泌尿外科解剖与生理

. 生化耐药
凋亡耐药 细胞动力学耐药
经 典 M D R
• MDR1的基因产物 MDR1的基因产物 • 一种细胞膜糖蛋白 • 称为P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp) 称为P 糖蛋白( P-gp) • 分子量为170KD(P170) 分子量为170KD(P170) 170KD(P170 • P-gp具有能量依赖性“药泵”功能 gp具有能量依赖性 药泵” 具有能量依赖性“ • 表达水平与耐药程度成正比
6.多药耐药基因 多药耐药基因MDR1是 HIF-1α的靶基 多药耐药基因 是 的靶基 因。
7.利用乏氧诱导肺腺癌细胞 表达 利用乏氧诱导肺腺癌细胞459表达 表达HIF-1α，发现 利用乏氧诱导肺腺癌细胞 ， p-gp和MRP随着 随着HIF-1α表达而增加，并且对表阿 表达而增加， 和 随着 表达而增加 霉素和顺铂的耐药性增强。 霉素和顺铂的耐药性增强。
因此肿瘤缺氧是肿瘤恶性进展的重要特征.肿 因此肿瘤缺氧是肿瘤恶性进展的重要特征 肿 瘤细胞可通过多种途径对缺氧进行适应性调 节. 缺氧诱导因子－ （ 缺氧诱导因子－1（Hypoxia inducible factor 1, HIF-1）是调节细胞缺氧反应的主要转录因 ） 子.
Till Acker ， et al. A role for hypoxia and hypoxiainducible transcription factors in tumor physiology。 J Mol Med , 2002, 80:562–575.
4. 发现 发现HIF-1α-/-组剂量反应曲线较 组剂量反应曲线较HIF组剂量反应曲线较 1α+/+组明显左移 组明显左移,IC50也显著减少 也显著减少. 组明显左移 也显著减少
5.对肿瘤细胞的研究发现 对肿瘤细胞的研究发现HIF-1α-/-肿瘤细 对肿瘤细胞的研究发现 肿瘤细 胞对放疗和化疗药物的敏感度都有所增加。 胞对放疗和化疗药物的敏感度都有所增加。
ห้องสมุดไป่ตู้ HIF-1α的表达调节因素 的表达调节因素
缺氧 癌基因激活 HER2 FRAP HRAS CSRC 抑癌基因失活 VHL PTEN p53 生长因子或细胞因子 IGR、Insulin、EGF、IL-1 、 、 、
二. 研 究 现 状 1. HIF-1α在肿瘤细胞中表达位于细胞核 在肿瘤细胞中表达位于细胞核 内. 2.HIF-1α在多种肿瘤中的表达 ,在肿瘤 在多种肿瘤中的表达 在肿瘤 附近正常组织中不能测及 . 3.在结肠癌、肺癌、乳腺癌及前列腺癌的 在结肠癌、肺癌、 在结肠癌 研究中发现， 研究中发现，HIF-1α蛋白表达随乳腺癌 蛋白表达随乳腺癌 恶性度升高而增加，且与浸润、淋巴结 恶性度升高而增加，且与浸润、 转移有关
8.国外的研究也发现，缺氧能导致p-gp和HIF-1α过 国外的研究也发现，缺氧能导致 国外的研究也发现 和 过 表达，从而产生对VP-16、博莱霉素和蒽环类耐药。 表达，从而产生对 、博莱霉素和蒽环类耐药。
9.国外对卵巢癌的研究已表明突变型 国外对卵巢癌的研究已表明突变型P53过表达会 国外对卵巢癌的研究已表明突变型 过表达会 引起HIF-1α表达升高 表达升高. 引起 表达升高
2. 研究内容
