巴氏染色的几点体会
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色原理是由德国微生物学家巴氏（F. Loeffler）和日本细菌学家小野寺（K. Kitasato）于1884年共同提出的。
该原理是指用一种特定的染色方法，可以
将细菌染色成蓝色或紫色，而其他组织则保持无色或染成红色。
这种染色方法在细菌学和病原微生物学研究中得到了广泛的应用。
巴氏染色原理的核心是利用染色剂与细菌细胞壁的特定化学成分之间的亲和作用，通过染色剂的作用，使细菌细胞壁吸附染色剂，从而使细菌呈现出特定的颜色。
这种染色方法的原理简单，操作方便，且染色效果稳定，因此被广泛应用于细菌学实验室中。
巴氏染色原理的具体步骤包括，将细菌涂片加热固定，然后用甲苯或其他溶剂
处理，使细菌细胞壁透明，接着用染色剂如甲基蓝或结晶紫染色，最后用水洗去余染色剂，晾干即可观察。
通过这种染色方法，可以清晰地观察到细菌的形态、结构和分布情况。
巴氏染色原理的应用不仅局限于细菌学领域，还广泛应用于医学临床诊断中。
通过染色技术，医生可以观察到患者体液或组织中的细菌、病毒等微生物，从而进行疾病的诊断和治疗。
比如在结核病的诊断中，巴氏染色方法可以帮助医生观察到结核杆菌的存在，从而进行准确的诊断。
总的来说，巴氏染色原理是一种简单而有效的细胞染色方法，通过对细菌细胞
壁的特定化学成分的染色作用，使细菌呈现出特定的颜色，从而方便观察和研究。
这种染色方法在细菌学和医学领域都有着重要的应用，对于微生物学研究和临床诊断都具有重要意义。
巴氏染色技术要点
巴氏染色巴氏（Papanicolaou）染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。
其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。
是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。
该染色法不但具有显示细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色，可长久保存。
对如何染好巴氏染色，笔者有以下几点体会，报告如下。
1 EA 36染液pH值的测试EA 36染液的酸碱度对巴氏染色的成功起着关键性作用，EA 36染液由伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等染料配成。
伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等属于酸性染料。
在溶媒中其发色团是负离子部分。
发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合，从而使胞浆显蓝色、绿色、桔黄色或红色。
但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的pH值而改变的。
在偏碱环境中，蛋白质的羧基游离增多（带负电）。
在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）。
所以必须把染液pH值调至5.2为宜［1］。
EA 36染液pH的调节，可用石蕊试纸法，也可用酸度计测试。
当然用酸度计法最为准确。
但以上方法均比较麻烦，同时还要受到仪器设备的限制，不方便。
本文采用一种简单方便的方法。
即用10%磷钨酸及饱和碳酸锂溶液直接测试。
具体做法是，拿一张滤纸先滴少量染液于纸上，若滴染液处呈紫色，说明染液偏碱，则滴加少量10%磷钨酸。
若显绿色，说明染液偏酸，则滴加少量饱和碳酸锂。
并充分混匀。
直至染液滴在纸上既显绿色又有红色，颜色鲜艳为宜。
用此法测试染液pH同用石蕊试纸法测试一样，同样可获得满意的染色效果。
磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料的着色力。
同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱，实际上是一对缓冲剂。
可中和分色及蓝化时可能留下的少量酸或碱。
保证染色达到理想效果。
2 分色分色或酸化，对染色效果也很重要。
分色目的是去掉胞浆中染上的多余的苏木素，使胞核着色显示特异性。
因此，经分色后的胞浆在镜下观察应无色为佳。
若胞浆中还残留有苏木素染料，会影响EA 36染液的着色。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色原理是一种用于细胞核的染色方法，由德国科学家巴氏于1882年首次提出。
