水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)检测论文
广东东部沿海麻痹性贝类毒素成分特征分析
广东东部沿海麻痹性贝类毒素成分特征分析江天久;包财;雷芳;吴锋;江涛【摘要】为了弄清广东东部沿海贝类中麻痹性贝类毒素(Paralytic shellfish poisoning,PSP)的主要成分及其藻类来源,运用液相色谱-柱后衍生荧光检测技术,对2005-2006年问在粤东近岸重点养殖区采集的主要经济贝类进行了麻痹性贝类毒素成分分析.分析结果表明,在染毒的贝类样品中共检出PSP的12种成分,各成分的检出率时空分布特征有所不同,其中N-磺酸氨甲酰基类毒素C1和氨基甲酸酯类毒素GTX1的检出率最高,均达78%以上;其次为GTX4,达71%.在毒素含量方面,C1普遍较低,春季含量较其他季节高,而在春秋两季贝类中,GTX1和GTX4含量普遍较高.总体上,麻痹性贝毒在粤东海域的分布具有明显的地域性、季节性和贝类种间差异.地域上以柘林湾污染较为严重,毒素成分最多,且含量较高;季节上春季为染毒高峰期,秋季次之;主要染毒贝类为牡蛎(Crassostrea spp.)、结蚶(Tegillarca nodifera)、泥蚶(Tegillarcagranosa)和蚶(Scapharca spp.),柘林湾2005年9月14日的结蚶毒性最高,其毒性当量值达到370 μg STX/100g.与其他贝类相比,蚶类对高毒力的GTX毒素有更强的积累能力.【期刊名称】《中国水产科学》【年(卷),期】2010(017)001【总页数】9页(P119-127)【关键词】麻痹性贝类毒素;高效液相色谱;粤东海域【作者】江天久;包财;雷芳;吴锋;江涛【作者单位】暨南大学赤潮与水环境研究中心,广东,广州,510632;暨南大学赤潮与水环境研究中心,广东,广州,510632;暨南大学赤潮与水环境研究中心,广东,广州,510632;暨南大学赤潮与水环境研究中心,广东,广州,510632;暨南大学赤潮与水环境研究中心,广东,广州,510632【正文语种】中文【中图分类】S97近十几年来,广东沿海有害赤潮频繁发生,不仅造成鱼类和贝类大量死亡,其产生的生物毒素通过食物链也对人类的生命健康产生危害,影响了近岸海产品的食用安全和海水养殖业持续稳定发展。
贝类毒素及其贝类毒素检测的研究
导读:贝类毒素及其贝类毒素检测的研究,摘要:贝类中毒是由一些浮游藻类合成的多种毒素而引起的,这些藻类是贝类的食物,这些毒素在贝类中蓄积,通过生物测定、物理分析、免疫化学可测定贝类毒素,赤潮毒素对人类造成的危害事件日益增多,贝类毒素属于海洋天然高分子有机化合物,它的形成与海洋中有毒素藻类赤潮密切相关,经过生物积累和放大转化为有机毒素,即贝类毒素,因此开展对贝类毒素的研究对人类有重要意义,1贝类毒素贝类(财经大学食品科学与工程学院,,210000)摘要:贝类中毒是由一些浮游藻类合成的多种毒素而引起的,这些藻类是贝类的食物,这些毒素在贝类中蓄积。
通过生物测定、物理分析、免疫化学可测定贝类毒素。
关键词:贝类;毒素;检测;藻类;毒理效应;化学分析。
Shellfish poison and shellfish toxin detection research(Nanjing University of Finance and Economics Institute of Food Science and Engineering,Nanjing 21000,Nanjing,China) Abstract: shellfish poisoning is by some planktonic algae synthesis of a variety of toxin and cause, these algae is shellfish food, the poison in the shellfish accumulation. Through the bioassay, physical analysis, immune chemical measurement shellfish poison.Keywords: Shellfish; Poison; Detection; Algae, Toxicological effect; Chemical analysis. 20世纪50年代以后,海洋赤潮频繁,赤潮毒素对人类造成的危害事件日益增多。
塔玛亚历山大藻产麻痹性贝类毒素能力的研究
洋污染风险进行评估。 就我 国 来 看,PSP污 染 情 况 不 容 乐 观,仅
2017—2019年,我国福建漳州和河北秦皇岛就发 生多起 PSP中毒事件,不仅威胁到人类的生命安 全,也造 成 了 海 水 养 殖 业 的 巨 大 经 济 损 失。对 此,我国政府高度重视,组织开展 PSP监测项目, 完善 PSP风险监控体系。相关科研人员也积极 投入 PSP研究中,比如,研发更高效的 PSP检测 手段、探究 PSP在贝类中的代谢规律、分析产 PSP 藻类在不同环境中的生长及 产 毒 能 力 等[12-13]。 有研究表明,全球绝大多数 PSP事件皆由亚历山 大藻属藻类引起,该属藻类目前已通过形态学确 定的有 30多种,其中一半以上被发现能够产生 PSP,且毒素成分多样[1,14]。ZOU等[15]对 67株分 离自我国沿海的塔玛亚历山大藻 PSP组分研究 发现,不同藻株 PSP成分存在较大差异,但主要
