食品中菌落总数的测定
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中的微生物污染是影响食品安全的重要因素之一。
为了保障食品的质量和安全，需要对食品进行微生物指标的测定。
食品中菌落总数的测定是最常见的指标之一。
本文将介绍食品中菌落总数的测定和不确定度分析。
二、方法1. 实验材料和仪器（1）实验材料：待测食品样品、平板计数培养基、无菌培养皿、无菌移液器、无菌培养基平板。
（2）实验仪器：恒温培养箱、计数板。
2. 测定步骤（1）将待测食品样品进行消毒处理，常用的消毒方法有热处理、酸碱处理等。
（2）准备培养基：将平板计数培养基加热至溶解，然后冷却至约45℃。
（3）将样品取约1g加入到无菌培养皿中。
（4）将培养基翻匀到无菌培养皿中，使其覆盖整个培养皿。
（5）将培养皿倒置放入恒温培养箱中，以适当的温度和时间进行培养。
（6）取出培养皿，使用计数板进行菌落计数。
三、结果与讨论1. 结果分析通过菌落计数，可以得到食品中菌落总数的数值。
通常情况下，食品中菌落总数应该符合国家标准或行业标准的规定。
2. 不确定度分析（1）实验误差：实验操作中的误差包括称量误差、计数误差等。
（2）装载量误差：由于不同的操作人员在装载培养皿过程中的个体差异，导致结果的误差。
（3）样品取样误差：由于样品取样的位置不同，导致结果的误差。
（4）环境误差：实验环境的温度、湿度等因素对结果会产生一定影响。
根据以上误差来源，可以进行不确定度的计算和分析。
常用的不确定度计算方法有合成不确定度法和扩展不确定度法。
四、结论通过菌落计数技术，可以对食品中的菌落总数进行测定。
在测定过程中，需要注意控制实验误差，并分析不确定度以评估结果的可靠性。
五、参考文献。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析菌落总数是指在特定培养条件下，一定量的样品中培养出的所有菌落的总数。
它可以反映食品样品的微生物污染程度，是食品安全检测中常用的指标之一。
食品中菌落总数的测定方法一般采用平板计数法，但在测定过程中会受到不确定度的影响。
一、菌落总数测定方法1.取样：取适量食品样品，根据国家标准要求在不同的质量级别下取样不同的量。
2. 制备培养基和平板：按照相应的食品行业标准的要求制备好培养基，并按照制备方法制备好平板。
3. 滴接法：将样品滴于平板上，在平板上均匀涂布后置于恒温箱中培养一定时间，然后计算出每个平板上所培养出的菌落数量。
测量结果不可避免地存在误差，因此测量结果带有一定的不确定度。
菌落总数的不确定度主要涉及到两个方面：1.实验误差：包括人为误差、器材误差、操作方法等影响因素。
在实验过程中要尽可能地减少这些误差。
2.样品变异性：同一批食品样品中，不同样品可能存在微生物数量的差异，导致菌落总数的测量结果具有不确定性。
三、不确定度的分析和评估不确定度的分析和评估是检验结果可靠性的重要指标。
按照ISO/IEC 17025标准要求，制定有效的不确定度评估方案，定期进行实验验证，以确保菌落总数测定结果的可靠性。
1.不确定度的计算：应按照GB/T 16161等国家标准制定的方法进行测量误差和样品变异性的计算，并进行不确定度组成的分析和评估。
2.评估结果的有效性：对于不确定度的评估结果应进行合理的统计分析，确定合适的置信度，以提高菌落总数测定结果的可靠度和准确性。
3.改进措施：对于不确定度评估结果存在较大误差的情况，应采取相应的改进措施，以提高测量结果的准确度和可靠性。
四、总结。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析为了确保食品安全和卫生，必须对食品中的菌落总数进行测定，并进行不确定度的分析。
食品中的菌落总数是指在特定条件下，通过培养方法检测出的食品中的微生物菌落数量。
食品中菌落总数的测定方法通常采用平板计数法。
该方法主要包括以下步骤：1.准备培养基：选择适宜的培养基，如营养琼脂平板培养基。
将培养基加热溶解，然后冷却至约 45-50℃。
2.样品制备：按照一定比例将食品样品加入到培养基中，使用均匀撒布法或稀释法将菌液平铺在培养基表面。
3.培养：将制备好的培养基进行培养。
培养条件包括培养温度、时间和湿度等，根据食品样品的特性和微生物的生长特点进行合理设置。
4.统计：在菌落出现后，使用显微镜和计数器进行菌落的计数。
根据计数的结果和稀释倍数，计算出食品中的菌落总数。
测定菌落总数时，不确定度的分析是非常重要的。
不确定度是指对测量结果的估计误差。
菌落总数测定的不确定度分析主要包括以下几个方面：1.操作误差：操作人员在样品制备和培养过程中的误差。
可以通过重复测量多次来评估操作误差。
2.测量误差：使用显微镜和计数器进行菌落计数时的误差。
可以通过重复计数多次来评估测量误差。
3.稀释误差：使用稀释法进行样品制备时的误差。
