小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白ELISA试剂盒操作步骤

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中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白量子点荧光定量检测试剂标准化操作流程

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白量子点荧光定量检测试剂标准化操作流程

1 项目简介NGAL 是一种在肾小管受到损伤时分泌到血液和尿液中的蛋白质,是肾脏结构损伤的标志物。

一般在肾脏损伤发生两个小时之后即可明显升高,用于急性(AKI)和慢性肾损伤(CKD)的早期诊断、严重程度判断以及预后评估。

2 项目临床应用2.1 心脏手术、脓毒症、大手术、造影剂、肾毒性药物导致的AKI 的早期诊断和危险分层。

2.2 急诊、外伤、ICU 患者肾功能的常规检测2.3 器官移植术后肾功能恢复的评估2.4 肾脏替代治疗的上机和撤机评估指标2.5 糖尿病、高血压、心力衰竭、红斑狼疮患者肾损伤的早期诊断和预后评估3 目的保证中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测卡结果准确可靠。

4 检测原理本产品采用双抗体夹心法,以固相免疫层析形式进行测定。

经稀释(由于NGAL 在人体内含量较高,检测中加入样本稀释液使检测结果更准确)的待检样本(全血/血清/血浆/尿液)在加样端由毛细作用力向上扩散,经过标记物垫时样本中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白与抗体1(鼠抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体量子点结合物)结合为量子点标记抗体-抗原的复合物;复合物随样本继续扩散到硝酸纤维素膜上,被抗体2(鼠抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白单克隆抗体)的T 线(检测线)拦截,捕获复合物,形成量子点标记抗体-抗原-包被抗体的免疫复合物。

未被拦截的量子点结合物继续上行,被C 线(质控线)包被的重组人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(鼠卵巢细胞)结合,指示反应完成。

通过激发量子点而产生荧光检测信号,使用适用仪器获得定量检测结果。

样本中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白含量与荧光检测信号的强度在一定范围内成线性关系。

5 样本收集和储存5.1 全血、血浆、血清、尿液样本均可用于测试。

5.2 建议使用分离胶血清(黄色帽)).将采集血样加入并摇匀备用。

样本采集后应尽快使用,若采血后不能在 2 个小时内检测的,应放在4℃保存,不得超过2 天。

人(Human)中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒说明书

人(Human)中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断人(Human)中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、7.5、15、30、60、120ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

ELISA检测试剂盒操作流程

ELISA检测试剂盒操作流程

ELISA检测试剂盒操作流程1.准备实验材料和试剂-检验样本:例如血清、尿液、细胞上清液等。

-ELISA试板:根据样本数量选择96孔或384孔的板。

- 试剂盒:包括标准品、washes缓冲液、检测抗体、底物等。

2.样本处理-对于血清等生物液体样本,可用离心将固体物质沉淀并分离下清液。

-样本需储存或运输途中应避免反复冻融。

3.实验板的板液处理-将实验板从包装中取出,将不需要的孔进行盖膜封闭。

- 根据试剂盒说明书,添加适量的板液(Coating Buffer)到每个孔中,使其充分覆盖孔内壁。

-封闭板液的孔,将实验板在2-8℃下放置静置一夜或在37℃下1-2小时孵育。

4.样本添加-倒掉盘液,用PBS或TBST洗板3次,去除残留物。

-将样本加到每个孔中,根据需要添加正样本、负样本和待测样本。

-注意每个样本的剂量和添加的体积,通过试剂盒说明书和实验设计标准控制。

5.抗体添加-清洗步骤同上,将洗板缓冲液加到孔中,重复3次。

-加入检测抗体,根据试剂盒说明书的建议将其添加到孔中。

-要确保抗体的浓度和添加的体积适宜。

6.洗涤-洗涤步骤同上,用洗涤缓冲液洗板,重复3次。

-每次洗涤时,将洗液完全加满孔,静置1分钟,然后倒出洗液。

-注意洗涤时间和洗涤次数的准确控制,以将非特异性结合物质彻底清除。

7.底物添加-清洗步骤同上,将洗液加到孔中,重复3次。

-加入底物,根据试剂盒说明书的建议将其添加到孔中。

-底物液体应完全覆盖孔底,防止反应过程中氧化。

8.反应停止-根据试剂盒说明书,将反应停止液加入到孔中,停止底物的反应。

-注意反应停止液的体积和浓度,以保证反应的准确停止。

9.色谱分析-用ELISA板读板仪读取各个孔的OD值。

-根据试剂盒说明书和实验设计的标准曲线确定样本中目标物质的含量。

-注意设置适当的控制组和标准曲线来保证测量结果的准确性。

总结:ELISA检测试剂盒的操作流程主要包括实验板处理、样本添加、抗体添加、洗涤、底物添加、反应停止和色谱分析。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(酶联免疫吸附法)产品技术要求wantai

