建立小鼠肿瘤模型的研究进展
一种自发抗肿瘤小鼠模型的建立及其抗肿瘤机制的研究进展
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综 肿 瘤 小 鼠模 型 的 建 立 及其 抗 肿 瘤机 制 的研 究 进 展
周 万青综述 ， 李芳秋审校
（ 京军 区南京 总 医院解放 军检 验 医学研究 所 ， 南 江苏南 京 ２ ０ ０ ） １０ ２
摘 要 ： 介 绍 一 种 肿 瘤 自发 性 消 退／ 全 抵 抗 （ Ｒ Ｃ ） 小 鼠 以 及 国外 学 者 对 其 抗 肿 瘤 机 制 的研 究 。 发 现 天 然 免 完 Ｓ／ Ｒ 的
ＺＨＯＵ ａ — ｎ ｅ ｉｗｉｇ ，ＬＩＦ ｎ － ｕ ｃ ｅ ｋｎ Ｗ ｎ ｑｉ ｇ ｒｖ ｅ ｎ ａ ｇ ｑｉ ｈ ｃ ｉ ｇ
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肿瘤动物模型构建实验技术
肿瘤动物模型得建立可以：（1）评价抗肿瘤免疫治疗得疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好得研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好得实验工具。
实验方法：诱发性肿瘤动物模型实验方法原理：诱发性肿瘤动物模型就是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物得肿瘤等。
实验材料：肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒、无血清培养基质、3%中性甲醇石腊仪器、耗材、低温离心机、血球计数器、游标卡尺实验步骤一、肝癌1．二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌（1）取体重250 g左右得封闭群大白鼠，雌雄不拘；（2）按性别分笼饲养。
除给普通食物外，饲以致癌物，即用0、25%DEN水溶液灌胃，剂量为10 mg/kg，每周一次，其余5天用0、025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由饮用；（3）共约4个月可诱发成肝癌；（4）也可以单用0、005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。
2．4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌（1）用含0、06%DBA得饲料喂养大鼠，饲料中维生素B2不应超过1、5～2 mg/kg；（2）4～6月就有大量得肝癌诱发成功。
3．2-乙酰氨基酸（2AAF）诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌（1）给成年大鼠含0、03% 2AAF标准饲料；（2）每日每平均2～3 mg 2AAF（也可将2AAF混于油中灌喂），3～4月后有80～90%动物产生肝肿瘤。
4．二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌：（1）用剂量为每日0、3～14 mg/kg体重，混于饲料或饮水中给予；（2）6～9个月后255/300大鼠发生了肝癌。
5．亚胺基偶氮甲苯（OAAT）诱发小鼠肝癌（1）用1%OAAF苯溶液（约0、1 ml含1 mg）涂在动物得两肩胛间皮肤上，隔日一次，每次2～3滴，一般涂100次。
（2）实验后7～8周即而出现第一个肝肿瘤，7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。
（3）或用2、5 mg OAAT溶于葵瓜子油中，给C3H小鼠皮下注射4次，每日间隔10天，也可诱发成肝癌。
小鼠肿瘤模型研究发展历史
小鼠肿瘤模型研究发展历史最早的肿瘤模型是通过将鼠肿瘤移植到具有免疫活性宿主小鼠中而建立的（图1A）。
这些同种异体移植模型在20世纪60年代至70年代期间用作药物筛选的主力，并且成功地鉴定了许多有效的细胞毒性药物，例如长春新碱和丙卡巴肼。
由于这种模型具有完全免疫活性，因此它们在免疫肿瘤学试剂的评估中也特别有用。
因为它们可用于研究从初始阶段的抗肿瘤免疫应答的产生，并且不需要过继转移免疫群体。
此模型可用于前期筛选鼠源/人鼠同源免疫检查点抑制剂的抗肿瘤作用及机制研究。
然而，这种小鼠模型缺乏人类的肿瘤组织和人类的免疫系统，无法模拟人类肿瘤微环境的异质性和复杂性。
肿瘤研究中应用的基因工程小鼠模型（genetically engineered mouse model，GEMM）通过转基因方法修饰小鼠的癌基因或抑癌基因来诱导肿瘤发生（图1B）。
其自发形成原位肿瘤，模拟了肿瘤形成的过程。
并且其肿瘤微环境含有天然免疫抑制基质和脉管系统。
然而此模型建立耗时长，肿瘤发生非同步化，存在非预期表型产生，缺乏人类免疫系统，并且与同源模型一样，需要考虑鼠免疫靶标是否与相应的人靶标交叉反应。
图1. 免疫肿瘤学的临床前小鼠模型为了创建更真实的人类疾病模型，重现人体免疫系统功能的临床前模型,研究人员开始研究开发人源化小鼠肿瘤模型。
人源化小鼠模型历史上的第一个重要事件是产生免疫缺陷小鼠品系，其能够使人细胞植入（图1C和图2）。
人类细胞或肿瘤组织移植到无胸腺裸鼠体内的过程始于20世纪60年代，但是间隔20年后CB17-Prkdcscid小鼠才被广泛应用。
