饮用水中菌落总数的测定

合集下载

饮用水中菌落总数的测定

饮用水中菌落总数的测定

饮用水中菌落总数的测定饮用水是人们生活中必不可少的资源之一,因此其质量问题也非常重要。

菌落总数测定是饮用水质量检验中的一项重要指标,它可以反映饮用水中微生物污染的情况。

本文将介绍饮用水中菌落总数的测定方法。

一、实验原理菌落总数测定是通过将水样分别接种在含营养物质的固体培养基上,在适宜的温度下培养一定时间后,观察菌落形成的数量来表示水样中菌落总数的多少。

菌落总数包括细菌、真菌、放线菌等不同种类的微生物。

二、实验材料1.培养基:通用营养琼脂培养基。

2.试剂:无菌纯水。

3.实验器材:培养皿、无菌玻璃滴管、高压蒸汽灭菌器、无菌工作台、温度控制器、数码计数器等。

三、实验步骤1. 准备工作:将通用营养琼脂培养基溶解,加入适当的营养成分,灭菌后,倒入消毒好的培养皿中,存放于恒温箱内。

2. 取样:在取样前,应将集水设施、自来水输送管道和水龙头清洗干净,进行彻底冲洗,然后使用无菌玻璃滴管从水源处取样,放入无菌瓶内。

3. 接种:将取出的水样用无菌玻璃滴管滴入消毒好的培养皿上,每个培养皿中加入约1ml水样,然后轻轻摇晃培养皿,使水样与琼脂培养基充分混合。

4. 培养:消毒好的培养皿放入恒温箱中,在恒温箱内控制温度为35℃左右,培养时间一般为24小时。

5. 统计菌落:在培养24小时后,取出培养皿,观察菌落的数量和形态,使用数码计数器统计菌落数量。

四、实验注意事项1. 取样前,应使用无菌玻璃滴管,避免外界细菌和真菌的污染。

2. 原水样取到之后应及时送到实验室或者进行现场测定,避免对样品存放时间过长而影响实验结果。

3. 在接种培养皿时,应将培养皿扣开盖盖起来,避免细菌、真菌等污染。

4. 培养皿在放入恒温箱时,要均匀摆放,避免温度分布不均,影响菌落的生长。

5. 统计菌落时,应仔细观察,避免漏掉菌落数,影响实验结果。

五、实验结果分析1.道路和公共场所的饮用水菌落总数标准为1000 CFU/ml。

通过菌落总数的测定可以了解饮用水中微生物的污染状况,若菌落总数超出标准值,则说明水源存在严重的微生物污染,需要进行处理和消毒。

生活饮用水水质检测 细菌菌落总数测定

生活饮用水水质检测 细菌菌落总数测定

3.3 生活饮用水细菌菌落总数的测定
冷却至50℃的 培养基
12~15ml
水样
各取1mL 水样
冷却 倒置
37℃、24h
计数
3.4 河水、池水等的菌落总数的测定
1. 水样稀释
9 ml 无菌水
1 ml
水样
9 ml 无菌水
1 ml
9 ml 无菌水
1 ml
10-1
10-2
10-3
稀释倍数视水污染程度而定,选择在平板上能长出30~300 个菌落的稀释倍数为宜。
细菌菌落总数的测定
教学目标
生活饮用水 水质检测
任务9
知识目标
(1)细菌总数、菌落;(2)细菌总 数与水质的关系;(3)水中细菌总数 的测定原理、平板菌落计数法。
能力目标 (1)水样采集;(2)培养基的配制和 灭菌技术,无菌操作,细菌的接种; (3)细菌的培养、菌落的观察、计数
素质目标 1)整洁、有序、规范;(2)多实践、 巧动手,严格执行无菌操作;(3)培 养实事求是、严谨认真的科学态度;善 于观察、分析问题
n 细菌的数量和大肠菌群数是生活饮用水监测的重要生物 指标。
1.2 菌落总数
菌落(colony):在固体培养基上,一个母细菌不断繁殖, 形成一堆肉眼可见、有一定形态构造特征的细菌集合。
n 单个细菌难以直接计数,但细菌在固体培养基上生长,形 成具有各种颜色和不同外观的菌落,却易观察,易计数。
n 在水质卫生学检验中,细菌总数是指1mL水样在牛肉膏蛋白 胨培养基中经37℃、24h培养后,所生长出的细菌菌落总数。
教学内容
细菌及菌落总数
细菌菌落总数测定的原理 平板菌落计数法 注意事项与思考题
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ

菌落总数 标准

菌落总数 标准

菌落总数标准一、菌落总数定义菌落总数是指食品经过处理,在一定条件下培养后,所得每克(每毫升)检样中所生长出来的细菌菌落总数。

它是一种反映食品卫生状况的重要指标,用以判定食品被污染的程度。

二、菌落总数测定方法1. 按照国家标准方法,将样品进行稀释,取一定量稀释液接种到培养基上,置于恒温箱中培养。

2. 观察每个培养基上的菌落数量,并记录。

3. 根据稀释倍数和培养基上的菌落数量,计算出每克(每毫升)样品中的菌落总数。

三、菌落总数卫生标准根据国家卫生部门的规定,食品中的菌落总数应符合以下标准:1. 饮料、饮用水:≤100cfu/ml。

2. 植物性食品、罐头食品:≤1000cfu/g。

3. 肉制品、乳制品:≤50000cfu/g。

4. 调味品、粮谷类食品:≤1000cfu/g。

5. 冷饮食品:≤2000cfu/g。

四、菌落总数食品卫生要求1. 食品生产过程中,应采取有效措施控制菌落总数的污染,确保食品的安全卫生。

2. 生产过程中使用的原料、水源、容器等应符合卫生要求,避免污染。

3. 食品加工设备、器具、管道等应定期清洁消毒,保持良好的卫生状况。

4. 成品储存应避免污染,严格控制温度、湿度等条件,确保菌落总数不超标。

五、菌落总数环境卫生要求1. 生产场所应保持清洁卫生,定期进行清洁消毒,保持良好的卫生状况。

2. 生产场所的通风、照明等设施应符合卫生要求,防止细菌滋生。

3. 生产过程中产生的废弃物、污水等应及时处理,防止污染环境。

六、菌落总数检验规则1. 按照国家规定的标准方法进行检验,确保数据的准确性。

2. 检验时应选取具有代表性的样品,确保样品的代表性。

3. 对于不合格的样品,应进行复检,以确认数据的可靠性。

4. 对于批量生产的食品,应按比例抽样检验,确保整批产品的质量。

七、菌落总数标识、储存、运输要求1. 标识:产品标签上应注明菌落总数指标,以提示消费者注意食品的卫生质量。

2. 储存:食品应储存在清洁卫生的环境中,避免污染。

水质菌落总数检测方法

水质菌落总数检测方法

水质菌落总数检测方法引言水质菌落总数检测方法是评估水体中细菌总数的一种重要方法,可以用于判断水体的卫生状况和水质的安全性。

本文将介绍水质菌落总数检测的原理、方法和应用。

一、原理水质菌落总数检测是基于细菌的生长原理进行的。

在菌落总数检测中,常用的方法是通过将水样溶液均匀地涂布在含有营养物质的琼脂平板上,然后在适宜的温度下进行培养,细菌就会在平板上形成可见的菌落。

通过计数菌落的数量,就可以得到水样中的细菌总数。

二、方法1. 准备工作(1) 准备琼脂平板:将琼脂混合溶液加热至完全溶解,冷却后倒入无菌培养皿中;(2) 准备培养基:根据需要添加不同的营养物质,如葡萄糖、肉葡萄糖、酵母粉等;(3) 灭菌:将琼脂平板和培养基一起进行高温高压灭菌。

2. 取样(1) 使用无菌容器采集水样;(2) 避免污染,尽量避免空气接触。

3. 稀释(1) 将水样稀释至一定浓度,以便于菌落的计数;(2) 根据水样的浑浊程度和预期菌落数量进行适当稀释。

4. 接种(1) 使用无菌吸管将稀释后的水样滴入琼脂平板上;(2) 均匀涂布水样,确保菌落的生长均匀。

5. 培养(1) 在适宜的温度下(通常为37℃),将琼脂平板倒置放置在培养箱中;(2) 培养时间通常为24-48小时,视菌落的生长速度而定。

6. 计数(1) 使用计数板或显微镜对菌落进行计数;(2) 确保计数的准确性,避免重复计数同一菌落。

三、应用水质菌落总数检测方法广泛应用于水质监测和卫生检验领域。

主要应用于以下方面:1. 自来水监测水质菌落总数检测可以评估自来水中细菌的数量,判断自来水的卫生状况,确保自来水的安全性。

2. 水源地评估通过对水源地进行水质菌落总数检测,可以判断水源地的卫生状况,及时采取措施保护水源地的水质。

3. 污水处理水质菌落总数检测可以评估污水处理系统的效果,判断处理后的水质是否符合排放标准,保护环境和人类健康。

4. 泳池水监测水质菌落总数检测可以判断泳池水的清洁程度,及时采取措施保证泳池水的卫生安全。

菌落总数检测标准

菌落总数检测标准

菌落总数检测标准
菌落总数检测是一种常见的微生指标检测方法用于评估食品、饮用水、医疗器械等物品中的微生物污染情况。

检测的菌落总一般采用生物计数法,即推测细菌总数的检验方法。

不同国家和地区可能有不同的标准和规定,但通常微生物指标检测标准的结构都是相对类似的,包括菌落总数、大肠埃希氏菌、霉菌、酵母菌等项目。

这些标准涉及了食品安全、饮用水卫生、医疗器械清洁等方面。

以下是一些常见的菌落总数检测标准:
1. 食品行业:根据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定GB 4789.2-2016》,菌落总数检测的标准上限值因不同食品类别而有所不同。

2. 饮用水行业:根据《生活饮用水卫生标准GB 5749-2006》,每毫升饮用水中的菌落总数应低于100个。

3. 医疗器械清洁行业:医用器械清洁标准如ISO 15883等对菌落总数也有相关的规定。

需要注意的是,具体标准和检测方法可能因国家、行业、用途等
而异,建议根据具体情况查询相关标准以获取最准确的信息。

饮用水中菌落总数的测定

饮用水中菌落总数的测定

目录中文摘要 (2)ABSTRACT (2)1.引言 (3)2. 材料与方法 (4)2.1实验材料 (4)2.2培养基的配制及其灭菌 (4)2.3主要仪器 (4)2.4染色液的制备 (4)2.5菌落总数的测定 (5)2.6革兰氏染色 (5)3结果 (6)3.1平板计数的结果 (6)3.2水样中细菌总数的计算 (6)3.3革兰氏染色结果 (7)4.讨论 (7)参考文献 (8)致谢 (8)中文摘要摘要:本实验采用平板菌落计数法对师高等专科学校女生宿舍2A320的管道自来水,圣王桶装水及校教育超市出售的康师傅、统一、今麦郎瓶装水分别进行了菌落总数的测定,并对其中的细菌进行培养,经过革兰氏染色和镜检,初步观察了细菌的形态和革兰氏阴阳性鉴定。

实验结果表明校管道自来水的菌落总数为66cfu/ml,符合国标GB 5749-85,超市销售的康师傅、统一、今麦郎瓶装水中菌落总数分别为0.5cfu/ml、1cfu/ml、1cfu/ml,均符合国家标准GB l0789-89,而桶装水的水质不是很理想,测定的菌落总数为520cfu/ml,远超过了国标GB 19298-2003中的规定。

通过本次实验,期待更多的在校师生,能够关注饮用水质量,关爱健康,增强安全用水意识。

关键词:饮用水;平板菌落计数法;菌落总数的测定;革兰氏染色ABSTRACTAbstract:Total number of colonies of using plate ,Lianyungang Teachers College dormitory 2A320 water pipeline,Sage Bottled Water, And school education in supermarkets sell Master Kong, unity, bottled water Jinmailang were terminated in this study by colony count method,and which the bacteria were cultured, after Gram staining and microscopy, we observed the shape of bacteria Preliminarily and Gram Identification of yin and yang The results show that the total number of campus pipeline water for the colony were 66cfu/ml, meet the national standard GB 5749-85,Master Kong supermarket sales, unity,bottled water Jinmailang total number of colonies were 0.5cfu/ml, 1cfu/ml, 1cfu/ml,meet the national standard GB l0789-89,however the water quality of bottled water is not very satisfactory, the determination of the total number of colonies were 515cfu/ml, which far exceeding the national standard GB 19298-2003 in the regulations. Through this experiment, looking for more teachers and students, to focus the quality of drinking water, health care, increased awareness of safe water.Keywords: drinking water, lat colonies notation, The etermination of total colonies,Gram's staining饮用水中菌落总数的测定1.引言各种天然水中常含有一定数量的微生物。

