大学食品微生物实验二
食品微生物学实验报告
实验一玻璃器皿的准备、常用仪器的使用及培养基的制备[实验目的]1、系统掌握玻璃器皿的准备方法及常用仪器的使用。
2、掌握一般培养基制备的原则和要求，熟悉一般培养基制备的过程。
[实验原理]一、玻璃器皿的无害处理：1、新购置的玻璃器皿因含有游离碱，一般在2%的盐酸溶液中浸泡数小时后再用清水洗净，也可在洗衣粉水中煮30-60min，取出用清水洗净。
2、常用玻璃器皿洗涤时可用鬃刷蘸取洗衣粉刷洗，然后用自来水冲洗干净。
3、带油污玻璃器皿先将倒空的玻璃器皿用10%的氢氧化钠浸泡半小时或放在5%的苏打液内煮两次，去掉油污，再用洗衣粉和热水刷洗。
4、带菌玻璃器皿经121℃高压蒸汽灭菌20min后，趁热倒去内容物，再用洗衣粉水刷洗干净，以水在内壁均匀分布成一薄层而不出现水珠为油垢除尽的标准。
经以上处理的玻璃器皿，可满足一般实验用。
少数实验对玻璃器皿清洁度要求较高，除用上述方法外，还应先用2%的HCl溶液浸泡数10min，再用自来水冲洗，蒸馏水淋洗2-3次。
有的尚需超纯水淋洗然后烘干备用。
二、玻璃器皿的包扎：吸管、平皿、瓶口等的包扎。
三、玻璃器皿的灭菌：分为两种，高压蒸汽灭菌法和干热灭菌法。
高压蒸汽灭菌法是湿热灭菌中应用最为广泛的一种方法。
其原理是依据在一个密闭的高压蒸汽灭菌器中，水的沸点随水蒸汽压的增加而上升，加压是为了提高水蒸汽的温度。
把待灭菌物品放在灭菌器内，当灭菌器内压力为0.1MPa时，温度可达到121℃，一般维持20min，即可杀死一切微生物的营养体及其孢子。
一般的培养基、玻璃器皿、金属用具、实验服、传染性标本等均可用这种方法有效灭菌。
灭菌的温度及时间视灭菌物品中的微生物种类及数量而定。
干热灭菌法也叫热空气灭菌法。
实验室通常使用恒温控制的电热鼓风干燥箱作为干热灭菌器。
此法常用于空的玻璃器皿、金属器具和其他耐高温的物品（如陶瓷培养皿盖、石蜡油、碳酸钙）的灭菌。
其优点是灭菌器皿保持干燥。
但带有胶皮、塑料的物品、液体及固体培养基不能用此法。
微生物综合实验报告
微生物综合实验报告姓名：杨延景班级：食品1101学号：32指导老师：郭永目录项目一食品中菌落总数的测定（一）前言 (3)（二）实验目的 (3)（三）实验原理 (3)（四）实验器材 (3)（五）实验步骤 (4)（六）实验结果以及分析 (7)（七）国标中微生物菌落总数标注 (7)项目二大肠菌群的测定（八）实验目的 (9)（九）实验原理 (9)（十）实验器材 (9)（十一）实验步骤 (10)（十二）实验结果以及分析 (15)项目三革兰氏染色（一）实验器材 (18)（二）实验步骤 (18)（三）实验结果 (18)四实验感想项目一食品中菌落总数的测定前言随着生活人们生活水平的提高，和社会的发展与进步食品安全问题越来越受到人们的关注，然而食品方面的问题这几年也越来越突出，食品安全问题屡见不鲜。
由前几年的“苏丹红红心鸭蛋”再到这几年的“三聚氰胺奶粉事件”和“瘦肉精事件”还有“地沟油”等等一系列的事件都不得不让人们对食品安全问题高度关注。
然而食品中微生物的菌落总数是用来判定食品被细菌污染的程度即清洁状态及其安全质量，它反映食品在生产过程中是否符合国家食品安全标准要求，以便对被检样品做出适当的食品安全评价。
然而微生物的检测主要依靠菌落总数(colony count)的测定，菌落总数的测定是指食品检样经过处理，在一定的条件下(样品处理、培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧条件)培养后，所得到的每单位食品(1g、1mL或1cm2)中所含细菌菌落的总数。
所以说通过这些实验让我们更好的掌握菌落总数的测定一方面要求和配置；.掌握我国食品安全标准中微生物检验指标及意义；.掌握常见各类食品微生物检验采样方法；.掌握食品微生物检验各项指标检验方法和技能；在我们以后的日常工作和学习中更好的为人们服务。
实训一食品中菌落总数的测定一、实验目的1.学习并掌握食品中菌落总数的原理和基本方法，以判别食品的质量；2.体会食品菌落总数检验的目的和意义。
食品微生物实验
实验方法
1) 斜面接平板
a. 划线法：见平板划线分离法。 b. 点种法：常用于观察霉菌和酵母细胞，轻点 在平板的表面（根霉点一点，曲霉、酵母可 点3-4点）。
2) 平板接斜面：一般是将经平板分散培养得到 的单菌落接种到斜面，以便作鉴定或扩大培 养、保存之用。