该方法通过染色剂与细胞核中的染色质结合，使其显现出不同的颜色，从而帮助科研人员观察和研究细胞核的结构和功能。
巴氏染色原理在生物学、医学和生物技术领域具有重要的应用价值。
巴氏染色原理的基本步骤包括固定、染色和洗涤。
首先是固定，即利用甲醛等化学物质使细胞固定在载玻片上，保持其形态和结构不变。
接着是染色，通过染色剂如甲苯胺蓝、伊红等与细胞核中的染色质结合，使其显现出特定的颜色。
最后是洗涤，将载玻片在适当的溶液中洗涤，去除多余的染色剂，使细胞核清晰可见。
巴氏染色原理的应用范围非常广泛。
在医学领域，巴氏染色原理被用于研究疾病的发病机制和病理变化，如癌症细胞的形态学特征和染色体异常。
在生物技术领域，巴氏染色原理被应用于基因工程和细胞工程中，帮助科研人员观察和分析基因的表达和调控。
在生物学领域，巴氏染色原理被用于研究细胞核的结构和功能，如染色体的形态和数量。
巴氏染色原理的优点在于操作简便、成本低廉、结果清晰可见。
然而，也存在着一些局限性，如染色效果受到固定和染色条件的影响，染色质与其他细胞结构的区分度不高等。
总的来说，巴氏染色原理作为一种重要的细胞核染色方法，在生物学、医学和生物技术领域具有重要的应用价值。
随着科学技术的不断进步，相信巴氏染色原理将会在更多领域得到广泛应用，为人类健康和科学研究做出更大的贡献。
临检基础知识讲解：脱落细胞学检测常用染色法
染色是利用细胞中各种结构的生化组成不同，对染料的亲和力不同，而显示不同的颜色，使细胞的形态和结构易于辨认。
常用的染色有HE、巴氏及瑞-姬氏染色，其特点如下。
1.HE染色：此法染色效果也好，只是胞质色彩不丰富，不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定。
优点是操作简易，试剂易配制。
2.巴氏染色：此法染色特点是细胞具有多色性，色彩丰富鲜艳，胞内结构清晰，染色效果好，是细胞病理学检查常用的方法，尤其是观察女性雌激素水平对阴道上皮细胞的影响。
此法的缺点是操作程序复杂。
3.瑞一姬氏染色：此法适用于血片、淋巴穿刺液和胸腹水涂片。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色原理是一种常用的细胞染色技术，用来对细胞或组织进行染色。
该原理是基于酚醛固定的原理，通过将细胞或组织固定在玻片上，然后处理它们使得它们能够与染料发生反应。
巴氏染色的步骤如下：
1. 固定：将细胞或组织浸泡在酚醛液中，使其固定在玻片上。
酚醛能够保持细胞或组织的形状和某些结构的完整性。
2. 脱水：通过将样本逐渐浸泡在濃度递增的酒精溶液中，使其逐渐失去水分。
这样做是为了减少细胞或组织内的水分，以便尽可能地提高染料对细胞或组织的亲和力。
3. 渗透：将细胞或组织浸泡在骨胶液中，使其充分浸润。
骨胶液能够渗透到细胞或组织的内部，使得染料更容易地与它们发生反应。
4. 染色：将染料溶液滴在样本上，使其与细胞或组织结合。
染料能够结合到不同的细胞或组织结构中，从而显示出不同的颜色或形态。
5. 清洗：将多余的染料以及其他杂质通过浸泡在去离子水中进行清洗。
这样可以让染色的结果更加清晰。
6. 封片：在玻片上涂上封片剂，以保护样本并固定染料。
这样可以使染色的结果保持较长时间。
通过巴氏染色原理，我们可以对细胞或组织进行染色，并观察它们的结构，从而得到更多关于它们的信息。
这种染色方法在细胞学和组织学研究中广泛应用，为我们研究生物体内部的结构和功能提供了重要的工具。
巴氏染色的原理及临床应用
巴氏染色的原理及临床应用1. 原理介绍巴氏染色是一种常用的组织学和细胞学染色方法，用于将细胞核内的染色质显色出来。
这种染色方法起源于19世纪末的德国，由柏氏提出并得到广泛应用。
巴氏染色的原理是用甲醛固定切片中的细胞核，然后使用甲铋绿染色荧光染料，该染料能够选择性地结合DNA，从而使细胞核显色。
2. 巴氏染色步骤巴氏染色可以分为以下几个步骤：•备制甲铋绿染色溶液：将适量的甲铋绿溶解在染色液中，配制成甲铋绿染色溶液。
•制备切片：将待染色的组织细胞固定在切片上，通常使用甲醛进行固定。
固定后，再进行脱水和清洁等处理，使细胞能够完整地附着在切片上。
•染色处理：倒入甲铋绿染色溶液，对切片进行染色处理。
可以使用扩散法或浸漆法染色。
•清洁固定：用甲醇对切片进行清洁固定，使甲铋绿染色质牢固地附着在细胞核上，不易褪色。
3. 临床应用巴氏染色在临床中有广泛的应用，主要用于以下方面：3.1 组织学研究巴氏染色技术能够显色出细胞核以及核内的染色质，对于细胞结构的观察和研究具有重要意义。
通过巴氏染色，可以观察细胞核的形态、大小、排列以及核内的染色质分布情况，从而提供组织学研究的依据。
3.2 细胞学诊断巴氏染色在细胞学诊断中有着重要的应用价值。
