海洋真菌抗老年痴呆相关活性成分的筛选与追踪研究
治疗阿尔兹海默病的天然药物活性成分研究现状
物 活 降低脑组织中Ｎ 酶的 性， ｏ的含量和Ｍ Ｏ的活性〔 。 例轻、 度Ａ） Ａ ’ ］ ０ 中 ｌ 患者服用石杉碱甲１周， 服，． ｍ 每天３ ６ 口 ０ｌ ｇ
高度重视， 近年来随着对老年神经生理、 生化、 药理等方面研 药物开发的新品数 目超过了任何其它治疗类药物开发的数 目。现今很多医药公司还把 目光移向天然药物， 试图从中开
作用。Ａ〕 ｌ 患者大脑中老年斑聚集的形成与 尽 一淀粉样肤 究的不断深人， 导致相关药物的开发研究不断取得进展， 此类 （ 有关， 诱导的细 邵） 邓 胞毒性通过活性氧中间体介导。白 黎
黄酮主 要有３ 染料木素（ 种： 三经异黄酮， ｎ ｅ 、 ｇ ｉ ｎ 大豆黄素 ｅｓ ） ｔ ｉ （ 异黄酮， ｉｅ 和黄豆黄素（ｙ ｉ ， 二经 ａｚ ） ｄｄ ｎ ｉ ｇ ｉｎ 其中以 ｌｔ） ｃ ｅ 染料木 素的生物活性最强。大豆异黄酮作为一种抗氧化剂， 具有清 除超氧自 基与过氧化氢， 由 抑制脂质过氧化， 抑制黄嗦岭氧化 酶活性， 增强抗氧化酶活性等抗氧化作用。异黄酮的抗氧化 功能可 是它能 能 够保护神经 重要机制 元的 之一川。 对大豆异
和 Ｍ 胆碱受体数， Ｚ 提高突触效能和结构可塑性， 抑制细胞凋
加兰他敏（习 ｏ ｅ 是从石蒜属植物中分离提取的生 亡和坏死， Ｇ ａｔ ｎ） ｎ 促进海马的神经发生， 因此对多种致痴呆模型的学 物碱， 为可逆性乙酸胆碱酷酶（ ｃ ） Ａ ｈ 抑制剂。耐受性好， 习 Ｅ 不 记忆功能 护作用， 显著改善脑缺血、 有保 能 乙醇和ｐ 淀粉 一 良 反应少， 能改善患者的学习与记忆功能。用加兰他敏与毗 样 等 起 学 记 损害 一〕陈 梅等２， 肤 引 的 习 忆 ［ “。 新 仁 研究发 ２ ５ ］ ６ 现 啦西坦治疗川 进行临床对比 〕 观察： 加兰他敏胶囊 １ ｒ ， 给 ０ｎ 口 ｇ 大鼠 服 参 昔Ｒ 脂 体（ ｍ ・ ’ 腹腔注 人 口 人 皂 ｇ 质 ２ ｇ 掩一） ｌ ｏ 或 射
南海深海沉积物来源真菌抗菌活性成分研究
研究内容摘要及意义细菌是长期以来困扰人类健康的杀手，如何从海洋中, 特别是从可持续利用的海洋微生物资源中寻找结构新颖、作用机制独特的抗菌药物已成为近年来科学家研究的热点和重点。
我们前期的研究发现，一株来源于南海深海沉积物的真菌(N00053)具有很强的抗菌活性。
因此，我们拟将该活性真菌作为研究对象，对其进行大规模发酵培养；运用现代色谱学的分离手段和波谱学的结构鉴定技术，结合抗菌活性筛选实验，快速分离鉴定并筛选出该真菌中的抗菌活性成分，为南海深海沉积物来源真菌抗菌先导化合物的发现和深度开发南海丰富的微生物资源奠定基础。
1、课题国内外现状从上个世纪20年代开始，Fleming和Waksman等人从微生物相互拮抗规律中发现了青霉素、链霉素、金霉素、灰黄霉素等一系列抗细菌和真菌抗生素，挽救了数以百万计人的生命。
随着抗生素的大量使用和不合理用药以及细菌变异速度的加快，细菌的抗药性逐渐增强。
此外，环境污染的加剧，使人类的免疫力不断下降，新的致病菌、条件致病菌和超级耐药菌不断出现，这些已经严重的威胁着人类健康。
因此，迫切需要快速和持续开发新类型的抗菌药物。
寻找新颖结构和独特抗菌作用机制的抗菌药物成为近年来科学家研究的热点和重点。
自1967 年美国海洋技术协会主办了“向海洋要药”的专题讨论会以来，海洋微生物一直是抗菌药物和其他药物的重要来源[1,2]。
由于海洋特别是深海环境条件特殊, 如低温或高温、高盐、高压和寡营养等, 为了适应这样的环境, 海洋微生物产生了独特的代谢系统和机体防御体系。
海洋微生物在物种、遗传基因、代谢途径以及次级代谢产物的化学结构方面均具有高度的多样性, 具有资源可持续利用、生长周期短、代谢易于调控和可通过大规模发酵实现工业化生产等特点。
海洋微生物特别是海洋真菌、海洋放线菌和海洋细菌己是目前和将来很长一段时期内新的生理活性物质重要来源之一[3]。
关于海洋真菌的生物活性物质的研究由来已久。
1945年7月Brotzu在地中海撒丁岛海域分到的一株海洋真菌即顶头孢霉菌(Cephalospoium acremonium)的培养液中分离得到多种抗菌素，如头孢菌素Cephalosporin C，Cephalosporin Pl，P2，P3，P4，P5以及青霉素penieillin N。
海洋真菌生物活性物质研究之管见
海洋药物教育部重点实验室 中国海洋大学医药学院 青岛 266003
摘 要：海洋真菌是活性海洋天然产物的重要来源，到目前为止，已从海洋真菌的发酵产物中分离鉴定了 1,117 个新化合物。 介绍了海洋真菌次生代谢产物的研究历史、现状、特点、研究方法、存在问题及其在新药研究中的应用前景。 关键词：海洋真菌，次生代谢，活性产物，含氮化合物，卤代物
菌物学报
220
图 2 1970-2010 年海洋真菌中发现的新化合物数量（Rateb & Rainer 2011）
Fig. 2 New compounds from marine fungi published in 1970-2010 (Rateb & Rainer 2011).
3 海洋真菌次生代谢产物的特点
4 海洋真菌次生代谢产物的研究方法
海洋天然产物研究较多的是海洋丝状真菌（霉 菌）。一般地，欲从海洋丝状真菌中获得新的活性 天然产物，首先要从大量的海洋真菌株中筛选出具 有活性新天然产物的生产菌株，即“天才菌株 （talented strains）”；其次是通过发酵优化、跟踪分 离、结构测定和活性评价，从“天才菌株”的发酵 产物中获得新的活性天然产物。
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ห้องสมุดไป่ตู้
图 3 1999-2003 年专利海洋天然产物的分类（Frenz et al. 2004）
Fig. 3 Category of active marine natural products in patents published in 1999-2003 (Frenz et al. 2004).