实验方法
平板划线
三点接种
实验方法
挑孢子： 将灭过菌的接种针在菌种管斜面上端冷却并湿润后，再
紫外线灭菌法： 一般30W灯管，9m3空间，距地面2m每次打开紫外线 照射0.5h，就使室内空气灭菌。若照射紫外线时先喷 洒石炭酸等化学消毒剂，可增强灭菌效果。紫外线虽 有较强的杀菌力，但穿透力弱，即使一薄层玻璃或水 层就能将大部分紫外线滤除，因此只适用于空气及表 面杀菌。 化学药剂消毒灭菌： 微生物实验室中常用的化学杀菌剂有升汞、甲醛、高 锰酸钾、酒精、碘酒、龙胆紫、石炭酸、漂白粉、新 洁尔灭、煤酚皂溶液，它们有的是杀菌剂，有的是抑 菌剂。
个个肉眼可见的细胞群体，此即为菌落。 接种是指在无菌操作条件下，将某种微生物 的纯种移接到适合其生长繁殖的新鲜培养基中或 生物体内的一种操作过程。实验室常用的接种方
法有斜面接种、穿刺接种、三点接种和液体接种。
实验器材
1. 菌种 实验室环境微生物、大肠杆菌、酿酒酵母、 放线菌及霉菌。 2. 培养基 马铃薯固体培养基、牛肉膏蛋白胨固体培 养基、高氏一号固体培养基
不断搅拌，以免糊底，并防止沸腾外溢； 分装量根据试管大小和实际需要而定，固体培养基装量 约为管高的1/5，液体培养基约为管高的1/4，三角瓶不 超过瓶体的1/2 ；
分装时不要将培养基沾在管（瓶）口上，以免引起污染。
思考题
1. 思考牛肉膏蛋白胨培养基属于何种培 养基？
食品微生物学第2阶段江南大学练习题答案 共三个阶段,这是其中一个阶段,答案在最后。
江南大学网络教育第二阶段江南大学练习题答案共三个阶段，这是其中一个阶段，答案在最后。
考试科目:《食品微生物学》第章至第章（总分100分）一单选题 (共10题，总分值10分，下列选项中有且仅有一个选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。
)1. 在微生物实验室中最常用的高压蒸汽灭菌条件是（）（1 分）A. 135℃～140℃，5～15秒B. 72℃，15秒C. 121℃，15～20分钟D. 100℃，5小时2. 在微生物能量代谢过程中，底物脱氢产生的氢还原力不经呼吸链传递，而直接交给某一内源中间代谢物的氧化类型属于（）（1 分）A. 发酵B. 无氧呼吸C. 黄素蛋白水平呼吸D. 有氧呼吸3. 在微生物学研究与实践中，常用于菌种复壮的措施是（）（1 分）A. 控制传代次数B. 创造良好的培养条件C. 有效的保藏方法D. 纯种分离4. 下列哪种方法杀灭芽孢菌的效果最差（）（1 分）A. 干热灭菌B. 煮沸消毒C. 间歇灭菌D. 高压蒸汽灭菌5. 在现行国家标准中用于食品中大肠菌群检测初发酵试验的是（）（1 分）A. 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤B. 营养肉汤C. 乳糖胆盐培养基D. 伊红美兰培养基6. 下列物质中属于微生物次生代谢产物的是（）（1 分）A. 鞭毛B. 生长因子C. 内毒素D. 色素7. 在细菌总数测定时，结果用cfu表示，其中cfu的含义是（）（1 分）A. 细菌个数B. 细菌活力C. 细菌效价D. 菌落形成单位8. 以下不属于微生物次生代谢产物的是（）（1 分）A. 赤酵母的β-胡萝卜素B. 灰色链霉菌产的链霉素C. 大肠杆菌内毒素D. 啤酒酵母产的酒精9. 使用高压锅灭菌时，上磅前打开排汽阀的目的是（）（1 分）A. 防止高压锅内压力过高，使培养基成分受到破坏B. 排尽锅内有害气体C. 防止锅内压力过高，造成灭菌锅爆炸D. 排尽锅内冷空气10. 在工业发酵中，接种时采用的种子液应处于（）（1 分）A. 稳定期B. 对数期C. 延迟期D. 衰亡期二多选题 (共5题，总分值10分，下列选项中至少有2个或2个以上选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。
《食品微生物检验技术》课程标准 2
《食品微生物检验技术》课程标准课程名称：食品微生物检验技术 课程类型：专业核心课程 适用专业：食品营养与检测 课程学分：8 总学时：1441 课程定位食品微生物检验技术是食品营养与检测专业的一门工学结合的专业核心课程，是食品检验两大工作岗位群之一，实践性、技术性很强。
