雷帕霉素诱导胆管癌细胞凋亡的机制研究
PARP抑制剂诱导AML细胞凋亡和自噬的机制研究的开题报告
PARP抑制剂诱导AML细胞凋亡和自噬的机制研究的开题报告一、研究背景急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia, AML）是一种原始造血细胞癌症，其特征为白细胞生成异常，并在骨髓中形成大量原始的、未成熟的白血病细胞，具有快速增殖及侵袭性能，引起骨髓功能障碍。
目前，虽然AML的治疗手段日益增加和完备，但对于某些患者来说，其治疗效果仍不理想。
因此，寻找治疗AML的新靶点已经成为了当前研究的热点方向。
封闭内质网（Endoplasmic Reticulum, ER）是一种分布广泛的细胞内膜系统，负责合成、折叠和修饰大量的蛋白质。
内质网应激（ER stress）是由于生长环境的不良、蛋白合成和折叠的紊乱等原因造成的内质网功能障碍，引起了细胞不适应。
PARP（Poly(ADP-ribose) Polymerase）作为一种关键的DNA修复酶，在DNA损伤修复和基因转录等一系列细胞活动中也起到了重要作用。
最近的研究发现，PARP在ER stress和自噬中也发挥了关键作用。
二、研究目的本次研究旨在探究PARP抑制剂在AML细胞中是否能够诱导ER stress和自噬，并进一步研究这一过程的机制。
三、研究内容与方法1.实验内容（1）选择不同浓度的PARP抑制剂处理AML细胞，并观察其对细胞存活率和凋亡率的影响。
（2）利用Western blot和荧光显微镜技术检测AML细胞中ER stress和自噬标志物的表达情况。
（3）利用siRNA技术抑制PARP的表达，并通过Western blot检测其对ER stress和自噬的影响。
2.实验方法（1）培养AML细胞株，并根据实验需要分成不同组别；（2）选取不同浓度的PARP抑制剂处理AML细胞，采用MTT法检测细胞的存活率；（3）借助Flow cytometry分析AML细胞的凋亡率；（4）采用Western blot检测AML细胞中ER stress和自噬标志物的表达情况；（5）利用荧光显微镜观察AML细胞自噬体在自噬过程中的变化；（6）利用siRNA技术抑制PARP1的表达，检测其对AML细胞中ER stress和自噬的影响。
雷帕霉素增强RSL3对睾丸癌细胞I-10的增殖、侵袭与迁移的抑制作用
睾丸癌是青年人群中最常见的恶性肿瘤［1］。
西方国家发病率在过去20年中上升,手术和以顺铂为基础的化学疗法的结合使得睾丸癌患者的治愈率大于90%［2］。
尽管如此，10%~20%患有转移性疾病的睾丸癌患者不能通过基于顺铂的化疗治愈［3］。
因此，探索治疗睾丸肿瘤的新方法具有研究价值。
铁死亡是一种铁依赖形式的非凋亡细胞死亡，其特征是脂质ROS 的积累［4］。
在细胞和小鼠中进行的遗传学研究确定硒酶谷胱甘肽过氧化物酶（GPX4）是这种形式的细胞死亡的关键调节因子。
GPX4将脂质氢过氧化物转化为脂质醇，这一过程阻止了铁（Fe 2+）依赖的有毒脂质活性氧（ROS ）的形成。
GPX4功能的抑制导致脂质过氧化，并可诱导铁死亡［5,6］。
近年来，人们在设计和开发基于铁死亡诱导的抗癌药物方面做了大量工作，在癌症治疗中引入铁死亡具有很好的治疗潜力［7］。
RSL3是一种常用的铁死亡诱导剂，通过抑制谷胱甘肽Rapamycin enhances inhibitory effect of RSL3on proliferation,invasion and migration of testicular cancer I-10cells in vitroLI Bin,WANG Yue,HOU Fengwei,DU Jiaru,TONG XuhuiSchool of Pharmacy,Bengbu Medical College,Anhui Provincial Engineering Research Center for Biochemical Pharmaceuticals,Bengbu 233030,China摘要：目的探究雷帕霉素增强RSL3对睾丸癌细胞I-10的增殖、侵袭与迁移能力的抑制作用。
方法MTT 法检测RSL3（Type II ）及合用雷帕霉素（RAPA ）作用后I-10细胞的存活率。
将RSL3（0~16μmol/L ）分别以及联合16μmol/L 雷帕霉素作用于睾丸癌细胞I-10，采用MTT 法检测I-10细胞增殖抑制情况，利用集落克隆形成实验检测细胞增殖能力，采用划痕实验和Transwell 小室检测I-10细胞的迁移与侵袭能力，采用流式细胞术检测I-10细胞的脂质活性氧水平，采用GSH 和MDA 检测试剂盒检测细胞中GSH 和MDA 含量，利用Western blot 检测细胞GPX4蛋白表达。
阿霉素诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展
Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｄｖａｎｃｅｓ Ｏ！ｉ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ０ｆ Ａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒ Ａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ａｄｒｉａｍｙｄｎ
ｓｔｕｄｉｅｓ眦ｄｏｎｅ 础ⅢｏｆＡｎａｔｏｍｙ，Ｌｉａｏ肺增ｍｅｄｉｃａｌ ｃｏｌｌｅｇｅ，肺Ｚｈｏｕ １２００１，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｔｏ ｕｔｉｌｉｚｅ ｔｈｅ ａｎｔｉ－ｔｕｎｗｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ，ｌｏｔｓ ｏｆ
万方数据
长和细胞增殖的主要机制，保持这一过程正常的关键是维持 激酶的平衡¨２｜。研究发现旧】，阿霉素诱导肝癌细胞凋亡后， ＰＴＥＮ的ｍＲＮＡ和蛋白表达水平均出现早期升高，后降低，提 示ＰＴＥＮ在细胞凋亡前转录以及蛋白水平上调足以促使细胞 进人凋亡过程，而凋亡发生后，ＰＴＥＮ活性下降。
