糖>双糖>三糖。
若用硼酸溶液市制硅胶G可改进分离效果。
对己分开的斑点显色，而将与它位置相当的另一个未显色的斑点从薄层上与硅胶G一起刮下，以适当的溶剂将糖从硅胶G上洗脱下来，就可用糖的定量测定方法各组分的含糖量。
薄层层析一般采用上行法，在具有密闭盖子的玻璃缸中进行，溶剂倒于缸底，简单地将薄板放入即可。
保证层析缸内有饱和的蒸气是实验成功的关键。
保证措施是在层析缸内壁衬一层浸湿溶剂的滤纸或缩小层析缸的容积。
因为层析时，溶剂会从薄层上蒸发，样品移动到一定距离的时间就会处长。
若所用溶剂系统由几个成分组成，挥发性较大的成分首先蒸发，就会使混合溶剂的组分改变，而溶剂的蒸发从薄板的中央向两边递减，致使溶剂前沿呈弯曲状，结果往往是使两边的Rf值大于中央位置的Rf值。
薄层层析与其它方法比有明显的优点：层析时间短，可以分离多种化合物，用样品量少（微克级），与纸层析相比要灵敏10-100倍，观察结果方便，显色方法甚至可以用腐蚀性显色剂。
操作方法1．制备硅胶G薄层板取硅胶G粉30g加75毫升0.1mol/L硼酸溶液，调匀后铺于洁净平整的玻板上，铺层后的薄板于100℃烘箱中烘干。
糖的薄层层析
❖ 四、实验步骤
❖ 1、薄板制备：称取硅胶G 1.5g于烧杯中，加入0.02mol/L 醋酸钠6ml(含有CMC-Na0.5%），调成均匀糊状后，立即 倾于玻璃板上，使糊状物迅速铺平，布满整块玻板。将铺好 的硅胶G薄板于100℃烘箱中烘干（30min），取出后即可使 用。
❖ 2、点样：用毛细管分别吸取4种标准糖溶液及其混合液，在 距玻板一段1.5cm处，间距1cm分别点样，用电吹风吹干样 点。
❖ 3、展开：先在层析缸中放入展开剂，液面不要超过点样线， 将硅胶板点样点朝下放入层析溶剂中，将层析缸密闭，待溶 剂到达标志线(距玻璃板上缘一厘米处）后取出电吹风吹干。
❖ 4、显色：用喷雾器向薄层均匀地喷上糖显色剂，置于80～ 100℃烘箱烘烤约3～5min，至色斑出现为止。
实验十
糖的薄层层析
学时: 3
一、实验目的 1 掌握吸附层析法。 2 掌握薄层层析的原理和操作技术。
二、实验原理
薄层层析是将吸附剂或支持物均匀地铺在玻璃上 成为薄层，然后把要分析的样品加到薄层的一端，用 合适的溶剂展开而达到分离目的。按照不同的样品和 不同的分离要求可选用不同的支持物，如硅胶G、硅 藻土、氧化铝G、纤维素、离子交换纤维素等。
❖ 本实验是以硅胶G为支持物的薄层层析。在铺有 吸附剂的薄层上，样品经过连续反复的被吸附剂吸 附及展开剂解吸附的过程后，不同的糖因其分子量 不同，羟基数目及醛基、酮基性质的差异，故而在 薄层上以不同速度移动而得以分离。被吸附剂吸附 强及被展开剂解吸附弱的在薄层上移动速ห้องสมุดไป่ตู้慢，展 开距离短；反之则移动速度快，展开距离长，于是 混合糖液中的各种糖就被分离开来。糖在薄板上的 移动速度是戊糖＞己糖＞双糖＞三糖。
海藻糖检验规程
1目的规范海藻糖进料的检验流程，明确海藻糖进料的抽样方法、质量标准、检验方法和结果判定，确保海藻糖检验结果的准确。
2适用范围适用于海藻糖进料检验和在储存、使用过程中的抽查检验。
3定义：海藻糖：是从淀粉中提取的非还原性糖。
4职责4.1品保部：负责对海藻糖的进料进行抽样检验和判定；参与物料评审。
4.2生产部：负责对海藻糖进料通知取样和进行检验状态标识和储存。
负责海藻糖使用过程进行抽查；参与物料评审。
4.3采购部：负责海藻糖进料检验异常时与供应商进行反馈；主导进行物料评审。
4.4技术研发部：负责制定海藻糖质量标准；参与物料评审。
5内容5.1抽样方法5.1.1海藻糖进料到厂后，生产部仓管员开《进料请验单》发品保部，品保部进料检验员按每一次交货的海藻糖为一个检验批，根据来货数量进行随机抽样检验。
5.1.2每20袋抽取1袋，进行检查。
5.2检验方法5.2.1感官检验5.2.1.1包装：包装袋外面应注有产品名称、生产厂厂名、厂址、净含量、生产日期、保质期、执行标准和规格，观察其是否清晰、完整、洁净和规范。
5.2.1.2杂质：打开袋口，无肉眼可见外来杂质。
