女贞子总黄酮提取工艺的研究_徐玲花
女贞子中三萜类化合物的提取纯化工艺研究进展_潘晴
DOIʒ10．13192/j．issn．1000-1719．2015．09．082女贞子中三萜类化合物的提取纯化工艺研究进展潘晴1，孙京海1，马鲁豫2（1．山东中医药大学，山东济南250355；2．山东省医学科学院，山东济南250001）摘要：木犀科植物女贞子是传统中药材，药理作用十分广泛，有很高的药用价值。
三萜类化合物是其发挥抗炎、降血糖、降血脂、保肝等功效的主要药效成分。
查阅相关文献、资料，结合已有的女贞子三萜类化合物的研究报道，现将女贞子中三萜类化合物的提取纯化工艺的研究进展做一综述。
关键词：女贞子；三萜类；齐墩果酸；熊果酸；提取纯化中图分类号：Ｒ284文献标志码：A文章编号：1000-1719（2015）09-1806-02Ｒesearch Progress on Extraction and Purification Process of theTriterpene Compounds in Fructus Ligustri Lucidi PAN Qing 1，SUN Jinghai 1，MA Luyu 2（1．Shandong University of TCM ，Ji ’nan 250355，Shandong ，China ；2．Shandong Provincial Academy of Medical Sciences ，Ji ’nan 250001，Shandong ，China ）Abstract ：Fructus ligustri lucidi is a traditional Chinese herbal medicine．Its pharmacological activity is very extensive and ithas high medicinal value．Triterpene is the main efficacy component of its anti －inflammatory ，falling blood sugar ，blood lipid and protecting liver functions．Now the author reported the research status of the extraction and purification process of the triterpene in fructus ligustri lucidi after consulting relevant literature and data and combining with the existing research reports about triterpene in fructus ligustri lucidi．Key words ：fructus ligustri lucidi ；triterpene ；oleanolic acid ；ursolic acid ；extraction and purification 收稿日期：2015－03－21基金项目：“十二五”重大新药创制国家科技重大专项（2013ZX09103002－005）作者简介：潘晴（1991－），女，山东聊城人，硕士研究生，研究方向：中药新药研究。
银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究
验 " 研究了浸取温度 $ 乙醇含量和固液质量比对黄酮类化合物提取率的影响 % 结果显示温 度是影响提取率的主要因素 " 最佳工艺为浸取温度 K8 Q " 乙醇的体积分数为 F8X 和固液 质量比 >YF "银杏叶中黄酮类化合物的浸出率可达到 V!U%X % 关键词 银杏叶 & 黄酮类化合物 & 乙醇 & 提取 中图分类号 5Z!%DU
基金项 目：青岛农业大学高层 次人 才科研基金 （６６３—１１１３３２０）；青岛 农业大学大学生科技创新基金 （２０１４３０５） 作者简介 ：姚 文红 （１９６８一 ），女 （汉 ），副教授 ，学士 ，研 究方 向：生物 产品的分 离分析 。
通信作 者 ：侯婷 （１９７３一 ），女 （汉 ），副教授 ，博士 。
１ 材料与方法 １．１ 材料与仪器
大 叶女贞花 ：由青 岛农 业大学植 物保护学 院罗兰 教 授采 自青 岛崂山并鉴 定 ；芦 丁标准 品 ：国药集 团化
分 离提取
姚文红，等：女贞花总黄酮提取及清除ＤＰＰＨ自由基作用的研究
４３ ＝＝Ｉ
学试剂有 限公 司 ，批号 ２０１２０５１４；抗坏血酸 ：天津市永 取 时间为 ６０ ｍｉｎ，采用 ５％ＮａＨＣＯ３、５％Ｎａ２ＣＯ３、０．２％
其 具有滋养肝 肾 ，强腰膝 ，乌须明 目的功效 ，有很 高的 药用价值 。
现代研究表 明 ，女贞子 、叶中含有女贞 子甙 、齐 墩 果酸 、对 一羟基苯 乙醇 、熊果酸 、甘露醇 、鼠李糖等 ３０多 种有效成份 ，还 含有铜 、铁 、锌 、锰 、铬 、镍等人体必需微 量元 素 ，具有 明显 的医疗保健作用和极高 的营养价值 ， 但是 ，对女贞花的相关研究却鲜见报道 。本试验着重对 女贞花 中总黄酮 的提取 工艺及抗氧化性 进行研 究 ，以 期为女贞花 中有效成份的开发利用提供理论参考 。
摘 要 ：在单 因素试验的基础上 ，利 用正交试验优化提取女 贞花 中总黄 酮的工 艺条件 ，并研究对 ＤＰＰＨ 自由基清除作 用。结果表 明：以 ０．５ｇ待测品为原料 ，按照 １：５５（ｇ／ｍＬ）料液比加入 ５０％乙醇为率为 １２．５７％（ＲＳＤ＝０．７４）；女 贞黄酮对 ＤＰＰＨ 自由基清除率 ＩＣ５０值为 １ １．９７ 咖 Ｌ，最大清 除 率 ８２．０６％。 关键 词 ：女 贞花 ；总 黄 酮 ；ＤＰＰＨ自由基
女贞子中黄酮类物质的提取方法
一、仪器与试剂
1. 仪器
UV-3150型紫外-可见分光光度计；分析天平；索氏
抽提器；布氏漏斗; 烧杯；25ml、100ml容量瓶；15ml移液管；洗耳球；
2 .试剂与样品
芦丁对照品, 石油醚，无水甲醇，女贞子粉末。
二、实验步骤
1.样品处理
精确称取女贞子粉末1.0000g，在索氏抽提器中经
石油醚脱脂到无色后，放冷后转出石油醚，加入80mL 无水甲醇，抽提至无色。
提取液全部转移到100mL容量瓶，用无水甲醇定容作为试液待用。
2.紫外光分光光度法标准曲线的制备
精密称取120℃干燥至恒重的芦丁对照品96.4mg，
用无水甲醇溶解，转移入100mL容量瓶中，用无水甲醇定容，摇匀。
精确移取10.00mL置于100mL容量瓶中，用无水甲醇定容，摇匀。
此芦丁对照品溶液浓度为
0.0964mg/mL。
准确吸取浓度0.0964mg/mL芦丁对照品溶液0.00mL、
1.00mL、
2.00mL、
3.00mL、
4.00mL、6.00mL，分别置于25mL
容量瓶中，各加无水甲醇定容，在359nm处测吸光度A，得回归方程。
3. 紫外光分光光度法
将配制好的不同浓度的芦丁对照品溶液在359nm
波长处测定吸收度A，得回归方程为：A=0.0004054+
0.02718C （A为吸光度，C为浓度mg/L ），相关系数r 2 =0.9997。
表明芦丁浓度在4mg/L~24mg/L范围内线性良好。
微波场协同提取女贞子总黄酮的研究