通过观察细胞核的形态、核仁和核内的染色质分布情况，可以帮助医生诊断细胞异常和病变。
例如，在细胞学涂片中，巴氏染色可以帮助诊断宫颈癌、乳腺癌等恶性肿瘤。
3.3 分子生物学研究巴氏染色在分子生物学研究中也有着重要的应用。
通过观察细胞核的染色与分布情况，可以了解DNA的含量、形态和排列方式。
这对于研究遗传物质的结构与功能具有重要意义。
此外，巴氏染色染料甲铋绿还可以选择性地染出核仁，从而帮助研究核仁的结构与功能。
4. 研究进展近年来，随着生物学技术的发展和突破，巴氏染色技术也在不断更新和改进。
一些新型的染色剂和染色方法被提出并得到应用。
例如，用于核糖核酸的新型染色剂mORANGE，可以实现DNA和RNA的同步染色。
快速巴氏染色液 注意事项
快速巴氏染色液注意事项快速巴氏染色液是一种常用的细胞染色方法，具有快速、简单、显色明亮等优点。
然而，在使用快速巴氏染色液时，我们需要注意一些事项，以确保染色效果的准确性和稳定性。
以下是使用快速巴氏染色液的注意事项：1. 样本制备：在进行细胞染色前，样本制备非常关键。
首先，要确保样本的新鲜度，尽量选择新鲜组织或细胞。
其次，样本处理要轻柔，避免引起细胞破裂或变形。
最后，要注意样本固定的时间和方法，固定时间过短或过长都会影响染色效果。
2. 清洗步骤：在染色之前，样本需要进行充分的清洗，以去除可能的干扰物质。
清洗步骤应该重复进行，直到洗涤液不再有颜色残留为止。
同时，要避免使用含有蛋白酶或酸碱性溶液进行清洗，以免影响细胞的形态和染色结果。
3. 染色时间控制：染色时间的控制对于快速巴氏染色液来说非常重要。
染色时间过短会导致染色不均匀或染色效果不明显，而染色时间过长则可能出现过度染色的情况。
因此，在染色之前，要根据样本类型和染色液的浓度进行试验，以确定最佳的染色时间。
4. 染色液的使用：在使用快速巴氏染色液时，要注意染色液的储存和使用。
首先，要避免染色液暴露在阳光下或高温环境中，以免影响染色效果。
其次，要定期检查染色液的有效期，过期的染色液可能会导致染色效果不佳。
最后，要遵循染色液的供应商提供的使用说明，按照正确的比例稀释染色液，避免使用过量或过少的染色液。
5. 染色结果的观察和记录：染色完成后，要仔细观察染色结果，并及时记录。
观察时要注意细胞的形态和染色的均匀性。
如果发现染色结果不理想，可以尝试调整染色时间或染色液的浓度。
同时，要将染色结果进行记录，以备后续分析和比较。
使用快速巴氏染色液时需要注意样本制备、清洗步骤、染色时间控制、染色液的使用和染色结果的观察和记录等方面。
遵循这些注意事项，可以提高染色效果的准确性和稳定性，为后续的细胞分析和研究提供可靠的基础。
巴氏染色液作用安全操作及保养规程
巴氏染色液作用安全操作及保养规程巴氏染色液是在生物科学研究和医学诊断中广泛使用的一种染色剂。
就像所有化学试剂一样，正确的使用和保养非常重要。
下面我们将重点介绍巴氏染色液的作用、安全操作和保养规程。
巴氏染色液的作用巴氏染色液是由甲醛和孟德尔水杨酸（也称为苯酚）混合而成的染色剂。
它广泛用于细胞和组织的标本制备，以便观察细胞学的形态、结构和功能。
巴氏染色液可以染色核糖核酸（RNA）、蛋白质和细胞核等有机物。
安全操作规程巴氏染色液是一种刺激性化学物质，在使用时需要保护好自己和实验室同事的健康。
以下是一些巴氏染色液的安全操作规程：1.密封存储巴氏染色液必须密封存储在冷暗处，避免暴露在阳光下或高温地方。
应该将巴氏染色液储存在标有危险物品的储存柜或房间中。
2.戴手套和护目镜在接触巴氏染色液前必须戴上手套和护目镜。
如果不小心触碰到染色液，要迅速将其冲洗掉并咨询专业人员。
3.通风操作巴氏染色液时必须在通风的环境下进行。
这将有助于防止呼吸危害和其他安全问题。
4.遵循正确的操作程序使用巴氏染色液前要阅读和理解安全数据表和物质安全说明书，确保了解正确的操作程序和应急处理方法。
5.避免接触皮肤和呼吸道避免巴氏染色液接触皮肤和呼吸道。
如果染色液不慎接触到皮肤或呼吸道，需要立即清洗或呼吸新鲜空气，并在情况严重时咨询医生。
保养规程保养巴氏染色液可以最大限度地保持其质量和性能，并延长其使用寿命。
下面是一些保养巴氏染色液的规程：1.不要过度稀释巴氏染色液不宜过度稀释。
稀释过量会使其染色效果不佳，使用寿命缩短。
2.避免冻结巴氏染色液不宜冻结，其应储存在常温下的冷暗处。
3.不要照射巴氏染色液不宜长时间暴露在阳光下。
光照下，其中的苯酚会发生氧化反应，降低其稳定性。
4.定期检查定期检查巴氏染色液的颜色和透明度。
如果其发生变化，可能是因为其受到了污染，需要重新制备。
5.避免细菌污染巴氏染色液易受到细菌的污染。
因此，在制备和使用巴氏染色液时需要遵循卫生规程，避免细菌的污染。
HE染色和巴氏染色法
