Chapter 4 Replication-1病毒的复制
病毒复制过程PPT参考课件
• 病毒在活细胞内,以其基因为模板,在酶的作用下,分 别合成病毒基因及蛋白质,再组装成完整的病毒颗粒, 这种方式称为复制(replication)。 • 从病毒进入宿主细胞开始,经过基因组复制和病毒蛋白 合成,至释放出子代病毒的全过程,称为一个复制周期。 • 病毒的复制周期主要包括吸附和穿入、脱壳、生物合成、 组装和释放四个连续步骤。
(+)ssRNA 晚期蛋白
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装配子代病毒
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单股负股RNA病毒
病毒自身携带依赖RNA的RNA多聚酶。
亲代(-ssRNA)
(+)ssRNA
多聚酶
(+)mRNA
蛋白质
子代(-)sRNA
子代病毒
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逆转录病毒
病毒RNA
逆转录酶
RNA:DNA
转录酶
双股DNA
mRNA 结构蛋白
整合至宿主细胞(前病毒)
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2. 有囊膜的病毒
• 囊膜与宿主细胞膜融合,病毒的核衣壳直接
进入细胞浆内 • 病毒胞饮: 细胞膜吞入
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(1) 膜融合后进入
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(2) 病毒胞饮
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二、脱壳(uncoating)
不同病毒脱壳方式不一,多数在宿主细胞溶酶体酶
作用下脱壳,释放出基因组核酸。
2018
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复制周期
2018
ห้องสมุดไป่ตู้
2
病毒的一步生长曲线
病毒的一步生长曲线:以感染时间为横坐标,病毒效价为 纵坐标,绘制出的病毒特征曲线。
2018 3
一、吸附和穿入
(一)吸附(adsorption)
第四章 DNA的复制-
• DNA的解链过程,首先在拓扑异构酶I的作 用下解开负超螺旋,并与解链酶共同作 用,在复制起点处解开双链,一旦局部解 开双链,就必须有SSB蛋白来稳定解开的 单链,接着由引发酶等组成的引发体迅速 作用于两条单链DNA。 • 不论是前导链还是滞后链,都需要一段 RNA引物以开始子链DNA合成。
• 冈崎片段与半不连续复制 由于DNA双螺旋的两条是反向平行的,因此在复制 叉附近解开的DNA链一条是5’-3’方向,另一条是 3’-5’方向,决定了前导链的复制是连续的,而滞 后链的复制是不连续的。因此称为DNA的半不连续 复制。 冈崎片段 在DNA不连续复制过程中,沿着后随 链的模板链合成的新DNA片段。随后共价连接成完 整的单链。其长度在真核与原核生物当中存在差 别,真核冈崎片段长度约为100~200核苷酸残 基,而原核为1000~2000核苷酸残基。
末端长度可变
A typical telomere has a simple repeating structure with a G-T-rich strand that extends beyond the C-A-rich strand. The G-tail is generated by a limited degradation of the C-A-rich strand.
The rolling circle replicates DNA
Phage λ
A rolling circle appears as a circular molecule with a linear tail by electron microscopy.