１对６０例新鲜胃癌标本进行细胞纯化， ６０例新鲜胃癌标本进行细胞纯化， 例新鲜胃癌标本进行细胞纯化 短期原代培养，应用流式细胞技术和MTT 短期原代培养，应用流式细胞技术和 法检测其对常用化疗药物的敏感性． 法检测其对常用化疗药物的敏感性．
２应用免疫组化技术检测60例胃癌石蜡标 应用免疫组化技术检测 例胃癌石蜡标 蛋白表达， 本P53、P-gp、HIF-1α蛋白表达，并收集 、 、 蛋白表达 临床病理资料。 临床病理资料。
2. HIF-1α结构功能代谢及其靶基因 HIF-1α结构功能代谢及其靶基因
缺氧诱导因子－1（Hypoxia inducible 缺氧诱导因子－ factor 1, HIF-1） HIFHIFHIF-1α 活性调节亚单位 HIFHIF-1β 可能与稳定HIF-1及二聚化有关 可能与稳定HIF-
缺 氧 诱 导 因 子 1 α 1 α － 的 代 谢
待解决问题
目前关于HIF-1α与胃癌生物行为及多药耐 与胃癌生物行为及多药耐 目前关于 药机制关系的研究报道甚少。 药机制关系的研究报道甚少。
目前对于HIF-1α与ＭＤＲ的研究多用基 与ＭＤＲ的研究多用基 目前对于 因转染方法， 因转染方法，应用原代胃癌体外细胞药 物敏感性进行研究的报道甚少． 物敏感性进行研究的报道甚少．
泌尿系统解剖与生理
广西中医学院第一附属医院泌尿外科 黄 新
泌尿系统的解剖 肾上腺 肾 输尿管 膀胱 尿道 前列腺 阴囊内容物
肾上腺的解剖
一、肾上腺的解剖
肾上腺（ 肾上腺（suprarenal gland）位于腹膜后隙，肾 ）位于腹膜后隙， 脏的上方, 脏的 左侧为半月形，右侧似三角形。 左侧为半月形，右侧似三角形。肾上腺的动脉 有三支： 膈下动脉－－ －－肾上腺上动脉 有三支： 膈下动脉－－肾上腺上动脉 腹主动脉－－ －－肾上腺中动脉 腹主动脉－－肾上腺中动脉 肾动脉－－ －－肾上腺下动脉 肾动脉－－肾上腺下动脉
胃癌手术标本
HIF-1αRT-PCR 免疫组化
细胞分离、 细胞分离、短期培养
HIF-1α、p-gp 、 、 P53 免疫组化
化疗药诱 导胃癌细 胞凋亡后 形态学改 变
ＭＴＴ及流 ＭＴＴ及流 式技术检测 化疗药物体 外敏感性
对结果进行统计 分析
五. 本课题的特点 从细胞缺氧角度探讨HIF-1α蛋白表达与 蛋白表达与 从细胞缺氧角度探讨 p-gp表达的相关性，探讨其与胃癌细胞 表达的相关性， 表达的相关性 多药耐药的关系。国外有类似研究， 多药耐药的关系。国外有类似研究，国 内未见报道
左肾上腺静脉－ 左肾上腺静脉－左肾静脉 右肾上腺静脉－ 右肾上腺静脉－下腔静脉 少数汇入右膈下静脉右肾静脉
二、肾上腺的生理
肾上腺皮质由外向内可分为３层即球状带、束状带和网状带。 肾上腺皮质由外向内可分为３层即球状带、束状带和网状带。 由外向内可分为 球状带主要分泌醛固酮 又称为盐皮质激素， 主要分泌醛固酮， 球状带主要分泌醛固酮，又称为盐皮质激素，其主要功能是促 进肾脏对钠离子的主动重吸收和对钾离子的排泄， 进肾脏对钠离子的主动重吸收和对钾离子的排泄，维持体内水 的恒定，增加组织液和血量，这对生命至关重要。 的恒定，增加组织液和血量，这对生命至关重要。 束状带及网状带分泌糖皮质激素 主要为皮质醇。 分泌糖皮质激素， 束状带及网状带分泌糖皮质激素，主要为皮质醇。皮质醇主要 作用是促进糖异生和升高血糖。