5.2.1.3感官：无水海藻糖：白色，干燥松散粉末，无肉眼可见异物；味甜，无异味；结晶海藻糖：白色，干燥松散结晶，无肉眼可见异物；味甜，无异味。
5.3检验结果判定5.3.1将检验结果记录在《原辅料及包材验收报告》中，并对照《海藻糖质量标准》对每一项检验结果进行检验结果判定。
5.3.2如检验结果合格，品保部进料检验员则回复生产部仓管员在《进料请验单》上签批检验合格，仓管员办理正常入库。
5.3.3 如第一次检验结果不合格，品保部进料检验员重新加倍抽样，复检不合格项目，如复检结果仍不合格，则在《进料请验单》上签批检验不合格，并即时反馈给采购部，由采购部确定是否需要进行物料评审。
5.4 物料评审5.4.1 采购部因生产急用或其它原因，需要对检验不合格的进料提出物料评审，则填写《物料评审表》，写明物料评审原因和不合格描述，组织生产部、技术研发部、品保部进行物料评审，各部门出具物料评审意见，汇总达成物料评审结果，必要时物料评审结果需要汇报给总经理签批。
薄层层析TLC通用显色剂
薄层层析TLC通用显色剂薄层层析通用显色剂1 通用试剂(1) 重络酸钾-硫酸:检查一般有机物.喷洒剂:5克重络酸钾溶于100毫升40%硫酸中.薄层检查:喷洒后加热到150℃至班点出现(2) 荧光素-溴:检查不饱和化合物喷洒剂:0.1克荧光素溶于100毫升乙醇中溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液喷洒后处理:喷洒荧光素溶液后,放置存有溴溶液的缸内,可于紫外线分析灯下检查荧光,荧光素与溴化和成曙红(Eosin)(无萤光),而不饱和化合物则成溴加成物,保留了原有荧光;若点样较多,则呈黄色斑点,底板呈红色.(3) 碘:检查一般有机物.方法:a 层析谱放密闭缸内或瓷盘内，缸内预先放有碘结晶少许，大部分有机化合物呈棕色斑点。
b 层析谱放碘蒸气中5分钟（或喷5％碘的氯仿溶液）取出置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后，喷1％淀粉的水溶液，斑点转成蓝色。
(4)硫酸：通用喷洒剂：5％的浓硫酸乙醇溶液，或15％浓硫酸正丁醇溶液，或浓硫酸－醋酸（1：1）喷洒后处理：空气中干燥15分钟，再热至110℃直至出现颜色或荧光。
(5)硝酸银－氢氧化铵（Tollen-Zaffaroni）试剂：检查还原性物质。
溶液I : 0.1%N硝酸银; 溶液II: 5N氢氧化铵喷洒剂: I和II以1:5混合(临用前混合)喷洒后处理: 105℃加热5~10分钟,至深黑色斑点出现.(6)磷钼酸或磷钨酸,硅钨酸:检查还原性物质,类脂体,生物碱,甾体喷洒剂: 5~10%磷钼酸或磷钨酸或硅钨酸乙醇溶液喷洒后处理: 120 ℃加热至斑点出现.沉淀试剂: 1克硅钨酸溶于20毫升水中,加10%盐酸至强碱性.2 生物碱(7)硫酸: 检查生物碱及含碘化合物喷洒剂: 0.1克硫酸?混悬于4毫升水中,加入1克三氯醋酸,加热至沸,逐滴加入浓硫酸至澄清.喷洒后处理: 110℃加热数分钟至斑点出现.(8)碘化铋钾(Drage ndorff)试剂:检查生物碱及其他含氟化合物.溶液I: 0.85克次硝酸铋溶于10毫升冰醋酸40毫升水中溶剂II: 8克碘化钾溶于20毫升水中.制备液I+II,等体积混合.可用于棕色瓶中保存较长时间,一般制备液可作沉淀试剂用.喷洒液: 制备液1毫升与2毫升醋酸,10毫升水混合即得(9).碘化汞钾(Mayer)试剂: 检查生物碱.制备液: 13.55克氯化汞和49.8克碘化钾各溶于20毫升水中,等体积混合并用水稀释至1000毫升.喷洒液: 制备液加1/10体积的17%盐酸.喷洒后处理: 观察斑点,并于紫外线荧光分析灯下检出.(10) ?酸纳-浓硫酸(Mandelin)试剂:检查生物碱.1%>酸纳的浓硫酸溶液.与多种生物碱呈不同颜色.(11)碘－碘化钾(Wagner)试剂:检查生物碱.1克碘及10克碘化钾,溶于50毫升水中,加热,加2毫升醋酸,再用水稀释至100毫升.可作纸层板显色剂,液可作沉淀试剂.3 酚类,鞣质(12)三氯化铁:检查酚类及??酸.喷洒剂:1~5%三氯化铁的水溶液或乙醇溶液.