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(酶联免疫吸附法)产品技术要求wantai

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(酶联免疫吸附法)
适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人尿液样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的含量。

1.1 产品规格
包装规格:48人份/盒,96人份/盒。

1.2 主要组成成分
表1 试剂盒主要组成成分
2.1 外观
试剂(盒)各组份应齐全、完整,液体无渗漏;标签应清晰,易识别。

2.2 测量系统的线性
在试剂盒的测量范围[10,250]ng/mL内,相关系数r应不低于0.9900。

2.3 准确度
将已知浓度的待测物加入到尿液基质或其他体液成分中,其回收率应在100%±20%范围内。

2.4 空白限
应不高于10 ng/mL。

2.5 重复性
检测低、高两个浓度重复性参考品CV1和CV2,变异系数(CV,%)均应不超过15%。

2.6 稳定性
效期稳定性:将2℃~8℃放置6个月以上的试剂盒检测2.1~2.5,2.9各项,应符合各项目规定的要求。

2.7 批间差
检测重复性参考品CV1,要求随机抽取三批试剂盒的批间差应不超过15%。

2.8 溯源性
校准品溯源性应符合GB/T 21415-2008有关规定,可溯源至企业的工作校准品,并经与已上市产品比对赋值。

2.9 特异性
检测含浓度(1500±50)ng/mL的基质金属蛋白酶-9的人尿液样品,浓度(100±20)μg/mL的α1-微球蛋白的人尿液样品,浓度(200±20)ng/mL的基质金属蛋白酶-2的人尿液样品,结果均应<10ng/mL。

简述使用elisa试剂盒的操作流程

简述使用elisa试剂盒的操作流程

简述使用elisa试剂盒的操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种常用的免疫学试验技术,用于检测体内或体外的蛋白质、抗体、抗原等物质。

ELISA试剂盒是用于进行ELISA实验的一种常见装置。

下面将为您介绍ELISA试剂盒的操作方法。

1.准备工作a.预热-将试剂盒中的所有试剂预热到适当的温度,通常为室温至37°C之间。

b.样品处理-准备好待测样品,可以是血清、细胞上清液、组织提取物等。

如果样品中含有大量的蛋白质或杂质,可以进行样品处理,如稀释、蛋白质去除等。

c.标准品准备-试剂盒通常包含一系列浓度已知的标准品,用于制作标准曲线。

按照说明书的要求,用缓冲液或适当的稀释液将标准品稀释为不同浓度的工作液。

2.涂膜板的处理a.涂膜板选择-根据实验需求选择合适的涂膜板,通常有96孔、384孔等。

b.板钉定位-使用板钉或其他适当的方法将涂膜板固定在适当的工作台上。

c.预涂底物溶液加入-将试剂盒提供的预涂底物溶液加入涂膜板的孔中,注意保持各孔液面平整。

3.样品与试剂添加a.标准品和样品加入-按照实验设计的需要,将标准品和待测样品分别加入涂膜板的孔中。

b.阳性对照和阴性对照加入-根据试剂盒的要求,加入阳性对照和阴性对照。

c.洗涤液加入-在每次试剂或样品加入后,使用专用的洗涤液将孔洗涤,以清除无关物质。

4.反应与显色a.结合抗体加入-按照试剂盒说明书要求,加入适当的结合抗体,用于与待测物质结合形成复合物。

b.二抗加入-加入带有底物标记的二抗,与结合抗体结合形成复合物。

c.显色底物加入-加入含有适当底物的显色底物试剂,使底物与酶结合并发出信号。

5.反应停止与测量a.反应停止液加入-在适当的时间点,根据试剂盒的说明,加入反应停止液,停止底物的酶反应。

b.光密封膜或保护板加盖-加盖光密封膜或保护板,防止溶液蒸发或污染。

6.读取和数据处理a.读取吸光度-使用ELISA读板仪读取各孔的吸光度值。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求模板

