食品应用生物技术实验指导
微生物工程实验指导
微生物工程实验指导适用生物技术专业食品与生物工程学院2008.1实验一 发酵实验用玻璃器皿灭菌前的包扎方法一、目的：学习发酵实验用玻璃器皿在灭菌前的包扎工作，并了解灭菌后的使用方法。
二、原理：为保持发酵实验用玻璃器皿灭菌后的无菌状态，需要对它们灭菌前进行包扎，这些工作看起来简单，但如操作不当或不按操作规程去做，则会影响实验结果，甚至会导致实验的失败。
三、材料和设备5ml吸管30只，9cm培养皿 10套，120*12mm试管 120只，250ml三角瓶30个，脱脂棉0.5斤，天然棉0.5斤，8层纱布30块，线绳。
四、方法1、洗涤1 新器皿应用2﹪盐酸浸泡数小时再洗涤。
2 琼脂块不能倒入下水道。
3 含菌培养基一般先煮再洗。
4 洗涤后玻璃器皿上水应均匀湿润而无条纹和水珠。
2、包扎① 平皿的包扎：10个一包。
前9个方向一致，最后一个反放，用纸卷成卷，也可放在特制铁桶中灭菌。
② 吸管的包扎：在吸管尾部塞入少许脱脂棉，脱脂棉长约1cm，距管口约0.5cm，以防止在使用时造成污染。
脱脂棉松紧适当，多余的棉花可用火焰烧掉。
每支吸管用约6cm宽纸条，吸管头部包衬双层纸，以30－45º卷起，吸管尾部用剩余纸条打成一结，防止散开，标上容量。
使用时，从吸管中间凝断包扎纸带，抽出吸管。
③ 试管的包扎：用天然棉做成棉塞，紧贴管臂，松紧适宜，棉塞要实，2/3塞进管口。
也可用硅胶塞。
十只一把，外加牛皮纸，扎好。
脱脂棉易吸水，可能造成染菌。
④三角摇瓶的包扎：用8层纱布（大小适宜），塞入瓶口2/3，瓶外部分揪成一团，再用一层牛皮纸或两层报纸把纱布遮严（以免打湿），包扎，用绳子系成活扣。
使用时，去掉包扎纸，拿去纱布，接种后，将纱布塞进瓶口，纱布四角拉下，用绳子系成活扣。
五、作业体会这样做有哪些好处？实验二 灭菌技术及其应用一、目的：掌握干热灭菌和高压蒸汽灭菌的原理和操作。
二、原理：灭菌的基本原理是通过加热使微生物体内蛋白质凝固变性，从而达到灭菌目的。
食品生物化学实验教学大纲
《食品生物化学实验》大纲一、说明1、课程类别专业基础课2、教学目的实验教学在食品生物化学教学中占有重要作用，一方面，可以加深学生对碳水化合物、脂类、蛋白质、核酸及酶的性质的理解；另一方面，通过定量测定、酶活力测定和制备实验，对学生进行质量管理、新产品开发及科学研究，都是不可缺少的技术训练。
3、教学内容食品生物化学是生物化学的一个分支学科。
它是研究生物有机体包括动物、植物、微生物及人体等的化学组成和生命过程中的化学变化规律，侧重于研究食品原料化学组成及其性质、食品成分在有生命的原料中的变化规律、食品成分在加工过程中的变化规律、食品成分在人体内的变化规律、食品原料生产的品种改造及其变化规律。
4、教学方式以实验操作为主，配合原理教授、实践性教学、多媒体教学和学生实验报告、撰写论文、自学等方法进行学习。
5、考核内容及方式1.平时成绩：包括出勤10%，课堂提问及实验结果20%。
2.实验成绩：实验报告10%，自行设计实验10-20%3.试卷成绩：考试（包括理论或实验操作）40-60%4.综合考核成绩：以上成绩综合6、本课程授课时间（学期），总学时数。
本课程在一年级第二学期开设，总计36学时，学时分配见下表：教学时数分配表二、教学内容1、教学目标（课程）（1）熟悉生物化学实验的一般知识，掌握常见生物化学实验仪器的操作技能，培养独立的实验能力。
（2）结合食品工程专业教学需要，掌握常见的涉及食品科学方面的生物化学实验技能。
（3）了解现代生物工程技术在食品工业中应用的实验原理。
（4）学会正确观察实验现象，正确排除设备故障，合理处理数据，准确描绘仪器设备装置简图，撰写实验报告，查阅生物化学常数手册以及进行新产品开发研究的初步能力。
2、教学内容（分章节描述）1.水分及水分活度的测定掌握水分及水分活度测定的常用方法，掌握康氏法测定水分活度的基本原理和方法；2．糖的分离与显色鉴别具体内容：（1）用层析法分离葡萄糖、木糖、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖等单糖；（2）用邻苯二甲酸与苯胺显色液对各种单糖进行显色鉴别。
食品生物技术实验
实验1 糖化酶固定化技术1 实验目的(1)熟悉酶的固定化技术和原理。
(2)掌握糖化酶的固定化操作。
2 实验原理在一定pH条件下，带正电荷的明胶与海藻酸根阴离子形成聚合物，同时，海藻酸钠与钙离子在一定条件下结合形成不溶于水的微球，从而使混合于其中的糖化酶通过包埋固定化。
戊二醛含有两个醛基，可与蛋白质中的氨基、酚基、巯基发生反应，相互交联而使固定化酶硬化，由于带正电荷的明胶与海藻酸根阴离子形成聚合物已将绝大部分游离酶包埋起来，因此这种交联主要发生在明胶与戊二醛之间，使固定化酶的使用时间延长、机械强度增大、稳定性提高。
3 仪器和试剂3.1 主要仪器磁力搅拌器，pH计，水浴锅，500mL烧杯，50mL注射器，12号注射器针头，冰箱。
3.2 药品及配制（1）所需药品：糖化酶，明胶，海藻酸钠，氯化钙，戊二醛，生理盐水。
（2）活力单位为70U/mL的糖化酶酶液100ml：用所给糖化酶配制。
（3）浓度为3%的明胶溶液150ml：称取明胶4.5g，放入装有150mL蒸馏水的烧杯中，静止10分钟，水浴加热使明胶溶解，注意水浴的温度不超过70℃。
（4）3%的海藻酸钠溶液150ml：称取海藻酸钠4.5g，放入装有150mL蒸馏水的烧杯中，不断搅拌同时加热煮沸彻底溶解。
（5）1％氯化钙溶液500ml。
（6）5％的戊二醛溶液500ml。
（7）5％稀盐酸：调节pH用。
4 实验操作将15mL糖化酶液与40℃150mL3％的海藻酸钠溶液混合搅拌，加入40℃150mL3％的明胶溶液混合乳化约10min，调pH为4.2~4.6，缓慢搅拌并降温至5～10℃，用12号注射器的针头将上述冷却液从3cm的高度注进1％氯化钙溶液中，立刻形成光滑的微球，然后保持温度为4℃，球在氯化钙溶液中被硬化30min，将球取出置人30℃5％的戊二醛溶液中进一步硬化1h，用生理盐水洗涤后，过滤得固定化糖化酶，贮存在0～5℃冰箱中备用。
