高效液相色谱_电化学检测法测定生_省略_样品中单胺类神经递质及其代谢产物_杨佳凤
快速、灵敏检测生物样本中单胺类递质及其代谢产物的方法――反相色谱-电化学检测分析法
ｎ代表被测物质单个分子的电子得失数， 是法拉 Ｆ
弟常数，Ｖ 表 示溶液通过电极表面时速率的乘方 ａ 数，Ｃ 表示浓度。在相同色谱条件且流量 恒 定 ｂ 时，对任一被测物质来说，Ｋ ｎＦ和Ｖ 都是恒量， 、 ａ 因而Ｉ ＢＣ，即所测量的电流正比于检测池中被 Ｌ ｂ
测化合物 的浓度 ５。ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
三、分析时应注意的几个问题
实验与技术
快速、灵敏检测生物样本中单胺类递质及其代谢
产物的方法— 反相色谱－ 化学检测分析法 电
叶惟泠
中国科学院上海生理研究所， ００１ ２０３） 单胺类神经递质，多巴胺 （ ） ＤＡ 、去甲肾上腺 素（ ）肾上腺素（） － ＮＡ 、 Ａ 和５羟色胺（－ ）是哺乳 ５ＨＴ 动物和人类中枢重要的信息传递物质。检测脑和体 液中微量的单胺递质及其代谢产物对研究这类递质 的生理功能，与递质代谢异常有关的疾病的诊断和 药物及手术疗效的鉴定都有重要意 义。自 １７ ９３年 Ｒｉ ｉ ｅ ｓｎ ｒ１等用高效液相色谱 （ Ｌ ）电化学 ｓｇ ＨＰ Ｃ － 检测法（ Ｃ 分析了儿茶酚胺 Ｃ ， Ｅ Ａ 包括ＤＡ ＮＡ和 、 Ａ 以来，由于高灵敏电化学检测器与高效反相 色 表１罗列了近十年来成功地测定了生物样 本 中这 类化合物的范例。由于令人满意地解决了 同时 分 离、检测这一系列化合物的方法，因而不仅能测出 递质的更新率，还可通过分析单位时间内底物降解
用Ｅ Ｃ分析时，流动相中必须有电解质存在， 以提供合适的离子电导率和传送电荷，通常离子强 度维持在０ １ ． ｏ／ ． —０ ｍ ｌ ０ １ Ｌ水平〔 １ ２，合适的离子强 度应大 于 ０ ５ ｌ ４；其次它必须在电极表面 ． ｍｏ／ ０ Ｌ 呈电化学惰性，即低的背景电流 ２１ ， ２。常用的磷 酸缓冲液、醋酸缓冲液等都适用于这类化 合 物 的
超高效液相色谱_电喷雾电离串联质_省略_用法检测茶叶中阿维菌素类药物残留_杨方
2009年3月M a r c h 2009色谱C h i n e s e J o u r n a l o f C h r o m a t o g r a p h yV o l .27N o .2153～157＊通讯联系人:杨 方,硕士,主任技师.T e l :(0591)87065542,E -ma i l :y f f j c i q @g m a i l .c o m.基金项目:国家“十一五”科技支撑计划项目(N o .2006B A K 02A 08).收稿日期:2008-09-03超高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱联用法检测茶叶中阿维菌素类药物残留杨 方1＊, 杨守深2, 林永辉1, 郑丹萍2, 卢声宇1, 黄志强3, 张 莹3(1.福建出入境检验检疫局,福建福州350001;2.福建农林大学,福建福州350003;3.湖南出入境检验检疫局,湖南长沙410007)摘要:建立了采用超高效液相色谱-电喷雾电离串联质谱同时检测茶叶中爱比菌素、甲胺基阿维菌素、乙酰胺基阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素、莫西丁克残留的方法。
试样经饱和氯化钠溶液浸润后,用乙腈提取,C 18固相萃取小柱净化,超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法(U P L C/E S I -M S /M S )测定。
对流动相、监测离子、校正曲线等进行了优化和探讨。
6种分析物在2.0～50μg /L 范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9920。
莫西丁克在5,10,20μg /k g ,其余分析物在2,5,10μg /k g 加标水平的平均回收率为61.7%～85.4%,相对标准偏差为9.37%～17.19%。
该方法可靠、稳定,可满足茶叶中阿维菌素类药物残留检测与确证的需要。
关键词:超高效液相色谱-质谱联用法;阿维菌素类药物残留;茶叶中图分类号:O 658 文献标识码:A 文章编号:1000-8713(2009)02-0153-05 栏目类别:研究论文D e t e r m i n a t i o no f a v e r m e c t i nr e s i d u e s i nt e a b yu l t r a -p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y -e l e c t r o s p r a y t a n d e m m a s s s p e c t r o m e t r yY A N GF a n g 1＊,Y A N GS h o u s h e n 2,L I N Y o n g h u i 1,Z H E N GD a n p i n g 2,L US h e n g y u 1,H U A N G Z h i q i a n g 3,Z H A N GY i n g3(1.F u j i a nE n t r y -E x i t I n s p e c t i o na n d Q u a r a n t i n e B u r e a u ,F u z h o u 350001,C h i n a ;2.F u j i a nA g r i c u l t u r ea n dF o r e s t r y U n i v e r s i t y ,F u z h o u 350003,C h i n a ;3.H u n a nE n t r y -E x i t I n s p e c t i o na n d Q u a r a n t i n e B u r e a u ,C h a n g s h a 410007,C h i n a )A b s t r a c t :As i m p l e a n d r a p i d a n a l y t i c a l m e t h o d f o r t h e s i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o n o f a b a m e c -t i n ,e m a m e c t i n ,e p r i n o m e c t i n ,i v e r m e c t i n ,d o r a m e c t i n a n d m o x i d e c t i n r e s i d u e s i nt e a b y u l t r a -p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y -e l e c t r o s p r a yt a n d e m m a s s s p e c t r o m e t r y(U P L C /E S I -M S /M S )h a s b e e nd e v e l o p e d .T h ea v e r m e c t i n s w e r e e x t r a c t e df r o m t h e t e aw i t ha c e t o n i t r i l e a f t e rt h e t e aw a s i n f i l t r a t e di ns a t u r a t e da q u e o u sN a C l s o l u t i o n ,t h e nc l e a n e du pw i t haC 18s o l i d p h a s e e x t r a c t i o n c a r t r i d g e .T h e l i n e a r r a n g e s w e r e 2.0-50μg /L a n d t h e c o r r e l a t i o n c o e f f i c i e n t s w e r e a l l a b o v e 0.9920.S e v e r a l U P L C -M S /M S c o n d i t i o n s t h a t i n c l u d e dt h em o b i l e p h a s e ,m o n i t o r i o n s a n d t h e s e l e c t i o n o f c a l i b r a t i o n o f t h e m e a s u r e m e n t w e r