1504-siRNA对表达EphA3的肿瘤细胞HGC27的抑制作用
siRNA沉默PLK1基因对骨肉瘤细胞生物学特性影响
siRNA沉默PLK1基因对骨肉瘤细胞生物学特性影响骨肉瘤是一种恶性骨肿瘤，最常见于青少年和成年人。
治疗骨肉瘤的主要方法包括手术切除、放疗和化疗，然而目前针对骨肉瘤的治疗效果并不理想。
寻找新的治疗策略是非常迫切的。
siRNA是一种小分子RNA，可以通过特异性沉默靶基因的表达，因此被广泛应用于疾病治疗和研究中。
PLK1是一种重要的细胞周期调控蛋白，已被证实在多种癌症中过度表达，包括骨肉瘤。
本文将讨论siRNA沉默PLK1基因对骨肉瘤细胞生物学特性的影响。
PLK1（Polo-like kinase 1）是一种重要的细胞周期调控蛋白，在有丝分裂期间起到关键作用。
PLK1在肿瘤细胞中的高表达与肿瘤的增殖、侵袭和抗药性密切相关。
PLK1被认为是肿瘤治疗的一个重要靶点。
siRNA是一种干扰RNA，通过靶向特定基因的mRNA，从而抑制该基因的表达。
siRNA技术被广泛应用于基因沉默和疾病治疗研究中。
目前已有研究表明，siRNA沉默PLK1基因可以抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭，促进细胞凋亡，有望成为肿瘤治疗的新策略。
骨肉瘤是一种常见的骨骼恶性肿瘤，起源于原始骨组织中的成骨细胞、软骨细胞或纤维母细胞等，具有高度侵袭性和转移能力。
目前治疗骨肉瘤的主要方法是手术切除、放疗和化疗，然而这些治疗方法存在局限性，如手术切除后容易复发、放疗和化疗对正常组织细胞毒性较大等。
寻找新的治疗策略对骨肉瘤的治疗至关重要。
siRNA沉默PLK1基因对骨肉瘤细胞生物学特性的影响备受关注。
研究发现，siRNA沉默PLK1基因可以显著抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭能力，促进细胞凋亡。
实验结果显示，siRNA沉默PLK1基因能够显著抑制骨肉瘤细胞的增殖能力，降低细胞的侵袭能力。
siRNA 沉默PLK1基因还能够促进骨肉瘤细胞的凋亡，提高细胞的敏感性，降低细胞的抗药性。
siRNA沉默PLK1基因对骨肉瘤的治疗具有潜在的应用价值。
siRNA沉默PLK1基因对骨肉瘤细胞生物学特性的影响机制主要包括以下几个方面：第一，siRNA沉默PLK1基因可以抑制细胞周期的进程。
siRNA靶向干扰APE1基因对脑胶质瘤细胞增殖凋亡及放疗敏感性的影响
ｕ Ｃ ｃ Ａ ｕ Ｇ Ａ Ｃ Ａ ｃ ３。与 转 染 前 １ Ａ Ｕ Ｃ Ｇ Ｃ ｕ ｃ ＡＧ Ｃ Ｕ－ ｄ
将 处于对 数 生 长 期 的 Ｕ ５ ２ １细 胞 以 ５ｍＬ ￣ 接 种 于 ／Ｌ
６孔 被 样 板 上 ， 孑设 ４个 复 孔 ， 严 格 按 照 Ｌｐ— 每 Ｌ 并 ｉｏ
脑 胶质 瘤是 最 常 见 的 恶性 中枢 神 经 系 统 肿 瘤 ， 因其恶 性程 度较 高 ， 论 外 科 治 疗 、 疗 、 疗 及 免 无 化 放
疫 治疗 ， 果 均不 理 想 ¨ 。近 几 年 ， 效 由于 对 Ｄ Ａ损 Ｎ
Ａ Ｅ Ｒ Ａ质 粒 ） Ｐ １ｉ Ｎ ｓ 。
１２２ ｓ Ｎ ．． ｉ Ａ的转 染与 筛选 Ｒ
山东 医药 ２ １ ０２年第 ５ ２卷第 ２ ４期
ｓ Ｎ ｉ Ａ靶 向干 扰 Ａ Ｅ Ｒ Ｐ １基 因对 脑 胶 质瘤 细胞 增 殖 凋 亡 及 放 疗 敏感 性 的影 响
李 光 雷 ， 建武 ’ 邱
（ 宁 医学院 附属 第一 医院 ， 宁锦 州 １ １０ ） 辽 辽 ２ ０ １
摘要： 目的 观察小干扰 Ｒ Ａ（ｉＮ 干扰脱嘌呤／ 嘧啶核酸 内切酶 （ Ｐ １ 基 因表达对 脑胶质瘤 细胞增殖 Ｎ ｓ Ａ） Ｒ 脱 ＡＥ） 与凋亡及其对放射治疗敏感性 的影响 。方 法 将 含有 Ａ Ｅ Ｒ Ａ的表达质粒分别稳定转染人脑胶质瘤 细胞 Ｕ ５ Ｐ １ｉ Ｎ ｓ ２１ 细胞系和 Ｕ ７细胞系 ， 用 Ｇ １ 选 阳性 克隆 ， ８ 并 ４ ８筛 应用 Ｗｅｔ ｎｂ ｔ ｓ ｒ ｌ 杂交 检测 Ａ Ｅ ｅ ｏ Ｐ １的表达变 化 ， Ｔ Ｍ Ｙ法及 Ａ ／ Ｂ ＯＥ 染 色观察脑 胶质瘤细胞的增殖与凋亡情况 ， 给予不 同放射 剂量照 射后应 用 ＭＩ１ ｒ 法绘 制细胞存 活 曲线。结果 转 ’ Ｉ
siRNA用于肿瘤抑制的生物学原理
2006年度诺贝尔生理学或医学奖
RNA干扰机制—双链RNA沉默基因
安德鲁·法尔
克雷格·梅洛
siRNA(short interfering RNA) 即小分子干扰RNA
是由RNase家族中的Dicer核酸内切酶在细胞中剪切自然存在的dsRNA过 程中产生的，它是RNA干涉的关键调控因子，其为21～23nt的双链RNA， 该双链的3’端有2个突的碱基，此结构对基因沉默效应十分关键，5’端则具 有磷酸基。 siRNA具有稳定、持久、安全、特异性，作用强大等特点．通过制备特 定的siRNA导人生物体内可以有目的地抑制靶基因的表达． 现已逐渐应用于医疗、预防等领域，尤其是siRNA对恶性肿瘤的作用已 成为当今的研究热点。且可以针对多个基因或基因族的共有序列来抑制多 个基因的表达!从而能更有效地抑制肿瘤生长。
siRNA技术作为一项即将应用于临床的新技术 仍存在许多问题：
一是siRNA技术具有高度特异性，即使是单个碱基错配也会使RNAi效率 降低； 二是并非所有的基因均可作为siRNA干扰的目标序列，非编码区的RNA 是否对RNAi敏感还有待研究； 三是如何将siRNA安全、有效地导入细胞并在其内稳定表达，尚需大量的 试验为临床应用铺平道路； 四是siRNA在动物试验中能否特异地靶向癌组织中过度表达的蛋白基因， 而不影响正常表达的同一基因； 五是由于肿瘤是多基因疾病，siRNA能否靶向多个基因而又不相互干扰； 六是siRNA对肝癌基因的封闭不完全的提高封闭率也是有待研究的； 七是在肿瘤这种多基因疾病中，虽然已经发现了部分癌基因，但这还远 远不够，发现、寻找其他的癌基因和抑制基因是一项重要工程．
化学治疗：将药物经血管带到全身，对身体所有细胞都有影 响。毒副作用强
siRNA 抑制人肝癌细胞 MDM2表达及细胞增殖的研究
siRNA 抑制人肝癌细胞 MDM2表达及细胞增殖的研究赵燕颖;李亚刚;杨泽成;张舵舵;赵春燕【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2012(000)010【摘要】目的探讨siRNA 对人肝癌 HepG2细胞 MDM2基因表达的抑制作用及对增殖的影响.方法体外合成针对MDM2基因的siRNA 质粒,转染HepG2细胞株；应用 RT-PCR 和 westernblot方法检测siRNA 对 MDM2和P53基因和蛋白表达的影响,并用 MTT 法检测siRNA 对细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期.结果和空白组比转染siMDM2-1,2的 HepG2细胞的 MDM2基因和蛋白表达减低,而 P53基因和蛋白表达增加.阴性对照质粒组的基因表达未见明显改变.转染siRNA MDM2后细胞生长受到抑制,转染siMDM2-1,2和阴性对照质粒后的抑制率分别是46.3%、56.1%和3%.和对照组比较,转染siMDM2-1,2的 hepG2细胞的细胞周期发生明显改变,而转染对照质粒的hepG 细胞周期未发生明显变化.结论 siRNA MDM2可以有效抑制 HepG2细胞株中 MDM2的表达,促进 P53的表达,同时可以使细胞周期发生变化,这可能是其抑制肿瘤细胞增殖的主要机制之一.【总页数】4页(P1790-1793)【作者】赵燕颖;李亚刚;杨泽成;张舵舵;赵春燕【作者单位】吉林大学第四临床医院内科,吉林长春130011; 吉林大学白求恩医学院生理学系,吉林长春130021;吉林大学第四临床医院内科,吉林长春130011;吉林大学中日联谊医院普外科,吉林长春130033;吉林大学中日联谊医院普外科,吉林长春130033;吉林大学白求恩医学院生理学系,吉林长春130021【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.siRNA抑制人胶质瘤细胞MDM2的表达及细胞增殖 [J], 张舵舵;赵燕颖;张妍;刘玲;高振平2.siRNA对骨肉瘤细胞MDM2的表达及细胞增殖的抑制作用 [J], 吕佳音;吴丹凯;徐春华;张舵舵;吴丹华;高忠礼;赵燕颖3.siRNA干扰MDM2基因对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响 [J], 刘莉;丁浩;马果果;邓璐林;张吉翔4.siRNA抑制人卵巢癌SKOV-3细胞MDM2的表达及细胞增殖的研究 [J], 王莹;贾志勇;赵燕颖5.siRNA抑制人前列腺癌细胞PC3的MDM2表达及细胞增殖 [J], 李然伟;赵燕颖;杨泽城;张舵舵;吕佳音;刘喜春因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