局部黏着斑激酶（ｆｏｃａｌ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｋｉｎａｓｅ，ＦＡＫ）是ＰＴＥＮ的 蛋白磷酸酶底物之一。它是和ｖ．Ｓｒｃ癌基因相互作用的高度 酪氨酸磷酸化的蛋白，分布于细胞内整合蛋白富集的黏着斑 连接处【Ｉ引，通过多种信号通路在细胞周期调控、黏附、迁移、 生存等多方面发挥重要作用。研究发现，ＦＡＫ在多种上皮及 间充质源的肿瘤中高表达或过度激活。ＦＡＫ活化可以促使 Ｓｒｃ同源体２（ＳＨ２）结构域介导的Ｓｒｃ家族蛋白酪氨酸磷酸 化，如ｐａｘｉｌｌｉｎ、ｐ１３０Ｃａｓ，该复合体还能激活多种蛋白激酶级联 效应¨４．１ ５｜。研究发现旧。阿霉素诱导肝癌细胞凋亡后，ＦＡＫ的 ｍＲＮＡ水平迅速降低，１２５ ０００的ＦＡＫ蛋白在细胞发生大量 凋亡时迅速降低消失，８５ ０００的ＦＡＫ水解片段则在大量凋亡 后出现，提示ＦＡＫ参与阿霉素诱导的细胞凋亡途径，且阿霉 素可以通过抑制ＦＡＫ基因的表达来促进凋亡。 ４ ｗｎｔ通路抑制因子（ＤＫＫ和ＦｒｐａＥ）
mTOR抑制剂雷帕霉素的抗肿瘤作用
mTOR抑制剂雷帕霉素的抗肿瘤作用李亮亮【摘要】哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是参与生命活动的多条信号通路的下游因子,其中就包括PI3K/Akt/mTOR信号通路,在细胞生长、分化、转移和存活中地位显著,已成为癌症治疗的一个重要靶标.第一代mTOR抑制剂雷帕霉素(RAPA)最初作为一种新型的免疫抑制药物在器官移植领域应用广泛.随着对该药物及mTOR信号通路的深入研究,人们慢慢地认识到RAPA 除免疫抑制外还具有诱导肿瘤细胞凋亡、阻断细胞周期、抑制信号传导、影响基因转录水平及其对表观遗传学的调控作用.本文主要综述了近年来雷帕霉素在抗肿瘤方面的研究进展,同时讨论了雷帕霉素抗肿瘤的局限性.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2019(030)002【总页数】4页(P241-244)【关键词】雷帕霉素靶蛋白;雷帕霉素;肿瘤发生;mTOR信号通路;抗肿瘤【作者】李亮亮【作者单位】海南医学院生物学教研室,海南海口 571199【正文语种】中文【中图分类】R979.1雷帕霉素(RAPA)是由智利复活节岛上的土壤链霉菌分泌的产物，属于三烯大环内酯类的化合物。
最初作为低毒强效的抗真菌药物和免疫抑制剂被研发出来，广泛用于抗炎和维持移植器官免疫能力。
随着科学家们对RAPA药理性质及分子机制的深入研究，人们开始认识到RAPA还具有除抗炎、免疫抑制外的多种其他药理作用，如对肿瘤细胞增殖产生抑制、提高机体免疫力、延缓衰老等作用。
近几十年来，研究发现RAPA可以影响多系统肿瘤性疾病，如消化系统、生殖系统、呼吸系统、女性生殖系统等[1-8]。
RAPA的肿瘤抑制作用受到科学家们关注，为此他们做了许多有关的研究并获得了一些成功，2007年FDA批准RAPA治疗肾癌，RAPA衍生物用于治疗肾癌、脑肿瘤、胰腺癌和乳腺癌等。
2015年FDA获批成为淋巴管肌瘤(LAM)和结节性硬化症(TAC)的治疗药物[9]。
211097962_雷公藤红素抗肿瘤作用及机制研究进展
生物技术进展 2023 年 第 13 卷 第 1 期 77 ~ 82Current Biotechnology ISSN 2095‑2341进展评述Reviews雷公藤红素抗肿瘤作用及机制研究进展董立强 ， 王斌 ， 苏适 ， 刘东琦绥化学院，黑龙江 绥化 152061摘 要：雷公藤红素是我国传统中药雷公藤中的天然活性成分，具有抗类风湿、抗炎、抗肿瘤等多种生物学活性。
近年来，雷公藤红素由于低毒、多靶点、广谱性等优势，在抗肿瘤治疗中备受关注。
雷公藤红素可以通过调控PI3K/AKT 、NF -κB 、MAPK 和STAT3等多种信号通路抑制肿瘤增殖、侵袭和转移，诱导肿瘤细胞凋亡。
综述了雷公藤红素的抗肿瘤作用及机制，以期促进雷公藤红素的深入研究与应用。
关键词：雷公藤红素；细胞凋亡；信号通路；抗肿瘤DOI ：10.19586/j.2095⁃2341.2022.0167 中图分类号：R284.1 文献标志码：AProgress on Celastrol in Anti -tumor Effects and MechanismDONG Liqiang ， WANG Bin ， SU Shi ， LIU DongqiSuihua University ， Heilongjiang Suihua 152061， ChinaAbstract ：Celastrol is one of the natural active ingredient in traditional Chinese medicine Tripterygium wilfordii ， which has many biological activities such as anti -rheumatoid ， anti -inflammatory ， anti -tumor and so on. In recent years ， celastrol has attracted much attention in anti -tumor therapy due to its advantages of low toxicity ， multiple targets and broad spectrum. Celastrol can in‐hibit tumor proliferation ， invasion and metastasis ， and induce tumor cell apoptosis via regulating various signaling pathwayssuch as PI3K/AKT ， NF -κB ， MAPK and STAT3 pathway. This paper summarized the anti -tumor effects and mechanism of celas‐trol ， in order to provide reference for the future research.Key words ：celastrol ； apoptosis ； signaling pathway ； anti -tumor雷公藤红素（celastrol ）属于五环三萜类化合物，分离自传统中药雷公藤或南蛇藤的根皮、茎和叶，分子量为450.61，易溶于乙醇、三氯甲烷、二甲基亚砜等有机溶剂［1］。
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白与恶性肿瘤上皮间质转化研究进展
