液体乳中三聚氰胺的快速检测 胶体金免疫层析法(KJ201907)
10项食品快速检测方法发布
《保健食品中巴比妥类化学成分的快速检测 胶体金免疫 层析法（KJ201903）》规定了保健食品中巴比妥类化学成分 的胶体金免疫层析快速检测方法，适用于硬胶囊、软胶囊、 丸剂、片剂、散剂及口服液等保健食品中巴比妥类化学成分 的快速测定。
基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚、双酚 A 的液相色谱 - 串 联质谱测定方法，适用于婴儿配方食品、畜肉、禽蛋、水产品、 罐头食品、植物油中辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚、 双酚 A 的测定。
《含乳饮料及其乳原料中酪蛋白含量的测定》规定了含乳 饮料及其原料中酪蛋白四种亚型 αs1- 酪蛋白、αs2- 酪蛋白、β酪蛋白、κ- 酪蛋白含量测定的方法，适用于含乳饮料及其原料 中酪蛋白总含量的测定，不适用于发酵法、酶解法、水解法等 工艺对蛋白质改性的样品。
《食品中柑橘红 2 号的测定》规定了柑橘类水果、果酱、 蜜饯、果汁饮料、辣椒油、辣椒酱、火锅底料、肉制品中柑橘 红 2 号的液相色谱 - 串联质谱测定方法，适用于柑橘类水果、 果酱、蜜饯、果汁饮料、辣椒油、辣椒酱、火锅底料、肉制品 中柑橘红 2 号的测定。
《食品中辛基酚等 5 种酚类物质的测定》规定了食品中辛
《液体乳中三聚氰胺的快速检测 胶体金免疫层析法 （KJ201907）》规定了液体乳中三聚氰胺的胶体金免疫层析快 速检测方法，适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、调制乳和发酵乳中 三聚氰胺的快速测定。
《液体乳中三聚氰胺的快速检测 拉曼光谱法（KJ201908）》 规定了液体乳制品中三聚氰胺快速测定方法，适用于生鲜乳、
牛乳中三聚氰胺的快速检测
2007年3月, 美国发生多起因 年 月 食用宠物食品而导致幼儿奶粉导致婴幼儿产生肾 结石病症的严重事件。两起 结石病症的严重事件。 事件的原因都是在食品或饲 料中非法添加大剂量三聚氰 料中非法添加大剂量三聚氰 因此, 胺。因此 如何快速准确的 分析食品和饲料中的三聚氰 胺成为食品企业、食品管理 胺成为食品企业、 机构和广大消费者密切关注 的问题。 的问题。
使用步骤】 【使用步骤】 1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和待 、在进行测试前先完整阅读使用说明书， 检样本恢复至室温。 检样本恢复至室温。 2、从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内尽快地使用。 、从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内尽快地使用。 3、将检测卡平放，用移液器或滴管吸取稀释后的待检样品溶液， 、将检测卡平放，用移液器或滴管吸取稀释后的待检样品溶液， 垂直滴加3~4 滴（约80µl）于加样孔中，加样后开始计时。 垂直滴加 ）于加样孔中，加样后开始计时。 4、检测结果应在 分钟读取， 、检测结果应在3~5分钟读取，其他时间判读无效，根据示意 分钟读取 其他时间判读无效， 图判定结果。 图判定结果。
【注意事项】 注意事项】 1、检测卡请在保质期内一次性使用； 、检测卡请在保质期内一次性使用； 2、使用前将检测卡和待检样本恢复至温； 、使用前将检测卡和待检样本恢复至温； 3、如果样品偏酸或偏碱，需要调节 、如果样品偏酸或偏碱，需要调节pH 至 中性后再检测； 中性后再检测； 4、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面； 、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面； 5、样品滴管不可混用，以免交叉污染； 、样品滴管不可混用，以免交叉污染；
【产品组成】 产品组成】 三聚氰胺免疫胶体金快速检测卡 样品稀释离心管（ 管 样品稀释离心管（1管 / 份，内 含样品稀释液） 含样品稀释液） 滴管（2个 / 份） 滴管（ 个 干燥剂（ 片 干燥剂（1片 / 袋）
液体乳中三聚氰胺的快速检测 拉曼光谱法(征求意见稿)
液体乳中三聚氰胺的快速检测拉曼光谱法（征求意见稿）1范围本方法规定了液体乳制品中三聚氰胺快速测定方法。
本方法适用于生鲜乳、灭菌乳、巴氏杀菌乳、调制乳和发酵乳等液态乳制品中三聚氰胺含量的快速测定。
2原理样品经沉淀、溶剂提取，加表面增强试剂对信号增强，进行拉曼光谱扫描。
以704±10cm-1处的拉曼特征峰作为三聚氰胺定量基准峰，以925±10cm-1或类似基质中稳定存在的拉曼峰为内标峰，根据三聚氰胺峰与内标峰的相对强度对三聚氰胺的浓度绘制标准曲线，内置仪器内进行判别。
3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1 试剂3.1.1三氯乙酸。
3.1.2三氯乙酸溶液（5%）：准确称取三氯乙酸（3.1.1）50 g于1 L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀后备用。
3.1.3表面增强试剂：纳米金溶胶或银溶胶，或相当者。
注：表面增强试剂的参考配制方法：纳米金溶胶：取100mL0.01%氯金酸（AuCl3·HCl·4H2O）水溶液加热至沸，剧烈搅拌下准确加入1.0mL 1%柠檬酸三钠（Na3C6H5O7）水溶液，金黄色的氯金酸水溶液在2min内变为红色，继续煮沸15min，冷却后用蒸馏水补加到100mL。
增强试剂配制用水为GB/T 6682规定的一级水。
