甘蓝下胚轴原生质体再生植株
蔬菜种子学 ：第十章：甘蓝良种繁育
圆头类型品种在长江流域作春甘蓝 栽培易发生早期抽薹现象，而尖头 类型的品种在同样的栽培条件下一 般抽薹较少。平头类型的品种的抽 薹情况介于上述二者之间。
注意：在引种工作中，应注意品 种冬性的强弱。
二、 开花授粉习性
或母系选择法。
（三）杂种优势的利用 1 利用自交不亲和系配制杂种一代 如京丰1号、晚丰、报春、新平头、夏
光等。 2 自交不亲和系的实用标准 蕾期自交亲和指数大于5， 花期自交亲和指数小于1， 兄妹交亲和指数小于2。 3 克服自交不亲和性的省工办法
开花期每隔1-2天喷一次5%食盐水
五、良种繁育
（一）甘蓝的种子繁殖：
田间管理与甘蓝的一般留种田相同，经冬贮后， 下年春定植、采种。露地定植时间为3月中旬， 父母本行比一般按1∶1的比例隔行栽植。父母 本相间种植，定植密度6.0～9.0万株/hm2。
若父、母本花期不遇，可采取摘心措施调节花 期。如果双亲的花期相差7～10天，可将早开 花亲本的主茎和一级侧枝的顶端掐掉，以促进 二、三级分枝的发育，使其花期相遇。如果末 期花不一致时，可将花期长的亲本的花枝末梢 打掉。此外还应做好去杂去劣、适时切包、放 蜂授粉及防止倒伏等。
1 一代杂种种子的繁殖
2 定型品种（自由授粉品种）的种子繁殖。
甘蓝的留种方法因地区而异，长江流域 及以南地区，选出的种株可直接栽在留种地。 北方可栽在阳畦内越冬或切除外叶后在窖内 贮藏越冬，第二年春暖后再栽到露地．
留种植株应在种性较纯的大田内选择，或 专门设置留种田，在留种田内去杂去劣。
（二）种株的选择
结球甘蓝常规品种良种生产
结球甘蓝良种生产多采用成株采种法或 半成株采种法进行。
植物体细胞不对称杂交研究进展
收稿日期:2003-12-08作者简介:刘拥海(1972-),男,汉族,博士,肇庆学院生物系副教授,现从事细胞生物学和植物生理学等方面的科研和教学工作。
基金项目:肇庆学院自然科学研究项目(0305)资助文章编号:1008-9632(2004)02-0010-04植物体细胞不对称杂交研究进展刘拥海,俞 乐(肇庆学院生物系,广东肇庆 526061)摘要:介绍了近代的植物体细胞杂交研究发展历程,进一步综述了近年来植物不对称体细胞杂交和植物配子-体细胞杂交方面的研究进展以及存在的困难。
关键词:体细胞;不对称杂交;植物中图分类号:Q943文章标识码:A近代的植物体细胞杂交研究起步于20世纪70年代,Po wer 等[1]于1970年提出了体细胞杂交设想并进行了原生质体诱导融合的研究,1972年美国Carlson 等[2]报道了首例粉蓝烟草与郎氏烟草两种不同的烟草原生质体融合并首先得到了种间体细胞杂种;1978年Melchres 等第一次得到的番茄与马铃薯属间体细胞杂种[3];随后Kasaka 和Ka me ga [4]报告将番茄叶肉原生质与胡萝卜悬浮培养细胞原生质体进行电融合,经选择获得科间杂种。
近年来人们在体细胞之间杂交成功的基础上人们开始了配子-体细胞杂交的研究。
Pental 等[5]用粘毛烟草小孢子四分体原生质体与烟草的体细胞原生质体融合成功得到了三倍体植株,即所谓配子-体细胞杂交,以区别于常规的体细胞杂交。
1 植物体细胞之间不对称杂交的研究进展体细胞杂种按照融合产物的细胞核组分来看,可以分为对称性和非对称性细胞杂种两类。
对称性细胞杂种含有来自双亲的全部染色体组成;而非对称性细胞杂种则常常有一个融合亲本的染色体组成发生部分丢失或单向丢失。
不对称性杂交又分为两种:自发的不对称性和诱导的不对称性。
一般来说,对称融合多形成对称杂种,其结果是在导入有用基因(或优良性状)的同时,也带入了亲本的全部不利基因(或性状),而非对称融合在一定程度上克服了体细胞不亲和性,可以得到只转移部分基因的杂种即非对称细胞杂种,使育种周期大大缩短。
现代生物技术在蔬菜育种中的应用
现代生物技术在蔬菜育种中的应用摘要从基因工程、细胞工程方面概述了生物技术在我国蔬菜育种中的研究现状，简要分析了我国蔬菜育种中存在的问题，并对生物技术在我国蔬菜育种中的发展趋势进行了展望。
关键词生物技术；蔬菜育种；应用近年来，随着生物技术的发展，人们用于改造蔬菜作物遗传特性的方法越来越多。
生物技术在蔬菜育种中的应用也逐渐广泛。
生物技术(bioteehnology)是指利用生物学原理，对生物进行一些遗传操作，改良作物的遗传特性，获得某些适用于人们特殊需要的新品种的技术。
生物技术包括基因工程(gene engineering)、细胞工程(cell engineering)、蛋白质工程(protein engineering)、发酵工程(ferment engineering)和酶工程(enzyme engineering)。
