2012版输血科血库实验室标准操作规程

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大通县第二人民医院医院血库
实验 SOP 文件
ABO血型正定型
编号： XK-SOP 版次： 1 生效日期： 2012-8-1
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1、 实验目的
用盐水介质法进行 ABO血型系统正定型的鉴定。
2、 实验原理
红细胞作为一种颗粒性抗原，在液体介质中和电解质的参与下，可直接与相应抗体结合，
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实验 SOP 文件
实验 SOP 文件目录
编号： XK-SOP
版次： 1
生效日期： 2012-8-1
第 1页
共 1页
编号
XK-SOP-01 XK-SOP-02 XK-SOP-03 XK-SOP-04 XK-SOP-05 XK-SOP-06 XK-SOP-07 XK-SOP-08 XK-SOP-09 XK-SOP-10
2 分钟内判读结果。
9.3、自身抗体可干扰正常结果判读，造成假阳性，应充分洗涤细胞，减少干扰。
9.4、对含有较多自身冷凝集素的受检者，在鉴定血型时往往被误定为
AB 型，遇此情况，需要
37℃生理盐水洗涤受检者红细胞 血型。
2-3 次，以去除吸附在红细胞上的冷凝集素，然后再鉴定
9.5、当用立即试管法不能显示出正常凝集时，对于弱的反应，需室温延长作用时间
15 分钟。
9.6、新生儿红细胞和弱的表现型个体，可能会出现假阴性或比正常反应弱的凝集。
9.7、溶血（排除物理溶血） 和凝血都是血型抗原抗体反应阳性； 首先观察溶血， 然后观察凝血。
9.8、微板法中振荡器震荡的调整要严格遵守一定标准，以便保证细胞沉淀悬浮条件的抑制。
9.9、微板法若用读板机判读结果， 重要的是红细胞悬液浓度和加入孔中液体的体积标准化，
采用血管是否正确；标本是否符合要求（无溶血，无乳糜，无杂物）
。
3.3 、标本处理：接收标本后尽快分离血浆或血清立即进行检测，如暂时不用可放
1-10 ℃范围
的标本冰箱保存 3 天。
4、试剂及被检细胞
4.1 、抗 A、抗 B标准血清。
4.2 、 35%-45%被检红细胞。
4.3 、 2%-4%被检红细胞。
微升） 35%-45%被检红细胞。
6.1.3 、摇动玻片放置约 2 分钟。
6.1.4 、观察并记录结果。
6.2 、试管法
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编号： XK-SOP 版次： 1 生效日期： 2012-8-1
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6.2.1 、取 2 只试管，分区标注 -A 、 -B 及被检者编号、血型。
8.1 、用于临床输血：严重贫血，各种急慢性失血的患者，以及手术前需要备的病人，都必须 提前检查血型和交叉配血。因血型不符的输血会造成严重的溶血性输血反应，所以必须 要坚持同型输血。
8.2 、新生儿溶血症：当母亲与胎儿血型不合时，可能会引起胎儿或新生儿的免疫溶血性疾病， 多发生于 O型母亲孕育 A 型或 B 型胎儿时。
出现肉眼可见的凝集现象，用已知 IgM 类特异性标准抗血清与被检红细胞在盐水介质中反应，
若出现凝集现象， 表明被检红细胞膜上有与血型抗体所对应的抗原，
从而判断和鉴定被检者的
ABO血型。
3、 标本采集
3.1 、采血管：应采用 EDTA抗凝的采血管采集血标本，标本中不可有血凝块。
3.2 、标本接收：接收标本时应该对标本标签信息与申请单信息是否相符，填写是否完整；所
-A 、 -Fra Baidu bibliotek 及被检者编号、血型。
6.3.2 、在 -A 、-B 区域分别加入 1 滴（ -50 微升）相应 -A 、-B 标准血清及 1 滴（ -50 微升）
2%-4%被检红细胞。
6.3.3、轻摇微孔板，混匀孔中液体。
6.3.4、 400g 离心 30s。 6.3.5、用震荡仪震荡微量板，震动能使阳性反应出现凝集细胞扣，而若是阴性反应细胞扣
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编号： XK-SOP 版次： 1 生效日期： 2012-8-1 第 3页 共 3页
8.3 、用于器官移植：受者和供者的 ABO血型必须相符，否则极易引起排斥反应造成移植失败。
8.4 、在法医学上还可用于亲子鉴定等。
9、注意事项 9.1、试验应在室温（ 18-25℃）内进行。 9.2、玻片法边缘易干涸，易造成假阳性结果，所以应在
程序文件名称
ABO 血型正定型 ABO 血型反定型 RH D 血型鉴定
RH 血型定型 聚凝胺试验 盐水配血试验 抗体筛查试验（聚凝胺 ABO 血型定型试剂质量控制（标准血清） ABO 血型反定型用红细胞质量控制（国产试剂） 配血、血型试验标记规定
页码
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6.2.2 、在 -A、 -B 试管内分别加入 1 滴（ -50 微升）相应 -A 、 -B 标准血清及 1 滴（ -50 微
升） 2%-4%被检红细胞。
6.2.3 、离心， 1000rcf/15s 。
6.2.4 、肉眼观察并记录结果。
6.3 、微板法
6.3.1 、取一准备完毕的微板，取合适的两孔分别标注
则很快消除。
6.3.6、判读并记录结果。 7、结果判定
正定型
反定型
血型
抗A
抗B
A1 细胞
B 细胞
O 细胞
+
–
–
+
–
A
–
+
+
–
–
B
–
–
+
+
–
O
+
+
–
–
–
AB
-A 侧凝集， -B 侧不凝集，为 A 型。
-A 侧不凝集、 -B 侧凝集，为 B 型。
-A 、 -B 侧均凝集，为 AB型。
-A 、 -B 侧均不凝集，为 O型。 8、临床意义
可
以使用自动加样器。
9.10、新微板使用前每孔加入一滴 20%-30% 牛血清白蛋白（ BSA ），轻轻摇动微板混匀后室温 放置 10-15 分钟，然后弃去孔中的 BSA ，用水龙头水洗涤微板至少 10 次，再用蒸馏水或
去离子水洗涤微板 2 次，用力甩去版中的液体，自然晾干，备用。
5、设备
5.1 、血型血清学试验离心机：久保田公司、 Diana 公司产品。
5.2 、 eppendorf 多功能离心机。
5.3 、振荡器。
6、实验操作
6.1 、玻片法
6.1.1 、取一张破片，分区标注 -A 、 -B 及被检者编号、血型。
6.1.2 、载玻片上 -A、-B 区域分别加入 1 滴（ -50 微升）相应 -A 、-B 标准血清及 1 滴（ -50