放线菌DX23对马铃薯炭疽病菌的拮抗作用及其鉴定
马铃薯连作土壤拮抗放线菌研究
马铃薯连作土壤拮抗放线菌研究作者：戴勤娟来源：《科技资讯》2014年第03期摘要：马铃薯在我国的农业领域是十分重要的组成部分，有着较为广阔的播种面积。
从当前的种植情况来看，因为连作而导致的土传真菌根系病害对于作物的生产与质量都造成了较大的危害性，出现这种问题的关键性原因是马铃薯种植土壤内微生物区系的失调。
所以，对各种生长年限马铃薯连作土壤内的拮抗放线菌问题展开分析及探讨，并寻找出具有抵抗病害与促进生长功效的多功能放线菌，是马铃薯连作土传根系病害防治工作的关键性环节。
关键词：马铃薯连作土壤放线菌病害中图分类号：S344 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2014）01（c）-0224-01在本文中我们将选择不同连作年限的马铃薯作为试验目标，分别针对健康植株、病害植株的根区土壤和根外土壤作为试验对象展开分析与研究，探讨马铃薯连作土壤中拮抗性放线菌的相关情况，同时选择具有实际应用意义的放线菌，用于马铃薯连作土传真菌病害的治理工作中，确保马铃薯种植产量及质量的有效提高。
1 资料及方法1.1 一般材料（1）试验所用土壤：选择健康植株、患有病害植株的根系生长土壤以及生长外部的土壤。
选择一级马铃薯种加以种植试验。
植株出现的病害属于立枯妊核菌侵入感染类别。
（2）试验所用靶标菌：在本次研究试验中，所选用的靶标菌为4株，包括2株干腐病病原菌，1株黑痣病病原菌立枯妊核菌以及1株黄萎病病原菌大丽轮枝菌。
（3）试验所用培养基：放线菌分离环节所选择的培养基为高氏1号以及腐植酸琼脂。
在将培养基倒进器皿之前要一次混合进重铬酸钾，确保重络酸钾的含量满足每升80 mg的标准。
在对放线菌加以储存与配备琼脂块环节所选择的培养基础都是高氏1号。
在立枯妊核菌的培育、储存与拮抗放线菌的筛选环节所选择的培养基为改良PDA。
剩下的几株病原真菌的培育、储存与拮抗放线菌的筛选所选择的培养基均为一般PDA。
（4）试验所用盆钵土：选择区域马铃薯种植土壤，筛检出直径超过1 cm的碎石以及草根等杂物，然后加入基础物质与肥料，使之满足每千克土壤70 g基质，58 g有机肥料的质量浓度标准，分别在每一个盆钵中加入土壤9 kg。
马铃薯疮痂病拮抗菌的筛选、鉴定及防效研究
马铃薯疮痂病拮抗菌的筛选、鉴定及防效研究马铃薯疮痂病拮抗菌的筛选、鉴定及防效研究引言：马铃薯（Solanum tuberosum）是世界上广泛种植的重要经济作物之一，其主要食用部分为块茎。
然而，马铃薯疮痂病是严重影响其产量和质量的病害之一。
本文旨在研究和发展一种有效的方法来筛选和鉴定马铃薯疮痂病的拮抗菌，并评估其在防治疮痂病过程中的效果。
一、马铃薯疮痂病的病原菌马铃薯疮痂病是由疮痂病菌（Streptomyces scabies）引起的，此细菌普遍存在于土壤中，一旦环境条件适合，就会侵害马铃薯。
疮痂病菌能够在马铃薯的表皮上产生痂皮状病斑，对马铃薯的外观造成严重影响。
二、拮抗菌筛选和鉴定为了寻找对疮痂病菌具有拮抗作用的菌株，我们采集了不同生长环境的土壤样品，并将其制备成悬浮液。
然后，通过筛选试验，挑选出对疮痂病菌具有潜在抑制作用的原悬浮液。
接下来，我们对筛选出的菌株进行鉴定。
我们采用形态学特征、生理生化特性、16S rRNA序列分析等方法来确定这些菌株的分类学位置。
通过比对其16S rRNA序列与数据库中已有的菌株进行比对，进一步验证了我们筛选出的拮抗菌株。
三、拮抗活性评估为了评估拮抗菌株的抗菌活性，我们进行了体外抑制圈试验。
将筛选出的拮抗菌株培养于琼脂平板上，然后在中心打孔，接种马铃薯疮痂病菌。
根据对抑制圈的直径测量，我们可以评估菌株的抑菌活性强弱。
在体内实验中，我们将拮抗菌株通过种子处理的方式引导进入马铃薯植株内。
然后，我们人工接种马铃薯疮痂病菌，观察病程和病害发展情况，并与对照组进行对比。
通过比较拮抗菌株处理组和对照组的病害程度以及产量等参数，我们可以评估拮抗效果。
四、防效研究在我们的研究中，我们发现筛选出的拮抗菌株对马铃薯疮痂病具有明显的抑制作用。
体内实验显示，拮抗菌株处理组的病害程度显著低于对照组，产量也相对较高。
进一步深入研究发现，拮抗菌株能够通过竞争性抑制、产生抗生物质和激活植物免疫等多种机制来抵御疮痂病菌的侵害。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定马铃薯是世界上重要的粮食作物之一，但马铃薯块茎病原真菌给马铃薯的种植和产量带来了很大的危害。
病原真菌的侵染不仅直接损害了马铃薯的生长和产量，还对土壤生态环境造成了不良影响。
寻找有效的拮抗菌株来控制马铃薯块茎病原真菌的侵染成为了当下研究的热点之一。
本文以马铃薯块茎病原真菌为研究对象，通过分离育种和鉴定拮抗微生物，筛选并鉴定了一批优良的真菌拮抗菌株。
本文以此为目标，针对马铃薯块茎病原真菌进行概述，探讨如何进行拮抗菌株筛选和鉴定，以及筛选并鉴定优良的拮抗菌株的方法和技术。
一、马铃薯块茎病原真菌概述马铃薯块茎病原真菌主要包括马铃薯晚疫病、黑斑病、菌核线虫病等。
马铃薯晚疫病由疫霉菌属真菌引起，是世界范围内最为重要的马铃薯病害之一，严重危害了马铃薯的生产。
黑斑病由鱼鳞状链格孢菌属真菌引起，是导致马铃薯减产和质量下降的主要病害之一。
针对这些病原真菌的控制成为了当前马铃薯生产中迫切需要解决的问题。
二、拮抗菌株筛选和鉴定1. 拮抗菌株筛选拮抗菌株的筛选是通过微生物学实验室的实验方法进行的。