e s t u d i e d .T h e a v -e r a g e r e c o v e r i e s a n dt h er e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n s r a n g e df r o m 61.7%t o 85.4%a n df r o m 9.37%t o 17.19%,r e s p e c t i v e l y ,i n s p i k e d s a m p l e s a t t h e c o n c e n t r a t i o n s o f 5,10,20μg /k g f o r m o x i d e c t i n a n d 2,5,10μg /k g f o r o t h e r a n a l y t e s .T h i s m e t h o d i s s u i t a b l e f o r t h e d e t e r m i n a t i o n o f a v e r m e c t i nr e s i d u e s i n t e a .K e y w o r d s :u l t r a -p e r f o r m a n c el i q u i dc h r o m a t o g r a p h y -t a n d e m m a s s s p e c t r o m e t r y (U P L C -M S /M S );a v e r m e c t i n r e s i d u e s ;t e a 阿维菌素类生物农药(a v e r m e c t i n s ,A V M s )属大环内酯类抗生素,但与一般大环内酯类抗生素不同的是阿维菌素还具有很高的杀虫活性,被誉为是近20年来抗寄生虫药物研究的重大突破。
库仑阵列电化学高效液相色谱法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质及代谢产物
图 1 N E、D O PA C、D A 、HO M V 标准色谱图; 图 2 5 HT 、5 H IA A 标准色谱图; 图 3 大鼠脑组织样本 N E、DO PA C、D A、H O M V 色谱图;
图 4 大鼠脑组织样本 5 HT 、5 H IA A 色谱图
2. 2 标准曲线 由于脑组织标本中均存在以上生 0. 1397, r 2= 0. 9998; NE: Y= 0. 113X+ 0. 5664, r 2=
ZH A N G X iang hui , LI U J un , S U L in y an ( Mental H ealth I nstitute , Xiangy a 2nd H osp ital , Centr al South Univers ity , Changsha, 410011 China )
溶液配制成不同浓度的混合标准液。用 0. 2 mo l/ L 高氯酸将内 标 DH BA 储 备液稀 释成含 DH BA 20
g/ L ( 并含焦亚硫酸钠 0. 04% 和乙二胺四乙酸二钠 0. 04% ) 的溶液做为蛋白沉淀剂的工作液[ 1] 。 1. 5 组 织样本制备 90~ 100 g WKY 种雄 性大 鼠, 断头后迅速取脑皮质立即置液氮中深冻, 固化后 精确称重, 每 100 m g 脑组织加 1 m l 预冷的工作内 标液, 于冰浴下快速玻璃匀浆, 4 & 条件下 14 000 ∀ g 低温离心 15 m in, 取上清液用 0. 22 m 针头过滤器 过滤, 滤液作为待测样品进样。 1. 6 伏安曲线 取以下待测物质每种含 100 g/ L 的标 准液, 设置 电势为: 0、50、100、150、250、300、 350、400、450、550、600 mv, 进样 20 l, 记录峰面积。 峰面积为 Y 轴, 电势为 X 轴, 作连线图。根据伏安 曲线设置 4 道电势为: - 50、100、300、500 mv。 1. 7 统计学处理 以 M illenium32 软件采集并处 理原始数据, 以 Ex cel 软件做统计学数据处理。
高效液相色谱同时检测生物样本中8种单胺类神经递质
分析化学 ( FENX I HUAXUE) 研究报告
第 3期
2009年 3月
Chinese Journal of Analytical Chem istry
330 8种单胺类神经递质
赵焕英 1, 2 段春礼 1 范春香 1 刘 琦 1 张 韬 1 杨 慧 3 1
将标准品定量混合并用标准品溶液稀释得到一浓度系列 ,取 20 μL 进样 ,对上述系列浓度各测定 3 次后 ,取其峰面积的平均值 ,以浓度 Y对峰面积 X 回归 ,各种物质的线性范围如表 1,相关系数都在 01994～0. 999之间 。当 S /N = 3时 , 检出限达 pmol/L 水平 。取混合标样 ,在含 8%甲醇流动相下 ,以 014 mL /m in固定流速连续进样 6 次 , 保留时间 RSD 为 0. 24% ～0. 68% ; 峰面积 RSD 为 0. 08% ～ 0143% ,重现性好 。将处理后的 1 份样品分成 5 份 ,其中 1 份作本底量 ,另外 4 份分别添加已知量的 8种标准液 。分别测出 8种物质在各样品中的含量 ,再根据检测本底量计算出 8种物质的回收率及标 准偏差 。
将动物快速断头 ,取脑 ,置于冰上剥离所要组织部位 ;称重后加入组织裂解液 ( 0. 01% L 2半胱氨酸 , 0. 2 mmol/L HC lO4 , 0. 5 mmol/L Na2 EDTA ) ,置 1. 5 mL 离心管中充分匀浆 ,然后再超生破碎两次 ,离心
2008208226收稿 ; 2008210208接受 本文系国家重点基础研究发展计划 (973 No. 2006CB500706) 、国家自然基金项目 (No. 30670655)和北京市教育委员会科技发展计划 面上项目 ( KM200610025002) 3 E2mail: zhaohy75@ sina. com
高效液相色谱-电化学法_概述及解释说明
高效液相色谱-电化学法概述及解释说明1. 引言1.1 概述高效液相色谱-电化学法（简称HPLC-EC）是一种常用的分析技术，利用高效液相色谱技术和电化学检测原理相结合，实现对样品中化合物的分离和定量分析。
此方法具有灵敏度高、选择性好、重复性好等优点，因而在环境科学、生物医药和食品安全等领域得到广泛应用。
1.2 文章结构本文共分五个部分进行阐述。
引言部分是对整篇文章的概述，介绍了HPLC-EC 技术的背景和研究意义。
第二部分将对HPLC技术和电化学法以及它们之间的结合进行简要介绍。
接下来一节将详细讨论HPLC-EC的实验原理与分析过程。
第四部分将探讨HPLC-EC在环境污染物、生物医药和食品安全领域中的应用案例。
最后一节是总结与展望，回顾整篇文章所提到的内容，并展望该技术在未来发展中可能取得的进展。
1.3 目的本文旨在全面介绍高效液相色谱-电化学法的相关知识，深入探讨其原理及其在环境科学、生物医药和食品安全领域的应用。
通过文章阐述，读者可以对HPLC-EC技术有一个全面的了解，并且了解到该技术在不同领域的实际应用和发展趋势。
2. 高效液相色谱-电化学法概述：2.1 高效液相色谱技术简介高效液相色谱(HPLC)是一种广泛应用于分析化学领域的分离技术。
它基于物质在溶剂流动下通过固定相的不同速率进行分离，可用于分析和检测各种化合物。
HPLC技术具有分离效果好、选择性强、重复性好等特点，因此被广泛应用于环境、生物医药和食品安全等领域的样品分析中。
2.2 电化学法简介电化学法是利用电极与溶液中存在的化学反应产生的电流或电势来检测或测定物质的一种方法。
根据所使用的电极类型和测量参数，常见的电化学方法包括极谱法、电化学滴定法、恒定电位法等。
这些方法可以实现对不同种类和浓度范围内的物质进行快速准确的检测和分析。
2.3 结合应用优势高效液相色谱-电化学法(HPLC-EC)是将HPLC技术与电化学方法相结合而形成的一种分析技术。
高效液相色谱_电化学法测定大鼠血液和脑组织中单胺类物质的含量
第25卷第2期2006年3月 分析测试学报FENXI CESH I X UEBAO(J ournal of Ins tru m en talAnal ys i s)V ol 25No 290~92高效液相色谱/电化学法测定大鼠血液和脑组织中单胺类物质的含量谭炳炎1,郑 琳1,冯 翔2(1.中山大学 公共卫生学院 中心实验室,广东 广州 510080;2.中山大学 公共卫生学院 营养学系,广东 广州 510080)摘 要:建立了高效液相色谱/电化学检测法测定大鼠脑组织和血液中单胺递质及其代谢产物的方法。