5 实验结果观察所得固定化糖化酶的色泽和形状，粗测其粒度大小，测量其体积和沥干水后的重量，把所得各项指标填入下表：表1 所得固定化糖化酶的外观、体积和质量6 思考题1．本实验的固定化方法是所述哪几种酶固定化方法的结合?2．为何固定时乳化液的pH要保持在4.2~4.6？实验二固定化糖化酶活力的测定1 实验目的（1）学习固定化糖化酶活力的测定方法。
初中生物生物技术在农业中的应用(含学习方法技巧、例题示范教学方法)
初中生物生物技术在农业中的应用第一篇范文：初中生物生物技术在农业中的应用随着科学技术的不断发展，生物技术在农业领域的应用日益广泛，为解决全球粮食安全问题提供了有力保障。
初中生物课程中涉及到的生物技术知识点，为学生们揭示了农业生产的未来发展趋势。
本文将结合初中生物课程内容，介绍生物技术在农业中的应用。
1. 转基因技术转基因技术是将一种生物的某个基因转移到另一种生物中，使其表现出转入基因所控制的性状。
在农业领域，转基因技术培育出了许多高产、优质、抗病、抗虫、抗逆性等特性的新品种，从而提高了农作物的产量和品质。
例如，转基因抗虫棉可以抵抗棉铃虫，减少农药使用，降低生产成本，提高农民收入。
2. 组织培养技术组织培养技术是指在无菌条件下，将植物体内的某一部分器官或组织，如茎尖、根尖、芽尖等，培养在人工配制的培养基上，经过一段时间的生长、分化最后长成一个完整的植株。
组织培养技术在农业上应用广泛，如微型繁殖、脱毒、人工种子、性别诱导等。
通过组织培养技术，可以快速繁殖优良品种，提高农业生产效率。
3. 细胞融合技术细胞融合技术是将两个或多个不同种类的细胞合并成一个细胞，从而获得具有双亲细胞特点的新细胞。
在农业上，细胞融合技术主要用于制备杂种细胞，进而培育出杂种植株。
杂种植株往往具有优良的抗病性、抗逆性和产量性状，如抗病性小麦、抗逆性水稻等。
4. 分子标记技术分子标记技术是利用特定的分子探针检测生物体内特定基因的存在和表达情况。
在农业上，分子标记技术主要用于品种鉴定、基因定位、基因指纹图谱构建等。
通过分子标记技术，可以快速、准确地鉴定植物品种，提高农业生产管理水平。
5. 生物农药和生物肥料生物农药和生物肥料是利用生物制品防治农作物病虫害和提供植物生长所需养分的农药和肥料。
生物农药具有环保、低毒、高效等特点，可以有效防治农作物病虫害，减少农药残留。
生物肥料则可以提供植物生长所需的养分，促进植物生长，提高产量。
6. 生态农业与可持续发展生态农业是一种以生态学原理和系统工程方法为基础，注重资源循环和生态环境保护的农业生产方式。
食品生物技术专业 建设经验
食品生物技术专业建设经验摘要：本文总结了食品生物技术专业建设的经验和实践，包括课程设置、实验室建设、教师队伍建设等方面。
通过对成功案例的分析，探讨了如何培养高素质的食品生物技术专业人才，并提出了一些可行的建议和方法。
一、引言食品生物技术是一个融合了生物学、化学和食品科学等学科的综合性专业。
在当前食品安全和生物技术发展的背景下，食品生物技术专业的建设具有重要意义。
二、课程设置1.基础课程：建立坚实的基础知识体系，包括生物学、化学、微生物学等。
2.专业核心课程：涵盖食品工程、食品安全、食品分析、食品加工等，培养学生的专业素养。
3.实践课程：注重实践能力的培养，包括实验课程、实习和创新设计等。
三、实验室建设1.设备更新与维护：保持实验室设备的先进性和完好性，以满足学生的实践需求。
2.安全管理：建立严格的实验室安全管理制度，确保学生和教师的安全。
3.实验指导与辅导：提供良好的实验指导和辅导，帮助学生掌握实验技能。
四、教师队伍建设1.学科交叉合作：建立与相关学科的合作机制，促进教师之间的学科交流与合作。
2.教师培训与发展：定期组织教师培训和学术交流活动，提高教师的教学水平和科研能力。
3.优秀教师引进：引进有经验和专业知识的优秀教师，提高教学质量和学科影响力。
五、实践教学与产学合作1.实习基地建设：与食品生产企业建立紧密的联系，为学生提供实践和实习机会。
2.创新设计项目：组织学生参与创新设计项目，培养其解决实际问题的能力。
3.产学合作：与食品生产企业和科研机构开展合作研究，提升教学与科研水平。
六、学生培养与评估1.个性化培养：关注学生的个性特点和发展需求，提供个性化的培养方案。
2.学业指导：提供学业指导和辅导，帮助学生规划学习和职业发展。
3.综合评估：采用多元化的评估方式，综合考察学生的知识掌握和实践能力。
七、问题与挑战1.师资力量：教师队伍建设仍面临一定的挑战，需要引进更多有经验的教师。
2.实践教学资源：实验室设备和实习基地等实践教学资源的充足性是一个问题。
生物技术大实验实验指导
生物技术大实验实验指导——原生质体的制备、再生一、实验名称：原生质体的制备、再生二、实验目的：通过本实验掌握丝状真菌原生质体制备和再生的技术和原理，并能将该技术应用于育种和遗传研究。
三、实验原理：微生物的细胞或菌丝在细胞壁被脱去或降解后所形成的圆球体，称为原生质体。
真菌细胞壁的主要成分为己糖或氨基己糖构成的多糖链，如几丁质、脱乙酰几丁质、纤维素、葡聚糖、甘露聚糖、半乳聚糖等。
此外，还有蛋白质、类脂、无机盐等。
所有真菌的细胞壁都具有无定形的和纤维状的组分。
纤维状的组分包括几丁质和纤维素，都是由多聚物形成的微纤丝。
无定形的组分包括蛋白质、甘露聚糖和β-(1,3)、和β-(1,6)、α-(1,3)葡聚糖，常混杂在纤维网中，但大多数真菌，包括子囊菌、担子菌、半知菌类和低等壶菌的细胞壁由几丁质（β-1,4-N-乙酰氨基葡糖为单元的无支链多聚体组成）。
细胞壁的成分随真菌类群的不同而变化，并且每种菌体的细胞壁在其生活周期的过程中也存在差异。
最早的脱壁方法是用机械的方法剥离细胞壁来制备植物细胞的原生质体。
1960年前后开始有大量关于用酶法制备植物和微生物原生质体的报道。
此后虽然也有人尝试过用物理方法（如研磨和超声波等）制备原生质体，但远不如酶法普遍。
酶法制备原生质体最关键的是根据不同物种的细胞壁的结构及其化学组成选用具有不同酶活性的脱壁酶。
真菌原生质体以广泛地应用于原生质体融合育种，质粒、线粒体等外源DNA 的原生质体转化，细胞壁的重建以及生理生化研究等方面。
因而，无论在理论上还是在应用上，原生质体的研究均引起了人们的浓厚兴趣。