1 基因工程在蔬菜育种上的应用基因工程是以植物组织、细胞或原生质体为受体系统，导人目的基因，改良作物农艺性状的一种育种方法，使育种目标更明确、操作更直接、程序更精简。
目前，基因工程在蔬菜育种中的应用主要有抗病毒基因的转化、抗虫基因的转化、抗逆基因的转化、抗除草剂基因的转化及在品质改良方面的应用。
1.1抗病毒基因的转化蔬菜抗病毒基因的转化是通过遗传转化将病毒外壳蛋白编码基因转入受体细胞中表达，目前这种技术已在辣椒、甘蓝、菠菜、芥菜、马铃薯、豌豆、番茄、黄瓜、南瓜、甜瓜和生菜等蔬菜上应用。
近10年来，人们利用转基因技术在植物抗病毒病育种研究上取得了较大进展，1986年英国科学家Harrison等首次将黄瓜花叶病毒(CMV)的Sat—RNA反转录成eDNA后转入植物中，获得了抗CMV的转基因植株。
1993年McGarvey等利用卫星RNA 技术得到了抗CMV的番茄。
1990年赵淑珍等利用卫星RNA的互补DNA(cDNA)单体和双体基因构造成抗黄瓜花叶病毒(CMV)的转基因番茄。
这种番茄能够干扰CMV的复制，表现出对CMV的显著抗性，且这种抗病特性可以遗传。
结球甘蓝原生质体培养及植株再生
结球甘蓝原生质体培养及植株再生本试验以结球甘蓝不同熟性的6个品种为材料,对影响其原生质体培养的主要因素进行了探讨；初步建立了适合结球甘蓝原生质体游离、纯化、收集、培养以至再生出完整植株的实用技术体系；为其非对称细胞融合及品种改良与创新等研究奠定了基础。
研究结果如下：1.原生质体的游离条件优化表明：以2% Cellulase R-10+0.5% Pectolase Y-23 +9CPW+5mmol/L MES酶液组合的酶解效果最佳。
其对4d苗龄的结球甘蓝下胚轴原生质体进行游离纯化,16h后以100rpm,4min的离心条件对游离的原生质体进行纯化,得到原生质体产量为16.85×105个/g,所获得原生质体活力为86.3%。
2.原生质体培养条件的优化表明：以YP+NAA 0.2mg/L+2,4-D 0.5mg/L+ 6-BA0.2mg/L的原生质体培养效果最佳,10d后细胞分裂频率与40d后植板率分别为20.8%和0.53%。
采用固液双层培养的方法,细胞分裂频率与液体浅层培养相差不大,但植板率明显大于液体浅层培养法获得的植板率。
由MS培养基添加NAA0.025mg/L+2,4-D0.025mg/L+6-BA0.1mg/L对结球甘蓝下胚轴原生质体微愈伤组织增殖效果好。
MS培养基附加6-BA 2g/L,ZT 0.5mg/L对结球甘蓝下胚轴原生质体再生愈伤组织芽分化效果较佳。
在结球甘蓝原生质体培养再生植株过程中,往芽分化培养基中添加AgNO37.5mg/L,能明显提高再生绿芽的分化,出芽率由51.3%提高至65.2%,褐化率下降约5个百分点。
取生长状态好的再生绿芽,以1/2MS附加IBA 0.2mg/L为生根培养基进行生根培养,能全部生根获得完整再生植株,植株再生率为100%。
3.再生植株差异性检测表明：所获得的QL再生植株,在外观形态上基本与母本植株相同,仅有数株表型略有不同。
流式细胞仪细胞倍性检测结果显示,所检测的原生质体再生植株,其中有79.6%为正常二倍体,9.1%为单倍体植株,6.8%为单/二倍体嵌合体植株,4.5%为四倍体植株。
内蒙古农业大学毕业生毕业论文标准格式
本科毕业论文毛沙生冰草生态生物学特性研究学 院：生态环境学院专 业：资源环境与城乡规划管理 学 号：******** 姓 名： 指导教师：职 称：教 授论文提交日期：二О一一年六月初号隶书，字间距加宽1磅，居中二号隶书居中 小二号隶书居中小二号Times New Roman摘 要毛沙生冰草（Adesertorum Var.Pilosinsculum meld.）具有较强的抗旱、抗寒、耐瘠薄的优良品质及草产量，种子产量均高的丰产性能。
适放牧，抗沙埋，草质量好，适口性强。
针对近几年我国西部草原退化、沙化日益严重的现状，寻求抗逆性强，易建植的牧草新品种是草场建植、植被恢复的一条有效途径。
本试验对毛沙生冰草植物等特征。
无性繁殖特性及生物产量等进行了观察和测定，结果表明，毛沙生冰草的千粒重较沙生冰草高0.32g ，茎杆粗0.041㎝，叶宽0.133㎝，青绿期持续长等优点。