某种蛋白质介入而在真正的末端启动复制
真核细胞中DNA的复制调控
• 真核细胞中DNA复制有3个水平的调控 (1)细胞生活周期水平的调控 即决定细胞停 留在G1期还是S期,许多外部因素和细胞因子 参与限制点的调控。 (2)染色体水平的调控 决定不同染色体或同一 染色体不同部位的复制子按一定的顺序在S期 起始复制 (3)复制子水平调控 决定复制的起始与否
病毒复制
1、吸附 2、穿入 3、脱壳 4、生物
合成 5、组装 6、释放
病毒单周期生长曲线
病毒的复制
复制(replication) 病毒在细胞内由病毒基因组引导合成病毒核 酸、蛋白质及其它病毒结构成分,在宿主细胞 质内或核内装配成熟,释放到细胞外的增殖方 式。
复制周期 从病毒体侵入细胞到子代病毒体生成释放, 称为一个复制周期。
第 III类: 单负链RNA病毒
• RNA 病毒必须具有自身的RNA 依赖的RNA 聚 合酶 (RNA-dependent RNA polymerase, RdRp) 才能复制。
• 单负链RNA病毒本身携带有依赖RNA的RNA 多聚酶,病毒核酸本身不具有感染性。
• 包括: 流感病毒, 腮腺炎症病毒和狂犬病毒等
甲型流感病毒的血凝素能与多种不同细胞表面的唾液酸结合
黄热病毒、森林脑炎病毒、流行性乙型脑炎病 毒能与多种动物细胞表面的受体结合,包括节 肢动物、爬行动物、两栖动物、鸟类和哺乳动 物等,因此,这些病毒不仅能感染多种动物, 而且还能感染蚊子和其他昆虫。
穿入 (penetration)
病毒体吸附在宿主细胞膜上后,可通过数种穿入 方式进入细胞:
本身携带依 赖RNA的 RNA多聚酶
RdRp 的校读 (proofreading) 能力很低,合成核酸 时其碱基的错配率是DNA 聚合酶的1 万倍。病毒复 制过程中,RNA 病毒的变异速度可达DNA 病毒的 100 万倍以上。 所以,同一种RNA 病毒毒粒与毒粒间的基因序列并 不完全相同。因此,某种RNA 病毒实际上是一组起 源相同,遗传上密切相关但其基因序列不完全相同的 病毒群,即准种 (quasispecies)。
装配(assembly)
装配 assembly:核衣壳形成的过程 病毒装配的位置和机制取决于病毒核酸复制的位 置以及病毒有无包膜
病毒的复制 名词解释
病毒的复制名词解释病毒的复制:揭开微生物世界的奥秘在当今科技高度发达的社会中,病毒复制是一个十分重要且引人瞩目的话题。
病毒是一种微型生物,需要侵入其他生物细胞才能复制自身。
它们无法独立生存,却有着惊人的繁殖能力。
病毒复制的过程是既精密又令人惊讶的,这涉及到复杂的分子机制以及微生物世界中一些被解开的奥秘。
首先,病毒复制前,需要侵入宿主细胞。
病毒通过利用细胞表面的受体与宿主细胞发生相互作用,进而成功进入细胞。
宿主细胞可能是人类、动物、植物或微生物,不同类型的病毒具有不同的寄主范围。
一旦进入宿主细胞,病毒开始利用细胞的机制来复制自己。
其次,复制的核心过程是基因组复制。
病毒的基因组可以是DNA(脱氧核糖核酸)或RNA(核糖核酸)形式,具体取决于病毒的类型。
DNA病毒通过利用宿主细胞核内的DNA合成酶来复制自己的基因组。
而RNA病毒则需要先转录其RNA为DNA,再利用DNA合成酶复制该DNA。
这个过程中,病毒基因组的复制精细地遵循着扩增、合成和修复的步骤,确保基因组的准确复制。
此外,在病毒复制的过程中,一些突变现象也经常出现。
由于病毒的基因组复制速度非常快,并且病毒在复制过程中存在一定的错误率,因此新的病毒变种往往会出现。
这种突变在一定程度上为病毒的进化提供了基础,因为突变可能导致病毒对抗宿主免疫系统的方式发生变化。
突变还可以帮助病毒适应新的环境,提高其在宿主中的存活能力。
值得一提的是,病毒复制与宿主细胞的关系也是相互作用的过程。
一方面,病毒借助宿主细胞提供的生物机制来完成复制;另一方面,病毒的复制也会对宿主细胞造成不同程度的损害。
