肿瘤动物模型的构建——白血病篇知识讲解

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肿瘤动物模型构建实验技术

肿瘤动物模型的建立可以：（1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。

实验方法：诱发性肿瘤动物模型实验方法原理：诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。

实验材料：肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒、无血清培养基质、3%中性甲醇石腊仪器、耗材、低温离心机、血球计数器、游标卡尺实验步骤一、肝癌1．二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌（1）取体重250 g左右的封闭群大白鼠，雌雄不拘；（2）按性别分笼饲养。

除给普通食物外，饲以致癌物，即用0.25%DEN水溶液灌胃，剂量为10 mg/kg，每周一次，其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由饮用；（3）共约4个月可诱发成肝癌；（4）也可以单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。

2．4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌（1）用含0.06%DBA的饲料喂养大鼠，饲料中维生素B2不应超过1.5～2 mg/kg；（2）4～6月就有大量的肝癌诱发成功。

3．2-乙酰氨基酸（2AAF）诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌（1）给成年大鼠含0.03% 2AAF标准饲料；（2）每日每平均2～3 mg 2AAF（也可将2AAF混于油中灌喂），3～4月后有80～90%动物产生肝肿瘤。

4．二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌：（1）用剂量为每日0.3～14 mg/kg体重，混于饲料或饮水中给予；（2）6～9个月后255/300大鼠发生了肝癌。

5．亚胺基偶氮甲苯（OAAT）诱发小鼠肝癌（1）用1%OAAF苯溶液（约0.1 ml含1 mg）涂在动物的两肩胛间皮肤上，隔日一次，每次2～3滴，一般涂100次。