可以通过重复制备多次进行评估。
4.环境误差：温度、湿度和空气质量等环境因素对菌落生长的影响。
可以通过控制环境条件和进行平行实验来评估环境误差。
评估不确定度后，可以使用统计方法来进行分析。
常用的统计方法包括平均数、标准差、方差和置信区间等。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析是确保食品安全的重要工作。
通过合理的测定方法和不确定度评估，可以提高菌落总数检测的准确性和可靠性。
食品中菌落总数的测定方法(参照材料)
食品中菌落总数的测定一、实验目的（1）学习和掌握测定食品中菌落总数的基本方法（2）学会菌落总数的报告方式二、实验材料1、仪器与设备：恒温培养箱、托盘天平、电炉、吸管、三角瓶、平皿、试管、试管架、酒精灯、灭菌刀或剪刀、75%酒精棉球、玻璃蜡笔。
2、培养基和试剂：75%乙醇、0.85%生理盐水、琼脂培养基：胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1000mL、pH 7.0±0.23、检样：利乐包装鲜牛奶250ml三、实验方法与步骤1、检验程序菌落总数检验程序：检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个适宜稀释度各以1ml之量分别入灭菌平皿内→每皿内加入46℃15-20ml营养琼脂→置36±1℃恒温箱内培养（48±2）h取出→菌落数→报告2、检样稀释及培养（1）以无菌操作，将检样包装打开，用吸管取25ml鲜牛奶，放于含有225ml灭菌生理盐水的500ml灭菌玻璃三角瓶内（瓶内预先置适当数量的玻璃珠），经充分振摇做成1：10的均匀稀释液。
（2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。
（3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。
（4）根据食品卫生检验标准要求和检样的菌落数量，选择3个连续适宜稀释度即10、10－1、10－2，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。
（5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿15ml~20mL，并转动平皿使与稀释检样混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。
（6）等琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃恒温箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1mL样品所含菌落总数。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中菌落总数是指在特定条件下，通过培养基培养和统计法，对食品中细菌和真菌等微生物菌落数的测定。
食品中菌落总数是评价食品卫生质量的重要指标之一，可以反映食品是否受到污染、保存条件是否良好等情况。
对食品中菌落总数进行准确测定和不确定度分析，对于食品卫生和质量控制至关重要。
二、食品中菌落总数的测定方法食品中菌落总数的测定方法通常采用菲尔氏杯平板法和薄膜法。
菲尔氏杯平板法是将食品样品稀释后均匀铺在富含寒天的琼脂培养基上，培养并统计菌落数；薄膜法是将食品样品均匀涂抹在琼脂培养基上，培养并统计菌落数。
三、食品中菌落总数的不确定度分析1. 采样不确定度：食品中菌落总数的测定首先要进行食品样品的采样和样品的制备，采样过程中可能会存在采样不均匀、采样器具的精密度等因素，引入采样不确定度。
2. 复现性不确定度：食品中菌落总数的测定通常需要进行多次重复测定，由于操作者、环境等因素的影响，可能会出现不一致的结果，引入复现性不确定度。
3. 实验条件不确定度：食品中菌落总数的测定受到实验条件的影响，如温度、湿度等条件会对微生物生长产生影响，引入实验条件不确定度。
4. 测量设备不确定度：食品中菌落总数的测定需要借助于培养箱、平板计数器等设备，设备的准确度和精度会影响测定结果，引入设备不确定度。
四、食品中菌落总数的不确定度评定食品中菌落总数的不确定度评定需要考虑上述不确定度因素的影响，并采用合适的方法进行计算评定。
不确定度评定的目的是为了确定测定结果的可靠性和准确性，提高测定结果的可信度。
1. 不确定度计算方法食品中菌落总数的不确定度可以采用GUM不确定度评定方法，通过不确定度传递法和不确定度组分法计算总的不确定度。
在实际计算中，需要考虑到各种不确定度来源的具体数值和权重，综合计算得出总的不确定度值。