这些小鼠是严重联合免疫缺陷（scid）突变的纯合子，可以成功移植人PBMC ，胎儿组织和人造血干细胞。
然而，基于CB17-Prkdcscid的人源化小鼠存在着很多缺点，如CB17-Prkdcscid 小鼠存在渗漏现象，随着年龄生长，会部分恢复自体的T和B细胞功能且NK细胞和其他免疫细胞活性处于高水平，这使得其对人类细胞的排斥；移植时为了清除小鼠内源造血干细胞，需要对其进行半致死剂量的放射性辐照，而scid突变产生DNA损伤修复缺陷，导致其抗辐照能力差。
小鼠抗肿瘤实验报告
肿瘤是当今世界严重的公共卫生问题之一，其发病率和死亡率逐年上升。
因此，寻找有效的抗肿瘤治疗方法对于提高人类健康水平具有重要意义。
本研究旨在通过构建小鼠抗肿瘤实验模型，探讨新型抗肿瘤药物的作用效果，为临床抗肿瘤治疗提供理论依据。
#### 二、实验材料与方法1. 实验动物：选取SPF级C57BL/6小鼠，体重18-22g，雌雄各半，由XX实验动物中心提供。
2. 实验药物：抗肿瘤药物XX，由XX制药公司提供。
3. 实验仪器：小鼠抗肿瘤实验模型、显微镜、细胞培养箱、CO2培养箱、酶标仪、凝胶成像系统等。
4. 实验方法：（1）构建肿瘤模型：采用皮下注射法，将S180肿瘤细胞悬液注入小鼠腋下，建立S180荷瘤小鼠模型。
（2）分组与给药：将荷瘤小鼠随机分为以下四组：A组：空白对照组，不给予任何处理；B组：模型组，给予等量生理盐水；C组：低剂量实验组，给予低剂量抗肿瘤药物；D组：高剂量实验组，给予高剂量抗肿瘤药物。
（3）观察指标：1）肿瘤体积：每周测量肿瘤直径，计算肿瘤体积；2）体重：每周测量小鼠体重；3）生存率：记录各组小鼠的存活天数；4）肿瘤细胞凋亡：采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况；5）肿瘤微环境：检测肿瘤组织中巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞浸润情况。
1. 肿瘤体积：经过4周实验，各实验组肿瘤体积均较模型组显著减小（P<0.05），且高剂量实验组肿瘤体积最小。
2. 体重：各实验组小鼠体重与模型组相比无显著差异（P>0.05）。
3. 生存率：高剂量实验组小鼠生存率最高，达80%，显著高于模型组（P<0.05）。
4. 肿瘤细胞凋亡：TUNEL法检测结果显示，高剂量实验组肿瘤细胞凋亡率显著高于模型组（P<0.05）。
5. 肿瘤微环境：高剂量实验组肿瘤组织中巨噬细胞、淋巴细胞等免疫细胞浸润情况较模型组显著增加（P<0.05）。
#### 四、讨论本研究通过构建小鼠抗肿瘤实验模型，观察了新型抗肿瘤药物XX在不同剂量下的抗肿瘤效果。
研究肿瘤动物实验报告
研究肿瘤动物实验报告
本报告旨在探讨肿瘤动物实验的研究成果和相关发现。
实验目的是通过对动物模型进行肿瘤实验，从而加深对肿瘤发展机制的理解，挖掘新的治疗方法和疗效评估指标。
实验设计中，我们选用了经典的小鼠肿瘤模型，并通过不同的实验组和对照组进行比较，以确保实验数据的准确性和可靠性。
在实验过程中，我们详细记录了动物模型的建立、肿瘤的发展和治疗干预等关键步骤的信息。
通过对肿瘤动物实验的观察和分析，我们发现了一系列关于肿瘤生长、转移和治疗等方面的重要发现。
首先，我们观察到肿瘤在小鼠体内呈现出逐渐增大的趋势，并表现出不同的生长速率和特点。
此外，我们还注意到肿瘤可通过血液或淋巴系统进行转移扩散，进一步危及生命。
在治疗实验中，我们使用了常见的抗肿瘤药物，观察和记录了肿瘤对药物的反应和治疗效果。
结果显示，不同药物对肿瘤的治疗效果具有一定差异，且肿瘤对药物基因的敏感性也存在差异。
这些发现为肿瘤治疗提供了新的思路和策略。
此外，我们还做了一系列生物学分析，包括组织切片、免疫组织化学染色和基因表达分析等。
通过这些实验，我们深入了解了肿瘤的组织学特征和分子机制，为进一步研究提供了有效的实验数据和依据。
总结而言，肿瘤动物实验为我们提供了关于肿瘤的重要信息和
数据。
通过对动物模型中肿瘤的观察和实验干预，我们深入了解了肿瘤的发展机制、治疗响应和分子特征。
这些发现为肿瘤治疗和研究提供了新的理论基础和临床指导。
在未来的研究中，我们将进一步优化实验设计，加强实验数据的统计和分析，以推动肿瘤研究的进一步发展和转化应用。
小鼠癌症模型的建立及治疗策略研究
小鼠癌症模型的建立及治疗策略研究近年来，癌症带来的威胁越来越大，不仅给人类带来巨大的伤害，也给动物带来不少困扰。
小鼠在癌症模型的建立上具有很大优势，因为小鼠与人类的遗传相似度较高，又可以轻松获取，更因其短生命周期、高繁殖速度和低成本等特征，成为了目前最为理想的癌症研究模型之一。
一、小鼠癌症模型的建立1、人工诱导模型人工诱导模型是一种基于实验室操作、通过引入损伤而引发癌症的模型。
这种模型常用的方法有放射线照射、化学物质注射等。
人工诱导模型的优点在于可以直接控制造模方式，不过可能存在某些限制和安全性问题。
2、遗传性模型遗传性模型通常是通过引入特定基因完成，以模拟人类遗传癌症疾病。
该类模型具有遗传多变性，可以在不同的背景上诱导不同的癌症类型。
遗传模型介绍最广泛的例子是P53突变小鼠模型，这些小鼠胚胎会带有p53 突变，从而使正常细胞失去周期和死亡机制，成为体内肿瘤的最终形成因素。
3、转移性模型转移性瘤模型是通过将人类癌细胞注射到小鼠体内，通过它转变成更具有侵略性的癌症类型，具有可应用性强的特点。
二、小鼠癌症治疗策略研究癌症治疗的核心目标是发现癌症细胞生长与传播所依赖的特定靶标，这被称为“拿下癌症的脚踏实地”。