能同时测定去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、3,4-二羟基苯乙酸(DO PAC)、多巴胺(DA)、高香草酸(HAV)、5-羟色胺(5-HT),并能和内标3,4-二羟卞胺(DHBA)分离良好。
本方法快速、简便,回收率为92%~105%,线性范围2 8~680ng/mL,检出限为0 05ng(S/N=3)。
本方法已应用在服用中药的大鼠下丘脑组织及血液的测定中,数据显示,本法能满足测定要求。
关键词:高效液相色谱;电化学检测;单胺类神经递质中图分类号:O657 1 文献标识码:A 文章编号:1004-4957(2006)02-0090-03D eter m i nati on o fM onoa m i ne T rans m itters i n R at Blood and Brai n T issues byH i gh Perf or m ance L i qu i d Chro m atographyTAN B ing-yan1,Z H E NG Lin1,FE NG X iang2(1.Central L aboratory,Schoo l o f Pub lic H ealth,Sun Y at-sen U n i versity,G uangzhou 510089,China;2.D epart m ent o fNutritiona l Sc i ences,School o f Publi c H ea lth,Sun Y a t-sen U n i versity,G uangzhou 510089,Ch i na) Abstrac:t A m ethod was developed to deter m i n e m onoa m ine trans m itters and their m etabo lites in rat blood and brain tissues by h i g h perfor m ance li q u i d chro m atog raphy w ith electroche m i c al detection.No r-ep i n ephri n e(NE),ep i n rphri n e(E),3,4-d i h ydr oxypheny lacetic acid(DOPAC),dopa m ine hydrochlo-ride(DA),ho m ovan illi c ac i d(HVA),and5-hydr oxytrypta m i n e(5-HT)cou l d be deter m i n ed si m ulta-neously and disti n ctly separated fro m i n ter nal standar d(3,4-dihydroxybenzyla m ine,D H BA)by th is m ethod.The recoveries of these co mpounds w ere bet w een92%and105%and the li n ear range w as2 8-680ng/m L.The detecti o n li m itw as0 05ng(S/N=3).This m ethod was app lied to deter m i n i n gt h e m onoa m i n es i n hypothala mus tissues of rats upon taking traditional Ch i n ese m ed ici n e,and satisfac-to r y resu lts w ere achieved.Key words:H i g h perfor m ance li q u i d chr o m atography;E lectroche m i c al detecti o n;M onoa m ines单胺类神经递质包括去甲肾上腺素(NE),肾上腺素(E),多巴胺(DA),5-羟色胺(5-HT)等物质。
高效液相色谱-电化学法测定大鼠不同脑区的单胺类神经递质
高效液相色谱-电化学法测定大鼠不同脑区的单胺类神经递质王娜;吴红海;侯艳宁【期刊名称】《解放军医药杂志》【年(卷),期】2006(018)003【摘要】目的:建立同时测定大鼠脑组织中单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD).方法:采用Diamonsil C18柱,以Na2HP04-枸橼酸-EDTA-庚烷磺酸钠-甲醇-水(80:40:2:7:32:89)为流动相,流速:1.2 ml/min.大鼠脑组织样品经高氯酸沉淀除去蛋白后,电化学检测脑内NE、DA和5-HT的含量.结果:脑组织中NE、5-HT的线性范围为0.50～10.00 ng,DA的线性范围为0.25～30.00ng.脑组织样品的相对回收率为91.7%～110.2%,日内、日间变异均小于15%.经初步研究,正常雄性SD大鼠不同脑区内NE、DA和5-HT的含量分别为伏隔核(508±203)、(3140±486)、(601±105)ng/g,腹侧被盖区(695±152)、(746±143)、(1049±222)ng/g,下丘脑(2032±351)、(332±236)、(847±218)ng/g,纹状体(790±205)、(5816±805)、(538±112)ng/g.结论:该方法具有准确、灵敏、样品制备简便等优点,可用于大鼠部分脑区内单胺类神经递质的分离测定.【总页数】4页(P162-165)【作者】王娜;吴红海;侯艳宁【作者单位】解放军白求恩国际和平医院药剂科,石家庄,050082;河北医科大学,石家庄,050017;解放军白求恩国际和平医院药剂科,石家庄,050082;解放军白求恩国际和平医院药剂科,石家庄,050082【正文语种】中文【中图分类】R446.8【相关文献】1.荧光分光光度法测定大鼠不同脑区单胺类神经递质 [J], 张燕;王洪斌;杨海霞;陈清;赵丽2.库仑阵列电化学高效液相色谱法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质及代谢产物[J], 张向晖;刘军;苏林雁3.荧光法测定SD大白鼠不同脑区的单胺类神经递质 [J], 汪丛莹;庞志功;汪宝琪;张鹏4.高效液相色谱-荧光检测法同时测定大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质 [J], 赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;白洁;杜光玲;高茜5.高效液相色谱-质谱法测定大鼠不同脑区的硫酸酯型神经甾体 [J], 任进民;侯艳宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
新型液相色谱—电化学检测技术的研究及其在脑神经科学中的应用
新型液相色谱—电化学检测技术的研究及其在脑神经科学中的应用新型液相色谱-电化学检测技术是一种结合了液相色谱技术和电化学检测技术的分析方法。
它采用液相色谱将样品分离，再利用电化学检测方法分析各个组分的浓度和性质。
这种技术在脑神经科学研究中有着广泛的应用，可以用于研究神经递质的释放、药物的代谢以及神经疾病的诊断等方面。
新型液相色谱-电化学检测技术的研究主要包括两个方面：分析方法的开发和仪器的改进。
在分析方法的开发方面，研究人员致力于寻找新的电化学检测方法，以提高检测的灵敏度和选择性。
例如，常用的电化学检测方法包括电化学检测器、电化学细胞等。
在仪器的改进方面，研究人员致力于设计新的仪器，采用新的材料和技术，以提高仪器的性能和稳定性。
例如，研究人员可以使用微流控技术制备微型分析系统，以实现快速、高通量的分析。
1.研究神经递质的释放：神经递质是神经元之间的化学信号传递物质，研究神经递质的释放对于理解神经传导的机制非常重要。
新型液相色谱-电化学检测技术可以实现对神经递质的高灵敏度、实时监测，从而研究神经递质的释放动力学过程。
2.研究药物的代谢：药物的代谢是了解药物在体内转化过程的重要方法。
新型液相色谱-电化学检测技术可以实现对药物及其代谢产物的分离和检测。
通过研究药物的代谢，可以了解药物在体内的药效、药理学和毒理学特性。
3.神经疾病的诊断：新型液相色谱-电化学检测技术可以用于检测神经疾病相关的生物标志物。
例如，在帕金森病的研究中，可以通过检测脑内多巴胺的浓度来诊断疾病。
通过研究这些生物标志物的变化，可以诊断神经疾病，并进行有效的治疗。
总之，新型液相色谱-电化学检测技术在脑神经科学研究中发挥重要作用。
它能够提供高灵敏度、高选择性的分析方法，用于研究神经递质的释放、药物的代谢以及神经疾病的诊断等方面。
随着新型液相色谱-电化学检测技术的不断发展，相信它将在脑神经科学研究中发挥更加重要的作用，为我们揭示大脑的奥秘提供更多的突破口。