P27在妇科恶性肿瘤中的研究进展
P27在妇科恶性肿瘤中的研究进展
姜艳艳;李英勇
【期刊名称】《国际妇产科学杂志》
【年(卷),期】2008(35)1
【摘要】P27蛋白是一种细胞周期蛋白激酶抑制因子,通过抑制cyclin-CDK复合物活性对细胞周期进行负性调节,使细胞周期停滞在G1期.其表达异常与肿瘤的发生发展及预后有关.妇科恶性肿瘤中普遍存在P27蛋白表达减少,但与疾病的关系却不完全相同.子宫内膜癌P27蛋白表达减少与发病机制有关,但与临床、病理、预后等指标无统计学关联.卵巢癌P27蛋白表达异常不仅与疾病发生发展有关,而且是独立的预后因素.P27蛋白的胞质定位提示卵巢癌预后不良,此外,P27蛋白还参与某些药物的肿瘤抑制作用.宫颈癌P27蛋白表达模式与卵巢癌类似,随疾病恶性程度增加P27蛋白表达逐渐减少.
【总页数】4页(P21-24)
【作者】姜艳艳;李英勇
【作者单位】广东医学院附属医院,524011;广东医学院附属医院,524011
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.细胞周期调节蛋白Skp2,p27在妇科恶性肿瘤中的研究进展 [J], 徐静
2.Skp2、p27在妇科恶性肿瘤中研究进展 [J], 王金华;郑秀;江忠清
3.HSP27在肿瘤中的研究进展 [J], 卢晓梅; 张潇
4.磷酸化HSP27在恶性肿瘤中的研究进展 [J], 毕珊;罗浩丹
5.磷酸化HSP27在恶性肿瘤中的研究进展 [J], 毕珊;罗浩丹(综述);陈绍春;李国萍(审校)
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211108286_大黄酸诱导胃癌细胞ＨＧＣ-２７凋亡的作用及其机制
大黄酸诱导胃癌细胞ＨＧＣ ２７凋亡的作用及其机制陈懿婷＋，褚智恒＋，傅瑾雯，陶嘉颖，陈佳玉△（绍兴文理学院医学院，浙江绍兴３１２０００）【摘要】 目的：探讨大黄酸对胃癌细胞ＨＧＣ ２７增殖和凋亡的影响及其作用机制。
方法：终浓度为０、５、１０和２０ｍｇ／Ｌ的大黄酸在体外分别作用于胃癌ＨＧＣ ２７细胞０、２４、４８、７２ｈ，每组各设３复孔，使用ＣＣＫ ８法检测细胞的增殖活力，同时将细胞置于小高内涵显微镜下观察其生长状态，细胞经ｈｏｅｃｈｓｔ染色观察其核型变化，ＪＣ １染色结合流式细胞术分析线粒体膜电位改变，使用流式细胞仪检测细胞周期，ＲＴ ｑＰＣＲ法分析基因的逆转录水平，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析蛋白表达的改变。
结果：与浓度为０ｍｇ／Ｌ大黄酸处理的ＨＧＣ ２７细胞对比，５、１０和２０ｍｇ／Ｌ浓度的大黄酸作用于ＨＧＣ ２７细胞２４ｈ后，细胞线粒体膜电位下降（Ｐ＜０．０１），细胞增殖活力受到抑制，并诱导其凋亡，作用效果随大黄酸浓度增加和作用时间延长而增强，而细胞周期无显著变化，细胞内ｂｃｌ ２、ｊａｋ１、ｊａｋ２、ｓｔａｔ３和ｎｏｔｃｈ基因的表达下调，ｂａｘ、ｃａｓｐａｓｅ ３基因的表达水平明显升高（Ｐ＜０．０１）。
结论：大黄酸可通过调节ＮＯＴＣＨ／ＪＡＫ／ＳＴＡＴ信号通路来诱导胃癌细胞ＨＧＣ ２７凋亡，具有抗胃癌的效应。
【关键词】 胃癌；大黄酸；信号通路；线粒体膜电位；细胞凋亡；细胞培养【中图分类号】Ｒ７３３．４，Ｒ７３０．２３ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１０００ ６８３４（２０２２）０５ ５８４ ００６【ＤＯＩ】１０．１２０４７／ｊ．ｃｊａｐ．６３２０．２０２２．１０８ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｒｈｅｉｎｏｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓＨＧＣ ２７ａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｓＣＨＥＮＹｉ ｔｉｎｇ＋，ＣＨＵＺｈｉ ｈｅｎｇ＋，ＦＵＪｉｎ ｗｅｎ，ＴＡＯＪｉａ ｙｉｎｇ，ＣＨＥＮＪｉａ ｙｕ△（ＳｈａｏｘｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｏｘｉｎｇ３１２０００，Ｃｈｉｎａ）【ＡＢＳＴＲＡＣＴ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒｈｅｉｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅＨＧＣ ２７ａｎｄｉｔｓｒｅｌａｔｅｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＨｕｍａｎｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓＨＧＣ ２７ｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ０，５，１０ｏｒ２０ｍｇ／Ｌｒｈｅｉｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｆｏｒ２４，４８ａｎｄ７２ｈｉｎｖｉｔｒｏ，ｔｈｒｅｅｄｕｐｌｉｃａｔｅｗｅｌｌｓｗｅｒｅｓｅｔｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．ＴｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＨＧＣ ２７ｃｅｌｌｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈＣＣＫ ８ｍｅｔｈｏｄ，ｔｈｅｇｒｏｗｔｈｓｔａｔｕｓｏｆＨＧＣ ２７ｃｅｌｌｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｓｍａｌｌｈｉｇｈ ｃｏｎｔｅｎｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ，ｈｏｅｃｈｓｔｓｔａｉｎｉｎｇｗａｓｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｋａｒｙｏｔｙｐｅｏｆＨＧＣ ２７ｃｅｌｌｓ．ＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＪＣ １ｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ｃｅｌｌｃｙｃｌｅｗａｓａｎａ ｌｙｚｅｄｗｉｔｈｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ｔｈｅｌｅｖｅｌｓｏｆｍＲＮＡｔｒａｎｓｃｒｉｂｉｎｇｏｆｂｃｌ ２，ｂａｘ，ｃａｓｐａｓｅ ３，ｊａｋ１，ｊａｋ２，ｓｔａｔ３ａｎｄｎｏｔｃｈｇｅｎｅｓｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａ ｔｅｄｗｉｔｈＲＴ ｑＰＣＲｍｅｔｈｏｄ．ＰｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＨＧＣ ２７ｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ０ｍｇ／Ｌｒｈｅｉｎ，ＨＧＣ ２７ｃｅｌｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ５，１０ａｎｄ２０ｍｇ／Ｌｒｈｅｉｎｆｏｒ２４ｈｓｈｏｗｅｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅｐｏｔｅｎｔｉａｌ（Ｐ＜０．０１），ｔｈｅｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｉｎｈｉｂｉｔｅｄａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｗａｓｉｎｄｕｃｅｄ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｗｅｒｅｅｎｈａｎｃｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｒｈｅｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｅｘｔｅｎｓｉｏｎｏｆｔｒｅａｔｍｅｎｔｔｉｍｅ，ｂｕｔｔｈｅｃｅｌｌｃｙｃｌｅｄｉｄｎｏｔｃｈａｎｇｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ，ａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｂｃｌ ２，ｊａｋ１，ｊａｋ２，ｓｔａｔ３ａｎｄｎｏｔｃｈｇｅｎｅｓｗｅｒｅｄｏｗｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｄ．Ｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｂａｘａｎｄｃａｓｐａｓｅ ３ｇｅｎｅｓｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＲｈｅｉｎｃａｎｉｎｄｕｃｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＨＧＣ ２７ｃｅｌｌｓｂｙｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇＮＯＴＣＨ／ＪＡＫ／ＳＴＡＴｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ，ａｎｄｈａｓａｎｔｉ ｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｅｆｆｅｃｔ．【ＫＥＹＷＯＲＤＳ】 ｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒ； Ｒｈｅｉｎ； ｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ； ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅｐｏｔｅｎｔｉａｌ； ｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ； ｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅ 【基金项目】国家大学生创新创业训练计划项目（２０２０１０３４９０３８）【收稿日期】２０２２ ０５ １２【修回日期】２０２２ ０９ ２８ △【通讯作者】Ｔｅｌ：０５７５ ８８３４５８２６；Ｅ ｍａｉｌ：ｃｈｅｎｙｕｊｉａ１０＠１６３．ｃｏｍ＋：为共同第一作者 胃癌是世界范围内常见的恶性肿瘤，当前全球胃癌发病率位于第５位，死亡率居于第４位［１］。
榄香烯脂质体对人胃癌细胞HGC-27的体内外作用的初步研究
945榄香烯脂质体对人胃癌细胞HGC-27的体内外作用的初步研究顾喜喜，锁 涛，蔡定芳复旦大学附属中山医院中西医结合科，上海 200032 ［摘要］ 背景与目的：近年来，许多研究表明榄香烯脂质体在临床治疗消化道肿瘤及其恶性胸腹水中应用广泛。
本研究结合体内和体外实验旨在观察榄香烯脂质体对人胃癌细胞HGC-27生长的抑制作用。
方法：在体外实验中，应用机器视觉-全自动活细胞观测分析系统(Cell-IQ)对不同浓度下的榄香烯脂质体进行观测，以筛选出对人胃癌HGC-27细胞产生抑制作用的最佳浓度，并通过流式细胞术分析在最佳浓度下，榄香烯脂质体对人胃癌细胞HGC-27凋亡的影响。
在胃癌腹膜转移的裸鼠模型中，观察榄香烯脂质体、顺铂(cisplatin，DDP)等药物对裸鼠腹膜肿瘤指数(peritoneal cancer index，PCI)的影响，并用免疫组化检测CD31标记的肿瘤微血管密度(microvessel density，MVD)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)在肿瘤中的表达，以期对榄香烯脂质体抑制胃癌HGC-27细胞腹膜转移的机制进行探讨。
结果：榄香烯脂质体作用于人胃癌细胞HGC-27后，Cell-IQ分析抑制作用随浓度增加，逐渐增强，以100 µg/mL为最佳，榄香烯脂质体浓度再增高，其抑制肿瘤作用不再增强。
最佳作用时间为4~19 h。
应用流式细胞术检测，100 µg/mL榄香烯脂质体作用于人胃癌HGC-27细胞24 h后，肿瘤细胞凋亡率为45%，对照组仅有0.019%。
处理组的细胞凋亡率明显高于对照组。
人胃癌腹膜转移裸鼠模型建立后给予榄香烯脂质体等药物干预，腹膜转移瘤PCI指数有明显差异，其中以联合治疗组下降明显，免疫组化检测发现CD31-MVD及VEGF蛋白表达与对照组差异无统计学意义(P >0.05)。
RNA干扰maspin基因对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响的开题报告
RNA干扰maspin基因对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响的开题报告1. 研究背景胃癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一，早期诊断和治疗对于胃癌患者生存率的提高具有重要意义。
抑癌基因maspin在许多人类癌变过程中被认为是一种重要的调节基因，并且可以通过多种途径诱导肿瘤细胞凋亡。
因此，研究maspin的作用机制可能有助于深入了解胃癌的癌变过程，进而为胃癌的治疗提供新的思路。
RNA干扰技术是一种新型的基因沉默技术，可以通过低浓度的小分子RNA靶向降解特定的mRNA，从而实现对特定基因的靶向沉默。
因此，本研究旨在通过RNA干扰技术探究maspin在胃癌细胞株MKN-28中的作用机制及其对细胞凋亡的影响。
2. 研究目的（1）构建maspin RNA干扰载体，转染到MKN-28细胞中，验证RNA干扰的有效性。
（2）比较maspin RNA干扰组与对照组胃癌细胞株MKN-28的细胞形态、增殖情况，并检测其凋亡情况，进一步研究maspin在胃癌细胞中的作用机制以及是否能够诱导胃癌细胞凋亡。
（3）通过Western blot和RT-PCR等技术检测细胞中关键凋亡相关蛋白和基因的表达情况，研究maspin对胃癌细胞凋亡通路的影响。
3. 研究方法（1）构建maspin RNA干扰载体，包装成质粒转染至MKN-28细胞。