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白与恶性肿瘤上皮间质转化研究进展金凤(综述);刘延庆;钱亚云(审校)【摘要】Mammalian target of rapamycin ( mTOR) is the hub of many important signaling pathways in cells,involved in many physiological and pathological processes,such as cell proliferation,cell cycle regulation,cell migration,etc.Disorded function of mTOR is closely associated with the occurrence and developmentof tumor.The basic research of anti-tumor targeting mTOR is the current hot spot.Epithelial-mesenchymaltransition(EMT) is closely related to the invasion and metastasis of tumor,which is controlled by manytranscription factors and Wnt,transforming growth factor βand Notch signaling pathways.Many studies havefound that mTOR binding protein,signal pathways and related genes are involved in malignant tumor EMTprocess,and mTOR can positively regulate EMT,and change the ability of invasion and metastasisof neoplasms.%哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（ mTOR）是细胞内许多重要信号转导通路的枢纽，参与多种生理与病理过程（如细胞增殖、细胞周期调控、细胞迁移等），其功能失调与肿瘤的发生、发展紧密相关。
雷帕霉素的研究进展及临床应用
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讲 座 与 综 述
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雷 帕霉 素 的研 究 进 展及 临床 应 用
陈丽 平 ， 段 坤峰 ， 王保 兴
【 关 键词 】 雷帕霉素 ； 作用机制 ； 慢性 肾脏 病 ； 应用 ； 研究进展
【 中图分类号】 Ｒ ９ ７ ９ ． ５ 【 文献标识码】 Ａ 【 文章编号】 １ ６ ７ ４ — ３ ２ ９ ６ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ Ｂ一 ０ １ ６ ３ — ０ ２
积物 、 毛细血 管外增生 、 间质浸润 、 小 管萎缩 和间质纤 维化 ］ 。 而在另一项研究 中 ， Ｒ Ａ Ｐ Ａ抑 制 了狼 疮 鼠 （ Ｎ Ｚ Ｂ ｘ Ｎ Ｚ Ｗ） Ｆ １雌性
小 鼠自身抗体的产生 、 免疫球蛋 白在肾小球的沉积及蛋 白尿 的 产生 ， 小 鼠的存活期也 得到 了延长 Ｊ ， 说明 Ｒ Ａ Ｐ Ａ能阻 止狼疮
雷帕霉素 （ ｒ ａ ｐ ａ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ ， Ｒ Ａ Ｐ Ａ） 是一种 新 型大环 内酯类免 疫 抑 制剂 。最新研究表 明： Ｒ Ａ Ｐ Ａ通 过不 同的细胞 因子受 体 阻断 信 号传导 ， 阻断 Ｔ淋 巴细胞及其他细胞 由 Ｇ 期至 ｓ期 的进程 ， 从 而发挥免疫抑 制效应 。Ｒ Ａ Ｐ Ａ 已通 过美 国食 品和 药 品管 理 局（ Ｆ Ｄ Ａ） 认证 ， 临床上表现 出强大 的免疫抑 制作 用 ， 可代替 已 有３ Ｏ多年临床史 的环孢素 ； 而且与 环孢 素相 比 ， Ｒ Ａ Ｐ Ａ 口服液
鼠（ Ｎ Ｚ Ｂ ｘ Ｎ Ｚ Ｗ） Ｆ １雌性小鼠发展成狼疮病 。
３ Ｒ Ａ Ｐ Ａ 的 临 床 研 究 进 展
上市后 ， 迅速成为 世界 各 地器 官移 植者 的 常展做一综述 。
１ Ｒ Ａ Ｐ Ａ 的 作 用 机 制
雷帕霉素说明书
Rapamycin(Sirolimus)说明书修订日期说明书修订日期：：2015.07.13Cat.No ：KGATGR005Store at ：-20 for at least 36 months ℃ For Research Use Only （科研专用）化学数据分子量 914.18DMSO 20 mg/mL化学式C 51H 79NO 13溶解性(25°C)水 <1 mg/mL 乙醇 <1 mg/mL3年 -20℃粉状 CAS 号53123-88-9稳定性6月-80℃溶于DMSO制备储液1 mg 5 mg 10 mg 1 mM 1.0939 mL 5.4694 mL 10.9388 mL 5 mM 0.2188 mL 1.0939 mL 2.1878 mL 10 mM 0.1094 mL0.5469 mL1.0939 mL50 mM---生物活性产品描述 Rapamycin (Sirolimus)是一种选择性的mTOR 抑制剂，IC50为~0.1 nM 。
靶点 mTOR IC50~0.1nM体外研究Rapamycin 作用于HEK293细胞，抑制内源性mTOR 活性，IC50为~0.1 nM,而iRap 和AP21967 作用时，IC50分别为~5 nM 和~10 nM 。
Rapamycin 处理酿酒酵母，诱导细胞周期停在G1/S 期，且抑制翻译。
Rapamycin 显著抑制T98G 和U87-MG 细胞活力，这种作用具有剂量依赖性，IC50分别为2 nM 和 1 µM, 而对U373-MG 细胞没有作用活性，IC50>25 µM 。
Rapamycin(100 nM) 作用于对Rapamycin 敏感的U87-MG 和T98G 细胞，通过抑制mTOR 功能，而诱导细胞周期停在G1期，也诱导自噬而不是凋亡。
体内研究在体内，Rapamycin 处理，特定阻断mTOR 下游靶点，如p70S6K 磷酸化和激活，和PHAS-1/4E-BP1导致的eIF4E 抑制释放, 完全阻断跖肌重量和纤维尺寸的肥厚增高。
胆囊癌的靶向治疗研究进展