2. 不确定度控制方法为了减小不确定度的影响，可以采取以下控制方法：（1）采样不确定度的控制：采用合适的采样方法和器具，确保样品的均匀性和代表性；（2）复现性不确定度的控制：严格控制实验条件和培养操作流程，尽量减小操作者和环境的影响；（3）实验条件不确定度的控制：控制实验条件的稳定性和准确性，进行实验前后的环境监测和校准；（4）测量设备不确定度的控制：对测量设备进行定期维护和校准，确保设备的准确度和精度。
食品中菌落总数的测定
【说明】蛋糕具有松软香甜，携带方便、食用简单等特点，因此成为人们居家生活特别是旅途中不可或缺的一种美食，深受人们的喜爱。
测定蛋糕中的菌落总数可以用来判定其被微生物污染的程度及卫生质量，它反映蛋糕在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价，菌落总数的多少在一定程度上标志着蛋糕产品质量的优劣，因此，测定蛋糕中的菌落总数具有重要意义。
目前应用于测定食品中菌落总数的方法有: 纸片法、电阻抗法等。
本实验采用国标法(GB\T 对独立包装小蛋糕中菌落总数进行测定。
并与GB 7099-2003糕点、面包卫生标准中规定的冷加工糕点中菌落总数≤10000（cfu/g）的数据对比初步判断样品是否符合卫生要求。
一、实验目的1、学习并掌握测定蛋糕中菌落总数的方法及原理。
2、通过对比实验验证冷藏对蛋糕的保鲜及抑菌作用。
3、了解菌落总数测定在食品卫生学评价中的意义。
二、实验原理菌落总数即为食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
每种细菌都有它一定的生理特性，培养时应用不同的营养条件及其他生理条件（如温度、培养时间、pH、需氧性质等）去满足其要求才能将各种细菌都培养出来。
但在实际工作中，一般都只用一种常用的方法。
细菌菌落总数的测定，所得结果，只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温性需氧菌的菌落总数。
菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
三、实验设备与材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：恒温培养箱：36 ℃±1℃，30℃±1 ℃。
冰箱：2 ℃～5 ℃。
恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。
天平：感量为 g。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中菌落总数的测定和不确定度分析是食品卫生检测中的重要一环。
菌落总数是指食品样品中各类菌落的总数，反映了食品样品的卫生质量和微生物状态。
通过对食品中菌落总数的测定和不确定度分析，可以评估食品样品中微生物的数量，并确定分析结果的准确度和可靠性。
二、测定方法食品中菌落总数的测定通常使用平皿计数法。
具体步骤如下：1. 准备样品：取食品样品适量，保持其完整性和天然状态。
2. 消毒处理：将样品进行消毒处理，通常采用酒精灼烧或辐射灭菌等方法，以确保样品中的微生物数量符合测定要求。
3. 取样：采用无菌技术，将样品取适量均匀地涂于含有营养物质的琼脂平板上。
4. 培养：将平板培养基斜放于培养箱中，控制培养环境的温度和湿度，使菌落得以生长。
5. 记录和计数：在培养一定时间后，观察平板上菌落的生长情况，并且根据菌落的形状、颜色、大小等特征进行记录和计数。
6. 计算菌落总数：统计记录的菌落数量，并根据实验过程中相应的计算公式计算出食品中菌落总数。
三、不确定度分析不确定度是对测量结果的可靠性和准确度的度量。
在食品中菌落总数的测定过程中，存在多个可能影响结果的因素，如样品的不均匀性、菌落的形状和大小的主观判断等。
通过不确定度的分析，可以评估测定结果的可靠性，并确保实验数据的准确度。
不确定度的分析可以通过以下步骤进行：1. 确定测定结果的标准偏差：通过进行多次实验测定，计算出测定结果的标准偏差。
标准偏差可以反映出数据的离散程度和测定的精确性。
2. 估计不确定度的类型：根据测定过程中存在的因素和误差来源，估计可能的不确定度类型，如随机误差和系统误差等。
3. 计算不确定度的组成：根据不确定度类型，分别计算出每个不确定度源的贡献度，并进行数值上的组合和求和。
4. 定量表示不确定度：通过数值表示不确定度的大小，常用表示形式包括标准不确定度和扩展不确定度。
5. 不确定度扩展：在测定过程中，不确定度可能会随着操作过程的复杂性而增加。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析食品中细菌总数的测定和不确定度分析是食品科学与技术领域中的重要研究内容之一。
细菌总数的测定可以帮助我们了解食品的卫生状况，评估食品质量，保障公众的食品安全。
不确定度分析则是用来评估测定结果的可靠性和准确性，帮助我们判断测定结果的可信度。