（2）实验后7～8周即而出现第一个肝肿瘤，7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。

（3）或用2.5 mg OAAT溶于葵瓜子油中，给C3H小鼠皮下注射4次，每日间隔10天，也可诱发成肝癌。

鼠类白血病模型的建立及治疗

鼠类白血病模型的建立及治疗在医学领域中，动物模型的建立是研究新药或治疗方法的必经之路。

而在癌症领域中，鼠类白血病模型被广泛应用于研究治疗方法和治疗效果。

本文将介绍鼠类白血病模型的建立以及针对该模型的治疗方法。

一、鼠类白血病模型的建立1. 研究鼠的选择建立鼠类白血病模型的第一步是选择适合研究的鼠种。

不同鼠种有不同的生理和病理差异，选择恰当的鼠种可以提高实验的可靠性和可重复性。

常用的鼠种有小鼠、大鼠和裸鼠等。

2. 白血病模型的建立方法建立白血病模型的方法有多种，如化学物质、放射性物质、病毒和基因改造等。

其中，化学物质和放射性物质是比较经典的建模方法，常用的有四氯化碳、苯酚和X射线等。

3. 白血病的诊断和评估建立鼠类白血病模型后，需要对其进行诊断和评估。

目前，常用的评估方法包括流式细胞仪、免疫组织化学和分子生物学等。

二、鼠类白血病的治疗方法1. 化疗化疗是目前最为常见的治疗方法之一。

基于不同的药物和治疗方案，白血病的化疗可以分为多种类型。

化疗的原理是通过杀死快速分裂的白血病细胞，从而达到治疗的目的。

2. 免疫治疗免疫治疗是一种新的治疗方法，其原理是通过调节机体免疫系统的功能，增强机体抵抗力，提高治疗效果。

目前，常用的免疫治疗方法包括单克隆抗体和免疫细胞治疗等。

3. 基因治疗基因治疗是一种新兴的治疗方法，其原理是通过改变细胞的基因表达，从而达到治疗的目的。

目前，基因治疗在白血病治疗中的应用还处于研究阶段。

4. 热疗热疗是一种通过高温杀死癌细胞的治疗方法。

热疗需要利用高温对白血病细胞进行有效杀灭。

该方法在一些难以手术切除的白血病中获得了良好的治疗效果。

三、鼠类白血病模型治疗中的关键问题1. 药物的副作用和耐药性化疗药物的副作用和耐药性是治疗中的关键问题。

目前，研究人员在开发新的化疗药物时需要考虑如何降低副作用和改善耐药性。

2. 治疗方案的选择针对不同类型的白血病，需要采用不同的治疗方案。

目前，研究人员正在探索基于基因、肿瘤标志物和治疗反应等因素的个体化治疗方案。

关于白血病小鼠模型创建的研究进展

关于白血病小鼠模型创建的研究进展引言白血病是一种由异常增殖的白血病细胞引起的恶性血液疾病，其发病机制复杂，治疗手段有限。

为了深入了解白血病的发病机理以及寻找新的治疗方法，研究人员经过长时间的努力，开发了多种白血病模型。

其中，白血病小鼠模型是最常用的模型之一，能够很好地反映白血病的发病过程和治疗效果。

本文将对白血病小鼠模型的创建方法和研究进展进行综述。

创建白血病小鼠模型的方法1.转基因技术转基因技术是最常用的创建白血病小鼠模型的方法之一。

通过介导基因敲除、基因敲入或基因突变等方式，使小鼠体内产生白血病相关基因的改变，从而模拟人体白血病的病理过程。

例如，可以通过操纵白血病相关基因如FLT3、BCR-ABL等来使小鼠产生白血病。

2.骨髓移植骨髓移植是另一种创建白血病小鼠模型的常用方法。

将白血病患者的骨髓或外周血中的白血病细胞移植到小鼠体内，使小鼠产生由白血病细胞引起的白血病。

这种方法可以很好地模拟人体白血病的发病过程，并用于研究白血病细胞的特性和治疗方法的有效性。

白血病小鼠模型的研究进展1.病理特点的模拟白血病小鼠模型能够很好地模拟白血病的病理特点，如骨髓增殖、脾脏和淋巴结的增大等。

通过观察小鼠模型中的病理变化，研究人员可以深入了解白血病的发展过程，并寻找新的治疗靶点。

2.药物治疗方法的研究白血病小鼠模型也被广泛用于研究白血病的治疗方法。

研究人员通过给小鼠注射抗白血病药物，观察其对白血病细胞的作用和疗效，从而评估潜在治疗药物的效果。

这种方法能够快速筛选出具有抗白血病潜力的药物，并为临床治疗提供新的选择。

3.免疫疗法的开发免疫疗法是目前白血病治疗的前沿领域之一。

白血病小鼠模型被广泛用于开发免疫疗法。

研究人员通过改编小鼠的免疫系统，使其产生特异性的抗白血病免疫反应。

这种方法可以有针对性地杀灭白血病细胞，提升白血病患者的生存率。

结论白血病小鼠模型是研究白血病发病机制、评估药物疗效和开发免疫疗法的重要工具。

通过转基因技术和骨髓移植等方法创建的白血病小鼠模型，能够很好地模拟人体白血病的病理过程，并为白血病的研究和治疗提供新的突破口。

动物模型的建立与应用肿瘤动物模型

动物模型的建立与应用肿瘤动物模型
第一页，讲稿共二十九页哦
引言
肿瘤，尤其是恶性肿瘤，是目前世界上危害人类生命健康最严重的
一种疾病。全世界每年大约有1/1000的人罹患癌症，约500万人死于恶性肿瘤。在有些国家，肿瘤已占据死亡原因的第二位，甚至第一位。在医学领域，肿瘤一直是世界范围内受到广泛重视的研究课题。
第五页，讲稿共二十九页哦
常用肿瘤模型小鼠的肿瘤自然发生率
肿瘤名称
乳腺肿瘤肺腺瘤肺细胞瘤肝癌淋巴瘤
网织细胞瘤垂体肿瘤
卵巢肿瘤纤维肉瘤
品系
C3H A/He C3H/He C3H/He/Ola AKR AKR (C57BL×C3H/Anf)F1 C57BR/Cd DBA BALB/c (BALB/c×C57BL/6)F1
同上
同上
同上
瓦克氏肉瘤 W256
W256 Wistar大鼠或同上其它大白鼠
0.2-0.5ml（1:3）
sc或im
第十六页，讲稿共二十九页哦
动物移植性肿瘤的移植方法
⑴取瘤
在不损伤肿瘤的前提下，处死供瘤动物，无菌条件下采取肿瘤。实体瘤注意无菌剥离，取无坏死的、生长良好的瘤组织；腹水瘤最好腹部消毒后，将吸取部位的腹部皮肤与肌膜剥离开，以保证无菌吸取含瘤细胞的腹水。
N- 亚硝基 - 口服甲基-乙酰氧基-甲胺
3.5mg/kg，2次 80-120 /周，共10周
前胃乳头状 >90% 瘤和癌
N-甲基亚硝静脉基脲
生后第 50 和 57 -100 天，50mg/kg
乳腺癌
>90%
第十一页，讲稿共二十九页哦
诱发性肿瘤动物模型的特点