胆囊癌的靶向治疗研究进展杜丽文1，刘建生21 山西医科大学，太原 030001；2 山西医科大学第一医院肝胆胰外科，太原 030001通信作者：刘建生，****************（ORCID： 0000-0002-6038-2560）摘要：胆囊癌（GBC）是一种预后极差的恶性肿瘤，外科手术是目前最有效的治疗手段。
但由于该疾病早期缺乏典型症状，患者在确诊时大多已进展至中晚期，失去根治性手术切除机会。
在现有的辅助治疗方法中，靶向治疗是一种特异性较高且副作用较小的治疗手段，对多种癌症的预后产生了积极的效果。
本文通过研究GBC靶向治疗的最新进展，对GBC靶向治疗的研究现状、潜在靶点及靶向药物研究进行综述，以期为GBC患者的临床治疗提供参考。
关键词：胆囊肿瘤；信号传导；治疗学Research advances in targeted therapy for gallbladder carcinomaDU Liwen1， LIU Jiansheng2.（1. Shanxi Medical University， Taiyuan， 030001， China； 2. Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery， The First Hospital of Shanxi Medical University， Taiyuan 030001， China）Corresponding author： LIU Jiansheng，****************（ORCID： 0000-0002-6038-2560）Abstract：Gallbladder carcinoma （GBC）is a type of malignant tumor with an extremely poor prognosis，and at present，surgical operation is the most effective treatment method for this disease. Unfortunately， due to a lack of typical symptoms in the early stage， most patients have progressed to the advanced stage at the time of confirmed diagnosis and lost the opportunity for radical surgery. Among the currently available adjuvant treatments， targeted therapy has higher specificity and fewer side effects and has improved the prognosis of a variety of malignancies. With reference to the latest research advances in targeted therapy for GBC，this article reviews the current research status，potential targets，and targeted medications of targeted therapy for GBC， in order to provide a reference for the clinical treatment of GBC patients.Key words：Gallbladder Neoplasms； Signal Transduction； Therapeutics胆囊癌（gallbladder cancer，GBC）是胆道系统常见的恶性肿瘤之一，占胆道肿瘤的2/3左右，5年生存率仅有5%［1］。
雷帕霉素诱导细胞自噬在衰老相关疾病中的作用
雷帕霉素诱导细胞自噬在衰老相关疾病中的作用吴伯艳;刘新光;陈维春【摘要】哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mammalian target of rapamy-cin, mTOR)是衰老和衰老相关疾病的一个关键调节因子。
雷帕霉素( rapamycin, RAPA)可通过抑制mTOR通路,诱导和促进细胞自噬的发生。
细胞自噬是维持细胞内稳态的主要方式与途径,通过降解多余的、受损的及衰老的蛋白与细胞器,为细胞重建、再生和修复提供必需原料。
早老症( hutchinson-gil-ford progeria syndrome, HGPS )患者细胞中伴随早老蛋白( progerin)的异常聚集；此外,诸如亨廷顿病、帕金森病、阿尔茨海默病等神经退行性疾病细胞内同样出现异常蛋白质的聚集,而这些异常蛋白的清除正依赖于细胞的自噬作用。
由此可见,雷帕霉素是潜在的抗衰老、治疗早老症及衰老相关疾病的重要药物。
该文主要阐述雷帕霉素促进细胞自噬方面的功能及在HGPS、神经退行性疾病方面的应用。
%Mammalian target of rapamycin( mTOR) is a key reg-ulator of aging and aging-related diseases. Rapamycin ( RAPA) induces and promotes the process of cell autophagy through in-hibiting mTOR pathway. Autophagy exerts a crucial role inmain-taining the cellular meostasis, which provides essential materials for cell reconstruction, regeneration and repair via degradating the redundant, damaged, or senescent proteins and organelles. Hutchinson Gilford progeria syndrome ( HGPS ) patients are al-ways accompanied with abnormally accumulated progerin in cells. Similar to HGPS, abnormal protein accumulation is the common pathological feature of neurodegenerative diseases, in-cluding Huntington′s disease, Parkinson′s disease, Alzheimer′s disease and so on. Degradation of these abnormalproteins pre-dominantly depends on cell autophagy. Thus, rapamycin is a po-tential anti-aging drug for HGPS and aging-related diseases thera-py. This view focuses on the effects of rapamycin on cell autoph-agy and clinical application in HGPS and neurodegenerative dis-eases.