一些病毒会打乱宿主细胞的正常生理功能,导致宿主感染疾病;而其他一些病毒则与宿主细胞共生,在某种程度上对宿主有益。
最后,随着科学技术的不断进步,对病毒复制机制的研究也在不断深入。
科学家们通过各种实验手段研究病毒复制的过程,不断揭示其中的秘密。
例如,基因工程技术的发展使得科学家们可以改变病毒的基因组,进而探索病毒复制过程中的关键因素。
病毒的复制增殖过程
病毒的复制增殖过程病毒不具有能独立进行代谢的酶系统,因此只有进入活的易感宿主细胞内,由宿主细胞提供合成病毒核酸与蛋白质的原料,如低分子量前体成分、能量、必要的酶等,病毒才能增殖。
病毒增殖的方式不是二分裂,而是自我复制。
即以病毒核酸为模板,在DNA多聚酶或RNA多聚酶及其他必要因素作用下,合成子代病毒的核酸和蛋白质,装配成完整病毒颗粒并释放至细胞外。
病毒复制(replication)一般可分为吸附、穿入、脱壳、生物合成及装配与释放5个阶段,称为复制周期(replication c ycle)。
病毒经过复制产生大量的子代病毒,而此时,宿主细胞的生物合成则受到不同程度的抑制和破坏。
一、病毒复制周期吸附(adsorption)吸附于宿主细胞表面是病毒感染的第一步。
吸附主要是通过病毒体表面的配体蛋白与易感细胞表面特异性受体相结合。
不同细胞表面有不同受体,它决定了病毒的不同嗜组织性和感染宿主的范围,如小RNA病毒衣壳蛋白特定序列能与人及灵长类动物细胞表面脂蛋白受体结合,而腺病毒衣壳触须样纤维能与细胞表面特异性蛋白相结合。
有包膜病毒多通过表面糖蛋白结构与细胞受体结合,如流感病毒HA糖蛋白与细胞表面受体唾液酸结合发生吸附;人类免疫缺陷病病毒(HIV)包膜糖蛋白gp120的受体是人Th细胞表面CD4分子;EB病毒则能与B细胞CD21受体结合。
无受体细胞不能吸附病毒,也不能发生感染。
细胞含受体数不尽相同,最敏感细胞可含10万个受体。
吸附过程可在几分钟到几十分钟内完成。
穿入(penetration)病毒与细胞表面结合后,可通过胞饮、融合、直接穿入等方式进入细胞。
胞饮类似吞噬泡,细胞内陷将病毒包进细胞浆内,无包膜病毒多以胞饮形式进入易感染动物细胞内。
融合是指病毒包膜与细胞膜融合,包括病毒融合蛋白与细胞第二受体的作用,如HIV 与CCR5的结合。
融合后再将病毒的核衣壳释放至细胞浆内。
还有少数无包膜病毒在吸附时某些蛋白衣壳的多肽成分发生改变,从而可直接穿过细胞膜。
DNA复制基础知识
讲解:XX
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(4) 末端长度可变
A typical telomere has a simple repeating structure
with a G-T-rich strand that extends beyond the C-
A-rich strand. The G-tail is generated by a limited
在复制启动位点具起始点(origin),在复制终止位点 具终点(terminus)。起始点仅作用于所在复制子。
注:在每个细胞周期中,每个复制子发生一次复 制,且只发生一次。
2021/3/10
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2.2 不同生物复制子的数目
质粒一般是一个自主环状的DNA基因组, 构成一个独立复制子;
原核生物基因组中一般只含一个复制 子,在唯一的起始点启动就会引起整 个基因组复制;
xxxx662121dnadna中发生一次复制的单位称为复制子中发生一次复制的单位称为复制子repliconreplicon复制子是根据它含有复制所需的控制元件来定义的复制子是根据它含有复制所需的控制元件来定义的在复制启动位点具在复制启动位点具起始点起始点originorigin在复制终止位点在复制终止位点具具终点终点terminusterminus