HE染⾊和巴⽒染⾊法HE染⾊和巴⽒染⾊法普通染⾊⼜称常规染⾊或HE（Haematoxylin and eosin）染⾊。
它是病理技术中最常⽤的⼀种⽅法，通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助⽅法，以达到准确，完整的病理诊断。
⼀、染⾊⽬的病理学的所有切⽚，都必须通过⼀种以上的染料，通过各种不同的⽅法，将切⽚中各种不同的物质，在不同染液的作⽤下，将其显⽰出来，使之在光学显微镜下，能够完全的观看各种结构。
例如，HE染⾊，好质量的切⽚可以清晰地显⽰出许多不同的结构，细胞核着蓝⿊⾊，细胞浆着粉红⾊，软⾻着蓝⾊等。
清晰的结构为诊断提供可靠的依据，因此，染⾊技术也是病理技术中的重要组成部分，必须不断地总结，⽅能提⾼。
如果染⾊不好，切⽚染⾊⼀团糟，红蓝不分，结构不清，层次不明，影响了镜下的观察，直接影响了临床诊断，染⾊结果的好坏直接关系到诊断的准确性。
⼆、染⾊的作⽤1．化学作⽤：所有的染⾊液中，可把它们分为两种类型，⼀种为酸性，另⼀种为碱性。
酸性染料中有染⾊作⽤的为阴离⼦；碱性染料中有染⾊作⽤的为阳离⼦，每个细胞也存在着两种物质，细胞核含的是酸性物质，细胞浆含的是碱性物质。
在染⾊时，细胞核中的酸性物质与苏⽊素染液中的阳离⼦发⽣作⽤，细胞浆中的碱性物质与伊红染液中的阴离⼦发⽣作⽤，由于反应的部位不同，结果着⾊有异。
2．物理作⽤：在染⾊过程中，染液中的⾊素微粒⼦浸⼊到被染组织的粒⼦间隙内，此时，因受分⼦的引⼒作⽤，⾊素微粒⼦被吸附⽽着⾊。
由于各种组织有不同的吸附能⼒和不同的吸附程度，因此就可显出来不同的颜⾊来。
⼀般来说，染⾊的学说还有许多，但说服⼒强的仅有上述两种。
但不管怎么样解释，实际上完成的每⼀种染⾊，都与上述两种学说分不开，它们的作⽤是相辅相成，同时存在的。
三、染⾊⽅法及步骤1．⼈⼯苏⽊素，伊红染⾊法（HE法）(1)切⽚浸⼊⼆甲苯中5-10min；(2)切⽚浸⼊⼆甲苯中5-10min；(3)100%酒精1min。
甲状腺细针穿刺细胞学涂片的巴氏染色分析
甲状腺细针穿刺细胞学涂片的巴氏染色分析目的讨论甲状腺细针穿刺细胞学检查（fine needle aspiration cytology，FNAC）的涂片制作及巴氏染色过程，出现的影响涂片质量的因素。
方法对1742例甲状腺FNA涂片，采用巴氏染色法染色后镜下观察结果。
结果镜下可观察到甲状腺滤泡上皮细胞核和胞浆均呈蓝绿色，易区分。
细胞核毛玻璃结构，核沟、核内包涵体等可见。
结论甲状腺FNA涂片涂片后一定要及时固定，否则易肿胀变形，不易诊断。
染色时需准确把握苏木素染色时间，盐酸酒精分化时间，才能使染色后胞核与胞浆着色分明，易区分。
涂片固定时间过久、盐酸酒精浓度过低，穿刺时出血较多、涂片过厚等都会影响红细胞着色。
标签：甲状腺FNA；细胞学涂片；巴氏染色甲状腺FNA，是一种安全、快速的检查手段，对于患者的创伤小，且对甲状腺疾病性质的诊断准确性高[1-2]。
经超声引导下甲状腺细针穿刺（US-FNA），还可对微小结节进行穿刺[3]，有助于病变的早期发现、合理治疗。
而对甲状腺疾病的明确诊断需要依靠病理学，因此，提高甲状腺FNA涂片的质量，对于甲状腺疾病性质的诊断至关重要。
1资料与方法1.1一般资料以2016年本科室甲状腺FNA行细胞学检查的病例为研究对象，共有1742例被纳入本研究。
纳入标准：经B超检查需进行甲状腺FNA病例；患者及家属同意或要求行甲状腺FNA细胞学检查。
男性408例，女性1334例；年龄14～84岁。
1.2 方法1.2.1 甲状腺FNA细针穿刺涂片经B超引导下进行甲状腺结节细针穿刺，对穿刺出的组织进行抹片。
组织尽量涂抹均匀，然后将涂片放入95%酒精中固定30 min。
1.2.2 巴氏染色先将涂片浸入75%的酒精溶液1 s左右，水洗后用苏木素染液染色3～5 min，再放入1.5%的盐酸酒精溶液中5～10 s，经水洗，再依次过75%、95%的酒精溶液约10 s，然后放入EA/OG溶液中3～5 min，染色后依次过95%的酒精溶液和无水酒精，最后浸入二甲苯溶液，湿封后镜检。
巴氏染色
巴氏染色巴氏染色的操作方法及注意事项染色有4个步骤：1、固定；2、核染色；3、胞浆染色；4、透明。
主要达到以下要求：1、核的结构清晰；2、透明度高；3、分色恰当。
一、固定固定的目的细胞制片的迅速固定是制片过程中关键的一步，否则会影响细胞学诊断的准确性。
对于不同的标本需要不同的固定方法。
最为常用的固定方法是95％酒精作为固定液的湿固定法。
酒精作为一种脱水剂能够防止细胞内的酶捋蛋白质分解而自容，并凝固细胞内的物质如蛋白质、脂肪和糖类等，使其保持与组织生活相仿的成分，从而使细胞各部分，尤其核染色质易于着色。