A review on studies of secondary metabolites from marine fungi
阿尔茨海默病的动物模型与药物筛选
阿尔茨海默病的动物模型与药物筛选阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）是一种晚发性、进行性、神经退行性疾病，常见于老年人群体。
该疾病在全球范围内呈现出日益增加的趋势，给患者和家庭带来了巨大的负担。
为了更好地研究AD的发病机制和寻找有效的治疗手段，科学家们通常会利用动物模型开展研究。
动物模型是一种用于模拟人类疾病发展过程的方法。
在AD研究中，常用的动物模型包括小鼠、大鼠和猴子等。
这些模型能够帮助科学家们更好地理解AD的发病机制，并进行药物筛选。
以小鼠为例，科学家们通常会利用转基因技术来构建AD模型。
他们会将人类AD相关基因（如APP、PS1等）整合到小鼠基因组中，使小鼠表达类似于AD患者的脑退行性病理特征。
这些转基因小鼠常被称为“AD小鼠”，它们在学习记忆能力、空间导航能力和行为上表现出与人类AD类似的异常。
利用AD小鼠模型，科学家们可以深入研究AD的病理生理机制。
他们发现，AD小鼠的脑内出现了β-淀粉样斑块的沉积，以及神经纤维缠结的形成。
这与人类AD患者的脑组织病理改变相似。
此外，AD小鼠还会出现神经元损伤和胆碱能系统功能异常等症状，进一步证实了该模型的可靠性和有效性。
在药物筛选方面，AD动物模型也发挥了重要作用。
科学家们可以通过给AD小鼠注射候选药物，观察其对病理特征和行为功能的影响。
以抗淀粉样斑块药物为例，研究表明某些药物可以显著减少AD小鼠脑内的淀粉样斑块沉积。
这为寻找治疗AD的新药提供了重要线索。
然而，虽然动物模型在AD研究中起到了重要的推动作用，但其也存在一些局限性。
首先，动物模型无法完全模拟人类AD的病理特征和病发机制，因为人类疾病的发生往往受到多种因素的综合影响，而动物模型只能够模拟其中的一部分。
其次，动物模型中的病理改变和症状表现与人类AD患者之间存在一定的差异，这也给药物筛选的准确性带来了一定的挑战。
因此，除了动物模型，科学家们还需要开展更多的研究手段，如细胞模型、体外实验等，以综合分析AD的发病机制和寻找更有效的药物筛选方法。
海洋细菌抗胶质瘤活性物质的发现及生物活性研究
海洋细菌抗胶质瘤活性物质的发现及生物活性研究胶质瘤是最常见和死亡率最高的脑肿瘤,多位于脑功能区,手术切除极为困难,药物对胶质瘤的防治尤显重要。
传统的第一代抗胶质瘤药和目前临床上唯一可单独用于胶质瘤治疗的金标药替莫唑胺均属于细胞毒类烷化剂,具有毒副作用大和耐药性等严重不足,临床上迫切需要具有新作用机制的抗胶质瘤新药物。
海洋微生物的次级代谢产物是抗胶质瘤先导化合物的重要资源。
本论文从多种海洋来源的样品中分离得到了 255株海洋细菌,以抑制胶质瘤细胞增殖为导向筛选获得了 27株活性菌株;研究了其中5株放线菌(Streptomycesfradiae PTZ0025、Streptomyces sp.P11-23B、Pseudonocardiasp.HS7、Streptomycessp.Q24 和Streptomycessp.P83B)的化学成分及其抗胶质瘤活性。
应用各种柱层析和HPLC,从这5株菌的培养物中分离到23个化合物,通过各种核磁共振谱、高分辨质谱、二级质谱和化学降解等相结合的方法鉴定了它们的化学结构,发现了 8 个新化合物,它们是:fradimycin A(2)、fradimycin B(3)、fradic acid A(5)、fradic acid B(6)、streptodepsipeptide P11A(8)、streptodepsipeptide P11B(9)、curvularin-7-O-α-D-glucopyranoside(12)和3-acetylamino-N-2-thienyl-propanamide(15)。
抗胶质瘤活性研究发现了18个化合物对胶质瘤细胞的增殖均有抑制作用,其中化合物7、8、12、13、21和22这6个活性化合物还可明显降低胶质瘤U87-MG细胞不同代谢途径关键酶的蛋白表达水平。
非常有意义的是,这6个活性化合物分别是从可降低胶质瘤细胞葡萄糖消耗和乳酸生成的3株放线菌(Streptomyces sp.P11-23B、Psuudonocardia sp.HS7和Streptomycessp.P83B)的培养物中获得,提示,以抑制胶质瘤增殖和影响胶质瘤细胞葡萄糖消耗和乳酸生成为导向发现目标活性化合物的意义和应用前景。
海洋耐(嗜)盐真菌及其次级代谢产物的初步研究的开题报告
海洋耐(嗜)盐真菌及其次级代谢产物的初步研究的开题报告
一、研究背景及意义
海洋中是一种独特的生态系统，藏有丰富的生物资源，其中包括很多具有耐(嗜)盐特性的真菌。
这些真菌能够在高盐环境下生长，具有较强的生存能力，因此在海洋
资源中具有很大的应用价值。
目前，人们已经从海洋中分离到了许多耐(嗜)盐真菌，并在这些真菌的代谢产物中发现了许多具有生物活性的物质，如温和毒素、天然抗生素和抗癌物质等。
因此，
对海洋耐(嗜)盐真菌及其次级代谢产物的研究，不仅可以深入了解其基础生物学特性，还有助于开发新型的药物和生物控制剂等。
本研究的主要目的是从海洋耐(嗜)盐真菌中分离出具有生物活性的成分，并对其进行初步的理化性质和生物活性评价，为进一步的研究打下基础。
二、研究内容和方法
本研究将从海洋样品中筛选出耐(嗜)盐真菌，利用基础生物学和微生物学实验方法对其生长规律、形态特征和种属进行鉴定和确认。
同时，采用传统和现代的化学分
离技术和方法，从耐(嗜)盐真菌中提取纯化次级代谢产物，并对其进行物理化学性质
和结构鉴定。
最后，采用生物学检测方法，对其进行初步的体外和体内生物活性评价。
三、预期结果
本研究将从海洋样品中成功分离出多株耐(嗜)盐真菌，并鉴定其物种、形态和基础生物学特性。
同时，也将从这些真菌中提取到有生物活性的成分，并对其进行初步
的化学鉴定和生物活性评价，为今后的进一步研究提供重要的科学依据。
海洋丝状真菌生物活性物质的研究概述
海洋丝状真菌生物活性物质的研究概述张志华1康应田2（1忻州职业技术学院，山西忻州034000；2定襄人民医院，山西定襄035400）摘要：海洋微生物资源丰富，蕴含丰富的结构新颖的活性物质，主要来源于海洋放线菌和海洋真菌。
特别是海洋真菌因其代谢途径复杂、代谢产物种类多样性丰富而日益受到研究者的重视。
海洋真菌正在成为海洋药源微生物研究的新热点。
海洋真菌及其活性物质较多来自子囊菌属。
关键词：海洋真菌；活性物质；海洋药物；研究中图分类号S963.21+1文献标识码A文章编号1007－7731（2010）11－73－04Research Review on Bioactive Substances of Marine FungiZhang zhihua1et al.（1Xinzhou vocational technical college，Xinzhou034000，2Dingxiang people’s hospital，Dingxiang035400）Abstract：Rich marine microorganisms，contains a wealth of new structure of active substances，mainly derived from marine actinomycetes and marine fungi.In particular，Marine fungi are attention by researchers，because of its complex metabolic pathways and diverse types of metabolic products，Ocean marine fungus medicine is becoming a new hot spot source of Mi-crobiology.And to sum up the more biologically active substances of marine fungi from the Ascomycota.Key words：Marine fungi；Active substances；Marine drug；Research1引言海洋占地球表面积的70%，占生物圈体积的95%，地理环境和生物环境极具多样性。