收稿日期:2020-04-07 基金项目:中国水产科学研究院基本科研业务费 (2017HYYJ0202);中央级公益性科研院所基本科研业务费 (21852018);国家自然科学基金 (31471672);上海市自然科学基金 (17ZR1439400) 作者 简 介: 汪 宇 (1995—),男,安 徽 安 庆 人,硕 士 研 究 生,主 要 研 究 方 向 为 贝 类 产 品 质 量 与 安 全。Email: wangy0513@126.com 通信作者:沈晓盛,研究员。Email:foodsmc98@126.com
仪器条件参考 GB5009.2132016中液相色 谱质谱条件[21]。样品分析在 Ultimate3000超高 压液相色谱QExactive静电场轨道阱高分辨质谱 联用系 统 上 进 行。色 谱 柱 为 TSKgelAmide80 (3μm,2mm×15cm)。
麻痹性贝类毒素在海洋食品中的安全性研究概述
麻痹性贝类毒素在海洋食品中的安全性研究概述作者:礼贺来源:《现代食品》 2018年第3期摘要:通过总结当前麻痹性贝类毒素的构效、检测分析方法提出安全监管方案,认为对于麻痹性贝类毒素,既要有效防治,又要加强利用,检测和监管工作也需进一步加强。
关键词:麻痹性贝类毒素;海洋食品;安全Abstract:This paper summarized the research of structure-activity, analyzed methods and thenproposed a security supervision program. It is believed that for paralytic shellfish toxin, it is necessary toprevent and control, and to strengthen the use of the detection and supervision.Key Words:Paralytic Shellfish Toxins; Marine food; Safety中图分类号:R155.3我国拥有丰富的海洋食品资源,扇贝、贻贝、牡蛎、鲍鱼等贝类由于食用价值高且有一定的保健功能而深具市场前景[1]。
然而,在几千万年的自然选择中,由海洋藻类产生的海洋毒素通过食物链传递至贝类体内,不断累积形成的有毒高分子化合物——贝类毒素,给食品安全消费提出新的挑战[2],它严重影响了贝类品质,给渔业养殖及食品加工业进出口造成巨大的经济损失。
本文以麻痹性贝类毒素为研究对象,通过探究其毒性、分析方法、安全监管来对其进行安全性分析。
1 贝类毒素概述贝类毒素是海洋毒素危害较大的一种,全球分布广,由于其毒性大、反应快、无适宜解毒剂,给防治带来了许多困难。
Saomes Maric 根据毒素对人类引发的中毒症状和藻源的不同将其分为5 类,主要包括麻痹性贝类毒素(Paralytical Shellfish Poisoning,PSP)、腹泻性贝类毒素(Diarrhetic Shellfish Poisoning,DSP)、神经性贝类毒素(Ncurotoxic Shellfish Poisoning,NSP)、健忘性贝类毒素(Amnesic Shellfish Poisoning,ASP)、西加鱼毒。
贝类毒素的测定
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1
一、麻痹性贝类毒素(PSP)
Para1ytical shellfish poisoning
PSP中毒是最常见的食用贝类中毒 PSP由一组石房蛤毒及其衍生物组成,PSP与涡
鞭毛藻的水华有关(>106个细胞/升) PSP在世界范围内分布 PSP中毒引起神经系统紊乱,呼吸困难,感觉
记录注射完毕时间,仔细观察 并用秒表记录小鼠停止呼吸时 的死亡时间(到小鼠呼出最 后一口气止)
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样品的测定
小鼠试验
若注射样品原液后,1只或2只小鼠的死亡时间 大于7min,则需再注射至少3只小鼠以确定样 品的毒力
若小鼠的死亡时间小于5min,则要稀释样品提 取液后,再注射另一组小鼠(3只),得到 5min-7min的死亡时间
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样品的测定
提取
取 100g 样 品 于 800mL 烧 杯 中 , 加 0.1mol/L HCl溶液100mL充分搅拌, 检 查 pH ( pH 应 为 2.0-4.0 ) 。 需 要 时,可逐滴加入5mol/L HCl溶液或 0.1mol/L NaOH溶液调整pH,加碱 时速度要慢,同时需不断搅拌,防 止局部碱化破坏毒素
8倍稀释液
0.5
1.25
16倍稀释液
1.0
1.25
16倍稀释液
0.5
0.625
1)以中肠腺为检样时,相当于含有中肠腺的去壳贝肉量。
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毒力MU/g 0.05 0.1 0.1 0.2 0.2 0.4 0.4 0.8 0.8 1.6
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谢谢 !