对于巴氏染色来说，酒精固定最为重要的。
如果酒精浓度不足引起的固定不佳，可造成细胞的人为变化，并可导致假阳性或假阴性的诊断。
1、固定方法湿固定法：作为用95％酒精固定液固定的细胞学标本一定使用湿固定法。
制片制备完后，趁标本新鲜而又湿润时，立即放入盛有95％酒精的固定缸内。
制片在固定液内至少保持15-30min。
固定时间通常不超过1周。
这种制片染色后，颜色鲜艳，结构清晰。
如果细胞制片需要送至另一实验室或邮寄他处染色时，可以固定15min后，把制片取出后立即密封的容器中或者使用甘油防止制片干燥。
因为无论固定前或固定后的制片，如果发生干燥后都会影响染色的效果。
2、固定注意事项固定液的过滤：为了防止细胞污染，凡是使用过的固定液，必须过滤后才能再使用。
使用过长的固定液，必须用酒精相对密度计测定，酒精浓度低于90％时应该及时更换新液。
湿固定的重要性：标本再新鲜时及时固定时保证染色效果的重要因素。
如苏木素对细胞核的染色，巴氏染色中胞浆的特殊着色作用，均可因标本干燥后固定而大受影响。
制片标本的邮寄：标本再固定15min后取出，立即加甘油数滴于制片上，装入密封的小盒中。
实验室在收到标本后，先浸入95％酒精中，使甘油溶去，再进行染色。
二、核染色1、苏木素液浸染时间一般在3-5min，但是必须随气温和燃料情况而酌情改变。
夏季或放置较久的苏木素染液容易着色，时间要缩短；冬季或新配制的苏木素染液和应用已久较稀释的苏木素液不易着色，时间要延长。
巴氏染色流程及注意事项
巴氏染色流程及注意事项
以下是 8 条关于巴氏染色流程及注意事项的内容：
1. 嘿，你知道巴氏染色第一步是干啥不？那就是涂片的制作呀！就像建房子得先打牢地基一样重要呢！把样本均匀地涂在玻片上，可不能马虎哦！你想啊，要是涂得不好，后面不就全乱套啦？例子：你看这涂片，是不是得像精心雕琢的艺术品一样呀！
2. 接下来，固定可不能小看呀！就好比把东西紧紧抓住一样。
固定不好，后面染色就容易出问题哦！你说，这重要不重要呀？例子：要是不固定好，那颜色不就乱跑啦。
3. 染色啦染色啦！这可是关键的步骤哟！就像给画上色一样，得仔细把握好颜色的深浅和均匀度呀！你能想象颜色乱七八糟的样子吗？例子：看这颜色，得染得恰到好处才行呢。
4. 冲洗也得注意呀！冲得太狠或者不够都不行，就跟洗车似的，不能太粗暴也不能太温柔呀！不然会咋样呢？例子：哎呀，冲洗可得小心点，不能把好不容易染上的颜色给冲没了呀！
5. 脱水干燥也很关键呢！这就好像让东西变得干脆利落一样，可不能拖泥带水哟！要不然会影响效果呀！例子：这脱水干燥，得迅速干脆呀。
6. 透明也不能马虎呢！就像给东西罩上一层清晰的外衣一样。
做不好的话，前面的努力不就白费啦？例子：你想想，不透明好怎么能看清呀。
7. 封片也很重要哦！把染好的片子保护起来，就像给宝贝穿上保护衣一样。
这你能不重视吗？例子：封片封得好，才能好好保存呀。
8. 哎呀呀，整个巴氏染色流程就是这样啦，每个步骤都得认真对待呀！可千万别掉以轻心哦，不然就达不到好的效果啦！注意事项都记住了吗？一定要记住呀！
我的观点结论：巴氏染色需要仔细按照流程操作并注意各项事项，才能保证染色的质量和效果。
巴氏染色法的原理及结果判读
巴氏染色法的原理及结果判读巴氏染色法，这个名字听起来像是某个高深莫测的化学实验，其实它就是一招能让细菌乖乖现身的“魔法”。
想象一下，科学家们在实验室里忙得不可开交，手里拿着一根小刷子，像是在给细菌涂抹化妆品，其实他们是在为细菌“上妆”，把它们变得更加引人注目。
这样一来，我们就能一眼看出它们是好是坏了，真是方便极了。
说到原理，巴氏染色法其实就是通过不同的染料，把细菌染成不同的颜色。
你瞧，染料有的像春天的花朵一样鲜艳，有的则深沉得像秋天的落叶。
比如，细菌被染上了紫色，那就说明它们是革兰阳性菌，换句话说，它们就像是穿着紫色外套的小可爱。
而如果是红色的，那就不那么讨喜了，说明它们是革兰阴性菌。
这时候，不妨想象一下，紫色的菌儿在舞台上跳舞，红色的则在角落里默默呜咽，生怕被发现。
哎，说到这里，不得不提一下这个染色过程。
实验室里总是弥漫着各种奇怪的气味，仿佛是化学实验的调色板。
科学家们会把细菌涂抹在玻璃片上，然后用火焰轻轻烤烤，嘿，这一步就像是给细菌做个小烤箱烤熟的感觉。
加入染料，紫色的、红色的，调皮的细菌们就开始“洗澡”了。
洗完澡之后，水一冲，染料随之而去，留下的就是那一抹亮丽的色彩。
结果判读就是另一番风味了。
你瞧，显微镜就像是一扇魔法窗户，让我们能看到那些微小的细菌世界。
科学家们紧盯着显微镜，像是在看一场精彩的戏剧。
紫色的小家伙们个个活泼好动，像是在舞台上肆意挥洒，红色的则显得有些沉闷，仿佛在琢磨人生的哲学。
通过这些颜色的对比，科学家们能够判断细菌的种类和特性，真是了不起。