从土壤、植物和水体等环境中分离出潜在的拮抗菌株，然后通过对病原真菌的抑制活性进行初步筛选，得出潜在的拮抗菌株。
接着，对这些潜在的拮抗菌株进行对比培养、体外抑制活性实验和生物学特性鉴定，最终确定出具有活性的拮抗菌株。
拮抗菌株的鉴定主要包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。
形态学鉴定是通过对菌株的形态特征、孢子形态和产孢方式等进行观察和测定，来确定拮抗菌株的种属。
生理生化鉴定是通过对菌株的生理代谢能力、生长特性和生化反应等进行分析和测定，来确定拮抗菌株的种属和生物特性。
分子生物学鉴定是通过对菌株的基因序列和遗传特征进行测序分析，来确定拮抗菌株的种属和亲缘关系。
在拮抗菌株筛选和鉴定的基础上，选择出具有活性和稳定性的优良拮抗菌株进行鉴定。
对这些优良拮抗菌株进行耐逆性测定和产孢能力测定，来评价其在不利环境条件下的生存能力和在大规模制剂生产中的产孢能力。
一种利用放线菌提升植物炭疽菌拮抗作用的方法[发明专利]
![一种利用放线菌提升植物炭疽菌拮抗作用的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/bea4eb2b0c22590103029d89.png)
专利名称：一种利用放线菌提升植物炭疽菌拮抗作用的方法专利类型：发明专利
发明人：陈美霞,刘伟,彭成彬,柯栋贤,甘鹏
申请号：CN201811119210.7
申请日：20180925
公开号：CN109182190A
公开日：
20190111
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种利用放线菌提升植物炭疽菌拮抗作用的方法，涉及微生物技术领域，包括以下步骤：A：采集、B：分离、C：筛选、D：复筛、E：统计、F：制备以及G：注射，本发明根据放线菌的抑菌特性，制成能够注入植物体内的抑菌溶液，显著提升了植物炭疽菌拮抗作用，较目前病害防治所用的化学药剂相比，具有高效、低毒、低残留、无污染和不易产生抗药性的特征。
本发明制成的抑菌溶液，能够对多种病原菌进行抑制，在被开发为生防菌制剂用于对植物病害的生物防治上，具有良好的市场应用前景。
申请人：宁德师范学院
地址：352100 福建省宁德市东侨经济开发区学院路1号
国籍：CN
代理机构：北京权智天下知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：李海燕
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马铃薯炭疽病(Colletotrichum coccodes)拮抗菌株的筛选及鉴定
马铃薯炭疽病(Colletotrichum coccodes)拮抗菌株的筛选及鉴定作者：王涵琦畅涛杨成德陈秀蓉来源：《植物保护》2014年第01期摘要采用对峙培养法对马铃薯炭疽病的拮抗菌株进行了筛选和鉴定。
结果表明，拮抗菌株ZHA10对炭疽病病原菌具有良好的抑制作用，抑制率达76.43%，其可以使病原菌菌丝变形和裂解；ZHA10菌体短杆状、革兰氏阳性、大小为(0.5~0.75)μm × (1.5 ~3.1)μm、芽胞中至尖端生。
通过生理生化测定、16S rDNA以及gyrB序列分析，鉴定ZHA10为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。
此外，ZHA10还对番茄早疫病菌(Alternaria solani)、马铃薯干腐病菌(Fusarium oxysporum)、孜然根腐病菌(Fusarium solani)、小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)和马铃薯褐腐病菌(Stysanus stemonitis)均具有较强的拮抗作用。
ZHA10抑菌能力良好，抑菌谱宽，具有进一步开发应用的潜力。
关键词炭疽病；生防菌株；筛选；鉴定中图分类号:S 435.32文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.05291542.2014.01.006Screening and identification of the antagonistic organismsagainst Colletotrichum coccodes on potatoWang Hanqi，Chang Tao，Yang Chengde，Chen Xiurong(College of Grassland, Gansu Agricultural University；Key Laboratory of Grassland EcosystemUniversity, Ministry of Education；Pratacultural Engineering Laboratory of Gansu Province；Sino U.S.Center for Grazingland Ecosystem Sustainability, Lanzhou730070, China) AbstractIn this study, the biocontrol strain of Colletotrichum coccodes on potato was screened by confrontation culture method. The results showed that the strain ZHA10 