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原理
根据小鼠注射贝类提取液后的死亡时间,查出 鼠单位,计算确定每100g贝肉中PSP的含量
麻痹性贝毒的分析方法研究进展
麻痹性贝毒的分析方法研究进展作者:石昌磊周志刚刘童丁家林于永刚来源:《现代农业科技》2010年第21期摘要针对麻痹性贝毒的检测技术,着重从生物学测试方法、化学测试分析方法2个方面概括地介绍了贝毒检测技术研究的进展。
总结了几种相关检测技术各自的优点和不足及几种方法有机结合和优势互补,提出了技术的革新和新方法的使用将是贝类毒素检测手段的发展方向。
关键词麻痹性贝毒;分析方法;生物学测试法;化学测试法中图分类号R994.6;X55文献标识码A文章编号 1007-5739(2010)21-0340-03AdvanceintheResearchMethodtoDetermineDiarrheticShellfishPoisonsSHI Chang-leiZHOU Zhi-gangLIU TongDING Jia-linYU Yong-gang(The Fishery Technology Spread Station of Lvshun in Dalian City of Liaoning Province,Dalian Liaoning 116041)AbstractIn this paper,focusing on the detection of paralytic shellfish poisoning techniques,the biological testing methods,and chemical test analysis methods were described in general on shellfish poisoning detection technology progress. The advantages and disadvantages of several related detection techniques,and several ways to combine and complement each other were summarized. New technology and new methodology will be the direction for shellfish toxins.Key wordsparalytic shellfish poisoning toxins(PSP);analytical method;biologicalmethod;chemicalmethod随着社会的发展,人们的生活质量渐渐提高,各种海产贝类食品越来越多地进入了寻常百姓家的餐桌,并且越来越受到欢迎。
南海海域养殖牡蛎中麻痹性贝类毒素分析
IK)专业论文PROFESSIONAL PAPER南海海域养殖牡蛎中麻痹性贝类毒素分析■文I王娴吴移山广东省湛江市质■计■监督检测所国家海产品质■监贅检测(湛江)中心林华娟广东海洋大学僅品科技学院摘要:本研究在2013年3月采集湛江、阳江、钦州、北海、汕头、汕尾、深圳I、台山等8个位于南海海域的养殖牡蛎,用小鼠生物(MBA)法和高效液相色谱(HPLC)法进行麻痹性贝类毒素检测。
MBA毒性分析结果显示:8个区域养殖牡蛎的毒素含量为0MU/g-2.3MU/g,符合我国贝类食品安全限量要求;HPLC毒素成分分析结果显示:湛江、深圳I、汕头、台山和阳江等5个海域的养殖牡蛎体内检测出痕量的麻痹性贝类毒素,湛江、深圳、汕头和阳江海域的养殖牡蛎中检出高毒性的STX和neo STX.本次麻痹性贝类毒素测试MBA法的检出率为25%,HPLC法的检出率为62.5%,HPLC法更适合于检测麻痹性贝类毒素含量低的样品。
关键词:南海海域;牡蛎;麻痹性贝类毒素尼丘痹性贝类毒素(psp)是一类剧毒的含氮杂环有机物,丿林■其基本化学结构是带两个肌基(=NH2)的嗥吟核,目前已经分离岀24种毒素,研究得比较多的主要有以下三种类型:(1)氨基甲酸酯类毒素(Carbamoyl toxins),如石房蛤毒素(saxitoxins,STX)、新石房蛤毒素(Neosaxitoxins, neoSTX)、膝沟藻毒素(Gonyautoxin,GTX^);(2)N-磺酰胺甲酰基类毒素(N-sulfo carbamoyl toxins),如C—GTX5(B,),GTX6(B2),(3)脱氨甲酰基类毒素(Decarbamoyl toxins),包括de STX、de neo STX、de GTX^等冋,PSP的主化学结构如图1所示。
在24种PSP中以氨基甲酸酯类毒素中的STX最为常见,是目前最主要的研究对象贝类毒素的形成与海洋中有毒藻类赤潮密切相关。
水产品中致病微生物的快速检测方法
致病微生物可通过水产食品对人产生危害, 表 现 为 胃 肠 炎 、腹 泻 、发 烧 、呕 吐 、败 血 症 、痢 疾 等 主要症状。这些微生物所引起的食源性疾病是影 响食品安全的主要因素之一。目前对水产及其加 工品的微生物检验主要是针对一般的污染 ( 如大 肠杆菌、菌落总数) 和致病菌( 如沙门氏菌、副溶血 性弧菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃氏菌等) 。常规的 微生物学检验通常以分离培养、生化试验及血清 学试验来进行判断, 具有操作复杂、手工劳动量