深海来源的微生物抗肿瘤活性筛选及次级代谢产物的初步研究
深海来源的微生物抗肿瘤活性筛选及次级代谢产物的初步研究摘要：对来自深海的海水、海泥样品进行了微生物分离并通过抗肿瘤活性筛选获得活性菌株，并研究活性菌株6a的次级代谢产物。
方法从样品中选择性分离得到真菌，采用SRB 法对分离得到真菌的发酵产物进行抗肿瘤活性筛选；采用现代分离手段对菌株6a发酵产物进行了活性追踪分离，通过理化性质及波谱学手段进行化学结构鉴定。
结果与结论从深海来源的样品中共分离获得29株真菌，其中7株具有细胞毒活性；从活性菌株6a的发酵产物中分离得到10个单体化合物（1-10），其化学结构分别鉴定为8, 9-dehydro-Desoxybrevianamide E (1)，8, 9-dehydro-12, 13-dehydro-Desoxybrevianamide E (2), 8, 9-dehydro-12- hydroxyl-Desoxybrevianamide E (3), 8, 9-dehydro-12- methoxyl-Desoxybrevianamide E (4), Desoxybrevianamide E (5), 5-methoxysterigmatocystin (6), 5, 4’-demethoxylsterigmatocystin (7), 5, 4’-demethoxyl-sterigmatocystin A (8), 4’-methoxylsterigmatocystin (9), averufin (10), 其中化合物1-4、7-9为新化合物。
关键词：深海来源真菌；次级代谢产物；抗肿瘤活性ABSTRACT: OBJECTIVE The cytotoxic microbial strains isolated from the deep ocean water and sediments were screened, and the secondary metabolites of active fungus 6a were investigated. METHODS Active microbial strains were screened using chronic medulla leucocythemia (K562) cell line. Bioactive fractions were obtained from the crude extract of 6a through a bioassay-guided fractionation and the chemical constituents of the fractions were investigated and purified by the combined use of column chromatography with silica gel and Sephadex LH-20, the preparative HPLC. Their structures were established by spectroscopic methods. RESULTS AND CONCLUSION Twenty nine strains of fungi were isolated. Among them, seven strains showed cytotoxic activities. Ten compounds (1-10) were isolated from the active strain 6a and identified as 8, 9-dehydro-Desoxybrevianamide E (1)，8, 9-dehydro-12, 13-dehydro-Desoxybrevianamide E (2), 8, 9-dehydro-12- hydroxyl-Desoxybrevianamide E (3), 8, 9-dehydro-12- methoxyl-Desoxybrevianamide E (4), Desoxybrevianamide E (5), 5-methoxysterigmatocystin (6), 5, 4’-demethoxylsterigmatocystin (7), 5, 4’-demethoxyl-sterigmatocystin A (8), 4’-methoxylsterigmatocystin (9), averufin (10). Among them, compounds 1-4 and 7-9 are new compounds.Key words: deep ocean sediment derived fungi; secondary metabolites; antitumor activity前言：深海生物处于独特的物理、化学和生态环境中，在高静水压、剧变的温度梯度、极微弱的光照条件和高浓度的有毒物质包围下，它们形成了极为特殊的生物结构、代谢机制系统。
抗氧化海洋真菌的筛选及3株真菌代谢产物的初步分离的开题报告
抗氧化海洋真菌的筛选及3株真菌代谢产物的初步分离的开题报告一、研究背景与意义海洋真菌具有多样的生物活性物质，尤其是具有抗氧化活性的代谢产物，已成为当前研究的热点领域。
随着近年来环境污染程度的加剧，对天然抗氧化物质的需求不断增加，寻找新的抗氧化海洋真菌并开发其代谢产物具有很大的研究价值和实际意义。
本研究旨在从海洋中筛选具有较强抗氧化活性的真菌，分离其代谢产物并深入研究其生物活性，为开发新的天然抗氧化剂提供理论和实践基础。
二、研究内容和目标本研究将通过对海洋样品的采集和初步处理，筛选出具有较高抗氧化活性的真菌，进一步对其进行鉴定和培养，分离纯化其代谢产物，并通过对其结构和生物活性的研究，探究其作为天然抗氧化剂的潜力。
具体目标：1、采集并初步处理海洋样品，筛选出具有较强抗氧化活性的真菌菌株；2、对该真菌进行鉴定和培养，进行代谢产物提取和分离纯化；3、通过NMR、MS等器械手段对代谢产物的结构进行鉴定；4、通过多种生物活性实验，评估代谢产物的抗氧化性质和其他生物活性。
三、研究方法1、采集海洋样品，并通过干燥、粉碎等步骤进行初步处理；2、利用琼脂糖平板、筛选剂等方法对样品进行真菌分离筛选；3、对选出的真菌进行鉴定和培养，并利用固液萃取法、硅胶柱层析法等方法提取和分离纯化其代谢产物；4、应用NMR、MS等方法对所得代谢产物进行结构鉴定；5、进行多种生物活性实验，评估代谢产物的抗氧化性质与其他生物活性，同时对其结构与生物活性之间的关系进行分析。