小鼠白血病和淋巴瘤的研究

小鼠白血病和淋巴瘤的研究小鼠白血病和淋巴瘤是常见的实验动物模型，被广泛应用于白血病和淋巴瘤的研究中。

这些模型为科学家们提供了丰富的机会，以深入了解这些疾病的发病机制、寻找新的治疗方法，并为临床研究提供重要的参考。

1. 小鼠白血病研究小鼠白血病是一种造血系统恶性疾病，其中造血干细胞或者造血细胞异常地增生和聚集，导致正常造血功能受阻。

在小鼠白血病的实验模型中，科学家们通过将白血病相关基因或突变体导入小鼠体内，模拟人类白血病的发展过程。

2. 小鼠淋巴瘤研究小鼠淋巴瘤是一种淋巴系统恶性肿瘤，它起源于淋巴细胞，通常表现为淋巴结肿大。

在淋巴瘤的研究中，科学家们通过引入淋巴瘤相关基因突变或突变体，成功构建小鼠淋巴瘤模型，用于探索淋巴瘤的发病机制和治疗方法。

3. 实验动物模型的优势小鼠作为实验动物模型在白血病和淋巴瘤研究中具有诸多优势。

首先，小鼠的基因组与人类基因组的相似性较高，使得其作为模型更有代表性。

其次，小鼠具有较短的繁殖周期和较低的饲养成本，能够满足大规模实验需求。

此外，小鼠模型还能够通过基因转染、基因敲除和基因突变等方法进行个体定制，进一步强化模型的准确性。

4. 白血病和淋巴瘤研究的进展借助小鼠模型，科学家们在白血病和淋巴瘤的研究中取得了许多重要的进展。

例如，通过揭示白血病发生的分子机制，科学家们发现特定基因的突变与白血病的发展相关，为白血病的早期诊断和治疗提供了新的思路。

在淋巴瘤的研究中，科学家们发现某些抗体药物能够靶向淋巴瘤细胞表面的特定蛋白，实现对淋巴瘤的精准治疗。

5. 临床应用前景小鼠白血病和淋巴瘤模型的研究成果为未来的临床应用提供了重要的参考。

这些模型不仅可以帮助研究人员验证治疗药物的安全性和有效性，还可以为个体化医疗提供基础。

通过分析不同患者的基因和白血病或淋巴瘤特征之间的关联，有望开发出针对特定基因突变的靶向疗法，提高患者的治疗效果。

结论小鼠白血病和淋巴瘤模型的研究为白血病和淋巴瘤的发病机制、治疗方法以及个体化医疗提供了重要的理论和实践基础。

肿瘤动物模型的构建

肿瘤动物模型的构建第一类是皮下移植瘤顾名思义，这种模型的建立是将肿瘤细胞或肿瘤组织直接种植在小鼠的皮下。

种植的点也有讲究，一般选择血运淋巴回流丰富的腹股沟和腋窝。

可根据实验设计选择移植点，统一移植点的位置，除了遵守实验统一的条件外，待肿瘤成熟后收集肿瘤时留下照片证据也显得美观。

裸鼠（Balb/c 鼠，无毛发，T 淋巴细胞缺陷）是比较常见和常用的实验用鼠，尤其是在皮下移植瘤肿瘤模型的建立中起到重要作用。

裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。

当然，这种肿瘤模型也有缺陷，即不能很准确的模拟正常人体肿瘤发生发展的过程。

肿瘤细胞移植时的简要步骤：首先准备好要移植的肿瘤细胞（细胞量根据不同肿瘤略有不同，我们所用的前列腺癌细胞系每个移植点一般选择1x106左右；肿瘤细胞可与基质胶1:1 混匀后用 1 ml 注射器吸取，基质胶能够给肿瘤细胞提供营养环境，有助于肿瘤细胞生长）。

戴无菌手套后，将小鼠用左手大拇指和食指捏住颈部皮肤，然后将鼠尾用左手无名指和小指固定于左手大鱼际。

将腋窝或腹股沟用75% 酒精消毒 3 次。

右手持吸有肿瘤细胞和基质胶混合液的注射器，在腹股沟或腋窝的位置，45 度斜角进针，注意不要突破腹膜，将针头保持于皮下位置。

然后近水平位置将针头几乎完全插入皮下，将混有基质胶的肿瘤细胞注射入皮下（肿瘤细胞量约1x106），快速退针，左手食指轻压针孔约1 min 后将小鼠放回饲养笼中，注意将小鼠侧放于垫料上，防止其不适呕吐时呕吐物误入呼吸道引起窒息。

2～3 h 后观察小鼠是否苏醒。

如果是利用肿瘤组织（人体肿瘤标本或小鼠移植瘤传代）建立裸鼠皮下移植瘤模型，则需要首先将肿瘤组织用无菌PBS（或1640 培养基）洗涤 3 次，然后在无菌平皿上切成或用无菌剪刀剪成<1 mm3 体积的小块（种植前可裹基质胶）备用。

将小鼠用水合氯醛麻醉后平卧于解剖板上，四肢用胶带固定，将腋窝或腹股沟用75% 酒精消毒3 次，然后用眼科剪剪开约0.5 cm 小口，小镊子将皮下筋膜与皮肤分开，然后将肿瘤组织放入贴近腹股沟或腋窝的深部，每个位置放置2～3 块肿瘤组织，注意不同组间统一放置肿瘤组织块数以保持一致。