高效液相色谱-电化学法检测蜜蜂脑部单胺类神经递质及其酸性代谢产物含量
高效液相色谱-电化学法检测蜜蜂脑部单胺类神经递质及其酸性代谢产物含量赵晓蒙;苏松坤【期刊名称】《福建农林大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(045)006【摘要】建立同时测定蜜蜂脑部神经物质左旋多巴( l-DOPA)、去甲肾上腺素( NE)、3,4-二羟基苯乙酸( DOPAC)、多巴胺(DA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)和5-羟色胺(5-HT)的高效液相色谱—电化学检测(HPLC-ECD)法.采用Acclaim C18色谱柱,以磷酸二氢钠、辛烷磺酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸及乙腈的混合液为流动相,流速0.2 mL•min－1,进样量10μL,柱温38℃,检测电压300 mV.蜜蜂脑组织样品经高氯酸、焦亚硫酸钠和乙二胺四乙酸混合溶液去除蛋白,再由0.22μm滤膜过滤后上样检测.结果表明：脑组织中各待测神经物质线性回归方程相关系数均大于0.997,加样回收率平均值大于90％,日内、日间精密度指数RSD 平均小于5.7％.经初步研究,意大利蜜蜂脑部l-DOPA、NE、DOPAC、DA和5-HIAA的含量分别为(0.232±0.107)、(1.288±0.630)、(2.555±1.201)、(0.574±0.233)、(0.393±0.123) ng•脑－1,中华蜜蜂脑部的对应物质含量分别为(0.331±0.162)、(0.894±0.395)、(2.819±0.974)、(0.636±0.255)、(0.353±0.163) ng•脑－1.【总页数】5页(P668-672)【作者】赵晓蒙;苏松坤【作者单位】福建农林大学蜂学学院，福建福州350002;福建农林大学蜂学学院，福建福州350002【正文语种】中文【中图分类】S891.4【相关文献】1.高效液相色谱法快速检测单胺类神经递质及其代谢产物 [J], 伦立民;于维林;宋鲁萍;初开秋;姜彩芹2.高效液相色谱-电化学检测法研究大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织中单胺类神经递质含量的影响 [J], 檀笑昕;张淑娟;刘坤;张铧尹;连靠奇;徐向东;康维钧3.高效液相色谱法快速检测单胺类神经递质及其代谢产物 [J], 伦立民;车琳杰;李世伟4.高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物 [J], 杨佳凤;李娟;杨虹;潘桂湘;高秀梅5.高效液相色谱法快速检测单胺类神经递质及其代谢产物(英文) [J], 伦立民;车琳杰;李世伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱-电喷雾式检测器测定生物质制乙酰丙酸反应中纤维素水解产物的单糖组成
高效液相色谱-电喷雾式检测器测定生物质制乙酰丙酸反应中纤维素水解产物的单糖组成刘俊彦;李继文;王川【摘要】建立了高效液相色谱-电喷雾式检测器测定生物质制乙酰丙酸反应中纤维素水解产物的单糖组成的方法.采用XBridge Amide C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,3.5 μm),以85％乙腈水溶液(含0.025％氨水)为流动相,色谱柱温70℃,流速1 mL·min-1,分析周期10 min.标样测定结果表明,各目标化合物在一定浓度范围内呈良好的线性响应,回归系数(R2)均大于0.99,最低检出限为0.001 g·L-1.实际样品的加标回收率在89.74％～107.58％之间,6次重复测定的相对标准偏差(RSD)均小于3％.该方法分析速度快,灵敏度高,分离效果好,结果准确可靠,数据精密度良好,无需进行糖类衍生化反应,为纤维素水解产物的单糖组成分析提供了一种新的简便、快速、准确的方法.%We established the determination method of monosaccharide composition in cellulose hydrolysate during the production of levulinic acid from biomass by high performance liquid chromatography(HPLC) with charged aerosol detection(CAD).Using 85％acetonitrile water solution containing 0.025 ％ ammonia as an mobile phase,an XBridge Amide C18 column(4.6 mm× 150 mm,3.5 μm) was applied for the separation coupled with CAD within 10 min,the column temperature was 70 ℃,and the flow rate was 1 mL · min-1.Determination results of standard samples showed a good linear relationship with the corresponding concentration,and the linear regression coefficients were greater than 0.99.The limit of detection of the method was 0.001 g · L-1.The adding standard recoveries of real samples were 89.74％～107.58％,and relative standard deviation(RSD) was less than 3％ for six repeatable detection.The method provides a new strategy forsimple,rapid,and accurate analysis of monosaccharide composition in cellulose hydrolysate during the production of levulinic acid from biomass with fast analysis,high sensitivity,good separation efficiency,accuracy and reliability,good precision,and no glycosyl derivatization.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2017(034)010【总页数】5页(P65-69)【关键词】高效液相色谱;电喷雾式检测器;纤维素;单糖;生物质;乙酰丙酸【作者】刘俊彦;李继文;王川【作者单位】中国石化上海石油化工研究院,上海201208;中国石化上海石油化工研究院,上海201208;中国石化上海石油化工研究院,上海201208【正文语种】中文【中图分类】O657.72随着自然资源的不断消耗，积极探寻和开发新能源体系迫在眉睫，由可再生的生物质原料生产平台化合物的探索已成为研究热点[1-2]。
高效液相色谱－电化学检测器测定富硒酵母中硒代蛋氨酸含量
高效液相色谱－电化学检测器测定富硒酵母中硒代蛋氨酸含量陈荣祥;保玉心【摘要】Objective To establish an HPLC-electrochemical detection method for the determination of selenomethionine in selenium-enriched teast. Methods The column was an Agilent Eclipse plus C18 column ( 150 mm × 3. 0 mm, 3. 5 μm ) . 100 mmol/L citrate buffer ( pH=2. 75, containing 300 mg/L1-Octanesulfonic acid sodium salt ) -methanol ( 85 : 15 ) was used as the mobile phase and the detection voltage was set at 500 mV ( ECD1 )and 700 mV ( ECD2 ) . Results Selenomethionine showed good linearitt in the range of 1-300 μmol/L ( r2=0. 999 6 ) , the detection limit was 0. 30μmol/L, and the recovert rate was 101. 30%, RsD was 2. 30% ( n=6 ) . Conclusion The method is simple, sensitive, reproducible, which can be used for the determination of selenomethionine in selenium-enriched teast.%目的：建立测定富硒酵母中的硒代蛋氨酸含量的高效液相色谱－电化学检测器检测法。