四、预期成果1、从海洋样品中筛选而得几株具有抗氧化性质的真菌菌株；2、分离纯化和鉴定3株抗氧化代谢产物；3、评估代谢产物的抗氧化性质，对其进行初步理解。
五、研究意义本研究的项目意义在于：1、开发新的天然抗氧化剂，具有较高的实践应用价值；2、丰富海洋真菌资源库，拓展海洋天然产物的研究领域；3、探索海洋环境中抗氧化剂的来源，对保护海洋生态环境具有重要意义。
活性海洋真菌的鉴定及其次级代谢产物的研究
活性海洋真菌的鉴定及其次级代谢产物的研究从福建沿海海滩采集的各种海洋生物样品中分离纯化得到218株海洋真菌,其中酵母菌有52株。
经液体发酵后,分别通过半叶法和叶碟法进行海洋真菌发酵液抑制烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)侵染、抑制TMV增殖的活性筛选,通过MTT法进行发酵液抗肿瘤的活性筛选。
结果表明,有39株海洋真菌的发酵液对TMV侵染的抑制率超过90%,6株海洋真菌的发酵液对TMV增殖的抑制作用较高,5株海洋真菌对两种肿瘤细胞的抑制活性均较好。
进一步,对活性菌株进行了形态鉴定,并对其ITS rDNA序列进行了同源进化关系分析。
结果表明,菌株1008F1 597kb的ITS rDNA序列与Neosartaya fischery(AF 176661)的ITS序列同源性高达100%,可鉴定为Neosartaya fischery.菌株1002F2575kb的ITS rDNA序列与Aspergillus sp.(EU159210、EU159210和EU159210)的ITS序列同源性高达100%,1009F1 609kb的ITS rDNA序列与Whalleya microplaca(EF026129)的ITS序列同源性高达98%,可鉴定为Whalleya microplaca.以7种植物病原真菌为供试菌种,对两株海洋真菌及其次级代谢产物的水溶性提取物进行抑菌试验。
结果表明,菌株1002F2和菌株1009F1抑菌活性相对较高。
其中,菌株1002F2水溶性提取物对高粱炭疽菌和番茄早疫菌的抑制活性较高,ECso值分别为1.34g/L和0.94g/L；菌株1009F1水溶性提取物对瓜果腐霉菌和番茄早疫菌的抑制活性较高,ECso值分别为0.63g/L和0.65g/L。
对初筛得到的7株活性菌株的固体发酵产物粗提物进行抗TMV增殖活性的复筛,结果表明,菌株0312F1和1008F1的固体发酵产物活性仍然较高,从而将其确定为大量发酵的活性菌株。
东海厚壳贻贝多糖的抗衰老生物学活性研究的开题报告
东海厚壳贻贝多糖的抗衰老生物学活性研究的开题报告
一、研究背景
随着我国人口老龄化的加剧，抗衰老的研究备受关注。
多糖作为海洋生物中一类重要的天然活性物质，具有很高的生物学活性，被广泛应用在保健、药品等领域。
而
厚壳贻贝是一种常见的贝类，它的厚壳中含有多种多糖，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤
等多种生物学活性。
因此，研究厚壳贻贝中的多糖对于开发新型的抗衰老保健品具有
重要的意义。
二、研究目的和意义
本研究的目的在于从东海厚壳贻贝中提取多糖，并对其进行化学成分分析和抗衰老生物学活性检测，以期为开发新型的抗衰老保健品提供有力支持。
三、研究内容
1. 东海厚壳贻贝多糖的提取和纯化方法的优化：利用常规提取方法和柱层析技术对多糖进行提取和纯化。
2. 多糖成分的分析：利用色谱、光谱等分析方法对多糖进行化学成分分析，分析其单糖组成、分子量等信息。
3. 多糖的抗氧化活性测试：采用体外试验方法，如DPPH自由基清除、还原力等，评价其抗氧化活性。
4. 多糖的抗炎活性测试：采用细胞实验方法，如西红柿红素诱导RAW264.7细
胞产生炎症反应，通过测定促炎性因子(IL-1β、TNF-α等)的生成量，评价多糖的抗炎
活性。
5. 多糖的抗衰老活性测试：采用体外和体内试验方法，如细胞抗氧化实验、老年小鼠模型等，评价多糖的抗衰老活性。
四、研究预期结果
通过对东海厚壳贻贝多糖的提取和纯化，分析其化学成分，并进行抗氧化、抗炎和抗衰老生物学活性检测，预期能够探明其在抗衰老方面的作用机制，为开发新型的
抗衰老保健品提供有力支持。
海洋微生物源农用抗生活性物质的筛选
Ｋ ｅ ｒ ： ｒｎ ｃｏ ｒ ａ ｉｍ； ｇ ｉｕｔｒｌ ｎｉｉｔ ； ｎｉ ｎ ａ；ｎ ｅ ｔ ｉ ｌｈ ｒｉｉａ ｙ ｗｏ ｄｓ ｍａｉｅｍｉｒ ｏ ｇ ｎｓ ａ ｒ ｌ ａ ｔ ｏｉ ａ ｔｆ ｇ ｌｉ ｓｃｉ ｄ ； ｅｂ ｃｄ ｌ ｃ ｕ ａ ｂ ｃ ｕ ｃａ
２ ０ ３ ；２ ０ ２ ４ ．华东理工大 学上海市化 学生物 学（ 芳香杂环） 点实验室 ， 重
２ １０ ） ０ ７ ２
２ ０ ３ ；３ ０２ ７ ．上 海 南 方 农 药 研 究 中 心 ， 上 海
摘要：对 １４ 海 洋微 生物 （ 中 ４ 海 洋放 线 菌、５ 海洋 细 菌、３ 株 海 洋真 菌）进行 农 ３株 其 ９株 ４株 ｌ 用抗生 活性 物质 筛选 ，分 别测 定其 发酵 上 清液和 菌丝 体 浸提 液 的活体抗 植 物病 源真 菌 、杀 虫、除 草 活性 ，发现 共有 ７ 株 菌株具 有 农用 抗生 活性 ，其 中 ７ 海 洋放 线 菌的代谢 产 物 的活性较 高：３ ７ 株 株 对植 物 病原 真 菌具有较 好 抑 制活 性 的海 洋放 线 菌代 号 为 Ｙ１ ２—２ 、Ｐ ０—１、Ｊ ６ １ ６ ＷＨ一０ ； 两株 ９
Ｓ ａｇ ａ Ｓ ｕｈＰ ｓｃ ｅ ｅｅｒｈＣ ｎｅ， ｈｎ ｈｉ ２ １０ ， ｈｎ ） ｈ ｎ ｈ ｉ ｏ ｔ ｅｔ ｉ ｓａｃ ｅｔｒＳ ａｇ ａ ０ ７ ２ Ｃ ｉａ ｉｄ Ｒ
Ａ ｂｓｒ ｃ ：Ａｃ ｏ ｄｎ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱｏ ｔｅ ｍｉｒ ｂａ ｉ ｓｒｅ ｉｇ ｏ ３ ｔａｎ ｒ ｅｍｉｒｏ ｇ ｎｓ ，ｉｃｕ ｅ４ ｔａｎ ｒｎ ｔａ ｔ ｃ ｒ ｉｇｔ ｈ ｃｏ ｉｌｂｏ ｃｅ ｎｎ ｆ１ ４ ｓｒｉｓｍａｉ ｃｏ ｒａ ｉｍｓ ｎ ｌｄ ９ ｓｒｉｓｍａｉ ｅ ｎ
三株海洋真菌活性代谢产物的分离和结构鉴定的开题报告
三株海洋真菌活性代谢产物的分离和结构鉴定的开
题报告
一、研究背景
海洋真菌因其生长环境独特，生物活性物质的多样性和独特性备受
研究者的青睐。
目前已经分离鉴定出了许多具有重要生物活性的化合物，例如抗菌、抗肿瘤、抗病毒、抗炎症等。
因此，深入研究海洋真菌代谢
产物的发现、分离及结构鉴定对开发新的药物具有重要意义。
二、研究内容
本次研究将从海洋真菌中筛选出具有潜在活性的化合物，进行分离
和结构鉴定。
具体包括以下几个方面的工作：
1.海洋真菌的筛选和分离
采用传统的筛选法和现代分离技术，对海洋真菌进行筛选和分离，
获取商品化菌种进行进一步研究。
2.活性代谢产物的分离
在筛选出的菌株中，选择具有生物活性的菌株，从菌株中分离出代
表性的活性化合物，纯化其中潜在生物活性的化合物。
3.化合物的结构鉴定
利用核磁共振、质谱等分析手段，对分离纯化后的化合物进行结构
鉴定。
三、研究意义
海洋真菌代谢产物的发现、分离和结构鉴定在新药开发和生物医药
领域具有很大的应用前景。
本研究对海洋真菌的分离和鉴定方法进行探讨，为海洋真菌的研究提供了新的思路和方法，有助于深入了解其潜在
的生物活性化合物。
一种海洋来源的抗老年痴呆化合物的制备方法及应用[发明专利]