Ｋ ｅ ｒ ： ｃｏ ａ ｅｅ ｔａｔ ｎ； Ｌｇ ｓ ｕ ￣ ｉｕ Ａｉ； Ｆａｏ ｏｄ ｙ ｗｏ ｄｓ Ｍｉｒｗ ｖ ｘｒｃｉ ｏ ｉｕｔ ｍ ｌ ｄ ｍ ｒ ｒ ｌｖ ｎ ｉｓ
女贞子 Ｌ ｕｔ ｍ ｌ ｉｕ ｉ为木犀 科植物女贞 的干燥成 熟 水式多用真空泵 （ ｉ ｓｕ ｅ ｍ Ａｔ ｇ ｒ ｕｄ 郑州长城科工贸有限公 司） 。 果实。女贞子的主要药用 价值有提 高机体免疫 功能 、 降低眼压 、 ２ 方 法 补益肌肤 、 降血 糖血脂 、 菌消 炎 、 抗 护肝 和抗 癌 等作用 … 。黄 酮 ２ １ 工艺流程 女贞子一粉碎一 脱脂一 微波提取一 抽滤一真 空 ． 类化合物是植物中的抗氧化活性成分之一 ， 也是女贞属植物中常 浓 缩 一 产 品 。 见 的成分。近年来 ， 人们对黄酮类化合物 的抗氧化功能和机理进 ２ ２ 提取剂 的选择 取等量 的女贞子粉末 ９等份 ， ． 分别用 等量的 行 了比较深入的研究 ， 证实黄酮类 化合 物是一种很强 的活性氧 自 水和体积分数 为 １％ ，０ ，５ ，０ ，０ ，０ ，０ ，０ ％ ５ ３ ％ ４ ％ ６ ％ ７ ％ ８ ％ ９ ％ １０ 用紫外 可见光光度计测量 由基清除剂 Ｊ所 以黄 酮类化合 物 的研究 日益引 起 了人们 的重 的乙醇 一水溶液微波提后稀释后定容 ， ， 视 。传统提取黄酮 的方法 主要有 溶剂 浸提法 、 提取 酸沉淀 法 其在 ２ ０— ２ ｍ范 围内的吸收谱线 。 碱 ５ ５ ０ｎ ． 分别在不 等 。微波辅助提取技术是近年 以传 统溶剂浸 提法原理 为基 础 ２ ３ 提取工艺条件 实验 取等量 的女贞子粉末若 干份 ， 同的提取工 艺条 件下 做平 行 、 交 和对 比试 验 ， 量各 样 品在 正 测 发展 的新 型萃取 技术 ， 该技 术具有选择性 高 、 时少 、 耗 能耗低 、 排 。 污量少等优点 ， 可克服传统提取方法的缺陷 ， 与超临界流体萃取 、 ２ ７ｎ ７ ｍ处 的吸光度 Ａ 高速逆流液相色谱等技术相 比， 适用 面更广 ， 且设备投资低 ， 目 ３ 结 果 是 前 国内外天然产物提取 的研究 热点 。 目前微波 辅助提取女 贞 ３ １ 提取 剂的选用 据报道和实验 的比较证明 ， ． 以乙醇 一水作为 子总黄酮的研究 尚未见文献报道 ， 本文对此进行 了研究 。 提取 剂 微 波 提 取 总 黄 酮 的 效 果 较好 。 由 图 １ 见 ， 选 取 溶 剂 中 可 所 １ 试 剂 与 仪器 以 ４ ％乙醇 的提取液吸光度最大 ， ５ 故选 ４ ％乙醇作提取剂 ， ５ 该提 １ １ 试 剂与样 品 女 贞子 ， ． 购于广州 ， ５ ℃的烘箱烘 ３ｈ 经粉 取液在紫外 区的最大吸收波长为 ２ ７ｎ 在 ０ ， ７ ｍ。 碎后过 ６ Ｏ目筛 ， 用石油醚 （ 沸程 ６ ９ ￣ 脱脂后放在干燥 器备 ０— ０Ｃ） 用； 其它试 剂均 为分析纯 。 １２ 仪器 Ｇ ｌ ｚ ８０微波炉 ； ． ａａ ０ ｎ ＷＤ 日本 岛津 ｕ 一２５ Ｖ ４０紫外分光
女贞子的催化抽提
女贞子的催化抽提史晓丹;郑少华;朱全力【摘要】通过考察一些固体酸碱粉末对水抽提女贞子的影响,利用分光光度法测定抽提液的吸光曲线与吸光度,发现3A分子筛、氯化铝以及酸碱改性的茂名高岭土与潮州瓷土矿对于抽提都具有促进作用.从吸光曲线判断,抽提液的含量有明显增加,尤以氧化铝与酸改性的粘土矿物质的促进作用显著.碱性物质或碱改性的粘土矿物质会使抽提液的组成有一定程度改变.通过分析讨论,认为这些固体物质表面的酸碱位置对抽提的影响是不一样的,酸位置比较有利于女贞子抽提.【期刊名称】《江西化工》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】4页(P153-156)【关键词】催化抽提;固体酸碱;女贞子【作者】史晓丹;郑少华;朱全力【作者单位】韩山师范学院,广东潮州521041;韩山师范学院,广东潮州521041;韩山师范学院,广东潮州521041【正文语种】中文引言女贞子属于木犀科植物[1]，富含萜类、黄酮类、苯乙醇类、磷脂类、脂肪酸、挥发油、多糖等物质[2]。
具有抗炎、抑菌、降血糖、降血脂、保肝、抗血栓形成、抗衰老及抗疲劳的作用，能调节免疫，提高肿瘤患者的免疫功效[3]。
可以治疗头昏目眩、腰膝酸软、遗精、耳鸣、须发早白、骨蒸潮热和目暗不明等症状[4]。
中草药有效成分不明确[5]，为获得其中有效成分，常采用溶剂抽提的方法[6]。
从现行文献报道来看，使用水、乙醇、电解质溶液都具有比较好的效果，其中水是一种常用廉价的高效的溶剂[7-8]。
为了提高抽提效率，研究人员进行了广泛地研究，如文廷刚等人[9]发现在100℃时用水抽提女贞子具有更好的效果，张兴辉[10]发现用水抽提女贞子具有更好的效果。
在植物的水抽提过程中，除了有一些极性物质溶入水之外，还会有可能发生水解等反应，而酸碱一般是这类水解反应的催化剂，因此，酸碱能否催化抽提过程是一个值得研究的课题。
若使用液态酸碱催化，会导致抽提物分离的困难，而使用固体酸碱催化剂，则可以方便地解决这一问题。
响应曲面法优化女贞子总黄酮的超声波提取工艺
Ｖｏ ＿ ４ Ｎｏ． ｌ２ ６
Ｄｅ ． ０ ０ ｅ２ １
响应 曲面 法 优化 女 贞 子 总黄 酮 的超 声 波 提 取 工 艺
江明珠 ，陈 星 ， 颜 辉 ，张久成
（ 江苏科 技大学 生物与环境工程学 院 ， 江苏 镇江 ２ ２ １ ） １０ ８
摘
要： 采用超声波提取法提取女贞子总黄酮 ， 在单 因素试 验的基础 上 ， 利用 响应 面分析法考察 乙醇 的浓度 、 超声提取功率
第２ ４卷第 ６期
２１ ０ ０年 １ ２月
江苏科 技大学 学报 （ 自然 科 学版 ）
Ｊｕｎｌ ｆ ｉｎｓ ｎ ｅｓｙｏ ｃ ｎ ｅａｄＴ ｃｎ ｌ ｙ Ｎ ｔｒ ｃ ｎｅＥ ｉｏ ） ｏ ｒａ ｏ Ｊ ｇｕＵ ｉ ｒ ｔ ｆ ｉ ｃ ｎ ｅｈ ｏ ｇ （ ａ ａ Ｓｉ ｃ ｄｔ ｎ ａ ｖ ｉ Ｓ ｅ ｏ ｕｌ ｅ ｉ
ｐｒ ｐ ｒｒ ｎ ｅ ｆｉ ｆｕ ｎ ｉ ｇ ｆ ｃｏ ｓ ｏ ｅ ａ ｇ ｓｏ ｎ ｅ ｃｎ ａ ｔ ｒ ． ｌ
Ｋｅ ｒ ｓ：ｌｇ ｔ ｍ ｕ ｉ ｕｍ ；ｔｔ ｌｆａ ｏ ｏｄ ｙ ｗｏ ｄ ｉｕｓｒ ｕ ｌ ｃｄ ｏａ ｖ ｎ ｉ ｓ；ｕ ｔａ ｏ ｉ — ｓ ｉｔ ｄ ｅ ｔａ ｔｏ ｌ ｌｒ ｓ ｎ ｃ ａ ｓｓｅ ｘ ｒ ｃｉｎ；ｒ ｓ ｎ ｅ ｓ ｒａ ｅ ｅ ｐｏ ｓ ｕｉｉ为木 樨 科 植 物 Ｆｕｔ ｇｓｉ ｃ ） ｕＬ ｒＬ ｄ 女 贞 的果实 ， 主要 含有 萜类 、 黄酮 等化 合物 ， 具有 补
Ｊａ ｇ Ｍｉｇ ｈ ｉｎ ｎ ｚ ｕ，Ｃ ｅ ｎ ｈ ｎ Ｘｉｇ，Ｙａ ｉ ｈ ｎ ｉｃ ｅ ｇ ｎ Ｈｕ ，Ｚ ａ ｇＪｕ ｈ ｎ
（ ｃｏｌ ｆ ｉｏｉａ ａｄＥ ｖ ｏｍ ｎａ Ｅ ｇ ｅｒ ｇ ＪａｇｕＵ ｉ ｒｔ ｆ ｃ ｎｅａ ｄＴ ｃｎｌｇ ， ｈｎｉｎ ｉ ｇｕ２２ １ ，Ｃ ｉａ Ｓｈｏ ｏ ｇ ｌ ｎ ｎｉ ｎ ｅ ｔ ｎｉ ｅｎ ， ｉｎｓ ｎｖ ｓｙｏ ｉ ｃ ｎ ｅｈ ｏｏｙ Ｚ ｅｊ ｇＪ ｎ ｓ １０ ８ ｈｎ ） ｏＢ ｌ ｃ ｒ ｌ ｎ ｉ ｅｉ Ｓｅ ａ ａ
女贞子中主要化学成分的提取工艺及质量控制研究进展
［ １ ３ ］ 叶 国传 ， 牛燕霞 ， 刘晓辉 ． 针刺 四肢穴 治疗抑郁 症疗 效观察 ［ Ｊ ］ ．