高效液相色谱－电化学检测法测定尿液中的多胺
高效液相色谱－电化学检测法测定尿液中的多胺
唐琴梅;庄凌航;徐修容;师英强;李澍
【期刊名称】《色谱》
【年(卷),期】1994(12)6
【摘要】在已报道的高效液相色谱－电化学检测多胺方法研究的基础上，又进一步探讨了该方法用于尿样本测定的各种条件，并测定了健康志愿者及肿瘤患者尿液中的多胺。
结果显示肿瘤患者未水解及水解尿液中的腐胺、尸胺的平均值高于健康志愿者。
【总页数】3页(P433-435)
【关键词】高效液相色谱;尿液;多胺;电化学
【作者】唐琴梅;庄凌航;徐修容;师英强;李澍
【作者单位】中国科学院上海药物研究所,上海肿瘤医院
【正文语种】中文
【中图分类】R446.12
【相关文献】
1.高效液相色谱—电化学法测定尿液中单胺类神经递质代谢物含量 [J], 周钰杰;王启荣;方子龙;邵晶;文安;李俊涛;刘代骏;郑义;覃璐
2.高效液相色谱-电化学法测定人尿液中儿茶酚胺的浓度 [J], 陈静;丘宏强
3.高效液相色谱-二极管阵列检测法及高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定植物源性蛋白中残留的三聚氰胺 [J], 丁涛;徐锦忠;李健忠;沈崇钰;吴斌;陈惠兰;李淑娟
4.高效液相色谱-电化学检测法测定人尿液中的5-羟基吲哚乙酸和高香草酸 [J], 唐琴梅
5.高效液色相色谱-电化学检测法测定尿液中的多胺 [J], 唐琴梅;庄凌航;徐修容因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱同时检测生物样本中8种单胺类神经递质
高效液相色谱同时检测生物样本中8种单胺类神经递质赵焕英;段春礼;范春香;刘琦;张韬;杨慧【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2009(37)3【摘要】建立一种快速、准确测定生物样品中左旋多巴(L-DOPA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴柯(DOPAC)、多巴胺(DA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)及5-羟色胺(5-HT)8种递质含量的高效液相色谱- 电化学检测方法.使8种物质在25 min于单一流动相、单流速、单通道检测器情况下达到良好的分离效果.采用ESA MD-150色谱柱(150 mm×3.2 mm, 3 μm),流动相为50 mmol/L 柠檬酸、50 mmol/L无水乙酸钠、0.5 mmol/L 1-庚烷磺酸钠、0.5 mmol/L乙二胺四乙酸二钠、5 mmol/L三乙胺,pH 3.5,在甲醇浓度为5%～10%,流速0.3～0.5 mL/min, 柱温为30 ℃时,都能使8种物质很好分离,其中在甲醇浓度8%,流速0.4 mL/min,检测到前5种物质线性范围为0.005～10 nmol/L; 后3种0.001～10 nmol/L,8种物质相关系数在0.994～0.999之间,检出限在pmol/L水平;回收率在80.3%～102.1%之间,相对偏差在1.4%～4.8%之间.且对样本处理和保存方法进行了探讨.【总页数】5页(P330-334)【作者】赵焕英;段春礼;范春香;刘琦;张韬;杨慧【作者单位】首都医科大学医学实验与测试中心,北京,100069;首都医科大学神经科学研究所,北京市神经再生修复重点实验室,教育部神经变性病重点实验室,北京,100069;首都医科大学神经科学研究所,北京市神经再生修复重点实验室,教育部神经变性病重点实验室,北京,100069;首都医科大学神经科学研究所,北京市神经再生修复重点实验室,教育部神经变性病重点实验室,北京,100069;首都医科大学神经科学研究所,北京市神经再生修复重点实验室,教育部神经变性病重点实验室,北京,100069;首都医科大学神经科学研究所,北京市神经再生修复重点实验室,教育部神经变性病重点实验室,北京,100069;首都医科大学神经科学研究所,北京市神经再生修复重点实验室,教育部神经变性病重点实验室,北京,100069【正文语种】中文【中图分类】O6【相关文献】1.免疫亲和柱净化-高效液相色谱法同时检测小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其衍生物 [J], 王培;徐广超;尹丽梅;黎睿;谢刚2.高效液相色谱法同时检测生物样品中利多卡因和MEGX [J], 李江涛;严鹏;尉志文;贠克明3.高效液相色谱法同时检测药渣中四环素及其衍生物 [J], 王敏;马玉龙;马琳;王艳;司继涛4.高效液相色谱同时检测不同类型烟叶中的多种生物碱含量 [J], 林雨晟;金洪石;张皓楠;金江华;郭伟;李玉娥;赵铭钦;刘鹏飞5.高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物 [J], 杨佳凤;李娟;杨虹;潘桂湘;高秀梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱电化学检测生物样品中儿茶酚胺的研究
高效液相色谱电化学检测生物样品中儿茶酚胺的研究李炳源;黄慧伟;黄彦;李新玲;邱一华【期刊名称】《南通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2005(025)003【摘要】采用Atlantis C18反相色谱柱,成功地分离去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺等儿茶酚胺类物质.研究了儿茶酚胺在Atlantis C18和Novle pak C18柱的保留特性,比较了流动相中离子对试剂辛烷基磺酸钠(B8)浓度对儿茶酚胺容量因子k'的作用,确认采用Atlantis C18柱分离儿茶酚胺,色谱条件优化空间更大,更适于复杂生物样品分析.色谱条件:Atlantis C18柱,电化检测,流动相:NaH2PO450mmol/L、柠檬酸钠50mmol/L缓冲液-乙腈(体积比为75:25),检测限(S/N)在0.93～2.43pg 以下,绝对回收率均≥98.5%,样品日内相对标准差<1.2%.方法精密、准确.【总页数】3页(P177-179)【作者】李炳源;黄慧伟;黄彦;李新玲;邱一华【作者单位】南通大学公共卫生学院;南通大学基础医学院生理学教研室,南通,226001;南通大学基础医学院生理学教研室,南通,226001;南通大学公共卫生学院;南通大学基础医学院生理学教研室,南通,226001【正文语种】中文【中图分类】R33-33【相关文献】1.高效液相色谱法测定生物样品中儿茶酚胺及其代谢产物 [J], 黄新华;陈本美;陈新2.高效液相色谱—电化学检测法测定血浆中儿茶酚胺含量 [J], 王长连3.高效液相色谱—电化学检测法测定心肌组织中的儿茶酚胺 [J], 朱珠;陈兆珍4.高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物 [J], 杨佳凤;李娟;杨虹;潘桂湘;高秀梅5.高效液相色谱紫外电化学串联检测生物样品中克仑特罗残留 [J], 苗虹;吴永宁因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质
高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质金忠秀;许媛媛;李平;储成顶
【期刊名称】《安徽医科大学学报》
【年(卷),期】2009(44)6
【摘要】目的建立同时检测小鼠脑内的去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)3种神经递质的高效液相色谱方法 .方法采用的色谱条件为:C18柱分离,梯度洗脱.结果方法的检测限(以3倍信噪比计算)2.5μg/L以下,回收率均在
87.8%～105.7%之间,样品日内测定峰面积的相对标准偏差在3.4%以下.结论该方法具有检测灵敏度高、样品制备简便等优点,对小鼠脑内的3种单胺类递质的检测具有实用价值.