1、药物治疗药物治疗是癌症治疗的核心部分之一，其核心目标是发现治疗癌症所依赖的特定靶标，然后研究合适的化学物质，以达到影响癌症细胞可持续性生长的效果。
比如，索非布韦（sorafenib）是通过抑制血管生成来阻止癌细胞迅速生长的化学物质。
2、放疗治疗放疗，即同位素治疗，是一种通过放射性同位素结合寻找癌症细胞，从而与癌症细胞特异性相结合的治疗方法。
同位素在特定时间释放出粒子，杀死癌细胞，起到治疗作用。
3、免疫治疗免疫疗法是癌症治疗中的一项重要策略，用于提高体内免疫细胞对某种癌细胞的抗体反应。
癌症也被称为“免疫逃避性疾病”，因为它可以通过发生在免疫细胞和肿瘤组织之间的复杂相互作用，从而在某种程度上逃避宿主的免疫攻击。
小鼠模型在肿瘤免疫研究中的进展与意义
究 恶 性 细 胞 与 免 疫 细 胞 之 间 的 关 系 。 恶 性 肿 瘤 的 各 种 小 鼠 模 型 奠 定 了 肿 瘤 免 疫 学 的 基 础 ,指 导 了 免 疫 监 视 、免
疫平衡和免疫逃逸理论的形成,故构建 动 物 模 型 在 研 究 中 起 到 至 关 重 要 的 作 用。本 文 就 近 年 来 有 关 肿 瘤 免 疫
immunecellscanbestudied.Various mouse modelsof malignanttumorshavelaidthefoundationfortumor immunologyandguidetheformationofimmunesurveillance,immunebalanceandimmuneescapetheory,so
肿瘤的小鼠模型研究
肿瘤的小鼠模型研究引言：肿瘤是一种常见的疾病，造成了全球广泛的健康问题。
为了研究这种疾病的发生机制以及开发有效的治疗方法，科学家们一直在寻找合适的动物模型来进行实验。
其中，小鼠模型已经成为肿瘤研究领域最常用的模型之一。
本文将介绍小鼠模型在肿瘤研究中的应用，包括模型建立、体内实验和数据分析等方面。
一、小鼠模型的建立1.1 选择适当的小鼠品系建立肿瘤小鼠模型时，选择合适的小鼠品系非常重要。
由于不同品系的小鼠在遗传背景、免疫系统和易感性等方面存在差异，因此需要根据具体的研究目的选择合适的品系。
目前常用的小鼠品系包括NOD/SCID小鼠、BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠等。
1.2 形成肿瘤模型形成肿瘤模型的方法有很多种，常用的方法包括植入肿瘤细胞、化学诱导和基因敲除等。
其中，植入肿瘤细胞是最常用的方法之一。
这种方法将肿瘤细胞注射到小鼠体内，使其形成肿瘤。
根据不同的实验目的，可以选择不同的细胞类型，如肿瘤细胞系、原代肿瘤细胞或转基因小鼠肿瘤细胞等。
此外，还可以通过化学物品诱导小鼠形成肿瘤，或者利用基因敲除技术使小鼠体内特定基因缺失从而形成肿瘤。
二、小鼠模型的应用2.1 病理学研究小鼠模型可以用于病理学研究，通过对小鼠形成的肿瘤进行组织学和病理学检查，可以了解肿瘤的组织结构、细胞类型和病理特征等。
这对于肿瘤的诊断和鉴别诊断非常重要。
2.2 药物筛选小鼠模型可以用于筛选新的抗肿瘤药物。
通过将候选药物注射到小鼠体内，观察其对肿瘤的治疗效果，可以评估药物的抑制肿瘤生长的能力。
这种方法可以帮助科学家们确定哪些药物具有潜在的治疗效果，并优先发展。
2.3 肿瘤发生机制研究肿瘤的发生机制是肿瘤研究的重要课题之一。
小鼠模型可以通过研究肿瘤的发生过程以及相关信号通路的调控机制，揭示肿瘤的发生机制。
这对于进一步了解肿瘤的发生发展规律以及找到干预和预防肿瘤的新途径具有重要意义。
三、小鼠模型研究的数据分析小鼠模型研究产生的数据通常需要进行统计分析，以便得出可靠的结果。
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定小鼠肿瘤模型的建立及鉴定是癌症研究中非常重要的一步，可以用于研究肿瘤的发生机制、治疗策略以及评估新的抗癌药物。
下面将详细介绍小鼠肿瘤模型的建立及鉴定的方法并提供一些实用的技巧。
肿瘤模型建立的方法主要包括人工移植方法、化学物质诱导方法和遗传工程方法。
一、人工移植方法：1.将人类肿瘤细胞、移植物肿瘤组织或细胞株移植到小鼠体内，可以通过裸鼠或免疫缺陷小鼠模型建立人类肿瘤模型。
当细胞或组织取出并经过相关处理后，通过给小鼠注射或将其移植到小鼠体内，研究人类肿瘤的生长和发展。
2.移植人体肿瘤片段。
3.使用免疫缺陷小鼠模型，如裸鼠、严重联合免疫缺陷小鼠等，可以接受外源组织移植而不会引发排斥反应。
二、化学物质诱导方法：1.化学物质诱导肿瘤模型是通过给予小鼠致癌物质或诱导剂来诱发肿瘤发生。
2.应遵循相关伦理原则使用易获得且时间成本低的致癌物质。
3.诱导剂可通过各种途径给予小鼠，如口服、皮下注射、腹腔注射等。
4.对于使用化学物质诱导的肿瘤模型，需要在给药期间和给药后对小鼠进行定期观察和血液检测，以评估肿瘤的发生和发展情况。
三、遗传工程方法：1.遗传工程方法可利用转基因技术将特定肿瘤相关基因引入小鼠体内，例如，通过敲除或激活肿瘤抑制基因或癌基因等，产生特定类型的肿瘤模型。
2.通过基因敲除、敲入或点突变技术，可改变小鼠体内特定基因的表达水平，以模拟人类肿瘤的发生和发展。
确定小鼠肿瘤模型建立成功后1.观察和检测小鼠是否出现明显的肿瘤体积增大和质地变硬等症状。
2.定期观察小鼠的体重变化，以评估肿瘤对小鼠健康状况的影响。
3.使用体重表、肿瘤质量表等测量工具定期测量肿瘤体积，以评估肿瘤生长速度。