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求模板

医疗器械产品技术要求编号中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)1.产品型号/规格及其划分说明1试剂组成试剂1:Tris-HCl缓冲液0.05mol/L;试剂2:NGAL抗体(具体浓度依据抗体效价确定),聚苯乙烯微球≤1%(w/v)。

2校准品组成校准品:NGAL蛋白、新生牛血清、稳定剂<0.1%。

浓度范围:校准品1:0.0ng/mL、校准品2:150.0±30.0ng/mL、校准品3:600.0±120.0ng/mL、校准品4:1500.0±300.0ng/mL、校准品5:3000.0±600.0ng/mL、校准品6:5000.0±1000.0ng/mL,批特异,具体定值见标签。

3质控品的组成质控品:NGAL蛋白、新生牛血清、稳定剂<0.1%。

浓度范围:质控品1(50.0~250.0)ng/mL、质控品2(300.0~700.0)ng/mL,批特异,具体定值见标签。

1.2型号规格1)试剂1:1×30mL、试剂2:1×10mL;2)试剂1:1×30mL、试剂2:1×10mL、校准品:6×1mL(6个浓度)、质控品:2×1mL(2个水平);3)试剂1:2×30mL、试剂2:2×10mL;4)试剂1:2×30mL、试剂2:2×10mL、校准品:6×1mL(6个浓度)、质控品:2×1mL(2个水平);5)试剂1:2×60mL、试剂2:2×20mL;6)试剂1:1×18mL、试剂2:1×6mL、校准品:6×1mL(6个浓度)、质控品:2×1mL(2个水平);7)200测试/盒(试剂1:1×30mL、试剂2:1×10mL)。

小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒使用说明书本

小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒使用说明书本

小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒使用说明书本本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的含量。

试验原理:NE试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知NE浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将NE和生物素标记的抗体同时温育。

小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶ELISA试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中NE的浓度呈比例关系。

试剂盒组成:自备材料蒸馏水。

加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

振荡器及磁力搅拌器等。

安全性避免直接接触终止液和底物A、B。

一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。

稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

不用的其它试剂应包装好或盖好。

不同批号的试剂不要混用。

保质前使用。

使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

使用干净的塑料容器配置洗涤液。

使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

底物A应挥发,避免长时间打开盖子。

底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

避免用手接触,有毒。

实验完成后应立即读取OD值。

加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

Elabscience 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明

Elabscience 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明

(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H6127产品规格:96T/48T/24T/96T*5Elabscience®人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human NGAL(Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。

用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其它相关生物液体中NGAL浓度。

检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。

用抗人NGAL抗体包被于酶标板上,实验时样品(或标准品)中的人NGAL会与包被抗体结合。

后依次加入生物素化的抗人NGAL抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,抗人NGAL抗体与结合在包被抗体上的人NGAL结合,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。

加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。

用酶标仪在450 nm波长处测OD值,NGAL浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中NGAL 的浓度。

试剂盒组成及保存未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒并按照下表中的条件分别保存各组分。

试剂体积以实际发货版说明书为准。

相关试剂在分装时会比标签上试验所需自备物品1.酶标仪(450 nm波长滤光片)2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL3.37℃恒温箱,4.双蒸水或去离子水5.吸水纸6.加样槽样品收集方法(具体处理方法可参考官网:/List-detail-241.html) 1.血清:全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃,1000×g离心20分钟,取上清即可检测。

ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法1.准备工作-将所需试剂和物质取出,并按照使用说明书中的要求进行储存和保存。