在早期, 利用多重嵌套式 PCR( ABC- PCR) 扩 增, 从滤食性软体动物中提取的 DNA 片段, 通 过 分析PCR 扩增后的限制性片段和 DNA 序列对 人 类 粪 便 中 的 隐 胞 子 虫 ( Cryptosporidium spp) 和 贾 第虫( Giardia duodenalis) 进行检测和鉴定。Couso 等[13]在 贻 贝 的 DNA 中 插 入 隐 胞 子 虫 和 贾 第 虫 的 基因片段, 从而建立目标检测基因, 再利用 ABC- PCR 方法检测, 结果表明该法非常适用于贝类中 隐胞子虫和贾第虫的检测。
麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法的建立
麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法的建立于志强;孙运;陈小青;刘汉伟;马中春【摘要】目的:建立麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法.方法:小鼠神经干细胞(NSC)培养于96孔培养板中,至对数生长期,每孔加入170μL培养液和10μL石房蛤毒素(STX)标准品(分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 ng),再加入10 mmol/L的乌本苷10μL及1 mmol/L的藜芦碱10μL.同时设置乌本苷及藜芦碱对照孔,以及空白对照孔.CCK-8溶液孵育后用酶标仪测定各孔D(450)值,根据石房蛤毒素标准液含量与D(450)值之间的剂量反应关系,建立标准曲线.结果:培养的正常NSC第1天为单细胞悬液,第2~3天聚集成为小神经球,第4天为大神经球;加入乌本苷及藜芦碱后较多细胞出现肿胀破裂,加入STX后可见肿胀或破裂死亡的细胞,但细胞形态多为正常.并于0.2~1.0 ng范围内建立了麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法并建立了标准曲线,其回归方程为y=1.252+0.495x(r=0.9980,P<0.01).结论:成功建立了麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法,该研究为神经性贝类毒素的体外检测相关研究奠定了基础.【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2019(031)004【总页数】4页(P323-326)【关键词】麻痹性贝类毒素;小鼠神经干细胞;体外检测方法;乌本苷;藜芦碱【作者】于志强;孙运;陈小青;刘汉伟;马中春【作者单位】宁波中盛产品检测有限公司/宁波海关技术中心,浙江宁波 315000;宁波中盛产品检测有限公司/宁波海关技术中心,浙江宁波 315000;宁波中盛产品检测有限公司/宁波海关技术中心,浙江宁波 315000;宁波中盛产品检测有限公司/宁波海关技术中心,浙江宁波 315000;宁波中盛产品检测有限公司/宁波海关技术中心,浙江宁波 315000【正文语种】中文【中图分类】R991贝类毒素是由海洋中的有毒藻类通过食物链传递给藻食性的贝类,并在其体内蓄积、放大、转化形成的有毒高分子化合物[1]。
麻痹性贝类毒素标准样品的研制
麻痹性贝类毒素标准样品的研制王秋艳;赵景红;徐杨;郑秋月;赵昕【摘要】Scallop, naturally contaminated with paralytic shellfish poison (PSP) toxins were collected and the shells were opened. Meat were removed, homogenized and lyophilized. Homogeneity and stability testing results showed that the PSP reference material was homogeneous and stable. The certification value was the average assigned by eight laboratories, The PSP content and its expanded uncertainty was (589 ±42) MU/g (k=2 ). The PSP reference material can be used in the method evaluation and quality control in the determination of PSP.%将麻痹性贝类毒素阳性的新鲜扇贝去壳后取贝肉,经过匀浆,冷冻干燥等步骤制备成冻干粉,然后进行均匀性和稳定性检验,结果表明,制备后的样品均匀,稳定,满足标准样品的要求.以多家实验室定值的方式对该标准样品进行定值,定值结果为( 589±42 )MU/g(k=2).该标准样品可用于麻痹性贝类毒素检测过程的方法验证与质量控制.