![一种海洋来源的抗老年痴呆化合物的制备方法及应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/6fbf24040975f46526d3e116.png)
专利名称：一种海洋来源的抗老年痴呆化合物的制备方法及应用
专利类型：发明专利
发明人：宫凯凯,苗双,贺倩倩
申请号：CN202011100991.2
申请日：20201015
公开号：CN112300155A
公开日：
20210202
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及海洋生物及医药技术领域，具体地说，涉及一种从海洋海绵Aaptos suberitoides中分离得到的抗老年痴呆化合物的制备方法及应用。
本发明所述的抗老年痴呆化合物是从海绵Aaptos suberitoides中分离出来的aaptamine类化合物，该化合物的制备方法简单易行，人工合成也易于实现。
同时，本发明首次披露该化合物具有具有较好的抑制乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的活性，其IC值分别为6.071μg/mL和1.492μg/mL，首次提出将该化合物通过结构修饰优化用于制备抑制乙酰胆碱酯酶药物和抑制丁酰胆碱酯酶药物的先导化合物，为开发利用我国海洋生物资源及抗老年痴呆新药的研发提供了科学依据。
申请人：滨州医学院附属医院
地址：256600 山东省滨州市黄河二路661号
国籍：CN
代理机构：济南方宇专利代理事务所(普通合伙)
代理人：史长敏
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海洋药物对老年痴呆症的影响研究
海洋药物对老年痴呆症的影响研究近年来，老年痴呆症在全球范围内逐渐成为一种极具挑战性的健康问题。
老年痴呆症是一种以认知能力下降和行为障碍为特征的退行性疾病，严重影响着患者及其家属的生活质量。
目前，尽管药物疗法等治疗手段已取得了一定效果，但仍然面临诸多挑战。
然而，一种新的治疗模式备受关注，即海洋药物在老年痴呆症治疗中的应用。
本文将重点探讨海洋药物对老年痴呆症的影响。
一、海洋药物的潜力老年痴呆症治疗中，海洋药物的潜力逐渐引起了研究者们的重视。
海洋生物的多样性和环境特点为药物研发提供了广阔的空间。
海洋环境中的海藻、海绵、海洋植物等生物体内存在着大量独特的活性成分，这些成分可能对老年痴呆症发挥积极的影响。
二、海洋药物中的有效成分海洋药物中的有效成分是探索其对老年痴呆症影响的重要因素。
一些研究表明，海洋药物中的某些活性成分具有抗氧化、抗炎、神经保护等多种作用机制。
例如，一些海洋生物体内富含的多糖类物质具有抗炎作用，可以减轻老年痴呆症患者神经炎症反应，起到保护神经细胞的作用。
此外，一些富含omega-3脂肪酸的海洋生物，如鱼类和贝类，对老年痴呆症的预防和治疗也具有积极的作用。
三、海洋药物的治疗应用随着海洋药物研究的深入，已有一些相关研究探讨了其在老年痴呆症治疗中的应用。
一些临床研究表明，一些海洋药物可以显著改善老年痴呆症患者的认知功能和行为表现。
例如，一项研究发现，从海洋中提取的一种多肽类物质可以增加患者的海马神经元生成，改善认知功能。
另外一些实验性药物，如从海洋中提取的抗氧化物质，也显示出对老年痴呆症的潜在益处。
四、挑战与前景尽管海洋药物在老年痴呆症治疗中表现出一定的潜力，但其研究和应用仍面临一些挑战。
首先，海洋环境的复杂性使得药物研发过程较为困难和耗时。
此外，海洋资源的稀缺性和环境保护的需求也限制了海洋药物的开发。
因此，开展更深入的研究，改善研发技术和利用海洋资源的合理性至关重要。
然而，海洋药物作为一种新的治疗模式，依然具有巨大的发展前景。
海洋药物的抗阿尔茨海默病和抗帕金森活性研究
海洋药物的抗阿尔茨海默病和抗帕金森活性研究导言：海洋药物作为一种新兴的药物资源，越来越受到科研人员的重视。
本文将探讨海洋药物在抗阿尔茨海默病和抗帕金森活性研究方面的最新进展。
一、阿尔茨海默病与海洋药物的关系A. 阿尔茨海默病的特点阿尔茨海默病是一种常见的神经系统退行性疾病，主要特点是记忆力丧失、认知功能下降、行为异常等。
目前尚无有效的治疗方法，严重影响患者的生活质量和家庭的幸福感。
B. 海洋药物在阿尔茨海默病治疗中的应用最近研究发现，海洋药物中的一些活性成分能够抑制阿尔茨海默病发生发展的关键步骤，如β-淀粉样蛋白的聚集和氧化应激等。
1. 海洋药物中的多糖类物质多糖类物质是海洋药物中常见的成分之一，研究表明多糖类物质可以抑制β-淀粉样蛋白的形成，从而减轻阿尔茨海默病的症状。
2. 海洋药物中的抗氧化物质海洋药物中富含多种天然抗氧化物质，可以抑制氧化应激的产生，减少阿尔茨海默病的损伤。
二、帕金森病与海洋药物的关系A. 帕金森病的特点帕金森病是一种常见的神经系统退行性疾病，主要特点是肌肉僵硬、震颤、运动不协调等。
目前尚无根治方法，治疗主要是缓解症状和提高患者的生活质量。
B. 海洋药物在帕金森病治疗中的应用海洋药物中的一些活性成分被发现具有潜在的抗帕金森活性，可以改善神经细胞的生存环境和功能。
1. 海洋药物中的活性肽某些海洋药物中的活性肽具有抗氧化、抗炎和抗凋亡等多种保护神经细胞的作用，可以减轻帕金森病的病理过程。
2. 海洋药物中的激素类物质海洋药物中的激素类物质被发现具有抗炎和神经保护作用，可以改善帕金森病的症状和预后。
结论：海洋药物在抗阿尔茨海默病和抗帕金森活性研究中具有巨大的潜力，为阿尔茨海默病和帕金森病的治疗提供了新的思路和方法。
然而，目前研究还处于初级阶段，尚需进一步深入研究和临床实践来验证其疗效和安全性。
相信随着科技的不断进步，海洋药物将会在神经退行性疾病治疗领域发挥重要的作用。
参考文献：1. Smith A, et al. Marine drugs for neurodegenerative diseases: state of the art and future prospects. Marine Drugs. 2020;18(7): 377.2. Wang B, et al. Neuroprotective peptides from marine organisms: recent advances and future prospects. Marine Drugs. 2020;18(6): 303.3. Li C, et al. Neuroprotective effects of marine bioactive compounds against neurodegenerative diseases. Marine Drugs. 2020;18(12): 624.（注：此文章仅为示例，实际需求还需根据具体情况进行调整。
海洋天然产物在神经退行性疾病治疗中的应用
海洋天然产物在神经退行性疾病治疗中的应用近年来，神经退行性疾病的发病率越来越高，给患者及其家庭带来了巨大的困扰和负担。
针对这一问题，科学家们开始研究利用海洋天然产物作为治疗神经退行性疾病的方式。
海洋中蕴含着丰富的生物资源，其中不乏具有治疗神经退行性疾病潜力的天然产物。
本文将探讨海洋天然产物在神经退行性疾病治疗中的应用，并介绍其研究进展及前景。
一、海洋天然产物在阿尔茨海默病治疗中的应用阿尔茨海默病是一种常见的神经退行性疾病，主要特征是认知功能障碍和记忆力衰退。
目前的治疗方案主要包括药物治疗和非药物治疗。
然而，药物治疗的效果有限，且存在许多副作用。
因此，科学家们开始研究海洋天然产物在阿尔茨海默病治疗中的应用。
研究表明，一些海洋天然产物具有抗阿尔茨海默病的潜力。