简要叙述水中细菌总数的测定步骤

简要叙述水中细菌总数的测定步骤

水中细菌总数的测定步骤在环境监测和饮用水管理中,测定水中细菌总数是非常重要的一项工作。

它可以帮助我们了解水质的卫生情况,评估水是否符合生活饮用水标准,从而保障人们的健康。

那么,究竟应该如何测定水中细菌的总数呢?下面我将结合常用的方法,为大家详细介绍一下。

1. 收集水样我们需要准备好需要测定的水样。

这些水样可以来自自来水、地表水、井水或者其他水源。

在收集水样的过程中,需要注意使用无菌瓶或者消毒过的玻璃瓶,避免外界细菌的污染。

在收集水样的过程中,也需要避免使用含氯的消毒剂,以免对后续操作产生影响。

2. 制备稀释液收集好水样之后,接下来需要制备稀释液。

一般来说,我们会选择生理盐水或者蒸馏水作为稀释液的基质。

在制备稀释液的过程中,需要进行严格的无菌操作,以确保稀释液不会受到外界细菌的污染。

3. 进行稀释将收集到的水样加入到制备好的稀释液中,进行适当的稀释。

一般情况下,我们会选择进行多次等比稀释,以确保在测定范围内可以准确计数。

稀释完成后,需要进行摇匀,确保水样和稀释液充分混合。

4. 填充平板接下来,我们需要将稀释后的水样填充到已经准备好的平板上。

填充平板的过程中,需要采用无菌技术,避免细菌污染。

填充完成后,需要在平板上进行横向和纵向的晃动,以确保水样均匀分布在平板表面。

5. 孵育培养填充好水样的平板需要置于培养箱中进行孵育。

一般情况下,会选择在35-37摄氏度下进行孵育,孵育的时间一般为24小时。

在孵育过程中,需要注意防止平板干燥,以免影响细菌的生长。

6. 计数和分析经过孵育后,我们可以观察到在平板上形成的菌落。

这时候就需要进行计数和分析了。

一般来说,我们会选择菌落计数板或者显微镜进行观察和计数。

通过计数和分析,我们就可以得到水样中细菌的总数。

测定水中细菌总数的步骤主要包括收集水样、制备稀释液、进行稀释、填充平板、孵育培养和计数分析。

这些步骤需要严格遵守无菌操作和实验室安全规范,以确保测定结果的准确性和可靠性。

包装饮用水菌落总数的测定方法操作规程

包装饮用水菌落总数的测定方法操作规程

包装饮用水菌落总数的测定方法操作规程操作规程:包装饮用水菌落总数的测定方法1.实验目的:测定包装饮用水中的菌落总数,评估其卫生安全性。

2.实验器材和试剂准备:-高温高压灭菌器-灭菌平板计数器-包装饮用水样品-琼脂培养基-蒸馏水或纯净水-消毒瓶-无菌试管-螺旋体和乳球菌选择性培养基(可选)3.操作步骤:3.1试剂准备和灭菌操作3.1.1准备琼脂培养基:根据生产商提供的说明书,配制琼脂培养基,并根据需要增加适当的抗生素(如螺旋体和乳球菌选择性培养基)。

3.1.2用蒸馏水或纯净水冲洗培养皿,确保其清洁并无细菌污染。

3.1.3将培养皿倒立放在无菌器皿内,进行高温高压灭菌。

3.1.4灭菌完成后,将培养皿平置在无菌工作台上,待培养基凝固。

3.2取样操作3.2.1使用无菌钳子或消毒瓶打开包装饮用水,将样品瓶口擦拭消毒。

3.2.2在无菌条件下,取适量的包装饮用水样品(通常为10mL),加入一支无菌试管中。

3.3平板涂布和培养3.3.1使用无菌针或无菌量杯,从含有样品的无菌试管中取适量样品。

3.3.2将取样的无菌针或无菌量杯沿培养皿表面迅速来回划线,覆盖整个培养基面积。

3.3.3使用一把灭菌的铲子,平均分配样品于培养基上。

3.4培养和计数3.4.1如果使用了螺旋体和乳球菌选择性培养基,则将琼脂培养基培养皿和选择性培养基培养皿分别标记,并进行相应的培养条件。

3.4.2培养皿倒置,置于恒温培养箱中培养(通常为35-37°C,48小时)。

3.4.3按照要求进行菌落计数,包括可见的典型和非典型菌落。

3.4.4记录每个培养皿上菌落的数量。

4.数据处理和结果分析:4.1计算平均菌落总数:将每个培养皿上的菌落数量相加,并除以培养皿总数,得到平均菌落总数。

4.2结果分析和评估:将测得的平均菌落总数与国家或国际标准进行比较,评估包装饮用水的卫生安全性。

5.注意事项:5.1操作过程中严格遵守无菌操作规范,以防止样品污染和结果失真。

饮用水 菌落总数 标准

饮用水 菌落总数 标准

饮用水菌落总数标准饮用水菌落总数标准。

饮用水是人类日常生活中不可或缺的重要物质,其质量安全直接关系到人们的健康和生活质量。

菌落总数是评价饮用水卫生质量的重要指标之一,它反映了水中微生物的数量和种类,对于评价水质的卫生安全性具有重要意义。

根据国家标准《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006),对于菌落总数的限制标准是每毫升不超过100个。