（2）比较maspin RNA干扰组与对照组胃癌细胞株MKN-28的细胞形态、增殖情况，检测其凋亡情况，通过流式细胞术定量检测细胞周期、细胞凋亡率等。
（3）检测细胞中与凋亡相关的基因和蛋白的表达情况，包括Bcl-2、Bax、p53、Caspase-3等，通过Western blot和RT-PCR等技术进行检测。
4. 预期结果预计RNA干扰maspin基因可显著抑制胃癌细胞MKN-28的增殖，同时诱导其凋亡，与对照组相比差异具有统计学意义；同时，RNA干扰maspin基因可通过对凋亡相关蛋白和基因的表达影响，介导细胞凋亡通路。
siRNA抑制Caspase-3表达对内毒素诱导肝细胞凋亡的影响
Ｃ ａ ｓ ｐ ｓｅ ａ － ３表达能有效 降低 内毒素诱导 的 Ｈ Ｌ ７ ７ ０ ２细胞凋亡 ， 从 而增强 细胞 增殖活性 。
关键 词 ： 小干扰 Ｒ Ｎ Ａ； 半胱氨 酸蛋 白酶 ３ ； 内毒素 ； 肝细胞 ； 细胞凋亡 ； 细胞增殖
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ２ — ２ ６ ６ Ｘ ． ２ ０ １ ７ ． ３ ４ ． ０ ０ ３
山东医药 ２ ０ １ ７年第 ５ ７ 卷箜 塑
ｓ ｉ Ｒ Ｎ Ａ抑 制 Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ 一 ３表 达 对 内毒 素 诱 导 肝 细 胞 凋 亡 的影 响
王雪银 ， 宋献美， 马 云云
（ 河 南 医学 高等专科 学校 ， 郑州４ ５ １ １ ９ １ ）
摘要 ： 目的
观察利用小 干扰 Ｒ Ｎ Ａ（ ｓ ｉ Ｒ Ｎ Ａ） 抑制 Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ 一 ３表 达对 内毒 素诱 导肝细胞 凋亡 的影 响 。方法 针
ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｓ ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ｂ ｙ ｅ ｎ ｄ ｏ ｔ ｏ ｘ ｉ ｎ
ＷＡＮＧ Ｘｕ ｅ ｙ ｉ ｎ。Ｓ ＯＮ Ｇ Ｘｉ ａ ｎ ｍｅ ，ＭＡ Ｙ ｕ ｎ ｙ ｕ ｎ
（ Ｈ ｅ ｎ ａ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｚ ｈ ｅ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ４ ５ １ １ ９ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
对Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ － ３的 Ｄ Ｎ Ａ序列 ８ ４ ３—１ ６ ３ ４ ｂ ｐ设计引物 ， 常规分 子克隆至慢病毒表达载体 ｐ Ｌ ｅ ｎ ｔ ｉ － ７ ． １ ， 同时设置空载体为
阴性对照 ； 利用 Ｌ ｉ ｐ ｏ ｆ ｅ ｅ ｔ ａ ｍ ｉ ｎ ｅ ２ ０ ０ ０转染至 ２ ９ ３ Ｔ细胞 ， ４ ８ ｈ 后 收获抑 制 Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ 一 ３表达病毒质粒 Ｖ・ Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ 一 ３和空载 体病毒质粒 Ｖ — ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ 。将肝细胞 ＨＬ ７ ７ ０ ２随机分 为观察 组和对照组 ， 分别加入 Ｖ — Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ － ３ 、 Ｖ — ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ 培养 ４ ｈ ， 均与 终浓度为 ２ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ的内毒素共培 养 １ ２ ｈ 。采用 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ法检测 Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ － ３蛋 白， 流式细胞术 测算细胞 凋亡 率， 原位末端标记技术测算 细胞 凋亡指数 （ Ａ Ｉ ） ， ＭＴ Ｙ法观察细胞增殖 活力 。结 果 观察组 Ｈ Ｌ ７ ７ ０ ２细胞 Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ ・ ３ 相对表量为 １ ７ ． ３ ２±２ ． １ ６ ， 低 于对 照组 的 ６ ２ ． １ ４± ４ ． ３ ６ （ Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） ； 观察组 Ｈ Ｌ ７ ７ ０ ２细胞 凋亡 率为 ２ ８ ． ７ ５ ％， 低于对照 组的 ７ ２ ． ６ ７ ％（ Ｐ＜ ０ ． 叭） ； 观察组 Ｈ Ｌ ７ ７ ０ ２细胞 Ａ Ｉ 为２ ３ ． ５ ２±１ ． ２ ４ ， 低 于对 照组 的 ５ ４ ． ２ ６±１ ． ８ ７ （ Ｐ＜０ ． ０ １ ） ； 观察 组 Ｈ Ｌ ７ ７ ０ ２细胞增殖率为 ６ ５ ． ４ ７ ％± ６ ． ２ ４ ％， 高 于对 照组 的 ４ １ ． ３ ９ ％ ±４ ． ８ ７ ％（ Ｐ＜０ ． ０ １ ） 。结论 通 过 ｓ ｉ Ｒ Ｎ Ａ抑 制
萝卜硫素对人胃癌细胞HGC27的抑制作用及其机制研究
ｌｏｗ ｄｏｓｅ ｍｉｄｄｌｅ ｄｏｓｅ ａｎｄ ｈｉｇｈ ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐｓ ２０ ４０ ａｎｄ ８０ μｇ / ｍＬ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ. ＣＣＫ８ ａｓｓａｙ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｏｆ ＨＧＣ２７ ｃｅｌｌｓ. Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ ＲＯＳ ａｎｄ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ ＡＴＰ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｕｓｉｎｇ ＤＣＦＨ￣ＤＡ ａｎｄ ＨＰＬＣ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂａｘ Ｂｃｌ￣２ ａｎｄ ｐ５３. Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅｓ ｏｆ ＨＧＣ２７ ｃｅｌｌｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ａ ｄｏｓｅ￣ ａｎｄ ｔｉｍｅ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ Ｐ< ０.０５ . ＲＯＳ ａｎｄ ＡＴＰ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ Ｐ<０.０５ . Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｂａｘ ａｎｄ ｐ５３ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｕｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｂｃｌ￣２ ｗａｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ Ｐ<０.