不过，巴氏染色法并不是一成不变的。
这些细菌也会耍点小花样，颜色不够明显，或许是染料不够给力，或者细菌太顽皮。
这时，科学家们就得耐心对待，重复实验，调试染料的浓度，像是在调配一杯完美的鸡尾酒。
只有这样，才能让细菌们的真实面貌展现无遗。
对于那些刚入门的小伙伴来说，巴氏染色法就像是一场有趣的游戏。
每一步都充满了惊喜，结果也让人忍不住想要分享。
巴氏染色原理
巴氏染色原理巴氏染色原理是指在细胞学领域中，用来染色和观察细胞的一种特殊方法。
它是由德国生物学家巴氏发明的，因此得名。
巴氏染色原理在生物学研究中有着广泛的应用，尤其在细胞形态学和细胞遗传学研究中起着重要作用。
巴氏染色原理的基本原理是利用染色剂与细胞内的某些结构或成分发生特异性的化学结合，从而使这些结构或成分在显微镜下显现出不同的颜色和形态。
这种染色方法可以使细胞的各种结构和器官清晰可见，有利于观察和研究细胞的形态、结构和功能。
巴氏染色原理主要包括以下几个步骤，固定、染色、脱水、透明和封片。
首先是固定，即将待观察的细胞或组织用适当的方法固定在载玻片上，使其保持原有形态和结构。
然后是染色，利用染色剂对细胞进行染色，使细胞内的各种结构和器官显现出不同的颜色。
接着是脱水，将染色后的载玻片在酒精中逐渐脱水，使细胞内的水分逐渐被酒精取代。
然后是透明，将脱水后的载玻片在透明介质中浸泡，使细胞透明。
最后是封片，将载玻片用封片剂封好，以便长期保存和观察。
巴氏染色原理在细胞学和遗传学研究中有着重要的应用价值。
通过巴氏染色，可以观察和研究细胞的形态和结构，了解细胞的功能和代谢过程，揭示细胞的生理和生化特性。
同时，巴氏染色还可以用于观察染色体的形态和数量，研究细胞的遗传性状和变异规律，为遗传学研究提供重要依据。
除了在科学研究中的应用，巴氏染色原理还在医学诊断和临床治疗中有着重要的作用。
通过对患者组织和细胞的染色观察，可以帮助医生诊断疾病，判断病情和预后，指导临床治疗和药物选择。
总之，巴氏染色原理作为一种重要的细胞学染色方法，在生物学研究、医学诊断和临床治疗中发挥着重要的作用。
它为科学家研究细胞的形态和结构，揭示细胞的功能和遗传规律提供了重要工具，也为医生诊断疾病、指导治疗提供了重要依据。
巴氏染色原理的发展和应用将进一步推动细胞学和遗传学领域的发展，促进人类健康和生命科学的进步。
巴氏染色评分标准
巴氏染色评分标准
巴氏染色是一种用于检测细胞形态和结构的常用染色方法，常用于细胞学检查。
其评分标准通常包括以下几个方面：
1. 细胞核的形态：正常的细胞核应该呈现圆形或卵圆形，核膜完整，核仁清晰。
如果细胞核形态异常，如核畸形、核深染或核仁不明显等，可能表示细胞存在病变。
2. 细胞质的颜色和质地：正常的细胞质应该呈现浅蓝色或浅粉色，质地均匀。
如果细胞质颜色异常，如变黄、变红或变绿等，或者细胞质质地不均匀，可能表示细胞存在病变。
3. 细胞的大小和形态：正常的细胞大小和形态应该相对一致。
如果细胞大小不一或形态异常，如出现多核、巨核或小核等，可能表示细胞存在病变。
4. 细胞核与细胞质的比例：正常的细胞核与细胞质的比例应该适中。
如果细胞核相对较大或细胞质相对较少，可能表示细胞存在病变。
5. 其他特征：还可能观察其他特征，如细胞的排列方式、是否有异常细胞群体等。
巴氏染色评分标准的具体细节和权重可能会因不同的实验室和临床应用而有所差异。
在解读巴氏染色结果时，通常需要结合临床病史、其他检查结果以及医生的专业知识进行综合判断。
巴氏染色 ppt课件
巴氏染液原理
伊红、亮绿：属于酸性染料，其发色团为负离子，发色团 可与蛋白质中带正电荷的氨基结合，而使胞浆显蓝色、绿 色或红色。
巴氏染液原理
伊红染料作用于成熟鳞状细胞的胞浆、核仁，染色结果呈 粉红色。 亮绿染料作用于代谢活跃的细胞，如鳞状上皮副基底层和 中层细胞、柱状上皮细胞，染色结果呈绿色或蓝绿色。
氨基酸结构通式
氨基酸三维结构
巴氏染液原理
苏木素染色原理：苏木素是碱性染料，能与细胞核内的主 要化学成分脱氧核糖核酸结合而呈紫蓝色。
苏木素结构
墨水树
巴氏染液原理
桔黄G：是一种小分子染料，能够很快地作用于胞浆。
作用：使宫颈、阴道上皮中非正常角化细胞和角化型鳞癌 细胞的胞浆呈鲜艳的橘黄色。
桔黄G
伊红结构式
巴氏染液原理
磷钨酸：酸性质子的位置不同，酸性强度也不同，其中位 于桥氧的酸性质子具有超强酸性，其酸性甚至超过浓硫酸。 作用：1、作为媒染剂
2、作为弱酸缓冲剂
磷钨酸结构式
巴氏染液的影响因素---PH
较高PH值：细胞质红染减少，绿染增多
较低PH值：细胞质红染增多，绿染减少
巴氏染液的存放
经典与简易巴氏染色的比较
经典巴氏染色缺点：使用的染料种类多，配置过程复杂， 影响因素多，易出现沉淀物，染液容易过期。 简易巴氏染色优点：颜色鲜艳，细胞结构清晰，染液可长 期使用，不容易出现染料沉淀物，不容易失效，配置简单， 易操作，减少成本。