这一标准的制定是为了保障饮用水的卫生安全,有效预防水源污染和水传播疾病的发生。

菌落总数的检测通常采用培养基培养法,通过培养水样中的微生物,再根据菌落的形态、颜色、大小等特征进行计数。

在实际检测中,需要严格按照操作规程进行,避免外界污染和误差的产生,以确保检测结果的准确性和可靠性。

当水样中的菌落总数超过标准限制时,表明水质受到了污染,存在着潜在的卫生风险。

这时需要采取相应的水质处理措施,如消毒、过滤等,以确保饮用水的安全性。

同时,也需要找出污染源,采取有效的措施进行治理,防止水质再次受到污染。

除了国家标准规定的菌落总数限制外,不同地区和不同用途的饮用水,还可能有着更为严格的菌落总数标准。

例如,一些对水质要求较高的特定场所,如医院、实验室等,对菌落总数的要求可能会更加严格,这需要根据实际情况进行具体规定和监测。

总的来说,饮用水菌落总数标准的制定和执行,对于保障饮用水的卫生安全至关重要。

只有严格执行标准,加强水质监测,及时发现和解决问题,才能有效预防水源污染和水传播疾病的发生,确保人民群众的身体健康。

同时,也需要加强公众对饮用水卫生的认知,提高自我保护意识,共同维护好饮用水的卫生安全。

在日常生活中,我们也要注意保护水资源,避免随意排放废水和垃圾,养成良好的用水习惯,从小事做起,共同为保障饮用水的卫生安全贡献自己的一份力量。

只有这样,我们才能真正享受清洁、健康的饮用水,让生活更加美好。

GB5757.12-2023-4.1菌落总数(平皿法)方法验证报告

GB5757.12-2023-4.1菌落总数(平皿法)方法验证报告

方法验证报告项目名称:生活饮用水中菌落总数的测定方法名称:《生活饮用水标准检验方法第12部分:微生物指标》GB/T 5750.12-2023 4.1 平皿计数法报告编写人:参加人员:审核人员:报告日期:1 实验室基本情况1.1 人员情况表1参加验证的人员情况登记表1.2 检测仪器/设备情况表2使用仪器情况登记表1.3 检测用试剂情况表3使用试剂登记表1.4 环境设施和条件情况实验室具有检定合格的温湿度计,环境可以控制在温度18⁓26℃,湿度45%⁓65%的要求范围内,满足检测环境条件,实验室人员每天对环境条件进行监控。

另外实验室配备了洗眼器、喷淋设施、护目镜、灭火器等的安全防护措施,符合实验室安全内务的要求。

2 实验室检测技术能力2.1定义和适用范围菌落总数指在一定条件下,经一定时间培养后所得1ml水样中的微生物菌落个数。

本方法适用于生活饮用水和水源水中微生物指标的测定。

2.2 精密度2.2.1 检测步骤2.2.1.1 选择稀释度选择适宜稀释度,以期培养后平皿上得到的菌落总数介于30-300之间。

例如,如果认为直接培养计数所得的菌落数为3000,就应该将样品稀释100倍后,再进行培养计数。

2.2.1.2 样品制备水源水:用移液器吸取1ml混匀的水样,放于装有9ml灭菌生理盐水的试管内,充分摇匀,制成1:10稀释液。

用移液器吸取1ml配置好的1:10样品放于装有9ml灭菌生理盐水的试管内,制成1:100稀释液。

按同法操作依次稀释成1:1000和1:10000等稀释度。

如此每递增一次,即换用另一只灭菌移液管或吸头。

根据对样品含菌量的估计,选择2个到3个适宜浓度的稀释菌液用做平板培养。

生活饮用水:不需要稀释2.2.1.3接种水样以无菌操作用1ml灭菌移液管吸取适宜浓度的稀释菌液1ml,注入灭菌平皿内,倾注约15ml以融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基,立即转动平皿,使稀释液和培养基混合均匀。

每个稀释倍数应倾注两个平板以对照培养结果。

水质 细菌总数的测定 菌落计数

水质 细菌总数的测定 菌落计数

水质细菌总数的测定菌落计数1. 适用范围本方法适用于测定饮用水、水源水、地表水细菌总数的测定。

2. 原理平板计数法是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌密度的方法。

因为细菌在水中能以单独个体、成双成对、链状、成簇等形式存在,而且没有任何单独一种培养基或一套物理、化学条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求。

所以,由此法所得的菌落数可能要低于真正存在的活细菌的总数。

3. 仪器高压蒸汽灭菌器电热干燥箱恒温培养箱冰箱解剖镜。

采样瓶、三角烧瓶、试管、平皿(直径9cm)、刻度吸管等器皿121℃(20min)高压蒸汽灭菌后于电热干燥箱中烘干。

培养基营养琼脂培养基:市售营养琼脂培养基,按说明配制,装于三角烧瓶中,经121℃高压蒸汽灭菌15min,经无菌性检验和标准菌株检验后,贮存于暗处备用。

4. 步骤4.1 选择稀释度稀释度要选择适宜,以期在平皿上的菌落总数介于30~300之间。

大多数饮用水水样,未经稀释直接接种1mL,所得的菌落总数可适于计数。

4.2 水样的稀释方法①将水样用力振摇20~25次,使可能存在的细菌凝团成分散状。

②以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样,注入盛有9mL灭菌水的试管中,混匀成1:100稀释液。

按同法依次稀释成1:1000、1:10000稀释液(稀释倍数按水样污浊程度而定)。

注意:吸取不同浓度的稀释液时,必须更换吸管。

4.3 操作方法①以无菌操作方法用1mL灭菌吸管吸取充分混匀的水样或2~3个适宜浓度的稀释水样1mL,注入灭菌平皿中,倾注约15mL已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基,并立即旋摇平皿,使水样与培养基充分混匀。