【总页数】3页(P772-774)
【作者】金忠秀;许媛媛;李平;储成顶
【作者单位】安徽医科大学附属省立医院脑外科,合肥,230001;安徽医科大学公共卫生学院,合肥,230032
【正文语种】中文
【中图分类】R329.54;R971
【相关文献】
1.固相萃取-高效液相色谱-荧光法测定人体尿液中单胺类神经递质 [J], 高慧;邢燕;汪洋;宋金枝;王旭
2.高效液相色谱-电化学检测法研究大蒜素对百草枯中毒小鼠脑组织中单胺类神经
递质含量的影响 [J], 檀笑昕;张淑娟;刘坤;张铧尹;连靠奇;徐向东;康维钧
3.荧光-反相高效液相色谱法同时测定小鼠脑组织中3种单胺类神经递质 [J], 魏小娟;许建华
4.高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化[J], 昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉
5.高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质 [J], 张璐璐;冯芳;叶小敏;朱杰;马冯飞
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高效液相色谱法对大鼠各器官中单胺类神经递质的测定
高效液相色谱法对大鼠各器官中单胺类神经递质的测定毛有彦;李爱芝【期刊名称】《中国误诊学杂志》【年(卷),期】2007(7)25【摘要】目的:以高效液相色谱法同时测定五种神经递质的含量,为神经递质的检测探索新的实验方法。
方法:色谱柱为C18柱,流动相为甲醇水(体积比为4∶6,其中每升中含EDTA-Na20.028g、SDS0.15g及浓硫酸0.22ml),流速1.0ml/min。
结果:本实验方法对大量样品进行过测定,其中包括正常、肝气郁症、肝气逆症等动物模型测定及用药后动物模型的测定,取得了可靠的结果。
结论:本方法实验成本低、样品处理量大,为稳定性及精密度、准确性都可靠的检测方法。
【总页数】2页(P5983-5984)【关键词】色谱法;高压液相;神经递质/分析;生物源单胺类/分析;动物【作者】毛有彦;李爱芝【作者单位】山东省潍坊市人民医院检验科;山东省潍坊市市立医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R122.11【相关文献】1.库仑阵列电化学高效液相色谱法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质及代谢产物[J], 张向晖;刘军;苏林雁2.荧光-反相高效液相色谱法同时测定小鼠脑组织中3种单胺类神经递质 [J], 魏小娟;许建华3.库仑阵列电化学-高效液相色谱法同时检测大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质 [J], 邓少东;卢洪梅;林励;肖凤霞;成晓燕4.高效液相色谱法测定百草枯染毒后小鼠脑组织中8种单胺类神经递质的含量变化[J], 昝富文; 解裴育; 贾昊然; 刘迎; 马莉5.柱前衍生-高效液相色谱法同时测定血清中氨基酸类及单胺类神经递质 [J], 白洁;王妲;刘泽平;张佳琪;刘丽艳;韩艳梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法快速检测单胺类神经递质及其代谢产物(英文)
高效液相色谱法快速检测单胺类神经递质及其代谢产物(英文)伦立民;车琳杰;李世伟【期刊名称】《中国临床康复》【年(卷),期】2006(10)22【摘要】背景:单胺类神经递质及其代谢产物对实验研究帕金森病和实验诊断嗜铬细胞瘤具有重要意义,是当今的研究热点。
目的:建立高效液相色谱法同时快速测定肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸、高香草酸及多巴柯7种单胺类神经递质及其代谢产物。
设计:病例-对照观察和随机对照动物实验。
单位:青岛大学医学院附属医院检验科及青岛大学医学院附属医院海阳分院。
对象:实验于2003-10/12在青岛大学医学院生理教研室和青岛大学医学院附属医院检验科完成。
①2例嗜铬细胞瘤患者,均经CT,MRI或病理切片和临床证实为该病。
12例正常对照均为在校大学生,且经查排除高血压、内分泌系统疾病和其他疾病。
②选用健康雌性Wistar大白鼠12只,体质量150～180g。
随机数字表法分为2组,正常对照组和帕金森病组,每组大鼠各6只。
方法:制备7种物质样品(肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸、高香草酸及多巴柯)的标准色谱图,同时进行样品精密度和回收率的检测。
采用高效液相色谱法检测12例正常对照和2例嗜铬细胞瘤患者24h尿中的儿茶酚胺类物质。
同时以6-羟基多巴胺损毁帕金森病组大鼠大脑一侧前脑束,以监测正常和帕金森病大鼠健侧及损毁侧尾壳核区纹状体内单胺类神经递质及其代谢产物的释放特点。
主要观察指标:①样品精密度和回收率检测结果。
②12例正常对照和2例嗜铬细胞瘤患者24h尿中儿茶酚胺类物质的测定结果。
③各组大鼠纹状体内单胺类神经递质及其代谢产物的释放特点。
结果:12例正常对照和2例嗜铬细胞瘤患者均获得24h尿中儿茶酚胺类物质检测结果,并进入结果分析。
实验动物在实验中无死亡。
①高效液相色谱法对肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺、5-羟吲哚乙酸、高香草酸及多巴柯7种单胺类物质的线性范围为2～1000μg/L,最低检测限为2～30μg/L,批内精密度为3.0%～8.6%,批间精密度为3.8%～9.7%。
库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方式学研究
库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方式学研究肖凤霞，邓少东，田青，邓超明1，周改莲【摘要】目的成立库仑阵列电化学高效液相色谱法快速测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质的含量。
方式采纳库仑阵列电化学检测器检测去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5羟色胺(5HT)、5羟吲哚乙酸(5HIAA)，采纳Phenomenex C18反相色谱柱(150 mm× mm，5 μm)，流动相为缓冲液乙腈(体积比87∶13)，流速为1 mL·min-1，柱温为35 ℃。
结果 4种单胺类神经递质的最低检测限为 15～ 15 ng ,回收率为 %～ %。
结论该法具有快速、准确、灵敏、样品制备简便等优势，可用于大鼠脑组织中单胺类神经递质的分离检测。
【关键词】高效液相色谱法;单胺类神经递质;库仑阵列电化学检测器of TCM,Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine,Guangzhou Guangdong 510006,China; Medical University,Taian,Shandong 271016,China)Abstract:Objective To establish a rapid method for determining monoamine neurotransmitters in rats’ brain tissue by HPLC with coularray HPLC was performed on a Phenomenex C18 column(150× mm,5 micron).The mobile phase,consisted of acetonitrile water phase(13∶87),was at a flow rate of 1 mL·min-1. The column temperature was kept at 35 ℃. The levels of NE,DA,5HT and 5HIAA were The minimum measurement limit was 15 ng. The average recoveries were %%.Conclusion This method is rapid,accurate,highly sensitive and easy to operate. The procedure is suitable for determining the monoamine neurotransmitters in rats’ brain tissue.Key words:HPLC; monoamine neurotransmitters; coularray detector单胺类物质包括去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5羟色胺(5HT)、五羟吲哚乙酸(5HIAA)等物质，是哺乳动物和人类中枢神经重要的信息传递物质。