在掌握与食品卫生检验中的有关微生物特性的基础上，通过系统的检验方法，及时、准确地对食品样品作出食品卫生检验的报告，为食品安全生产及卫生监督提供科学依据。
2 课程目标1.能力目标1.1 掌握微生物检验过程中无菌操作规程；1.2 正确使用光学显微镜、高压蒸汽灭菌锅、干燥箱、均质器、超净工作台等微生物检验有关仪器和设备；基础化学食品生物化学食品检验校内生产训练食品微生物检验技术顶岗实习1、 食品微生物类群鉴别、测定技术；2、 食品微生物检验室建设；3、 食品卫生细菌学检验技术；4、 真菌学检验技术；5、 食品中常见病原微生物检验技术；6、 其他的微生物检验技术1.3 熟练掌握无菌操作技术、培养基制备技术、消毒灭菌技术、分离纯培养和接种技术、染色技术等微生物基本操作技能；1.4 掌握各类食品检样的菌落总数、大肠菌群、乳酸菌、霉菌和酵母菌、致病菌等常规项目的检测技术，能掌握罐头食品商业无菌的检验技术；1.5 熟练分析总结实验结果，并做出实验结果，并作出正确、规范的实验报告。
2.知识目标2.1 理解和掌握无菌操作技术特点，五大类微生物类群的形态特征，细菌的革兰氏染色的原理和方法，光学显微镜的工作原理和技术特点，培养基的配制原则和种类，微生物生长的规律以及影响微生物生长的因素；2.2 熟悉微生物检验的基本程序和要求；2.3 常规项目的检验的卫生学意义及检验程序；2.4 理解《中华人民共和国国家标准食品卫生检验方法微生物部分》（简称国标）；2.5 熟悉常见致病菌的生物学特性，能在食品检验中进行致病菌的鉴别；2.6 检验新技术基本原理。
3.素质目标3.1 培养学生自觉学习新技术、新知识的能力；3.2 重视培养学生的诚信品质、敬业精神和责任意识、遵纪守法意识、团结合作意识；3.3 提高学生的实践能力、创造能力、就业能力。
(完整版)食品微生物检验技术课程标准
食品微生物检验技术》课程标准课程名称：食品微生物检验技术课程代码：0803003课程类别：专业课课程性质：必修课课程学分：4课程学时：64适用专业：食品营养与检验开课学期：第二学期一、课程定位《食品微生物检验技术》为食品营养与检验的专业课，属于职业发展平台中的必修课。
通过学习，学生能够掌握食品微生物检验的基本理论知识、实验操作技术能力，具备食品微生物检测职业素质。
《食品微生物检验技术》是在《分析化学》、《食品生化》等基础上开设的。
为后续的专业课程《食品理化检测技术》、《食品质量管理》、《食品安全控制》、获得食品检验员职业资格证书以及毕业后从事食品检测、食品品质控制等奠定坚实的基础。
二、课程目标食品营养与检验专业开设《食品微生物检验技术》，该课程是我院食品营养与检测专业的必修课程之一，也是核心课程。
安排在第二学期开设，是学生今后从事食品检验工作的必备知识。
本课程总学时数为4X16=64学时，其中理论课时24 学时，实验40 学时。
通过以基础知识和基本技能、食品微生物形态观察、食品微生物数量及大小测定、食品微生物培养及分离等典型实验项目为载体，进行任务型的学习教学设计。
在微生物实验中结合企业目前的检测规范，培养学生的管理能力。
（一）知识目标1、掌握食品微生物检验技术的基础理论、。
2、掌握食品微生物检验的基本方法3、掌握食品卫生细菌学的检测方法4、掌握食品中病原微生物的检测方法5、掌握发酵食品微生物的检测方法（二）能力目标1 •能熟练使用显微镜及维护、2. 能进行微生物的制片及形态观察3. 能进行微生物的计数4 •能测定微生物的大小5. 能进行培养基的制备及灭菌6. 能培养微生物7. 能对微生物纯种分离（三）素质目标1. 团队工作、与人沟通能力。
2. 注意工作保护能力。
3. 提高学生观察、分析和判断问题的能力4. 严谨的工作作风、实事求是的工作态度5. 遵守有关法律法规。
6. 具有安全知识与职业道德。
食品微生物学_第二阶段练习及答案
江南大学网络教育第二阶段练习题考试科目:《食品微生物学》第章至第章（总分100分）__________学习中心（教学点）批次：层次：专业：学号：身份证号：姓名：得分：一单选题 (共10题，总分值10分，下列选项中有且仅有一个选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。