4.进行组织学检测，通过活体组织活检或解剖后进行病理学检测，以确定肿瘤种类和分级。
5.对肿瘤样本进行免疫组织化学染色、分子生物学检测等，以确定肿瘤的分子特征。
总结：建立和鉴定小鼠肿瘤模型是一项复杂的工作，需要专业的知识和技术支持。
肿瘤模型鼠的研发与应用
肿瘤模型鼠的研发与应用近年来，肿瘤模型鼠成为了癌症研究领域中重要的工具之一，广泛应用于肿瘤发生机制、肿瘤治疗和转化实验研究中。
本文将从肿瘤模型鼠的研发及应用方面进行介绍。
肿瘤模型鼠的研发肿瘤模型鼠是指经过基因改造或移植的鼠类，能够快速产生特定类型的肿瘤。
将人类肿瘤细胞移植到小鼠体内，能够创造出与人类类似的肿瘤环境，为研究人类肿瘤的发生、发展提供了重要的工具。
当前，肿瘤模型鼠主要有以下几种类型。
1. 基因改造肿瘤模型鼠基因改造技术是指通过改变小鼠遗传物质DNA，使其具有人工设计的表型性状。
目前，在研究肿瘤发生、发展方面，基因改造肿瘤模型鼠的建立已经成为了一种重要技术手段。
通过基因改造，研究人员能够在小鼠体内重建异型肿瘤病理机制，全面探究肿瘤的基因调控机制，从而提高肿瘤治疗的精准度。
以癌症研究为例，目前基于基因编辑技术的肿瘤模型已经发展了许多，如HER2阳性乳腺癌模型、K-RAS突变肺癌模型等。
2. 转基因肿瘤模型鼠转基因鼠是指将人类肿瘤细胞转染到小鼠体内，使之产生人类类似的肿瘤，从而模拟人类肿瘤，为肿瘤研究提供所需的动物模型。
转基因肿瘤模型鼠的建立重在人类肿瘤细胞的无限增殖和转移，如此一来，对于人类肿瘤的疾病机制和治疗方法能够进行更加深入的研究。
转基因鼠建立之后，其肿瘤细胞的发展进程、转移过程等也能够进行查看，能够给肿瘤研究带来更为深刻的影响。
肿瘤模型鼠的应用目前，肿瘤模型鼠被广泛应用于癌症研究中，成为了不可或缺的实验动物。
1. 新药筛选研究人员通过转基因肿瘤模型鼠体内进行药物筛选，测试不同药物对特定肿瘤的影响，从而为治疗策略的制定提供更多的选择。
这样，能有效地减少在致死性肿瘤中，药物研发周期长、效果不佳的情况。
2. 癌症治疗在肿瘤治疗上，通过基因改造技术构建的肿瘤模型鼠可以较好地模拟人体的病理过程，对能否治愈人类肿瘤疾病进行评估，有效降低治疗失败率，降低治疗风险。
3. 肿瘤发生机制研究肿瘤研究需要从肿瘤的基本信息入手，通过对这些基本信息进行梳理和分析，来缩小肿瘤研究的范畴。
人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立实验
人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立实验标签：弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠肿瘤模型的建立：（1）深入研究淋巴瘤发病机理；（2）评价治疗药物；（3）建立人弥漫性大B细胞淋巴瘤小鼠模型的条件及肿瘤特点。
实验方法皮下种植法实验方法原理采用SCID 小鼠皮下接种107细胞可成功地建立人人弥漫性大B 细胞淋巴瘤（DLBCL ）移植瘤模型，成瘤率70%，肿瘤的组织学表现类似于人DLBCL。
实验材料SPF 级SCID 小鼠试剂、试剂盒RPMI 1640培养液青霉素谷氨酰胺链霉素CD19 APC抗体CD20 PE抗体CD24 PE抗体山羊抗兔IgG FITC仪器、耗材流式细胞仪离心机水浴培养瓶冰箱注射器离心管封口膜微量移液器实验步骤一、细胞培养1. SUDHL-4为人GCB 样DLBCL细胞株。
将初始密度为2.5× 105 /ml 细胞置于含10% FBS、100 U /ml 青霉素、100 μg /ml 链霉素、30 μg /ml 谷氨酰胺的RPMI1640 培养液的T25 细胞培养瓶中，在37℃、5%CO2、饱和湿度孵箱中培养。
2. 待2-3 d 第1 次传代后，转入T75 细胞培养瓶，以后根据细胞生长情况适时移入T150 细胞培养瓶。
二、流式细胞术检测样品的制备1. 取对数生长期的SUDHL-4 细胞，用无血清PBS 漂洗2 遍后，于PBS /2% FBS 中制成细胞悬液( 1 ×107 /ml) 。
2. 根据说明书建议的适宜浓度加入相应抗体，4℃避光孵育15 min；若需胞内染色，则先采用1% 多聚甲醛对细胞进行固定，然后用破膜剂( 0.25% Saponin) 处理，同时加抗体进行染色，4℃避光孵育过夜。
3. 细胞用PBS /2% FBS 漂洗1遍，悬于200 μl PBS 待测。
4. 流式细胞仪检测时每份样品均测定3 × 105细胞，用FlowJo 软件对检测结果进行分析。
仓鼠肿瘤模型的研究和应用进展
实验方法，尽可能减少各种干扰因素对实验结果的影响。 除化学致癌物外，某些病毒和寄生虫也可诱发肿瘤。 Ｃｈａｉｍｕａｎｇｒａｊ等¨３用麝猫后睾吸虫对仓鼠进行的诱发实验表
明，被麝猫后睾吸虫感染过的仓鼠肝组织有诱生型一氧化氮 合酶和血红素氧合酶１的表达，进而促使小胆管上皮细胞内
ＤＮＡ的损害，从而证实感染介导的炎症是诱发癌变的一个
巴免疫系统，产生针对异种移植的人类恶性肿瘤细胞／组织 的淋巴免疫监控机制。然而，此时已生长增殖到大于１０８个 肿瘤细胞的人类恶性肿瘤组织，会在幼仔机体表达出足够多 的、具有极强淋巴免疫抑制作用的许多种肿瘤细胞因子，能
瘤）、血管瘤、横纹肌瘤，乳腺肿瘤、骨肉瘤（多发于殷骨
和胫骨）等。 ２．２动物可移植性肿瘤：移植瘤的建立方法一般是选择白
发瘤或诱发瘤组织块，制成瘤细胞悬液，接种于同系动物皮 下，如此反复传代，使其移植成功率、生物学特性等趋于稳