had good inhibition against C.coccodes, and the inhibition rate reached 76.43%. In order to understand the bacteriostatic mechanism of the endophytic strain ZHA10 to C.coccodes and its taxonomic status, a series of physiological and biochemical experiments were conducted. The results showed that the antibacterial activity was mainly due to hyphal deformation and cracking. ZHA10 was short rod shaped, gram positive, and （0.5-0.75）μm×(1.5-3.1)μm in size, with endospores growing from the center to the tip. Through 16S rDNA and gyrB gene sequence analysis, ZHA10 was identified as Bacillus subtilis. Besides, ZHA10 could effectively inhibit the growth of Alternaria solani, Fusarium oxysporum, Fusarium solani, Bipolaris sorokiniana, Fusarium oxysporum and Stysanus stemonitis, which showed thatZHA10, with broad spectrum and high antagonistic activity against pathogenic fungi, had good potential for development and application.Key wordsColletotrichum coccodes;biocontrol strain;screening;identification生物防治(biological control)是指利用有益生物及其生物代谢产物对植物病害进行有效防治，从而为生产者、消费者和环境降低风险，提高利益［1］。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯是一种重要的农作物，块茎病原真菌对马铃薯生产造成了严重的威胁。
拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定对于控制块茎病原真菌具有重要意义。
本文旨在对马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株进行筛选，并鉴定优良的拮抗菌株。
一、拮抗菌株筛选方法
1. 样品收集：从不同的土壤样品和马铃薯根际土壤中分离出细菌菌株。
2. 筛选方法：将分离得到的细菌菌株进行拮抗实验，通过对块茎病原真菌的抑制能力来筛选出具有拮抗作用的菌株。
3. 筛选条件：采用对照组和实验组进行筛选，每个菌株分别与病原真菌接种进行拮抗试验，观察并记录不同菌株的抑制效果。
4. 优良菌株鉴定：通过对拮抗能力较强的菌株进行鉴定，确定其属于何种细菌，并对其进行进一步分析。
二、拮抗菌株优良鉴定
1. 菌株鉴定方法：采用生理生化方法和分子生物学方法对拮抗菌株进行鉴定。
2. 生理生化方法：通过菌株的生理生化特性，如对不同碳源和氮源的利用能力、产酶特性等进行鉴定。
3. 分子生物学方法：通过16S rRNA基因序列分析和DNA/DNA杂交技术对菌株进行鉴定，确定其属于何种细菌。
三、拮抗菌株应用价值
1. 生物防治：将优良的拮抗菌株应用于农田，利用其对块茎病原真菌的拮抗作用，达到生物防治的目的，减少对马铃薯的病害危害。
2. 生物肥料：拮抗菌株还可以作为生物肥料的一种，促进马铃薯的生长发育，增强植株的抗病能力。
3. 拮抗机制研究：研究优良的拮抗菌株对病原真菌的拮抗机制，为深入了解拮抗作用提供理论依据。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定随着经济的发展以及人们对健康食品的需求，马铃薯的栽培已成为我国的一项重要农业产业。
而马铃薯的病害也是制约其生产和发展的重要因素之一。
因此，寻找有效的马铃薯病害控制手段成为了一个急需解决的问题。
其中，利用微生物拮抗病菌的方法成为了一个备受关注的领域。
在本次实验中，我们从不同的土壤样品中筛选出拥有拮抗能力的细菌株，并对这些菌株进行了鉴定。
具体实验步骤如下：一、土样采集与细菌分离我们在不同的气候和地理条件下采集了不同的土样。
先将每个样品随机切取到不同的深度（1-5cm、5-10cm、10-15cm等），然后将其混合均匀并筛选出适量的细菌样品。
二、病原真菌筛选筛选与马铃薯病原真菌有拮抗作用的细菌之前，需要先获取马铃薯病原真菌。
我们选择有关马铃薯块茎腐烂病的主要病原菌，如软腐霉（Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum）和青霉（Fusarium solani）。
将其接种于含有不同浓度抗生素的琼脂平板上，最终留下能够存活在含重金属或不同抗生素剂量的高生殖百分比真菌。