纳米银溶胶：取200mL1.0mM硝酸银（AgNO3）水溶液加热沸腾，剧烈搅拌下逐滴准确滴加5.0mL1%柠檬酸三钠（Na3C6H5O7）水溶液，持续煮沸1h，溶液变为灰绿色，冷却后用蒸馏水补加到200mL。
增强试剂配制用水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1.4促凝剂：金溶胶的促凝剂：称取5.85g氯化钠，溶于100mL水中，摇匀，备用，或配制成其他相当的无机盐溶液。
银溶胶的促凝剂：称取5.85g氯化钠和2g氢氧化钠，溶于100mL水中，摇匀，备用，或配制成其他相当的无机盐溶液。
乳品中三聚氰胺快速检测解决方案
28 食品安全导刊 2010年11月刊ANAlySIS & TEST 自2008年三聚氰胺事件爆发以来，乳品安全一直备受关注。
为了加大对乳品行业的监管力度，使中国乳品行业迅速恢复元气，相关职能部门出台了多项措施：在质量控制方面，要求对奶源做到严格把关，有效提高乳品质量安全系数。
因此，在奶站收奶环节，企业对原料奶的检测把关显得尤为重要，同时为保证牛奶不发生腐败变质的现象，必须在最短的时间内对其进行检测并立即入罐冷藏，这些都对乳品的检测技术提出了挑战。
常规的三聚氰胺残留量检测方法主要有液相色谱/质谱法（LC-MS）、高效液相色谱（H PLC）、液相色谱串联质谱（LC-M S-M S）等，这些方法因为存在仪器设备昂贵、检测过程繁琐、检测时间太长和对检验人员的技能要求高等局限，所以不适合现场监控和大量样品的筛查，在鲜奶收购环节使用不现实。
鉴于此，如何选择一种快速、低成本的检测方法，构建从奶□ 张德红 扶胜 杜祥乐 北京望尔生物技术有限公司站、企业到政府监管的安全检测网络已成为当前迫切需要解决的问题。
目前，快速筛查技术主要有两大类：生物分析技术和化学分析技术。
生物分析技术又包含免疫学方法，该方法具有检出限低、准确性好、灵敏度高、重现性好等特点，是现在和未来快速筛查技术发展的主流技术，非常适合对原料乳的快速检测。
依托此项技术，北京望尔生物技术有限公司（以下简称北京望尔）开发出三聚氰胺酶联免疫试剂盒和胶体金试纸卡等检测产品，为广大乳品企业及相关机构提供了有效的三聚氰胺快速检测方案。
三聚氰胺酶联免疫试剂盒检测方案检测原理三聚氰胺试剂盒采用间接竞争E L I SA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的三聚氰胺将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗三聚氰胺抗体，在加入酶标二抗后，用T M B底物显色，样本吸光值与残留物三聚氰胺的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中三聚氰胺的含量。
液体乳中三聚氰胺的快速检测胶体金免疫层析法(KJ201907)
附件7液体乳中三聚氰胺的快速检测胶体金免疫层析法（KJ201907）i范围本方法规定了液体乳中三聚氰胺的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、调制乳和发酵乳中三聚氰胺的快速测定。
2原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。
样品中的三聚氰胺与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。
通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中三聚氰胺进行定性判定。
3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1试剂3.1.1 甲醇。
3.1.2 三羟甲基氨基甲烷（Tris ）。
3.1.3 1mol/L盐酸：移取83 mL浓盐酸，加入900mL水中，定容至1 L。
3.1.4甲醇水溶液：准确量取50 mL甲醇和50 mL水，混匀后备用。
3.1.5 稀释液：准确称取6.05 g Tris （3.1.2）和8.5 g 1mol/L盐酸（3.1.3），加水定容至1 L ,混匀后备用。
3.2参考物质参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度＞99%3.3标准溶液的配制三聚氰胺标准储备液（1000卩g/mL :精密称取适量三聚氰胺标准品（ 3.2），置于10 mL容量瓶中，用甲醇水溶液（3.1.4）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1000卩g/mL的三聚氰胺标—1——准储备液；或可直接购三聚氰胺标准储备液。
4C避光保存备用，有效期3个月。
3.4 三聚氰胺胶体金免疫层析试剂盒3.4.1 金标微孔（含胶体金标记的特异性抗体）。
3.4.2 试纸条或检测卡。
4 仪器和设备4.1 移液器：200 L、1000 k 和5 mL。
4.2 涡旋混合器。
4.3 电子天平：感量为0.01 g。
4.4 环境条件：温度15C ~35C，湿度＜80%5 分析步骤5.1 试样制备取适量有代表性样品充分混匀。
胶体金免疫层析法快速检测乳制品中三聚氰胺