)1. 在微生物实验室中最常用的高压蒸汽灭菌条件是（ C ）（1 分）A. 135℃～140℃，5～15秒B. 72℃，15秒C. 121℃，15～20分钟D. 100℃，5小时2. 在微生物能量代谢过程中，底物脱氢产生的氢还原力不经呼吸链传递，而直接交给某一内源中间代谢物的氧化类型属于（ A ）（1 分）A. 发酵B. 无氧呼吸C. 黄素蛋白水平呼吸D. 有氧呼吸3. 在微生物学研究与实践中，常用于菌种复壮的措施是（ D ）（1 分）A. 控制传代次数B. 创造良好的培养条件C. 有效的保藏方法D.纯种分离4. 下列哪种方法杀灭芽孢菌的效果最差（A ）（1 分）A. 干热灭菌B. 煮沸消毒C. 间歇灭菌D. 高压蒸汽灭菌5. 在现行国家标准中用于食品中大肠菌群检测初发酵试验的是（ A ）（1 分）A. 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤B. 营养肉汤C. 乳糖胆盐培养基D. 伊红美兰培养基6. 下列物质中属于微生物次生代谢产物的是（ D）（1 分）A. 鞭毛B. 生长因子C. 内毒素D. 色素7. 在细菌总数测定时，结果用cfu表示，其中cfu的含义是（ D ）（1 分）A. 细菌个数B. 细菌活力C. 细菌效价D. 菌落形成单位8. 以下不属于微生物次生代谢产物的是（C ）（1 分）A. 赤酵母的β-胡萝卜素B. 灰色链霉菌产的链霉素C. 大肠杆菌内毒素D. 啤酒酵母产的酒精9. 使用高压锅灭菌时，上磅前打开排汽阀的目的是（ D ）（1 分）A. 防止高压锅内压力过高，使培养基成分受到破坏B. 排尽锅内有害气体C. 防止锅内压力过高，造成灭菌锅爆炸D. 排尽锅内冷空气10. 在工业发酵中，接种时采用的种子液应处于（ B ）（1 分）A. 稳定期B. 对数期C. 延迟期D. 衰亡期二多选题 (共5题，总分值10分，下列选项中至少有2个或2个以上选项符合题目要求，请在答题卡上正确填涂。
食品微生物实验讲义
试验一培养基的配制及灭菌【目的要求】1．了解培养基的概念、种类及用途2．了解培养基的配制原理及其常规配制程序3．学习和掌握细菌、放线菌、霉菌、酵母菌常用培养基的配制方法。
【基本原理】培养基是指利用人工方法将适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的各种营养物质混合配制而成的营养基质，主要用于微生物的分离、培养、鉴定、菌种保藏等方面。
自然界中微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基种类很多。
不同培养基一般都应含有微生物生长繁殖所需的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水等营养成分。
此外，为了满足微生物生长繁殖的要求，还必须控制培养基的pH值。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种用于培养细菌的培养基，属于半合成培养基。
高氏一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。
马丁氏培养基和豆芽汁葡萄糖培养基分别用于霉菌和酵母菌的分离培养。
【材料与用品】1．材料与试剂牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、可溶性淀粉、琼脂、黄豆芽、NaCl、KNO3、K2HPO4、MgSO4、FeSO4、KH2PO4、MgSO4•7H2O、NaOH溶液（1mol/L）。
【仪器与用品】天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、pH试纸、棉花、纱布、牛皮纸、线绳、报纸等。
一、肉膏蛋白胨培养基的配制1．培养基成分牛肉膏0. 3g蛋白陈1gNaCl 0.5g琼脂 1.5g水100mlpH 7.2~7.4 2．配制方法（1）称量及溶化：分别称取蛋白胨和NaCl的所需量，置于唐瓷缸中，加入所需水量的2／3左右的蒸馏水；用玻璃棒挑取牛肉膏置于另一小烧杯中，进行称量。
然后加入少量蒸馏水于小烧杯中，加热融化，倒入上述唐瓷缸中。
将唐瓷缸加热，用玻璃棒搅拌，使药品全部溶化。
（2）加琼脂：加入所需量的琼脂，加热融化。
（3）定容：将溶液倒入量筒中，补充水量至所需体积。
（4）调pH：待溶液冷至室温时，用1mol/l NaOH溶液调pH至7.2~7.4。
食品微生物实验报告