食品中的细菌是以菌落的形式存在的，所以细菌总数的测定方法一般采用菌落计数的方法。
具体的步骤如下：1. 取样：从食品样品中取出适量的物质，一般是取适量食品，加入适量的生理盐水，通过均匀悬浮。
2. 稀释：将取样得到的悬浮液进行适当的稀释，以保证每个培养皿上的菌落数在可计数的范围内。
一般采用十倍的稀释系列进行稀释。
3. 接种：将稀释好的样品取适量，在无菌条件下倒入培养皿中，均匀涂布在培养基上。
4. 培养：将培养皿放入恒温箱温育，通常为30°C，培养时间一般为24-48小时。
5. 计数：培养完成后，通过裸眼或显微镜观察，根据菌落的形态、大小、颜色等特征进行计数，并将计数结果记录下来。
细菌总数的测定结果一般以CFU/g（菌落形成单位/克）为单位表示。
不确定度分析是对测定结果的评估，主要从随机误差和系统误差两方面进行分析。
随机误差是由于测定过程中的种种因素引起的结果的波动性。
在细菌总数的测定中，随机误差可能包括取样不均匀、稀释误差、接种误差等。
通过重复测定可以减小随机误差，并通过统计方法计算出标准偏差来表示测量结果的稳定性。
系统误差是由于测定方法的固有缺陷引起的结果的偏差。
在细菌总数的测定中，系统误差可能包括培养基的选择和准备、温度和湿度的控制、观察的主观判断等。
通过合理选择和优化测定条件，可以减小系统误差。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品中的微生物污染是导致食品质量问题的重要原因之一。
食品中菌落总数是评价食品卫生状况的指标之一，它可以反映食品中的微生物污染程度。
准确测定食品中的菌落总数并分析其不确定度，对于保证食品安全和卫生具有重要意义。
二、理论基础菌落总数是指在一定条件下生长发育的微生物形成的菌落的总数。
通常使用平皿计数法来测定食品中的菌落总数，该方法主要包括以下几个步骤：1、样品制备：将食品样品精确称重，并加入合适的培养基中。
2、培养：将加入样品的培养基倒入培养皿中，倒平并让其凝固。
3、孵育：将培养皿放入恒温箱中，在适宜的温度条件下孵育一定时间。
4、计数：取出培养皿，使用显微镜观察并计数菌落的数量。
不确定度是测量结果与所测量实际值之间的偏差的度量，通常用标准偏差表示。
计算不确定度需要考虑到样品制备、培养、孵育过程中的误差以及人为误差等因素。
三、实验方法2、制备菌落计数平皿：将无菌琼脂糖培养基熔化，并冷却到45-50℃左右，加入适量的样品，充分混合后倒入培养皿中。
3、培养和孵育：将培养皿倒平，并在无菌条件下放置一段时间，直到琼脂糖凝固。
4、计数：将培养好的平皿放置在显微镜下，使用透明计数器或格子计数器对菌落进行计数，并记录结果。
四、结果分析根据平皿计数法所测得的菌落总数结果，计算菌落总数的平均值、标准偏差和不确定度。
标准偏差的计算公式为：s = \sqrt{\frac{\Sigma(x_i-\overline{x})^2}{n-1}}x_i为单次测量结果，\overline{x}为平均值，n为测量次数，\Sigma表示求和。
不确定度的计算公式为：U = k \times sU为不确定度，k为覆盖因子，可以参考标准不确定度表格进行选择。
五、结论通过实验测定了食品中的菌落总数，并对测量结果进行了不确定度分析。
根据实验结果，可以评估食品中的微生物污染程度，为食品安全和卫生提供科学依据。
测定结果的不确定度分析可以评价测量结果的可靠性，并为后续食品质量控制提供参考。
食品中菌落总数的测定
任务四 平板制备
选择适宜的稀释样液根据对标本情况的估计,选择 3个 适宜稀释度,吸取该稀释度1mL稀释液于空平皿内。
待培养基冷却至46℃左右，以无菌操作倒入无菌培养 皿中。每个平皿倒入约15-20mL培养基，并转动平皿使其 混合均匀。放至水平面上自然冷却凝固，切勿随意晃动而 使培养基表面不平整影响涂布操作。
从样品稀释到平板 制备要求在15min 内 完成。
任务五、培养计数
待琼脂凝固后,倒置平板,置36±1℃温箱内培养48+2h。 平板取出,计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每
g(或mL)样品所含菌落总数。 菌落计数以平板内菌落形成单位（CFU）表示。
恒平 温板 培计 养数
食品中菌落总数的测定
检测依据
GB 4789.2-2010
任务一 仪器试剂准备
• 所用器具干净、烘干、灭菌，既不能存在活菌也不能存在 抑菌物质。
• 应注意无菌操作。
任务二 仪器试剂灭菌
玻璃器皿
----干热灭菌160-170℃ 1-2h
平皿可以用牛皮纸或 双层报纸包扎成捆， 或放入金属筒内再灭 菌。
在吸管粗头顶端约 0.5cm处，塞上一 小段棉花，后用45cm宽的报纸将其 包好。
内部框架 带盖外筒பைடு நூலகம்
电热恒温干燥箱
培养基、生理盐水-----湿热灭菌121 ℃ 15-30min