三、拮抗细菌株筛选对于每种病原真菌，我们都在琼脂平板上各接种了一个菌落，并将其分别于其他微生物菌株接触10天。
之后观察每天抑菌圈的大小，并进行筛选。
筛选标准为：抑菌效果好，菌落形态规整，菌种愈活跃，速度愈快。
四、细菌鉴定采用常规菌种鉴定方法，对所筛选的细菌进行鉴定。
我们主要采用了形态学特征、生理生化特性、生物学特性等多种方法进行鉴定。
同时，还对鉴定结果进行了序列分析，确保结果的准确性。
总之，本次实验筛选与马铃薯病原真菌有拮抗作用的细菌，不仅是为了为我国的农业生产开拓一片新的绿色清洁技术之路，同时也是为了满足人们对健康食品和生活环境的需求，提高我们的生态环境以及城市建设水平。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定【引言】马铃薯是全球重要的食用植物之一，但其生长过程中容易受到各种真菌病原的侵害，导致产量下降和质量下降。
筛选和鉴定能够拮抗马铃薯块茎病原真菌的优良拮抗菌株对于马铃薯生产至关重要。
【筛选拮抗菌株的方法】筛选拮抗菌株的方法一般包括分离、培养和对病原真菌的拮抗性评价。
我们需要从土壤或植物组织中分离出潜在的拮抗菌株。
可以采取表面均匀涂布法，将土壤样品均匀涂布在培养基上，然后在适宜的培养条件下进行培养。
培养基中通常加入适量的抗生素来抑制非目标菌的生长。
然后，我们需要培养和筛选出对病原真菌有拮抗作用的菌株。
一般可以采用双层培养法，将潜在菌株分别在富含葡萄糖和无葡萄糖的琼脂培养基上进行预培养，然后将病原真菌悬浮液均匀涂布在琼脂培养基上。
通过观察菌落形态、周围溶解区和菌落与病原真菌之间的相对位置，筛选出拥有明显拮抗作用的菌株。
我们需要进行对拮抗菌株的拮抗活性评价。
可以采用对抗菌试验，将拮抗菌株加入到含有病原真菌的琼脂培养基中，观察菌落大小、形态、颜色等指标，以及对病原真菌的抑制能力。
【优良拮抗菌株的鉴定】鉴定优良拮抗菌株的方法主要包括形态学观察和分子鉴定。
形态学观察是一种直观的方法，通过观察菌落形态、孢子形态和菌丝结构等特征来判断菌株的分类和鉴定。
这些特征包括菌落大小、形状、边缘、颜色等，以及孢子形态和产孢结构。
可以使用光学显微镜和扫描电子显微镜等设备进行观察和记录。
分子鉴定是一种准确性更高的方法，常用的技术包括PCR和DNA测序。
通过提取菌株的基因组DNA，选择适当的引物进行PCR扩增，获得特定片段的DNA序列。
然后，可以通过序列比对和系统发育分析，将其与已知的真菌数据库进行比对和分类，从而获得菌株的分类和鉴定结果。
【结论】马铃薯块茎病原真菌的拮抗菌株筛选和优良拮抗菌株的鉴定是保障马铃薯生产的重要环节。
通过适当的分离、培养和对病原真菌的拮抗性评价，可以筛选出具有明显拮抗作用的菌株。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定【摘要】本研究旨在筛选马铃薯块茎病原真菌的拮抗菌株，并进行优良拮抗菌株的鉴定工作。
文章首先介绍了马铃薯块茎病原真菌的危害及传播途径，然后详细阐述了拮抗菌株筛选方法和优良拮抗菌株鉴定技术。
实验设计方面，本研究采用了多种分子生物学和生物化学手段，结合实验室和田间试验。
在结果与讨论部分，通过对各菌株的生长速度、抗性能力等指标进行比较和分析，展示了各菌株的不同特点和效果。
结论部分总结了研究成果，提出了未来的展望，并指出了研究在农业生产中的重要意义和应用前景。
通过本研究，将为马铃薯块茎病害的防治提供新的思路和方法。
【关键词】马铃薯、块茎、病原真菌、拮抗菌株、筛选、鉴定、实验设计、结果与讨论、研究成果、展望、意义与应用。
1. 引言1.1 研究背景马铃薯（Solanum tuberosum）是我国主要的经济作物之一，其块茎广泛用于食品加工和饲料生产。
马铃薯块茎病原真菌如晚疫病菌（Phytophthora infestans）、黑斑病菌（Alternaria solani）等一直是制约马铃薯产量和品质的重要病害。
传统的化学农药防治虽然能够一定程度上控制这些病害，但会产生农药残留、抗药性增强等问题，对环境和人体健康造成潜在风险。
1.2 研究目的研究目的是为了筛选出对马铃薯块茎病原真菌有良好拮抗作用的菌株，从而开发出更加环保、高效的生物防治栽培技术，降低农药使用量，减少环境污染和食品残留物的风险，保障农产品质量和环境安全。
通过研究和筛选，提高农作物抗病能力，减少疾病发生率，增加产量和质量，为农业生产提供技术支持和保障，推动农业可持续发展，促进农民收入增加，实现农田生态健康和可持续利用目标。
通过本研究，为相关领域的学术研究和应用实践提供新的理论和实验依据，为我国农业发展和生态保护做出贡献。
1.3 研究意义马铃薯是我国重要的经济作物之一，马铃薯疾病的发生对农业生产造成了严重影响。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定马铃薯是全球重要的粮食作物之一，但其生长过程中易受到多种病原真菌的危害。
因此，研究马铃薯的病害防治措施十分必要。
本文着重介绍了马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株的筛选及优良拮抗菌株的鉴定方法。
一、材料和方法1、病原真菌及拮抗菌株本实验所使用的病原真菌为马铃薯块茎病菌；拮抗菌株为来自多个来源的细菌和真菌。
2、菌种保存将筛选自然环境中的细菌和真菌接种于含有20%甘油的琼脂糖平板上，存放于4℃下冷藏保存。