例如，来自海洋植物的部分提取物被发现具有抑制阿尔茨海默病相关蛋白质聚集的能力，从而减轻病理损伤。
此外，海洋动物中的某些生物活性物质也显示出潜在的抗阿尔茨海默病效果。
这些发现为开发新型的阿尔茨海默病治疗药物提供了重要的参考。
二、海洋天然产物在帕金森病治疗中的应用帕金森病是一种常见的神经退行性疾病，其主要症状包括肌肉僵硬、震颤和运动障碍等。
目前，帕金森病的治疗主要依靠药物和手术治疗，然而这些治疗方法存在一定的限制和副作用。
因此，寻找新的治疗手段势在必行。
研究发现，海洋天然产物在帕金森病治疗中具有一定的潜力。
例如，某些海洋海绵中的抗氧化物质被发现具有抗帕金森病的作用，能够减轻病理损伤和改善运动功能。
此外，还有一些海洋微生物中的天然产物被发现具有保护多巴胺神经元的能力，对帕金森病的治疗具有重要意义。
三、海洋天然产物在亨廷顿病治疗中的应用亨廷顿病是一种罕见的遗传性神经退行性疾病，其特征是神经细胞的变性和死亡。
目前，亨廷顿病的治疗方法仍然非常有限。
因此，科学家们开始寻找新的治疗途径，其中包括海洋天然产物的应用。
研究发现，一些海洋生物中的化合物被发现具有抗亨廷顿病的潜力。
海洋药物的抗痴呆机制研究
海洋药物的抗痴呆机制研究近年来，随着人口老龄化的加剧，痴呆症等神经系统疾病的发病率逐渐上升，成为全球关注的重大健康问题。
而海洋药物由于其独特的生物多样性和广阔的海洋资源，日益成为新兴药物研发的热点之一。
本文将探讨海洋药物在抗痴呆方面的机制研究。
痴呆症是一类以认知功能损害为主要特征的疾病，其主要症状包括记忆力减退、思维敏捷性下降以及行为与语言能力的改变。
而海洋药物中的活性成分则被认为具有潜在的抗痴呆作用。
例如，海洋藻类中的多肽、多糖和多酚等成分都被发现具有抗氧化、抗炎和神经保护作用，有效延缓痴呆症的进展。
首先，海洋药物中的多肽成分常常具有神经保护作用。
例如，某些海藻中提取的多肽能够增强神经细胞的生存能力，并促进脑细胞新陈代谢。
这些多肽还可以影响特定信号通路，促进神经细胞的生长和分化，从而保护受损神经细胞，减轻痴呆症的症状。
其次，海洋药物中的多糖成分也被发现具有一定的抗痴呆潜力。
多糖具有多种生物活性，包括提高免疫力、调节血糖和血脂、促进脑功能等。
研究表明，一些海洋藻类中的多糖有助于改善认知功能，减轻炎症反应，并促进神经再生。
这些作用机制有助于抑制痴呆症的发展，并且可能成为新型抗痴呆药物的候选物质。
此外，海洋药物中的多酚化合物也备受关注。
海洋藻类中的多酚具有较强的抗氧化能力，可以清除自由基，减少脑细胞损伤，并调节炎症反应。
一些研究发现，多酚能够改善学习和记忆功能，提高脑部血液循环，减轻痴呆症的症状。
这些研究结果表明，海洋药物中的多酚化合物可能具有潜在的痴呆症治疗效果。
综上所述，海洋药物中的多肽、多糖和多酚等活性成分具有广泛的抗痴呆潜力，并且可能成为痴呆症治疗的新方向。
然而，海洋药物的开发和应用还面临许多挑战，包括提取纯化技术的改进、活性成分的鉴定以及副作用的评估等。
因此，未来的研究需要进一步深入探索海洋药物的抗痴呆机制，并加强与临床实践的关联，为痴呆症患者提供更有效的治疗方案。
通过对海洋药物抗痴呆机制的深入研究，我们有望找到更多的抗痴呆候选药物，为痴呆症患者提供更好的治疗选择，同时也为海洋资源的合理开发和利用提供了新的方向。
海洋植物抑菌活性初步研究
海洋植物抑菌活性初步研究摘要：采用生长速率法对海带和裙带菜的抗真菌活性进行了筛选。
结果表明：海带三种溶剂提取物对小麦赤霉病菌、黄瓜枯萎病菌和苹果腐烂病菌均有一定的抑制作用，对小麦赤霉病菌的抑菌活性最好，其中乙醇提取物的抑菌率达到了100%，乙酸乙酯和石油醚提取物的抑菌率也在50%左右；乙醇和乙酸乙酯提取物对黄瓜枯萎病菌的抑菌率分别是67.5%，42.11%。
除乙醇提取物外，其余两种溶剂提取物对青霉病菌均有一定的抑菌效果。
但三种溶剂提取物对番茄绵腐病菌均无抑菌效果。
裙带菜乙醇提取物对除黄瓜枯萎病菌外的四种病菌均有抑制效果。
且裙带菜乙醇提取物的抑菌效果要高于海带乙醇提取物的抑菌效果。
同时还测定了海带乙醇提取物在五种梯度浓度下对苹果腐烂病菌和小麦赤霉病菌的抑菌活性，结果表明对苹果腐烂病菌和小麦赤霉病菌的EC50分别为0.67g干物质/ml和0.03g干物质/ml。
关键词：海带；裙带菜；真菌；抑菌活性；EC50由于海藻是海洋生物群落中地位较低的组成者。
海藻为了对付海洋食草动物的大量吞食来维护自身的生存繁衍，大多能产生一些很有特色的代谢物质。
欧美及日本的学者曾研究了多种海藻的抗菌活性，发现多卤、多硫化合物、萜类及结构独特的二萜醇是主要的抗菌成分[1]。
现以海带和裙带菜作为实验材料，通过用不同溶剂对海藻的活性物质进行提取并测定其对苹果腐烂菌等真菌的抑菌活性，以验证海洋植物内抑菌活性物质的存在，初步明确海藻活性提取物对何种真菌具有较好的抑菌活性，为植物源农药的开发和综合利用做初步研究。
一、材料与方法1．实验材料和实验方法（1）供试海藻。
供试海藻为产自青岛的海带和裙带菜，自然晾干后粉碎备用。
（2）海带及裙带菜粗提物抑菌活性测定。
采取连续稀释法纯化，按慕立义[4]方法计算抑菌率。
抑菌率计算公式如下：抑菌率(%)=[1-（处理生长直径-菌饼直径）/（对照生长直径-菌饼直径）]×100% （3）用以上方法测定不同浓度海带提取物对真菌的抑菌率。
抗阿尔茨海默病的牡蛎内生真菌分离筛选及发酵条件优化
抗阿尔茨海默病的牡蛎内生真菌分离筛选及发酵条件优化李钰;袁梦;刘淑珍;王凤舞;仇宏伟【期刊名称】《青岛农业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2024(41)1【摘要】以青岛海域野生牡蛎为原料,采用菌丝尖端切割法分离获得内生真菌,采用形态学和18S rDNA对其进行鉴定,并对其进行种属分类。
结果表明从牡蛎中共分离得到13株真菌,经鉴定这13株真菌全部属于子囊菌门(Ascomycetes),其中7株为枝孢霉属(Cladosporium),是牡蛎内生真菌的优势菌属,占分离真菌总数的53%,另外青霉属(Penicillium)两株,节菱孢霉(Arthrinium)、蜡蚧菌属(Lecanicillium)、链格孢霉属(Alternaria)和黑团孢属(Periconia)的菌株各1株。
对分离得到的牡蛎内生真菌进行体外抗阿尔茨海默病活性筛选,其中5株真菌发酵产物兼具抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)和抑制β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)聚集的活性。
为进一步开发利用,采用单因素结合响应面方法对活性菌株ML3发酵条件进行了优化。
结果表明:最佳发酵条件为发酵温度28℃,发酵时间12天,种子液接种量10%。
在此条件下,次生代谢产物AChE抑制率和Aβ1-42相对抑制率分别为57.65%和52.43%,比未优化前分别提高了9.35%和7.63%,且影响上述两个指标的主次因素均为:种子液接种量>发酵温度>发酵时间。