定。亦可采用组织块接种法。已被大家所接受的移植瘤模型
完善卫…。因此，幼仔的淋巴免疫系统针对异体或异种移植
于国际卫生组织所定义的人的肺泡癌。１９７６年Ｈａｒｒｉｓ等用 电镜观察也发现仓鼠与人的呼吸道解剖学、组织学、细胞学 和超微结构都非常相似，适合用于模拟人肺癌微环境。
１９８５年，黄润等曾由左肺叶支气管内注入含３ ｍｇ矿粉 尘混合物（ＣＭＩ）、２％呋喃甲醛生理盐水悬液０．０６ ｍｌ／只，
移植性肿瘤模型。现就仓鼠肿瘤模型的研究和应用作一
ｔＯ
Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ
ｏｆ Ｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｔｓ
Ｆｅｔｕｓ ｉｎ
ｍｕｒｉｎｅ
ｏｕｔｃｏｍｅ
ａｎｄ
ｍａｔｉｎｇｓ：ｉｎｖｏｌｖｅ—
Ｉｎｄｕｃｉｎｇ Ｍａｔｅｒｎａｌ Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ
免疫缺陷小鼠体内建立人源化肿瘤转移模型应用进展论文
免疫缺陷小鼠体内建立人源化肿瘤转移模型的应用进展作者简介：徐淑娟，女，硕士研究生研究方向：抗肿瘤药物的临床前研究。
基金项目：国家自然科学基金（30873101）【摘要】转移是恶性肿瘤的重要特征之一，也是影响肿瘤患者治疗预后的重要因素；肿瘤转移是一个复杂的过程，因此，建立一种稳定、可靠的动物模型成为了恶性肿瘤转移的相关研究中的重要环节。
利用免疫缺陷小鼠建立人肿瘤转移模型越来越多应用于肿瘤转移的研究领域，并已具有较广泛的应用前景。
本文将对人源化肿瘤转移模型的建立以及该模型近些年来在肿瘤转移领域的应用进展予以综述。
【关键词】免疫缺陷；小鼠；转移；模型【中国分类号】r73-36【文献标识码】a【文章编号】1004-5511（2012）06-0350-03恶性肿瘤转移的相关研究已是当下肿瘤研究的热点；肿瘤转移是一个复杂的、非随机的多步骤过程, 它涉及肿瘤细胞的侵袭、渗透、迁移、远处粘附及远隔器官内再生长等多个关键步骤［1］. 然而，对肿瘤体内转移机制及生物学特性的研究，最终都要依靠适宜的动物模型来完成。
在动物体内进行人类肿瘤的转移研究，则需要排除模型机体的免疫排斥等因素；异种移植肿瘤转移实验目前主要建立在各种免疫缺陷鼠的模型之上，包括裸鼠、scid鼠、nod-scid 鼠等品系［2］。
自1973年第一例人肿瘤裸鼠转移模型建立至今，越来越多关于人肿瘤的免疫缺陷小鼠转移模型（以下称：人肿瘤转移模型）相继报道; 由于这些小鼠具有不同程度的免疫缺陷，在一定情况下，不易排斥来自同种或异种的移植。
因此应用免疫缺陷小鼠建立人肿瘤转移模型具有独特的优势。
如今，人肿瘤转移模型在肿瘤转移过程机制的研究、高转移瘤株细胞的筛选、治疗转移新药的开发等方面应用广泛，为肿瘤转移的相关研究提供了良好的平台。
本文将就免疫缺陷小鼠体内建立人肿瘤转移模型及其在肿瘤转移研究中的应用等方面，介绍近几年国内外的研究概况。
一. 免疫缺陷小鼠的一般状况人肿瘤转移模型的建立是肿瘤细胞与宿主机体相互作用的过程, 宿主的品系、免疫状况以及微生物学的控制等均是影响建模的重要因素。
仓鼠肿瘤模型的研究和应用进展
诱 发性 动物 肿 瘤 指将 致 癌 物 直 接 与 动物 靶 组 织 或靶 器官 接 触 而诱 发 该 组 织 或 器 官 发 生 肿 瘤 ， 常 见 的接 触 方 法 为 涂
抹 、灌 注 、喂 养 或埋 置 等 。
１ １ 涂 抹 法 ：仓 鼠 口腔 两 侧 具 有 一种 特 殊 的 囊 状 结 构 ，该 ． 部位 无 淋 巴 循环 ，为 免 疫 缺 陷部 位 ，可 以用 化 学 致 癌 物 、射
容性 抗 原 的 免疫 学 特 殊 区 ，是 进 行 组 织 培养 、人 类 肿 瘤 移植
和观 察 微 循 环改 变 的 良好 区域 。仓 鼠 自身也 好 发 肿 瘤 ，并 且 在 某 些 形态 学 、生 物 学 以及 免 疫 学 等方 面与 人 相 似 ，因此 成
为 研 究 肿瘤 的重 要对 象 。常 用 的肿 瘤 模 型 可 分 为诱 发 性 肿 瘤
电镜 观 察 也 发 现 仓 鼠 与人 的呼 吸 道 解 剖 学 、组 织 学 、细胞 学 和超 微 结 构 都 非 常相 似 ，适 合 用 于模 拟 人 肺 癌 微 环境 。 １８ ９ ５年 ，黄润 等 曾 由左 肺 叶 支气 管 内注 入 含 ３ｍｇ矿 粉 尘 混 合 物 （ ＭＩ 、２ 呋 喃 甲 醛 生 理 盐 水 悬 液 ０ ０ ／ ， Ｃ ） ． ６ ｍｌ只 共 １ ５次 可 发 生 癌 变 。石 棉 也 常 用 于 诱 导 仓 鼠肿 瘤 。 Ｈｅ ｔ ｉｚ ｎ 等用 青 石 棉 和 温 石 棉 处 理 仓 鼠气 管 上 皮 细 胞 （ Ｅ ，研 究 ＨＴ ） 石棉 诱 导 ｃｆｓｍＲ — ＮＡ表 达 的 情 况 。ｃ ｏ 是 一 组 调 控 蛋 白基 ｏ —ｓ ｆ 因家 族 ，其 编码 的产 物 可 以调 控 与 细胞 分 裂 有 关 的其 他 基 因
小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段
小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段癌症是当今世界范围内的一种重大疾病，而且其影响范围越来越广泛，与此同时，由于癌症的病发机制尚不完全明确，因此对于防治癌症的研究和探索主要依靠动物模型研究。