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】4页(P11-14)【关键词】雷帕霉素;雷帕霉素靶蛋白;自噬;早老症;早老蛋白;神经退行性疾病【作者】吴伯艳;刘新光;陈维春【作者单位】广东医学院衰老研究所，广东东莞 523808; 广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞 523808; 广东医学院生物化学与分子生物学研究所，广东湛江 524023;广东医学院衰老研究所，广东东莞 523808; 广东省医学分子诊断重点实验室，广东东莞 523808; 广东医学院生物化学与分子生物学研究所，广东湛江524023;广东医学院衰老研究所，广东东莞 523808; 广东医学院生物化学与分子生物学研究所，广东湛江 524023【正文语种】中文【中图分类】R-05;R329.25;R339.38;R745.7;R916.4;R977.3雷帕霉素靶蛋白(target of rapamycin, TOR)是一种进化上十分保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，是磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B (PI3K/Akt)信号途径的关键蛋白。
胆管癌实验研究现状与展望
表明，在肝脏中除了肝细胞胆管细胞，还有肝脏干细 胞，这些细胞存在于胆管树最远端的小管分支周围以
及赫林沟（ｃａｎａｌｓ
ｏｆ
续活化。ＩＬ－６是一种重要的致癌因子，在胆管癌的发
生中，它的过表达可能是细胞因子信号抑制因子３
Ｈｅｒｉｎｇ）。在肝脏受到内外理化因
（ＳＯＣＳ一３）沉默的结果，而ＳＯＣＳ一３是炎性因子通路的
病、胆肠引流术、胆石症等。现在越来越多的证据表 明，肝脏的慢性炎症，如丙肝和乙肝也可以导致胆管 癌。目前大部分实验是以肝内胆管癌或肝门部胆管癌
为实验平台进行的。现将部分进展简述如下。 一、胆管癌实验研究现状
因（ＰＴＥＮ）、Ｒａｓ相关区域家族１基因（ＲＡＳＳＦｌ）在胆 管癌患者标本中也发现有突变，这些基因突变可能涉 及到胆管癌发生发展和转移的不同过程。 ３．胆管癌与染色体畸变：在胆管癌患者中发现染 色体异常的概率超过２０％，染色体异常包括，染色体
可观察到胆管腺瘤以及肠上皮化生等癌前病变的发 生。（５）血吸虫感染动物模型：血吸虫感染是目前胆
管癌比较明确的致病因素之一，有研究者利用向仓鼠 体内注入麝猫后睾吸虫囊蚴使其感染，并给予二甲基 亚硝胺喂养，可成功诱发胆管癌的发生。 二、展望 未来对胆管癌的研究必定是多方面的，由于受到
的方法共有以下几种：药物诱导胆管癌动物模型、移植
导动物模型主要有两类，一是结扎胆总管诱导，应用结 扎胆管配合二乙基亚硝胺可诱导仓鼠胆管癌发生，有 学者给予仓鼠胆管内植入尼龙线头，后给予口服含二 氧丙基胺的饮水，诱导胆管癌。该模型主要先造成仓 鼠胆管炎，后在炎症基础上诱导胆管癌。二是人为制
造胆胰管返流动物诱导，方法是手术将动物胆道及胰 管吻合，观察犬、猪或猫等大型动物胆管上皮的改变，
被认为是导致胆管癌直接浸润的重要信号通路，胆管
文末参考文献著录规则之文献类型和标识代码
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雷帕鸣主要临床研究解读
雷帕鸣主要临床研究解读雷帕鸣，作为一种免疫抑制剂，在器官移植领域发挥着重要作用。
为了深入了解其疗效和安全性，众多临床研究纷纷展开。
接下来，让我们一同走进这些研究，解读其中的关键发现。
首先，我们来了解一下雷帕鸣的作用机制。
它主要通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）来发挥免疫抑制作用。
mTOR 在细胞的生长、增殖和代谢等过程中起着关键的调节作用。
通过抑制 mTOR，雷帕鸣能够有效地抑制免疫细胞的活化和增殖，从而降低器官移植后的排斥反应风险。
在一项针对肾移植患者的大规模临床研究中，研究人员将患者随机分为雷帕鸣治疗组和传统免疫抑制剂治疗组。
经过长期的随访观察发现，雷帕鸣治疗组的患者在术后一年内急性排斥反应的发生率显著低于传统治疗组。
这一结果表明，雷帕鸣在预防肾移植后的急性排斥反应方面具有出色的表现。
不仅如此，在另一项关于心脏移植的临床研究中，雷帕鸣同样展现出了良好的效果。
研究发现，使用雷帕鸣的患者心脏移植术后的慢性排斥反应发生率明显降低，并且移植心脏的功能得到了更好的维持。
这对于提高心脏移植患者的长期生存率和生活质量具有重要意义。
然而，雷帕鸣的使用也并非毫无风险。
在临床研究中，一些患者出现了血脂异常、口腔溃疡、贫血等不良反应。
但值得注意的是，通过合理的监测和调整治疗方案，这些不良反应大多可以得到有效的控制和管理。
此外，关于雷帕鸣的用药剂量和血药浓度监测也是临床研究的重点之一。
研究表明，不同个体对雷帕鸣的代谢和反应存在差异，因此需要根据患者的具体情况进行个体化的剂量调整。
通过定期监测血药浓度，可以确保药物在有效治疗浓度范围内，同时减少药物过量导致的不良反应。
在儿童器官移植患者中，雷帕鸣的临床应用也受到了关注。
研究发现，儿童患者对雷帕鸣的耐受性和药代动力学特点与成人有所不同。
因此，在儿童患者中使用雷帕鸣时，需要更加谨慎地制定治疗方案，并密切关注其生长发育和免疫功能的变化。
另一个重要的研究方向是雷帕鸣与其他免疫抑制剂的联合应用。
雷帕霉素研究进展
雷帕霉素研究进展
穆云龙
【期刊名称】《河北化工》
【年(卷),期】2010(000)001
【摘要】对雷帕霉素的免疫抑制机理及发酵、纯化、检测方法、应用等方面进行了简述,以期为雷帕霉素的研究提供参考.