食品微生物实验篇一：霉菌的培养与形态学观察：实验一真菌培养基的配制与灭菌实验目的：〔1〕了解培养基的配置原理和方法，掌握别离培养微生物的有关准备工作。
〔2〕掌握高压灭菌方法及原理实验原理：〔1〕培养基的制备原理：培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
从营养角度分析：营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力；一定的氧化复原电位；适宜的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。
加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。
但屡次反复融化，其凝固性降低。
〔2〕湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。
在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。
在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
实验材料与方法配制培养基所需器材实验设备：高压蒸汽灭菌器。
实验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码、称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。
培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及考前须知高压灭菌条件：121.3℃，15min。
含糖培养基113℃，15min。
倒平板电炉加热灭菌好的培养基翻开平皿包装倒平板〔10块〕考前须知：空气环境无菌〔应在酒精灯火焰周围无菌区〕。
a.在酒精灯火焰处，倾斜翻开瓶口。
b.瓶口要过火焰。
c.左手掀开平皿小口。
d.倾注满皿底再多一点，约10ml〔7cm直径平皿〕。
e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。
f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。
分析与讨论〔1〕如何证明培养基灭菌是否彻底把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。
2016年4月食品微生物学(二)真题
A101·03281绝密启用前2016年4月江苏省高等教育自学考试食品微生物学（二）试卷(通卡)（课程代码03281)本试卷分为两部分，满分100分，考试时间150分钟。
第一部分为选择题，1页至2页，共2页。
应考者必须按试题顺序在“答题卡”上按要求填涂，答在试卷上无效。
第二部分为非选择题，3页至4页，共2页。
应考者必须按试题顺序在“答题卡”上作答，答在试卷上无效。
第一部分选择题（共20分）一、单项选择题（本大题共20小题，每小题1分，共20分)在每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，请将其选出并将“答题卡”的相应代码涂黑。
错涂、多涂或未涂均无分。
1.第一个观察到并记录微生物细胞的人是A.巴斯德B.列文虎克C.柯赫D.哈拉尔德2.细菌的革兰氏染色中最关键的步骤是A.结晶紫初染B.碘液媒染C.乙際脱色D.蔷红复染3.在各类细菌中着生鞭毛最普遍的微生物是A.螺旋菌B.杆菌C.球菌D.放线菌4.是否产生芽孢是细胞菌种的生物学特征，其中最主要的产芽细菌是A.革兰氏阳性杆菌B.球菌C.螺旋菌D.产甲烷细菌5.放线菌的菌体呈分枝丝状体，因此它是一种A.多细胞的真核微生物B.单细胞真核微生物C.多核的原核微生物D.无壁的原核微生物6.属于霉菌无性孢子的是A.子囊孢子B.孢囊孢子C.卵孢子D.接合孢子7.啤酒酵母菌的生活史中营养细胞以哪种形式存在？A.双倍体B.单倍体C.单双倍体共存D.双核体8.单纯扩散和促进扩散的主要区别是A.物质运输的浓度梯度不同B.前者不需能量，后者需要能量C.前者不需要载体，后者需要载体D.溶质运送方向A 101•03281 食品微生物学（二）试卷第1页（共4页）9.微生物分批培养时，在延迟期A.