胶体金免疫层析法快速检测乳制品中三聚氰胺程国栋;吴小慧;张宇;李晓丹;吴方舟;王丹;金珠【期刊名称】《中国乳品工业》【年(卷),期】2015(043)009【摘要】建立了快速检测乳制品中三聚氰胺的胶体金免疫层析试纸条分析方法.通过实验研究了方法的灵敏度、重复性和特异性.结果表明,用免疫胶体金法测定乳制品中三聚氰胺的检出限为50～200 μg/kg,方法重现性好.选用了8种干扰物对胶体金免疫层析试剂条进行了特异性实验,发现尿素对胶体金免疫层析试纸条检测液态奶时存在干扰,其他物质没有干扰.使用胶体金免疫层析法和高效液相色谱法同时检测加标样品,结果一致.方法适用于乳制品中三聚氰胺的快速检测.【总页数】4页(P40-43)【作者】程国栋;吴小慧;张宇;李晓丹;吴方舟;王丹;金珠【作者单位】蒙牛乳业(马鞍山)有限公司,安徽马鞍山243000;蒙牛乳业(马鞍山)有限公司,安徽马鞍山243000;蒙牛乳业(马鞍山)有限公司,安徽马鞍山243000;蒙牛乳业(马鞍山)有限公司,安徽马鞍山243000;蒙牛乳业(马鞍山)有限公司,安徽马鞍山243000;内蒙古蒙牛乳业(集团)股份有限公司,呼和浩特010000;蒙牛乳业(马鞍山)有限公司,安徽马鞍山243000【正文语种】中文【中图分类】TS252.7【相关文献】1.原料乳和乳制品中三聚氰胺快速检测方法的探讨 [J], 丁云连;雷磊2.乳与乳制品中三聚氰胺快速检测方法 [J], 王玉英;柴艳兵;张耀广;赵媛媛;张玉娟;闫立红3.乳与乳制品中三聚氰胺的快速检测-高效液相色谱法 [J], 王新喜4.胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的三聚氰胺 [J], 李淑群;曹碧云;常化仿;邓安平5.胶体金免疫层析法快速检测乳制品中重金属离子铅 [J], 赵小旭;柳家鹏;柴艳兵;张耀广;杨敏;滕燕;李曼;郭健因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
胶体金免疫层析技术在检测乳制品中三聚氰胺的应用
胶体金免疫层析技术在检测乳制品中三聚氰胺的应用潘声旺1，和垚1，何茂萍1，陈春坛1，2，周钰潇1，何靓雯1，李亚阑1，2*（1.成都大学建筑与土木工程学院，成都610106；2.四川文理学院化学化工学院，四川达州635000）摘要:【目的】基于竞争抑制免疫层析原理，建立一种快速检测乳制品中三聚氰胺的方法。
【方法】在胶体金免疫层析（GICA ）技术的基础上，以胶体金为标记物，建立乳制品中三聚氰胺（MA ）快速检测方法、研发GICA 检测试纸；验证该方法的灵敏度、重复性和特异性。
【结果】所研发的GICA 试纸测定乳制品中MA 的检出限为40~160μg/kg ，重现性好；选用11种干扰物对GICA 试剂进行特异性实验，仅发现尿素、缩二脲对GICA 试纸检测液态奶时存在干扰，其他9种无干扰；使用GICA 、HPLC 、GC-MS 同时检测阴性或添加MA 质量分数2.00mg/kg 的阳性乳样品，检测结果一致。
【结论】GICA 试纸适用于乳制品中MA 的快速检测。
关键词:胶体金；免疫层析；三聚氰胺；乳制品中图分类号:TS207.7文献标志码:Ａ文章编号:1000-2650（2020）03-0346-07A Rapid Colloidal Gold-Based Immunochromatographic Strip Assay for Monitoring Melamine in Dairy ProductsPAN Shengwang 1，HE Yao 1，HE Maoping 1，CHEN Chuntan 1，2，ZHOU Yuxiao 1，HE Jingwen 1，LI Yalan 1，2*（1.School of Architecture and Civil Engineering ，Chengdu University ，Chengdu 610106，China ；2.School of Chemistry and Chemical Engineering ，SichuanUniversityof Arts and Science ，Dazhou635000，Sichuan ，China ）Abstract:【Objective 】This study was aimed to establish a method for the rapid detection of melamine (MA)in dairy products based on the principle of competitive immunochromatography.【Method 】On thebasis of colloidal gold Immunochromatographic assay (GICA)technology ，a rapid detection method forMA in dairy products was established and GICA test paper was developed with colloidal gold as the marker ，and its sensitivity ，repeatability and specificity were verified.【Result 】Determination of melamine in dairy products by colloidal gold immuneochromatographic assay the detection limits for 40~160μg/kg ，and reproducibility is ing 11kinds of interferences of colloidal gold immuneochromatographic reagent strip for the specific experiment ，discovered the presence of biuret and urea interference on col -loidal gold immuneochromatographic reagent strip for detection of liquid milk ，other substances without any interference.Simultaneous determination of the negative milk samples or the positive milk sam -ples with MA content of 2.00mg/kg by GICA and high performance liquid chromatography(HPLC)，and gas chromatography-mass spectrometer (GC-MS)the results obtained by these three methods were in good agreement.