任务三 样品稀释制备
全过程遵循无菌操作程序
⑴检样处理 以无菌操作取经过充分摇 匀的检样25mL，放入含有225mL灭菌 生理盐水的灭菌广口瓶内做成1:10的均 匀稀释液。
⑵样品稀释 用1mL灭菌吸管,吸取1:10 稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭 菌生理盐水或其他稀释液的试管内（注 意吸管尖端不要触及管内稀释液),充分 振摇试管，使之混合均匀,制备成1:100 的稀释液。另取1mL灭菌吸管,按上项操 作顺序，作10倍递增稀释液,如此每递增 稀释一次,即换用1支1mL灭菌吸管。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析食品中菌落总数的测定是一种常见的微生物检验方法，用于评估食品的微生物质量和卫生状况。
本文将介绍食品中菌落总数的测定方法以及不确定度分析。
食品中菌落总数的测定方法有几种，例如平板计数法、液体培养法和膜过滤法等。
平板计数法是最常用的方法之一。
该方法的步骤如下：1.准备培养基：选择适当的培养基，如营养琼脂平板培养基或大肠杆菌培养基。
将培养基加热煮沸，使其溶解均匀，然后倒入培养皿中，待其凝固。
2.取样：将要检测的食品样品称取一定重量，加入无菌生理盐水中，然后进行均质处理。
3.制备稀释液：将均质后的食品样品逐渐按一定比例进行稀释，通常选择1:10、1:100的稀释倍数。
4.接种：取适量的稀释液用无菌吸管滴于培养皿上，静置几分钟使液体完全吸收后倒置培养皿，将其置于恒温培养箱中进行培养。
5.计数：在适当的培养时间后，观察培养皿上的菌落形成情况，并根据菌落的形态和数量进行计数。
通常在30-35°C下培养24-48小时。
菌落总数的测定结果通常以菌落单位（CFU/g或 CFU/mL）表示。
根据样品的稀释倍数和计数结果，可以计算出样品中的菌落总数。
不确定度是测量结果的一个重要指标，用于表示测量结果与"真实值"之间的差异。
对于食品中菌落总数的测定，不确定度分析可以帮助确定测量结果的可靠性，并提供测量的可信度。
不确定度的计算通常包括两个方面：随机不确定度和系统不确定度。
随机不确定度是由于随机误差引起的，可以通过重复测量来评估。
系统不确定度是由于系统误差引起的，可以通过校准和其他适当的控制措施来评估。
在食品中菌落总数的测定中，随机不确定度可以通过进行多次独立实验来进行评估。
根据实验数据的离散程度和统计分析方法，可以计算得到菌落总数的随机不确定度。
系统不确定度可以通过进行校准和质量控制措施来评估。
使用已知浓度的菌液进行校准，或在实验中添加附加的质控样品来进行验证。
食品菌落总数检测标准
食品菌落总数检测标准食品安全一直是人们关注的焦点，而食品中的菌落总数是评价食品卫生质量的重要指标之一。
菌落总数是指在一定条件下，菌落在寄主（通常是琼脂培养基）上生长并形成可见菌落的数量。
食品中的菌落总数一般反映了食品是否受到了污染，以及食品是否在生产、加工、储存和运输过程中得到了适当的处理和保护。
根据《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数的测定 GB 4789.2-2010》，食品中的菌落总数检测应该遵循以下步骤和标准：1. 样品的准备。
在进行菌落总数检测之前，首先需要准备好样品。
样品的准备应该符合相应的标准，避免样品受到二次污染或者样品本身就存在菌落过多的情况。
2. 菌落总数的测定方法。
菌落总数的测定方法一般采用平板计数法。
具体操作包括在琼脂培养基上平铺待测样品，然后在适当的温度下培养一定时间，再进行菌落的计数。
在进行菌落总数检测时，需要注意培养基的选择、温度的控制、培养时间等因素，以保证检测结果的准确性。
3. 结果的判定。
根据国家标准，食品中的菌落总数应该符合相应的标准要求。
一般来说，菌落总数超过一定的标准值就属于不合格。
对于不同类型的食品，其菌落总数的标准值也有所不同。
因此，在进行菌落总数检测时，需要参照相应的标准进行判定。
4. 结果的记录和报告。
检测结果应该及时记录并形成检测报告。
检测报告应包括样品的信息、检测方法、检测结果以及判定结果等内容。
检测报告应该保存一定的时间，并且在需要时能够提供给相关部门或者客户查阅。
总之，食品中的菌落总数检测是保障食品安全的重要环节，严格按照国家标准进行检测是确保食品质量的关键。
只有加强对食品菌落总数的检测，才能更好地保障人们的饮食安全，促进食品行业的健康发展。
食品中菌落总数的测定和不确定度分析
食品中菌落总数的测定和不确定度分析一、引言食品是人们日常生活中必不可少的营养来源，食品中的菌落总数是衡量食品安全和卫生质量的重要指标之一。
菌落总数是指在一定温度下，某一食品中可增殖的微生物数量。
准确地测定食品中的菌落总数对于评估食品的卫生安全性具有重要意义。