微生物的代谢机能非常不活跃B.菌体体积增大C.菌体体积不变D.菌体体积减小10.利用冰箱保存斜面菌种，一般将温度控制在A.o℃B.4~5℃C.10℃D.5~10℃11.细菌的生长曲线中，新繁殖菌数和衰亡菌数几乎相等的是A.延滞期B.对数期C.稳定期D.衰亡期12.不能利用分子氮的微生物是A.根瘤菌B.弗兰克氏菌C.霉菌D.固氮菌13.原生质体融合育种中最常用的化学促融合剂是A.聚乙二醇B.EDTAC.磷酸盐D.硫酸二乙酯14.耗能型污水处理方法是A.氧化塘法B.生物转盘法C.厌氧消化法D.洒水滤床法15.BOD的测定有助于确定A.废水有机物的污染程度B.土壤的过滤能力C.100mL水样中的细菌数D.生态系统中的生物群类型16.菌种保藏的具体方法很多，其中菌种保藏期最长的是A.冰箱保藏B.石油蜡封藏C.砂土管法D.液氮保藏法17.导致菌种发生退化的主要原因是A.基因突变B.培养基不适合C.传代过程中出现杂菌污染D.保藏方法不当18.土壤中三大类群微生物以数量由多到少的排序为A.细菌>真菌>放线菌B.细菌>放线菌>真菌C.放线菌>细菌>真菌D.真菌>细菌>放线菌19.在酶联免疫吸附测定(ELISA)终结时通过哪种现象判断实验结果？A.产生了放射性B.看见了凝块反应C.细胞被裂解D.发生了颜色变化20.细菌在五界系统的分类中属于A.病毒界B.原核生物界C.真菌界D.原生生物界第二部分非选择题（共80分）二、填空题（本大题共9小题，每小题1分，共9分)21.微生物学奠基期的代表人物是，他因为发现导致肺结核的结核分枝杆菌而获得了诺贝尔奖，被称为细菌学的奠基人。
《食品微生物》实验教学大纲
《食品微生物学》课程实验教学大纲实验一微生物检验常规试验预备（4个学时）[目的与要求]1.熟悉菌落总数测定和大肠菌群检验所需的各种培养基的制备。
熟悉高压蒸汽灭菌器的使用。
2.熟悉玻璃器皿的包装与干热灭菌方法。
[主要内容]：1 研钵、剪刀、镊子、吸管、平皿的包扎与干热灭菌。
2 实验所需培养基（营养琼脂、EMB 琼脂、乳糖胆盐发酵管）和生理盐水的配制、分装、包扎和高压蒸汽灭菌。
1）配制700 mL 生理盐水（0.9%NaCl ），分别分装与5 个盐水瓶，每瓶90 mL；分装18 支试管，每管9 mL 。
2）配制乳糖胆盐培养基（发酵管）200 mL，并分装于小试管各3 mL ，每管中加入一个充满培养基的小倒管，注意一定不能有气泡。
（配方：2%蛋白胨，0.5%猪胆盐，1%乳糖，调pH7.4，然后加入0.4%溴甲酚紫 2.5ml/100ml ）3）配制普通琼脂培养基400ML ，分装于2 个三角瓶。
（0.5%NaCl ，1%蛋白胨，0.3%牛肉粉（膏），pH7.4，琼脂粉 1.5%）4）配制伊红美蓝培养基300 mL。
（配方：蛋白胨1%，NaCl 0.5%，牛肉膏0.3%，pH7.4，琼脂粉1.5%，加热溶化后加入乳糖1%、2%伊红水溶液2 mL/1000 mL 、0.65%美蓝1 mL/1000mL）5）TTC 培养基（1）2%乳糖发酵管40 支，每管 2.5ml（2%乳糖，2%蛋白胨）。
（2）TTC 培养液100ml（2%蛋白胨，1%Nacl，1%Na2HPO4.12H2O,0.4% 十二烷基硫酸钠，PH7.4）（3）灭菌后加10%TTC8ml 后分装于（1），每管加 2.5ml。
6）DC 培养基（0.5%蛋白胨，0.5%Nacl ，1%乳糖，0.3%K2HPO4.3H2O ，0.2%柠檬酸铁铵，琼脂粉0.7%）溶于水后调PH7.2，加入10%去氧胆酸钠1ml 及0.4%溴麝香草酚兰 1.6ml。
[思考题]1 配制培养基时的一般原则和注意事项？2 使用高压灭菌器和恒温干燥箱的注意事项？实验二菌落总数测定（4个学时）[目的与要求]通过本试验要求掌握食品的菌落总数测定的方法，菌落计数和报告方式，以及经常食用的各类动物性食品的菌落总数标准。
2024版《食品微生物学》电子教案
03 食品中的微生物
2024/1/28
11
食品中常见的微生物种类
01
02
03
细菌
包括乳酸菌、大肠杆菌、 沙门氏菌等，广泛存在于 各类食品中。
2024/1/28
真菌
如酵母菌、霉菌等，常见 于发酵食品和潮湿环境中。
病毒
虽然不直接在食品中生长， 但可通过食品传播，如诺 如病毒、轮状病毒等。
12
食品中微生物的来源与污染途径
《食品微生物学》电子教案