【期刊名称】《化学分析计量》【年(卷),期】2012(021)002【总页数】3页(P4-6)【关键词】麻痹性贝类毒素;标准样品;小鼠生物法;扇贝【作者】王秋艳;赵景红;徐杨;郑秋月;赵昕【作者单位】辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001;辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001;辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001;辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001;辽宁出入境检验检疫局,辽宁大连116001【正文语种】中文【中图分类】O652.3麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poison,PSP)是指化学结构以石房蛤毒素(Saxitoxin,STX)为代表,摄食后可产生麻痹作用存在于贝类体内的海洋生物毒性物质的总称[1]。
贝类体内麻痹性贝类毒素的提取方法研究
贝类体内麻痹性贝类毒素的提取方法研究摘要:采用浓度系列为0.04、0.07、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.40、0.50、0.70、1.0 mol/L的HCI和HAc溶液作为提取液,分别取10 mL提取液与10 g栉孔扇贝性腺混合,在沸水浴中加热5 min提取麻痹性贝类毒素(PsP);同时采用0.3 mol/L HAc 和0.2 mol/L HCl,于冰水浴中进行超声波提取麻痹性贝类毒素5—30 min。
提取完成后将混合物于4℃冷冻离心机内离心5 min(3500 r/min),取上清液并以0.1 mol/L NaOH或5 moL/L HCl调整至pH为2.0~4.0。
经超滤膜过滤后的提取液以高效液相色谱柱后衍生荧光检测法进行毒素分析,研究毒素组分间的转化关系和提取效率,并与超声波提取法进行了比较。
结果表明,采用0.04~0.25 mol/L HCl和0.04—1.0 moVL HAc从贝肉中提取PSP毒素。
各毒素组分浓度差异不大,当HCI浓度大于0.25 mol/L时,Ⅳ一磺酰氨甲酰基类毒素cl浓度急剧降低,HCI浓度大于0.5 mol/L时,~.磺酰氨甲酰基类毒素C2和GTX5浓度急剧降低,j者在酸度过大的情况下分解或转化为膝沟藻毒素-2(GTX2),膝沟藻毒索-3(GTX3)和石房蛤毒素(STX)。
在相同浓度酸的情况下,超声波提取液中c1毒素的浓度显著低于沸水浴提取法,但c2的浓度略高于沸水浴提取液。
1 引言麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning toxins,PSP)是一类对人体神经系统产生麻痹作用的海洋生物毒素,主要由有毒甲藻产生,可通过食物链在贝类等生物体内累积放大【1l。
当人们误食这些染毒的海产品时,就会发生中毒或死亡。
PsP是一类四氢嘌呤的衍生物,现已发现该类毒素有20余种成分,分为四类:氨基甲酸酯类毒素(Carbamate toxins),包括石房蛤毒素(Saxitoxin,STX),新石房蛤毒素(Neosaxitoxin,NEO),膝沟藻毒素(Gonyautoxin),包括膝沟藻毒素GTXI,GTX2,GTX3和GTX4;N一磺酰氨甲酰基类毒素(N-sulfocarbamoyl toxins),包括C1、C2、C3、C4、GTX5(B1)和GTX6(B2);脱氨甲酰基类毒素(Decarbamoyl toxins),包括Decarbamoyl saxitoxin(dcSTX),Decarbamoyl neosaxitoxin(dcneoSTX),Decarbamoyl gonyautoxins l 4(dcGTXl-4);脱氧脱氨甲酰基类毒素(Deoxydecarbamoyltoxins)。
5起织纹螺引起的麻痹性贝类中毒的调查及分析[1]
中图分类号 : S944. 4+ 9
文献标识码 : C 文章编号 : 1004
8456( 2000) 01 0053 02
祝读者新年快乐
54 中国食品卫生杂志 2000 年第 12 卷第 1 期
在与中毒病人所食的织纹螺同一捕捞点捕捉而来。 纹螺毒力大小采用鼠单位 ( M U ) 来表示 , 鼠单位是国际上表示麻痹性贝类毒素毒 力的统一 单位 , 1M U 表示 15
[ 1] min 内杀死体重 20 g 小白鼠的平均毒素量 。鼠单位 ( M U ) 的测定按 A OAC 的小白鼠生物测定法进行。
取适量螺肉 , 剪碎 , 研磨 , 混匀后 , 用 0. 1 mol/ L HCl 制成浓度为 0. 5 g/ mL 的酸性螺肉提取液。根据 毒力 强弱将提取液作适当稀释 , 使小鼠在 4~ 8 min 内死亡。取 19~ 21 g 健康 ICR 小鼠腹腔注射上 述提取液 或稀 释液 , 每只注射 1 mL, 记录小鼠死亡时间 , 根据平 均死亡时间 , 从 Sommer 表中查得相应的鼠单 位 ( M U ) , 再换
食物中毒
5 起织纹螺引起的麻痹性贝类中毒的调查及分析
蒋贤根 徐卫平 林香娟 杭州 310009) ( 浙江省卫生 防疫站 , 浙江