【总页数】11页(P62-72)【作者】李钰;袁梦;刘淑珍;王凤舞;仇宏伟【作者单位】青岛农业大学食品科学与工程学院;山东省特种食品技术创新中心;青岛农业大学学报编辑部【正文语种】中文【中图分类】TS254.1【相关文献】1.一株具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的牡蛎内生细菌筛选鉴定及发酵条件优化2.盐生海芦笋内生真菌Salicorn 35的分离鉴定与抗氧化发酵条件优化3.盐生海芦笋内生真菌S19的分离鉴定与抗氧化发酵条件优化4.金线莲分泌IAA内生真菌的筛选与鉴定及其发酵条件优化5.烟草赤星病高效生防内生细菌的分离筛选及发酵培养条件优化因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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海洋真菌抗老年痴呆相关活性成分的筛选与追踪研究张翼1，鲍海燕1,2，聂影影1，伦彦玲1，党梓文1，宋采1，邵海艳1，胡雪琼1（1.广东海洋大学食品与科技学院，广东省水产品加工与安全重点实验室，水产品深加工广东普通高等学校重点实验室，湛江市脑健康海洋药物与营养品重点实验室，广东海洋大学海洋药物研究所，广东湛江 524088） （2.大连交通大学环境与化学工程学院，辽宁大连 116028）摘要：本文作者对44株海洋真菌的抗老年痴呆相关活性成分进行了筛选与追踪。
采用DTNB法和DPPH自由基清除法分别评价其提取物抑制乙酰胆碱酯酶（AChE）和抗氧化活性，采用生物自显影和专一性显色剂分析活性物质多样性及结构类型，采用高分辨液质联用分析代表性菌株的活性代谢产物。
发现共计32株菌在不同培养基中的发酵产物，显示了显著的双重活性，它们来自不同真菌类群。
生物自显影显示它们可产生多样化活性成分，化学显色显示其活性成分可能为生物碱等含氮化合物、酚类及其他结构类型的天然产物。
通过液质联用分析，发现一株真菌中分子式为C16H13NO2的代谢产物具有较强抑制AChE活性。
本研究表明海洋真菌是多样化抗老年痴呆活性物质的重要来源，为活性物质的后续分离鉴定奠定了基础。
关键词：海洋生境；真菌；抗氧化；乙酰胆碱酯酶；酶抑制剂文章篇号：1673-9078(2016)11-63-71 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.11.010 Screening and Tracing of Anti-alzheimer Related Bioactive Constituentsfrom Marine FungiZHANG Yi1, BAO Hai-Y an1,2, NIE Ying-Ying1, LUN Y an-Ling1, DANG Zi-Wen1, SONG Cai1, SHAO Hai-Y an1,HU Xue-Qiong1(1.College of Food Science and Technology, Guangdong Ocean University (GDOU), Guangdong Provincial Key Laboratory of Aquatic Product Processing and Safety, Key Laboratory of Advanced Processing of Aquatic Products of Guangdong Higher Education Institution, Zhanjiang Municipal Key Laboratory of Brain Health Related Marine Drugs and Nutritions, Research Institute for Marine Drugs and Nutritions of GDOU, Zhanjiang 524088, China)(2.School of Environmental and Chemical Engineering, Dalian Jiaotong University, Dalian 116028, China)Abstract: Active constituents having anti-Alzheimer’s effects were screened and traced in 44 marine fungal strains. Acetylcholinesterase (AChE) inhibitory and antioxidant activities were assessed using the 5,5-dithio-bis-2-nitrobenzoic acid method and the 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free-radical scavenging method, respectively. Bioautography and specific color-developing reagents were applied to investigate the diversity of bioactive substances and their structural types, respectively. HPLC-Q-TOF-ESI-HRMS was used to characterize representative fungal bioactive metabolites. The fermentation extracts of 32 strains in different culture media showed remarkable dual bioactivity against AChE and DPPH. These dual-bioactive strains originated from different fungal taxa. Bioautography revealed their diverse bioactive constituents. Chemical colorization further suggested that their active components were nitrogenated compounds (alkaloids), phenols, and other types of natural products. Based on HPLC-Q-TOF-ESI-HRMS analysis, a metabolite with molecular formula C16H13NO2 of a strain exhibited relatively strong inhibition effect against AChE. The present study revealed that marine fungi were an important source of diverse anti-Alzheimer’s active substances, and provided a foundation for future studies involving the isolation and elucidation of bioactive compounds.Key words: marine habitats; fungi; antioxidants; acetylcholinesterase; enzyme inhibition收稿日期：2016-04-14基金项目：国家自然科学基金项目（20902009）；广东省“扬帆计划”项目（201433009）；中国博士后科学基金项目（2011M500051，2012T50258）；广东海洋大学引进人才科研启动项目（E15155）；广东海洋大学自然科学研究项目（C14519）；广东海洋大学创新强校项目（GDOU2014030502）。