近几年来，真菌原生质体的研究对象已从实验室模式种逐渐转向具有工业价值的生产种，以期获得更好的经济效益。
四、材料1、菌种：蛹虫草拟青霉。
2、培养基：（1）菌丝生长培养基PDA培养基：马铃薯20 g（去皮切片煮沸30 min，过滤去渣）；葡萄糖2g；琼脂1.5g；蒸馏水100 ml；自然pH。
食品科学的分子生物学研究与应用
食品科学的分子生物学研究与应用随着科技的进步，人们对食品安全、营养健康等问题的关注度越来越高。
为了保障公众健康和满足人们对美食的追求，食品科学领域的研究也在不断深入。
其中，分子生物学技术被广泛运用于食品科学的研究与应用当中，让我们一起来了解一下。
一、什么是分子生物学分子生物学是研究生物体的分子结构、功能和相互关系的一门学科。
它以脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)和蛋白质等生物大分子为研究对象，探究它们在基因表达、遗传变异、细胞信号传导等方面的作用机制。
通过研究生物分子的变化和相互作用，分子生物学已成为生物医学、生命科学、农业科学等领域不可或缺的技术手段。
二、分子生物学在食品科学中的应用2.1 食品基因组学食品基因组学是通过分子生物学技术研究食品相关物种的基因组结构和功能。
它的应用包括：1）品种鉴定。
通过检测不同物种或品系的基因组序列，可以鉴别不同物种和品系之间的遗传差异，帮助食品生产企业进行品种认证和追溯。
2）功能分析。
通过研究食品中关键基因的表达差异，可以揭示不同食品所含营养成分的差异、品质特性和功能特点，指导食品加工和研发。
3）基因改良。
通过基因工程技术，可修改食品中某些基因的表达，实现改进食品品质、增加产量和抗逆性等目的。
2.2 食品质量与安全控制分子生物学技术在食品质量与安全控制方面的应用主要包括：1）污染物检测。
通过检测食品中的细菌、霉菌、病毒等微生物的基因信息，实现食品中有无污染物的检测，保障食品安全。
2）致病物检测。
通过检测食品中潜在的致病物的基因信息，可以预防和控制食品中的致病物对人体的危害。
3）食品中毒检测。
通过检测食品中毒原体（如沙门氏菌、艰难梭菌）的基因信息，可检测食品中是否有毒素，为食品安全检测提供重要的依据。
2.3 新型食品材料研发分子生物学技术在新型食品材料研发方面也有着广泛的应用。
例如：1）人工合成食品色素及香精。
通过分子生物学技术合成食品色素和香精，可以减少人工添加物的使用，保障食品安全和营养健康。
食品微生物实验技术指导书
实验一普通显微镜的使用和细菌形态观察1 目的(1)学习并掌握油镜的工作原理和使用方法。
(2)复习光学显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。
2 原理微生物的最显著特点是个体微小，必须借助显微镜才能观察到它们的个体形态和细胞结构。
熟悉显微镜和掌握其操作技术是研究微生物不可缺少的手段。
实验将介绍目前微生物学研究中最常用的普通光学显微镜的结构和样品制作。
的在于使同学们通过实验，对光学显微镜有比较全面的了解，并重点掌握明视野通光学显微镜中油镜的使用。
3 材料3.1 菌种金黄色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)染色玻片标本。
链霉菌(Streptomyces sp .)及青霉菌(Penicillium sp.)的水封片。
3.2 溶液或试剂香柏油、二甲苯。
3.3 仪器及其他用品显微镜、擦镜纸等。
4 流程安置一＞调光源一＞调目镜一＞调聚光器一＞镜检(低倍镜一＞高倍镜一＞油镜)一＞擦镜一＞复原5 步骤5.1 观察前的准备5.1.1 显微镜的安置置显微镜于平整的实验台上，镜座距实验台边缘约l0cm。
镜检时姿势要端正。
5.1.2 光源调节安装在镜座内的光源灯可通过调节电压以获得适当的照明亮度，若使用反光镜采集自然光或灯光作为照明光源时，应根据光源的强度及所用物镜的放大倍数选用凹面或凸面反光镜并调节其角度，使视野内的光线均匀，亮度适宜。
5.1.3 双筒显微镜的目镜调节根据使用者的个入情况，双筒显微镜的目镜间距可以适当调节，而左目镜上一般还配有屈光度调节环，可以适应眼距不同或两眼视力有差异的不同观察者。
5.1.4 聚光器数值孔径值的调节正确使用聚光镜才能提高镜检的效果。
聚光镜的主要参数是数值孔径，它有一定的可变范围，一般聚光镜边框上的数字是代表它的最大数值孔径，通过调节聚光镜下面可变光阑的开放程度，可以得到各种不同的数值孔径，以适应不同物镜的需要。
5.2 显微观察在目镜保持不变的情况下，使用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的。
食品微生物实验室操作规程
食品微生物实验室操作规程1. 实验室介绍本实验室是专门进行食品微生物研究的实验室，主要用于检测食品中的微生物污染程度、菌落计数和微生物鉴定等工作。
为保障实验结果的准确性和实验人员的安全，制定了以下实验室操作规程。
2. 实验前准备2.1 实验人员在进入实验室前应穿戴实验服，并佩戴帽子、口罩和手套，尽量减少污染源的产生。
2.2 实验前需要检查实验室的消毒情况，确保操作台、试验器具和其他设备的清洁度满足实验要求。
2.3 实验前需要准备好所需的培养基、试剂和实验器具，并进行必要的消毒处理，以防止外源性微生物的污染。
3. 样品处理3.1 样品采集：在进行实验前，实验人员需要根据实验要求，选取符合要求的食品样品进行采集。
采集时需要注意避免外界环境污染，并尽快将样品送到实验室进行处理。
3.2 样品预处理：根据实验项目要求，对样品进行以下处理：去除外表污物、切碎或研磨等。
3.3 样品稀释：根据实验要求，将样品进行适当的稀释，以保证实验所需的微生物数量在可计数范围内。
4. 细菌培养与计数4.1 培养基制备：根据实验要求准备所需的培养基，并按照说明书配制培养基的浓度和pH值。
4.2 细菌分离：将样品中的微生物进行分离培养。
根据实验要求，将适量的样品接种到培养基中，并进行相应的温度和时间培养。
4.3 细菌计数：通过落菌计数法或涂布平板法，对细菌进行计数。
根据实验要求，在培养基上进行菌落计数，并记录结果。