3、制备病原真菌孢子悬液在马铃薯块茎表面切取0.5cm2的组织，置于含有0.2%酵母浸粉的菌液中搅拌均匀，过滤去除大块茎组织，离心获得孢子悬液。
4、筛选拮抗菌株选取筛选好的真菌和细菌菌落进行拮抗试验。
将病原菌苗与拮抗菌株菌苗分别涂抹于琼脂糖平板上进行对峙培养，24-48小时后观察拮抗情况并选择表现出较强抑制作用的菌株。
5、优良拮抗菌株鉴定为鉴定优良拮抗菌株，需进行以下测试：（1）糖酸盐葡萄糖琼脂糖培养实验。
将优良拮抗菌株接种于糖酸盐葡萄糖琼脂糖培养基中，培养3-4天后观察生长情况。
（2）微生物生长曲线试验。
取20ml琼脂糖液体培养基，接种优良拮抗菌株，用洗涤液清洗头盖玻片，在琼脂糖液面上覆盖，移至培养箱内进行培养，并在规定时间段内记录菌落生长情况。
（3）电子显微镜观察试验。
将优良拮抗菌株接种于琼脂糖平板上，取出生长发育良好的菌落，用电子显微镜观察其形态特征和结构组成。
二、结果分析通过上述方法筛选出的优良拮抗菌株在鉴定实验中表现出较高的生长速度和强大的抑制作用。
电子显微镜观察结果显示，这些菌株具有多种不同的形态特征和结构组成，其中有一些拮抗菌株形态特征与潜在的病原真菌相似，这可能是其生物控制中起到作用的原因之一。
三、结论通过对多个来源的真菌和细菌进行拮抗试验，我们筛选出了多个优良的拮抗菌株。
通过糖酸盐葡萄糖琼脂糖培养实验、微生物生长曲线试验和电子显微镜观察试验，我们对这些菌株进行了鉴定和分析，并评估了其防治马铃薯块茎病的潜力。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定马铃薯是全球重要的粮食作物之一，但受到各种病原真菌的侵害，导致产量下降和质量下降。
病原真菌通过感染马铃薯块茎引起各种疾病，如晚疫病、黑斑病、锈病等，对马铃薯的生产造成了严重影响。
寻找有效的拮抗菌株对抗这些病原真菌，对保障马铃薯的生产和质量至关重要。
本研究旨在筛选出对上述病原真菌具有很强抑制作用的拮抗菌株，并对其进行鉴定和评价。
1.材料与方法1.1 菌株来源本研究利用已分离的一批马铃薯病原真菌，包括晚疫病菌、黑斑病菌和锈病菌等。
从不同的环境中采集一部分富含微生物资源的样品，如农田土壤、根际土壤、植物叶片等。
1.2 细菌和真菌拮抗筛选将采集的样品进行稀释处理，然后分别接种在含有马铃薯病原真菌的琼脂平板上，培养一定时间后进行观察和筛选。
通过对产生抗性圈的细菌和真菌进行进一步分离和纯化，得到单一的拮抗菌株。
1.3 拮抗菌株鉴定通过形态学观察和生理生化实验，对筛选出的拮抗菌株进行初步鉴定。
采用16S rRNA 或ITS序列分析技术，对菌株进行分子生物学鉴定。
最终确定其科、属和种的分类地位。
1.4 优良拮抗菌株评价通过对拮抗菌株对不同病原真菌的抑制作用进行评价，包括抑菌圈直径的测定、抑制作用的观察和统计分析等。
对其对普通细菌和真菌的拮抗性能进行评估，以确保其在多样化环境中的应用潜力。
2. 结果与讨论2.1 拮抗菌株筛选在不同的样品中分离到了大量的真菌和细菌，经过初步筛选和纯化，得到了若干具有抑制作用的拮抗菌株。
这些菌株在琼脂平板上产生了明显的抗性圈，对多种病原真菌具有较强的抑制作用，表现出良好的潜在应用价值。
3. 结论与展望本研究筛选出了多种对马铃薯病原真菌具有显著抑制作用的拮抗菌株，并对其进行了初步鉴定和评价。
这些优良的拮抗菌株可以作为生物防治剂应用于马铃薯的病害防治中，有望提高马铃薯的产量和质量，降低化学农药的使用量，减少环境污染，具有重要的经济和社会意义。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定马铃薯块茎病是一种常见的马铃薯疾病，由多种真菌引起，其主要致病菌包括马铃薯晚疫病菌和马铃薯早疫病菌等。
拮抗菌株的筛选及鉴定是控制该病害的重要手段之一。
本文对马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株的筛选和优良拮抗菌株的鉴定进行了探讨。
对不同环境样品进行采样，包括土壤样品、病原菌感染的马铃薯茎叶样品等。
将样品分别接种于富含养分的琼脂平板上，利用马铃薯茎叶病原真菌的菌丝刺激法筛选出拮抗菌株。
将菌丝刺激菌落扩展，形成过氧化物酶酶反应明显的菌落进行选择。
随后，将拮抗菌接种于含有马铃薯块茎病原真菌菌丝的琼脂平板上，观察拮抗菌株对马铃薯块茎病原真菌的抑制效果。
在拮抗菌株筛选实验中，发现有几株菌株对马铃薯块茎病原真菌具有明显的抑制作用。
这些菌株的菌落在马铃薯块茎病原真菌菌丝周围形成抑制圈，并能够有效地抑制病原真菌的生长。
进一步的鉴定实验表明，这些具有抑制作用的菌株属于拮抗菌，可以有效地减轻马铃薯块茎病的发生，具有潜在的应用价值。
为了更好地了解这些菌株的特性，对其进行了进一步的形态学和生理生化特性的研究。
通过形态学观察，如菌落形状、颜色等来了解这些菌株的差异性。
进行了生理生化特性的研究，如对温度和pH的适应性、嗜盐性等。
通过比较这些菌株与已知拮抗菌株的特性，进一步鉴定这些菌株的种属。
通过以上的实验研究，我们成功筛选出了具有抑制马铃薯块茎病原真菌能力的拮抗菌株，并对这些菌株进行了初步的鉴定。
这些优良拮抗菌株的发现和鉴定为控制马铃薯块茎病的发生提供了一定的理论依据和实验基础。
这项研究为进一步探索拮抗菌在马铃薯病害防治中的应用提供了一定的参考。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株的筛选及优良拮抗菌株的鉴定是一项重要的研究工作，对于马铃薯病害的防治具有重要意义。