０５ . Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ ｃａｎ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ＨＧＣ２７ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＲＯＳ ａｎｄ ＡＴＰ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂａｘ ａｎｄ ｐ５３ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｃｌ￣２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ. Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｓｕｌｆｏｒａｐｈａｎｅ ＨＧＣ２７ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｒａｔｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
siRNA在沉默HSP27基因增强卵巢癌化疗效果中的研究的开题报告
siRNA在沉默HSP27基因增强卵巢癌化疗效果中的研究
的开题报告
题目：siRNA在沉默HSP27基因增强卵巢癌化疗效果中的研究
摘要：卵巢癌是一种恶性肿瘤，无症状性和容易复发使其成为极具威胁的疾病。
加热休克蛋白27（HSP27）在卵巢癌中高表达，并且与逃脱细胞凋亡和化疗失败相关。
因此，HSP27可能是卵巢癌治疗的一个靶点。
siRNA技术已经被用于沉默HSP27基因，以研究其影响卵巢癌化疗效果的作用。
本论文将评估沉默HSP27基因的siRNA在增强卵巢癌化疗效果中的应用。
研究目的：评估沉默HSP27基因的siRNA在增强卵巢癌化疗效果中的应用。
研究方法：对HSP27基因表达的卵巢癌细胞使用siRNA技术进行沉默。
通过Western blotting和RT-PCR测量细胞中HSP27蛋白和mRNA的表达水平。
同时，使
用MTT法测量细胞的增殖和细胞凋亡情况，以评估化疗药物和siRNA的效果。
研究结果：本研究将进一步评估HSP27基因的沉默是否增强了卵巢癌细胞对化
疗药物的敏感性，并且抑制了细胞增殖和诱导了细胞凋亡。
由于HSP27与肿瘤的治疗抵抗密切相关，本研究的结果可能为新的卵巢癌治疗策略提供帮助。
研究意义：本研究旨在提高对卵巢癌治疗的认识，特别是在HSP27基因的沉默
方面。
结果可能有助于开发新的治疗策略并改进现有的治疗方案，从而提高卵巢癌患
者的生存率和治愈率。
关键词：卵巢癌；HSP27；siRNA；化疗；细胞凋亡。
SiRNA靶向抑制HDGF表达对肝癌HepG2细胞功能的影响的开题报告
SiRNA靶向抑制HDGF表达对肝癌HepG2细胞功
能的影响的开题报告
引言：
肝癌是世界范围内最常见的癌症之一，对人类健康带来严重威胁。
尽管外科手术、放疗和化疗等多种治疗手段已经应用，但是肝癌的治疗仍然存在难度。
因此，寻找新的治疗方法十分必要。
那么，基因治疗是一种新的方法，因此本文将探讨SiRNA靶向抑制HDGF的表达对肝癌HepG2细胞功能的影响。
目的：
研究SiRNA靶向抑制HDGF表达对肝癌HepG2细胞功能的影响。
方法：
选择HepG2作为研究对象，分为两组：实验组和对照组。
实验组使用SiRNA靶向抑制HDGF表达，对照组不使用。
比较两组HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
结果：
SiRNA靶向抑制HDGF表达对HepG2细胞功能的影响显著。
与对照组相比，实验组细胞增殖、迁移和侵袭能力明显降低。
同时，SiRNA靶向抑制HDGF表达后HepG2细胞死亡率显著升高。
结论：
SiRNA靶向抑制HDGF表达对肝癌HepG2细胞功能有明显的影响，可以抑制其增殖、迁移和侵袭能力，同时增加细胞死亡率。
这一研究提供了一种新的肝癌治疗方法。
siRNA法下调PRL-3对脑胶质瘤细胞SHG-44生长周期的影响的开题报告
siRNA法下调PRL-3对脑胶质瘤细胞SHG-44生长周期的影响的开题报告题目：SiRNA法下调PRL-3对脑胶质瘤细胞SHG-44生长周期的影响背景介绍：脑胶质瘤是一种恶性肿瘤，其发病率和死亡率逐年增加。
目前，手术切除、放疗和化疗是脑胶质瘤的主要治疗手段。
然而，这些方法仍然存在一些难题，例如药物副作用、放疗损伤等。
PRL-3是一种酪氨酸磷酸酶，其在多种恶性肿瘤中的异常表达与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移有关。
研究发现，在脑胶质瘤细胞中，PRL-3的表达水平明显升高。
因此，PRL-3成为治疗脑胶质瘤的潜在靶点。
RNA干扰技术（RNA interference，RNAi）是一种通过特异性降低基因表达的技术。
siRNA是一种能特异性靶向mRNA并降解其的短RNA分子。
在细胞内导入siRNA分子可以有效抑制基因表达，从而起到治疗疾病的作用。
研究目的：本研究旨在探讨siRNA法下调PRL-3在脑胶质瘤细胞SHG-44中对细胞生长周期的影响，为寻找治疗脑胶质瘤的新方法提供理论基础。
研究内容：1. 培养SHG-44细胞，确定细胞生长曲线，并选择合适的时间点;2. 细胞分组，将细胞分为实验组和对照组;3. 设计合适的siRNA并通过转染方法导入实验组细胞中，对照组细胞不做处理;4. 以CCK8法检测实验组和对照组的细胞增殖情况;5. 通过流式细胞仪检测实验组和对照组的细胞周期分布情况;6. 对实验数据进行统计学处理，分析siRNA下调PRL-3对SHG-44细胞生长周期的影响。
研究意义：本研究对于探究siRNA下调PRL-3在脑胶质瘤中的作用具有现实意义和实际应用价值，为脑胶质瘤的治疗提供新思路和新方法。
siRNA抑制PPARγ表达对绒癌细胞JEG-3侵袭力的影响
siRNA抑制PPARγ表达对绒癌细胞JEG-3侵袭力的影响许华;陈丽君【摘要】目的:采用小分子干扰RNA(siRNA)技术特异性地抑制绒癌细胞株JEG-3中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达,研究PPARγ影响JEG-3细胞侵袭力的机制.方法:将实验设为实验组(转染PPARγ基因的特异性siRNA)、阴性对照组(转染阴性对照siRNA)和空白对照组(不转染任何siRNA片段,其它试剂与另两组相同),采用实时定量PCR技术从mRNA水平检测PPARγ及黏蛋白-1(MUC1)的表达;利用Transwell侵袭实验观察siRNA转染JEG-3细胞后细胞侵袭力的变化.结果:siRNA使PPARγ mRNA的表达水平下调了(75.0±0.8)% (P<0.05),MUC1 mRNA的表达水平下调了(65.0±1.3)% (P<0.05),JEG-3细胞侵袭Matrigel的能力显著增强(P<0.05).结论:PPARγ表达水平的下降能相应下调MUC1的表达水平,并增强滋养细胞的侵袭能力,推测PPARγ可能通过调节MUC1基因影响滋养细胞的侵袭能力,从而参与了子痫前期等病理妊娠的发生.