确保试剂完整无损,并严格遵守保存条件。

2.样品处理-根据试剂盒的要求,处理待测样品。

这可能涉及到稀释、离心、过滤等步骤,以确保样品符合试剂盒的要求。

注意避免样品的污染和损坏。

3.准备试剂和标准曲线-根据试剂盒的要求,准备所需的试剂和标准曲线。

试剂通常由酶标板和洗涤缓冲液组成。

标准曲线是用于确定未知浓度样品的参考标准。

4.酶标板涂层-先加入涂层抗体或抗原到酶标板的孔中,然后将其在室温下孵育一段时间。

这会使孔中形成抗原或抗体的层,以便后续的反应。

5.吸附溶液去除-将酶标板颠倒并用纸巾轻轻拍干,以将未吸收的溶液去除。

6.样品和标准品加入-根据试剂盒的要求,将样品和标准品加入到孔中。

同时留有几个孔作为空白对照。

注意将样品和标准品加入到正确的孔中,避免交叉污染。

7.孵育和洗涤-放置酶标板在孵育箱中(一般在37摄氏度)孵育一段时间,以促使样品中的目标物质与酶标记的抗体结合。

然后将液体从孔中洗涤掉,以去除未结合的物质。

8.酶标记的二抗加入-加入酶标记的二抗(通常是抗人IgG的辣根过氧化物酶)到酶标板中的每个孔中,使其与目标物质结合。

9.孵育和洗涤-将酶标板重新放回孵育箱中孵育,然后再次进行洗涤,以去除未结合的物质。

10.底物添加-向每个孔中加入底物,使其与酶发生反应,产生颜色的变化。

反应时间根据试剂盒的要求进行控制。

11.反应终止-加入反应停止液,停止酶的反应,防止进一步的颜色变化。

具体的反应停止方法要根据试剂盒的要求进行。

12.颜色的测定-使用酶标仪或光度计测量各个孔中颜色的强度,并将其与标准曲线上的标准值进行比较,以确定样品中目标物质的浓度。

以上是ELISA试剂盒的基本操作步骤。

不同的试剂盒可能略有不同的要求和步骤,因此在操作之前务必仔细阅读和遵守试剂盒的使用说明书。

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南

ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的免疫学实验方法,用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。

它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势,被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。

本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。

一、实验准备1.阅读检测项目的说明书:在使用试剂盒前,仔细阅读说明书,了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。

2.样本准备:根据实验要求,准备样本。

如果需要检测血清中的抗体水平,可以采集血液样本,离心分离血清;如果需要检测细胞培养上清中的分子,将上清收集,并使其清晰,避免细胞或杂质的污染。

3.样本预处理:根据实验需求,对样本进行必要的预处理。

例如,可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本,以改变样本组分和浓度。

4.准备品质控制样品:制备阳性和阴性控制样品,用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。

5.实验器材准备:准备所需实验器材,如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。

确保器材的干净和完整,并按照说明书要求对其进行预处理。

二、试剂使用步骤1.试剂准备:根据说明书要求,将试剂从冰箱中取出,并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。