白细胞疾病动物模型制作步骤及方法

白细胞疾病动物模型制作步骤及方法在医学研究中，为了更好地理解和治疗白细胞疾病，制作合适的动物模型是至关重要的。

这些模型能够帮助科研人员深入探究疾病的发病机制、发展过程以及测试新的治疗方法。

下面将详细介绍白细胞疾病动物模型的制作步骤及方法。

一、模型选择首先，需要根据研究的具体白细胞疾病类型以及实验目的来选择合适的动物模型。

常见的实验动物包括小鼠、大鼠、豚鼠等。

小鼠由于其繁殖快、基因易于操作等优点，在白细胞疾病研究中应用广泛。

二、诱导方法（一）化学诱导化学物质诱导是常见的方法之一。

例如，使用苯、环磷酰胺等化学物质，可以破坏骨髓造血微环境，影响白细胞的生成和发育，从而诱导白细胞疾病的发生。

（二）放射线诱导通过对动物进行一定剂量的放射线照射，损伤骨髓造血干细胞，导致白细胞异常。

这种方法可以模拟由于放射性损伤引起的白细胞疾病。

（三）病毒感染诱导某些病毒，如人类 T 淋巴细胞病毒 1 型（HTLV-1）、EB 病毒等，与特定的白细胞疾病密切相关。

将这些病毒感染动物，有可能诱导出相应的疾病模型。

（四）基因工程诱导利用基因编辑技术，如 CRISPRCas9 系统，对动物的基因组进行特定的修饰，敲除或插入与白细胞相关的基因，从而构建出遗传性白细胞疾病模型。

三、实验动物的准备（一）动物的选择选择健康、遗传背景清晰、年龄和体重适宜的动物。

一般来说，年轻的动物对诱导因素的反应更敏感，但也需要考虑实验周期和动物的成熟程度对实验结果的影响。

（二）动物的饲养环境提供清洁、安静、温度和湿度适宜的饲养环境，保证动物的正常生长和健康状态。

遵循动物伦理和福利原则，给予充足的食物和水。

四、诱导操作（一）化学诱导操作以环磷酰胺诱导为例，根据动物的体重计算合适的给药剂量，通过腹腔注射或静脉注射的方式给药。

给药过程中要严格控制药物浓度和注射速度，避免药物外渗和动物的过激反应。

（二）放射线诱导操作使用专门的放射线设备，对动物进行全身或局部照射。

肿瘤动物模型

三.移植性肿瘤动物模型及其研究方法
定义：模型是指将动物或人体肿瘤移植到同种或异种动物体内连续传代而形成移植
性肿瘤动物的肿瘤
实验动物选择：移植性肿瘤常用动物为小鼠、大鼠和地鼠
肿瘤细胞的选择：筛选抗癌药物时，最好选用
3类瘤株，及肉瘤、腹水型肿瘤和白血病株。在众多移植性肿瘤中，小鼠Lewis肺癌、小鼠黑色素瘤B16 及小鼠白血病P388是目前最受重视和应用最广的。
操作方法（例：人胃腺癌SGC-7901)：
1.超净台内将移植瘤剪成2~3mm3大小的瘤块，用套管针接种在BALB/c裸小鼠右侧腋窝皮下 2.接种24h后随机分组，开始给予受试药进行实验治疗，试验周期6周左右 3.停药次日，称体重，剥取肿瘤并称重，计算瘤重抑制率。
观察指标与疗效评价：
1.动物在接种肿瘤后6周左右形成1g以上的瘤块（平均瘤重），则表明移植肿瘤成功
结果：一般情况下，接种3~5d形成肿瘤，移植成功率可达85%，移植成功后可
用以观察受试药的疗效
Thanks !
谢谢
瘤细胞悬液接种法
每次接种的动物数量较多时可采用此法。具体方法是：无菌操作取出瘤块，将数个瘤块混合后剪成小块，放入玻璃匀浆器中，加无菌生理盐水向一个方向转动研磨后，经滤网过滤，加生理盐水稀释成1:3~1:4 （肿瘤g：生理盐水ml）的瘤细胞悬液，用台盼兰染色法计数活细胞数，用1ml注射器注射到接种部位，每个接种点接种0.2ml(一般含 1×106~1×107个细胞数）。通常接种到腋窝皮下，每只动物可选用多个接种点。
诱发性肿瘤动物模型建立方法
物理方法：放射性物质致瘤，用放射线照射或局部注射放射性同位素。化学方法：使用化学致癌物，如苯并芘（benzpy rene）、甲基胆蒽

血液系统疾病常见动物模型

血液系统疾病常见动物模型造血系统疾病（Disease of hematopoietic system），除了地中海贫血等少数疾病具有明确的病因以外，再盛赞该性贫血等大多数疾病都还没有明确的病因，造血系统疾病的动物模型，就成为研究造血系统疾病的发病机理、探索新型治疗技术和新药研究的基本工具。