二、菌落总数的测定方法测定食品中的菌落总数通常采用菌落计数法。
菌落计数法是将一定体积的食品样品悬浮液平铺在含有富养分的琼脂培养基上，经过一定时间的培养，计算营养基上的菌落总数。
该方法的优点是操作简单、准确度高，能够鉴定不同菌种的存在以及确定其数量。
具体操作步骤如下：1. 准备琼脂平板培养基和试样。
2. 将试样加入适量的生理盐水中，均匀悬浮后称取一定体积的悬浮液。
3. 将悬浮液倒入琼脂平板上，快速回旋使样品均匀分布。
4. 等待琼脂培养基凝固后，将琼脂平板倒置在合适的温度下培养一定时间。
5. 将培养好的琼脂平板取出，利用菌落计数器计数。
三、不确定度的分析不确定度是对测量结果表示确定性程度的度量。
菌落总数的测定结果可能会受到多种因素的影响，如操作误差、样品不均匀性、环境条件等。
在进行菌落总数测定时需要对不确定度进行分析，以评估测定结果的可靠性。
菌落总数测定中的主要误差来源包括：1. 体积取样误差：由于液体量取操作的不准确性，导致取样体积与实际需要的体积有偏差。
2. 稀释误差：菌液的稀释过程中，由于混匀不均，导致样品中菌落总数的测定值与真实值存在一定误差。
3. 环境条件误差：培养环境的温度、湿度等因素可能会对微生物的生长产生影响，从而影响菌落总数的测定结果。
在测定菌落总数时，需要进行一系列的质量控制措施，如需要使用标准菌株进行培养，以评估菌落计数法的准确性和可重复性。
菌落总数测定的不确定度可以通过重复测定同一样品来评估。
在进行菌落计数时，可以选取多个琼脂平板进行测定，然后计算平均值和标准偏差。
标准偏差可以作为不确定度的一个估计值，表示测定值的离散程度，其数值越小说明数据的分散性越小，表示测定结果的可靠性越高。
食品中菌落总数的测定方法
食品中菌落总数的测定一、实验目的（1）学习与掌握测定食品中菌落总数的基本方法（2）学会菌落总数的报告方式二、实验材料1、仪器与设备:恒温培养箱、托盘天平、电炉、吸管、三角瓶、平皿、试管、试管架、酒精灯、灭菌刀或剪刀、75%酒精棉球、玻璃蜡笔。
2、培养基与试剂:75%乙醇、0、85%生理盐水、琼脂培养基:胰蛋白胨5、0g、酵母浸膏2、5g、葡萄糖1、0g、琼脂15、0g、蒸馏水1000mL、pH 7、0±0、23、检样:利乐包装鲜牛奶250ml三、实验方法与步骤1、检验程序菌落总数检验程序:检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个适宜稀释度各以1ml之量分别入灭菌平皿内→每皿内加入46℃15-20ml营养琼脂→置36±1℃恒温箱内培养(48±2)h取出→菌落数→报告2、检样稀释及培养(1)以无菌操作,将检样包装打开,用吸管取25ml鲜牛奶,放于含有225ml灭菌生理盐水的500ml灭菌玻璃三角瓶内(瓶内预先置适当数量的玻璃珠),经充分振摇做成1:10的均匀稀释液。
(2)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液,下同),振摇试管混合均匀,做成1:100的稀释液。
(3)另取1ml的灭菌吸管,按上项操作顺序作10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1ml灭菌吸管。
(4)根据食品卫生检验标准要求与检样的菌落数量,选择3个连续适宜稀释度即10、10－1、10－2,分别在作10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度作两个平皿。
(5)稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿15ml~20mL,并转动平皿使与稀释检样混合均匀,同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。
(6)等琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃恒温箱内培养(48±2)h取出,计算平板内菌落数目乘以倍数,即得1mL样品所含菌落总数。
食品中菌落总数测定
知识点：菌落总数测定情境：微生物检测技术任务：菌落总数测定课程：食品微生物技术菌落总数测定原理一、菌落总数什么叫菌落总数食品检样经过处理，在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后，所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
二、菌落总数测定原理 平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
菌落总数测定步骤1.液体样品稀释以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。