我们对这方面的研究还需进一步的深入探讨和完善，以期取得更好的研究成果，并为马铃薯病害的防治提供更有效的措施和方法。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病是由真菌引起的一种重要农作物病害，严重影响着马铃薯的产量和品质。
目前，化学农药是控制该病害的主要手段，但长期使用会产生抗药性和环境污染问题。
利
用拮抗菌来控制马铃薯块茎病具有巨大潜力。
从农田土壤中采集样品，并以马铃薯块茎病原真菌为目标，通过平板拮抗试验筛选拮
抗菌株。
将土壤样品稀释后涂布在含有马铃薯块茎病原真菌的富马酸蔗糖琼脂平板上，观
察并记录有拮抗作用的菌落形态和直径。
选择拮抗作用明显的菌落进行后续实验。
然后，对具有拮抗作用的菌株进行形态学和生理生化特性的鉴定。
通过显微镜观察形
态特征，如孢子形态、菌丝形态和色素产生情况。
通过培养实验确定温度、pH值和碳源的适宜条件。
利用酶活性试验测定酸碱度、蛋白酶和纤维素酶等酶活性。
接下来，通过16S rDNA序列分析和系统进化树构建，对具有拮抗作用的菌株进行分子鉴定。
提取菌株基因组DNA，进行PCR扩增，获得16S rDNA片段。
将扩增的片段测序并比对数据库，获得16S rDNA序列。
根据序列进行系统进化树构建和菌株鉴定，并分析其亲缘关系。
进一步评价优良拮抗菌株的拮抗活性和抗性。
利用双扰基因法，将拮抗菌株与马铃薯
块茎病原真菌同时接种于琼脂平板上，观察并比较拮抗活性。
通过抗性筛选试验，测试拮
抗菌株对不同抗性马铃薯块茎病原真菌的拮抗效果。
本研究的结果将为马铃薯块茎病的生物防治提供重要的理论和实践依据。
通过对优良
菌株的鉴定，可以为今后的菌种选育和菌剂研发提供基础。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定马铃薯是一种重要的经济作物，然而其种植面临着很多病害威胁，其中以块茎病害最为严重。
块茎病害是由真菌引起的，严重影响着马铃薯的产量和品质。
为了解决这个问题，研究人员开始注重寻找真菌拮抗菌株来对抗块茎病原真菌。
本文就马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定进行了探讨。
首先，研究人员需要从自然环境中收集潜在的真菌拮抗菌株。
一般来说，拮抗菌株应该来自于马铃薯种植区域的土壤和植物，因为这些地方会有与块茎病原真菌相同或类似的条件和环境。
经过筛选和鉴定，将筛选出潜在的拮抗菌株。
接下来，需要对这些潜在的拮抗菌株进行初步的鉴定和筛选。
这包括观察菌株是否生长迅速、是否易于培养、是否具有抗生素素优秀的抗生素能力等。
这些特征是判断菌株是否适合于拮抗块茎病原真菌的重要指标。
在初步筛选后，研究人员需要对潜在的拮抗菌株进行深入研究以了解其抗菌能力和机制。
这包括研究这些菌株的代谢产物、生长条件、毒力和抗菌成分的组成等方面。
同时还需要对这些菌株进行抗真菌活性鉴定，以证明其拮抗块茎病原真菌的效果。
最后，需要对优良的拮抗菌株进行进一步的鉴定和确认。
这包括对其遗传特征、菌株分离、分子分析、基因测序等方面的分析。
这些信息有助于确定优良拮抗菌株的数量、遗传多样性和分布情况。
总之，通过对马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株的筛选和鉴定，可以为马铃薯的生产提供有效的防治方法。
同时，研究人员还可以借鉴这些优良拮抗菌株来研发更为广泛的生物农药和生物治疗方法，为农业生产提供更好的服务。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定【摘要】本研究旨在利用马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定方法，探究植物病原真菌防治策略。
首先对病原真菌进行筛选，然后使用拮抗菌株进行对抗，最终鉴定出优良的拮抗菌株。
通过结果分析和讨论，我们得出结论：拮抗菌株对马铃薯块茎病原真菌具有有效的控制作用，并具有重要的应用前景。
研究总结指出了拮抗菌株在植物病害防治方面的重要性，未来展望是进一步优化拮抗菌株筛选方法，提高病害抗性，为农业生产提供更多可能性。
本研究为马铃薯块茎病害的防治提供了新的思路和方法，具有重要的理论与实践意义。
【关键词】马铃薯、块茎、病原真菌、拮抗菌株、筛选、鉴定、优良、结果分析、讨论、研究总结、展望1. 引言1.1 研究背景马铃薯是我国重要的农作物之一，但是在种植过程中常常受到各种病害的威胁。
马铃薯块茎病原真菌是造成马铃薯病害的重要原因之一，这些真菌会导致马铃薯块茎腐烂，影响产量和质量。
在过去的研究中，化学农药是控制病害的主要手段，但是随着人们对环境保护和食品安全的重视，寻找替代方法来有效防治病害变得尤为重要。
自然界中存在着许多能够抑制病原真菌生长的微生物，这些微生物被称为拮抗菌株。
通过筛选和鉴定优良的拮抗菌株，就能够有效地防治马铃薯块茎病害。
本研究旨在从自然界中筛选出对马铃薯块茎病原真菌具有拮抗作用的菌株，并对其进行鉴定和评价，为替代化学农药提供新的防治方法。
通过对研究背景的深入探讨，可为后续的实验设计和数据分析打下坚实的基础。
1.2 研究意义马铃薯是世界上重要的粮食作物之一，但其产量受到多种病害的威胁，其中块茎病原真菌是马铃薯生产中的主要病害之一。
病害不仅会导致马铃薯产量下降，还会影响其品质，给农民造成经济损失。
寻找有效的方法来控制马铃薯块茎病原真菌非常重要。
本研究旨在筛选出对块茎病原真菌具有拮抗作用的菌株，进而用于控制病害的发生。