一、缺铁性贫血动物模型缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）是体内用来合成血红蛋白（HGB）的贮存铁缺乏，HGB合成减少而导致的小细胞低色素性贫血，主要发生于以下情况：（1）铁需求增加而摄入不足，见于饮食中缺铁的婴幼儿、青少年、孕妇和哺乳期妇女。

（2）铁吸收不良，见于胃酸缺乏、小肠粘膜病变、肠道功能紊乱、胃空肠吻合术后以及服用抗酸和H2受体及抗剂等药物等情况。

（3）铁丢失过多，见于反复多次小量失血，如钩虫病、月经量过多等。

IDA是一种多发性疾病，据报道，在多数发展中国家，约2/3的儿童和育龄妇女缺铁，其中1/3患IDA，因此，研究IDA的预防和治疗具有重要的意义。

在这些研究中，缺铁性贫血的动物模型（Animal model of IDA），又是实施研究的基础工具。

常见的IDA动物模型的构建技术如下：实验动物：一般选用SD大鼠，4周龄，雌雄不拘，体重65g左右，HGB≥130g/L。

建模方法：低铁饲料加多次少量放血法。

低铁饲料一般参照AOAC配方配制，采用EDTA 浸泡处理以去除饲料中的铁，饲料中的含铁量是诱导SD大鼠形成缺铁性贫血模型的关键，现有研究表明，饲喂含铁量<15.63mg/Kg的饲料35天，SD大鼠出现典型IDA表现，而饲喂含铁40.30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁，但并不表现贫血症状。

建模时一般采用去离子水作为动物饮水，以排除饮水中铁离子的影响。

少量多次放血主要用于模拟反复多次小量失血导致的铁丢失，还可以加速贫血的形成。

放血一般在低铁饲料饲喂2周后进行，常用尾静脉放血法，1～1.5ml/次，2次/周。

肿瘤模型构建

肿瘤模型构建小鼠模型分三大类第一类是以S180、EAC、H22等为代表的，他们的宿主小鼠多选用KM，可产生腹水，也可在皮下成瘤。

多以腹水传代，实验时抽取腹水，经过一定稀释后皮下接种构建模型，接种后第二天开始给药（这里与指导原则相悖，指导原则要求肿瘤长至100-300立方毫米时才给药），给药7到10天，接种10天后结束试验，剥取肿瘤称瘤重。

1. 构建瘤种可以用体外细胞株培养后，用PBS悬浮至1~3×106/0.1ml/mouse，i.p接种即可，最好用6号左右的针头，就是常用的2ml一次性注射的针头。

细胞悬液接种时要选活力好的细胞，就是对数期。

细胞生长至瓶底70~80%满的时候认为是对数生长期。

2. 腹水传代观察到第一代的种鼠肚子较大后（一般约8~9天左右），可以传代，传代时取1ml注射器，用2ml注射器的针头，种鼠腹部消毒后直接将针头插入抽取腹水即可，注意不要把针头插得很深，尽量浅一点，还可以把老鼠拎起来，利用重力，让腹水集中在某处便于抽取，一般抽个0.5ml就可以了，不用离心，直接用PBS3~6倍稀释后，接种到新的老鼠腹腔，腹水颜色为白色或者略有发黄都是正常的，但是血性腹水说明不好，需要注意调整。

第二代以后，尽量6~7天的时候传代，不要等的时间太久，否则腹水容易血性。

三代后可用于试验。

腹水瘤接种时，接种量不要太高，1*107/ml，0.2ml即可，多按1：3用生理盐水稀释，否则有可能腹水血性。

超过7天的腹水再传代，动物的周龄太大（>6周）,传代次数太多也很容易出现血性腹水。

一般小鼠肿瘤模型都控制在30多代以内（也有说50多代的）。

出现血性以后可以调整一下：血性腹水可以离心后加0.17N的NH4CL溶液破红细胞，然后精确控制条件（接种量，传代时间，动物周龄等）传几代，很多情况下再传一两代后会有无腹水血性的种鼠出现，然后用这只种鼠的腹水继续传代。