2021/3/10
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2 复制子(replicon)
2.1 复制子的定义 2.2 不同生物复制子的数目 2.3 复制眼概念 2.4 复制叉概念及其移动方向的实验确定 2.5 复制的模式---起点、方向和速度
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2.1 复制子的定义
DNA中发生一次复制的单位称为复制子(replicon) 。 复制子是根据它含有复制所需的控制元件来定义的,
《DNA复制》PPT课件
了解内容:
①基因组复制与细胞分裂的关系;②复制叉移动方向
的确定;真核生物DNA聚合酶的种类及各自的功能;
③DNA复制的调控。
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3
1 引言---基因组复制与细胞分裂的关系
细胞在每次分裂的过程中,整个基因组都必 须精确地复制一次。
如何保证这一点?两个原则 (1) DNA复制的启动决定了细胞的进一步分裂; (2) 复制过程完成前,细胞是不会发生分裂的。
解旋酶(helicase): 使DNA的两条链分开,它通常利 用ATP水解来提供必需的能量;
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拓扑异构酶 (DNA Topisomerase )
拓扑异构酶的种类分为Ⅰ型和Ⅱ型。 原核拓扑构酶Ⅰ:
MW=100kD,单肽链,含3~4个Zn。 作用是暂时切断一条DNA链,形成酶-DNA共 价中间物而使超螺旋DNA松弛,然后再将切断的 单链DNA连接起来。每次改变一个连环数。
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2 复制子(replicon)
2.1 复制子的定义 2.2 不同生物复制子的数目 2.3 复制眼概念 2.4 复制叉概念及其移动方向的实验确定 2.5 复制的模式---起点、方向和速度
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2.1 复制子的定义
DNA中发生一次复制的单位称为复制子(replicon) 。 复制子是根据它含有复制所需的控制元件来定义的,
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4.1 大肠杆菌DNA聚合酶的种类及其功能
SOS 修复
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4.1.1 大肠杆菌DNA聚合酶 I、II、 III 的性质比较
性质 3`→5`外切
聚合酶 I +
聚合酶 II
病毒学课件-病毒的复制
雙股DNA病毒
複製
病毒DNA
子代病毒DNA
宿主細胞 轉錄酶
晚期mRNA
早期mRNA
病毒結構蛋白
早期蛋白(酶等)
子代病毒子
單鏈正股RNA病毒
親代病毒(+)ssRNA
(1) 膜融合後進入
(2) 病毒胞飲
二、脫殼(uncoating)
不同病毒脫殼方式不一,多數在宿主細胞溶酶體酶 作用下脫殼,釋放出基因組核酸。
三、生物合成(biosynthesis)
• 病毒基因組一旦從衣殼中釋放後,就利用宿主細胞提 供的低分子物質合成大量的病毒核酸和結構蛋白。
• 早期,病毒複製合成所必需的複製酶和一些抑制蛋白 • 生物合成階段,病毒處於隱蔽期 • 根據病毒基因組如何轉錄成mRNA、如何指令合成蛋
第二章 病毒的複製
• 病毒在活細胞內,以其基因為範本,在酶的作用下,分 別合成病毒基因及蛋白質,再組裝成完整的病毒顆粒, 這種方式稱為複製(replication)。