本文章通过分析和描述毛沙生冰草的一系列指标，研究毛沙生冰草生态生物等特性，为干旱地区The study the Ecobiology character of Adesertorum var.A desertorum Var, Pilosinswlum Meld has fine resistance, cold resistance. Both the grass yield and the seed yield of latter are high productivity capacity.Searching for some new forage species of strong antiadversity and can be planted easily is an affective way to prevent the grassland degredation and the desertification. Through the observation and measurement of biological characters, unsexusl resproductive characters and productivity on A desertorum Var, Pilosinsculum Meld showes the result that the weight of a thousand seeds of A desertorum Var, Pilosinsculum Meld was 0.32g, more than that of other Agropyroms, the stem diamcter of former was 0.041 cm more than that of latter, the width of leaf of former was 0.113 cm more than that of the latter, and the former’s alive perivded a new resource of a series of indexes about A desertorum Var, Pilosinsculum Meld and researching the ecobiology characters of A desertorum Var, Pilosinsculum Meld.目1 前言 ................................................ 错误!未定义书签。
甘蓝型油菜的遗传转化_杜建中
综述文章编号：１００９－０００２（２００８）０５－０７７２－０５甘蓝型油菜的遗传转化杜建中，孙毅，曹秋芬，郝曜山，刘龙龙，贺健山西省农业生物技术研究中心，山西太原０３００３１［摘要］甘蓝型油菜的各种外植体经遗传转化、组织培养后可以再生为转基因植株，但再生频率会因外植体的基因型、年龄、培养基添加成分和农杆菌共培养的不同而发生变化。
转化方法包括农杆菌介导转化、基因枪法、花粉介导法、ＰＥＧ介导法等，其应用前景非常广阔。
甘蓝型油菜的遗传转化在其品质改良、抗逆性提高、雄性不育系的获得和一些特殊性状方面都取得了很大成就。
简要介绍甘蓝型油菜的再生体系建立、转化方法及所取得的部分成就。
［关键词］甘蓝型油菜；转化；无载体转化；农杆菌；性状改良［中图分类号］Ｑ９４３．２［文献标识码］ＡＧｅｎｅｔｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＲａｐｅｓｅｅｄ（ＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓＬ．）ＤＵＪｉａｎ－Ｚｈｏｎｇ，ＳＵＮＹｉ，ＣＡＯＱｉｕ－Ｆｅｎ，ＨＡＯＹａｏ－Ｓｈａｎ，ＬＩＵＬｏｎｇ－Ｌｏｎｇ，ＨＥＪｉａｎＡｇｒｉ－ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＳｈａｎｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｔａｉｙｕａｎ０３００３１，Ｃｈｉｎａ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｐｌａｎｔｓｃａｎｂｅａｃｑｕｉｒｅｄｆｒｏｍｖａｒｉｏｕｓｏｆｅｘｐｌａｎｔｓｏｆｒａｐｅｓｅｅｄ（ＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓＬ．）ｂｙｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｆｒｅｑｕｅｎｃｙｄｅｐｅｎｄｓｏｎｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ，ｇｅｎｏｙｐｅｓ，ａｇｅｏｆｅｘｐｌａｎｔｓａｎｄＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｃｏｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ．ＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｉｎｃｌｕｄｅｄＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ－ｍｅｄｉａｔｅｄ，ｍｉｃｒｏｐｒｏｊｅｃｔｉｌｅｂｏｍｂａｒｄｍｅｎｔｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ｐｏｌｌｅｎ－ｍｅｄｉａｔｅｄｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ＰＥＧ－ｍｅｄｉａｅｄｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｅｔｃ．，ａｎｄｔｈｅｙｗｅｒｅａｌｌｐｒｏｍｉｓｉｎｇ．ＡｃｈｉｅｖｅｍｅｎｔｓｏｎｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＢ．ｎａｐｕｓｉｎｃｌｕｄｅｉｍｐｒｏｖｉｎｇｑｕａｌｉｔｙ，ｅｎｈａｎｃｉｎｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｓ，ｏｂｔａｉｎｉｎｇｎｕｃｌｅａｒｍａｌｅｓｔｅｒｉｌｉｔｙｓｙｓｔｅｍｅｔｃ．．Ｉｎｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅ，ｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｅｓｏｎｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ，ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓａｎｄｓｏｍｅｃｏｎｔｒｉｂｕ－ｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｒａｐｅｓｅｅｄｗｅｒｅｄｉｓｃｕｓｓｅｄ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ｒａｐｅｓｅｅｄ‘ｇｅｎｅｔｉｃｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ‘ｖｅｃｔｏｒｌｅｓｓｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ‘Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ‘ｇｅｎｅｔｉｃｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ长久以来，人们通过驯化和修饰甘蓝型油菜（ＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓＬ．）品种以使其适应日益变化着的需求。
原生质体培养方法和再生植株的遗传与变异
压，否则细胞团不会继续生长。待 小愈伤组织长至1 -2mm时，应及时
转移至固体培养基使其进一步生长
4.植株再生
原生质体培养再生的愈伤组织可直接转移到分化培养基，一步成苗 （器官发生）。愈伤组织也可通过体细胞胚发生，先形成胚状体，再 诱导生芽、生根。不同植物种属，其再生方式不同
供体细胞的分化程度：同一个基因型的植株生长在不同的环境条件下，其 生理状态会有改变。供试植株最好生长在控制条件下，以提高原生质体的细 胞分裂频率和再生能力，并且可提高实验重复性
柑橘：叶肉原生质体无论单独培养还是共培养均不能再生，只有胚性愈伤 组织来源的原生质体才能再生
起始培养密度与培养基
–起始培养密度：适宜密度为1-5×105/ml –培养基激素水平：柑橘不添加外源激素，也可再生 –培养基营养成分完全性：越丰富越好
仙客来原生质体的再生
香蕉原生质体再生—Assani等2006 看护培养
Sugarbeet （糖 甜菜）callus and protoplast regeneration
影响原生质体培养的主要因素
基因型
– 番茄与秘鲁番茄有性杂交后性状分离的遗传分析表明，其愈伤组 织再生能力受2个显性基因决定(Koornneef等1987)。Cheng和 Veilleux(1991)对芙薯(S. phureja)原生质体培养能力进行遗传 分析，证明从原生质体培养到形成愈伤组织受2个独立位点的显性 基因控制(Cheng等1991)