并加盐酸少许.??酸呈红色斑点,酚类称蓝色或绿色斑点.(13)铁氰化钾-三氯化钾:检查酚类,芳香胺类及还原性物质.喷洒剂: 1%铁氰化钾水溶液,2%三氯化铁水溶液.临用前等体积混合.喷洒后处理: 喷洒后酚性物质呈蓝色斑点.再喷2N盐酸,能使颜色加深,纸谱可用稀盐酸洗去喷洒液.(14) 4-胺基安替比林-铁氰化钾(Emerson反应): 检查酚类.喷洒剂: I . 2%4-氨基安替比林乙醇溶液;II. 8%铁氰化钾水溶液.或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液方法: 先喷洒I,再喷洒II,即显色,或再放入密闭缸中,缸内放25%氢氧化铵,即产生橙色至深红色.(15) 对氨基苯磺酸,重氮盐(Pauly试剂): 检查酚类,芳香胺类及能偶合的杂环化合物.喷洒剂: 4.5克对氨基苯磺酸,加热溶于45毫升12N盐酸中,用水稀释至500毫升,取10毫升稀释液用冰冷却,加10毫升冷4.5%亚硝酸钠水溶液,0℃放15分钟(此试剂于0℃可保存3天), 用前加等体积1%碳酸钠水溶液.一般重氮化试剂,也可用联苯胺,对硝基苯胺等.(16) 对甲苯磺酸: 检查甾体,黄酮,鞣质.喷洒剂: 20%对甲苯磺酸氯仿溶液.喷洒后处理: 100℃加热数分钟,紫外线分析灯下检查荧光斑点.4 含氧杂环及蒽醌类*(17) 三氯化铝: 检查黄酮体.喷洒1%三氯化铝乙醇液于紫外线荧光分析灯下检示,呈黄色荧光(18)碱式醋酸铅: 检查黄酮体.喷洒剂: 饱和碱式醋酸铅(或饱和醋酸铅)水溶液.于紫外线荧光分析灯下检查荧光斑点.(19)醋酸镁: 检查蒽醌甙,甙元及黄酮体喷洒剂: 0.5%醋酸镁甲醇溶液方法: 90℃加热5分钟,呈红色至紫色斑点.(20)氢氧化钾: 检查香豆素,蒽醌甙及甙元喷洒剂: 5~10%氢氧化钾的甲醇溶液.于日光及紫外线荧光分析灯下检示斑点.5 萜类,甾体(21) 三氯化锑(Carr-Price试剂): 检查甾体,萜类,皂类.喷洒剂: 25克三氯化锑溶于75克氯仿中(亦可以用氯仿或四氯化碳的饱和溶液). 喷洒后处理: 100℃加热5分钟,于紫外线荧光分析灯下检示荧光.(22) 五氯化锑: 检查甾体,萜类,皂甙.喷洒剂: 五氯化锑-氯仿或四氯化碳(1:4),用前新鲜配制.喷洒后处理: 120℃加热至斑点出现,并于紫外线荧光分析灯下检示.(23)香兰醛-硫酸: 检查高级醇类,酚类,甾体,萜类,芳香油.喷洒剂: 1克香兰素溶于100毫升浓硫酸,或0.5克香兰醛溶于100毫升硫酸-乙醇(4:1)中.喷洒后处理: 室温或120℃加热观察显色斑点.(24) 4-二甲氨基苯甲醛,醋酸,磷酸(E.P.试剂): 检查? Azulene 及?前体Proazulene.喷洒剂: 0.25克4-二甲氨基苯甲醛,溶于50毫升醋酸5克85％磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存数月):烃室温即成蓝紫色斑点,>前体于80℃加热10分钟出现蓝紫色斑点.(25) 氯胺T－三氯醋酸: 检查强心甙.喷洒剂: I. 3%氯仿T水溶液新鲜制备.II. 25%三氯醋酸乙醇溶液(能保存数天).10毫升I加40毫升II,用前混合.喷洒后处理: 110℃加热7分钟,紫外线荧光分析灯下检示呈蓝色或黄色荧光. (26) 亚硝酸基铁氰化钠-氢氧化钠(Legal试剂): 检查不饱和内酯;甲基酮或活性次甲基,常用于强心甙喷洒剂: 1克亚硝基铁氰化钠溶于100毫升2N氢氧化钠-乙醇(1:1)的水溶液.显红色或紫色斑点.(27) 3,5-二硝基苯甲酸(Legal试剂): 检查强心甙,α,β-不饱和内酯.喷洒剂: 1克3,5-二硝基苯甲酸溶于50毫升甲醇,加入1N氢氧化钾50毫升.强心甙呈紫红色斑点.6 糖类(28) 邻苯二甲基苯胺: 检查还原糖.喷洒剂: 0.93克苯氨,1.66克邻苯二甲酸溶于100毫升水饱和的正丁醇中.喷洒后处理: 105℃加热10分钟.(29) 2,3,5-Triphenyl-tetrazo lium chloride (T.T.C.)：检查还原糖及其他还原物质。