乳酸菌降胆固醇体外筛选的培养基研究_王晓君

2010No．4Serial No．217

China Brewing

血清胆固醇水平的提高是引发冠心病的主要危险因素之一。益生菌作为来源于宿主并对宿主健康有一定促进作用的微生物活体，其保健功能越来越受到人们的重视。许多体外或体内实验研究表明，益生菌有一定的降胆固醇作用[1-5]。同时体外研究也表明，某些乳酸菌可以降低培养基中的胆固醇[6-9]。GILLILAND S E 等[10-11]报道了嗜酸乳杆菌从实验培养基中吸收胆固醇的现象，条件为厌氧且存在胆酸盐的环境，吸收能力有菌株特异性。GILLILAND S E 等的实验结果与王俊国等[12]的实验结果一致，表明只有能降低培养基中胆固醇的菌株才能对猪的胆固醇水平有显著作用，因此能否降低培养基中胆固醇的体外研究成为筛选降血脂益生菌的初筛条件。

本研究探讨了乳酸菌在3种不同胆固醇源培养基中的生长状况以及降解胆固醇情况，旨在为乳酸菌降胆固醇体外筛选培养基的选择提供参考。1材料与方法1.1材料1.1.1菌种

植物乳杆菌（L.plantarum ）XZ45304、嗜酸乳杆菌（L.acidophilus ）NCFM4356、肠球菌（E.faecalis ）wz47-1-1、干酪乳杆菌（L.casei ）AG8-3、瑞士乳杆菌（L.helveticu ）mgh2-3-2由内蒙古农业大学乳品中心实验室提供；瑞士乳杆菌（L.helveticu ）T2从德琪饮乐多活性乳酸菌饮料中分离并保存；嗜热链球菌（S.thermophilus ）SD 从市售得益酸

乳中分离并保存；嗜热链球菌（S.thermophilus ）9从市售蒙牛酸乳中分离并保存；保加利亚乳杆菌（L.bulgaricus ）LB 、干酪乳杆菌（L.casei ）C ：本实验室保存。1.1.2培养基

高胆固醇MRS-broth 培养基I ：MRS-broth 培养基中加入超声乳化的鸡蛋黄（按1%加入）；高胆固醇MRS-broth 培养基II [13]：采用RAZIN 等[14]研究的方法，把配制好的胆固醇胶束溶液快速加入到MRS-broth 培养基中（0.1mg/mL ），边加入边搅拌；高胆固醇MRS-broth 培养基III ：先用无水乙醇配制浓度为10mg/mL 的胆固醇溶液,然后按一定比例添加到MRS-broth 培养基中使胆固醇最终浓度为100μg/mL 。1.1.3主要试剂

冰乙酸，正己烷，95%vol 乙醇，浓硫酸，50%KOH 溶液均为分析纯；胆固醇（生化试剂，上海三杰生物技术有限公司）；邻苯二甲醛（化学纯，上海同纳环保科技有限公司）；牛胆盐（化学纯，中国惠兴生化试剂有限公司）。1.2方法

1.2.1发酵液的制备

供试菌试验前在无菌MRS-broth 中连传3代，调整菌液

OD 620值（在波长620nm 处测得菌液的吸光度值）为同一水

平，按1%的接种量转接到高胆固醇MRS-broth 培养基I 、II 、III 中，37℃培养24h 。同时未接菌的含胆固醇MRS-broth 培养基，在5℃保存备用。1.2.2胆固醇降低率测定

乳酸菌降胆固醇体外筛选的培养基研究

王晓君1，潘道东2，张佳程1*

（1.青岛农业大学食品学院，山东青岛266109；2.南京师范大学食品科学与工程学院，江苏南京210097）

摘要：许多体外或体内实验研究表明,益生菌有一定的降胆固醇作用。探讨了10株不同的益生菌在3种不同胆固醇源的高胆固醇

MRS-broth 培养基中的降胆固醇效果以及生长状况，结果发现，这些益生菌在3种高胆固醇培养基中，37℃培养24h 后,均表现出降胆固醇活性，其中胆固醇胶束溶液配制的高胆固醇MRS-broth 具有较好的筛选效果。关键词：益生菌；培养基；降胆固醇中图分类号：Q93-335

文献标识码：A

文章编号：0254-5071（2010）04-0026-03

Medium for screening cholesterol-lowering lactic acid bacteria by in vitro model

WANG Xiaojun 1,PAN Daodong 2,ZHANG Jiacheng 1*

(1.College of Food Science,Qingdao Agricultural University,Qingdao 266109,China ；2.College of Food Science and Technology,Nanjing Normal University,Nanjing 210097,China)

Abstract:In vitro and in vivo studies showed that probiotics can lower cholesterol levels.Growth and effects of cholesterol-lowering of ten probiotics strains in three kinds of high cholesterol MRS-broth medium made by different sources of cholesterol were evaluated and analyzed.The results indi-cated that all strains showed cholesterol-lowering capacity after incubation for 24h at 37℃in medium with high concentration of cholesterol.And the MRS-broth with cholesterol micellar solution was the best.Key words:probiotics;medium;cholesterol-lowering

收稿日期：2010-01-26

基金项目：国家高技术研究发展计划（863计划）（2007AA10Z357）

作者简介：王晓君（1983-），女，硕士研究生，研究方向为乳品科学与技术；张佳程*，通讯作者。

Research Report

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