• 变异程度的大小与起始材料及培养过程中产生的 变异有关
• 原生质体再生植株变异可为体细胞遗传学研究和 品种改良提供有益的材料
• 从原生质体培养再生植株已选育一些新品种（体细
胞突变育种）
甘蓝型油菜与蔊菜的原生质体融合与植株再生
维普资讯
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Ｉ Ｓ Ｓ Ｎ ０ ２ ５ ３ － ９ ７ ７ ２ Ｗ Ｗ Ｗ ． ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ｇ ｅ ｎ ｅ ． Ｃ Ｒ
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初期培养条件对甘蓝和萝卜原生质体培养效果的影响
在原生质体培养中， 初期的培养条件，特别是培养基组成 、 激素、渗透压 、 培养密度等条件对原生 质培养的效果形成影响很大， 赢接影响细胞的分裂频率及分化。同时， 也对后期的植株再生产有重要影 响【 。因而 ，找 出适宜的原生质体初期培养条件就显得非常重要 。 卜 引
１ 材料和方法
１ 试验材料 ． １ 本试验中所用甘蓝品种有：金 １０ （ １ 、紫甘蓝 （ ２ 、冬王 （ ３ ；萝 卜 ０号 Ｃ） ｃ） Ｃ） 品种有心里美 （ １ Ｒ）
和 守 口大 根 （ ２ 。 Ｒ ） １ ． 无菌 苗培养 ２
甘蓝和萝 卜 种子用 ７ ％乙醇浸泡 １ ｎ ０ ． ｍｉ，无菌水冲洗 １ ５ 次，再用 ｌ 次氯酸钠灭菌 １ ｎ后，无 ％ ５ｍｉ 菌水冲洗 ３ 次，接种于含琼脂 Ｏ ％、蔗糖 Ｏ３ ． ６ ． ％、ｐ ． 的 ＭＳ固体培养基中培养。 Ｈ５８ １ 原生质体分离 、收集与培养 ． ３ 取１ Ｏ日苗龄 的甘蓝子叶、萝 卜 子叶和下胚轴 （ 子叶每处理 ４ Ｏ片，下胚轴 ２ 根 ） Ｏ ，在 Ｃ Ｗ 盐溶液 Ｐ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ａｔｔ ｅ ｅ ｒｙ ｓ ｇ ｆ ｃ ｔ ｌ ｄ ｎ ａ ｄ ｈ ｐ ｃ ｔ ｌ ｐ ｏ ｏ ｌ ｓｓ ｃ ｌ ｒ ｆ ｃ ｂ ａ ｅ ａ ｄ ｒ ｄ ｓ ， ｔｅ ｈ ｇ ｅ ｌｄ ｖ ｓｏ ｓｒ ｃ ： ｈ ａ ｌ ｔ ｅ ｏ ｏ ｙ ｅ ｏ ｎ ｙ ｏ ｏ ｙ ｒ ｔ ｐ ａ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ａ ｂ ｇ ａ ｕ ｎ ａ ｉｈ ｈ ｉ ｈ ｃ ｌ ｉ ｉｉ ｎ
新型保健蔬菜羽衣甘蓝优质栽培技术
新型保健蔬菜羽衣甘蓝优质栽培技术食用型羽衣甘蓝属十字花科芸墓属甘蓝种的一个变种，原产于欧洲地中海沿岸，在欧洲和北美一些国家栽培历史悠久。
羽衣甘蓝适应性广，抗病、抗寒、耐热和耐肥，栽培管理容易，一次定植可连续多次采收，利用设施栽培一年可栽3茬，实现周年生产供应。
羽衣甘蓝以羽状深裂嫩叶供食，可炒食、凉拌、做汤或腌制，品质柔嫩，风味清脆，富含大量维生素A、C、B₂及钙、铁、钾等多种矿物质，是高营养价值的新型保健蔬菜，具有较强的市场竞争力。
1良种选择选择生长势强，叶片绿色、羽状深裂、叶面褶皱，耐寒、耐热性较强，抽墓晚、采收期长，质地柔嫩、风味浓的鲜食型羽衣甘蓝优良品种，如北京市农林科学院、国家蔬菜工程技术中心共同研发的羽衣甘蓝新品种开乐，从美国、英国、荷兰引进的沃斯特、穆期博、阿培达、温博特等优秀良种。
2栽培季节羽衣甘蓝属长日照作物，喜冷凉温和气候，耐寒、耐热能力较强，可忍耐-4℃短暂低温和35℃的高温；茎叶生长最适宜温度白天为18~20℃，夜间为8~10℃，在30~35℃条件下叶片纤维增多，质地变硬，风味较差。
羽衣甘蓝市场需求旺季为春季叶菜类蔬菜退市和夏季叶菜类蔬菜供应淡季的5-8月，及下半年餐饮旺季的10月至翌年2月。
在浙北平原，羽衣甘蓝利用塑料大棚设施可实现周年生产与供应，除12月至翌年2月播种因羽衣甘蓝易通过春化作用产量锐减外，根据市场需求可采用春、夏、秋播，实现鲜食型羽衣甘蓝设施栽培周年生产。
即春播于3月上旬双膜保暖育苗，4月初定植，5月初至6月收获；夏播于5月防虫网避雨育苗，6月定植，7~9月收获；秋播于7~10月初大棚育苗，8~11月定植，9月至翌年5月收获。
3 播种育苗3.1用种量羽衣甘蓝多用苗床撒播及穴盘点播2种育苗方式。
一般每1hm²大田种植需苗床面积150 m²、用种量375 g，若穴盘育苗，需苗床面积60 m²、用种量为225g。
3.2播前准备应选择地势较高、地面平坦、排灌方便、易运输和具备棚顶喷雾灌溉系统的大棚育苗。
甘蓝种植技术手册
甘蓝种植技术手册第一节概述一、甘蓝起源甘蓝，十字花科草本植物，基生叶旋叠，花两性，性甘，平，无毒。