小鼠肿瘤模型是目前研究肿瘤发病机制和癌症治疗的重要手段，在注射人类肿瘤细胞后，小鼠可呈现人体肿瘤组织细胞移植的特性。
相对于人体肿瘤实验和传统的肿瘤细胞培养，小鼠肿瘤模型的优异之处在于能够创造肿瘤微环境，仿真人体肿瘤的生长和转移过程，以提高癌症的治疗效果。
本文将详细介绍小鼠肿瘤模型的建立方法以及常见的评价手段。
一、小鼠肿瘤模型的建立方法1.1 人体肿瘤细胞移植模型人体肿瘤细胞移植模型以人类肿瘤细胞在裸鼠或小鼠体内移植后的肿瘤实体为基础，分为无血液供应的固体肿瘤模型和有血液供应的血液源性肿瘤模型两种。
在移植人类肿瘤细胞时，要确保细胞的活力和数量，同时条件控制的严谨性也是建立模型成功的关键。
以草甸欧豆荚腺癌细胞(A549)为例，在室温下用胰蛋白酶消化并在热水浴中加温25分钟，离心后取上清液，将细胞恢复在人工营养的体外环境中培养至稳定生长。
然后注射生长正常的A549细胞到裸鼠的皮下尽处，便成为一个人体肿瘤细胞移植模型。
1.2 化学诱导肿瘤模型化学诱导肿瘤模型是通过注射某些化学物质来诱导荷尔蒙依赖性肿瘤，可以有效地模拟荷尔蒙依赖性肿瘤的发病原因及其恶化过程。
在采用二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠膀胱癌时，过程如下：将DMN溶于苏木精中，经过研磨混合后注射大鼠，每次剂量控制在4-25mg/kg，2个月后检查其膀胱肿瘤的形成情况。
化学物质注射后，不同的化学物质会引起不同部位的肿瘤，如DMN会引起膀胱癌。
1.3 基因敲除技术建立小鼠肿瘤模型目前最为先进的小鼠肿瘤模型是通过基因敲除技术构建。
通过选择与癌症相关的基因，并在小鼠体内干扰其功能，从而让小鼠形成癌症。
其中胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)是一种与人类肿瘤密切相关的基因，在建立小鼠肿瘤模型时被广泛用于其基因干扰的研究。
人源化小鼠在肿瘤模型研究中的应用
人源化小鼠在肿瘤模型研究中的应用近年来，人源化小鼠体系在肿瘤治疗领域的研究中扮演了重要的角色。
如今，科学家们正越来越重视使用这种小鼠模型来进行肿瘤模型研究，并根据其结果来评估化学疗法和免疫疗法等各种治疗方式的效果。
人源化小鼠是指植入人类组织或细胞的小鼠，使其具备人类特定的特征和生物学行为。
这些模型被广泛应用于肿瘤研究中，因为它可以模拟人类肿瘤内的复杂细胞和分子交互。
一、创建人源化小鼠模型创建人源化小鼠模型需要使用多种技术。
其中最流行的技术之一是将人类肿瘤细胞移植到小鼠体内。
这些细胞可以来自人类肿瘤样本，如手术取样的肿瘤组织、体液或转移性肿瘤组织。
此外，还可以使用人类肿瘤细胞系，这些细胞系由定期采集的人类肿瘤组织得到。
当这些人类肿瘤细胞成功种植到小鼠体内后，研究人员可以观察肿瘤的性质，包括其生长率、转移性质和反应性等。
这将有助于透彻地了解肿瘤的形态学和生物学特征。
二、优势与应用与传统的小鼠模型相比，人源化小鼠模型具有显著的优势。
最重要的是，这种模型可以预测许多患者可能会面临的治疗挑战。
它还能够更好地评估新型肿瘤治疗方法的效果，因为这些方法不仅仅是有害细胞，还比较针对性，且具有一定的风险。
人源化小鼠模型还能够帮助科学家了解肿瘤细胞和免疫细胞之间的相互作用，并评估具体的肿瘤疫苗或细胞治疗方案的效果。
此外，它们还可以为药物筛选提供可靠的模型，从而有效减少临床前测试的时间和成本。
在肿瘤治疗领域，人源化小鼠模型的应用实际上不限于化学治疗或免疫治疗的评估。
由于这些小鼠的医学信息实际上与人类相当接近，所以可以采用这种模型用于预测肿瘤再生、侵袭和转移等特征。
此外，研究人员还可以针对特定的肿瘤类型、基因类型和分子标记开发不同的人源化小鼠模型。
三、局限性与未来虽然人源化小鼠模型具有许多优势，但还有一些限制。
首先，由于这种模型有相当的人类特性，对其进行动物道德和伦理的评估如何是否应该保护这些小鼠，需要认真思考。
其次，与人类的多样性相比，人源化小鼠模型的多样性仍然有待完善。
小鼠肿瘤模型建立
小鼠肿瘤模型的建立与鉴定[摘要]：目的：建立小鼠荷瘤数据模型，探索肿瘤生长的本质与其发生发展的规律，寻求对肿瘤生长与转移有抑制作用的药物与治疗方法。
方法：小鼠右腋下注射H22肿瘤细胞，使小鼠荷瘤，观察肿瘤生长，记录体重数据并建立动物模型。
结果：注射部位发生癌变，小鼠肿瘤生长明显，切片结果证明实验成功，模型构建完成，为灵芝多糖抗肿瘤研究奠定了动物实验基础。
关键词：小鼠，肿瘤，体重数据，动物模型To Establish Mice Tumor Model and Identify Characteristics [Abstract]: Purposes: To establish mice tumor data models, explore the essence of tumor growth, develop the law, and seek to an effect method of tumor growth and the transfer of drugs and treatments. Methods: Named right armpit injections H22 tumor cells to a mouse neoplasm observe tumor growth. To record weight data and establish animal models. Results : Injection parts