【总页数】3页(P21-23)
【作者】穆云龙
【作者单位】华北制药集团新药开发有限责任公司,河北,石家庄,050015
【正文语种】中文
【中图分类】R979.5
【相关文献】
1.雷帕霉素靶蛋白RNA干扰联合雷帕霉素对人食管癌移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素蛋白基因表达的影响 [J], 陈玉;亚国伟;张威;陈奎生
2.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白介导的自噬在心血管疾病中作用的研究进展 [J], 甘婷; 李景东
3.基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路调控自噬治疗动脉粥样硬化的研究进展 [J], 傅为武;欧阳雅蓉;黄景伟;卢帅;黄冬欢;罗丽琼;王庆高
4.鱼类雷帕霉素靶蛋白信号通路生物学功能的研究进展 [J], 吴龙华;梁化亮;戈贤平;任鸣春
5.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂在心脏移植中的应用研究进展 [J], 左一凡;吴琪;王志维
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雷帕霉素逆转T-ALL Jurkat细胞对糖皮质激素耐药
雷帕霉素逆转T-ALL Jurkat细胞对糖皮质激素耐药顾玲;李强;高举;朱易萍;贾苍松;马志贵【期刊名称】《临床儿科杂志》【年(卷),期】2010(28)5【摘要】目的探讨雷帕霉素能否有效逆转T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)Jurkat细胞对糖皮质激素(GC)的耐药.方法用10 nmol/L雷帕霉素(Rap 组)、1 μmol/L 地塞米松(Dex 组)、10 nmol/L雷帕霉素联合1 μmol/L地塞米松(Rap + Dex 组)和0.05% DMSO和 0.01% 乙醇(对照组)分别处理Jurkat细胞.MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Western blot法分析mTOR及细胞周期、凋亡相关蛋白表达情况.结果 10 nmol/L雷帕霉素能有效抑制mTOR信号通路,逆转Jurkat细胞对GC耐药.雷帕霉素和地塞米松协同作用可有效上调细胞周期抑制蛋白p21和p27的表达,并协同下调细胞周期素D1的表达,从而阻抑细胞在G1期.雷帕霉素协同地塞米松,通过上调Bim表达,活化caspase-3,促进Jurkat 细胞凋亡.结论雷帕霉素可有效逆转T-ALL Jurkat细胞对GC耐药.包含雷帕霉素和地塞米松的化疗方案有望成为治疗耐药T-ALL的有效方案.【总页数】6页(P401-406)【作者】顾玲;李强;高举;朱易萍;贾苍松;马志贵【作者单位】四川大学华西第二医院血液实验室/儿童血液肿瘤科,成都,610041,四川,中国;四川大学华西第二医院血液实验室/儿童血液肿瘤科,成都,610041,四川,中国;四川大学华西第二医院血液实验室/儿童血液肿瘤科,成都,610041,四川,中国;四川大学华西第二医院血液实验室/儿童血液肿瘤科,成都,610041,四川,中国;四川大学华西第二医院血液实验室/儿童血液肿瘤科,成都,610041,四川,中国;四川大学华西第二医院血液实验室/儿童血液肿瘤科,成都,610041,四川,中国【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.雷帕霉素逆转卵巢癌细胞系SKOV3/DDP顺铂耐药及其机制探讨 [J], 徐国才;王东雁;卢淮武;林仲秋;张丙忠;2.雷帕霉素逆转急性淋巴细胞白血病CEM-C1细胞对糖皮质激素耐药的研究 [J], 郭霞;马志贵;李强;周晨燕;高举;朱易萍;顾玲;符仁义;贾苍松;陈艳;李熙鸿3.雷帕霉素逆转骨髓瘤U266细胞黏附介导的耐药 [J], 蒋丹容;康晓平;阙文忠4.雷帕霉素逆转卵巢癌细胞系SKOV3/DDP顺铂耐药及其机制探讨 [J], 徐国才;王东雁;卢淮武;林仲秋;张丙忠5.雷帕霉素对乳腺癌多药耐药细胞的耐药逆转作用初探 [J], 沈香娣;仇容;范兴丽;陈健;刘丹丹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
线粒体促凋亡蛋白Smac_DIABLO及其与肿瘤的关系
Review 综 述线粒体促凋亡蛋白S m ac /DI ABLO 及其与肿瘤的关系高 飞,郭 文(南方医科大学南方医院消化病研究所,广州 510515)[摘要] S m ac /D I ABLO 即第2个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活剂/低pI 的IAP 直接结合蛋白,是近年发现的一种线粒体促凋亡蛋白,存在于线粒体并通过拮抗凋亡抑制蛋白(IAP s)的作用激活caspase 9和caspase 3而诱导细胞凋亡,并可促进肿瘤坏死因子相关的凋亡促使配体(TRA IL)诱导的凋亡。
Sm ac /D I A BLO 还可以通过其N 或C 末端促进肿瘤细胞凋亡、增强肿瘤免疫及影响肿瘤细胞周期等机制抗肿瘤,并且增加肿瘤对放化疗的敏感性。
本文主要就S m ac /D IABLO 的结构功能、作用机制及与肿瘤发生和治疗的关系作一综述。
[关键词] 肿瘤;Smac /D I A BLO;线粒体蛋白质类;促凋亡蛋白质类;凋亡抑制蛋白类[中图分类号] R 730 [文献标识码] A [文章编号] 1000 7431(2007)10 0844 03[作者简介] 高 飞(1983 ),女(汉族),硕士研究生,住院医师C orrespondence to :GUO W en(郭 文) Te:l 020 ******** E m ai:l g w doc @163.co mS m ac /D I ABLO 是2000年7月W ang 实验小组首次报道从H eL a 细胞中分离出的一种新型线粒体蛋白质,命名为第2个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活剂(second m itochon dr i a l der i ved acti vato r o f caspase ,S m ac)[1];同时,V erhagan 实验小组也报道了从293T 细胞中分离出一种蛋白质,并命名为低pI 的I A P 直接结合蛋白(d irect I A P bi ndi ng prote i n w i th lo w pI ,D I ABLO )[2]。