腹水难抽有几种情况，要么接种天数不够，腹水不够多，一般要等动物肚子很大了才去抽。

肿瘤动物模型的构建——白血病篇

移植后第二天对小鼠分组பைடு நூலகம்进行给药；统计小鼠生存率。
评价：此种模型易建立，成瘤率高，成瘤时间差异小，是筛选抗肿瘤药物常用的动物模型。
数据分析：小鼠经X射线照射后尾静脉注射2×105个hMRP8-PML-RARα细胞，建立ATRA耐药移植型小鼠模型[3]。如下图：
图A统计生存曲线，给药组（LG362B和阳性药ATRA）均可延长小鼠生存期。
第二章：实验研究所用白血病模型首先，来了解一下常用的细胞株白血病中常用的小鼠品系
用于建立白血病小鼠模型的小鼠可分为近交系和突变系。根据不同类型和目的选择不同的小鼠品系，具体如下图所示：
最后说说常用的动物模型，主要分为三类：
一、异种移植模型
异种移植模型是最常用的淋巴瘤动物模型。根据实验目的选择相应的小鼠品系和细胞株后，通常细胞的接种方式为皮下注射、腹腔注射和尾静脉注射。
肿瘤动物模型的构建——白血病篇
导读白血病（Leukemia）是一种常见的恶性血液疾病，俗称血癌。据统计，白血病是儿童恶性肿瘤的头号原因，在儿童及35岁以下成人中发病率位居第一[1]。同时也是十大恶性肿瘤之一。目前，白血病具体的发病原因至今尚未研究透彻，因此建立合适的白血病动物模型，对于白血病发病机制及药物研发具有重要意义。
图C与D剥离小鼠脾脏拍照并称重，患白血病小鼠较正常小鼠脾脏肿大，给药组（LG362B和阳性药ATRA）均可使脾脏恢复正常。
图e：取小鼠外周血和骨髓细胞制作涂片进行Wright-Giemsa染色，从形态学上可观察到给药组（LG362B和阳性药ATRA）可诱导白血病细胞分化。
二、基因修饰型白血病模型
基因修饰型白血病模型主要为利用基因编辑技术进行敲除或插入特定基因，从而诱发动物产生白血病。如骨髓增生异常综合征（MDS）转化为急性髓系白血病是由于NRAS和BCL-2在形成复合物，建立骨髓增生异常综合征转化AML小鼠模型MRP8[NRASD12/hBCL-2]筛选出BCL-2抑制剂ABT-737[4]。下图为主要的基因工程型白血病模型[5]：评价：基因修饰型动物模型成瘤机制清楚、病理表现明确，常用于白血病发病机制的研究。但需构建基因工程载体，胚胎培养、显微注射等一系列工作，周期长，花费大，一般根据实验需求构建适合的动物模型。

动物模型

现介绍三种自发性乳腺癌小鼠模型
C3H小鼠：繁殖用雌鼠自发性乳腺癌发生率为小鼠：
85%~100%。 85% 100%。 100%
A系小鼠：经产雌鼠乳腺肿瘤发生率为30% 80%。系小鼠：经产雌鼠乳腺肿瘤发生率为30% 80%。 30%~80% CBA小鼠：雌鼠自发性乳腺癌发生率为60% 65%。雌鼠自发性乳腺癌发生率为60% 65%。 60%~65%
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肿瘤体积变化对时间作出生长曲线变化对时间作出生长曲线, 将肿瘤体积变化对时间作出生
8.摘要：目的建立结肠癌肝转移的动物模型，用于肿瘤转移防治的实验方法，对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经脾脏注入指数生长期的的小鼠结肠腺癌细胞（ＣＴ２６）悬液０．１ｍｌ，含细胞１＊１０＾６个，保留脾脏。观察接种后小鼠的生存期，小鼠分别于接种后第７、１０、１５天及自然死亡后剖腹、观察腹腔内肿瘤生长情况，留标本作病理检查和流式细胞术（ＦＣＭ）倍体检测。结果小鼠平均自然生存时间为（１８．２±１．８）天，尸解发现接种动物的肝
4.【摘要】目的建立并对比两种异位种植结肠癌肝转移小鼠模型。方法以1×106个/mL小鼠结肠癌细胞株(CT26)0.2mL对BALB/c小鼠分别行肝门静脉注射法,脾脏种植切除脾脏法构建结肠癌异位种植肝转移动物模型。术后待小鼠自然死亡,比较两种动物模型的肝转移率和成瘤效果、肺转移率以及小鼠生存期的差异。结果肝门静脉注射法与脾脏种植切除脾脏法相比,前者在肝转移率、肝脏成瘤效果和肺转移率方面高于后者,后者在小鼠生存时间和操作难易程度方面优于前者。结论本研究建立并对比了两种具有高转移率的结肠癌肝转移小鼠模型,肝门静脉法在肝转移率和肝脏成瘤效果方面更具优势,适合对肝转移率和取材要求较高的实验研究;而脾脏种植切除脾脏法则更适合验证周期较长的药物实验。