turn cancertization ,the mouse's tumors grow obviously, the consequence of slices prove the experiment successfully, and model established completely, for the anti-cancer research ganoderma lucidum polysaccharide lay a animal experiments foundation.Keywords: mouse, tumors, weight data, animal models0 引言肿瘤是由机体中某些细胞基因发生突变为特征的一种全身性疾病，它的危害不仅在于它损害身体的各器官，而且还会产生各种肿瘤并发症，如转移、积水、疼痛等，最终导致身体各器官功能衰竭而危与患者的生命。
科研动物肿瘤实验报告
一、实验背景近年来，肿瘤已成为全球范围内最主要的死亡原因之一。
为了提高肿瘤的治愈率，研究人员一直在寻找新的治疗方法和药物。
动物肿瘤实验是肿瘤研究的重要手段之一，可以模拟人类肿瘤的生长、发展和治疗反应，为肿瘤治疗提供理论依据。
本实验旨在探讨新型抗肿瘤药物对动物肿瘤模型的抑制作用。
二、实验材料与方法1. 实验动物实验采用昆明种小鼠，雌雄各半，体重18-22g，由本实验室动物中心提供。
2. 实验分组将实验小鼠随机分为四组，分别为对照组、模型组、低剂量组和高剂量组。
3. 肿瘤模型制备采用小鼠乳腺癌细胞株（4T1）建立动物肿瘤模型。
将4T1细胞以1×10^6个细胞/只的浓度接种于小鼠背部皮下，观察肿瘤生长情况。
4. 实验方法（1）对照组：不给予任何药物处理，仅观察肿瘤生长情况。
（2）模型组：给予相同剂量的溶剂，观察肿瘤生长情况。
（3）低剂量组：给予低剂量的抗肿瘤药物，观察肿瘤生长情况。
（4）高剂量组：给予高剂量的抗肿瘤药物，观察肿瘤生长情况。
5. 数据收集与分析（1）观察肿瘤生长情况，记录肿瘤体积、重量等指标。
（2）统计肿瘤生长曲线，分析各组肿瘤生长速度。
（3）采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析，比较各组间差异。
三、实验结果1. 肿瘤生长情况实验结果表明，与对照组相比，模型组、低剂量组和高剂量组的肿瘤体积和重量均显著减小（P<0.05）。
其中，高剂量组的肿瘤体积和重量减小最为明显。
2. 肿瘤生长曲线通过统计肿瘤生长曲线，可以看出高剂量组的肿瘤生长速度明显低于对照组、模型组和低剂量组。
3. 数据分析采用SPSS 22.0软件对实验数据进行统计分析，结果表明高剂量组与低剂量组、模型组及对照组相比，肿瘤体积和重量差异具有统计学意义（P<0.05）。
四、讨论本实验结果表明，新型抗肿瘤药物对动物肿瘤模型具有显著的抑制作用。
高剂量组的肿瘤体积和重量减小最为明显，说明药物在较高剂量下具有更强的抗肿瘤效果。
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建立小鼠肿瘤模型的研究进展摘要：建立一种理想的肿瘤动物模型对研究肿瘤的发病、治疗和预防有重大的意义。
其中小鼠肿瘤模型具有生长周期快、易获得、易操作等优点被基础实验研究所广泛采用，如何选择和建立一个合适的小鼠肿瘤模型对肿瘤的整个研究有着举足轻重的作用。
关键字：肿瘤，动物模型，小鼠肿瘤，是一种严重威胁人类健康的多发病和常见病。
对肿瘤的研究一般都是在人类疾病动物模型的基础上展开的。
建立一个完全反映人类疾病的动物模型比较困难，但可依据不同的实验目的选择相应的动物实验模型。
1.实验动物的选择可用作肿瘤模型的动物有很多，小鼠肿瘤模型作为其中一种常用模型主要因为有以下几个优点。
（1）易获得，常用的肿瘤模型小鼠通常采用SPF级小鼠，SPF级小鼠一般医学院校及研究所都能买到。
（2）生长周期短，一般小鼠肿瘤模型两周左右就能长大，能大大缩短实验周期。
（3）易操作，小鼠的动物实验操作一般简便，因此可适当增加组内样本数量，使实验数据更具说服力。
2.理想的建立肿瘤模型应具备的条件（1）肿瘤生长的过程应与人类肿瘤生长过程相似，做到尽可能复制出与人类肿瘤相同的模型。
（2）制作模型的方法简单易行。
（3）动物模型的重复性要好，要能满足实验的多次重复试验结果稳定性好。
（4）采用的建模方法对实验人员和环境无危害或危害较小。
3.肿瘤来源的选择现在世界上保有近500种的动物移植瘤，但常用于筛药的不到40种，多数为小鼠肿瘤，其次是大鼠和仓鼠移植瘤，包括小鼠L1210淋巴白血病，P1534淋巴白血病，艾氏腹水瘤，Friehd病毒白血病，肉瘤180，白血病P388，Lewis肺癌，腺癌755，白血病615，Walker-256，吉田肉瘤，肉瘤45，Liol淋巴瘤，Dunning 白血病，Ｗagner癌肉瘤，白血病L5170Y，P1798淋巴肉瘤，LPC-1浆细胞瘤，淋巴瘤8，B16或Cloadman黑色素瘤，Ridaway骨肉瘤，Gardner 淋巴肉瘤，肉瘤37，P315白血病，Mur hy-sturm淋巴肉瘤，Jensen肉瘤，Geurin氏癌，仓鼠十二指肠腺癌和人体肉瘤HSL第1代杂交鼠移植。
它们对抗癌药作用的敏感性大致可分为敏感，中度敏感，低敏感和不敏感瘤株四类，同样敏感株对抗癌药的疗效水平也不相同。
4.常用的肿瘤建模方法4.1自发或诱发小鼠肿瘤模型自发性肿瘤模型是指利用实验动物本身某种自发肿瘤发病率高所建立的动物模型，如利用AKR小鼠建立白血病模型、利用C3H小鼠建立乳腺癌模型。