起源于地中海沿岸，由野生甘蓝演化而来。
早在4000 年以前，野生甘蓝的某些类型就在东南欧洲被利用。
后逐渐传至欧洲各国栽培，经过长期的人工栽培和选择、演化成上述不同的变种。
到公元9 世纪，甘蓝已为欧洲各国广泛种植供食用。
16 世纪传入北美洲。
现已成为世界许多国家特别是欧洲、北美各国的主要蔬菜甘蓝的普通园艺类型主要按食用部位分为3 类：①叶型，叶疏松而开展(如羽衣甘蓝及宽叶羽衣甘蓝等)或紧密包合呈头状(如普通甘蓝和萨伏依甘蓝)；②花和粗花茎型，花稍畸变或无畸变(花茎甘蓝)及花变粗而畸变(如花椰菜和大头花茎甘蓝)；③茎型，茎明显扩展成鳞茎状(如球茎甘蓝)。
羽衣甘蓝二、结球甘蓝植物学名结球甘蓝。
十字花科芸薹属甘蓝种中顶芽或腋芽能形成叶球的一个变种，为二年生草本植物。
学名Brassica oleracea var. capitata L，别名洋白菜、包菜、圆白菜、卷心菜、莲花白、椰菜等。
染色体数2n=2x=18。
叶球供食用，每100g 鲜菜含水分93.7-94.4g，碳水化合物2.7-3.4g，粗蛋白1.1-1.6g，粗纤维0.5-1.1g，维生素C38-41mg 等。
三、甘蓝的形态特征甘蓝属二年生草本，高30-90cm，全体具白粉。
全国各地有春、夏、秋、冬均有栽培。
1、根系。
根系浅，主要分布在深30cm，宽80cm 土层中。
2、茎。
短缩茎，外短缩茎着生莲座叶，内短缩茎着生叶球。
3、叶。
基生叶广大，肉质而厚，倒卵形或长圆形，长15-40cm。
如牡丹花瓣样，层层重叠，至中央密集成球形，内部的叶白色，包于外部的叶常呈淡绿色；茎生叶倒卵圆形，较小，无柄。
4、花。
花期5-6 月，异花授粉，花轴从包围的基生叶中抽出，总状花序，上着生小花穗，花淡黄色；萼片4，狭而直立，星袋形；花瓣4；4 强雄蕊；罐蕊1。
5、果。
长角果，呈圆锥形，未熟果果荚青绿色，成熟果荚褐色，易开裂，内有数粒种子。
结球甘蓝体细胞无性系变异的RAPD分析
（ Ｂ ｒ ａ ｓ ｓ ｓ ｉ ｃ ａ ｏ ｌ ｅ ｒ ａ ｃ ｅ ａ Ｌ ． ｖ ａ ｒ ｃ ａ ｐ ｉ ｔ ａ ｔ ａ ）ｗ ｅ ｒ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ａ ｓ ｍ ａ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ ｓ ，ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ Ｒ Ａ Ｐ Ｄ ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ ｍａ ｒ ｋ ｅ ｒ ｓ ｔ ｏ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｔ ｈ ｅ ｓ ｏ ｍａ —
ｃ ｌ ｏ ｎ ａ ｌ ｖ ａ ｒ ｉ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｃ ａ ｂ ｂ ａ ｇ ｅ ｒ ｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ．Ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ａ ｓ ｆ ｏ ｌ ｌ ｏ ｗ ｓ ：１ ４ ｐ ｒ ｉ ｍｅ ｒ ｓ ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｗｅ ｒ ｅ ｓ ｃ ｒ ｅ ｅ ｎ ｅ ｄ ｏ ｕ ｔ ｏ ｆ
（ 浙江省农业科 学院 蔬菜研究所 ， 浙江 杭 州 ３ １ ０ ０ ２ １ ； 。南京农业大学 作 物遗传 与种质创新 国家重点实验室 ， 江苏 南京 ２ １ ０ ０ ９ ５ ）
摘
要： 以结球甘蓝强力 ５ Ｏ原生 质体 再生植株 和无菌 苗下胚轴 再生植 株为材 料 ， 利用 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ分子标 记技术
浙江农业学报 Ａ ｃ ｔ ａ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ａ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｅ Ｚ ｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ ， ２ ０ １ ３ ， ２ ５ （ ４ ） ： ７ ５ ３ ｗ ｗ． ｚ ｊ ｎ ｙ ｘ ｂ ． ａ ｎ