5. 微生物鉴定5.1 细菌鉴定：根据细菌的形态、生理和生化特性，进行细菌的初步鉴定。
通过显微镜观察菌落形态和细胞形态，以及进行相关的生理和生化试验，进行进一步的鉴定。
5.2 真菌鉴定：根据真菌的产孢器、菌丝和孢子形态等特征，进行真菌的初步鉴定。
通过显微镜观察菌落形态和微观形态，以及进行相关的生理和生化试验，进行进一步的鉴定。
5.3 结果验证：对鉴定结果进行复核和验证。
通过对鉴定结果进行交叉验证和对照，确保鉴定结果的准确性。
《食品生物技术》电子教案(齐全版)课件
食品生物技术概论实验指导北京师范大学珠海分校二零一一年九月目录实验一果酒的酿造及感官评价实验二蛋糕的制作与品质鉴定实验三果酱（苹果酱）的制作实验四碳酸茶饮料的制作实验五辣椒味口香糖的制作实验六肉铺的加工实验七低脂雪糕的制作实验八纳豆的制作实验一果酒的酿造及感官评价一、实验目的学习并掌握酸果酒的酿造的基本原理和方法。
二、实验原理酵母分为天然酵母和人工培养酵母两种。
天然酵母即野生酵母，常附着在果皮上。
果汁在酵母菌作用下将中的葡萄糖发酵生成酒精并且产生二氧化碳。
当前发酵结束后，对果酒进行过滤，控制温度，进行后发酵，可进一步提高酒的品质和口味。
为了保证酵母菌发酵纯正，防止或抑制其它杂菌的活动，必需对果汁进行二氧化硫处理。
二氧化硫可以抑制大部份杂菌的活动，但不影响正常酵母的活动，它具有对果酒汁进行杀菌，澄清，抗氧化，溶解和增酸的作用。
三、材料和设备瓷盘、500ml三角瓶（每组3）、1ml吸管、角勺、玻棒、台秤、糖度计、吸球、2层纱布、试纸（pH3.5）、天平、100ml烧杯、100ml量筒、水浴锅等鲜葡萄、猕猴桃、果酒活性干酵母、蔗糖、亚硫酸四、实验内容1、选料：葡萄（选择充分成熟、色泽鲜艳、无病和无霉烂的果实为原料，去掉杂质并冲洗干净表面的泥土。
）2、破碎：葡萄：去除梗，清水洗涤，凉干。
挤破果实，每个处理1瓶，每瓶装0.5斤葡萄，测糖度，测pH值。
3、调糖；先测定果浆的含糖量，按生成1％酒精需要1.7％糖的比例进行调糖，添加能产生约10％酒精的蔗糖，搅拌溶解。
4、二氧化硫和果胶酶处理：二氧化硫的添加常在破碎时或果汁入罐发酵前一次加入，这样杀菌效果较好。
一般常用6%的亚硫酸H2SO3来获得SO2，一般用量是每升果汁加入1 mL亚硫酸。
猕猴桃果实较硬，需加果胶酶处理，加入量为1％。
5、活性干酵母活化：按1g/L的用量，称取活性干酵母，在40℃温水中加入10％的活性干酵母，静止复水活化，8 min轻轻搅拌一次，活化20 min后，加入处理葡萄果汁1和猕猴桃果汁中。
《生物化学》实验指导书
《生物化学》实验指导书适用专业：生物技术、生物工程、食品科学与工程生物与食品工程学院生物科学系生物化学实验细则为了保证生物化学实验的顺利进行，培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能，特制定以下实验细则，请同学们严格遵守。
1.实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。
2.严格按照生物化学实验分组，分批进入实验室，不得迟到。
非本实验组的同学不准进入实验室。
3.进入实验室必须穿实验服。
各位同学进入各自实验小组实验台后，保持安静，不得大声喧哗和嬉戏，不得无故离开本实验台随便走动。
绝对禁止用实验仪器或药物开玩笑。
4.实验中应保持实验台的整洁，废液倒入废液桶中，用过的滤纸放入垃圾桶中，禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。
5.实验中要注意节约药品与试剂，爱护仪器，使用前应了解使用方法，使用时要严格遵守操作规程，不得擅自移动实验仪器。
否则，因非实验性损坏，由损坏者赔还。
6.使用水、火、电时，要做到人在使用，人走关水、断电、熄火。
7.做完实验要清洗仪器、器皿，并放回原位，擦净桌面。
8.实验后，要及时完成实验报告。
2006年1月目录生物化学实验细则 (1)目录 (2)实验1 蛋白质的沉淀、变性反应 (3)实验2 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 (6)实验3 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量 (11)实验4 凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 (16)实验5 DNA的琼脂糖凝胶电泳 (20)实验6 唾液淀粉酶的性质和活力测定 (24)实验7生物氧化与电子传递 (25)实验8 植物体内的转氨基作用 (27)实验1 蛋白质的沉淀、变性反应（3学时）目的要求1. 加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。
2. 了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。
3. 了解蛋白质变性与沉淀的关系。
原理在水溶液中，蛋白质分子表面形成水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒，所以蛋白质溶液和其他亲水胶体溶液相类似。
但是，蛋白质胶体颗粒的稳定性是有条件的，相对的。
优化《食品微生物学实验》教学体系调动学生的学习积极性
优化《食品微生物学实验》教学体系调动学生的学习积极性食品微生物学实验是食品科学与工程专业的一门重要课程，通过这门课程的学习，能够让学生掌握食品微生物学基本理论和实验技术，提高他们对食品微生物学的认识和应用能力。
传统的实验教学方式往往让学生感到枯燥乏味，缺乏学习的积极性。
为了提高学生的学习积极性，我们需要不断优化食品微生物学实验的教学体系，调动学生的学习积极性。
一、增加实验内容的实用性传统的食品微生物学实验往往以繁重的实验操作为主，学生很难在实验中感受到与实际生活相关的实用性。
我们需要增加实验内容的实用性，可以通过引入与实际生产相关的实验项目，如食品中微生物的检测和鉴定、发酵食品的生产等，让学生了解实际生产中的微生物应用情况，增强学生的学习兴趣和学习动力。