自噬抑制剂氯喹通过线粒体ROS增加顺铂诱导QBC939细胞死亡的敏感性
自噬抑制剂氯喹通过线粒体ROS增加顺铂诱导QBC939细胞死亡的敏感性背景胆管癌组织学起源于胆道被覆上皮细胞,与肝细胞癌分别居于肝胆系统最常见恶性肿瘤的前两位。
相比于肝细胞癌,有较多研究指出,胆管癌具有较明显的原发多药耐药性,对顺铂等化疗药物普遍不敏感。
对于两种不同组织来源的肿瘤细胞——肝细胞癌细胞和胆管癌细胞——可能因代谢差异而导致自身抗氧化能力不同,并因此对顺铂等抗肿瘤药物表现出不同的敏感性。
由于糖代谢与细胞抗氧化能力的密切关系,而顺铂在诱导肿瘤细胞发生凋亡时会增加细胞内ROS水平,尤其是线粒体ROS,因此,推测胆管癌对顺铂耐药可能与其抗氧化能力增强有关。
糖代谢为细胞提供了合成生物大分子所需的原料和各种生命活动所需的能量。
磷酸戊糖途径作为糖代谢的重要分支之一,不仅能生成核苷酸的原料——磷酸核糖,还能产生大量NADPH。
后者是细胞内重要的还原性底物,能够维持GSH的还原性,参与细胞内氧化还原平衡的调节。
自噬是维持细胞代谢功能的必要条件,也可以被线粒体功能紊乱和氧化应激诱导激活。
异常功能的蛋白和细胞器可以通过分子伴侣介导自噬或巨自噬降解,而自噬的降解产物可以参与代谢过程,重新用于生成生物大分子或提供能量。
作为经典的自噬抑制剂CQ,能够抑制肺癌、结肠癌等肿瘤发展,具有治疗肿瘤的潜在可能。
研究指出,自噬被抑制后细胞内ROS水平显著升高,由于自噬与代谢关系密切,推测自噬通过与代谢途径的相互作用发挥维持细胞内环境稳态的作用。
与之相反的,通过抑制自噬是否能够抑制细胞代谢活性,进而降低其抗氧化能力,增加肿瘤细胞对化疗药物敏感性,成为我们所关注的重点。
目的本实验选择肝脏不同组织来源的肿瘤,肝细胞癌Hep G2细胞和胆管细胞癌QBC939细胞,通过对比二者顺铂耐药性差异与代谢、抗氧化能力,探讨自噬抑制剂CQ通过抑制细胞PPP途径、促进细胞内ROS产生等多个途径增加细胞内mt ROS水平,促进顺铂诱导QBC939细胞死亡,进而为通过抑制细胞自噬-溶酶体途径降低细胞糖代谢活性,而增加肿瘤细胞对顺铂的敏感性机制的探索提供新的途径。
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雷 帕霉 素 （ ｒ ａ ｐ ａ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ ， Ｒ Ａ Ｐ Ａ ） 属 大环 内酯 类 抗生素 ， 是 一 种 新 型免 疫 抑 制 药物 …。最 近研 究 发 现 Ｒ Ａ Ｐ Ａ不仅 具有 免 疫 抑 制 的活 性 ，还 具 有 广 泛 的抗 肿 瘤 活性 。 Ｒ Ａ Ｐ Ａ可 以抑 制 多种 消 化 道肿 瘤 细胞 的 生 长 、 侵袭 和转移 ， 如肝癌［ 、 结 肠 癌 …等 。 然而 Ｒ Ａ Ｐ Ａ 对 胆 管 癌 细 胞 生 长 的 作 用 尚 未 见 报 道 。另 外 ， Ｒ Ａ Ｐ Ａ诱 导 细胞 凋 亡 的分 子 机 制 尚未 完 全 阐 明 。本 研 究 通 过 观 察 Ｒ Ａ Ｐ Ａ对 胆 管 癌 细 胞 株 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９生 长 和凋 亡 的 作 用 。 并进一步揭示 Ｒ Ａ Ｐ Ａ 诱 导 凋 亡 发生 的分 子 机制 。 １ 材料 与 方 法 １ ． １ 细胞 培养及 药 物处理 胆 管癌 细胞株 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９ 培养在含 １ ０ ％胎牛血清 ， １ ｍ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ 非必 需氨基酸 和１ ％青 、 链霉 素的 Ｄ Ｍ Ｅ Ｍ培养基 中 ， 在５ ％Ｃ Ｏ ： ， ３ ７ ℃条件 下 培 养 ． 至 培养 基 中细 胞 贴壁 生 长 。 Ｒ Ａ Ｐ Ａ 以Ｄ ＭＳ Ｏ溶 解 。后 续 实验 设 置 Ｐ Ｂ Ｓ组 和 Ｄ ＭＳ Ｏ组 作 为对 照组 。 １ ． ２ ＷＳ Ｔ ． １ 法检测细胞活力 取 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９细胞 接 种于 ９ ６ 孔板过夜 ，加人不同浓度的 Ｒ Ａ Ｐ Ａ （ １ 、 ５ 、 ２ ５ 和 １ ２ ５ ｎ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ ） ． 另设 不 加药 的 Ｐ Ｂ Ｓ对 照组 和 Ｄ ＭＳ Ｏ 对照组 。 每组设 ６ 个平行孔 。 在培养 ４ ８ ｈ 后， 每孔 加入 ２ ０ Ｌ ＷＳ Ｔ ． １工作 液 ，继 续 培 养 ２ ｈ后 采 用 酶标仪检测在 ４ ５ ０ ｎ ｍ波 长下的光吸收值 （ Ｏ Ｄ 值） 。细胞生存率＝ （ 实验组 Ｏ Ｄ值／ 对照组 Ｏ Ｄ值 ）
×１ ０ ０ ％。