上海针灸杂志 ， ２ ０ １ ２ ， ３ １ （ ７ ） ： ４ ６ ４ — ４ ６ ６ ． ［ １ ４ ］ 王存伟 ， 孙守刚 ， 秦秀 红． 孙思邈 “ 十三鬼穴 ” 治疗抑 郁症 临床观 察［ Ｊ ］ ． 西部中医药 ， ２ ０ １ ２ ， ２ ５ （ ２ ） ： ７ ３ — ７ ５ ．
［ １ ５ ］ 徐凯 ， 柴铁劬． 靳三针治疗抑郁 症的 临床 和实验研 究 ［ Ｄ］ ． 广州 ：
广 州 中医 药 大 学 ， ２ ０ １ ３ ．
［ ２ ］ 黄昕 ， 石 朗， 孙晶， 等． 针 刺对抑 郁症 的临床疗效 及作用 机制 ［ Ｊ ］ ． 中医药信息 ， ２ ０ １ ３ ， ３ ０ （ ４ ） ： ６ ８—６ ９ ．
（ ６ ）： ４ ９ ５— ４ ９ ６ ．
症 的辨证分型依据各异 ， 给相关 的科研和药物研发带 来 巨大阻 力 。其次 ， 科 研设 计 方法 不完 善 ， 临床 研究 样 本 量较 小 ， 多 中心 、 大 样 本 的临 床 研 究 更 少 ， 这 些 使 研 究结果 的意义受到影响。而且抑郁症的疗 程较长 ， 复 发率 较高 ， 目前大 多研 究 观察 时 间短 ， 这在 一定 程度 上 影 响了中医治疗抑郁症远期疗效 的可信度 。另外 ， 关 于针 刺 、 艾灸 、 拔罐、 心 理 疏 导 等传 统 中 医方 法 治 疗 抑 郁 症 的相 关研 究 相对 比较 少 ， 这 些 方法 单 独 或 联 合 方 药 治 疗抑 郁症 的作用 有待 进 一步评 估 。 参考 文献 ：
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
女贞子中齐墩果酸提取工艺的研究
女贞子中齐墩果酸提取工艺的研究
女贞子是广受人们喜爱的一种可食用浆果，它含有丰富的维生素和果胶，同时
具有酸甜可口的美味滋味。
与此同时，女贞子还具有良好的抗氧化和抗癌活性，它的研究也受到了学者的热烈关注。
近期，一项新突破，将让研究者们大开眼界。
科研工作者采用干酪根研究方法，探究了女贞子齐墩果酸提取工艺。
研究结果表明，采用干酪根工艺提取女贞子齐墩果酸，具有较高的产率和质量，还能够解决低效率的现有技术难题。
这项研究成果将对女贞子的开发具有重要意义，同时也使得一些意想不到的食
品和饮料领域的应用成为可能。
今后，研究者将继续进行详细的研究，从而更好地领会和利用女贞子具有的美味。
总之，这项关于女贞子齐墩果酸提取工艺的研究将对女贞子研发提供新的发展
空间，完善其功能，特别是在抗氧化和抗癌方面发挥重要作用。
希望未来可以推出更多含有女贞子齐墩果酸的新型饮料，从而让人们在夏日享受到美味又健康的生活方式。
女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究
女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究女贞子是一种常见的中草药材，具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌等多种药理作用。
其中一种重要的有效成分是齐墩果酸。
因此，对女贞子中齐墩果酸的提取工艺进行研究具有重要的理论和实际意义。
本文将从女贞子的选择、提取工艺、齐墩果酸的分离纯化等方面进行综述。
首先，在女贞子的选择方面，应该选择高品质的女贞子作为原料。
优质的女贞子应该有鲜亮的色泽、完整的果实、无虫蛀和霉变的情况。
同时，还要注意女贞子的收获时间，一般认为女贞子的果实成熟度在9月中旬至10月初，此时女贞子中齐墩果酸的含量相对较高。
其次，在提取工艺方面，可以采用水煎提取和超声波辅助提取两种方法。
水煎提取是传统的提取方法，可以通过加水煮沸的方式将女贞子中的齐墩果酸提取出来。
而超声波辅助提取则是通过超声波的作用，加速提取物与溶剂之间的质量传递，提高提取效果。
研究表明，超声波辅助提取的提取效率较高，且对女贞子中齐墩果酸的保护效果较好。
接着，在齐墩果酸的分离纯化方面，可以采用柱层析和高效液相色谱等技术。
柱层析是一种常用的分离方法，可以通过选择不同的吸附剂和溶剂，实现对齐墩果酸的纯化。
高效液相色谱则是一种在小柱中进行快速分离的方法，可以通过选择合适的填料和溶剂体系，实现高纯度的齐墩果酸的得到。
最后，在齐墩果酸的分析方面，可以采用紫外分光光度法和高效液相色谱等技术。
紫外分光光度法是一种简单常用的光谱分析方法，可以通过齐墩果酸的最大吸收波长进行定量分析。
高效液相色谱则是一种高分辨率的色谱分析方法，具有分离效果好、快速高效等优点。
综上所述，女贞子中齐墩果酸的提取工艺研究具有重要的意义。
通过选择优质的女贞子原料，采用适当的提取工艺和分离纯化技术，可以得到高纯度的齐墩果酸。
同时，齐墩果酸的分析方法也是研究的重要内容。
这些研究成果将有助于女贞子的开发利用和产业化生产。
女贞子体外抗氧化活性有效部位制备和筛选
女贞子体外抗氧化活性有效部位制备和筛选女贞子（Fructus Ligustri Lucidi）又名女贞果，是一种常用的中草药材，具有滋补肝肾、明目益气的功效，并且被广泛应用于中医临床治疗中。
女贞子具有丰富的抗氧化成分，对人体健康具有重要的保护作用。
女贞子中的体外抗氧化活性成分已成为研究的热点之一。
本文将就女贞子体外抗氧化活性有效部位的制备和筛选进行探讨。
女贞子中包含有多种活性成分，如黄酮类、总苷类、多糖类等，这些成分具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
女贞子体外抗氧化活性的有效部位主要包括黄酮类和总苷类成分。
黄酮类化合物是女贞子中的主要抗氧化活性成分，其结构与抗氧化活性密切相关。
总苷类化合物也具有一定的抗氧化活性，对脂质过氧化酶具有抑制作用。
这些有效部位具有很高的抗氧化活性，是女贞子发挥药效的重要成分。
1. 提取方法女贞子体外抗氧化活性有效部位的制备首先需要进行提取工作。
目前常用的提取方法包括水提取、醇提取、超临界流体提取等。
水提取是将女贞子粉末与水混合，加热浸提后得到提取液，再通过浓缩和干燥得到提取物。
醇提取是将女贞子粉末与醇混合，通过浸提和溶剂挥发得到提取物。
超临界流体提取是利用超临界流体对女贞子进行提取，得到的提取物具有较高的纯度和活性。
这些提取方法的选择应根据目标成分的特性和要求进行。
2. 分离纯化提取得到的女贞子体外抗氧化活性有效部位含有多种成分，需要进行进一步的分离纯化工作。
常用的分离纯化方法包括柱层析、薄层色谱、高效液相色谱等。
柱层析是将提取物溶解后通过柱层析柱，利用不同成分在填料中的分配系数进行分离。
薄层色谱是将提取物均匀涂抹在薄层板上，通过在一定条件下进行分离。
高效液相色谱是利用填料对提取物进行分离，具有高效、快速、精密的特点。
这些方法可以有效地提取和分离女贞子体外抗氧化活性有效部位，并得到纯度较高的目标成分。
3. 结构鉴定得到的女贞子体外抗氧化活性有效部位需要进行结构鉴定工作。
女贞子总黄酮超声辅助提取工艺及体外抗氧化活性研究