二、丰富实验教材的形式除了传统的实验报告和实验讲评，还可以通过多媒体教学、网络课程等形式来呈现实验教材，让学生能够更加直观地了解实验内容和实验过程，增加学生对实验的好奇心和学习兴趣。
三、提供个性化的实验指导针对不同学生的学习和兴趣特点，可以提供个性化的实验指导，让学生根据自己的兴趣和特长选择实验课题，激发学生的学习热情和主动参与性。
通过适当的实验项目安排和实验辅导，能够更好地激发学生的学习兴趣，提高学生的学习积极性和主动性。
四、开展实验竞赛和展示可以根据学生的兴趣和特长，组织实验竞赛和展示活动，让学生将自己所学到的知识和实验技术进行展示和比较，激发学生的学习热情和积极性。
通过开展实验竞赛和展示活动，可以让学生在实践中提高自己的实验能力和技术水平，增强学生的学习动力和学习兴趣。
通过以上优化食品微生物学实验的教学体系，我们可以更好地调动学生的学习积极性，提高学生的学习动力和学习兴趣，从而提高学生的学习效果和实验技术水平。
也可以让学生在学习过程中更加深入地了解食品微生物学的理论知识和实验技术，为将来的科研和实际生产打下扎实的基础。
【采用以上方法能够更好地调动学生的学习积极性，提高学生的学习动力和学习兴趣，为将来的科研和实际生产打下扎实的基础】。
2024版《食品微生物学》电子教案
03 食品中的微生物
2024/1/28
11
食品中常见的微生物种类
01
02
03
细菌
包括乳酸菌、大肠杆菌、 沙门氏菌等，广泛存在于 各类食品中。
2024/1/28
真菌
如酵母菌、霉菌等，常见 于发酵食品和潮湿环境中。
病毒
虽然不直接在食品中生长， 但可通过食品传播，如诺 如病毒、轮状病毒等。
12
食品中微生物的来源与污染途径
《食品微生物学》电子教案
2024/1/28
1
目录
• 课程介绍与教学目标 • 微生物基础知识 • 食品中的微生物 • 食品微生物检测技术 • 食品微生物控制技术 • 食品微生物学实验指导
2024/1/28
2
01 课程介绍与教学 目标
2024/1/28
3
食品微生物学概述
食品微生物学的定义
研究食品中微生物的种类、数量、生 理生化特性以及与食品相互关系的科 学。
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实验三：酵母菌的形态观察及死活鉴定
01 实验目的
学习酵母菌的形态特征和分类方 法，掌握酵母菌死活鉴定的原理 和操作步骤。
02
实验原理
酵母菌是一类单细胞真菌，具有 多种形态和生理特征。通过观察 酵母菌的形态和生理特征，可以 对其进行分类和鉴定。酵母菌的 死活鉴定可以通过观察其细胞壁 完整性和细胞质流动性来判断。
实验步骤
制备霉菌涂片、观察霉菌形态、进行分类鉴定、记 录实验结果。
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实验原理
霉菌是一类多细胞真菌，具有多种形态和生理特征。 通过观察霉菌的形态和生理特征，可以对其进行分 类和鉴定。霉菌的分类鉴定主要依据其菌丝体特征、 孢子形态和菌落特征等。
食品生物技术课程教学大纲
食品生物技术课程教学大纲课程名称：食品生物技术英文名称：Food Biotechnology课程编号：x3030401学时数：32其中实验（实训）学时数：8 课外学时数：0学分数：2.0适用专业：生物工程专业一、课程的性质和任务本课程是生物工程专业开设的一门专业方向课，目的是让学生在掌握生物技术基础理论的基础上，了解国内外关于生物技术在食品工业中的应用的概况和研究进展，并能运用现代生物技术去设计新型食品和食品原料，改进食品生产工艺。
通过这门课程的学习，要求学生正确理解食品生物技术方面的相关原理，掌握各类食品生物技术在应用中的加工方法，做到既能掌握典型食品生物技术方面的理论知识，又能具备一定的实际操作能力。
本课程是一门综合性和实践性很强的应用学科，在教学中要注意课堂教学与实践教学的联系和结合，在学习必要的基础理论知识的同时，着重加强学生实际操作能力的训练和培养，为此在学期末安排8学时实验。
二、课程教学内容的基本要求、重点和难点本课程的主要内容是系统介绍生物技术，即发酵工程、酶工程的基本理论和操作技术。
通过教学，使学生掌握工业菌种分离保藏技术、工业培养基的配制技术、实验室和生产车间的种子扩大培养技术以及酶的生产和分离纯化技术、酶的固定化技术等，了解发酵工程、酶工程、基因工程、细胞工程和蛋白质工程在食品工业中的应用。
具体教学内容的基本要求与重点、难点如下：（一）绪论基本要求：（1）生物技术的定义和研究内容（2）生物技术的形成和发展简史（3）食品生物技术的基本特征和研究内容介绍本门课程的研究对象、方法、内容及对学生的要求、教学安排和考核方式。
掌握生物技术的定义以及食品生物技术的基本特征和研究内容，了解生物技术的发展简史和现代食品生物技术的作用。
重点：生物技术的定义以及食品生物技术的基本特征和研究内容。
难点：发酵工程、酶工程、基因工程、细胞工程和蛋白质工程的概念和相互之间的关系。
（二）酶工程与食品产业基本要求：（1）酶工程原理和方法（2）酶工程与食品加工（3）酶工程与功能性食品配料（4）酶工程与食品原料的改良（5）新型酶制剂及其应用掌握酶制剂的生产、酶的提取、纯化、酶活力的测定以及酶的固定化，了解酶工程与食品加工、酶工程与功能性食品配料、酶工程与食品原料的改良以及新型酶制剂及其应用。
《食品添加剂应用技术》课程标准
《食品添加剂应用技术》课程标准课程名称：食品添加剂应用技术适用专业：食品生物技术1．课程定位和设计思路1.1课程定位《食品添加剂应用技术》是一门研究食品添加剂性质以及其在食品工业中的应用的一门学科，是食品类专业的一门重要的专业课。
本课程以课堂理论教学为主，注重实践，开展课堂讨论与实践动手操作，引导学生结合已学专业课内容，掌握各类添加剂的作用机理，各种添加剂的结构，主要理化性质、毒性、使用范围和用量用法，加深学生对常用食品添加剂的感性认识；熟悉我国食品添加剂使用标准及相关法规；重点掌握各种常见食品添加剂在典型产品中的应用技术。
作为一门重要的专业核心课程，为学生学习后续课程及提高职业能力、创新精神、科学作风和综合素质的全面提升打下良好基础。