%AIM: To invesligale the effect of peroxisome proliferalor - activated receptor γ( PPAR-γ) on the invasion ability of trophoblasls. METHODS: A segment of PPAR-γ siRNA was synthesized. Three groups were designed; experiment group, negative control group and blank control group. The PPAR-γ siRNA was transfe cted into JEG - 3 cells. Real - time quantitive PCR was used to detect the mRNA levels of PPARγ and mucin - 1 ( MUC1). The Transwell culture inserts were used to detect the invasion ability of JEG - 3 cells 24 h after treated with PPARγ siRNA. RESULTS; After transfected with PPARγ siRNA, the mRNA expression levels of PPARγ and MUC1 were significantly depressed by (75.0 ±0.8)% and ( 65. 0 ± 1. 3 ) % ( P < 0. 05 ), respectively, and the invasionability of JEG - 3 cells was significantly strengthened ( P < 0. 05 ) . CONCLUSION: The depression of PPARγ gene down - regulates the expression of MUC1, and affects the invasion ability of trophoblasts, indicating that PPARγ may regulate the invasion of trophoblasts by MUC1 and involve in the development of placental defects such as preeclampsia.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2012(028)005【总页数】5页(P829-833)【关键词】过氧化物酶体增殖物激活受体γ;小干扰RNA;黏蛋白-1;JEG-3细胞【作者】许华;陈丽君【作者单位】山东大学齐鲁医院妇产科,山东,济南,250012;山东大学齐鲁医院妇产科,山东,济南,250012【正文语种】中文【中图分类】R714.24滋养细胞浸润是人类胎盘及胚胎发育的关键过程，其结果为胚胎植入母体组织，间质成分以及母胎间血管浸润。
甘草次酸对人胃癌HGC-27的抑制增殖和诱导凋亡作用
甘草次酸对人胃癌HGC-27的抑制增殖和诱导凋亡作用贾洪岩;林芳;王立敏;刘丹【摘要】目的:研究18β-甘草次酸(glycyrrhetinic acid,GA)对人胃癌细胞HGC-27生长抑制作用及对细胞凋亡的影响.方法:分别以12.5、25、50、100和200 μM的GA处理HGC-27细胞,MTT法检测不同时间点(24、48和72h)的细胞增殖抑制率,以AO/EB法初步观察GA诱导HGC-27凋亡的情况,以Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率确定凋亡的发生.结果:GA能抑制HGC-27细胞生长,且呈剂量依赖性,GA可以引起HGC-27细胞核皱缩、染色质浓缩、细胞膜发泡、等凋亡特征,提示了凋亡的参与,通过Annexin V/PI双染色法最终确定GA可剂量依赖性地引起HGC-27的凋亡.结论:GA可抑制人胃癌细胞HGC-27增殖,其作用机制可能与GA引起HGC-27凋亡有关.【期刊名称】《黑龙江医药科学》【年(卷),期】2016(039)002【总页数】4页(P88-90,92)【关键词】甘草次酸;HGC-27细胞;细胞凋亡【作者】贾洪岩;林芳;王立敏;刘丹【作者单位】沈阳药科大学基于靶点的药物设计与研究教育部重点实验室,辽宁沈阳110000;佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯154007;沈阳药科大学基于靶点的药物设计与研究教育部重点实验室,辽宁沈阳110000;佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯154007;沈阳药科大学基于靶点的药物设计与研究教育部重点实验室,辽宁沈阳110000【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌是一种严重威胁人类健康的疾病，在许多恶性肿瘤当中，其发病率高居第二位。
在临床上，利用Ki－67、RAB5A、VHL、Survivin以及HGF等的表达情况来诊断早期胃癌的发生［1～3］。
多数早期胃癌的治疗均采取局部切除的方法，而对于晚期胃癌，手术切除后仍有复发或转移的可能，其术后5年生存率始终保持在30%左右。
姜黄素对胃癌细胞系HGC-27影响的蛋白质组学研究的开题报告
姜黄素对胃癌细胞系HGC-27影响的蛋白质组学研
究的开题报告
一、研究背景
胃癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤，其发病率和死亡率在全球范围内均较高。
姜黄素是一种天然产物，有很强的抗氧化和抗肿瘤活性，因此被广泛用于癌症治疗。
现有研究表明，姜黄素对胃癌具有一定的抑制作用，但其作用机制尚不清楚。
因此，本研究旨在探究姜黄素对胃癌细胞系HGC-27的影响及其作用机制。
二、研究目的
1. 研究姜黄素对HGC-27胃癌细胞的生长抑制效应。
2. 借助蛋白质组学技术，对姜黄素对HGC-27细胞的蛋白质表达进行全面分析。
3. 探究姜黄素诱导HGC-27细胞凋亡的分子机制。
三、研究内容及方法
1. 细胞实验
选取HGC-27胃癌细胞作为研究对象，使用MTT法、克隆形成实验等方法评估不同浓度姜黄素对HGC-27细胞的生长抑制效应，同时采用倒置显微镜观察细胞形态学变化。
2. 蛋白质组学分析
通过双向蛋白质组学技术，对姜黄素诱导的HGC-27细胞蛋白质表达水平进行比较，筛选出差异表达的蛋白质。
3. 分子机制研究
通过Western blot等方法检测姜黄素对HGC-27细胞凋亡相关基因的表达，包括Bcl-2、Bax、Caspase-3等，探究姜黄素诱导HGC-27细胞凋亡的分子机制。
四、研究意义
通过本研究，可以更深入地了解姜黄素对胃癌细胞的影响及其作用机制。
相关结果有望为胃癌的治疗提供新的思路和方法，也为姜黄素作为一种抗肿瘤药物的开发提供实验依据。
探索人高转移胃癌细胞HGC-27适配体的靶标蛋白
探索人高转移胃癌细胞HGC-27适配体的靶标蛋白刘浩波; 刘涛; 王亚雷; 罗昭锋【期刊名称】《《安徽医科大学学报》》【年(卷),期】2019(054)010【总页数】4页(P1570-1573)【关键词】cell-SELEX; 核酸适配体; 胃癌; 转移; 靶标蛋白【作者】刘浩波; 刘涛; 王亚雷; 罗昭锋【作者单位】安徽医科大学第一附属医院消化内科合肥230022; 中国科学技术大学生命科学院合肥230022【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌(stomach cancer，SC)是世界上第四大常见的恶性肿瘤, 发病率逐年上升[1]，但其早期症状并不明显，大多数SC患者就诊时就已发生癌细胞转移, 延误了最佳治疗时机。
因此如果能鉴定出高转移性SC的肿瘤标志物将对早期监测SC转移和探索SC转移机制带来巨大前景。
目前，寻找肿瘤标志物一种方法是使用抗体，另一种是使用适配体，通过抗体寻找靶蛋白时，需要两种抗体形成一种特殊结构才能找到靶标蛋白[2]，使用核酸适配体来寻找生物标志物的方法相对简单。
核酸适配体是由随机寡核苷酸文库通过寡核苷酸与靶分子的重复结合演化而来的单链DNA或RNA分子。