女贞子总黄酮超声辅助提取工艺及体外抗氧化活性研究周旋;许明祥;蔡文卓;翟晓瑞;霍明洋;高锐;郗艳丽【摘要】通过响应面试验优化超声辅助提取工艺,测定小鼠红细胞溶血、肝组织匀浆和肝线粒体丙二醛(malondial-dehyde,MDA)的水平,分析总黄酮的抗氧能力.结果表明:在提取时间为110 min、提取功率为640 W、乙醇体积分数为60％、液料比为65︰1(mL/g)的条件下,提取的女贞子总黄酮含量为47.40 mg/g.该条件下提取的女贞子总黄酮在200～1000 mg/L时能抑制小鼠红细胞溶血,降低肝组织匀浆和肝线粒体MDA的生成,具有量效关系.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2019(035)003【总页数】7页(P182-188)【关键词】女贞子;黄酮;提取工艺;抗氧化活性【作者】周旋;许明祥;蔡文卓;翟晓瑞;霍明洋;高锐;郗艳丽【作者单位】吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林132013;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013;吉林医药学院公共卫生学院,吉林吉林 132013【正文语种】中文女贞子(Fructus Ligustri Lucidi)为木犀科植物女贞的干燥成熟果实，又名冬青子、女贞实等[1]。
女贞子是中国传统中药，始载于《神农本草经》，历代本草及《中国药典》(1963～2015版)均有记载[2]。
现代研究发现，女贞子中主要含有黄酮类、萜类、多糖类及挥发油等化学成分[3]，女贞子黄酮是女贞属植物中常见的化学成分，具有降血脂[4]、抗菌[5]、抗氧化[6]等功效。
目前、植物黄酮的主要提取方法有直接浸提法、超声辅助提取法、微波辅助提取法、酶辅助提取法等[7]，超声辅助提取法作为植物活性物质提取的新技术，具有节能、安全、高效等优点[8]。
女贞子总黄酮的测定及其提取工艺
女贞子总黄酮的测定及其提取工艺文廷刚;杜小凤;郭宇;王伟中;吴传万【摘要】采用正交试验,研究了水提醇沉法和醇提法提取女贞子总黄酮的提取工艺.结果表明,女贞子总黄酮提取以水提醇沉法为宜,最佳提取工艺条件为:料液比1:40,提取1次,100℃下提取3 h.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2008(000)002【总页数】2页(P187-188)【关键词】女贞子;总黄酮;测定;提取工艺【作者】文廷刚;杜小凤;郭宇;王伟中;吴传万【作者单位】江苏徐准地区淮阴农业科学研究所,江苏淮安,223001;江苏徐准地区淮阴农业科学研究所,江苏淮安,223001;江苏徐准地区淮阴农业科学研究所,江苏淮安,223001;江苏徐准地区淮阴农业科学研究所,江苏淮安,223001;江苏徐准地区淮阴农业科学研究所,江苏淮安,223001【正文语种】中文【中图分类】R284.1女贞子为木樨科植物女贞(Ligustrum lucidum Ait.）的果实。
在我国女贞主要分布在浙江、江苏、湖南、广西、四川等地，作为园林绿化植物［1］。
女贞子主要含有帖类、黄酮、多糖等化合物。
中医认为女贞子味甘苦性平，有滋补肝肾明目等功能。
现代医学表明，女贞子具有补腰膝、壮筋骨、强阴肾、乌须发、治疗神经衰弱和风热赤眼等作用，是一种兼具营养和药理作用值得开发的植物资源［2－3］。
黄酮类化合物广泛分布于植物界中，而且生理活性多种多样。
在花、叶、果等组织中，一般多以苷的形式存在。
医学研究表明，黄酮具有降低心肌耗氧量，使冠脉、脑血管流量增加，抗心律失常，软化血管，降血糖，降血脂，抗氧化，消除机体内自由基抗衰老的作用，增强机体免疫功能［4］。
目前，从植物中提取分离黄酮类物质国内外已有许多研究报道，但大多以醇提法为主，水提法运用较少。
本试验采用水提醇沉和醇提两种方法从女贞子中提取总黄酮，设计正交试验，优化其提取工艺。
1.1 仪器UV755B型紫外可见分光光度计(上海分析仪器总厂）；HHS2型电热恒温水浴锅(江苏常熟医疗器械厂）；FA1104上皿电子天平(上海天平仪器厂）；SHB－Ⅲ型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司）；FZ10型植物粉碎机(齐家务科学仪器厂）；RE52－05型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂）。
响应曲面法优化女贞子总黄酮的超声波提取工艺
响应曲面法优化女贞子总黄酮的超声波提取工艺江明珠;陈星;颜辉;张久成【摘要】采用超声波提取法提取女贞子总黄酮,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法考察乙醇的浓度、超声提取功率及超声提取时间对总黄酮得率的影响.结果表明,最佳提取条件为:乙醇体积分数为49.12%,超声提取功率为116.94 W,超声提取时间为1.31 h;响应面分析法可以优化女贞子总黄酮的提取工艺,在各影响因素合理取值范围内找到最佳得率及其对应的最佳提取条件.【期刊名称】《江苏科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(024)006【总页数】5页(P604-608)【关键词】女贞子;总黄酮;超声波提取;响应曲面【作者】江明珠;陈星;颜辉;张久成【作者单位】江苏科技大学,生物与环境工程学院,江苏,镇江,212018;江苏科技大学,生物与环境工程学院,江苏,镇江,212018;江苏科技大学,生物与环境工程学院,江苏,镇江,212018;江苏科技大学,生物与环境工程学院,江苏,镇江,212018【正文语种】中文【中图分类】Q946.2女贞子(Fructus Ligustri Lucidi)为木樨科植物女贞的果实，主要含有萜类、黄酮等化合物,具有补腰膝、壮筋骨、乌须发等作用,是一种值得开发的药用植物[1]．黄酮类化合物具有降血脂,降血糖,抗氧化,增强机体免疫功能等作用[2]．从女贞子中提取黄酮类化合物作为保健食品或药品的原料具有较好的应用前景．超声波提取具有操作简便快捷、提取时间短和提出率高等优点,目前己广泛应用在生物活性物质的提取方面．响应曲面法(RSM)同正交实验相比,具有回归方程精度高、能体现几种因素交互作用的特点[3].文中用响应曲面法优化超声乙醇提取法提取女贞子总黄酮的工艺,借助实验设计软件Design Expert version 7.0,采用Box-Benhnken模式对各主要影响因子之间的单一和交互作用等进行了研究,得出最佳的提取工艺参数,为女贞子的综合利用提供理论依据．1 实验1.1 材料与试剂女贞子购于镇江同仁堂药店;芦丁为sigma公司出品．1.2 主要实验仪器UV9600紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器公司);KQ5200DB型超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)等．1.3 实验方法1.3.1 芦丁标准曲线制作精密称取在105 ℃下干燥至恒重的芦丁对照品0.01 g,60%乙醇定容至100 ml,得0.1 mg/ml芦丁标准液．准确吸取芦丁标准液0，0.50，1.00，2.00，3.00和4.00 ml放入试管中,加入30%乙醇溶液至5 ml,加入5%NaNO2溶液0.3 ml,振摇静置5 min后加入10%Al(NO3)3溶液0.3 ml,摇匀静置6 min后加入1.0 mol/L NaOH溶液2 ml,再加入2.4 ml 30%乙醇,摇匀后于510 nm处测定吸光度D(λ)[4-5]．