【Conclusion 】This method is suitable for rapid detection of melamine in dairy products.Keywords:colloidal gold ；immunochromatography ；melamine ；dairy products第38卷第3期2020年6月收稿日期:2019-10-27基金项目:成都市科技局技术创新研发计划（2018-YF05-00486-SN ）；四川省教育厅科研项目（18ZA0116）。
液体乳中三聚氰胺的快速检测胶体金免疫层析法（KJ201907）
液体乳中三聚氰胺的快速检测胶体金免疫层析法（KJ201907）附件7液体乳中三聚氰胺的快速检测胶体金免疫层析法(KJ201907)范围本方法规定了液体乳中三聚氰胺的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、调制乳和发酵乳中三聚氰胺的快速测定。
原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。
样品中的三聚氰胺与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。
通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中三聚氰胺进行定性判定。
试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。
3.1试剂3.1.1甲醇。
3.1.2三羟甲基氨基甲烷（Tris）。
3.1.31mol/L盐酸：移取83mL浓盐酸，加入900mL水中，定容至1L。
3.1.4甲醇水溶液：准确量取50mL甲醇和50mL水，混匀后备用。
3.1.5稀释液：准确称取6.05gTris（3.1.2）和8.5g1mol/L盐酸（3.1.3），加水定容至1L，混匀后备用。
3.2参考物质参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥99%。
表1三聚氰胺参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量三聚氰胺Melamine108-78-1C3H6N6126.12注：或等同可溯源物质。
3.3标准溶液的配制三聚氰胺标准储备液（1000μg/mL）：精密称取适量三聚氰胺标准品（3.2），置于10mL容量瓶中，用甲醇水溶液（3.1.4）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1000μg/mL的三聚氰胺标准储备液；或可直接购三聚氰胺标准储备液。
4℃避光保存备用，有效期3个月。
3.4三聚氰胺胶体金免疫层析试剂盒3.4.1金标微孔（含胶体金标记的特异性抗体）。
3.4.2试纸条或检测卡。
仪器和设备4.1移液器：200µL、1000µL和5mL。
三聚氰胺快速检测卡(胶体金法)说明书
三聚氰胺快速检测卡(胶体金法)说明书【产品名称】产品名称：三聚氰胺快速检测卡(胶体金法)英文名称：Melamine Rapid Test(Colloidal Gold)【产品简介】三聚氰胺是为提高乳及乳制品中表观蛋白质（全氮）含量而添加的一种化工原料，人体尤其是婴幼儿摄入一定量会增加肾脏负担，可能有致癌风险，国家已经禁止其作为食品添加物质使用。
本产品为快速检测液态奶和奶粉中三聚氰胺残留量的检测卡，检测过程只需20分钟左右，适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构的快速筛查。
【包装规格】5次/盒。
【产品组成】三聚氰胺快速检测卡（5条）；200μL刻度吸管（5支）；奶粉取样勺（1支）；提取瓶（内含三聚氰胺提取液4mL，5瓶）。
【检测原理】本产品采用了竞争抑制免疫层析的原理。
【检测限量】本产品检测方法对液态奶中三聚氰胺检出限为2.5mg/L，对婴幼儿配方奶粉（以粉末计）中三聚氰胺检出限为1.0mg/kg。
根据卫生部等5部（总局）《关于三聚氰胺在食品中的限量值的公告(2011年第10号)》规定，液态奶中三聚氰胺检出限为2.5mg/L；婴幼儿配方奶粉中三聚氰胺检出限为1.0mg/kg。
【使用方法】1、液态奶检测：用吸管吸取200μL液态奶（至吸管刻度线），加入到提取瓶中，盖紧瓶盖后振荡混匀；奶粉检测：用奶粉取样勺量取1平勺奶粉（约0.4g），加入提取瓶中，盖紧瓶盖后振荡混匀。
2、从包装袋中取出检测卡，平放在桌面，用吸管从提取瓶中吸取样品，垂直滴加3滴（约100μL）于检测卡加样孔（S孔）中。
3、室温环境计时10分钟，根据示意图判定结果。
【结果判定】阴性（-）：C线和T线都显色，表示样品中三聚氰胺浓度低于检出限。
阳性（+）：C线显色，T线不显色，表示样品中三聚氰胺浓度等于或高于检出限。
无效：C线未出现，表明操作过程不正确或检测卡已失效。