作者简介：张翼（1978-），男，博士，副教授，研究方向：海洋天然产物化学；鲍海燕（1991-），女，硕士研究生，研究方向：海洋真菌生物活性物质，共同第一作者63随着世界人口老龄化的加剧，老年痴呆（Alzheimer’s Disease，AD）发病率不断增加，寻找抗AD新药迫在眉睫。
目前，胆碱能神经递质缺乏或胆碱能神经元凋亡是被广泛接受的AD发病机制学说[1]。
在该理论的指导下，乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase，AChE）抑制剂成为目前最主流的抗AD药物[2~3]。
不少研究发现，需氧细胞代谢过程中产生的超氧自由基会对脑组织造成损害，促进脑细胞的衰老和死亡，而且自由基还能损害细胞染色体，使第21号染色体畸变，从而发生AD[4]。
而抗氧化剂不仅能够稳定细胞膜，消除活性氧，同时还能抑制和清除脑内β淀粉样蛋白沉积，从而来预防和保护神经细胞免受损伤，从而延缓AD的发展进程[5]。
因此，乙酰胆碱酯酶抑制剂和抗氧化剂均有治疗或延缓AD 的作用，筛选具有抑制AChE活性和抗氧化双重功能的天然药物具有重要意义。
而海洋真菌作为生物活性天然产物的重要资源，已逐渐成为抗老年痴呆活性化合物的研究热点。
目前，已从曲霉属、鹿角菌属、链格孢属和镰刀霉属等多类海洋真菌中都发现了具有抑制乙酰胆碱酯酶或抗氧化神经保护活性的化合物[6]。
本研究对从潮间带动植物或沉木和鲨鱼鳃部分离到的44株真菌，分别用海水马铃薯蔗糖蛋白胨（PSP）培养基和麦芽膏（M）培养基这两种液体培养基发酵，从中筛选出能够体外抗氧化和抑制乙酰胆碱酯酶的发酵提取物，对其活性物质多样性、化学性质及一株真菌中的活性化合物进行了初步分析，以期为活性化合物的进一步筛选和研究奠定基础。
1 材料与方法1.1 材料海洋真菌：供试用44株海洋真菌为本实验室所保藏，其中21株来自大连潮间带动植物或沉木，23株来自鲨鱼鳃部，多数菌株通过ITS1-5.8S-ITS2 rDNA 序列测定已被鉴定到种或属[7~9]，如表1。
培养基：（1）海水马铃薯蔗糖蛋白胨培养基（PSP）：200 g去皮土豆块煮制的新鲜土豆汁500 mL，海盐20 g，蔗糖20 g，蛋白胨5 g，蒸馏水500 mL，pH值未调节，实测值为5.0左右；（2）麦芽膏培养基（M）：麦芽浸膏15 g，海盐20 g，蒸馏水1 L、pH 7.4~7.8。
试剂：碘化硫代乙酰胆碱（A TCh）（sigma DA0048）、5,5-二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）（Ruibio ED8514）、乙酰胆碱酯酶（AChE）（Sigma C3389）、牛血清白蛋白（BSA）（Sigma A1933）、十二烷基硫酸钠（SDS）、二苯代苦味酰自由基（DPPH）（Sigma）和他可林(Sigma A79922-1G)，其他试剂均为国产分析纯试剂。
表1 供试海洋真菌菌株清单Table 1 List of marine fungal strains tested菌株编号种属及Genbank序列号来源菌株编号种属及Genbank序列号来源潮间带真菌鲨鱼鳃真菌6-F Aspergillus sydowii GU244528海藻AP2T1 Penicillium polonicun JN368448鲨鱼11-N1 Alternaria sp. HQ149771海藻BP2T2 Penicillium commune JN368450鲨鱼19-10-1 Aspergillus fumigates HQ149777海绵BP321 Aspergillus unguis JF731256鲨鱼6-N Chaetomium globosum GU244529海藻BP3T4 Penicillium concentricum JN368449鲨鱼13-F1 Aspergillus fumigates GU266273海藻BP3T10 Chaetomium globosum JF731257鲨鱼DLEN2008016 Penicillium glabrum FJ618520海藻BM3T2 Neosartorya glabra JQ082501鲨鱼DLEP2008001 Aspergillus unguis GU117635海藻BM3T6 Aspergillus sydowii JN368457鲨鱼DLEN2008004 Hypocrea lixii GU266272海藻BCT1-4 Aspergillus versicolor JN368459鲨鱼DLEN2008006 Aspergillus clavatus GU266275海绵BCT2-3 Aspergillus flavipes JQ082507鲨鱼DLEN2008010 Hypocrea lixii HQ149775海绵TBG1-1 Penicillium citrinum JQ082503鲨鱼DLEN2008005 Trichoderma harzianumKU530201海藻TBG1-5 Penicillium polonicum JF731266鲨鱼DLEN2008007 Arthrinium phaeospermumGU266274沉木TBG1-8 Penicillium corylophilum JF731268鲨鱼DLEP2008014 Alternaria alternata FJ618522海藻TBG1-16 Penicillium polonicum JN368453鲨鱼DLEP2008005 Fusarium oxysporum FJ618521海绵TBG1-21 Penicillium crustosum KF746907鲨鱼转下页6465接上页11-N2 未鉴定 海藻 TBG2-1 Mucor circinelloides KF746908 鲨鱼 12-F 未鉴定 海藻 TBG2-2 Penicillium polonicum JF731269鲨鱼 DLEN2008012 未鉴定 海藻 TBG2-8 Penicillium chrysogenum JF731271鲨鱼 DLS2008001 未鉴定 贝类 TBG2-10 Chaetomium sp. JQ082500 鲨鱼 DLEN2008018 未鉴定 海绵 TBG3-1 Penicillium polonicum JQ082508 鲨鱼 DLEN2008009 未鉴定 海绵 TBG3-3 Aspergillus fumigates JQ082499 鲨鱼 DLEP2008013未鉴定 海绵 TBG3-14 Penicillium chrysogenum JF731274鲨鱼 TBG3-15-1 未鉴定 鲨鱼TBG2-4未鉴定鲨鱼1.2 主要仪器设备HPX-9082MBE 电热恒温培养箱，上海博讯实业；N-1001S-W 旋转蒸发仪，上海爱朗仪器有限公司；LDZX-50KBS 立式压力蒸汽灭菌器，上海申安医疗器械厂；WFH-201B 紫外透射反射仪，上海精科实业有限公司；V arioskan Flash 全波长多功能酶标仪，美国Thermo Fisher Scientific 公司；Agilent 1260-Bruker maxis Q-TOF 高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱联用仪。