以浓度C(mg/mL)为横坐标,D(λ)为纵坐标作标准曲线,得标准曲线方程为D(λ)=1.029 3 C+0.005 4(R2=0.999 6),线性关系良好．1.3.2 原材料处理与女贞子总黄酮含量测定女贞子于60 ℃烘干、粉碎,取适量包入滤纸,置于索氏提取器中,石油醚回流脱脂,至溶液无色,取出,挥干溶剂备用[6]．取上述样品,按实验预先安排的因素和水平,用一定浓度和体积的乙醇超声辅助提取,提取液趁热过滤、取样,按1.3.1方法测定吸光度．1.3.3 单因素实验设计分别考查乙醇浓度(c)为40%，45%，50%，55%，60%，65%，70%，80%，90%;料液比(Q)为1 ∶10,1 ∶15,1 ∶20,1 ∶25,1 ∶30,1 ∶35和1 ∶40;超声功率(P)为80,100,120,140和160 W;超声时间(t)为0.5,1,1.5,2.0和2.5 h对女贞子总黄酮提取率(Y)的影响．总黄酮得率为:提取总黄酮重量/女贞子总重量·100%1.3.4 响应曲面设计根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理,综合1.3.3单因素实验结果,选取乙醇浓度、超声功率、超声时间对女贞子总黄酮提取率影响显著的3个因素,在单因素实验的基础上采用三因素三水平响应面分析方法．实验因素与水平设计见表1．表1 响应面实验因素与水平Table 1 Factors and levels of of response surface design实验因素水平-101乙醇浓度c/%45%50%55% 超声时间t/h1.01.52.0 超声功率P/W1001201402 结果与讨论2.1 单因素实验2.1.1 乙醇浓度对女贞子总黄酮提取率的影响从图1可看出，随着乙醇浓度的增加,总黄酮的提取率随之提高,当乙醇浓度增大到约50%时,总黄酮的提取率达到最大值,随后,总黄酮提取率逐渐下降．这是因为随着乙醇浓度的增加,黄酮类化合物溶解度也随之增加并在50%时总黄酮的溶解度达到最大值,但当乙醇浓度再增加时,黄酮类化合物溶解度减少;同时一些醇溶性杂质、色素等成分溶出量增加,这些成分与黄酮类化合物竞争同乙醇—水分子结合,从而导致黄酮类化合物的提取率下降[7],确定50%的乙醇为最佳提取浓度．图1 乙醇浓度对女贞子总黄酮提取率的影响Fig.1 Effects of ethanol concentration on total flavonoids extraction2.1.2 料液比对女贞子总黄酮提取率的影响从图2可看出，女贞子总黄酮的提取率随料液比的增大而呈上升趋势,但是当料液比超过1 ∶20时,随着料液比的增大，黄酮的提取率不再上升．这是因为溶剂量大,溶剂中的有效成分浓度低,与物料及溶剂边界层的有效成分浓度差大,扩散推动力大,还增加了物料与溶剂的接触面积因而提取率高．当料液比大于1 ∶20时,随着料液比的增大,溶剂量的增多,造成杂质过多溶出,使得进一步的浓缩消耗更多的能量和时间,同时也会阻碍黄酮的溶出,使得黄酮提取率不再上升．查阅文献并结合生产实际[7-8],为节约成本,减少溶剂处理量,确定最佳料液比为1 ∶20,响应曲面法实验不再考察该因素．图2 料液比对女贞子总黄酮提取率的影响Fig.2 Effects of ratio of solid on liquid on total flavonoids extraction2.1.3 超声功率对女贞子总黄酮提取率的影响从图3可看出，随着超声功率增加,女贞子总黄酮的提取率也随之增大;但是当超声功率超过120 W时,超声功率增加,总黄酮提取率反而下降．这是因为超声功率的增加使得被萃取出来的黄酮类化合物的量也随之增多,但过高超声功率会使分子运动加剧而导致其他物质被萃取出来影响总黄酮的提取纯度,同时过高的功率将使溶剂温度升高,增加其他成分的溶解,所以超声功率过高提取率反而下降[8],确定最佳超声功率为120 W．图3 超声功率对女贞子总黄酮提取率的影响Fig.3 Effects of ultrasonic on total flavonoids extraction2.1.4 超声时间对女贞子总黄酮提取率的影响从图4可看出，总黄酮提取率在1.5 h处达到最大值,这是因为乙醇对细胞渗透性强,在短时间内即可达到溶解平衡．但是,提取时间的延长会导致氧化和分解等副反应发生,导致得率下降;同时使多糖等含量较高的杂质溶出量增加,提取液黏度和混浊度加大[8],因此最适提取时间为1.5 h．图4 超声时间对女贞子总黄酮提取率的影响Fig.4 Effects of time on total flavonoids extraction2.2 响应曲面优化实验2.2.1 响应曲面实验结果以乙醇浓度(A)、超声时间(B)、超声功率(C)为自变量,在料液比为1 ∶20时,以女贞子总黄酮提取率为响应值(R),进行响应面分析实验，结果见表2．表2 响应面试验结果Table 2 Results of response experimental design试验序号A/%B/hC/WY/%110-11.546 7 20-1-11.702 1301-11.488 44-10-11.721 650001.877 06-1101.721 671101.702 181-101.741 090001.857 610-1-101.760 4110001.877 0120-111.624 4130111.585 5141011.546 715-1011.605 02.2.2 多元二次响应面回归模型的建立与分析通过Design Expert version7.0软件对表2进行二次回归响应面分析,建立多元二次响应面回归模型R1=-0.095 7+2.270 2×10-3A+2.574 6×10-3B+9.7275×10-4 C+2.914 6×10-6AC+4.371 9×10-5BC-2.687 9×10-5A2-2.882 2×10-3B2-4.958 9×10-6C2.因A-B对女贞子总黄酮提取率的影响较小,故上述方程中省略了这一项．各因素的方差分析见表3．从表3可以看出,模型P值<0.05,表明该模型显著．模型的复相关系数为0.940 6,说明该模型能解释94.06%的响应值的变化,拟合程度良好,实验误差小,可以用此模型对超声辅助提取女贞子黄酮的结果进行分析和预测．由表3可知,模型中二次项达到显著水平,而一次项乙醇浓度(A)、超声时间(B)、超声功率(C)和交互项对女贞子黄酮得率的影响均不显著．该模型的纯误差的均方值较小为1.259×10-8,说明此模型有效,应用响应曲面法优化提取女贞子总黄酮的提取工艺可行．表3 二次响应面回归模型方差分析Table 3 Variance analysis of quadratic response surface regression model方差来源Source平方和SS自由度DF均方MSF值P值Prob>F Model2.009×10-592.233×10-610.050.010 2A-A9.250×10-719.250×10-74.160.096 8 B-B1.364×10-611.364×10-66.140.056 0 C-C1.180×10-711.180×10-70.530.498 8A-B0.00010.0000.001.000 0A-C3.398×10-713.398×10-71.530.271 1 B-C7.645×10-717.645×10-73.440.122 7 A21.667×10-611.667×10-67.510.040 8 B21.917×10-611.917×10-68.630.032 3 C21.453×10-511.453×10-55.400.000 5 残差1.111×10-662.221×10-7失拟性1.085×10-643.618×10-728.750.033 8 纯误差2.517×10-821.259×10-8 总差2.120×10-5142.2.3 响应曲面分析从表3得出,本实验中AC的交互作用和BC的交互作用影响较明显．