1.2设计思路1.2.1课程设计原则课程设置与产业技术进步、与企业岗位技术应用情况相一致，体现为后续课程服务、为行业、企业服务的宗旨，积极打通“教、学、做一体化”的培养途径，拓展技术与技能培养的教育资源，突出理论与实践并重的教育特色，保证教学质量。
（1）课程内容选取坚持以食品添加剂最新国家标准GB2760—2011为选择教学内容的核心，针对不同类型的食品添加剂的理论和实验进行有目的、有计划、按照认识论的规律进行教学内容安排。
（2）理论知识适度化课程中所涉及的专业理论的内容和深度以理论在指导实践工作中能达到“必需、够用、可发展”作为总的要求，严格按照职业岗位工作的需要和发展去螺旋上升式地精选内容适合深度适当的专业理论知识，强调理论在实际工作中的应用，突出专业理论在生产实践中的直效性。
（3）工作任务实用化合理安排典型工作任务教学内容，做到理论知识与工作任务有机结合，任务内容与行业企业的技能需要、与后续课程的要求相适应，最终达到“食品添加剂安全应用高等技术技能人才”的人才培养要求。
（4）课程结构系统化将课程内容进行综合、重组和整合，以认知过程为主线安排。
同时注意课程内在属性的连续性和相关性以及与前导课程和后续课程的合理衔接，实现课程体系的整体优化，使每个教学环节都能够体现出最佳教学效果。
食品生物化学实验指导
食品生物化学实验指导书实验一淀粉的显色、水解和老化一、实验目的和要求1、了解淀粉的性质及淀粉水解的原理和方法。
2、掌握淀粉水解的条件和产物的实验方法。
3、淀粉的老化原理和方法二、实验原理1、淀粉与碘的反应直链淀粉遇碘呈蓝色，支链淀粉遇碘呈紫红色，糊精遇碘呈蓝紫、紫、橙等颜色。
这些显色反应的灵敏度很高，可以用作鉴别淀粉的定量和定性的方法，也可以用它来分析碘的含量。
纺织工业上用它来衡量布匹退浆的完全度，它还可以用来测定水果果实（如苹果等）的淀粉含量。
近年来用先进的分析技术（如X射线、红外光谱等）研究碘跟淀粉生成的蓝色物，证明碘和淀粉的显色除吸附原因外，主要是由于生成包合物的缘故。
直链淀粉是由α-葡萄糖分子缩合而成螺旋状的长长的螺旋体，每个葡萄糖单元都仍有羟基暴露在螺旋外。
碘分子跟这些羟基作用，使碘分子嵌入淀粉螺旋体的轴心部位。
碘跟淀粉的这种作用叫做包合作用，生成物叫做包合物。
在淀粉跟碘生成的包合物中，每个碘分子跟6个葡萄糖单元配合，淀粉链以直径0.13 pm绕成螺旋状，碘分子处在螺旋的轴心部位。
淀粉跟碘生成的包合物的颜色，跟淀粉的聚合度或相对分子质量有关。
在一定的聚合度或相对分子质量范围内，随聚合度或相对分子质量的增加，包合物的颜色的变化由无色、橙色、淡红、紫色到蓝色。
例如，直链淀粉的聚合度是200～980或相对分子质量范围是32 000～160 000时，包合物的颜色是蓝色。
分支很多的支链淀粉，在支链上的直链平均聚合度20～28，这样形成的包合物是紫色的。
糊精的聚合度更低，显棕红色、红色、淡红色等。
下表就是淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色。
表 2-1 淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色淀粉跟碘生成的包合物在pH=4时最稳定，所以它的显色反应在微酸性溶液里最明显。
2、淀粉的水解淀粉是一种重要的多糖，是一种相对分子量很大的天然高分子化合物。
虽属糖类，但本身没有甜味，是一种白色粉末，不溶于冷水。
在热水里淀粉颗粒会膨胀，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊。
基于OBE教育理念的《食品生物技术》教学改革初探
基于OBE教育理念的《食品生物技术》教学改革初探
OBE是一种以学生为中心的教育理念，它强调学生在学习过程中要达到具体的学习成果。
在传统的教育模式中，教师主导教学，强调传授知识，而在OBE教育中，学生主动参与学习，教师更多地充当导师的角色。
明确课程的学习目标和学习成果。
教师应该明确课程的学习目标是什么，学生应该通过这门课程掌握哪些知识和技能。
在《食品生物技术》这门课中，学习目标可以包括对食品生物技术的基本概念和原理的理解，以及对食品生物技术应用的掌握等。
设计具体的学习活动和评价方式。
学习活动应该能够帮助学生达到学习目标，激发学生的学习兴趣和动力。
可以组织学生进行小组讨论、实验和案例分析等，让学生通过实际操作和解决问题的方式来学习和应用知识。
评价方式应该与学习目标相匹配，可以采用项目作业、口头报告、实验报告等形式，评价学生的学习成果和能力。
提供学生自主学习的机会和资源。
在OBE教育中，学生需要发挥主动性和自主学习的能力。
教师可以提供学习资源和指导，例如提供专业书籍、网络资料和实验设备等，鼓励学生自己去探索和学习。
及时反馈和调整教学策略。
教师应该及时对学生的学习进行反馈和评价，帮助学生发现自己的优势和不足，并及时调整教学策略。
可以定期组织学生进行学习小结和反思，让学生意识到自己在学习过程中的进步和不足。
基于OBE教育理念的《食品生物技术》教学改革可以通过明确学习目标、设计学习活动、提供学生自主学习的机会和资源，及时反馈和调整教学策略等方式进行。
通过这种教学方式，可以培养学生的自主学习能力和创新精神，提高他们的综合素质和就业竞争力。
基于OBE教育理念的《食品生物技术》教学改革初探
基于OBE教育理念的《食品生物技术》教学改革初探一、 OBE教育理念OBE教育理念是以培养学生的综合素质和实际能力为目标的，强调学生的自主学习和能力培养。
OBE教育理念认为教育的目的是培养学生掌握一定的知识和技能，培养他们的综合素质和实际能力，以便他们适应未来的社会和工作要求。
在OBE教育中，教学的重点放在学生的学习结果上，而不是传统的“课程内容”，并致力于帮助学生掌握一定的综合素质和实际能力。
二、《食品生物技术》教学改革的必要性传统的《食品生物技术》教学模式侧重于传授知识，学生被 passively 接受知识，缺乏主动学习的积极性。
而且，学生仅仅掌握了一定的理论知识，却无法将这些知识应用到实践中。
随着行业的要求不断提高以及社会的发展需求，传统的教学模式已经不能满足学生的学习需求。