2024/1/28
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目录
• 课程介绍与教学目标 • 微生物基础知识 • 食品中的微生物 • 食品微生物检测技术 • 食品微生物控制技术 • 食品微生物学实验指导
2024/1/28
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01 课程介绍与教学 目标
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食品微生物学概述
食品微生物学的定义
研究食品中微生物的种类、数量、生 理生化特性以及与食品相互关系的科 学。
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实验三：酵母菌的形态观察及死活鉴定
01 实验目的
学习酵母菌的形态特征和分类方 法，掌握酵母菌死活鉴定的原理 和操作步骤。
02
实验原理
酵母菌是一类单细胞真菌，具有 多种形态和生理特征。通过观察 酵母菌的形态和生理特征，可以 对其进行分类和鉴定。酵母菌的 死活鉴定可以通过观察其细胞壁 完整性和细胞质流动性来判断。
实验步骤
制备霉菌涂片、观察霉菌形态、进行分类鉴定、记 录实验结果。
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实验原理
霉菌是一类多细胞真菌，具有多种形态和生理特征。 通过观察霉菌的形态和生理特征，可以对其进行分 类和鉴定。霉菌的分类鉴定主要依据其菌丝体特征、 孢子形态和菌落特征等。
食品微生物学实验
《食品微生物学实验》是为生物工程、生物技术等专业选修课程《食品微生物学》开设的实验，包括两部分内容：一是微生物发酵食品加工，如甜酒酿的酿制，酸乳的制作、豆腐乳的制作、面包的制作等；二是食品中微生物的检验，包括常规检验如菌落总数、大肠菌群的检验和致病性微生物的检验等。
第一篇微生物食品加工实验一甜酒酿的制作一、目的1、通过甜酒酿的制作了解酿酒的基本原理。
2、掌握甜酒酿的制作技术。
二、原理以糯米（或大米）经甜酒药发酵制成的甜酒酿，是我国的传统发酵食品。
我国酿酒工业中的小曲酒和黄酒生产中的淋饭酒在某种程度上就是由甜酒酿发展而来的。
甜酒酿是将糯米经过蒸煮糊化，利用酒药中的根霉和米曲霉等微生物将原料中糊化后的的淀粉糖化，将蛋白质水解成氨基酸，然后酒药中的酵母菌利用糖化产物生长繁殖，并通过酵解途径将糖转化成酒精，从而赋予甜酒酿特有的香气、风味和丰富的营养。
随着发酵时间延长，甜酒酿中的糖分逐渐转化成酒精，因而糖度下降，酒度提高，故适时结束发酵是保持甜酒酿口味的关键。
三、材料1、材料：糯米、酒药2、仪器和器具：手提高压灭菌锅，不锈钢丝碗，滤布，烧杯，不锈钢锅。
四、流程原料选择→洗米蒸饭→淋水降温→落缸搭窝→接种→保温发酵→后熟→质量评估五、方法1、洗米蒸饭将糯米淘洗干净，用水浸泡4h，捞起放于置有滤布的钢丝碗中，于高压锅内蒸熟（约，9min），使饭“熟而不糊”。
2、淋水降温用清洁冷水淋洗蒸熟的糯米饭，使其降温至35℃左右，同时使饭粒松散。
3、落缸搭窝将酒药均匀拌入饭内，并在洗干净的烧杯内洒少许酒药，然后将饭松散放入烧杯内，搭成凹形圆窝，面上洒少许酒药粉。
盖上培养皿盖。
4、保温发酵于30℃进行发酵，待发酵2天后，当窝内甜液达饭堆2/3高度时，进行搅拌，再发酵1天左右即可。
六、结果1、发酵期间每天观察、记录发酵现象。
2、对产品进行感官评定，写出品尝体会。
七、思考1、制作甜酒酿的关键操作是什么2、发酵期间为什么要进行搅拌实验二酸乳的制作一、目的1、掌握酸乳制作原理2、学会酸乳的制作方法二、概述酸奶因具有清新爽口的味觉而倍受欢迎 , 又由于酸乳中会有乳酸菌的菌体及代谢产物,它对肠道内的致病菌有一定的丑掣作用,故对人体的肠道消化道疾病有良好的治疗效果。
食品微生物学 第二次章节测试
食品微生物学第二次章节测试1、下列微生物中属于单细胞真核微生物类群的是()。
[单选题] *A、细菌B、酵母菌菌(正确答案)C、霉菌D、放线菌2、霉菌中的( )具有假根是 [单选题] *A、米根霉B、米根霉(正确答案)C、高大毛霉D、黑根霉3、根霉的无性繁殖孢子为( )。