肿瘤动物模型常用建立方法

肿瘤动物模型常用建立方法肿瘤动物模型是用于研究和测试肿瘤发生、发展和治疗的工具。

建立适当的肿瘤动物模型对于揭示肿瘤的生物学特性和评估各种治疗方法的有效性至关重要。

以下是常用的肿瘤动物模型建立方法。

1. 移植瘤模型：这是最常见和简化的动物模型建立方法之一。

它涉及在动物体内或体外移植人类或动物来源的肿瘤细胞株。

这些细胞可以从肿瘤组织中分离得到，并在实验室中培养。

移植瘤模型的优点是易于建立和控制，但它不能反映肿瘤的整个发展过程。

2. 转基因模型：转基因动物模型是通过将特定的基因突变导入小鼠或其他动物体内来模拟肿瘤。

这些基因突变可以是人类肿瘤相关基因的突变，也可以是具有肿瘤形成潜能的其他基因的突变。

转基因模型可以提供更真实的肿瘤发展和治疗反应，但其建立过程相对复杂和耗时。

3. 化学诱发模型：这种方法通过给动物暴露于化学物质，如化学致癌物质或腺病毒，来诱发肿瘤的发生。

这些化学物质可以引起DNA损伤或基因突变，从而促进肿瘤的形成。

化学诱导模型可以提供与人类肿瘤相似的病理特征，但其应用范围受到化学物质的选择和剂量的限制。

4. 遗传模型：遗传模型使用特定品系的小鼠或其他动物，这些动物因其自身的遗传缺陷而具有高发生肿瘤的风险。

这些遗传模型可以是自然突变品系，也可以是通过基因工程技术引入的遗传缺陷。

遗传模型可以提供对特定肿瘤类型和易感因素的研究，但其适用范围受到特定品系的限制。

以上是常见的肿瘤动物模型建立方法。

根据具体研究目的和研究条件的不同，选择合适的肿瘤动物模型对于取得可靠的研究结果至关重要。

不同模型的优劣势需要综合考虑，并根据研究的需要进行合理选择。

白细胞疾病动物模型制作步骤及方法

白细胞疾病动物模型制作步骤及方法1白细胞减少症动物模型(Animal model of leucopenia)在研究化疗药物毒性的减毒实验中，经常需要建立化疗所致的白细胞减少症及骨髓有核细胞减少症的动物模型。

白细胞减少症(leucopenia)为临床常见血液病。

凡机体外周血液中白细胞数持续低于4×1000000000/L时，称之为白细胞减少症；若机体白细胞总数明显减少，低于2×1000000000/L，中性粒细胞值低于0.5×1000000000/L甚至消失者，则称为粒细胞缺乏症(agranulocysis)。

临床上白细胞减少症患者的临床表现主要为乏力、头晕，并常伴有食欲减退、四肢酸软、失眠多梦、低热心悸、畏寒腰酸等症状；而粒细胞缺乏症则多以突然发病、畏寒高热、咽痛为主。

粒细胞缺乏症为白细胞减少症发展至严重阶段的表现，两者病因和发病机制基本相同。

临床上白细胞减少症主要可分为原因不明性和继发性两种。

其中又以前者多见，而后者则多为化学因素、物理因素、药物因素及某些疾病；或可见于各种实体肿瘤化疗后、多种血液疾病、严重感染及原因不明者等。

1.1大鼠白细胞减少症模型(1)复制方法体重约为150g的SD大鼠，按30mg/kg体重的剂量经其腹腔注射环磷酰胺，连续注射5d。

模型大鼠在给药前、给药第3, 5日，以及停药后第2, 5, 8, 11, 15日时分别采血作外周血象检测，观察外周血白细胞总数。

后1次检测观察后麻醉处死动物，取其股骨，用hanks液冲洗骨髓细胞，显微镜下观察骨髓有核细胞数。

(2)模型特点注射环磷酰胺后，模型大鼠的食耗量、饮水量减少，活动减少，被毛疏松无光泽，体重增长趋缓，明显消瘦；停药15d后机体开始明显恢复。

给药3d时，模型大鼠的外周血白细胞总数明显降低，给药5d时其外周血白细胞总数可降至低值；停药后第2日时白细胞总数无明显回升，停药第5, 8, 11, 15日时，白细胞总数呈逐渐回升趋势；模型大鼠低白细胞水平维持时间较长，至停药后第15日时仍未见明显回升。

肿瘤动物模型构建方法及来源分类

肿瘤动物模型构建方法及来源分类
顾名思义，肿瘤动物模型构建这种模型的建立是将肿瘤细胞或肿瘤组织直接种植在小鼠的皮下。

种植的点也有讲究，一般选择血运淋巴回流丰富的腹股沟和腋窝。

可根据实验设计选择移植点，统一移植点的位置，除了遵守实验统一的条件外，待肿瘤成熟后收集肿瘤时留下照片证据也显得美观。

根据肿瘤动物模型构建方法或者来源分为三大类
1、自发性肿瘤动物模型
优点：发病机制及机理较接近人。

缺点：数量及种类非常有限，无法满足实验的需要。

2、诱发性肿瘤动物模型
优点：发病机制及机理也较接近人。

缺点：诱发剂对人体都有很大的毒性，对实验人员存在较大的风险；实验周期非常长，且诱发成功的时间不一致，无法在同一条件下大批量实验。

3、移植性肿瘤动物模型
优点：可以在同一条件下大批量移植，实验周期较短，对动物的治病机制亦与人类相似，已成为目前应用为广泛的造模方法。

实验中肿瘤动物模型构建关键要细心，尤其是肿瘤细胞选择，肿瘤组织块处理上要仔细认真，这是影响模型成功建立的关键，还有移植手术时更要耐心细致，不要还没有建立就已经失败。