李贵 ， 陶鹏 ， 李必元 ， 等．结球 甘蓝体细胞无性系变异 的 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ分析 ［ Ｊ ］ ． 浙江农业学报 ， ２ ０ １ ３， ２ ５ （ ４ ） ： ７ ５ ３ － ７ ５ ８ ．
Ｌ Ｉ Ｇｕ ｉ ， ’ Ｔ ＡＯ Ｐ ｅ ｎ ｇ ，Ｌ Ｉ Ｂ ｉ — ｙ ｕ ａ ｎ ，Ｗ ＡＮＧ Ｗｕ — ｈ ｏ ｎ ｇ ，ＹＵＥ Ｚ ｈ ｉ — ｃ ｈ ｅ ｎ ，Ｚ ＨＯＮＧ Ｘ ｉ ｎ — ｍｉ ｎ ，
甘蓝型油菜下胚轴原生质体培养再生植株
甘蓝型油菜下胚轴原生质体培养再生植株胡张华;郎春秀;刘智宏;黄锐之;吴关庭;陈笑芸;陈锦清【期刊名称】《浙江农业学报》【年(卷),期】2002(014)005【摘要】油菜是重要的油料作物，我国的油菜种植面积和油菜籽产量均居世界首位。
提高油菜籽粒含油量是育种的主要目标之一。
我们利用拥有自主知识产权的反义PEP(phosphoenolpyruvate carboxylse）技术获得了超高含油量油菜＾[1]。
将超高含油量特性与油菜杂种优势结合是使超高油油菜尽快应用于生产，实现产业化生产的重要途径。
而超高含油量不育系的选育是杂种优势利用的前提之一。
通过不对称体细胞杂交能“一步法”快速选育不育系＾[2]。
为此，建立重演性好、再生额率高的原生质体培养系统十分必要。
甘蓝型油菜原生质体的培养已有一些成功的报道＾[3-6]，但愈伤组织分化频率都不高。
本文以甘蓝型油菜下胚轴为材料，通过琼脂糖包埋法，建立了原生质体高频分裂及植株再生体系，为通过不对称体细胞杂交快速选育超高含油量不育系提供一些科学依据。
【总页数】3页(P278-280)【作者】胡张华;郎春秀;刘智宏;黄锐之;吴关庭;陈笑芸;陈锦清【作者单位】浙江省农业科学院原子能利用研究所,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院原子能利用研究所,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院原子能利用研究所,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院原子能利用研究所,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院原子能利用研究所,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院原子能利用研究所,浙江,杭州,310021;浙江省农业科学院原子能利用研究所,浙江,杭州,310021【正文语种】中文【中图分类】S565.4【相关文献】1.结球甘蓝下胚轴原生质体培养再生植株体系的优化研究 [J], 李贵;李必元;王五宏;岳智臣;钟新民;侯喜林2.结球白菜下胚轴原生质体培养及其体细胞胚植株再生 [J], 刘凡;赵泓;秦帆3.青花菜和甘蓝下胚轴原生质体培养再生植株 [J], 钟仲贤;李贤4.菜心下胚轴原生质体培养和植株再生 [J], 张兰英;李耿光5.不结球白菜OguCMS下胚轴原生质体培养再生植株 [J], 侯喜林;曹寿椿;佘建明;蔡小宁;陆维忠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
实验五植物原生质体的分离和培养
实验五植物原⽣质体的分离和培养实验四植物原⽣质体的分离和培养实验⽬的掌握植物原⽣质体分离和培养的基本⽅法，并对培养的结果进⾏初步观察。
实验原理原⽣质体是除去细胞壁的裸露细胞。
在适宜的培养条件下，分离的原⽣质体能合成新壁，进⾏细胞分裂，并再⽣成完整植株。
植物的幼嫩叶⽚、⼦叶、下胚轴、未成熟果⾁、花粉四b咻、培养的愈伤组织和悬浮培养细胞均可作为分离原⽣体的材料来源。
分离愿⽣厦籀萨采⽤酶解法。
其原理是根据由纤维素酶、罘胶酶和半纤维素酶配制⽽成的溶液对细胞壁成分的降解作⽤，⽽使原⽣质体释放出来。
原⽣质体的产率和活⼒与材料来源、⽣理状态、酶液的组麟，以及原⽣质体收集⽅法有关。
酶液通常需要保持较⾼的渗透压，以使原⽣质体在分离前细胞处于质壁分离状态，分离之后不致膨胀破裂。
渗透剂常⽤⽢露醇，⼭梨醇，葡萄糖或蔗糖。
酶液中还应含⼀定量的钙离⼦，来稳定原⽣质膜。
游离出来的原⽣质体可⽤过筛⼀低速离⼼法收集，⽤蔗糖漂浮法纯既，然后进⾏培养。
实验⽤品⼀、材料1.烟草幼苗的叶⽚、或向⽇葵⽆菌苗的叶⽚、⼦叶或下胚轴等。
2.胡萝⼘根切⽚诱导的松软愈伤组织。
⼆、器材超净⼯作台、台式离⼼机或⼿摇离⼼机、倒置显微镜、普通显微镜、培养室、灭菌锅、⾎细胞计数板、⽯蜡膜带等。