织纹螺 ( N assar ius sp ) 属软体动物门 , 腹足纲、 前鳃亚纲、 狭舌目、 织纹螺科 , 是我省 沿海常见的 螺种之一 , 沿海居民普遍有食用织纹螺的习惯。由于海洋污染的加剧 , 赤潮的 增多 , 近年来我省 织纹螺中 毒事件明显 增 多 , 仅 1998 年就发生了 5 起因食用织纹 螺引起的麻痹性贝类中毒 ( par alytic shellfish poisoning PSP) , 现将 有关 流行病学调查及毒性研究报告如下。 1 流行病学调查 织纹螺广泛分布于我省沿海 地区 , 其外形 呈长卵 圆形或 尖锥形 , 长约 1. 5~ 2. 0 cm, 外 壳
水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)的快速检测
水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)的快速检测黄玉柳;黄国秋;叶欣宇;黎小正;吴祥庆;庞燕飞;谢宗升;陈静【摘要】介绍了美国ABRAXIS麻痹性贝类毒素试剂盒的测定原理和测定方法,应用该试剂盒对广西钦州和防城港海域近江牡蛎样品各20个、北海海域文蛤样品20个,进行麻痹性贝类毒素检测.应用酶联免疫试剂盒检测麻痹性贝类毒素,全部试验过程在2h内完成,检测限0.02 ng/g,灵敏度为0.015 ng/g.应用ELISA法检测麻痹性贝类毒素,具有简便、快捷、灵敏、成本低廉等特点,非常适于快速检测的实际需求,有望作为理想的筛选分析方法之一,在水产品质量快速检测、养殖区染毒情况调查以及上市贝类质量监控方面发挥重要作用.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2012(040)001【总页数】2页(P255-256)【关键词】麻痹性贝类毒素;酶联免疫;食品检验;小白鼠生物法【作者】黄玉柳;黄国秋;叶欣宇;黎小正;吴祥庆;庞燕飞;谢宗升;陈静【作者单位】广西水产研究所,广西南宁530021;广西水产研究所,广西南宁530021;广西水产研究所,广西南宁530021;广西水产研究所,广西南宁530021;广西水产研究所,广西南宁530021;广西水产研究所,广西南宁530021;广西水产研究所,广西南宁530021;广西水产研究所,广西南宁530021【正文语种】中文【中图分类】R446.62麻痹性贝类毒素(PSP)是指存在于贝类体内、化学结构以石房蛤毒素(Saxitoxin,STX)为代表、摄食后可产生麻痹作用的海洋生物毒性物质的总称,主要是由甲藻类中的亚历山大藻(Alexandrium)以及膝沟藻属(Gonyaularx)、原甲藻属(Prorocentrum)等一些形成赤潮的种类产生的一系列氨基甲酸酯类衍生物,是目前世界上分布最广、食物中毒发生频率最高、危害程度最大的一类毒素。
目前国际上普遍采用小鼠法、生物免疫法、色谱法和质谱法等手段来检测贝类并做出预警预报[1-2]。
营口沿海贝类毒素含量调查论文
营口沿海贝类毒素含量调查【摘要】目的通过实验条件的优化选择,摸索出适用于海水贝类食品中贝类毒素的检测方法,摸清常见贝类毒素的污染状况。
方法本次调查采用国际公认的aoac标准生物检测方法psp和dsp的小白鼠生物试验法。
结果在采集的80份海水贝类样品中检出麻痹性贝类毒素13份,检出均值为55μg/100g;11份样品检出腹泻性贝类毒素,检出均值为12μg/100g。
结论小白鼠生物试验法测定贝类毒素取材方便、方法简单、快速,适于基层单位应用。
【关键词】贝类毒素;含量;调查文章编号:1004-7484(2013)-02-0923-01近年来,我国周边海域海水贝类被赤潮污染的情况时有发生,贝类通过滤食有毒微藻,经过生物累积和放大转化为贝类毒素,它是毒性很强的非蛋白毒素,毒性大、反应快、无适宜解毒剂,具有突发性和广泛性,这些特点都给防治带来了许多困难。
近1o年来,据不完全统计,在菲律宾已有40多人因麻痹性贝类毒素中毒夺去生命,在危地马拉两天内就有26人因中毒而丧生,有报道连云港市1991年至2003年报告的11起麻痹性贝类中毒中死亡人数为8人。
营口市位于辽东半岛西北部,近海滩涂和浅海养殖水域有4万余亩,蕴藏杂色蛤、毛蚶、缢蛏、大竹蛏等贝类资源价值约2亿元,年产扇贝、杂色蛤、文蛤、蛏子等近万吨,但目前辽东湾、渤海湾赤潮处于多发期,仅去年渤海全年共发生赤潮7次,严重赤潮可使50%以上养殖贝类死亡。
虽然我国近年来在近岸海域实施了贻贝监测计划,结果表明,我国近岸海域贝类体内的滴滴涕、镉、铅和砷的残留水平总体呈现下降趋势,但贝类毒素含量调查工作尚未开展。
因此,开展营口沿海贝类毒素含量特征的调查研究工作,意义重大。
1 材料与方法贝类毒素的种类繁多,不同种类的毒素引起人类中毒的症状不尽相同。
贝类毒素主要分为4类:麻痹性贝毒(paralytic shellfish poisoning,psp)、腹泻性贝毒(diarrheic shellfish poisoning,dsp)、记忆缺损性贝毒(amnesic shellfish poisoning,asp)、神经性贝毒(neurotoxic shellfish poisoning,nsp)。
麻痹性贝毒毒素(PSP)及其产毒藻对海洋鱼类危害的研究