• 從病毒進入宿主細胞開始,經過基因組複製和病毒蛋白 合成,至釋放出子代病毒的全過程,稱為一個複製週期。
• 病毒的複製週期主要包括吸附和穿入、脫殼、生物合成、 組裝和釋放四個連續步驟。
早期蛋白
(-) ssRNA
(+)ssRNA
dsRNA複製中間型
(-) ssRNA
(+)ssRNA
大量子代(+)ssRNA
晚期蛋白 裝配子代病毒
單股負股RNA病毒
病毒自身攜帶依賴RNA的RNA多聚酶。 親代(-ssRNA) 多聚酶 (+)mRNA
(完整word)病毒的复制过程
病毒的复制过程病毒增殖的方式—-- 自我复制 ( self replication)当病毒进入活细胞后便发挥其生物活性.由于病毒缺少完整的酶系统,不具有合成自身成份的原料和能量,也没有核糖体,因此决定了它的专性寄生性,必须侵入易感的宿主细胞,依靠宿主细胞的酶系统、原料和能量复制病毒的核酸,借助宿主细胞的核糖体翻译病毒的蛋白质。
病毒这种增殖的方式叫做“复制(Replication)”。
病毒复制的过程分为吸附、穿入、脱壳、生物合成及装配释放五个步骤,又称复制周期(Replication cycle)。
一、复制周期:(一)吸附(adsorption):病毒表面接触蛋白——-—细胞表面受体吸附(Adsorption)是指病毒附着于敏感细胞的表面,它是感染的起始期。
细胞与病毒相互作用最初是偶然碰撞和静电作用,这是可逆的联结。
随后的特异性吸附是非常重要的,根据这一点可确定许多病毒的宿主范围,不吸附就不能引起感染。
脊髓灰质炎病毒的细胞表面受体是免疫球蛋白超家族,在非灵长类细胞上没有发现此受体,而猴肾细胞、 Hela细胞和人二倍体纤维母细胞上有它的受体,故脊髓来质炎病毒能感染人体鼻、咽、肠和脊髓前角细胞,引起脊髓灰质炎(小儿麻痹)。
水磨石病毒的细胞表面受体是含唾液酸(N-乙酰神经氨酸)的糖蛋白,它与流感病毒表面的血凝素剌突(受体连结蛋白)有特殊的亲和力,如用神经氨酸酶破坏该受体,则流感病毒不再吸附这种细胞.此外,HIV受体为CD4;鼻病毒的受体为细胞粘附分子-1(1CAM—1);EB病毒的受体为补体受体—2(CR—2)。
病毒吸附也受离子强度、pH、温度等环境条件的影响。
研究病毒的吸附过程对了解受体组成、功能、致病机理以及探讨抗病毒治疗有重要意义。
(二)穿入(penetration):膜融合;病毒胞饮等穿入(Penetration)是指病毒核酸或感染性核衣壳穿过细胞进入胞浆,开始病毒感染的细胞内期。
主要有三种方式:(1)融合(Fusion),在细胞膜表面病毒囊膜与细胞膜融合,病毒的核衣壳进入胞浆。
《现代分子生物学》第四章 1 DNA 复制
参与复制的DNA分子上 有两个区域,未复制的 区域由亲代DNA组成, 已复制的区域由两条子 代链组成。复制正在发 生的位点叫做复制叉 (replication fork)或 生长点(growing point)。
Origins can be mapped by autoradiography and electrophoresis Replicated DNA is seen as a replication eye flanked by nonreplicated DNA.
二、DNA聚合酶(包括DNA复制酶及参与复
制的附属反应或损伤DNA的修复合成)
1 大肠杆菌的DNA聚合酶 大肠杆菌中发现了三种DNA聚合酶:DNA聚合 酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ。 DNA聚合酶Ⅰ参与损伤DNA的修复,并在半保 留复制中起切除RNA引物的作用。 DNA聚合酶Ⅱ也参与修复。 DNA聚合酶Ⅲ是一个多亚基的蛋白质,是合成 DNA新链的主要复制酶。
Semi-conservative mechanism
15N
labeled DNA
15N
labeling experiment
1. 2. 3. 4.