每个水样应倾注两个平皿。

②待琼脂冷却凝固后,翻转平皿,使底面向上,置于37℃恒温箱内培养24h,进行菌落计数。

4.4 菌落计数培养之后,立即进行平皿菌落计数。

如果计数必须暂缓进行,平皿需存放于5~10℃冰箱内,且不得超过24h。

但是不可以使这种做法成为常规的操作方式。

水质菌落总数检测方法

水质菌落总数检测方法

水质菌落总数检测方法一、引言水质菌落总数是评估水体卫生质量的重要指标之一,它能够反映水体中细菌的数量,进而判断水质是否合格。

因此,准确测定水质菌落总数对于保障水源安全、防止水传播疾病具有重要意义。

1. 培养法培养法是目前最常用的水质菌落总数检测方法之一。

其基本原理是将水样涂布在含有营养物质的琼脂平板上,然后在适宜的温度下培养一定时间,观察并计数菌落的数量。

这种方法简单易行,可以检测各种类型的细菌,但需要较长的时间,通常需要24-48小时才能得到结果。

2. 膜过滤法膜过滤法是一种快速测定水质菌落总数的方法。

其原理是将水样通过一块细孔膜滤膜,过滤掉水中的微生物,然后将滤膜放置在含有营养物质的琼脂平板上进行培养。

菌落在滤膜上生长并形成可见的斑点,通过计数斑点的数量来测定水质菌落总数。

相比于培养法,膜过滤法缩短了检测时间,通常只需要6-12小时即可得到结果。

3. 流式细胞仪法流式细胞仪法是一种高效准确的水质菌落总数检测方法。

它利用光散射和荧光染色技术,将水样中的微生物分为不同的群体并进行计数。

流式细胞仪能够快速检测大量样品,并提供详细的菌落分布数据,具有高灵敏度和准确性。

但是,流式细胞仪法的设备较为昂贵,需要专业操作人员进行操作。

4. PCR法PCR法是一种基于DNA扩增的水质菌落总数检测方法。

它利用特定的引物和酶,在聚合酶链反应的条件下,扩增水样中细菌的DNA片段。

通过测定扩增产物的数量,可以间接测定水质菌落总数。

PCR 法具有高灵敏度和高特异性,并且可以快速得到结果,但需要专业的实验室设备和技术支持。

三、不同方法的优缺点比较1. 培养法的优点是操作简单,可以检测不同种类的细菌。

缺点是需要较长时间,无法实时监测水质。

2. 膜过滤法的优点是快速,可以在较短时间内得到结果。

缺点是只能检测活菌,对于耐热菌等特殊菌种的检测效果较差。

3. 流式细胞仪法的优点是高效准确,可以实时监测水质。

缺点是设备昂贵,需要专业操作人员。

水质菌落总数300

水质菌落总数300

水质菌落总数300
(原创实用版)
目录
1.水质菌落总数的概念
2.水质菌落总数的标准
3.水质菌落总数的检测方法
4.水质菌落总数的意义
5.控制水质菌落总数的措施
正文
一、水质菌落总数的概念
水质菌落总数是指在一定的条件下,水中的细菌在一定培养基上生长繁殖形成的菌落总数。

它是评价水质卫生学状况的重要指标,可以反映水体受微生物污染的程度。

二、水质菌落总数的标准
我国《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)规定,生活饮用水中水质菌落总数的标准为 300CFU/mL。

CFU/mL 是表示每毫升水中形成菌落的
菌落数,表示水中细菌污染的程度。

三、水质菌落总数的检测方法
水质菌落总数的检测方法通常采用平皿法。

具体操作步骤为:首先将一定量的水样均匀涂布在培养基平板上,然后在一定温度下培养一定时间,最后观察并计数平板上的菌落数。

四、水质菌落总数的意义
水质菌落总数可以作为评价水体卫生学状况的重要指标,对保障饮用水安全具有重要意义。

菌落总数越高,说明水体中的微生物污染越严重,
对人体健康的潜在危害也越大。

五、控制水质菌落总数的措施
为了保证饮用水的卫生安全,降低水质菌落总数,可以采取以下措施:
1.加强水源保护,防止水体受到微生物污染。

2.完善水处理工艺,提高水质净化效果。

3.加强水质监测,定期检测水质菌落总数,确保达标。

4.严格执行饮用水卫生标准,对不符合标准的水体进行处理和整改。

总之,水质菌落总数是评价水质卫生学状况的重要指标,应引起广泛关注。

(新编)自来水中菌落总数的测定

(新编)自来水中菌落总数的测定

(新编)自来水中菌落总数的测定一、实验目的1.学习水的细菌学检查方法,看其是否合乎饮用标准。

2.了解水源的平板菌落计数的原则二、实验原理饮用水是否合乎标准,通常通过水中细菌总指数和大肠菌群数来确定。

细菌总指数是指lml水样在普通肉膏蛋白琼脂培养基中,37℃24小时培养后所生长的菌落数。

一般规定,1ml自来水的总菌数不得超过100个。

三、实验器材肉膏蛋白琼脂培养基、灭菌水、灭菌三角烧瓶、灭菌的带玻璃塞瓶、灭菌培养皿、灭菌吸管、灭菌试管等。

四、实验步骤1.水样的采取(1)先将自来水龙头用火焰烧灼三min灭菌,再开放水龙头使水流5min后,以无菌容器接取水样。

以待分析。

(2)池水、河水或湖水应取距水面10~15cm的深层水样,先将无菌的带瓶塞的小口瓶,口向下浸入水中,然后翻转过来,除去玻塞,水即流入瓶中,盛满后,将瓶塞盖好,再从水中取出,样品最好立即检查,否则须放入冰箱中保存。

2.细菌总数测定(1)自来水1)用灭菌吸管吸取1ml水样,注入灭菌培养皿中。

共做2份样品。

2)分别倾注约15ml已溶化并冷却到45℃左右的普通琼脂培养基,并立即在桌上作平面旋摇,使水样与培养基充分混匀。

3)另取一空的灭菌培养皿,倾注普通琼脂培养基15m1,作空白对照。

4)培养基凝固后,翻转,置37℃培养箱中,培养24h,进行菌落计数。

两个培养皿的平均菌落数即为lml水样中的细菌总数。

(2)池水、河水或湖水等1)稀释水样取3个灭菌空试管,分别加入9ml灭菌水。

取1ml 水样注入第一管9ml灭菌水内,摇匀;再自第一管摇匀的水样中取1ml至下一灭菌水内,如此稀释到第三管,稀释度分别为10-1、10-2与10-3。

稀释度倍数看水样污浊程度而定,以培养平板的菌落数在30~300个之间的稀释度最为合适,若三个稀释度的菌数均多到无法计数或少到无法计数,则需进一步稀释或减小稀释倍数。