２ ５ ｇ ） 饲 养 于 上 海 交 通 大 学 医 学 院 附 属 新 华 医 院 Ｓ Ｐ Ｆ级环 境 的动 物 实验 中心 。 取 ２×１ ０ 个 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９ 细胞进行皮下接 种 。 ２周 后 ， 出现肉眼可见肿块 ， 成瘤率达 １ ０ ０ ％。当荷 瘤 长至 约 ０ ． ５ ａ ｍ 时。 瘤 内注 射 浓度 为 ２ １ ． ４ ｎ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ Ｒ Ａ Ｐ Ａ， 每 ３天 注 射 １次 ， 共 ４次 。设 Ｄ ＭＳ Ｏ和 Ｐ Ｂ Ｓ组 为 对 照 组 。每 ４天 测量肿 瘤 体积 ， 并绘制 生长 曲线 。 体积 计算 公式 ： 体积 （ ｃ ｍ， ） ＝ 长× 宽： ／ ２ 。在 第 ２ ８天 时 处 死 裸 鼠。 １ ． ４ 细 胞 凋 亡 检 测 细 胞 分 为 Ｒ Ａ Ｐ Ａ作 用 组 ． Ｄ ＭＳ Ｏ作用组 ， Ｐ Ｂ Ｓ作 用 组 。分 别 于 ４ ８ ｈ和 ７ ２ ｈ 后通 过 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ． Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ双 染 法 检 测 细 胞 凋 亡 状 况。 结果判定 ： （ １ ） 左 上 象 限为 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ． Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ染 色 阴性 、 Ｐ Ｉ 染 色 阳性 ， 代表坏 死细胞 ； （ ２ ） 左 下 象 限为 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ． Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ和 Ｐ Ｉ均 未 染 色 ， 代 表 活 细 胞： （ ３ ） 右 上象 限 为 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ． Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ和 Ｐ Ｉ 均 染 色， 代 表晚期 凋亡 细胞 ； （ ４ ） 右下 象 限为 Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ． Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ染 色 阳 性 、 Ｐ Ｉ 染 色 阴 性 ，代 表 早 期 凋 亡 细胞 。 １ ． ５ Ｆ ａ ａ ｓ Ｌ 、 ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ． ８ 、 ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ． ３ 和细胞色素 ｃ等 凋亡 相关 蛋 白的表 达变化 在 Ｒ Ａ Ｐ Ａ作用 ４ ８ ｈ后 ． 收集 细胞 ， 提取 浆 蛋 白和核 蛋 白并 定 量 。取 ３ ０ ｇ 蛋 白完 成 变 性 ， 电泳 ， 转膜 ， 封 闭； 各种 一抗 孵 育 过 夜； 二抗孵育 ２ ｈ ， Ｔ Ｂ Ｓ Ｔ冲洗 ； 然后 在暗室里进 行 发光 ， 显影。 最 后 对 蛋 白条 带 相 对光 密 度 进行 分 析 统计。 １ ． ６ 统 计学 分析 用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ４ ． ０软 件 进 行 统 计 分 析 所有 数据 都采 用平 均数 ± 标 准差 （ ｍ ｅ ａ ｎ±Ｓ Ｄ） 方 式表 达 。根据 实 验需 要采 用 ｔ 检验 （ Ｓ ｔ ｕ ｄ ｅ ｎ ｔ Ｓ ｔ ｔ ｅ ｓ ｔ ） 和单 因素 方差 分 析 （ Ｏ ｎ ｅ ． ｗ ａ ｙ Ａ Ｎ Ｏ Ｖ Ａ） 方 法 统计 数据。 以 Ｐ＜０ ． ０ ５表示 显著性 差异 。 所 有实 验均重 复
实用 医学杂 志 ２ ０ １ ３年第 ２ ９卷 第 ８期
雷 帕霉 素诱 导 胆 管 癌 细胞 凋 亡 的机 制研 究
田林烽 黄文杰 秦 一雨 全 志伟
摘要 目的： 探讨 雷帕霉素 （ ｒ ａ ｐ ａ ｍ ｙ ｃ ｉ ｎ ， Ｒ Ａ Ｐ Ａ） 抑制胆 管癌 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９细胞生长的机制 方法： 采 用 ＷＳ Ｔ ． １ 法检测 Ｒ Ａ Ｐ Ａ作 用后 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９细胞的 生长 状况 ：观察 Ｒ Ａ Ｐ Ａ作 用后 Ｑ ＢБайду номын сангаасＣ ９ ３ ９细胞荷 瘤的 生长状 况 ：应用 Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ — Ａ ｎ ｎ ｅ ｘ ｉ ｎ Ｖ 染 色 法检 测 体 外 细 胞 凋 亡 状 况 ； Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ 检测 Ｒ Ａ Ｐ Ａ作 用后 Ｆ ａ ｓ ／ Ｆ ａ ｓ Ｌ 、 ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ 一 ８ 、 ． ３以 及 细胞 色素 Ｃ（ ｃ ｙ ｔ ｏ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ｅ Ｃ ） 凋亡相 关蛋 白的表达 变化 结果 ： Ｒ Ａ Ｐ Ａ 可显 著抑制 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９细胞在 体外 的生
长， 并 呈 现 出明 显 的 量效 关 系 ， Ｉ Ｃ ５ ０ ＝２ １ ． ４ ｎ Ｍ； Ｒ Ａ Ｐ Ａ可 减 缓 荷 瘤 组 织 的 生 长 速度 。Ｒ Ａ Ｐ Ａ 可诱 导 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９细胞
发 生显著凋亡 ， Ｆ ａ ｓ ／ Ｆ ａ ｓ Ｌ 、 ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ． ８和 ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ 一 ３ 、 细胞 色素 ｃ等凋亡相关蛋白表达 亦显著升 高。 结论 ： Ｒ Ａ Ｐ Ａ通 过 激活死 亡受体介导的 外源性和 内源性 凋亡途径诱导 Ｑ Ｂ Ｃ ９ ３ ９细胞发 生显著凋亡 ． 抑制其 生长 关键词 胆管肿瘤 ； 雷帕霉素 ； 外 源性 凋亡 ； 内源性 凋亡