高效液相色谱电化学同时检测单胺递质及其代谢物
高效液相色谱电化学同时检测单胺递质及其代谢物
程连弟;刘英琳
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】1996(24)8
【总页数】1页(P992)
【作者】程连弟;刘英琳
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R971
【相关文献】
1.麻醉剂量羟甲芬太尼对大鼠脑内单胺递质及其代谢物含量的影响 [J], 金昔陆
2.高效液相电化学检测器检测大鼠中枢单胺递质 [J], 李俊
3.超高效液相色谱-三重四极杆质谱法同时检测人尿中12种单羟基多环芳烃代谢物[J], 付慧;胡小键;陈曦;林少彬
4.高效液相色谱荧光检测法同时检测鸡蛋中氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺残留[J], 谢恺舟;姚宜林;徐东;陈学森;谢星;戴国俊;刘宗平;陈国宏
5.高效液相色谱电化学检测法测定兔血浆单胺递质及其相关化合物 [J], 李广林;郎子文;董明显;杨国林;张国伟;李锦宇;牛建荣;蒲万霞;毛学锋;刘惠玲;何天稀;侯经国
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单胺类神经递质及其代谢产物包括去甲肾上腺素（ＮＥ）、５－羟吲哚乙酸（５－ＨＩＡＡ）、高香草酸（ＨＶＡ）、多巴胺（ＤＡ）、５－羟色胺（５－ＨＴ）。
它们是一类具有广泛生物学活性的物质，既是人体内一类非常重要的神经递质，在神经系统支配体内各个器官，调节各个系统的多种生理功能中处于关键地位［１］，也是重要的激素物质，它们和神经冲动、行为及大脑皮质的觉醒和睡眠节律等都有关系，在神经系统中起重要调节作用［２］。
近年来发现病理情况下它们与脑血管病、脑外伤关系密切，过量的单胺类神经递质能够产生大量的活性氧物质，引起神经细胞凋亡，其中一些疾病特别如帕金森病、高血压、交感神摘要：［目的］建立一种简单、快速、灵敏的测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物的高效液相色谱方法。
［方法］色谱柱采用ＷａｔｅｒｓＣ１８反相色谱柱（３．９ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ），流动相为水相（每５００ｍＬ中含辛烷磺酸钠１．２５ｇ，磷酸二氢钾６．８ｇ，乙二胺四乙酸１８ｍｇ，ｐＨ值３．３）∶甲醇∶乙腈＝７８∶１９∶３，流速为０．８ｍＬ／ｍｉｎ，柱温３５℃；电化学检测器工作电极为玻璃碳电极，参比电极为银／氯化银（Ａｇ／ＡｇＣｌ）电极，工作电压为０．７Ｖ。
［结果］５种物质保留时间分别为：去甲肾上腺素３．６ｍｉｎ，５－羟吲哚乙酸４．５ｍｉｎ，高香草酸５．２ｍｉｎ，多巴胺６．２ｍｉｎ，５－羟色胺１１．９ｍｉｎ；线性范围均为２０～１０００μｇ／Ｌ，最低检测限为４～８μｇ／Ｌ。
［结论］此方法测定生物样品中的单胺类神经递质及其代谢产物，简便，快速且灵敏度高。
关键词：高效液相色谱－电化学检测法；单胺类神经递质；代谢物中图分类号：Ｒ２８４．１文献标识码：Ａ文章编号：１６７３－９０４３（２００７）０４－０１９２－０４ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍｏｎｏａｍｉｎｅｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒａｎｄｉｔｓｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｄｅｔｅｃｔｉｏｎＹＡＮＧＪｉａ－ｆｅｎｇ，ＬＩＪｕａｎ，ＹＡＮＧＨｏｎｇ，ｅｔａｌ（ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｏｆＴＣＭＦｏｒｍｕｌａｅ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＴＣＭ，ＴｉａｎｊｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴＣＭ，Ｔｉａｎｊｉｎ３００１９３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ａｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄａｎｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅＨＰＬＣ－ＥＣＤｍｅｔｈｏｄｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｍｏｎｏａｍｉｎｅｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒａｎｄｉｔｓｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ．［Ｍｅｔｈｏｄｓ］ＴｈｅＬＣｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎａＷａｔｅｒｓ＠ＯＤＳＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（３．９×５００ｍｍ，５μｍ）．Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ，ｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆＭｅｔｈａｎｏｌ－Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－Ｗａｔｅｒｐｈａｓｅ（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＢ８１．２５ｇ，ＫＨ２ＰＯ４６．８ｇ，ＥＤＴＡ１８ｍｇｉｎ５００ｍＬｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｐＨ＝３．３）＝１９∶３∶７８．Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓａｔａｆｌｏｗ－ｒａｔｅｏｆ０．８ｍＬ／ｍｉｎ．ＴｈｅｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌｄｅｔｅｃｔｏｒｗａｓｅｑｕｉｐｐｅｄｗｉｔｈａｇｌａｓｓｃａｒｂｏｎｗｏｒｋｉｎｇｅｌｅｃｔｒｏｄｅａｎｄａＡｇ／ＡｇＣｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅｅｌｅｃｔｒｏｄｅ．Ｔｈｅｗｏｒｋｉｎｇｖｏｌｔｗａｓ０．７Ｖ．Ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓｋｅｐｔａｔ３５℃．［Ｒｅｓｕｌｔｓ］Ｔｈｅｉｒｒｅｔｅｎｔｉｏｎｔｉｍｅｗｅｒｅ３．６ｍｉｎｆｏｒＮＥ，４．５ｍｉｎｆｏｒ５－ＨＩＡＡ，５．２ｍｉｎｆｏｒＨＶＡ，６．