2.梯度稀释❞用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。
❞按上述操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。
每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。
四、倒平板❞根据对样品污染状况的估计，选择2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释时，吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。
同时，分别吸取1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
❞及时将15 mL～20 mL 冷却至46 ℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46℃±1 ℃恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
五、培养❞（1）待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养48 h±2 h。
水产品30℃±1℃培养72h±3 h。
❞（2）如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4mL），凝固后翻转平板36℃±1℃培养48 h±2 h。
食品中菌落总数的测定方法
食品微生物学检验菌落总数测定1范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。
本标准适于食品中菌落总数的测定方法。
2术语和定义菌落总数：指食品检样经过处理，在一定条件下培养后(如培基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等),所得1mL(g)检样中所含菌落的总数3设备和材料恒温培养箱：36±1℃30±1℃；冰箱：2～5℃；恒温水浴：46±1℃；天平：感量为0.1g；均质器；震荡器；无菌吸管1mL、10mL或微量移液器及吸头；无菌锥形瓶：250 mL；500 mL；无菌培养皿：直径90mm；pH计或pH比色管或精密pH试纸；放大镜、菌落计数器4培养基和试剂4.1平板计数琼脂培养基4.1.1成分4.1.2制法将上述成分加入到蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH。
分装试管和锥形瓶，121℃高压灭菌15min。
4.2磷酸盐缓冲液4.2.1成分4.2.2制法贮存液：称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中，用大约175mL的1mol/L 的氢氧化钠溶液调节pH，用蒸馏水稀释至1000mL后贮存于冰箱。
稀释液：取贮存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL，分装于适宜容器中，121℃高压灭菌15min。
4.3无菌生理盐水4.3.1成分4.3.2称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中，，121℃高压灭菌15min。
5检验程序菌落总数的检验程序如下：检样25g（或25mL）样品+225mL稀释液，均质↓10倍系列稀释↓选择2～3个适宜样品匀液，各取1mL分别加入无菌培养皿内↓每皿中加入15 ～20mL平板计数琼脂培养基，混匀↓培养36℃±1℃↓48 h±2 h计算各平板菌落数↓计算菌落总数↓报告6操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品：称取25g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8 000r/min～10 000r/min 均质1 min～2 min ，或放人盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min ，制成1：10 的样品匀液。
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食品中菌落总数的测定
一、实验目的
（1）学习和掌握测定食品中菌落总数的基本方法
（2）学会菌落总数的报告方式
二、实验材料
1、仪器与设备：恒温培养箱、托盘天平、电炉、吸管、三角瓶、平皿、试管、试管架、酒精灯、灭菌刀或剪刀、75%酒精棉球、玻璃蜡笔。
2、培养基和试剂：75%乙醇、0.85%生理盐水、琼脂培养基：胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、