AB，AC，BC 的交互作用实验结果见图5，6，7．等高线的形状可反映出交互效应的强弱大小,椭圆形表示两因素交互作用显著,而圆形则与之相反[6]．图5 乙醇浓度与超声时间的响应面Fig.5 Response surface plot of R=f(A,B)图6 乙醇浓度与超声功率的响应面Fig.6 Response surface plot of R=f(A,C)图7 超声时间与超声功率的响应面Fig.7 Response surface plot of R=f(B,C) 2.2.4 模型的验证性实验通过女贞子总黄酮提取率的二次多项数学模型解逆矩阵得出:在提取乙醇浓度为49.12%,超声时间为1.31 h,超声功率为116.94 W,料液比定为1 ∶20的工艺条件下,女贞子总黄酮最大提取率预测值为1.880%．为检验此方法的可靠性，采用上述最优提取条件进行女贞子总黄酮提取实验,同时考虑到实际操作的便利,将女贞子总黄酮提取最佳条件修正为室温下乙醇浓度为50%,超声时间1.5 h,超声功率120 W,料液比1 ∶20,水浴温度为40 ℃,实际测得的提取率为1.877%,与理论预测值相差不大.因此,采用响应面优化得到的提取条件准确可靠,具有实用价值．3 结论应用响应面设计法优化出最佳提取条件:乙醇浓度为49.12%,提取时间为1.31 h,超声功率为116.94 W,在料液比1 ∶20时得到女贞子中的总黄酮提取率为1.880%．参考文献(References)[1] 李阳,孙文基.女贞子的药理作用研究[J].陕西中医学院学报,2006,29(5):58-60.Li Yang, Sun Wenji. Pharmacological effects of Ligustrum lucidum [J]. Shanxi Traditional Chinese Medicine, 2006,29 (5):58-60.(in Chinese)[2] 王振宇,夏祥慧,李宏菊.响应面分析法优化大果沙棘总黄酮提取工艺[J].东北林业大学学报,2009,37(6):30-32.Wang Zhenyu, Xia Xianghui, Li Hongju. Analysis of total flavonoids of hippophae rhamnoides extraction process response surface [J]. Northeast University of Forestry, 2009,37 (6):30-32(in Chinese)[3] 顾晶晶,王爱琴,康键.响应面方法研究新疆大果沙棘的果酒酿造工艺[J].食品工业科技,2008,29(8):224-226.Gu Jingjing, Wang Aiqin, Kang Jian. Resp onse surface method of xinjiang′s wine brewing technology hippophae [J]. Science and Technology of Food Industry, 2008,29 (8):224-226.(in Chinese)[4] 吴华勇,黄赣辉,顾振宇,等.响应曲面法优化竹叶总黄酮的提取工艺研究[J]. 食品科学，2008,29(11):196-200.Wu Huayong, Huang Ganhui, Gu Zhengyu, et ing optimization of total flavonoids extraction from leaves of bamboo by response surface method[J]. Science of Food,2008,29 (11):196-200.(in Chinese)[5] 汪芳明,唐玉斌,佘顺宝.螺旋藻生产中两种碳营养源的对比研究[J].江苏科技大学学报:自然科学版,2006,20(1):89-92.Wang Fangming, Tang Yubin, She Shunbao. Comparative study of two kinds of carbon nutrition source of spirulina production [J]. Jiangsu University of Science and Technology: Natural Science Edition, 2006,20 (1):89-92.(in Chinese)[6] 黎彧,蓝方存,李梅娣,等.可见及紫外分光光度法测定女贞子总黄酮含量的研究[J]. 中国酿造,2006,161(8):70-71.Li Yu, Lan Fangchun, Li Meidi, et al.Spectrophotometry of total flavonoids from ligustrum content by visible and ultraviolet [J]. China Brewing, 2006,161 (8):70-71.(in Chinese)[7] 肖卫华,韩鲁佳,杨增玲,等.响应面法优化黄芪黄酮提取工艺的研究[J].中国农业大学学报,2007,12(5):52-56.Xiao Weihua, Han LuJia, Yang Zengling, et al. Optimization of extraction process of astragalus by response surface [J].China Agricultural University, 2007,12 (5):52-56.(in Chinese)[8] 闰克玉,高远翔.响应面分析法优化槐米总黄酮的提取工艺[J].食品研究与开发,2009,30(7):21-24.Run Keyu, Gao Yuanxiang. Optimization of the extraction process of total flavonoids from bud by response surface [J]. Food Research andDevelopment, 2009,30 (7):21-24.(in Chinese)。
女贞子中黄酮类化合物的提取研究