与抗体类似，适配体可以以高特异性和亲和力结合其靶分子。
该研究旨在利用已经得到的可以特异性识别高转移SC细胞的适配体LW-25去探索其结合的靶标蛋白。
1 材料与方法1.1 主要材料1.1.1 细胞株人胃癌细胞系HGC-27(高转移能力)获赠于中国科学技术大学生命科学院；生长于含20 U/ml的青霉素和链霉素以及10%胎牛血清的RPMI-1640培养液中，在37 ℃、5%CO2条件下恒温恒湿培养箱内培养, 实验均采用对数期细胞。
1.1.2 单链DNA序列名称及碱基组成见表1。
表1 生物素修饰后的LW-25及随机文库Lib的碱基组成序列名称碱基组成(5′-3′)Biotin-LW-25biotin-TTCAGCACTCCACGCATAGCCAAGTTGCCGACAATACAACGGACCGATTATTT CCACCGACCTATGCGTGCTACCGTGAABiotin-Libbiotin-GCAATGGTACGGTACTTCCNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNN NNNNNNNCAAAAGTGCACGCTACTTTGCTAA以上两种适配体由上海生物工程公司合成1.1.3 主要试剂和仪器 RMPI-1640培养基、胰蛋白酶购自美国Gibco公司；胎牛血清购自杭州四季青公司；PBS缓冲液购自上海慧颖生物科技有限公司；青霉素-链霉素溶液、PMSF、蛋白酶抑制剂混合物购自上海碧云天公司；酵母tRNA购自美国Sigma公司；葡萄糖、BSA购自上海生物工程公司；洗涤缓冲液(washing buffer，WB)、结合缓冲液(binding buffer，BB)以及DNA封闭液由实验室自行配置； WB：含有4.5 g/L葡萄糖及5 mmol/L MgCl2的DPBS；BB：含有1 mg/ml BSA和0.1 mg/ml酵母tRNA的WB；DNA封闭液：5 mg鲑鱼精DNA 和1 ml胎牛血清加入4 ml的BB；链霉亲和素包被的琼脂糖凝胶珠、Q ExactivePlus质谱仪购自美国赛默飞公司；Guava easyCyte 5流式细胞仪购自美国Merck Millipore公司；CLM-170B-8-NF型CO2培养箱购自上海Esco公司。
siRNA沉默STAT3基因对人肝癌细胞的抑制及对相关生长调控基因的调节
siRNA沉默STAT3基因对人肝癌细胞的抑制及对相关生长调控基因的调节李静;朴云峰;蒋政;丁百静【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2007(15)19【摘要】目的:探讨RNA干扰技术沉默STAT3基因表达对人肝癌细胞的抑制作用及对相关生长调控基因的调节.方法:构建pSilencer3.0-H1-siRNA-STAT3重组质粒,转染人肝癌细胞株SMMC 7721,采用MTT法观察重组质粒对肝癌细胞的生长抑制,RT-PCR和Western blot及免疫组化法分别观察STAT3基因和蛋白水平的变化,同时检测survivin,c-myc,VEGF,p53,caspase3生长调控基因的mRNA,并用流式细胞技术(FCM)及AO/EB染色方法观察细胞凋亡.结果:pSilencer 3.0-H1-siRNA-STAT3重组质粒对肝癌细胞的生长有抑制作用,实验组48h和72h抑制率分别为59.32%,76.49%,与空白组及阴性组细胞相比有显著性差异(P<0.01);在重组质粒组,STAT3基因mRNA及蛋白水平表达降低,surviving,VEGF的mRNA表达下调,p53,caspase3的mRNA表达上调(P<0.01),c-myc的mRNA表达却无明显改变;重组质粒可诱导SMMC 7721细胞凋亡,凋亡率达21.6%(P<0.01),细胞周期分析显示细胞阻滞于G2期.结论:pSilencer3.0-H1-STAT3-siRNA可能通过下调基因survivin和VEGF mRNA表达,上调p53和caspase3 mRNA表达来抑制STAT3基因在人肝癌细胞中的表达.【总页数】7页(P2101-2107)【关键词】STAT3基因;肝癌;RNA干涉;pSilencer;3.0-H1-siRNA-STAT3重组质粒;细胞凋亡【作者】李静;朴云峰;蒋政;丁百静【作者单位】吉林大学第一医院消化科;锦州市第二医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R739.41【相关文献】1.hAFP及hTERT双启动子调控的针对人IGF-Ⅱ基因的siRNA特异性抑制人肝癌细胞生长 [J], 汤绍辉;吴胜兰;王旷靖;张良鹏;罗羽宏;曹明溶;周鸿科2.siRNA沉默巨噬细胞移动抑制因子基因对肝癌细胞血管内皮生长因子表达的影响[J], 夏金堂;伍兆锋;李雯;傅新晖;毕颎;陈连周;李瑜元3.经沉默免疫负调控基因技术处理的树突状细胞联同细胞毒性T淋巴细胞抑制人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的研究 [J], 付海峰;周文波;魏英;吴红伟;汪斌;徐军辉;徐彦哲;丁佑铭4.survivin 启动子调控肿瘤干细胞标记 CD133基因 siRNA增殖型溶瘤腺病毒的构建及对肝癌细胞生长的抑制作用 [J], 牛坚;王月;刘斌;王人颢;朱志军;申海莲5.姜黄素联合KLF8基因siRNA调控JAK2/STAT3信号通路对乳腺癌细胞生长抑制作用的研究 [J], 李新;牛冰;李庆辉;张成娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
siRNA沉默多效生长因子表达及其生物学意义
siRNA沉默多效生长因子表达及其生物学意义胡迎春;刘敏丽;李刚;霍艳英;吴德昌【期刊名称】《癌症（英文版）》【年(卷),期】2006(025)010【摘要】背景与目的:多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)基因是一种分泌性的生长因子,具有促进肿瘤细胞的增殖与迁移及肿瘤血管的生成等功能.有研究表明,抑制该基因的表达,就能够有效地控制肿瘤细胞的过度增殖,从而达到抑制肿瘤发生与发展的目的.本研究旨在合成一种能够有效抑制该基因表达的小干扰RNA.方法:(1)设计并合成具有基因特异性的一组寡核苷酸片段,并克隆到pSilenceTM 3.1-H1 hygro载体;(2)瞬时转染siRNA表达载体至3T3细胞,以检测不同siRNA对Ptn基因表达的抑制能力;(3)用脂质体Lipofectamine 2000转染和潮霉素筛选等方法建立能稳定表达相应Ptn siRNAs的一组PTEN-/-MEF241细胞株,并对其Ptn的表达水平进行检测;(4)利用细胞生长曲线检测沉默Ptn基因对PTEN-/-MEF241细胞生长的影响;(5)裸鼠成瘤实验观察Ptn基因沉默后,PTEN-/-MEF241细胞致瘤特性的改变.结果:设计并合成了3条针对Ptn基因的siRNAs,并证实其中的1条小干扰RNA,即Ptn siRNA-B能显著地抑制PTEN-/-MEF241细胞中Ptn基因的表达,抑制效率达到95%以上;同时能使PTEN-/-MEF241的生长速度明显减慢;接种裸鼠后成瘤率仅为1/8,而对照组的成瘤率为5/8,发生肿瘤的潜伏期超过90天,而对照组为30天左右,可见裸鼠成瘤率被显著抑制,发生肿瘤的潜伏期大大延长.结论:本研究设计并合成的针对Ptn基因的小干扰RNA,即Ptn siRNA-B能够抑制PTEN-/-MEF241细胞增殖,降低PTEN-/-MEF241细胞的致瘤性,因此可能成为一种新型的肿瘤基因治疗药物.【总页数】6页(P1210-1215)【作者】胡迎春;刘敏丽;李刚;霍艳英;吴德昌【作者单位】军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;重庆医科大学病理学教研室,重庆,400016;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850【正文语种】中文【中图分类】R73-36+2因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