在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的检测卡重新测试。
【注意事项】1、请按照使用方法进行测试，检测卡打开包装后1小时内使用，检测前将检测卡恢复至室温。
液态奶中的三聚氰胺检测方法
液态奶中的三聚氰胺检测方法液态奶是我们日常生活中常见的一种奶制品，但是近年来随着食品安全问题的关注度提高，人们对于液态奶中可能存在的有害物质也越来越关注。
三聚氰胺就是一种可能存在于液态奶中的有害物质之一。
三聚氰胺是一种无色、无味的结晶性化合物，具有较高的氮含量。
如果长期摄入含有三聚氰胺的奶制品，可能会对人体造成损害，因此检测液态奶中的三聚氰胺成为一项十分重要的工作。
那么，如何检测液态奶中的三聚氰胺呢？下面我们将介绍一种常用的检测方法。
一、高效液相色谱法高效液相色谱法是目前常用的一种用于液态奶中三聚氰胺检测的方法。
该方法的原理是利用高效液相色谱仪对液态奶样品进行分离和检测，从而得出三聚氰胺的含量。
具体操作步骤如下：1. 样品处理：首先需要将液态奶样品进行前处理，一般常用的方法是将液态奶样品进行萃取和浓缩，将目标物质提取出来。
然后将提取物进行适当稀释，以便进行后续的分析。
2. 色谱条件设置：接下来需要设置色谱条件，包括流动相、柱温、检测波长等参数。
这些参数的设置会影响到后续的色谱分离效果和检测结果的准确性。
3. 样品分析：将经过前处理的样品注入高效液相色谱仪中，进行分析。
色谱仪会根据样品中的物质特性进行分离，最终得出样品中三聚氰胺的含量。
4. 数据处理：最后需要对所得到的数据进行处理和分析，得出最终的三聚氰胺含量结果。
高效液相色谱法是一种比较可靠、准确的检测方法，但是也存在一些局限性，比如需要专业的设备和操作技能，同时也需要一定的检测周期和成本。
针对液态奶生产企业和有关监管部门，需要建立检测标准和技术规范，保证三聚氰胺检测结果的可靠性和可比性。
二、质谱法质谱法是一种基于样品分子量和结构的分析方法，也可以用于液态奶中三聚氰胺的检测。
其原理是通过质谱仪对样品分子进行分析，从而得到目标物质的含量和结构信息。
液态奶中的三聚氰胺检测是一项重要的工作，关系到人们的饮食安全和健康。
通过采用高效液相色谱法、质谱法等现代化的检测方法，可以有效地对液态奶中的三聚氰胺进行快速、准确的检测，从而保障液态奶制品的质量和安全。
原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法实验报告 (2)
原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法实验报告应化0901 4103090137 金立峰一、实验目的1.了解用液相色谱法快速检测原料中三聚氰胺的方法。
2.了解和掌握高效液相色谱的使用方法。
3.学习使用液相色谱的软件分析数据。
二、实验原理用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂，强阳离子交换色谱柱分离，高效液相色谱-紫外检测器，加标回收率。
三、实验器材1.实验试剂除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
乙腈（CH3CN）：色谱纯磷酸（H3PO4）磷酸二氢钾（KH2PO4）三聚氰胺标准物质（C3H6N6）：纯度大于或等于99%标准溶液A：2.00×102mg/L2.实验器材一次性注射器滤膜：水相，0.45μm 针式过滤器：0.45μm具塞刻度试管：50mL 液相色谱仪分析天平：感量0.01gPH计：测量精度±0.02 溶剂过滤器四、实验步骤1.流动相的配制配制磷酸盐缓冲液：0.05mol/L.称取6.8g磷酸二氢钾（准确至0.01g），加水800ml完全溶解后，用磷酸调节PH至3.0，用水稀释至1L，用滤膜过滤后备用.②将磷酸缓冲液350mL与乙腈150mL（体积比）超声波震荡混匀.2.标准溶液的配制按下表移取不同体积的标准溶液A，置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。
3.试样的制备①分别称取光明纯牛奶、光明高钙奶、伊利舒化奶三种样品15g，置于50mL具塞刻度试管中并做标记为1,2,3，加入30mL乙腈，剧烈震荡6min，加水定容至满刻度，充分混匀后静置3min，用一次性注射器吸取上清液用针式过滤器过滤后，作为高效液相色谱分析用试样。
②称取光明纯牛奶15g于三支50mL具塞刻度试管中并标为4,5,6;分别加入20mL、40mL、60mL的三聚氰胺标准溶液（1mg/L),加入30mL 乙腈，剧烈震荡6min，加水定容至满刻度，充分混匀后静置3min，用一次性注射器吸取上清液用针式过滤器过滤后，作为高效液相色谱分析用试样。
固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量
固相萃取一高效液相色谱法测定液态奶中三聚氰胺含量引言三聚氰胺是一种有机氮化合物，被广泛用作氮肥和杀虫剂。
三聚氰胺在食品中的超标使用会对人体健康造成危害，尤其是对婴幼儿和孕妇。
准确测定液态奶中三聚氰胺的含量对保障食品安全至关重要。
本研究旨在建立一种固相萃取一高效液相色谱法，用于测定液态奶中三聚氰胺含量。
实验方法1. 样品准备将不同来源的液态奶样品分别取样，并冷冻保存以确保样品的新鲜度和完整性。
2. 萃取过程将50ml的液态奶样品加入250ml的锥形瓶中，然后加入20ml的去离子水。
将样品与水充分混合，并进行超声处理5分钟。
接着将样品倒入100ml的固相萃取管中，并采用正向固相萃取法进行样品预处理。
3. 洗脱过程使用10ml甲醇-去离子水（3:1，v/v）进行3次洗脱，用5ml甲醇进行1次洗脱。