确保试剂瓶盖紧闭,并避免暴露在直接阳光下。

2.实验操作:按照说明书的要求,将试剂加入到酶标板中,并根据实验设计进行标准曲线的设置。

标准曲线用于测量未知样品的数量,并计算出浓度。

3.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行孵育。

孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。

4.洗涤:使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。

洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。

5.补液:在洗涤完成后,加入辣根过氧化物酶标况稀释液,促进酶标物与特异性结合物的反应。

6.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。

7.反应停止:根据试剂盒的要求,加入相应的停止液,停止酶反应。

ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法

ELISA试剂盒操作方法ELISA(酶联免疫吸附法)是一种常用的实验技术,用于检测目标物(如蛋白质、抗原或抗体)的存在和浓度。

ELISA试剂盒是ELISA实验的核心,包括特定的试剂和材料,用于执行特定的步骤和操作。

以下是一般ELISA试剂盒的操作方法,包含以下步骤:1.准备实验样品:收集所需分析物的样品(例如血清、细胞上清液或组织提取液等),并适当保存或稀释以便后续操作。

2.预处理步骤:根据实验的目的和试剂盒的要求,进行样品的预处理。

这可能包括去除干扰物质、离心、稀释或加热等处理步骤。

3.涂覆酶联免疫板:打开试剂盒中提供的酶联免疫板,将其放置在工作台上。

将涂覆物质(如抗体或抗原)加入到每个酶联免疫孔中,通常使用多通道移液器或微量移液器进行操作。

涂覆后,尽量避免泡沫和交叉污染。

4.触发剂孵育:将涂覆后的酶联免疫板放入孵育箱或板上孵育器中,在适当的温度下孵育一段时间。

此步骤的目的是固定涂覆物质,并优化其活性。

5.洗涤:将试剂盒中提供的缓冲液加入酶联免疫孔中,并倾斜孔盘轻轻敲打或使用洗板仪进行洗涤,以去除未结合的物质和杂质。

通常,洗涤液需要多次更换,充分洗涤以获得更好的准确性和灵敏度。

6. 过量引物(Block):加入试剂盒提供的阻断缓冲液至孔中,目的是防止非特异性结合的发生。

阻断时间可以根据试剂盒的要求进行调整。

7.加入样品和控制物质:将处理好的样品和控制物质,如阳性对照和阴性对照,加入到各个酶联免疫孔中。

注意要根据试剂盒的要求进行适当的稀释。

8.孵育和洗涤:将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中,按照试剂盒的要求进行孵育。

完成孵育后,继续进行洗涤步骤,以去除未结合的物质。

9.检测剂加入:将检测试剂(通常是特异性抗体或酶标记物质)加入酶联免疫孔中。

如有需要,可以进一步稀释试剂以适应实验要求。

10.再次孵育和洗涤:将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中,对要求进行的步骤进行孵育。

完成孵育后,进行洗涤步骤以去除未结合的物质。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(乳胶免疫比浊法)产品技术要求shijiwode

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(乳胶免疫比浊法)产品技术要求shijiwode

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(乳胶免疫比浊法)
适用范围:用于体外定量测定人血清中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的含量。

1.1包装规格
1.2主要组成成分
2.1 外观
试剂1为无色澄清液体,试剂2为乳白色液体。

试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。

2.2 装量
不少于瓶签标示量。

2.3 试剂空白
在测定温度为37℃,比色杯光径为1.0cm,波长为700nm处比色试剂空白吸光度≤1.5。

2.4 分析灵敏度
当样本中NGAL浓度为150ng/mL时,其吸光度变化值△A≥0.005。

2.5 准确度
待检系统与比对系统测值的相关系数相关系数(r)不小于0.975;在[25,500]ng/mL区间内绝对偏差不超过±60ng/ml;(500,5000]ng/mL区间内相对偏差不超过±12%。

2.6 线性
2.6.1在[25 ,5000]ng/mL区间内,线性相关系数r≥0.990;
2.6.2在[25,500]ng/mL区间内,线性绝对偏差不超过±60ng/mL;(500 ,5000]ng/mL区间内,线性相对偏差不超过±12%。

2.7 重复性
用高、中、低三个水平的样本进行检测,变异系数CV不大于10%。

2.8 批间差
随机抽取三批试剂盒对同一份样品进行重复测定,相对极差不超过±10%。

2.9 稳定性
该产品在2℃~8℃条件下贮存有效期为12个月,取效期末的产品进行检测,应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求sainuopu

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求sainuopu

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)适用范围:用于体外定量测定人体尿液中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白。

1.1 试剂盒包装规格试剂1:1×20ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×15ml;试剂1:3×40ml,试剂2:3×10ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×15ml;试剂1:2×400ml,试剂2:1×200ml;试剂1:2×40ml,试剂2:2×10ml。

校准品(选配):1×1ml;1×3ml。

质控品(选配):1×1ml;1×3ml。

1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1:无色至淡黄色澄清液体;试剂2:乳白色液体。

校准品:无色至淡黄色澄清液体。

质控品:无色至淡黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度在37℃、540 nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度范围应在0.3~2.0之间。

2.4 分析灵敏度测定浓度为150ng/ml样本时,吸光度变化值(ΔA)应不小于0.005。

2.5 线性范围在(0,5000)ng/ml范围内:线性相关系数r不小于0.995;在[200,5000)ng/ml 范围内,线性相对偏差应不大于±10%;(0,200)ng/ml范围内,线性绝对偏差应不大于±20ng/ml。

2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于10%。

2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于15%。

2.8 准确度回收试验:回收率应在85%~115%之间。

2.9 质控品赋值有效性测定结果在靶值范围内。

2.10 校准品溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,校准品溯源至企业工作校准品。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求wantaishengwu

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求wantaishengwu

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(荧光免疫层析法)适用范围:本试剂盒与厦门万泰沧海的免疫荧光定量检测仪配套使用,用于体外定量测定人尿液样本中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白含量。