促使蛋白质分解，使脂肪组织 作用是促进糖异生和升高血糖。促使蛋白质分解， 中脂肪分解并在体内重新分布。 中脂肪分解并在体内重新分布。皮质醇在机体处于应激状态时 可提高其耐受能力。 可提高其耐受能力。皮质醇还具有抗炎抗过敏和抑制免疫功能 的作用。 的作用。 肾上腺髓质由嗜铬细胞构成 主要分泌肾上腺素， 由嗜铬细胞构成， 肾上腺髓质由嗜铬细胞构成，主要分泌肾上腺素，也可分泌少 量去甲肾上腺素。肾上腺素和去甲肾上腺素对心血管、内脏平 量去甲肾上腺素。肾上腺素和去甲肾上腺素对心血管、 滑肌的活动有调节作用。肾上腺髓质是人体极重要的内分泌腺， 滑肌的活动有调节作用。肾上腺髓质是人体极重要的内分泌腺， 髓质分泌功能障碍将引起人体失去有效的应急能力
3 HIF-1α肿瘤中表达及与生物行为关系 肿瘤中表达及与生物行为关系
4 HIF-1α与化疗耐药的关系 与化疗耐药的关系 5 p53基因与 基因与HIF-1α表达的关系 基因与 表达的关系
1 胃癌化疗及多药耐药研究概况 胃癌是常见的消化道恶性肿瘤， 胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，化疗仍是治 疗中晚期胃癌的主要手段， 疗中晚期胃癌的主要手段，但由于肿瘤的多 药耐药（ ），化疗的效果并不理想 药耐药（MDR），化疗的效果并不理想。 ），化疗的效果并不理想。 目前认为mdr-1基因与 基因与MDR有关，其编码 有关， 目前认为 基因与 有关 其编码p糖蛋白(p-gp)，能把结构功能不同的药物泵 糖蛋白 ， 出细胞外而降低药物浓度, 出细胞外而降低药物浓度 从而引发肿瘤耐 但是对于癌症中p-gp过表达的调节机制 药．但是对于癌症中 过表达的调节机制 目前尚不清楚。 目前尚不清楚。
膀胱的血供
膀胱上动脉
髂内动脉前干
膀胱上中部 髂内静脉
膀胱下动脉
膀胱下部
前列腺的位置
阴 囊 的 层 次
肾上腺的解剖
1. 选题背景
2.研究现状 研究现状
3.研究目标 研究目标 和研究内容
4. 技术路线
5. 本课题特 点
6. 部分预实 验结果
7. 实验进展 安排
1 胃癌化疗及多药耐药研究概况 2 HIF-1α结构功能及其靶基因 HIF-1α结构功能及其靶基因
肾血管与肾段
肾静脉
肾的被膜
肾的被膜有三层： 肾的被膜有三层：由外向内依次为肾 筋膜、脂肪囊和纤维囊。 筋膜、脂肪囊和纤维囊。
肾的被膜（纵面观）
输尿管的解剖
输尿管(ureters)：全长25－30cm。可 ：全长 － 输尿管 。 分三部： 分三部： 腹部（腰段）， ），从肾盂与输尿管交 ⑴腹部（腰段），从肾盂与输尿管交 界处至跨越髂血管处； 界处至跨越髂血管处； 盆部（盆段）， ），从跨越髂血管处至 ⑵盆部（盆段），从跨越髂血管处至 膀胱壁； 膀胱壁； 壁内部（膀胱壁段）， ），斜行穿膀胱 ⑶壁内部（膀胱壁段），斜行穿膀胱 壁。
三.研究目标和研究内容
1. 研究目标 研究HIF-1α蛋白表达与 蛋白表达与p-gp表达的相关 研究 蛋白表达与 表达的相关 探讨其与胃癌细胞多药耐药的关系。 性，探讨其与胃癌细胞多药耐药的关系。
探讨HIF-1α表达与胃癌生物学行为的关 表达与胃癌生物学行为的关 探讨 系. 探讨HIF-1α蛋白表达与突变 蛋白表达与突变P53过表达的 探讨 蛋白表达与突变 过表达的 相关性 .