优点：自发性肿瘤通常比用实验方法诱发的肿瘤与人类所患的肿瘤更为相似，有利于将试验结果推用到人；这一类肿瘤发生的条件比较自然，有可能通过细致观察和统计分析而发现原来没有发现的环境致癌因子。
缺点：肿瘤的发生率参差不齐，不可能在短时间内获得大量的肿瘤学材料，观察时间长，实验消耗大。
诱发性肿瘤模型是指对实验动物给予致癌物质、射线以及某些致病病毒而诱发各种肿瘤的动物模型。
常用的诱癌物有放射线局部照射、化学致癌物（烷化剂、亚硝胺类、芳香胺类）、生物毒素（黄曲酶毒素）、细菌（幽门螺杆菌）、肿瘤病毒感染。
如7，12一二甲基苯蒽诱发的小鼠恶性肿瘤动物模型，四氯化碳乙醇诱导小鼠原发性肝癌，利用二乙基亚硝胺诱发小鼠肺癌；利用甲基胆葸诱发小鼠胃癌和宫颈癌；感染小鼠白血病病毒可诱发白血病等等[]。
诱癌方法分为原位诱发和异位诱发，原位诱发：指将致癌物直接与动物靶组织或靶器官接触而诱发该组织或器官发生肿瘤，接触方法可通过涂抹、灌注、喂养或埋置等。
异位诱发：将与致癌物接触后的动物组织或器官埋置于该动物或另一正常动物皮下而产生的该组织或器官的肿瘤。
异位诱发肿瘤具有易于观察和取材的优点[1~3]。
4.2移植型小鼠肿瘤模型移植性肿瘤模型是将肿瘤细胞接种于相关种属的实验动物所建立的动物模型。
移植模型分为同种移植和异种移植，同种移植就是用于移植的肿瘤细胞来源于同系或同种动物，此种移植一般不会产生免疫排斥现象或排斥现象很小，方法一般最常用的就是SPF级小鼠皮下移植和原位移植。
裸鼠因为没有免疫排斥作用，因此为理想的异种移植受体，但裸鼠饲养条件要求太高，一般基础实验可以不选用此法。
常用的将肿瘤移植如体内的方法有肿瘤组织块移植法，肿瘤组织悬液移植法，肿瘤细胞培养液移植法和腹水瘤细胞移植法。
组织块移植法操作复杂，成功率不高，目前已基本不使用此法造模。
目前较常用的是采用肿瘤组织悬液移植法和肿瘤细胞培养液移植法进行皮下移植或原位移植。
其基本操作步骤为首先收集肿瘤细胞悬液，皮下移植常采用的接种量为每只0.2ml,肿瘤细胞数为1×10 6个。
原位移植由于受接种体积限制，所以可以将肿瘤细胞悬液浓度提升至1×10 7个/ml。
张煜等采用原位注射细胞悬液法成功获得小鼠肝癌模型，其模型成功率高，稳定性好[4]。
但需注意的是，在科学实验中，要警惕移植瘤株生物学特性的改变，包括：传代后组织学类型，生长特性(接种成活率，生长速度，自动消退率，宿主寿命与宿主反应等)，侵袭和转移特性以及对化疗药物敏感性等[5~6]的改变。
4.3转基因小鼠肿瘤模型转基因技术是把外源基因用实验方法导入动物基因组中, 并使之在动物体内表达的一种技术。
转基因动物技术包括四个重要步骤: ①靶基因(被导入的外源基因, 又称目的基因、转基因)的获得和改建; ②靶基因向生殖细胞或ES 细胞转移; ③受精卵或胚胎组织的发育;④筛选、鉴定和稳定转基因动物品系。
Gordon等[7]。
在20世纪80年代初创立了转基因小鼠技术。
转基因小鼠是指通过不同的方法将外源基因导入小鼠受精卵，然后产生携带外源基因的小鼠品系，并能通过生殖细胞将外源基因传递给后代的小鼠。
现在最常用的转基因方法是显微注射法，该法始于1974年，Jaenisch等[8]用显微注射法将多瘤病毒SV 40的DNA 导入到小鼠的囊胚（blastocyst ）中，在子代小鼠的肝、肾组织中检测到了SV 40的DNA 。
这一结果证明，将外源基因导入胚胎细胞中并实现整合是可能的。
在此基础上，人们又开发了可诱导的转基因技术，该技术可以调控转基因模型的基因表达，目前，最常用的是反式因子rtTA 与四环素衍生物强力霉素结合后激活四环素操纵子表达的方法（tet-on），而tTA与强力霉素结合则起抑制四环素操纵子表达的作用（tet-off）。
这样，tet-on转基因小鼠可以通过摄入四环素的方法激活癌基因的表达；tet-off 转基因小鼠则持续表达癌基因，直至因强力霉素的摄入而被特异性抑制。
应用此系统已构建了可诱导性表达c-myc和SV40Tag的转基因小鼠肿瘤模型[9~10]。
4.4基因敲除肿瘤小鼠模型随着基因打靶技术的进步,基因敲除肿瘤小鼠模型的研究已经有了长足的发展,其种类也越来越多。
基因敲除又称基因打靶，是指利用外源DNA与受体细胞染色体DNA上的同源序列之间发生重组，使之整合到预定位点上，并替代原有基因，从而改变细胞遗传性的方法。
利用此方法产生的去除特定基因的小鼠模型称为基因敲除小鼠模型。
这其中包括①同源重组法，可产生目的基因完全缺失的小鼠，但发现这些小鼠往往会有较高的致死率，生长发育迟缓不育或主要的器官系统发育缺陷。
②Cre / l oxP诱导的条件敲除体系法，可在特殊的部位或特定的生长阶段使目的基因缺失，这个方法的最大好处就是大大降低了致死率[11]。
5.展望小鼠肿瘤模型的建立为肿瘤的病因学、发展过程和治疗研究提供了极大的帮助，尤其是近来分子生物学技术的提高及在小鼠肿瘤模型中的应用，为肿瘤有关基因研究提供了依据，为进一步研究肿瘤发生机制及靶向治疗提供了广阔的前景。
不可否认，目前仍存在一些问题有待解决，比如：基因修饰鼠基因稳定性的问题；另外，在移植性动物模型的建立中，对所移植的肿瘤细胞国内没有统一的监控体系，有些细胞可能已经发生肿瘤细胞株的变异。
但是随着研究的深入以及各种技术的完善，人们将建立更为完善的肿瘤模型，在研究肿瘤及治疗肿瘤方面取得更大的突破。
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