一般中等污秽水样,取10-1、10-2与10-3三个连续稀释度,污秽严重的取10-2、10-3与10-4三个连续稀释度。

水质检测菌落总数标准

水质检测菌落总数标准

水质检测菌落总数标准导言水质检测是评估水体健康状况的重要方法之一。

其中,检测菌落总数是一种常用的指标,用于评估水体中细菌和其他微生物的含量。

菌落总数是指在固定条件下,培养基上形成的可见菌落数目,它反映了水体中菌落的数量和密度。

检测方法常用的菌落总数检测方法是通过培养基培养水样中的微生物,以得到可见的菌落。

通常,使用接种柄在培养基上接种水样,然后将培养基放入恒温箱中适宜的温度下培养一段时间,一般为24-48小时。

在此期间,微生物会逐渐生长并形成可见的菌落。

最后,通过目测或显微镜观察,记录菌落的数量。

检测标准菌落总数的检测结果可以用于评估水体的微生物污染程度,以及是否符合相关的水质标准。

不同国家和地区对菌落总数的限制标准可能不同,一般可根据国际上通用的标准进行判断。

在中国,根据《生活饮用水卫生标准》,菌落总数的标准如下:•水源地进水、水厂出厂水:每毫升不得超过100个菌落形成单位(CFU/ml);•供水管网、集中供水系统出水:每毫升不得超过100个菌落形成单位(CFU/ml);•居民家庭自来水:每毫升不得超过100个菌落形成单位(CFU/ml);菌落总数的标准可以根据水体的用途和领域的要求进行调整。

例如,在某些特定的行业中,如食品生产或医疗机构,对水体的微生物污染准则要求更为严格。

影响因素菌落总数的检测结果可能受到以下因素的影响:•水样采集与保存条件:采样时的卫生条件和保存方式可能导致菌落总数异常增加或减少;•培养基的选择:不同的培养基适用于不同类型的微生物,使用不当可能导致不准确的结果;•培养条件的控制:培养箱的温度、湿度等培养条件的控制是否准确,会影响微生物的生长和形成菌落的数量。

因此,在进行菌落总数检测时,需要注意以上因素以获得准确和可靠的结果。

结论菌落总数是评估水体微生物污染程度及水质的重要指标之一。

不同国家和地区对菌落总数的标准可能有所不同,而菌落总数的影响因素也多种多样。

在进行菌落总数检测时,应严格遵守相应的标准和规范,并注意采样、保存和培养条件的控制,以获得准确、可靠的结果。

水 中 细 菌 总 数 的 检 测

水 中 细 菌 总 数 的 检 测

水中细菌总数的检测
一、实验的目的要求
1、学习并掌握水的细菌学检测方法
2、了解水质状况与细菌数量在饮用水检测中的重要性。

二、实验原理
细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃经24h培养后,所生长的细菌菌落的总数。

2、消毒酒精、消毒水。

3、试管、三角瓶、平皿、刻度吸管、涂布器等(实验前包扎灭菌处理好备用)
4、培养基
蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂10~20g蒸馏水1000ml
制备方法:
按照实际的需要量,按上述配方称取各成分混合后,加热溶解,调整pH为7.4~7.6,,分装于玻璃容器中,用高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌20min,倒制成平板后储存于冷处备用。

5、水样:自来水、中水。

四、实验内容:
(一)、培养基的制备:
实验前事先准备好培养基平板(方法见上),每小组2-4个平板。

(二)、取水样:
1、自来水的取样:先将自来水龙头用酒精棉擦拭,再用酒精灯火焰灭菌,打开龙头放水1-2分钟,
用无菌空三角瓶接取水样200毫升。

六、实验报告内容;
1、记录实验方法和步骤。

2、列表说明检测结果。

(1)自来水
(2)饮用水
3、思考题:
(1)从自来水的细菌总数结果来看,是否合乎饮用水的标准?
(2)你所测的水样污秽程度。

饮用水菌落总数标准

饮用水菌落总数标准

饮用水菌落总数标准饮用水是人类日常生活中必不可少的一部分,其质量直接关系到人们的健康。

因此,对于饮用水的监测和评价显得尤为重要。

其中,菌落总数是评价水质的重要指标之一。

本文将就饮用水菌落总数标准进行详细介绍,以便更好地了解和掌握相关知识。

首先,菌落总数是指在一定条件下,培养基上生长出的细菌或真菌的总数。

通常情况下,菌落总数是通过将水样涂布在含有营养物质的培养基上,经过一定时间后,根据培养基上出现的菌落数量来进行计数的。

菌落总数的标准是衡量饮用水卫生安全的重要指标之一,它直接反映了水中微生物的数量和水质的卫生状况。

其次,根据《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2006)的规定,菌落总数的标准是每毫升不超过100个。

这一标准是对饮用水卫生安全的一项重要保障,也是保障公众健康的必要措施。

因为水中的微生物,尤其是致病菌的存在,很容易导致水源的污染,从而对人们的健康造成威胁。

因此,菌落总数超标可能导致水质不合格,从而影响人们的生活和健康。

再次,饮用水菌落总数的标准是有其科学依据的。

一方面,菌落总数可以直接反映出水中微生物的数量,从而判断水质的卫生状况。

另一方面,菌落总数标准的制定是经过科学实验和大量数据分析的结果,是为了保障公众健康和生活安全而进行的。

因此,严格执行菌落总数标准,对于保障饮用水的卫生安全至关重要。

最后,为了确保饮用水的卫生安全,我们每个人都应该从自身做起,节约用水,保护水资源,杜绝污染行为。

同时,政府部门也应加大对饮用水质量的监测和管理力度,确保饮用水菌落总数符合相关标准。

只有通过共同努力,我们才能真正保障饮用水的卫生安全,让人们喝上放心、安全的水。

综上所述,饮用水菌落总数标准是保障公众健康和生活安全的重要指标,其制定和执行都具有重要意义。

我们每个人都应该关注饮用水的质量,从自身做起,共同维护饮用水的卫生安全。

希望通过本文的介绍,能够增加大家对饮用水菌落总数标准的了解,从而更好地保障饮用水的卫生安全。

水质 细菌总数的测定 菌落计数

水质 细菌总数的测定 菌落计数

水质细菌总数的测定菌落计数1. 适用范围本方法适用于测定饮用水、水源水、地表水细菌总数的测定。

2. 原理平板计数法是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌密度的方法。

因为细菌在水中能以单独个体、成双成对、链状、成簇等形式存在,而且没有任何单独一种培养基或一套物理、化学条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求。