麻痹性贝毒毒素(PSP)及其产毒藻对海洋鱼类危害的研究黄根华;彭艳超【摘要】麻痹性贝毒毒素(PSP)是海洋赤潮藻毒素中分布最广、危害最严重的一种藻毒素,是甲藻等有毒藻产生的一类四氢嘌呤毒素的总称.近年来的研究表明,PSP对鱼类有强烈的致死作用.海洋鱼类除了受到PSP及其产毒藻的急性毒性影响而死亡外,在受到非致死性的毒性作用时,鱼的其它生理状态也会发生一定的变化:如酶活性增加或降低、细胞坏死脱落以及鱼的行为改变等.【期刊名称】《中国新技术新产品》【年(卷),期】2010(000)008【总页数】2页(P17-18)【关键词】麻痹性贝毒;毒素;产毒藻;危害【作者】黄根华;彭艳超【作者单位】国家海洋局珠海海洋环境监测中心站,广东,珠海,519015;国家海洋局珠海海洋环境监测中心站,广东,珠海,519015【正文语种】中文1 PSP及其产毒藻对海洋鱼类的危害麻痹性贝毒毒素(PSP)是海洋赤潮藻毒素中分布最广、危害最严重的一种藻毒素,是甲藻等有毒藻产生的一类四氢嘌呤毒素的总称(图1)。
现在已经发现的麻痹性贝毒毒素近30种,主要是由大约 11种Alexandrium,Gymnodiniumcatenatum和Pyrodinium bahamense pressum等甲藻,以及蓝细菌Anabaena circinalis,Apbanizomenon flos-aquae,Cylindrospermopsis raciborskii,Lyngbya wollei和Planktothrix sp.等产生。
其活性成分石房蛤毒素及其衍生物在作用机制上与河豚毒素类似,都是通过选择性阻断电压门控Na+通道,导致动作电位无法形成。
含有PSP的水产品也有可能导致人类中毒事件,主要中毒症状表现为面部、肢端麻木,恶心,严重的会因呼吸肌麻痹而死亡[1]。
当PSP产毒藻赤潮爆发时,可以导致现场生物的大量死亡。
与滤食性生物相比,鱼类对PSP更为敏感,主要表现为鱼类的生理机能在PSP及产毒藻的影响下更易发生变化,严重时甚至死亡。
贝类生物毒素研究进展
贝类生物毒素研究进展阮雯;纪炜炜;岳冬冬;方海;刘勤;王鲁军;王芸;张晓峰;陆亚男【摘要】贝类是广受欢迎的水产品,但贝类中的生物毒素常引起食品安全事故,严重威胁消费者健康,影响了海洋养殖业的可持续发展。
本文阐述了常见贝类毒素的种类如记忆缺失性贝毒、麻痹性贝毒、腹泻性贝毒、神经性贝毒、原多甲藻酸贝毒和环亚胺类贝毒,进一步综述了其毒素来源及分布区域,并简单介绍了贝类毒素的两种分析检测方法,最后介绍了发达国家和组织对贝类毒素的监控限量,以期为我国贝毒的监测和标准设定提供参考。
【期刊名称】《渔业信息与战略》【年(卷),期】2017(032)004【总页数】5页(P276-280)【关键词】贝类生物毒素来源分布检测方法限量标准【作者】阮雯;纪炜炜;岳冬冬;方海;刘勤;王鲁军;王芸;张晓峰;陆亚男【作者单位】农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090;农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090;农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090;农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090;农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090;农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090;农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090;农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090;农业部远洋与极地渔创重点验室,中水产科学究完东水产研究斤,上海200090【正文语种】中文【中图分类】S912贝类是广受市场欢迎的水产品,贝类养殖是水产业的支柱产业之一。
我国是世界上最大的贝类养殖国,贝类养殖始于20世纪70年代,贝类年产量占世界贝类总年产量的60%以上。
据统计,2015年我国贝类总产量为1 384.6×104 t,比2000年增长33.27%,占水产养殖总量的28%,其中主要为海水贝类养殖,年产量为1 358.8×104 t[1]。
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水产品中麻痹性贝类毒素(PSP)检测探析[摘要]目的:使用美国abraxis麻痹性贝类毒素试剂盒对40个北海海域的文蛤样品进行psp检测。
方法:使用酶联免疫试剂盒对文蛤麻痹性贝类毒素进行检测,检测限为0.02ng/g,灵敏度为为0.015 ng/g。
通过建立psp纯溶液的标准曲线测定,待测水产品的psp浓度。
结果:建立标准曲线后,最终测得水产品样品psp的平均含量为1.7ng/g结论:应用elisa法检测麻痹性贝类毒素,具有简便、快捷、成本低廉等特点,适用于快速检测的样品。
可以应用于水产品质量的快速检测以及对贝类进行质量监控。
麻痹性贝类毒素(psp)指存在于贝类体内,摄食后可以产生麻痹作用的一种海洋生物毒性物质。