女贞子中黄酮类化合物的提取研究张雪娇;李罗【期刊名称】《应用化工》【年(卷),期】2011(40)4【摘要】考察了乙醇浓度、水浴温度、提取时间、料液比等对用乙醇提取女贞子中黄酮类化合物浸提率的影响.结果表明,最佳提取条件为:乙醇体积分数为50%,料液比1:35(g:mL),90℃下浸提回流1 h,在此条件下,黄酮类化合物的浸提率可达到1.239%.%The extraction of flavonoid from the ligustrum lucidum was studied, focusing on the ethanol concentration,water temperature , extraction time and material liquid ratio for single factors. The optimum conditions were 50％ethanol with material liquid ratio for 1∶ 35 ( g ∶ mL) in 90 ℃ temperature for extraction reflux 1 h. The extraction rate under the method discussed above is proximately 1. 239％ .【总页数】3页(P674-676)【作者】张雪娇;李罗【作者单位】西安医学院药学院,陕西,西安,710021;西安医学院药学院,陕西,西安,710021【正文语种】中文【中图分类】O652.6;O658.9;O629.9【相关文献】1.女贞子中黄酮类化合物的提取方法比较 [J], 张雪娇2.女贞子中黄酮类化合物的提取工艺研究 [J], 黄新苹;王玲;王武朝3.超声提取女贞子中黄酮类化合物的工艺研究 [J], 张雪娇;刘春叶4.女贞子中黄酮类化合物的回流提取工艺研究 [J], 高亮亮;钱令芝;张霞5.柚皮中黄酮类化合物提取工艺研究进展 [J], 石敏;何春玫;胡金贵;赖文英;陈群因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
化学毕业论文 女贞树根中黄酮提取及其清除羟基自由基初探
目录摘要 (Ⅰ)关键词 (Ⅰ)Abstract (Ⅱ)Keywords (Ⅱ)前言 (1)1 实验材料、试剂及仪器 (2)1.1 实验材料 (2)1.2仪器 (2)1.3 试剂 (2)2 实验方法 (2)2.1女贞树根的采集与预处理 (2)2.2 女贞树根黄酮的提取及其定性检验 (2)2.2.1女贞树根黄酮的提取 (3)2.2.2提取液的定性检验 (3)2.3芦丁标准溶液的配制和标准曲线的绘制 (3)2.3.1芦丁标准溶液的配制 (3)2.3.2测定方法依据 (3)2.3.3芦丁标准溶液最大吸收波长的测定................................................ .3 2.3.4芦丁标准曲线的绘制.. (3)2.4 单因素实验 (3)2.4.1乙醇浓度的选择 (3)2.4.2 料液比的选择 (4)2.4.3 回流提取温度的选择 (4)2.4.4 回流提取时间的选择 (4)2.5 正交实验 (4)2.6比较提取液、芦丁溶液、BHT溶液对羟基自由基的清除 (4)3.实验结果与分析 (5)3.1 女贞根黄酮提取液的定性检验 (5)3.2 芦丁和女贞根黄酮提取液最大吸收波长的测定 (5)3.3 标准曲线的绘制及其线性回归方程 (5)3.4单因素实验 (5)3.4.1乙醇浓度的选择 (6)3.4.2 料液比的选择 (7)3.4.3 回流提取温度的选择 (8)3.4.4 回流提取时间的选择 (9)3.5 正交实验 (9)3.6比较提取液、芦丁溶液、BHT溶液对羟基自由基的清除 (10)4.结论 (11)参考文献 (12)致谢 (13)女贞树根中黄酮提取及其清除羟基自由基初探摘要：采用乙醇回流法提取女贞树根中的黄酮，以乙醇浓度、提取温度、提取时间、液料比为考察因素，对女贞树根黄酮的提取工艺进行单因素及正交实验，并探究了提取液清除羟基自由基。
结果表明，乙醇回流法提取女贞树根中黄酮的最佳条件为：乙醇浓度70%，温度75℃，料液比1:15（g/mL），提取时间2.5h，此条件下黄酮提取得率为3.32%。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
水平 Level
1 2 3
表 1 L9(34)正交试验因素与水平设计
Table1L9 (34 )orthogonaltest
提取温
乙醇体积
提取时
度 (A)∥℃ 分数 (B)∥% 间(C)∥hExtLeabharlann actionAlcohol
Extraction
temperature 80 85 90
concentration 60 70 80
制成浓度为 0.2 mg/ml的标准溶液 。 准确吸取标准溶液 0、 5.0 ml, 分别置于 25 ml容量瓶中 , 分别加入 30%乙醇至 12.5 ml, 接着加入 0.7 ml5% NaNO2 , 摇匀 , 静置 6 min, 加入 0.7 ml10%Al(NO3 )3 ,静置 6 min,再加入 5.0 ml4%NaOH溶液 , 混匀 ,用 30%乙醇定容 ,静置 10 min后 ,于 2 000 r/min下离 心 10 min, 同时作空白对照 [ 10] , 用紫外分光光度计在波长 200 ～ 600 nm范围内进行扫描 , 确定最佳测定波长为 506 nm。 1.2.8.2 芦丁标准曲线回归方程的确立 。 精密量取上述标 准溶液 0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0 ml于 9只 25 ml容量瓶中 ,加入 30%乙醇至 12.5 ml, 显色 , 静置 10 min, 于 2 000 r/min下离心 10 min,取上清液 ,以 0 ml为空白对照 , 于 波长 506 nm处测定吸光度值 。以芦丁标准溶液的浓度 (C) 与吸光度 (A)作图 ,用最小二乘法作线性回归 ,得芦丁标准溶 液浓度 C(mg/ml)与吸光度值 A的标准曲线回归方程式为 : C=0.128 2A+0.001 0, r=0.999 5, 表明芦丁标准溶液浓度 在 0 ～ 0.07 mg/ml范围内与吸光度值的线性关系良好 。 1.2.8.3 总黄酮提取率的计算 。 分别量取样品溶液 0、1.0 ml于 25 ml容量瓶中 , 加入 30%乙醇至 12.5 ml, 显色 , 静置 10 min, 于 2 000 r/min下离心 10 min,以 0 ml为空白对照 , 于 波长 506 nm处测定吸光度值 。所测样品吸光度值经标准曲 线回归方程换算后 , 得出提取液总黄酮浓度 , 然后按下式计 算提取率 :
摘要 [ 目的 ]优化女贞子 (FRUCTUSLIGUSTRILUCIDI)中总黄酮的提取工艺。 [ 方法] 在单因素试验基础上, 采用 L9(34)正交试验对 乙醇回流法提取女贞子总黄酮的工艺进行优化 。 [ 结果] 最佳提取工艺条件为:2.50 g干燥女贞子粉末, 乙醇体积分数 60%, 料液比 1∶ 50(M/V), 提取温度 85 ℃, 提取时间 2 h。 在此最佳提取工艺条件下 , 总黄酮提取率较高 , 为 6.215%。 [ 结论] 乙醇回流法提取女贞子总 黄酮稳定可靠。 关键词 女贞子;黄酮;提取工艺 中图分类号 S567.23+9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2011)06-03305 -04
duration 1.5 2.0 2.5
料液比
(D)(W/V)
Solid-
liquidratio 1∶30 1∶40 1∶50