所以,由此法所得的菌落数可能要低于真正存在的活细菌的总数。

3. 仪器高压蒸汽灭菌器电热干燥箱恒温培养箱冰箱解剖镜。

采样瓶、三角烧瓶、试管、平皿(直径9cm)、刻度吸管等器皿121℃(20min)高压蒸汽灭菌后于电热干燥箱中烘干。

培养基营养琼脂培养基:市售营养琼脂培养基,按说明配制,装于三角烧瓶中,经121℃高压蒸汽灭菌15min,经无菌性检验和标准菌株检验后,贮存于暗处备用。

4. 步骤4.1 选择稀释度稀释度要选择适宜,以期在平皿上的菌落总数介于30~300之间。

大多数饮用水水样,未经稀释直接接种1mL,所得的菌落总数可适于计数。

4.2 水样的稀释方法①将水样用力振摇20~25次,使可能存在的细菌凝团成分散状。

②以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样,注入盛有9mL灭菌水的试管中,混匀成1:100稀释液。

按同法依次稀释成1:1000、1:10000稀释液(稀释倍数按水样污浊程度而定)。

注意:吸取不同浓度的稀释液时,必须更换吸管。

4.3 操作方法①以无菌操作方法用1mL灭菌吸管吸取充分混匀的水样或2~3个适宜浓度的稀释水样1mL,注入灭菌平皿中,倾注约15mL已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基,并立即旋摇平皿,使水样与培养基充分混匀。

每个水样应倾注两个平皿。

②待琼脂冷却凝固后,翻转平皿,使底面向上,置于37℃恒温箱内培养24h,进行菌落计数。

4.4 菌落计数培养之后,立即进行平皿菌落计数。

如果计数必须暂缓进行,平皿需存放于5~10℃冰箱内,且不得超过24h。

但是不可以使这种做法成为常规的操作方式。

包装饮用水菌落总数的测定方法操作规程

包装饮用水菌落总数的测定方法操作规程

食品中菌落总数的测定方法操作规程一、适用范围本标准规定了食品中菌落总数(Aerobic plate count)的测定方法。

本标准适用于食品中菌落总数的测定,实验采样方案按照GB4789.1-2016。

二、编写依据GB4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定》三、术语和定义菌落总数:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。

四、内容1.设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:1 .1恒温培养箱:36℃±1℃,30℃±1℃1.2 冰箱:2℃~5℃1.3 恒温水浴箱:46℃±1℃1.4 天平:感量为0.1g1.5 均质器1.6 振荡器1.7 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头1.8 无菌锥形瓶:容量250 mL、500 mL1.9 无菌培养皿:直径90 mm1.10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸1.11 放大镜或/和菌落计数器2.培养基和试剂:2.1 平板计数琼脂培养基:同GB 4789.15项下制法。

2.2 磷酸盐缓冲液:同GB 4789.15项下制法。

2.3 无菌生理盐水:同GB 4789.15项下制法。

2.4 30%碳酸钠溶液。

2.5 1mol/L HCl。

3.样品的稀释3.1固体和半固体样品:称取25 g样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min均质1 min~2 min,或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min,制成1:10的样品匀液。

3.2液体样品:以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

目录中文摘要 (2)ABSTRACT (2)1.引言 (3)2. 材料与方法 (3)2.1实验材料 (3)2.2培养基的配制及其灭菌 (4)2.3主要仪器 (4)2.4染色液的制备 (4)2.5菌落总数的测定 (4)2.6革兰氏染色 (5)3结果 (5)3.1平板计数的结果 (5)3.2水样中细菌总数的计算 (6)3.3革兰氏染色结果 (6)4.讨论 (7)参考文献 (7)致 (8)中文摘要摘要:本实验采用平板菌落计数法对师高等专科学校女生宿舍2A320的管道自来水,圣王桶装水及校教育超市出售的康师傅、统一、今麦郎瓶装水分别进行了菌落总数的测定,并对其中的细菌进行培养,经过革兰氏染色和镜检,初步观察了细菌的形态和革兰氏阴阳性鉴定。

实验结果表明校管道自来水的菌落总数为66cfu/ml,符合国标GB 5749-85,超市销售的康师傅、统一、今麦郎瓶装水中菌落总数分别为0.5cfu/ml、1cfu/ml、1cfu/ml,均符合国家标准GB l0789-89,而桶装水的水质不是很理想,测定的菌落总数为520cfu/ml,远超过了国标GB 19298-2003中的规定。

通过本次实验,期待更多的在校师生,能够关注饮用水质量,关爱健康,增强安全用水意识。

关键词:饮用水;平板菌落计数法;菌落总数的测定;革兰氏染色ABSTRACTAbstract:Total number of colonies of using plate ,Lianyungang Teachers College dormitory 2A320 water pipeline,Sage Bottled Water,And school education in supermarkets sell Master Kong, unity, bottled water Jinmailang were terminated in this study by colony count method,and which the bacteria were cultured, after Gram staining and microscopy, we observed the shape of bacteria Preliminarily and Gram Identification of yin and yang The results show that the total number of campus pipeline water for the colony were 66cfu/ml, meet the national standard GB 5749-85,Master Kong supermarket sales, unity, bottled water Jinmailang total number of colonies were 0.5cfu/ml, 1cfu/ml, 1cfu/ml,meet the national standard GB l0789-89,however the water quality of bottled water is not very satisfactory, the determination of the total number of colonies were 515cfu/ml, which far exceeding the national standard GB 19298-2003 in the regulations.Through this experiment, looking for more teachers and students, to focus the quality of drinking water, health care, increased awareness of safe water.Keywords: drinking water, lat colonies notation, The etermination of total colonies,Gram's staining饮用水中菌落总数的测定1.引言各种天然水中常含有一定数量的微生物。

水中微生物的主要来源有:水中的水生性微生物(如光合藻类)、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。