琼脂15.0g、蒸馏水1000mL、pH 7.0±0.2
3、检样：利乐包装鲜牛奶250ml
三、实验方法与步骤
1、检验程序
菌落总数检验程序：
检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个适宜稀释度各以1ml之量分别入灭菌平皿内→每皿内加入46℃15-20ml营养琼脂→置36±1℃恒温箱内培养（48±2）h取出→菌落数→报告
2、检样稀释及培养
（1）以无菌操作，将检样包装打开，用吸管取25ml鲜牛奶，放于含有225ml灭菌生理盐水的500ml灭菌玻璃三角瓶内（瓶内预先置适当数量的玻璃珠），经充分振摇做成1：10的均匀稀释液。
（2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。
（3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。
（4）根据食品卫生检验标准要求和检样的菌落数量，选择3个连续适宜稀释度即10、10－1、10－2，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。
（5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿15ml~20mL，并转动平皿使与稀释检样混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。
（6）等琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃恒温箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1mL样品所含菌落总数。
四、检样中细菌菌落总数的计算与报告
1、菌落计算方法
（1）菌落计数方法
做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防遗漏。
在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
（2）菌落计数的报告
①平板菌落数的选择
选取菌落数在30～300 CFU之间的平板作为菌落总数测定标准。
一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，
②稀释度的选择
应选择平均菌落数在30～300 CFU之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之。
若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，按以下公式计算：
N = 样品中菌落数
ΣC = 含适宜范围CFU 的平板菌落数之和
n 1 = 第一稀释度（低稀释度）平板个数
n 2 = 第二稀释度（高稀释度）平板个数
d = 稀释因子（第一稀释度）
若所有稀释度的平均菌落数均大于300 CFU ，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之， 若所有稀释度的平均菌落数均小于30 CFU ，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告
若所有稀释度及样品原液均无菌落生长，则以小于l 乘以最低稀释倍数报告之，若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300 CFU 之间，其中一部分大于300 CFU 或小于30 CFU 时，则以最接近30 CFU 或300 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
③菌落数的报告
菌落数小于100 CFU 时，按“四舍五入”原则修约，以整数报告。
菌落数大于或等于100 CFU 时，第3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2 位数字，后面用0 代替位数；也可用10 的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。
若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。
若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。
称重取样以CFU/g 为单位报告，体积取样以CFU/mL 为单位报告。
3、实验结果与记录 10 10－1 10－2 报告数
1
2
稀释液对照皿
空白皿
判定所检测样品菌落总数是否符合国家标准
五、分析与讨论
稀
释 度
菌 落 数 皿 号。