15N
labeling: grow cells in ?? Collect DNA: grow cells in ?? Separation: method ?? Result interpretation
第四章
DNA 复制
DNA的复制(replication)是指以原来的DNA分 子为模板合成出相同的DNA分子的过程。
遗传信息通过亲代DNA分子的复制传递给子代。 DNA复制在保持生物物种遗传的稳定性方面起 着重要的作用。
病毒的复制
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Viral Nucleic Acid & Protein
Nucleic acid---nucleus or cytoplasm Protein synthesis---- cytoplasm
20
Biosynthesis***
the production of
early mRNA & early proteins
Medical Microbiology
1
Viral Replication 病毒的复制
2
Basic Steps of Replicative Cycle 病毒的复制周期的基本步骤
Adsorption吸附 Penetration穿入
(Virus enters the cell)
Uncoating脱壳 Biosynthesis生物合成 Assembly & Release装配及释放
Genom replication
26
Reference book
医学微生物学学习指南 分子病毒学
27
谢家 谢和 各老 位师 专!
28
dsDNA virus
dsDNA
Progeny DNA early mRNA early protein
late mRNA
late protein
Progeny virus
herpesvirus
29
30
(+) Single-stranded RNA viruses
to serve as a messenger RNA to serve as a template for the synthesis of a complementary (-) strand RNA -- make more (+) RNA strands
第四章DNAreplication
R1与R3 部分正向重复 R1: TGTGGATAA R3: TTTGGATAA
R2与R4部分正向重复 R2: TTATACACA R4: TTATCCACA
R1, R2, R3, R4构成了E.coli. 的复制酶识别因子 的识别位点,为E.c第o四章liD.NA的repl复icatio制n 不可缺少。
1)E.coli. 的复制原点 ori C
ori C 245bp
特点: A T的含量高; 存在9-14个GATC 位点,其中A的甲基化非常重要; 识别位点R1, R2, R3, R4高度保守, A T的含量更高。
R1 R2 R3 R4
3个13聚体
4个9聚体形成的识别位点
每个9聚体含9 个bp
第四章DNAreplication
识别因子 引发酶
螺旋酶
第四章DNAreplication
5)SV40病毒的ori
T抗原是识别因子
回文序列 反向重复序列 AT富含序列
Site 1
Site 2
回文序列(功能不知)
Site 2 反向重复序列(其中GAGGC是T抗原的识别位点)
AT富含序列(解链的位点)
T抗原只结合Site 2, 起始40-50%的复制能力; T抗原结合Site 2和Site 1 , 起始100%的复制能力。
SEQ20(
A.SK)
微生物种类的名称
T7噬菌体的ori
包括Gene 1.1的2个启动子 61bp的AT富含序列
Gene 1.1
微生物经济节约的特点又一体现
第四章DNAreplication
4)P4噬菌体的ori
P4噬菌体是温和型噬菌体(temperate phage)
ori包括6个重复的TGTTCACC
病毒复制(医药参考)
医药参考
24
Class I: Double-stranded DNA
• 痘病毒科,虹彩病毒科 • 疱疹病毒科,多瘤病毒科,腺病毒科,
乳头状病毒科,T4噬菌体等
医药参考
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病毒DNA
复 制
子代DNA
转录 (核内)
细胞的依赖 DNA的RNA
多聚酶
早期mRNA
翻译
(细质)
早期蛋白:DNA多 聚酶和调节蛋白
医药参考
7
分节段的ss-RNA
NA
M1
M2
HA
1 2 34 5 6 7 8
PB2 PB1 PA RNA
RNA多聚酶
医药参考
NP
核糖核蛋白即RNA+NP(RNP)
8
流感病毒的表面结构
• 血凝素(HA)
柱状,为三聚体,它基本上以 相同的间距覆盖了病毒的全部 表面
• 神经氨酸酶(NA)
四个亚单位组成的四聚体,并 不平均分布在病毒表面,而是 聚合成群。
(1)溶酶体酶直接裂解经过膜融合后进入的衣壳; (2)溶酶体酶也可注入吞噬空泡内,将衣壳裂解
医药参考
21
四、生物合成(biosynthesis)
病毒复制
吸附
Attachment or Adsorption
* 吸附:是病毒体感染并侵入细胞的第一步,是病毒体表面蛋 白与细胞表面受体识别、特异结合的过程。
viruses
susceptible cells
surface protein
receptor
吸附
Attachment or Adsorption
裸露病毒体通过衣壳蛋白吸附细胞;包膜病毒体通过胞膜糖蛋白 吸附细胞
双链RNA病毒的复制
Double-Stranded RNA Virus
Attachment
Capsid RNA
Host cell
Nucleus Cytoplasm
Maturation and release
Entry and uncoating
Translation and synthesis
RNA replication by viral RNA-
mRNA and – incorporated
strands form the capsid and released into as new viral genomcyet.oplasm of the host.