[单选题] *A、分生孢子B、孢囊孢子(正确答案)C、粉孢子D、厚壁孢子4、如果长大的子细胞与母细胞并不立即分离，其间仅以狭小的面积相连，这种藕节状的细胞串就称为()。
[单选题] *A、假菌丝(正确答案)B、真菌丝C、有隔膜菌丝D、无隔膜菌丝5、溶源性细胞形成的主要原因是由于( )的侵染造成的。
[单选题] *A、类病毒B、温和噬菌体(正确答案)C、病毒D、烈性噬菌体6、噬菌体与细菌的关系为( )。
[单选题] *A、互生B、寄生(正确答案)C、猎食D、拮抗7、下图是噬菌体侵染细菌的示意图，侵染细菌的正确顺序应是( )[单选题] *A．BDAEC(正确答案)B．ABCDEC．BDEACD．DBAEC8、V.P实验生化依据是某些细菌发酵糖产生()。
[单选题] *A、乳酸B、乙酰甲基甲醇C、2,3丁醇(正确答案)D、丁酸9、碳素营养物质对微生物的主要功能是( )。
[单选题] *A．构成细胞物质B．提供能量C．A与B两者(正确答案)D．调节渗透压10、微生物进行生物氧化，发酵作用的最终电子受体是( )。
[单选题] *A．氧B．无机物C．有机物(正确答案)D．水11、用化学成分不清楚或不恒定的天然有机物配成的培养基称为( )。
[单选题] * A．天然培养基(正确答案)B．半合成培养基C．合成培养基D．加富培养基12、实验室常用的培养酵母的培养基是( )。
[单选题] *A、牛肉膏蛋白胨培养基B、马铃薯培养基C、高氏一号培养基D、麦芽汁培养基(正确答案)13、简单扩散和促进扩散的主要区别是( )。
[单选题] *A、物质运输的浓度梯度不同B、前者不需能量，后者需要能量C、前者不需要载体，后者需要载体(正确答案)D、前者需要能量，后者不需能量14、微生物的六种营养要素中哪个需要量最少？() [单选题] *A．碳源B．氮源C．能源D．生长因子(正确答案)15、利用选择培养基的原理，用富集培养法富集醋酸菌时须添加的营养物是()。
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四、实验步骤：
革兰氏染色：涂片→干燥→固定 →草酸铵结晶紫染色1分钟 →水洗→ 碘液媒染1分钟 →95％酒精脱色15～ 20秒→水洗→蕃红复染2分钟 →水洗 干燥→镜检。
2、荚膜染色法：涂片→干燥→醋酸
结晶紫液染色2分钟→20％硫酸铜液 冲洗→干燥→镜检。 五、实验结果与讨论：
1、大肠杆菌在显微镜 下显————颜色，为G?。
2、金黄色葡萄球菌在显微镜 下显————颜色，为 G?。
3、绘 出硅酸盐细菌图
4、空气微生物菌落数计数
50000N
每立方米空气细菌=——————=78.6N
A T
预习：培养基的制备与灭菌
利用革兰氏染色法可将细菌区分为两 大类，但并不是所有细菌都可明确 区分为革兰氏阳性或阴性，有的细 菌革兰氏染色不定菌。• 此，必须 因 选 用不同培养基和培养条件，进行 多次反复试验，才能大致表明革兰
氏阳性或阴性菌
2 、 细 菌 荚 膜 染 色 (Bacteria grellung staining) ：荚膜是包围在某些细菌细 胞外面的一层粘液性多糖类物质，不易 染色,用Tyler 三、实验材料：
实验二
革兰氏染色和荚膜染色
一、实验目的：
1、学习染色片的制作 2、熟练无菌操作技术、进一步巩固油镜的使 用 3、掌握革兰氏染色法的原理及其在细菌分类 中的作用 4、了解荚膜染色的原理和方法
二、 染色法，细菌先经碱性染料着色，用媒 染剂处理后以脱色剂脱色，最后复染， 若细菌菌体仍保持原来的染料颜色。 `革兰氏阳性菌(G＋)• 若被脱色剂脱色， ， 染上复染料的颜色，称革兰氏阴性菌(G －)• 1QAZ 。
(1)在营养琼脂培养基上培养18～24小时 大 肠 杆 菌 ( E.coli) 和 金 黄 色 葡 萄 球 菌 (Staphylococcus
aureus)； (2)草酸铵结晶紫液；(3)路哥尔
碘液(Lugol's iodine solutin)；(4)95％酒 精；(5)蕃红液； (6)接种环；(7)载玻片； (8)蒸馏水；(9)废液缸；(10)洗瓶；(11)吸 水纸；(12)酒精灯；(13)火柴；(14)玻璃铅 笔；(15)显微镜；(16)二甲苯；(17)香柏油； (18)擦镜纸 (19)•shby无氮培养基上培养3天 A 的 硅 酸 盐 细 菌 ( Bacillus mucilaginosus) (20)Tyler氏醋酸结晶紫液；(21)20％硫酸铜