１ｍｉｎｆｏｒＤＡａｎｄ１１．９ｍｉｎｆｏｒ５－ＨＴｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｓｅｆｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗｅｒｅａｌｌｆｏｕｎｄｔｏｂｅｌｉｎｅａｒｏｖｅｒａｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅｏｆ２０～１０００μｇ／Ｌ．Ｔｈｅｌｏｗｌｉｍｉｔｏｆｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｗａｓ４～８μｇ／Ｌ．［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］ＴｈｅＨＰＬＣ－ＥＣＤｍｅｔｈｏｄｗａｓｒａｐｉｄ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｆｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｒ－ｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍｏｎｏａｍｉｎｅｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒａｎｄｉｔｓｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＨＰＬＣ－ＥＣＤj ＭｏｎｏａｍｉｎｅＮｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒj Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ高效液相色谱－电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物G杨佳凤，李娟，杨虹，潘桂湘，高秀梅G 基金项目：国家自然科学基金（３０６７２６３１）。
作者单位：３００１９３教育部处部共建方剂学重点实验室，国家中药高新技术产业基地，天津现代中药研究中心，天津中医药大学作者简介：杨佳凤（１９７９－），女，助理研究员，主要从事中药代谢研究。
经瘤等都使其发生显著的变化。
对于神经递质的研究也是目前生命科学研究的热门课题之一［３］。
由于单胺类神经递质自身的不稳定性，生物结构的相似性以及样本自身的内源性干扰物影响，而且样品中含量极微［４］，准确测定较为困难。
所以本实验的目的是建立一种灵敏度高、简单快速的检测单胺类神经递质及其代谢产物的方法，更好的为科研和临床需要服务。
１仪器和试剂１．１仪器Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪：四元泵、在线脱气机、手动进样器、柱温箱；ＤＥＣＡＤＥＩＩ电化学检测器：玻璃碳工作电极和银／氯化银（Ａｇ／ＡｇＣｌ）参比电极；ＭＥＴＴＬＥＲＴＯＬＥＤＯＤＥＬＴＡ３２０ｐＨ仪；ＭＩＬＬＩＰＯＲＥＧａｔＮｂＱＧＡＲＤＯＯＲ１超纯水系统。
１．２试剂ＮＥ、ＤＡ、５－ＨＴ、ＨＶＡ、５－ＨＩＡＡ均为Ｓｉｇｍａ公司产品。
辛烷磺酸钠（Ｂ８，分析纯，天津市大茂化学试剂厂），磷酸二氢钾（ＫＨ２ＰＯ４，分析纯，天津市大茂化学试剂厂），乙二胺四乙酸二钠（ＥＤＴＡ，分析纯，天津市化学试剂一厂），磷酸（分析纯，天津市化学试剂三厂），甲醇（色谱纯，天津市协和昊鹏色谱科技有限公司），乙腈（色谱纯，天津基准化学试剂有限公司）。
２测定条件色谱柱为ＷａｔｅｒｓＣ１８反相色谱柱（３．９ｍｍ×１５０ｍｍ，５μｍ），柱温３５℃；流动相为水相（每５００ｍＬ中含Ｂ８１．２５ｇ，ＫＨ２ＰＯ４６．８ｇ，ＥＤＴＡ１８ｍｇ，ｐＨ＝３．３）∶甲醇∶乙腈＝７８∶１９∶３；流速０．８ｍＬ／ｍｉｎ；电化学检测器工作电压为０．７Ｖ；进样量均为１０μＬ。
３溶液的配置３．１标准品储备液制备精密称取ＮＥ、ＤＡ、５－ＨＴ、ＨＶＡ、５－ＨＩＡＡ各１．００ｍｇ，置于１０ｍＬ容量瓶中，用超纯水定容至１０ｍＬ制成浓度为０．１０ｇ／Ｌ的储备液。
３．２流动相水相的配制精密称取１．２５ｇＢ８、６．８ｇＫＨ２ＰＯ４和１８ｍｇＥＤＴＡ，溶解于５００ｍＬ超纯水中，用磷酸将其ｐＨ值调至３．３，使用前用０．４５μｍ滤膜过滤，超声波脱气。
４测定的方法学考察４．１色谱学行为在本实验色谱条件下，５种物质ＮＥ、ＤＡ、ＨＶＡ、５－ＨＴ、５－ＨＩＡＡ能较好分离，基线噪音小，它们的保留时间分别为ＮＥ：３．６ｍｉｎ；５－ＨＩＡＡ：４．５ｍｉｎ；ＨＶＡ：５．２ｍｉｎ；ＤＡ：６．２ｍｉｎ；５－ＨＴ：１１．９ｍｉｎ，峰形和分离度都较好。
见图１。
４．２标准曲线将５种物质混合标准品储备液配制成浓度分别为２０、４０、８０、２００、４００、１０００μｇ／Ｌ的标准品溶液，进样１０μＬ，对所得数据进行处理，以浓度为横坐标（ｘ），峰面积为纵坐标（ｙ），每个浓度平行３份，取其均值计算回归方程即标准曲线。
并以信噪比３∶１（Ｓ／Ｎ＝３）时样品浓度为该条件下的检测限。
见表１。
４．３精密度本实验中分别将５种神经递质各取３个浓度，每个浓度做６个样品，测定分析，并考察测定的精密度。
５种物质的精密度，数据见表２。
结果表明，相对误差（ＲＳＤ）均小于５．０％，测定精密度高，可以满足实验的要求。
４．４稳定性用标准品储备液分别配制ＮＥ、ＤＡ、ＨＶＡ、５－ＨＴ、５－ＨＩＡＡ的标准品溶液，使其浓度均为４００μｇ／Ｌ，保存于４℃，于１个月内每周测定１次。
标准品溶液在１个月内稳定性较好。
透析液样品保存于４℃条件下，在１ｄ内有较好的稳定性。
保存于－８０℃条件下，１周内有较好的稳定性。
１：ＮＥ（１５０μｇ／Ｌ），２：ＨＶＡ（２００μｇ／Ｌ），３：５－ＨＩＡＡ（８０μｇ／Ｌ），４：ＤＡ（１００μｇ／Ｌ），５：５－ＨＴ（２５０μｇ／Ｌ）图１混合标准品溶液典型色谱图表１５种神经递质的标准曲线（ｎ＝３）神经递质ＮＥＤＡＨＶＡ５－ＨＴ５－ＨＩＡＡ回归方程Ｙ＝３．０８１Ｘ－１２．７６Ｙ＝２．１８９Ｘ－２．３０６Ｙ＝２．５９８Ｘ－１．９９８Ｙ＝２．８４１Ｘ－３９．０９Ｙ＝２．９９４Ｘ－４２．９５Ｒ０．９９９２０．９９９８０．９９７８０．９９８９０．９９８４线性范围（μｇ／Ｌ）２０～１０００２０～１０００２０～１０００２０～１０００２０～１０００检测限（μｇ／Ｌ）４８８４４表２方法的精密度（ｎ＝６）浓度（μｇ／Ｌ）８０５００１０００ＮＥ２．４０．３１．１ＤＡ４．５０．７１．６ＨＶＡ２．２０．６０．８５－ＨＴ３．９０．４１．９５－ＨＩＡＡ１．４３．００．２ＲＳＤ（％）ｍＡＵ５本检测方法的应用５．１大鼠脑透析液中单胺类神经递质的检测手术将微透析探针定位于大鼠脑部海马区，探针的进口管连接微透析泵，用林格液灌流，探针的出口管连接低温收集器，每隔一定时间收集透析液直接进样，检测单胺类递质及其代谢产物的含量。
见图２。
５．２大鼠脑组织中单胺类神经递质的检测将大鼠断头处死，于冰袋上剥离脑组织。
取全脑称质量后，剥离丘脑称质量。
迅速将丘脑转移至研钵中，研钵置于冰浴上，加入４ｍＬ（０．１ｍｏｌ／Ｌ）高氯酸，一边加高氯酸一边研磨匀浆。
匀浆２ｍｉｎ后，将匀浆液转移至小离心管中，４℃下１５０００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ，取上清液１０μＬ立即进样分析，检测单胺类递质及其代谢产物的含量。
见图３。
６讨论６．１单胺类神经递质的测定方法建立简便易行的单胺类神经递质的测定方法，了解其在中枢神经不同部位的含量和代谢状况，是研究中枢神经系统对机体各功能调节的重要手段之一。
目前常用的检测方法有荧光法、放射酶学法和高效液相色谱法，近年来，毛细管电泳法、液—质联用法、化学发光分析法等方法正在逐步应用到单胺类神经递质的检测中［５－１０］。
荧光法是常规使用的检测方法，但这种方法对样品的处理较复杂。
放射酶学法可用于研究生理和病理状态下血浆和组织中的单胺类神经递质的含量变化，优点是灵敏度高（可达２．２×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ），选择性好，可有效地分离并检出Ｅ、ＮＥ、ＤＡ。