the Viral genome
Viral protein
(RNA)
Capsid proteins and RNAdependent RNA polymerase
主细胞不能为病毒复制提供全部必需物 质,故不能产生完整的病毒体,或产生 的病毒成分不能正常组装,这种感染称 为顿挫感染。
伪病毒颗粒 (pseudovirion) 病毒衣壳包裹一段宿主细胞的DNA形
成的病毒颗粒。
病毒的异常增殖
缺陷性干扰颗粒(defective interfering particles,DIP)
动物病毒学课件第四章:病毒的复制
➢ 噬菌体的侵入方式 ✓ 无囊膜噬菌体—注射式侵入 有尾噬菌体:利用尾部的溶菌酶部分破坏细菌细 胞壁,尾管刺入细胞,将病毒核酸注入细胞,衣 壳留在细胞外。e.g. T偶数噬菌体:T2、T4
三、脱壳(Uncoating)
具有特异性:受细胞表面的特定受体和病毒 的吸附蛋白决定
• 解吸的病毒不再具备感染性(正粘病毒和副粘
病毒除外)
并非所有的病毒都有这2个阶段
• 吸附蛋白(virus attachment protein, VAP):
病毒表面能识别特异细胞受体的结构蛋 白。主要是壳体蛋白或包膜糖蛋白
– 有包膜的动物病毒:流感病毒的HA、副粘病 毒的HN糖蛋白、弹状病毒的C糖蛋白
病毒的复制周期(replicative cycle):病毒复制 的整个过程,自病毒吸附于细胞开始,到子代病 毒从受染细胞释放出来为止的病毒增殖全过程。
动物病毒的复制周期分为5个主要阶段:
➢吸附(Adsorption/Attachment) ➢侵入(Penetration) ➢脱壳(Uncoating) ➢病毒成分的合成(Synthesis of
✓将细胞培养温度由37℃降至32℃甚至30℃, 可隔15-30天传代一次。
长 途 ✓ 取刚刚长成单层的细胞培养物,弃去营养液,加
运 送 入维持液至满瓶(勿使培养瓶内存留空气),随
细 胞 后用橡皮塞紧塞瓶口,并作适当的包扎。
培养 物的
✓ 运输途中的温度应保持在15-25℃左右。
保存 ✓ 到达目的地后,置37℃培养1天,再行传代。
– 无包膜的动物病毒:脊髓灰质炎病毒衣壳蛋 白上的VP1多肽
病毒的复制、增殖
双股DNA病毒 单股DNA病毒 单正股RNA病毒 单负股RNA病毒 逆转录病毒 双股RNA病毒
( dsDNA V ) ( ssDNA V ) ( +ssRNA V ) ( -ssRNA V ) ( 逆转+ssRNA V ) ( dssRNA V)
3.生物合成 biosynthesis
通过病毒基因组表达与复制来完成的,包括蛋白 质的合成与核酸的复制, 此阶段无完整病毒可见, 也不能用血清学检测出病毒的抗原,称为隐蔽期 发生在病毒核酸复制之前的转录称为早期转录, 产物为早期mRNA,翻译出早期蛋白;发生在病 毒核酸复制开始或之后的转录称为晚期转录, 产 物为晚期mRNA,翻译出晚期蛋白.