有必要进行《食品生物技术》教学改革，以培养学生的综合素质和实际能力。
1、制定学习目标和达成度标准在使用OBE教育理念进行《食品生物技术》教学改革中，首先需要明确学习目标和达成度标准。
学习目标是指学生在学习过程中需要掌握的知识和技能，而达成度标准则是对学生达到学习目标所需达到的绩效水平进行具体的描述和说明。
通过明确学习目标和达成度标准，可以为学生提供明确的学习方向和目标，帮助他们更好地认识学习内容和学习要求，提高学习的积极性。
2、以案例教学为主传统的《食品生物技术》教学模式侧重于理论知识的传授，很少涉及到实际应用和案例分析。
而基于OBE教育理念的《食品生物技术》教学改革则应以案例教学为主，注重理论与实践的结合。
在教学过程中，可以通过真实的案例、实验和实践活动来帮助学生掌握知识和技能，提升他们的综合素质和实际能力。
3、注重学生的自主学习和能力培养基于OBE教育理念的《食品生物技术》教学改革应注重学生的自主学习和能力培养。
教师应该从知识的传授者转变为学生的学习指导者和学习顾问，激发学生的学习兴趣和学习动力，培养他们的自主学习能力和实际操作能力。
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纤溶酶是大豆发酵过程中由微生物分泌的一种蛋白水解酶，在酶学分类上有些是丝氨酸蛋白酶，有些是金属蛋白酶，具有能直接降解血栓纤维蛋白，并不降解血浆纤维蛋白原，可口服，经消化道直接吸收，安全可靠，在人体内半衰期长，不易引起体内出血等优势，被认为是潜在的、安全的溶栓剂。
一、基本原理能够产生纤溶酶的菌株在初筛平板上生长后，其菌落周围可形成明显的蛋白水解圈。
二、实验目的学习用选择平板分离纤溶酶产生菌的方法，获得产纤溶酶菌株。
三、实验器材1. 原料豆豉或纳豆2. 溶液和试剂蛋白胨，牛肉膏，琼脂粉，氯化钠，酪蛋白，营养琼脂，葡萄糖等。
3. 仪器和用品三角瓶，培养皿，吸管，试管，涂布棒，培养摇床，高压灭菌锅，天平、振荡混合器四、操作步骤1. 初筛培养基的配制（%）：大豆蛋白胨 1.0，牛肉膏0.3，氯化钠0.5，酪蛋白2.0，琼脂粉2.02. 菌种保存斜面的配制（%）：葡萄糖0.5，营养琼脂3.5。
分装成若干支试管，试管上带棉塞。
（每人3支试管）3. 培养基与器皿（1.5 mL离心管60个，无菌水100 mL）的灭菌121℃，灭菌15 min4. 菌液的制备分别称取3 g原料于研钵中，加入10 mL无菌水研碎后，转移至无菌离心管中，迷你离心机离心后，将上清液转移至试管中，备用。
5. 菌液的梯度稀释与划线移取上述菌液0.5 mL至4.5 mL无菌水中，制成10-1菌液，依次类推，制成10-2，10-3，10-4菌液，分别将10-3，10-4菌液涂布到初筛培养基上，每个梯度涂布2块平板，分别放入28℃、35℃培养20 h左右观察结果。
用接种环从实验项目一的平板上选择一个能产水解圈的菌株在选择平板上划线分离。
（每人划1~2个平板）6. 产纤溶酶菌株的分离纯化7. 产纤溶酶菌株的菌落形态观察及菌种保存将上述划线后的平板放入37℃培养箱培养20 h后，将平板拍照，接种其中最为典型的菌株划线保存在试管斜面上；观察产纤溶酶菌株在选择平板上的菌落形态，并对其进行描述。
一、基本原理1. 不同类型的纤溶酶都能在初筛平板上形成水解圈，细菌在平板上的生长条件和液体环境中生长的情况相差很大，因此在平板上产圈能力强的菌株不一定就是纤溶酶的高产菌株，因此要进行酶活测定复筛。
2. 蛋白酶对酪蛋白、乳清蛋白、谷物蛋白等都有很好的水解作用。
磷钨酸和磷钼酸混合试剂，即福林-酚试剂，碱性条件下极不稳定，易被酚类化合物还原而呈蓝色反应（钨兰和钨兰混合物）。
由于蛋白质中含有具有酚基的氨基酸（酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸），因此，蛋白质及其水解产物也呈此反应。
利用蛋白酶分解酪素（底物）生成含酚基氨基酸的呈色反应，来间接测定蛋白酶的活力。
二、实验目的学习采用福林试剂测定纤溶酶活力。
三、实验器材1. 原料产纤溶酶菌株2. 溶液和试剂蛋白胨，牛肉膏，琼脂粉，氯化钠，干酪素，三氯乙酸，NaOH，Na2CO3，Folin试剂，硼砂，酪氨酸，蒸馏水等。
3. 仪器和用品三角瓶，培养皿，吸管，试管，涂布棒，高压灭菌锅，天平、振荡混合器四、操作步骤1. 选择平板的配制（%）：大豆蛋白胨 1.0，牛肉膏0.3，氯化钠0.5，酪蛋白2.0，琼脂粉2.0，121℃，灭菌15 min。
（200 mL×2）预备实验1（杨华、王金新）2. 扩大培养基的配制（%）：大豆蛋白胨 1.0，牛肉膏0.3，氯化钠0.5，酪蛋白2.0，15×150的试管装6 mL，121℃，灭菌15 min。
（150 mL，分装成25支试管，每6 ~ 7支一包）预备实验1（杨华、王金新）3. 发酵培养基的配制（%）：大豆蛋白胨 1.0，牛肉膏0.3，氯化钠0.5，酪蛋白2.0，250 mL三角瓶的装瓶量为50 mL，121℃，灭菌15 min。
（1200 mL，分装成24个250 mL三角瓶，50 mL/三角瓶）预备实验1（杨华、王金新）4. 菌液的制备用接种环从试管斜面上挑取一环菌株，在选择平板上划线，37℃倒置培养20 h，挑选有明显水解圈的单菌落转接入试管扩大培养液中37℃震荡培养6 h，转接入装有50 mL发酵培养基的三角瓶中继续37℃震荡培养16 h，4℃，5000 rpm离心10 min，取上清液用于纤溶酶活力的测定。
5. pH7.2磷酸缓冲液的制备预备实验2（邓海、张娟）取28mLA液、72 mL B液混合后，用蒸馏水稀释1倍，即为pH7.2磷酸缓冲液。
A液（0.2mol/L磷酸二氢钠溶液）称取31.2 g NaH2PO3.2H2O，用蒸馏水溶解后定容至1000 mL。
B液（0.2mol/L磷酸氢二钠溶液）称取71.6 g Na2HPO3.12H2O，用蒸馏水溶解后定容至1000 mL。
6. Folin试剂的配制预备实验2（邓海、张娟）6.1 Folin试剂在250 mL磨口回流瓶中，加入20 g钨酸钠，5 g钼酸钠及140 mL蒸馏水，再加10 mL85%磷酸，20 mL 浓盐酸，充分混合，接上回流冷凝管，以小火回流10 h。