染色不佳常见原因及解决方法
2、细胞浆着色不佳
（1）如果全片内胞浆都淡染，则需要延长染色时间或更换新液。
巴氏染色的几点体会
巴氏染色的几点体会李瑞祥熊灏靳敏巴氏（Papanicolaou）染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。
其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。
是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。
该染色法不但具有显示细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色，可长久保存。
对如何染好巴氏染色，笔者有以下几点体会，报告如下。
1 EA 36 染液pH值的测试EA 36 染液的酸碱度对巴氏染色的成功起着关键性作用，EA 36 染液由伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等染料配成。
伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等属于酸性染料。
在溶媒中其发色团是负离子部分。
发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合，从而使胞浆显蓝色、绿色、桔黄色或红色。
但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的pH值而改变的。
在偏碱环境中，蛋白质的羧基游离增多（带负电）。
在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）。
所以必须把染液pH 值调至5.2为宜［1］。
EA 36 染液pH的调节，可用石蕊试纸法，也可用酸度计测试。
当然用酸度计法最为准确。
但以上方法均比较麻烦，同时还要受到仪器设备的限制，不方便。
本文采用一种简单方便的方法。
即用10%磷钨酸及饱和碳酸锂溶液直接测试。
具体做法是，拿一张滤纸先滴少量染液于纸上，若滴染液处呈紫色，说明染液偏碱，则滴加少量10%磷钨酸。
若显绿色，说明染液偏酸，则滴加少量饱和碳酸锂。
并充分混匀。
直至染液滴在纸上既显绿色又有红色，颜色鲜艳为宜。
用此法测试染液pH同用石蕊试纸法测试一样，同样可获得满意的染色效果。
磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料的着色力。
同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱，实际上是一对缓冲剂。
可中和分色及蓝化时可能留下的少量酸或碱。
保证染色达到理想效果。
2 分色分色或酸化，对染色效果也很重要。
分色目的是去掉胞浆中染上的多余的苏木素，使胞核着色显示特异性。
因此，经分色后的胞浆在镜下观察应无色为佳。
若胞浆中还残留有苏木素染料，会影响EA 36 染液的着色。
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值宫颈癌是我国女性健康的重要杀手、从癌前病变转变成癌有一个过程、一般所需10年左右、因此早癌筛查很重要，而液基细胞学（TCT）检查是目前国际上较先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，检出率为100%，在宫颈病变诊断中普及，改变了传统手工涂片的方法，制片效果好，利于观察，阳性检出率高，是应用于妇女宫颈癌筛查的一项先进的技术。
宫颈细胞学的常用染色方法以巴氏染色，HE染色为主，效果各有优劣。
比较两种染色方法，分析各自的优缺点，便于在工作中选择合适的染色方法。
1 材料与方法1.1 仪器材料我院TCT采用武汉呵尔医疗科技发展有限公司的薄层液基细胞涂片试剂盒（细胞保存液），细胞保存液I型，规格15ml/瓶人份，保存条件4℃-30℃保存。
细胞保存液I型成分为：无水乙醇﹑氯化钠和去离子水等，I型主要用于宫颈癌筛查，对取得的宫颈细胞进行固定和保存。
H-E 染色，其染液用苏木素染色液采用Harris液为珠海贝索生物技术有限公司生产的。
伊红（水溶性）为珠海贝索生物技术有限公司生产的。
按《临床技术操作规范》病理学分册的方法自行进行染液配制。
1.2 取材与制片方法取材方法：将宫颈充分暴露以后，用一次性宫颈刷采集宫颈细胞标本，大拇指和食指捏住刷柄，将宫颈刷伸入到宫颈口内，顺时针旋转3-5圈，抽出宫颈刷，卸下刷头放入装有15ml的细胞保存Ⅰ液的小瓶中。