psp的化学结构主要是石房蛤毒索(saxitoxin),是目前世界上一类分布最广、食物中毒频率最高、危害度最大的毒素。
关键词:水产品;麻痹性毒素;检测
中图分类号:s9 文献标识码:a 文章编号:1009-914x(2013)02-01-01
1 资料与方法
1.1 样品随机选取40个北海海域的文蛤样品,用于后续psp
检测使用。
1.2 试剂美国abraxis贝类毒素试剂盒,甲醇。
1.3仪器酶标比色仪(bio一tek)、均质器、微量进样器、离心机、电子天平。
1.4方法
1.4.1测定原理用特异性抗体同石房蛤毒素进行结合。
样本中的石房蛤毒素可与石房蛤毒素一酶的结合物进行竞争,与微孔板上的兔抗一石房蛤毒素抗体发生特异性结合。
石房蛤毒素抗体和微孔底部的二抗发生结合,洗板后加入底物,此时会产生蓝色物质。
颜色的深度同样本中的石房蛤毒素浓度成反比。
在规定时间内终止颜色反应,用酶标仪进行读值。
每个孔内的样本浓度通过做出标准曲线来读取。
1.3.2样品前处理除去样品的贝壳,用蒸馏水洗净后放入均质器中。
称取15g均质后的样品,加入15ml0.1 mol/l的盐酸溶液,并煮沸5min。
煮沸过程中需要不断搅拌。
冷却均质后,以3500r/min 的速度进行10分钟离心。
取出上清液,用6mol/l的盐酸溶液调节ph,使ph小于4。
取10微升调节ph后的均质液,用蒸馏水稀释到1 ml,充分混匀待测。
1.4.2测定程序依次在微孔板中加入浓度为0,0.02、0.005、0.10、0.20、0.40ng/ml的psp标准溶液和待测提取液各50μl。
每个微孔中加入50μl的石房蛤毒素酶标物,轻轻搅拌使混合均匀;在每个孔中加入50μl石房蛤毒素抗体,轻轻搅拌式混合,覆盖上薄膜,室温放置30min。
充分反映后,将微孔中的溶液倒出,用洗液清洗3次,最后倒净残留的洗液。
向每个测试孔里加入100μl
的底物溶液。
将微孔封闭,轻轻震荡使使微孔板里的液体充分混匀。
室温放置30min,避免阳光直射。
最后向每个测试孔内加入100μl
的终止液。
用酶标测定仪于450nm处测量各溶液的吸光度。
绘制标准曲线,并进行计算。
1.5 数据分析可以采用excel2007绘制标准曲线。
算出标准吸光度值的平均值,计算每个标准的d/d0。
以标准的d/d0为y轴、各石房蛤毒素的标准浓度作x轴构建标准曲线。
2 结果
2.1灵敏度及检测限灵敏度:0.01ng/g。
检测下限:0.02ng/g。
2.2 标准液检测d/ d0(%)结果见表2
表2 标准液d/ d0(%)结果
标准液浓度(ng/ml)d/ d0(%)
0.02 0.9662
0.05 0.9617
0.10 0.9534
0.20 0.9361
0.40 0.9019
2.3标准曲线绘制使用excel2007绘制标准曲线,见图1
图1 psp标准曲线图
2.4 样品含量的计算待测样品psp的平均含量为1.7ng/g
3 讨论
麻痹性贝类毒是一种神经肌肉麻痹剂。
作用与人体时,主要是通过阻断细胞的钠离子通道造成神经系统的传输障碍进而产生麻
痹作用。
[1]贝类摄入此毒素时对自身无害,但当人食用后,毒素
会释放并给人体带来毒性作用。
一般来说,潜伏期仅数分钟。
发作后,主要症状包括:四肢肌肉麻痹、恶心头痛、皮疹等,更严重的会致人死亡。
1983年菲律宾曾发生一例麻痹性贝类中毒事件,致21人死亡。
麻痹性贝类毒素所带来的危害有突发性和广泛性。
由于psp的毒性大,反应快,无合适的解毒剂,给治疗带来很大困难。
所以需要开展对麻痹性贝类毒素含量的检验,以确保人民的生命安全[2]。
psp是一种碱性水溶化合物,在碱性条件下不稳定,这也对研究人员的分析带来一定的困难[3]。
这对分析仪器提出了精确可靠的要求。
自上世纪60年代来,有研究人员开始研究psp的免疫检测技术。
80年代末期,发展了酶联免疫吸附的技术,但因交叉反应效率低下,不能充分检测而未得到广泛应用。
随着科技的发展,出现了一系列较为先进的技术。
本实验即采用elisa检测方法水产品中麻痹性贝类毒素的含量。
由于psp本身为小分子物质,缺乏免疫原性,因此需要将其连接到大分子的载体上,使成为完全抗原后再用来免疫动物[4]。
一般采用实验中在2小时内完成酶联免疫试剂盒对麻痹性贝类毒素的检测过程,检测限为0.02ng/g,灵敏度为为0.015 ng/g,最终待测样品psp的平均含量为1.7ng/g。
本次应用elisa法检测麻痹性贝类毒素,具有简便、快捷、成本低廉等特点,适用于快速检测的样品。
可以应用于水产品质量的快速检测以及对贝类进行质量监控(当psp含量特别高时,结果可能存在一定的差异)。
因此,应用elisa方法对于麻痹性贝类的中
毒防治、水产业的发展、公众的健康都是非常重要的。
参考文献:
[1] 刘智勇,计融.麻痹性贝类毒素研究进展(综述) [j].中国热带医学.2006(2):340-344.
[2] 吴小松,姜雪.麻痹性贝类毒素的检测方法[j].科技风,2009,(20):194-195.
[3] 刘智勇,计融.麻痹性贝类毒素研究进展(综述) [j].中国热带医学.2006(2):340-344.
[4]林晶.贝类毒素分析技术的研究进展[j].黎明职业大学学报,2010(4):26-27.
作者:曹伟红,女,45岁,工程师,主要从事食品分析检验工作。