通过研究优良的拮抗菌株，可以有效地减少农药的使用量，降低农业生产中的化学污染，保护农业生态环境。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株筛选及优良拮抗菌株鉴定马铃薯块茎病是马铃薯产业中常见的一种病害，其病原真菌有利于病害的发生和扩散。
针对马铃薯块茎病原真菌的拮抗菌株筛选和鉴定具有重要意义。
需要从土壤和马铃薯植株表面收集样本。
收集的样本应包括块茎、叶片、茎部、花朵等。
将这些样本分别在适宜的培养基上进行分离培养，以获得单一的菌落。
然后，通过形态学和生理生化特征对分离株进行初步鉴定。
形态学特征包括菌落形状、颜色、质地等。
生理生化特征包括菌落生长条件、利用碳源和氮源的差异。
通过比对已有的真菌鉴定手册或数据库，可以初步判断菌株的属种。
接下来，对初步鉴定的菌株进行药剂敏感性测试。
通过将菌株接种到含有不同浓度药剂的培养基上，观察菌落的生长情况，可以评估菌株对不同药剂的敏感性。
对于表现出良好的敏感性的菌株，应进一步鉴定其抗药性基因。
对几个代表菌株进行拮抗实验。
在马铃薯块茎病原真菌生长培养基上切割小块菌落，然后在菌周围刺激菌界面生长的菌株。
观察菌株对马铃薯块茎病原真菌的拮抗效果。
通过以上实验，可以初步筛选出具有拮抗效果的菌株。
对于拮抗效果较好的菌株，可以通过16S rDNA或ITS序列分析进行分子鉴定，进一步确定其属种和亚种。
还可以对优良拮抗菌株进行其他鉴定。
通过抗菌谱测试，评估其对其他病原真菌的拮抗效果。
通过发酵条件优化，获得优良拮抗菌株的最佳发酵条件。
将得到的优良拮抗菌株进行大规模培养，并考虑将其应用于田间试验。
通过田间试验，评估优良拮抗菌株在抑制马铃薯块茎病发生和扩散方面的实际效果。
马铃薯块茎病原真菌拮抗菌株的筛选和鉴定是一个复杂而多样的过程，需要通过形态学、生理生化特征、药剂敏感性、拮抗实验等多种手段来进行评估。
这样才能获得具有拮抗效果的优良菌株，并为马铃薯块茎病的防控提供有效手段。
拮抗真菌和放线菌复配发酵产物对马铃薯晚疫病的防病作用
租 用 ，但是 对 于梨 黑斑 病 菌 ，三 株 放 线菌 都 表现 出了显 著 的拮 抗 作 用 。这也 就 意 味着 三株 放 线菌 之 间 是可 以复合 发 酵 的 ，但 是不 能选 用两株 拮抗 真 菌和 三株放 线菌 之 间的共 同发 酵 。 ３ ． ２ 单独 发酵 液 、复合 发酵 液的 抑制 作用 三 种放 线菌 采 用 的 发酵 方式 冉 ，在对 致 病 疫霉 的抑制 作 用 方 面 也表 现 出 了相 对 显 著 的差 异 ，其 中在 单 独发 酵 的 方式 中 ，Ｎ Ｂ ８ 单 独发 酵 液 的抑 制作 用 最显 著 ，而另 外 两种 发 酵 液单 独 的抑 制 作 用 相对 较 弱 ，还 不 足３ ０ ％。在 复合 发 酵 方式 中 ，Ｎ Ｂ ８ 和Ｎ Ｂ １ ｌ 复 合 发 酵液 以及 三株 放线 菌 复合 发 酵 之后 基 本 没有 产 生抑 制 作 用 。这 也 就意 味着 ，选 用Ｎ Ｂ ８ 与 真菌进 行 发酵液 的 复配 。 ３ ． ３ 确 定 单一拮 抗菌 振荡 或者 静置 的培 养方 式 确 定 的 方式 主 要 是对 梨 黑 斑 病菌 和 Ｎ Ｂ ８ 分别 进 行 振 荡 培养 和 静 置 培养 ，在振 荡 培养 条 件 下获 取 的 发酵 液对 致 病 疫霉 的生 长具 有 促 进作 用 ，但 是 在静 置 培 养状 态 下 获 取 的发 酵 液 却 有 着 高 达 ９ ０ ％以上的抑 制作 用 ；再 来看 Ｎ Ｂ ８ ，在 静置 培养 状态 下获 取 的发 酵 液抑 菌 效果 不理 想 ，基本 可 以忽 略不 计 ，但 是 在振 荡 培养 状 态 下 得 到 的发 酵液 抑 菌效 果 理想 ，可 以达 到９ ０ ％。这 也 就 是说 ，对 于 梨黑 斑 病 菌 ，静 置 培养 是 最 为合 适 的 ，但 是 对 于 Ｎ Ｂ ８ 来 说 ，振 荡 培养 则是合 适 的 ，因此 ，两者 不能 进行 混合 发酵 。 ３ ． ４ 梨黑 斑病 菌和 Ｎ Ｂ ８ 发酵 液复配 后 的抑菌 作 用 与单 一发 酵液 相 比，供 试 的９ 种不 同体 积 比 的复配 在抑 菌作 用 方 面都 要更 加 显 著 ，尤其 是 是 ２ ：１ 体 积 比进 行 复 配 的效 果最 为 理 想 ，抑 菌 效 果达 到 了９ ６ ％以 上 ，而 梨 黑斑 病 菌 发酵 液 的 抑 菌率 是 ９ １ ． ９ ％，Ｎ Ｂ ８ 单 独发 酵液 的抑 菌率 是８ ９ ． ９ １ ％。 ３ ． ５ 拮 抗发 酵液 对马铃 薯 块茎 的防病 作 用 在 对梨 黑斑 病 菌 和Ｎ Ｂ ８ 以及 两 者 的复 配 发 酵液 进 行 诱 导处 理 以后 ，病 情 的 指数 都 是在 ８ ０ ％左 右 ，相对 于对 照来 说 ，稍 微有 些 低 ，这就 是 说它 们对 马铃 薯块 茎 都 表现 出 了一 定 的 诱导 抗 病性 ， 但 是 在这 三 种处 理 方式 之 间没 有 表 现 出显 著性 的差 异 ；如 果 先用 三种发 酵液 对块 茎进 行 预先 处理 的话 ，３ 天后 再 进行致 病 疫霉 接 种 的话 ，三种 方 式 的病 情 指数 都 有 所下 降 ，基 本都 在 ６ ０ ％以下 ，这 就 说 明 ，还 是起 到 了 一定 的 预 防作 用 。如 果 预先 进 行致 病 疫 霉 的 接 种 ，等 到３ 天 后再 用发 酵液 进 行处 理 的话 ，病 情指 数与 对照 组 相 比没 有显 著 差 异 ，这 就可 以证 明三 种 发 酵液 对 已经 感染 致 病 疫 霉 的块 茎是不 具备 治疗 作用 的 。 参考 文献 ［ １ ］ 桂春爽， 梁宁， 蒋 继 志． 拮 抗 真 菌 和放 线 菌 复配 发 酵 产物 对 马 铃 薯 晚 疫 病 的 防病 作 用 ［ Ｊ ］ ． 河 北大学学报（ 自然 科 学 版 ） ，