细菌过滤器和0·45µm的滤膜、300⽬不锈钢⽹筛及配套的⼩烧杯、解剖⼑、尖头镊⼦、注射器(5、10m1)和12号长针头、带⽪头的刻度移液管(5、10ml，上部管⼝加棉塞)、培养⽫(直径6cm)或扁平培养瓶(50m1)、⼤培养⽫、吸⽔纸等、使⽤前需经过灭菌。
三、试剂1. 70％酒精。
2. 0.1％升汞⽔溶液，并滴⼊少许TWeen 80。
3. 灭菌蒸馏⽔。
4. 0.16mo／L和0.20mo／L CaCl2·2H2O溶液，并加有0.1％MES（2-N-吗啉已烷磺酸），PH5.8~6.2。
5. 20％和12％蔗糖溶液，pH PH5.8~6.2。
蓝莓组织培养技术大全
蓝莓组培技术介绍一、愈伤组织的培养（一）几个概念1.外植体（explant）：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
2.分化（differentiation）：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。
3.脱分化（dedifferentiation）:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分化组织状态的过程。
4.再分化（redifferentiation）:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。
5.愈伤组织（callus）:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。
6.胚状体（embroid）:-对应于胚（embryo），在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。
胚状体原始细胞特征：原生质浓厚，细胞核较大，处于细胞质中央。
7.人工种子(artificial seed):指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中,在适宜条件下发芽出苗的颗粒体。
（二）愈伤组织类型及特征1.结构致密型：表面光滑有光泽，结构致密，多为淡黄色或白色，易于再生芽2.结构松散型：多为白色，可以用于悬浮系建立。
3.胚性愈伤组织：具有产生胚状体能力。
（三）愈伤组织的形成：大致经过起绐期、分裂期和形成期，但三个时期没严格界限。
1.起始期指细胞准备进行分裂的时期，当外植体已分化的活细胞在外源植物生长物质的作用下，通过脱分化起动而进入分裂和形成愈伤组织。
2.分裂期表现为外层细胞出现分裂，细胞分裂进入最旺盛时期，细胞体积最小，细胞核和核仁较大，RNA含量最高。
3.形成层的特征是细胞大小趋于稳定,细胞分裂从分裂期的周缘细胞分裂为主转向了内部组织。
（四）愈伤组织中的形态发生：愈伤组织通过再分化形成再生植株的方式主要有：1.先产生芽后,在茎的基部长根。
伟大的预言——有梦想才会有创造材料11902年哈伯兰特
比较
植物组织培养
所属 范畴 原理 无性繁殖 细胞全能性 ①脱分化 ②再分化
保持优良性状 繁殖速度快 大规模生产提高经济效益
植物体细胞杂交技术
染色体变异、基因重组 膜流动性 细胞全能性 ①去除细胞壁 ②融合形成杂种细胞 ③组织培养
克服不同种生物远缘 杂交不亲和的障碍
步骤
意义 联系
杂交技术应用了组织培养
• 材料2：哈伯兰特没有实现自己的预言，但是1958年， 斯图尔德等人第1次用胡萝卜的韧皮部细胞证实了植物 细胞的全能性。
• 材料3：番茄与马铃薯同属茄科植物，但不 是同属的植物。番茄的果实和马铃薯的块 茎是人们经常食用的蔬菜。马铃薯的块茎 生长在土壤中。
• 材料4： • 1960年，Cocking等用真菌纤维素酶分离 植物原生质体获得成功。这是植物组织培 养的第2次突破。 • 1971年，Takebe等从烟草原生质体得到再 生植株。首次获得原生质体植株再生成功。
伟大的预言••••••
——有梦想，才会有创造
• 材料1：1902年，哈伯兰特提出高等植物的 器官和组织可以不断地分割，直至单个细 胞的观点，预言植物体细胞在适宜的条件 下有发育成未获成功。他说：“……用 任何一个植物细胞都可以培养出一株植 物。” 哈伯兰特预言的主体是什么？理论基础是什 么？实现的方法是什么？为什么任何一个植 物细胞都可以培养成一株植物？
植物体细胞杂交技术
1、过程： 植物细胞的融合
马铃薯 细胞 原 生 质 体 融 合 植物组织培养 标志：成功融合
去 壁
再细 生胞 脱 出壁 分 化
人工诱 导
再 分 化 愈 伤 组 织
番茄 细 胞
原生 质体
杂 种 细 胞
杂 种 植 株