回流结束时，加入30g 硫酸锂，10 mL蒸馏水及数滴液体溴，开口继续沸腾15 min，以便驱除过量的溴，冷却后溶液呈黄色（如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的步骤）。
转移至200mL容量瓶，用少量蒸馏水洗涤回流瓶，洗涤液一并转移至200mL容量瓶，定容至200 mL，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存。
6.2 Folin试剂使用液使用前，将Folin试剂与水按1:2稀释。
7. 0.4 mol/L碳酸钠溶液的配制预备实验3（瞿格格、喻顺华）准确称取无水碳酸钠42.4 g，以蒸馏水溶解定溶至1000 mL。
8. 0.4 mol/L的三氯乙酸溶液的配制预备实验3（瞿格格、喻顺华）准确称取65.4三氯乙酸，以蒸馏水溶解定溶至1000 mL。
9. 0.5 mol/L的NaOH的配制预备实验3（瞿格格、喻顺华）准确称取2 g NaOH溶解并定至100 mL。
10. 20.00 mg/mL干酪素溶液预备实验3（瞿格格、喻顺华）称取干酪素2.000 g，准确至0.001 g，用少量的0.5 mol/L的氢氧化钠溶液(若为酸性蛋白酶则用浓乳酸2 ~ 3滴)润湿，加入约80 mLpH7.2磷酸缓冲液，在沸水浴中边加热边搅拌，直至完全溶解，冷却后，转入100 mL容量瓶中，用适宜的缓冲液稀释至刻度，此溶液在冰箱内贮存。
11. 100 μg/mL酪氨酸标准溶液预备实验3（瞿格格、喻顺华）准确称取预先于105℃干燥至恒重的L-酪氨酸0.1000 g，用1 mol/L的盐酸60 mL 溶解后定容至100 mL，即为1.00 mg/mL的酪氨酸溶液。
吸取1.00 mg/mL酪氨酸标准溶液10.00 mL，用0.1 mol/L盐酸定容至100 mL，即得100.0 μg/mL L-酪氨酸标准溶液，此溶液在冰箱内贮存。
12. 酪氨酸标准曲线的制作用100 μg/mL酪氨酸标准溶液配制0~100 μg/mL的标准溶液。
试管号0 1 2 3 4 5取100 μg/mL 酪氨酸溶液（mL ）0 2 4 6 8 10蒸馏水（mL ）10 8 6 4 2 0酪氨酸实际浓度（μg/mL ）0 20 40 60 80 100 取上述不同浓度的酪氨酸1 mL与5 mL 0.4 mol/L Na2CO3、1 mL Folin试剂混合，40 ℃水浴显色30 min，680 nm测定吸收值并绘制标准曲线。
试管号0 1 2 3 4 5取不同浓度的酪氨酸溶液（mL ） 10.4 mol/L Na2CO3（mL ） 5Folin试剂 140 ℃水浴显色30 min取出用分光光度计于波长680 nm比色，以不含酪氨酸的0管为空白调零，分别测定吸光度值，以吸光度值为纵坐标，酪氨酸的浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。
计算出当OD为1时的酪氨酸的量（μg），即为吸光常数K值，其K值应在95~100范围内。
13. 样品测定13.1 先将干酪素溶液放入40±0.2℃恒温水浴中，预热5 min。
13.2 取4支试管，各加入1 mL酶液。
13.3 取一支作为空白管，加2 mL三氯乙酸，其他3管作为测试管各加入1 mL干酪素，摇匀，40℃保温10 min。
13.4 取出试管，3支测试管中各加入2 mL三氯乙酸，空白管中加1 mL干酪素。
13.5 静置10 min，使蛋白质完全沉淀，然后用滤纸过滤沉淀。
13.6 各取1 mL滤液，分别加0.4 mol/L的Na2CO3 5 mL、Folin试剂1 mL。
在40℃显色30 min。
680 nm 处测OD值。
以空白管调零点。
五、结果计算1. 酶活定义1g固体酶粉（或1mL液体酶），在40℃（酸性pH=3.0、中性pH=7.5、碱性pH=10.5）条件下，1 min 水解干酪素产生1 μg酪氨酸为一个酶活力单位。
2. 计算酶的活性单位依据以下公式蛋白酶的活力= A×K×4/10×n U/g(mL) A：样品平行试验的平均OD值K：吸光常数4：反应试剂的总体积10：酶解反应时间n：酶液稀释总倍数项目三碳源对菌株产纤溶酶活力的影响一、实验材料1. 实验原料：高产豆豉纤溶酶菌株2. 试剂：蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂粉、蔗糖、葡萄糖、可溶性淀粉、干酪素、麦芽糖、甘露糖、果糖、甘露醇、玉米淀粉、大豆粉、四棱豆粉，三氯乙酸，NaOH，Na2CO3，Folin试剂，蒸馏水等。
3. 器皿：三角瓶，培养皿，吸管，试管，涂布棒，高压灭菌锅，天平、振荡混合器、具塞比色试管等。
4. 仪器设备：分光光度计、灭菌锅。
二、实验操作步骤1. 培养基制备（1）选择平板的配制（%）：蛋白胨 1.0，牛肉膏0.3，氯化钠0.5，干酪素2.0，琼脂粉2.0，121℃，灭菌20 min。
预备实验（刘炎平、申超凡）（2）扩大培养基的配制（%）：葡萄糖1.0，蛋白胨 1.0，氯化钠0.5，15×150的试管装6 mL，121℃，灭菌20 min。
预备实验1（刘炎平、申超凡）（3）发酵培养基1的配制（%）：葡萄糖2.0，蛋白胨 2.0，氯化钠0.5，250 mL三角瓶的装瓶量为50 mL，121℃，灭菌20 min。
（150 mL，分装成3个250 mL三角瓶，50 mL/三角瓶）（4）发酵培养基2的配制（%）：蔗糖2.0，蛋白胨 2.0，氯化钠0.5，250 mL三角瓶的装瓶量为50 mL，121℃，灭菌20 min。
（150 mL，分装成3个250 mL三角瓶，50 mL/三角瓶）（5）发酵培养基3的配制（%）：可溶性淀粉2.0，蛋白胨 2.0，氯化钠0.5，250 mL三角瓶的装瓶量为50 mL，121℃，灭菌20 min。
（150 mL，分装成3个250 mL三角瓶，50 mL/三角瓶）（6）发酵培养基4的配制（%）：干酪素2.0，蛋白胨 2.0，氯化钠0.5，250 mL三角瓶的装瓶量为50 mL，121℃，灭菌20 min。