第四课肿瘤模型ljl分析

第四课肿瘤疾病动物模型
分类
1. 自发性肿瘤（spontaneous tumor）动物模型：
指实验动物未经任何有意识的人工处置，在自然情况下发生的肿瘤所形成的模型。
2. 诱发性肿瘤（induced tumor）动物模型：是使用致癌因素在实验条件下诱发动物发生肿
瘤的动物模型。
3. 移植性肿瘤（transplant tumor）动物模型：指将动物或人体肿瘤移植同种或异种动物连续
肿瘤实验研究中，选用高发病率的实验动物肿瘤模型作为研究对象，否则就无法进行研究。
目前已培育了许多种小鼠自发肿瘤，从肿瘤发生学上看，这些自发瘤与人体肿瘤相似，进行肿瘤发病学和药物筛选等实验应属理想。
但由于不易同时获得大批病程相似的自发瘤动物，又因这种肿瘤生长较慢，实验周期相对较长，所以一般很少用于筛药。
2. 诱癌物：放射线局部照射、化学致癌物（烷化剂、亚硝胺类
、芳香胺类）、生物毒素（黄曲酶毒素）、细菌（幽门螺杆菌）、肿瘤病毒感染。
2 诱发性肿瘤模型
致癌物的诱癌过程需时较长，成功率多数达不到100%，肿瘤发生的潜伏期个体变异较大，不易同时获得病程或癌块大小较均一的动物供实验治疗之用，再加之肿瘤细胞的形态学特征常是多种多样，且致癌多瘤病毒常诱发多部位肿瘤，故不常用于药物筛选，但从病因学角度分析，它与人体肿瘤较为近似，故此模型常用于特定的深入研究。由于该类型肿瘤生长较慢，瘤细胞增殖比率低，倍增时间长，更类似于人肿瘤细胞动力学特征，常用于综合化疗或肿瘤预防方面的研究。
③具有不同结构的亚硝胺有明显的器官亲和性，例如二甲基亚硝胺等对称的衍生物常引起肝癌，不对称的亚硝胺如甲基苄基亚硝胺常诱发食管癌；在大鼠，二丁基亚硝胺能引起膀胱癌，二戊基亚硝胺能诱发肺癌，而N-甲基-N-硝基-N1-亚硝基胍则能引起胃肠癌。

裸鼠荷瘤资料

接种量要查文献来确定接种量，在找不到任何相关资料的情况下,最高就用到1*107/0。

2ml/site,再高也没有意义了。

如果你的细胞很小，1＊107/0.1ml也可以操作，不至于很粘稠,那么最好是1*107/0.1ml/site。

查文献看他们的构建条件是什么样的,比如培养条件，接种量，接种位置什么的，是不是一定要用雌性鼠等等。

有的瘤株也有可能很容易成瘤，而且生长速度很快。

建议用几只动物试试不同的接种浓度，万一能够长出来，而且还长得很快，那你就要根据情况选择一个合适的浓度了。

基本上一般认为比较合适的接种浓度有这么几个特征：1. 接种后10到15天左右可以开始试验。

2。

开始试验时可以用于试验的动物数不少于60～70％,而且SD 不大于平均值的1/3左右。

3。

开始试验三、四周后肿瘤重量大于1g，并且没有溃烂。

当然，这些条件都是锦上添花的东西,如果以1*107/site 都勉勉强强长出肿瘤，那么就不必过多的去考虑它了。

接种部位接种部位：腋窝中部外侧皮下为好。

皮下肿瘤模型中，想要成瘤率高就接种在腋下。

接种时由裸鼠体侧腰部稍靠上的部位进针,要保证与接种点的距离小于针头的长度，向头部方穿行，绝对不能刺破皮肤或者刺破肌肉层,当针头到达接种位点时注射，退出针头，这样操作的目的并不完全是避免漏液，其实熟练后，不需要皮下穿行也不会漏液，主要是避免污染，进针点还有少量污染的可能性的，针头在皮下穿行一段后，接种点离进针点较远,最大限度减少污染的可能。

如果是用于正式实验，那么一只老鼠就只能接种一个位点,不可以接种多个位点用于保证可用的模型数.因为在有些情况下，一个老鼠身上有多于一个肿瘤的情况下，会有相互影响的可能,无论这几个肿瘤相距有多远。

要是想多打几个部位做做预试验,倒也不是不可以，但是我觉得，基本上没有什么必要。

皮肤不用绷得太紧，平展就可以了，另外接种的时候进针点很靠下，针头在皮下走一段再注射，速度不要太快。

注射前针头稍微动一动,能动就说明在皮下，否则可能在皮内或者肌肉内。