1.2.7 优化条件的验证试验 。 1.2.7.1 精密度试验 。精密称取干燥女贞子粉末 2.50 g, 加 入 100 ml60%乙醇提取 2.0 h, 将提取液抽滤 、离心 , 然后定 容至 100 ml容量瓶中 。准确吸取 1.0 ml待测液 5份 , 显色 , 测定吸光度值 ,计算其相对标准偏差 (RSD)[ 8] 。 1.2.7.2 方法重现性试验 。精密称取 5 份女贞子粉末各 2.50 g, 加入 100 ml60%乙醇提取 2.0 h, 将提取液抽滤 、离 心 ,然后定容至 100 ml容量瓶中 , 准确吸取 1.0 ml, 显色 , 测 定吸光度值 , 计算 RSD。 1.2.7.3 显色反应稳定性试验 。精密称取干燥女贞子粉末 2.50 g, 加入 100 ml60%乙醇提取 2.0 h, 将提取液抽滤 、离 心 ,然后定容至 100 ml容量瓶中 。准确吸取 1.0 ml待测液 , 显色后 ,每隔 15 min测定 1次吸光度值 , 连续测定至 90 min, 以确定提取液显色后的稳定性[ 9] 。 1.2.8 分析方法 。 1.2.8.1 最佳波长的选择 。准确称取干燥至恒重的芦丁对 照品 0.010 0 g于 100 ml烧杯中 ,加入 20 ml30%乙醇 , 在水 浴锅中加热使其溶解 ,然后转移至 50 ml容量瓶中 , 定容 , 配
中药女贞子 (FRUCTUSLIGUSTRILUCIDI)又称女贞实 、 冬青子 、白蜡树子和鼠梓子 , 系木犀科植物女贞 (Ligustrum luciclumAit.)的干燥成熟果实 , 是我国传统的扶正固本药 物 [ 1] 。女贞子具有补益肝肾 、清虚热 、明目之功效 , 可用于治 疗头昏目眩 、腰膝酸软 、遗精 、耳鸣 、须发早白 、骨蒸潮热和目 暗不明等病症 。现有研究表明 , 女贞子含有多种化学成分 , 最先发现的是含量较高的齐墩果酸 ,后又发现了乙酰齐墩果 酸 、熊果酸和乙酰熊果酸等 。 女贞子的挥发油成分主要为 酯 、醇和醚类 , 其次是硫酮和烃类及少量胺和醛 , 不含萜烃 类 。女贞子的黄酮类物质主要有木樨草素 -7-O-B-D-葡萄糖 苷 、槲皮素 、芹菜素 、大波斯菊苷 、芹菜素 -7-O-乙酰 -B-D-葡萄 糖苷 、芹菜素 -7-O-B-D-芦丁糖苷和木樨草素 ,还有黄酮 、黄酮 醇 、双氢黄酮和双氢黄酮醇类化合物 [ 2] 。 文廷刚等研究表 明 ,天然植物中的黄酮类化合物具有极为广泛的生理活性作 用 ,如抗氧化性 、抗衰老 、清除自由基 、降低血糖 、降血脂 、降 血压 、治疗心脑血管疾病 、抗炎 、抗菌 、抗癌 、镇痛 、免疫及对 消化性溃疡的保护作用等药用保健功能 [ 3] 。为此 , 笔者优化 了女贞子中总黄酮的提取工艺参数 ,以期为女贞子在食品领 域和药品领域的进一步开发利用奠定基础 。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 研究对象 。女贞子采自黄石理工学院校园 , 由黄石 理工学院郑进教授鉴定为 L.luciclumAit.的干燥成熟果实 。 1.1.2 主要试剂 。芦丁对照品 , 由中国药品生物精品检定 所生产 ;无水乙醇 , 由天津市凯通化学试剂有限公司生产 ; 99.5%甲醇 、99.5%丙酮 、亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠 、石油 醚 、氯化钠和三氯化铁等 ,均由天津市科密欧化学试剂有限 公司生产 ;36% ～ 38%浓盐酸 、锌粉 ,均由武汉市江北化学试
33 06
安徽农业科学 2011年
滴氢氧化钠溶液 , 观察记录颜色变化 ;静置一段时间 ,观察记 录颜色变化 ;然后再加热观察记录颜色变化 。 1.2.5 单因素试验 。 1.2.5.1 乙醇体积分数的选择 。 精密称取 5份干燥女贞子 粉末 ,各 2.50 g, 分别用 50%、60%、70%、80%、90%乙醇 100 ml提取 2.0 h, 将提取液抽滤 、离心 , 然后定容至 100 ml容量 瓶中 ,显色 ,测定吸光度值 。 1.2.5.2 提取时间的选择 。精密称取 5 份干燥女贞子粉 末 ,各 2.50 g用 100 ml80%乙醇分别提取 1.0、1.5、2.0、2.5、 3.0 h, 将提取液抽滤 、离心 ,然后定容至 100 ml容量瓶中 , 显 色 ,测定吸光度值 。 1.2.5.3 提取温度的选择 。精密称取 5份干燥女贞子粉末 各 2.50 g, 各加入 100 ml80%乙醇 , 于 70、75、80、85、90 ℃下 提取 2.0 h,将提取液抽滤 、离心 , 然后定容至 100 ml容量瓶 中 ,显色 , 测定吸光度值 。 1.2.5.4 料液比的选择 。精密称取 5份干燥女贞子粉末各 2.50 g, 分别用 50、75、100、125、150 ml80%乙醇 [即料液比分 别为 1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60(M/V)] 加热回流提取 2.0 h,将提取液抽滤 、离心 , 然后定容至 100 ml容量瓶中 , 显色 , 测定吸光度值 。 1.2.6 正交试验 。 在单因素 试验基础上 , 选择提 取温度 (A)、乙醇体积分数 (B)、提取时间 (C)和料液比 (D)4个因 素 ,每个因素 3个水平 , 采用 L9 (34 )正交表 (表 1)设计试验 , 以确定最佳黄酮提取工艺条件 。
StudyontheExtractionofTotalFlavonoidsfrom FRUCTUSLIGUSTRILUCIDI XULing-huaetal (ProcessSchoolofChemicalandMaterialEngineering, HuangshiInstituteofTechnology, Huangshi, Hubei435003) Abstract [ Objective] TooptimizetheextractionprocessoftotalflavonoidsfromFRUCTUSLIGUSTRILUCIDI.[ Method] Onthebasisofsingletest, theextractionprocesswasoptimizedthroughL9 (34)orthogonaltest.[ Result] Theoptimum extractionprocesswasasfollows:2.50 g driedpowderofFRUCTUSLIGUSTRILUCIDI, 60% alcoholasextractant, solid-liquidof85 ℃, extractiondurationof2 h, undertheaboveconditiontheyieldrateoftotalflavonoidsreachedashighas6.215%.[ Conclusion] Ethanolrefluxmethodwasprovedtobestableandreliablefor extractingtotalflavonoidsfromFRUCTUSLIGUSTRILUCIDI. Keywords FRUCTUSLIGUSTRILUCIDI;Flavonoids;Extractionprocess