一株能防治马铃薯青枯病的拮抗菌及其微生物有机肥料[发明专利]
![一株能防治马铃薯青枯病的拮抗菌及其微生物有机肥料[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/471e86f56edb6f1afe001f16.png)
专利名称：一株能防治马铃薯青枯病的拮抗菌及其微生物有机肥料
专利类型：发明专利
发明人：沈其荣,丁传雨,陈巍,杨兴明
申请号：CN201010608565.X
申请日：20101228
公开号：CN102174428A
公开日：
20110907
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一株能防治马铃薯青枯病的拮抗菌及其生产的微生物有机肥料，属于农业集约化生产技术。
本发明分离到了一株对马铃薯青枯病病原细菌有显著拮抗作用的拮抗菌（I-23），拮抗菌与有机堆肥制成微生物有机肥料，肥料中拮抗菌含量1×10cfu·g以上,全氮含量为4~5%，总氮磷钾养分为6~10%，有机质含量为30~35%。
试验表明，这种微生物有机肥料施入土壤后能够使拮抗菌迅速繁殖，在土壤中形成优势群，在马铃薯青枯病严重的连作土壤中对马铃薯青枯病的防治率达80%以上。
施用本微生物有机肥料能有效防治马铃薯青枯病的发生。
申请人：南京农业大学,江苏新天地生物肥料工程中心有限公司
地址：210095 江苏省南京市卫岗1号
国籍：CN
代理机构：南京经纬专利商标代理有限公司
代理人：张素卿
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２ ０ １ ５ 年 ４月
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第 ５ ０卷
双 月 刊
第 ２ 期 ９ ５ ￣９ ９
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放 线 菌 ＤＸ２ ３对 马铃 薯 炭疽 病 菌 的拮 抗 作 用 及 其 鉴 定
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关键词 ： 放 线菌 ； 马铃薯 炭疽 病菌 ； 拮抗作用 ； 鉴定 中图分类号 ： Ｓ ４ ３ ５ ． ３ ２ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ：１ ０ ０ ３ — ４ ３ １ ５ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ２ — ０ ０ ９ ５ — ０ ５
ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ ｃ ｉ ｒ ｃ ｌ ｅ ｄ ｉ ａ ｍｅ ｔ ｅ ｒ ｗａ ｓ ｕ ｐ ｔ ｏ ２ ５ ． ７ ｍｍ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ７ ２ ｈ ｏ ｆ ｃ ｕ ｌ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ａｃ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ， ｐ ｈ ｙ ｓ ｉ ｏ —
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Ｈ ｕ ｇ ｈ ｅ ｓ ］ ￣ ］ 起＿ ５ ］ ， 该病菌可 以侵染包括葫芦科 、 茄科
在内的 １ ３ 个科的 ３ ５ 种寄主， 尤 其喜 欢侵染 马铃薯 、
番茄 ， 该 病菌 能 以小 菌 核 的 形 式在 块 茎 表 面 和 内部
长期 存 活 ， 还 可存 活 于其 他 营养 体上 ， 带病 块茎 和带
马铃 薯 炭 疽 病 （ ｂ ｌ ａ ｃ ｋ ｄ ｏ ｔ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ） 广 泛 分 布 于 美国、 意大 利、 英 国和加拿 大等 ５ ０多 个 国 家 和 地
区＿ １ ］ ， 可 以发 生在 马铃 薯 的各个 生 长部 位 ， 如地 下部 分、 茎基 部及 叶部 ｌ ＿ ２ ］ ； 该病 菌侵 染 根部 能引起 根 的腐
陈淑琴 ， 王 生 荣
（ 甘肃农业 大学草业学院 ， 甘肃 兰州 ７ ３ ０ ０ ７ ０ ）
摘要 ： 为获得马铃薯炭疽病 菌的生防放线菌 ， 从 马铃薯种植地健康植株 的根 围土壤 中分 离筛选放 线菌． 结果 表
明， 采用平板对峙法筛选 得到 １株 编号 为 Ｄ Ｘ２ ３的拮抗 菌 ， 其拮 抗 作用 表现 为 ： 培养 ７ ２ ｈ后 ， 平 均抑 菌 圈直径 为 ２ ５ ． ７ ｉ ｎ ｎ ｚ根据形 态学特征 、 生 理生化特性 和 １ ６ Ｓ ｒ Ｄ ＮＡ序列 对 比分析 ， 将该 菌株初 步鉴定为链霉 菌属 的栗 褐色类
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