Host cell DNA
RNase H
DNA
Reserse transcriptase
DNA DNA
Viral proteins and glycoproteins
Diagram of retrovirus New virus particles
完整的病毒为一个感染单位又称毒粒 病毒在细胞外环境中不起作用,它们只能 在活的易感细胞内增殖,属基因水平的寄 生物。 病毒进入细胞内,以病毒核酸编码信息指 令感染细胞合成病毒特异性大分子,最终 产生子代病毒。
病 毒 的 基因结 构
由于病毒的基因结构不同,不同病毒感染 易感细胞后其结构不同,即细胞损伤或死 亡、细胞无损或共存 从单细胞的微生物到动、植物均可被病毒 感染,这些病毒的基因组千差万别,但仍 有共同点(如遗传密码) 病毒与宿主关系的许多信息从研究噬菌体 获得
replication
Retrovirus: HIV
(1)逆转录酶; (2)复制中间体(replicative intermediate, RI); +RNA—DNA
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
T4侵入以后的事件
Chapter 4: Replication
• 病毒大分子的生物合成包括核酸复制与病毒蛋 白质合成两部分
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
T4基因组
Chapter 4: Replication
不同类型病毒的转录
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Class I: Double-stranded DNA
Chapter 4: Replication
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INTRODUC Herpesvirus Gene -TION TO VIROLOGY
INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4 Replication
Chapter 4: Replication
The Replication Cycle
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
Influenza Virus Attachment Protein
• layers of waxes & pectin and each cell is surrounded by a thick wall of cellulose overlying the cytoplasmic membrane. No plant virus is known to use a specific cellular receptor of the type that animal & bacterial viruses use for attachment. Plant viruses rely on a breach of the integrity of a cell wall to directly introduce a virus particle into a cell. This is achieved either by the vector associated with transmission of the virus or simply by mechanical damage to cells. After replication in an initial cell, the lack of receptors poses special problems for plant viruses in recruiting new cells to the infection.
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
副粘病毒包膜糖蛋白
Chapter 4: Replication
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
流 感 病 毒 包 膜 蛋 白
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
T7 复 制
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
T7 复 制
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
ФX174复制
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
ФX174滚环复制
A蛋白
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Chapter 4: Replication
Tφ
T7 噬 菌 体 的 基 因 组
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INTRODUC RNA -TION TO 噬菌体 VIROLOGY
Chapter 4: Replication
MS2
翻 译
复 制
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Schematic representation of some virus receptors - arrows indicate virus attachment site:
Chapter 4: Replication
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapteplication
Expression
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
Herpesvirus Gene Expression
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
Translocation
3) Translocation of the entire virus particle across the cytoplasmic membrane of the cell. • This process is relatively rare among viruses & is poorly understood.
intracellular vacuoles is probably the most common mechanism of virus entry into cells. • Fusion does not require any specific virus proteins (other than those already utilized for receptor binding) but relies on the normal formation & internalization of coated pits at the cell membrane. • Receptor-mediated endocytosis is an efficient process for taking up & concentrating extracellular macromolecules.
Expression of Adenovirus E1A
Chapter 4: Replication
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
Adenovirus E1A
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
tL tR1
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
Gene Expression in λ
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
λ滚环复制
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
Genetic Map of
λ
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
A Simplified Genetic Map of λ
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Poliovirus Receptor Binding
Chapter 4: Replication
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INTRODUC Virus Receptors -TION TO Many examples of virus receptors are now VIROLOGY known.
Chapter 4: Replication
腺 病 毒 复 制
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INTRODUC Adenovirus Gene -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
Expression
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
进 入 动 物 细 胞
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INTRODUC -TION TO VIROLOGY
Chapter 4: Replication
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Endocytosis
INTRODUC Endocytosis -TION TO VIROLOGY of the virus into 2) Endocytosis
dPft/dt=K·ft· , P B
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INTRODUC Plant Viruses • -TION TO face special problems initiating an infection. Plant viruses Plant Viruses • The outer surfaces of plants are composed of protective VIROLOGY