将洗脱液合并，并置于50℃水浴中浓缩至干燥。
随后加入2ml的去离子水重新溶解，转移到2ml小瓶中备用。
4. 分析参数采用高效液相色谱法将三聚氰胺化合物在C18色谱柱上分离，采用二极管阵列检测器进行检测，流动相A为0.1%甲酸溶液，流动相B为乙腈。
柱温为30℃，流速为0.8ml/min，进样体积为10μl。
5. 样品检测将萃取液用0.22μm滤膜过滤后，进行高效液相色谱分析。
利用标准曲线法定量测定三聚氰胺的含量。
结果分析通过以上实验方法，我们成功建立了一种固相萃取一高效液相色谱法，用于测定液态奶中三聚氰胺的含量。
我们分别采用标准品对该方法进行了验证，在不同浓度下三次测定的相对标准偏差(RSD)均小于3%，符合测定法的要求。
该方法的检出限为0.05μg/kg，定量限为0.2μg/kg，对实际样品的分析结果也表现出较好的准确性和灵敏度。
结论我们成功建立了一种固相萃取一高效液相色谱法，用于测定液态奶中三聚氰胺的含量。
该方法具有操作简便、准确性高、灵敏度好的特点，可以应用于实际液态奶的质量控制和食品安全监测中。
未来，我们还将探索该方法在其他食品中三聚氰胺含量测定方面的应用，并不断优化方法，提高其分析精度和适用范围。
三聚氰胺检测技术 (1)
四、线扫描式拉曼高光谱成像技术无损检测奶粉三聚氰胺
在671.71 cm-1处的原始图像中，由于受到荧光背景的干扰，每个像素点之间的 拉曼强度值差异并不明显。经过光谱预处理后，校正图像中部分像素点的亮度 较高，说明粉三聚氰胺
四、线扫描式拉曼高光谱成像技术无损检测奶粉三聚氰胺
一、胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的 三聚氰胺
限量值
二、高效液相色谱法测定奶制品中的三聚氰胺
二、高效液相色谱法测定奶制品中的三聚氰胺
配制溶液：流动性，三氯氰胺标准溶液
色谱柱条件 试样提取和净化 标准曲线制备
二、高效液相色谱法测定奶制品中的三聚氰胺
将三聚氰胺标准系列溶液按色谱条件进样，以峰面积 A为纵坐标，质量浓度C为横坐标，绘制标准曲线，进 行线性回归，求得回归方程为A=29320C+18930， R2=0．9999。
三聚氰胺检测技术
一、胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的 三聚氰胺
一、胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的 三聚氰胺
研究对三聚氰胺的分子结构进行了较合理的修饰，制备了两种三聚 氰胺衍生物
一、胶体金免疫层析法快速检测牛奶、奶粉、饲料中的 三聚氰胺
取100μL三聚氰胺标准溶液(或样品试液)于样品垫中，溶液将沿吸水纸方向移动。 首先与胶金垫上的金标抗体结合，并一同继续向吸水纸方向移动，到达T线区域。 在T线处，溶液中的三聚氰胺与包被抗原竞争金标抗体，溶液中的三聚氰胺浓度越大，能够与 包被抗原相结合的金标抗体的量越少。胶体金的颜色(红色)越浅，通过比对颜色的深浅从而判 断三聚氰胺的含量。
3 次取样结果中均检测到了若干三聚氰胺像素点，说明在该试验参数下，奶粉样本中三 聚氰胺浓度的检测限达到了 0.01%。 随着三聚氰胺颗粒的不断增加，二值图像中三聚氰胺像素点的个数逐渐变多。检测结果 表明应用此方法获取的二值图像能够直观的显示出奶粉样本中三聚氰胺颗粒的多少和具 体的位置分布
液态奶中的三聚氰胺检测方法
液态奶中的三聚氰胺检测方法三聚氰胺是一种常见的化工原料，也被用来制作化肥和动物饲料。
三聚氰胺也是一种有毒化合物，过量摄入会对人体健康造成损害，甚至危及生命。
在液态奶生产过程中，必须对三聚氰胺进行严格检测，以确保液态奶的安全性和质量。
本文将介绍液态奶中的三聚氰胺检测方法，以帮助相关从业者更好地了解和掌握相关技术。
液态奶中三聚氰胺的检测方法主要包括化学检测法、光谱检测法和生物传感检测法等多种技术手段。
下面将分别介绍这些方法的原理和应用。
一、化学检测法化学检测法是最常用的三聚氰胺检测方法之一。
其原理是利用化学试剂对三聚氰胺进行反应，生成可定量测定的物质，并通过测定其浓度来确定样品中的三聚氰胺含量。
1. 气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）GC-MS是一种高效分离和高灵敏度检测的方法，可以准确测定样品中三聚氰胺的含量。
其原理是将样品中的三聚氰胺分离出来，然后通过质谱仪来进行检测和定量分析。
这种方法具有分析速度快、分辨率高、准确性高等特点，但需要昂贵的设备和专业的操作技能。
二、光谱检测法光谱检测法是一种基于分子在特定波长下吸收光线的原理来判断样品中三聚氰胺含量的方法。
常见的光谱检测法包括紫外-可见吸收光谱法和荧光光谱法。
1. 紫外-可见吸收光谱法紫外-可见吸收光谱法是一种利用样品对紫外-可见光的吸收特性来进行定量分析的方法。
通过测定样品在特定波长下的吸光度，可以确定其中三聚氰胺的含量。
该方法具有操作简单、成本低、快速等特点，但对样品的预处理要求严格，且受到干扰因素较多。
2. 荧光光谱法荧光光谱法是一种利用样品在激发光激发下产生荧光来进行定量分析的方法。
该方法具有灵敏度高、选择性好、检测速度快等特点，但对仪器和环境要求严格，且操作复杂。
三、生物传感检测法生物传感检测法是一种利用生物分子识别元素来进行定量分析的方法，具有检测灵敏度高、特异性好、操作简单等特点。
而在生物传感检测法中，酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种常用的方法，已被广泛应用于液态奶中三聚氰胺的检测。
三聚氰胺的快速检测方法
三聚氰胺的快速检测方法三聚氰胺是一种有毒化学物质，被广泛用于生产塑料、树脂、涂料、胶粘剂等工业产品。