从而成功提取宫颈处的表皮细胞，在这里值得注意的是，（如果病人宫颈上的粘液或分泌物较多，应先用棉球将该粘液或分泌物提前擦拭一下后再取样）。
液基细胞制片，妇科取材保存于细胞保存液中送检。
通过95%酒精固定30min，水冲洗，分别用巴氏、HE两种染色法。
巴氏染色：液基细胞涂片置苏木素染液浸染3min，水冲洗，盐酸酒精分化5s，水冲洗碱水反蓝，95%酒精2min，EA-50染色2min，95%酒精第一次lmin，95%酒精第二次lmin，100%酒精第一次2min，100%酒精第二次5min，二甲苯1～2min，中性树胶封固。
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巴氏染色的几点体会
李瑞祥熊灏靳敏
巴氏（Papanicolaou）染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。
其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。
是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。
该染色法不但具有显示细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色，可长久保存。
对如何染好巴氏染色，笔者有以下几点体会，报告如下。
1 EA 36 染液pH值的测试
EA 36 染液的酸碱度对巴氏染色的成功起着关键性作用，EA 36 染液由伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等染料配成。
伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等属于酸性染料。
在溶媒中其发色团是负离子部分。
发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合，从而使胞浆显蓝色、绿色、桔黄色或红色。
但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的pH值而改变的。
在偏碱环境中，蛋白质的羧基游离增多（带负电）。
在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）。
所以必须把染液pH 值调至5.2为宜［1］。
EA 36 染液pH的调节，可用石蕊试纸法，也可用酸度计测试。
当然用酸度计法最为准确。
但以上方法均比较麻烦，同时还要受到仪器设备的限制，不方便。
本文采用一种简单方便的方法。
即用10%磷钨酸及饱和碳酸锂溶液直接测试。
具体做法是，拿一张滤纸先滴少量染液于纸上，若滴染液处呈紫色，说明染液偏碱，则滴加少量10%磷钨酸。
若显绿色，说明染液偏酸，则滴加少量饱和碳酸锂。
并充分混匀。
直至染液滴在纸上既显绿色又有红色，颜色鲜艳为宜。
用此法测试染液pH同用石蕊试纸法测试一样，同样可获得满意的染色效果。
磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料的着色力。
同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱，实际上是一对缓冲剂。
可中和分色及蓝化时可能留下的少量酸或碱。
保证染色达到理想效果。
2 分色
分色或酸化，对染色效果也很重要。
分色目的是去掉胞浆中染上的多余的苏木素，使胞核着色显示特异性。
因此，经分色后的胞浆在镜下观察应无色为佳。
若胞浆中还残留有苏木素染料，会影响EA 36 染液的着色。
结果会出现该红的胞浆不红，该绿的胞浆不绿，或不红不绿的现象。
看不到红蓝相间现象。
因此，掌握好分色是关键。
分色时间不能过短或过长。
太短胞浆中苏木素除不尽，太长会把核上的苏木素也退掉。
每次应在数秒内完成。
盐酸浓度应偏低（0.5%为好）。
这样便于掌握分色的时间。
3 蓝化或碱化
蓝化的目的是使胞核着色更具有特异性。
经蓝化后的胞核紫中带蓝。
这与红色的胞浆对比更鲜明。
蓝化所用的碳酸锂是一种弱碱。
因此，蓝化过程中碳酸锂还可中和分色时可能残留下的少量盐酸。
为EA 36 的着色创造良好条件。
所以蓝化时间可适当长些，以肉眼观察涂片变蓝为好［2］。
若涂片经EA 36 染色后，镜下观察效果不理想时。
根据涂片着色情况，可于EA 36 染液中滴加少量10%磷钨酸或饱和碳酸锂后重染EA 36 3～5min而补救。
比如:角化细胞浆不红，就滴加10%磷钨酸。
若角化前细胞浆也变红，就滴加饱和碳酸锂如此边复染边镜下观察，直至获得最佳染色效果为止。