水中的病原微生物主要来源于人和动物的传染性排泄物。

水是生命之源,和、空气一样,是生命不可或缺、最基本、最必需的自然资源。

水参与了生物体所有的生理生化过程,同时又是体进行系生化反应的良好场所。

故水的微生物检验在保证饮水安全和控制传染病上有着重要的意义,同时也是评价水质状况的重要指标。

国家饮用水标准GB 5749-85规定,菌落总数不得超过100 cfu/g(ml),所用的方法是稀释平板计数法。

平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。

统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。

根据我校的实验条件,本实验拟选用国标规定的平板菌落计数法,对我校女生宿舍2A320的管道自来水,圣王桶装水及校教育超市出售的康师傅、统一、今麦郎瓶装水进行了菌落总数的测定,为全校师生的饮水安全提供理论和实践依据。

2. 材料与方法2.1实验材料随着生活水平的提高,人们对水的质量有了高要求,生产商择世所需,引进了先进的净水设备,来满足不同层次的人群需求。

小区居民喝自来水,办公室人员喝桶装水,学生则喝瓶装水的居多,针对以上情况,本实验选取的水样是师高等专科学校女生宿舍2A320的管道自来水、圣王桶装水和校教育超市出售的康师傅、统一、今麦郎三种常见瓶装水。

详情见表1。

表1 样品编号及存放时间样品名称样品编号实验日期存放时间(天)量取体积(ml)管道自来水ZS 2010.11.15 / 15 圣王桶装水ST 2010.11.15 3 15 康师傅KS 2010.11.15 25 15统一TS 2010.11.15 23 15今麦郎JS 2010.11.15 26 152.2培养基的配制及其灭菌由于水中的细菌种类繁多,它们对营养和其它生长条件的要求差别很大,不可能找到一种培养基在一种条件下,使水中所有的细菌均能生长繁殖。

因此本实验采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养出的细菌总数仅是一种近似值。

本培养基的主要成分有:牛肉膏,蛋白胨,氯化钠,琼脂,自来水[1]。

根据配置培养基的体积,事先加水溶解已经量取好的相应质量的牛肉膏、蛋白胨、氯化钠,然后加入到未沸的600-700ml的自来水中,边加热边用玻璃棒搅拌,待水沸腾后加入琼脂,再加水至1000ml,不断地搅拌直到液体呈半透明状将其取下,分装。

分装好的培养基运用高压蒸汽灭菌,121℃,15min即可[2]。

2.3主要仪器手提式高压灭菌锅(型号:YX280A)、超净工作台(型号:SW-CJ-1B)、恒温培养箱(型号:PYX-120)、显微镜(型号:OLYMPUS CH20)。

2.4染色液的制备革兰氏染色实验需要的染色液有:草酸钙结晶紫、碘液、95%的乙醇、番红[3]。

草酸钙结晶紫的制备:先将2.0g结晶紫溶于20ml95%的酒精,0.8g的草酸铵溶于80ml 蒸馏水中,然后将两液混合,静置48小时使用。

碘液的制备:先将1.0g碘与2.0g碘化钾混合,加水少许,略加摇动,待碘完全溶解后再加蒸馏水定容至300ml。

95%的乙醇的制备:将95ml的乙醇溶入100ml的水中。

番红的制备:将0.25g沙黄溶解于10ml95%的乙醇中,待完全溶解再加蒸馏水至100ml。

2.5菌落总数的测定采用国标中规定的平板菌落计数法,详细步骤见下。

2.5.1水样的采取自来水,先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌,再开放水龙头使水流5min后,以灭菌三角烧瓶接取水样,待用。

桶装水,取未打开的桶装水,打开盖子倒入灭菌的锥形瓶中,待用。

瓶装水,在超净工作台上打开盖子将水倒入灭过菌的锥形瓶中,待用。

2.5.2水样稀释及培养2.5.2.1水样稀释取3个灭菌空试管,分别加入9ml灭菌水。

取lml水样注入第一管9ml灭菌水、摇匀,再自第一管取1ml至下一管灭菌水,如此稀释到第三管,稀释度分别为10-1、10-2与10-3。

管道自来水、圣王桶装水和三种瓶装水分别按照以上叙述进行稀释。

通过预实验,本实验所采用的管道自来水的水样稀释度为100,圣王桶装水的水样稀释度为10-1,康师傅、统一、今麦郎三种瓶装水的水样稀释度均为100[4]。

2.5.2.2制作平板用一支灭菌吸管吸取lml水样,注入灭菌培养皿中,共做两个平皿。

另取一支灭菌吸管吸取1ml灭菌的蒸馏水,注入灭菌培养皿中,共做两个皿,作为空白对照。

分别在以上四个培养皿中倾注约15mL己溶化并冷却到45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基,并立即在桌上作平面旋摇,使水样与培养基充分混匀。

管道自来水、圣王桶装水和三种瓶装水分别按照以上叙述进行制作平板。

每个水样两个平行样,共做十个平板,外加每个水样一个空白对照板。

2.5.2.3菌落培养待培养基凝固后,倒置于37℃恒温培养箱中,培养48h。

2.6革兰氏染色本实验采用革兰氏染色法对细菌菌落进行染色,革兰氏染色一般包括初染、媒染、脱色、复染、镜检五个步骤,染色制片后选用OLYMPUS CH20显微镜,在油镜下进行镜检。

具体操作方法如下[5]。

2.6.1涂片固定在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,固定。

2.6.2初染草酸铵结晶紫染2分钟,自来水冲洗,去掉浮色。

2.6.3媒染用碘-碘化钾溶液媒染1分钟,倾去多余溶液。

2.6.4脱色用中性脱色剂如乙醇(95%)或丙酮酸脱色30秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。

2.6.5复染用蕃红染液复染2分钟,水洗。

2.6.6镜检干燥后用油镜观察,革兰氏阳性菌仍呈蓝紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。

以分散开的细菌革兰染色反应为准,过于密集的细菌常由于脱色不完全而呈假阳性。

3结果3.1平板菌落计数的结果用直接计数法,记录每个水样每个平板的菌落数,然后计算每个水样同一稀释度的两个平板的平均菌落数。

本实验管道自来水水样中的平均菌落数为66,且两个平行样间的菌落数相差小于5%;圣王桶装水水样中的平均菌落数为52,且两个平行样间的菌落数相差小于5%;康师傅、统一、今麦郎瓶装水的水样中的平均菌落数分别为0.5、1、1,且两个平行样间的菌落数相差均小于5%,详细结果见表2。

相关文档
最新文档