然而，三聚氰胺也被发现存在于食品和饲料中，对人体和动物健康造成严重危害。
因此，快速、准确地检测三聚氰胺的方法显得尤为重要。
目前，常用的三聚氰胺检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、光谱法等。
这些方法虽然准确可靠，但是操作复杂、耗时长、设备昂贵，不适合于快速大批量检测的需求。
因此，研究人员一直在探索更加简便、快速的三聚氰胺检测方法。
一种被广泛研究和应用的快速三聚氰胺检测方法是免疫分析法。
免疫分析法利用抗体与抗原（三聚氰胺）之间的特异性结合来进行检测。
这种方法具有操作简便、快速高效、灵敏度高、特异性强的优点，因此被广泛应用于食品安全监测领域。
另一种快速三聚氰胺检测方法是基于生物传感技术的检测方法。
生物传感技术利用生物元件对目标物质产生特异性识别和信号转换，通过对生物传感器信号的检测和分析，实现对三聚氰胺的快速检测。
这种方法具有操作简便、灵敏度高、检测时间短的特点，适用于快速大批量检测的需求。
除了免疫分析法和生物传感技术，近年来还出现了一些基于纳米材料和纳米技术的快速三聚氰胺检测方法。
这些方法利用纳米材料的特殊性质，结合传统的化学分析方法，实现对三聚氰胺的快速检测。
这种方法具有操作简便、灵敏度高、检测时间短的特点，适用于快速大批量检测的需求。
综上所述，当前常用的三聚氰胺快速检测方法包括免疫分析法、生物传感技术和基于纳米材料的检测方法。
这些方法具有操作简便、快速高效、灵敏度高的特点，适用于食品安全监测领域和工业生产过程中对三聚氰胺的快速检测需求。
随着科学技术的不断发展，相信会有更多更加简便、快速、准确的三聚氰胺检测方法出现，为保障食品安全和工业生产提供更有力的保障。
液态奶中的三聚氰胺检测方法
液态奶中的三聚氰胺检测方法三聚氰胺是一种有毒化学物质，对人体健康造成严重危害。
在过去的几年中，三聚氰胺被发现在液态奶中，引起了公众的关注和恐慌。
确保液态奶中不含三聚氰胺成为了食品安全的重要问题之一。
为了达到这一目的，科学家们研发了多种不同的检测方法，以确保液态奶中不含有三聚氰胺。
本文将介绍一些常用的液态奶中三聚氰胺检测方法。
液相色谱-串联质谱检测方法是目前常用的一种方法。
这种方法可以快速、准确地检测出液态奶中的三聚氰胺含量。
样品需要经过前处理步骤，通常是使用乙腈或甲醇提取出三聚氰胺。
然后，液相色谱-串联质谱检测方法将提取出的样品进行分离和检测。
这种方法需要专业的设备和操作人员，但可以提供非常准确和可靠的检测结果。
另一种常用的检测方法是酶联免疫吸附法。
这种方法利用特定的抗体或抗原来检测和测定三聚氰胺的含量。
样品中的三聚氰胺会与特定的抗体或抗原结合，然后通过颜色反应或荧光等方法来检测三聚氰胺的含量。
这种方法具有操作简单、快速、灵敏度高等特点，可以应用于大规模的样品检测。
还有一种快速检测试纸法。
这种方法通过在试纸上涂覆含有特定抗体的试剂，当试纸与含有三聚氰胺的液态奶接触时，会产生可见的颜色变化。
这种方法操作简单、快速方便，可以用于现场快速检测。
以上所述的三种方法都各有优缺点，科学家和食品安全监管部门需要根据实际情况选择合适的检测方法。
值得注意的是，检测方法的准确性和可靠性对于食品安全来说至关重要，因此仪器设备的维护和校准也是至关重要的。
在实际生产过程中，为了确保液态奶中不含有三聚氰胺，不仅需要对原料奶进行严格的检测，还需要建立完善的质量管控体系, 加强生产过程中的监控。
食品企业还需要提高员工的安全生产意识，进行相关知识的培训，以确保生产过程中不会发生三聚氰胺等有毒物质的混入。
液态奶中的三聚氰胺检测方法至关重要，不仅需要科学家们不断研发出更加准确、快速、可靠的检测方法，同时也需要食品生产企业加强生产过程中的监控和管理，确保液态奶的质量安全。
原料乳中三聚氰胺快速检测国标发布概要
原料乳中三聚氰胺快速检测国标发布
记者15日从国家质检总局获悉，国家质检总局、国家标准化管理委员会15日批准发布了《原料乳中三聚氰胺快速检测液相色谱法》国家标准，标准自发布之日起实施。
针对奶站、企业在原料乳收购过程中对三聚氰胺快速检测的需要，科技部会同质检总局、农业部、卫生部等部门组织专家开展了快速检测的筛选工作。
通过对126家单位提供的128种快速检测方法进行初筛和现场统一测试，专家认为由中国计量科学研究院提供的原料乳中三聚氰胺快速检测方法是较成熟的方法，建议制定为国家标准。
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附件7
液体乳中三聚氰胺的快速检测
胶体金免疫层析法
(KJ201907)
1范围
本方法规定了液体乳中三聚氰胺的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于巴氏杀菌乳、灭菌乳、调制乳和发酵乳中三聚氰胺的快速测定。
2原理
本方法采用竞争抑制免疫层析原理。
样品中的三聚氰胺与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和试纸条或检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。
通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中三聚氰胺进行定性判定。
3试剂和材料
除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。
3.1试剂
3.1.1 甲醇。
3.1.2 三羟甲基氨基甲烷（Tris）。
3.1.3 1mol/L盐酸：移取83 mL浓盐酸，加入900mL水中，定容至1 L。
3.1.4 甲醇水溶液：准确量取50 mL甲醇和50 mL水，混匀后备用。