1.1 包装规格:10人份/盒,50人份/盒。

1.2 主要组成成分表1 试剂盒主要组成成分检测卡:附着荧光标记抗NGAL抗体的玻璃纤维、包被有抗NGAL抗体的硝酸纤维素膜、玻璃纤维、塑料背衬。

样本稀释液:0.02mol/L 磷酸盐缓冲液(pH7.4)定标代码:贮存有试剂盒批号及对应定标曲线信息。

2.1 外观试剂(盒)各组份应齐全、完整;标签应清晰,易识别。

2.2 膜条宽度应不小于2.5mm。

2.3 液体移行速度液体移行速度应不低于10mm/min。

2.4 净含量液体组分的净含量与标示值相对偏差不超过±10%。

2.5 测量系统的线性在测量范围[50,1500]ng/mL内,线性相关系数r应不低于0.9900;[50,300]ng/mL浓度线性绝对偏差不超过±45ng/mL,(300,1500]ng/mL浓度线性相对偏差应不超过±15%。

2.6 定量限检测50ng/mL定量限参考品,变异系数(CV,%)应不超过20%。

2.7 准确度检测试剂盒回收率在80%~120%范围内。

2.8 重复性检测低、高两个浓度的重复性参考品CV1和CV2,变异系数(CV,%)应均不超过15%。

2.9 批间差用3个批号试剂盒检测低、高两个浓度重复性参考品CV1和CV2,其结果相对偏差应均不超过±15%。

2.10 稳定性效期稳定性:取2℃~30℃干燥处保存18个月以上试剂盒,检测2.1~2.8,2.11项,结果应符合各项目规定的要求。

2.11 特异性用企业特异性参考品T1~T3检测,结果应均<100ng/mL。

其中T1为(1500±50)ng/mL的基质金属蛋白酶-9尿液样本,T2为(200±20)ng/mL基质金属蛋白酶-2尿液样本,T3为(100±20)μg/mL的α1-微球蛋白尿液样本。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求zhongshengbeikong

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求zhongshengbeikong

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清、血浆或尿液中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白含量。

1.1 规格液体双剂型试剂1(R1):60mL×2,试剂2(R2):15mL×2;试剂1(R1):60mL×1,试剂2(R2):15mL×1;试剂1(R1):40mL×2,试剂2(R2):10mL×2;试剂1(R1):20mL×2,试剂2(R2):10mL×1;选配校准品(6个浓度):1mL×6;选配质控品(2个水平):1mL×2。

1.2 规格划分说明根据净含量划分规格。

1.3 主要组成成分试剂盒由试剂1(R1)液体、试剂2(R2)液体、校准品液体(选配)和质控品液体(选配)组成。

1.3.1 试剂1(R1)液体:甘氨酸缓冲液50mmol/L1.3.2 试剂2(R2)液体:抗人NGAL抗体包被的乳胶颗粒悬浊液1.3.3 校准品液体(甘氨酸缓冲液基质):中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白定值范围:浓度1:0 ng/mL;浓度2:50 ng/mL~200 ng/mL;浓度3:300 ng/mL~500 ng/mL;浓度4:1200 ng/mL~2000 ng/mL;浓度5:2500 ng/mL~3500 ng/mL;浓度6:4500 ng/mL~5500 ng/mL。

(每批定值)1.3.4 质控品液体(甘氨酸缓冲液基质):中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白定值范围:水平1:50ng/mL~300ng/mL;水平2:300ng/mL~1500ng/mL(每批定值)。

2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足:a)试剂1(R1)应为无色或浅黄色透明溶液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损;b)试剂2(R2)应为白色乳浊液,无杂质、无絮状物,外包装完整无破损;c)校准品应为无色或浅黄色透明溶液,外包装完整无破损;d)质控品应为无色或浅黄色透明溶液,外包装完整无破损。

小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白ELISA试剂盒操作步骤

小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白ELISA试剂盒操作步骤

小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白ELISA试剂盒操作步骤使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)含量。

标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

3200ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液1600ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液800ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液400ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液200ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

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小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白ELISA试剂盒操作步骤
使用目的:
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋
白(NGAL)含量。

标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

3200ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
1600ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
800ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
400ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
200ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液
40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5 倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。

测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。

操作程序总结:
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高(样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6 个月__。

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