3.1.5 稀释液：准确称取6.05 g Tris（3.1.2）和8.5 g 1mol/L盐酸（3.1.3），加水定容至1 L，混匀后备用。
3.2参考物质
参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥99%。
表1 三聚氰胺参考物质中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量
注：或等同可溯源物质。
3.3标准溶液的配制
三聚氰胺标准储备液（1000 μg/mL）：精密称取适量三聚氰胺标准品（3.2），置于10 mL容量瓶中，用甲醇水溶液（3.1.4）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1000 μg/mL的三聚氰胺标准储备液；或可直接购三聚氰胺标准储备液。
4℃避光保存备用，有效期3个月。
—1—
3.4三聚氰胺胶体金免疫层析试剂盒
3.4.1金标微孔（含胶体金标记的特异性抗体）。
3.4.2试纸条或检测卡。
4仪器和设备
4.1移液器：200 µL、1000 µL和5 mL。
4.2涡旋混合器。
4.3电子天平：感量为0.01 g。
4.4环境条件：温度15℃~35℃，湿度≤80%。
5分析步骤
5.1试样制备
取适量有代表性样品充分混匀。
5.2试样提取
准确称取样品0.5 g于离心管中，加入5 mL稀释液（3.1.5），涡旋混匀提取5 min，即得待测液。
注：试样提取过程可按照试剂盒说明书，不做限定。
5.3测定步骤
5.3.1试纸条与金标微孔测定步骤
吸取150~200 μL样品待测液于金标微孔（3.4.1）中，抽吸5~10次使混合均匀，不要有气泡，40℃温育3 min，将检测试纸条（3.4.2）样品端垂直向下插入金标微孔中，40℃温育5 min，从微孔中取出试纸条，进行结果判定。
5.3.2检测卡测定步骤
吸取150-200 μL样品待测液于检测卡加样孔（3.4.2）中，室温反应3-5 min，进行结果判定。
5.4质控试验
每批样品应同时进行空白试验和加标质控试验。
5.4.1空白试验
称取空白试样，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。
5.4.2加标质控试验
准确称取空白试样100 g（精确至0.01 g）置于100 mL玻璃溶液瓶中，加入250 μL三聚氰胺标准溶液（1000 μg/mL）（3.3），使试样中三聚氰胺浓度为2.5 mg/kg，按照5.2和5.3步骤与样品同法操作。
注：可参考标准品的说明书配置操作。
6结果判定要求
通过对比控制线（C线）和检测线（T线）的颜色深浅进行结果判定。
目视结果判读如图1。
6.1无效
控制线（C线）不显色，表明不正确操作或试纸条/检测卡无效。
6.2阳性结果
—2—
6.2.1消线法
检测线（T线）不显色，控制线（C线）显色，表明样品中三聚氰胺含量高于方法检测限，判定为阳性（如图1试纸条/检测卡目视判定示意图）。
6.2.2比色法
检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色浅或几乎不显色，表明样品中三聚氰胺含量高于方法检测限，判定为阳性（如图1试纸条/检测卡目视判定示意图）。
6.3阴性结果
6.3.1消线法
检测线（T线）、控制线（C线）均显色，表明样品中三聚氰胺含量低于方法检测限，判定为阴性（如图1试纸条/检测卡目视判定示意图）。
6.3.2比色法
检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当，表明样品中三聚氰胺含量低于方法检测限，判定为阴性（如图1试纸条/检测卡目视判定示意图）。
—3—
—4—
图1 试纸条/检测卡目视判定示意图
6.4 质控试验要求
空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应为阳性。
6.5 读数仪测定法
按读数仪说明书要求操作直接读取并进行结果判定。
7 结论
三聚氰胺与灭蝇胺有交叉反应，当检测结果为阳性时，应对三聚氰胺结果进行确证。
8 性能指标
8.1 检测限
2.5mg/kg 。
8.2 灵敏度
灵敏度应≥99% 8.3 特异性
特异性应≥85%。
8.4 假阴性率
假阴性率应≤1%。
8.5 假阳性率
假阳性率应≤15%。
注：性能指标计算方法参见附录A 。
试纸条
手持端
C 线 T 线
样品端
检测卡
T 线
C 线 C 线 T 线
T 线
T 线
C 线 C 线 阴性
阳性
阳性
阴性
消线法
比色法
结果无效
检测装置示意图
9其他
本方法所述试剂、试剂盒信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便，在使用本方法时不做限定，可根据试剂盒说明书进行操作。
方法使用者应使用经过验证的满足本方法规定的各项性能指标的试剂、试剂盒。
本方法参比标准为《食品安全国家标准原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》（GB/T 22388-2008）。
本方法使用试剂盒可能与灭蝇胺存在交叉反应，当结果判定为阳性时，应采用实验室仪器方法《食品安全国家标准原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》（GB/T 22388-2008）对三聚氰胺结果进行确证。
—5—
附录A
快速检测方法性能指标计算表
本方法负责起草单位：北京市食品安全监控和风险评估中心（北京市食品检验所）
验证单位：山东省食品药品检验研究院、四川省食品药品检验检测院、江南大学
主要起草人：史娜、吴燕涛、孙蕊、王丽、潘攀、张丽华
—6—。