雄激素依赖性前列腺癌细胞中雄激素受体上调EphA3表达
雄激素依赖性前列腺癌细胞中雄激素受体上调EphA3表达刁小伟;李园;皮玉瑞;李同辉;刘平;卢山【期刊名称】《天津医药》【年(卷),期】2015(000)011【摘要】目的：探讨雄激素依赖性前列腺癌细胞中促红细胞生成素产生肝细胞A 型受体（EphA）3表达和雄激素受体（AR）信号通路的关联。
方法首先通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹实验（Western blot）分别检测前列腺癌细胞LNCaP和22Rv1中EphA3和AR的mRNA及蛋白水平，然后用双氢睾酮（DHT）刺激48 h，测定细胞EphA3、AR和前列腺特异抗原（PSA）表达水平的变化。
同时，将成功构建的荧光素酶报告基因重组质粒EphA3-Luc（-789~+146）与AR表达质粒pcDNA3.1（+）-AR或AR特异性小分子干扰RNA （siAR）共转染22Rv1细胞，分析AR对EphA3转录活动的影响。
结果 EphA3在前列腺基质细胞WPMY-1中表达水平极低，但在前列腺癌细胞LNCaP和22Rv1中则明显升高，与AR表达模式相似。
10 nmol/L DHT不仅明显上调22Rv1细胞中AR、PSA和EphA3表达水平，也显著升高LNCaP细胞中相关基因和蛋白水平。
而且细胞内不同AR表达水平会显著影响EphA3启动子活性。
结论 AR通过提高EphA3启动子活性上调EphA3表达水平。
%Objective To evaluate the relationship between liver cell type A receptor (EphA) expression and androgen receptor (AR) signaling in androgen-dependent prostate cancer cells. Methods RT-PCR and Western blot assay were used to determine mRNA and protein levels of EphA3 and AR in prostate cancer LNCaP and 22Rv1 cells, respectively. The variations of EphA3, AR andprostate specific antigen (PSA) expressions were also measured in these cells after dihydrotes⁃tosterone (DHT) treatment for 48 h. The constructed EphA3-Luc (-789-+146) luciferase reporter plasmid was co-transfect⁃ed with pcDNA3.1(+)-AR or siAR in 22Rv1 cells to analyze the effects of different AR expression levels on EphA3 tran⁃scription activity. Results The expression pattern of EphA3 was similar to AR, showing a lower level in prostate stromal cell line WPMY-1 and a higher level in prostate cancer cell lines LNCaP and 22Rv1. When stimulated with 10 nmol/L DHT, the expression levels of AR, PSA and EphA3 were significantly increased in22Rv1 cells, and the protein levels of these genes were also increased in LNCaP cells. Moreover, AR expression levels markedly influenced the activity of EphA 3 pro⁃moter. Conclusion AR up-regulates EphA3 expression by increasing the activity of EphA3 promoter.【总页数】5页(P1253-1257)【作者】刁小伟;李园;皮玉瑞;李同辉;刘平;卢山【作者单位】南京师范大学生命科学学院邮编210023; 南京师范大学江苏省分子医学生物技术重点实验室;南京师范大学生命科学学院邮编210023; 南京师范大学江苏省分子医学生物技术重点实验室;南京师范大学生命科学学院邮编210023; 南京师范大学江苏省分子医学生物技术重点实验室;南京师范大学生命科学学院邮编210023; 南京师范大学江苏省分子医学生物技术重点实验室;南京师范大学生命科学学院邮编210023; 南京师范大学江苏省分子医学生物技术重点实验室;南京师范大学生命科学学院邮编210023; 南京师范大学江苏省分子医学生物技术重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R737.1;R73-37【相关文献】1.非依赖雄激素的前列腺癌细胞株中雄激素受体的表达 [J], 赵军2.非依赖雄激素的前列腺癌细胞株中雄激素受体的表达 [J], ChlenskiA3.雄激素受体在雄激素非依赖性前列腺癌的表达 [J], 甘道举;江军;陈善勤;赖建平;王学华;孙广运;牟江洪4.雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌雄激素受体表达水平的变化 [J], 吕涛;田斌群;郑新民;李世文5.雄激素受体反义RNA对前列腺癌细胞雄激素受体表达的抑制作用研究 [J], 江军;王洛夫;方玉华;靳风烁;靳文生;李彦锋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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［ 键 词 ］ Ｅ ｈ ； 瘤 ； 殖 ； 干扰 Ｒ Ａ 关 ｐ Ａ３ 肿 增 小 Ｎ ［ 图分类号］ Ｑ ８ 中 ７ ［ 献标识码 ］ Ａ 文 ［ 文章 编 号 ］ １０ — ０ ２ ２ １ ）４ ０ ０ — ３ ０ ９ ０ ０ （０ ２ ０ — ５ ３ ０
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制 作 用 。 方 法 ： 携 带 １０ 一ｉ Ｎ 的质 粒 用 Ｖ ｇｒｕ 转 染 试 剂 瞬 时 转 染 ＨＧ ２ 细 胞 ， ８ｈ后 收 集 蛋 白， Ｗｅｔ 将 ５４ ｓ Ａ Ｒ ｉｏｏ ｓ Ｃ７ ４ 用 ｓ ｍ ｅ
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研 究 报 告
１０ －ｉＮ ５ ４ ｓ Ａ对 表 达 Ｅ ｈ ３的 肿 瘤 细 胞 ＨＧ ２ Ｒ ｐＡ Ｃ ７的 抑 制 作 用
赵亚丽 ， 一 武瑞琴 ， 海量 ， 洪涛 ， 国兰 王健 ， 建 光 李 王 罗 ， 周
１ ．军事 医 学科 学 院 ａ ．生 物 工 程研 究 所 ， 京 １０ ５ ；ｂ 北 ０ ８ ０ ．疾病 预 防控 制 所 ， 京 １０ ７ ； 北 ００ １ ２ ．航 天 医 学工 程 癌 基 因印 摘 研 的 小 干 扰 Ｒ Ａ（ｉ Ｎ １０ 一ｉＮ 对 表 达 Ｅ ｈ ３的 胃癌 细 胞 Ｈ Ｃ ７的 增 殖 抑 Ｎ ｓ Ａ）５ ４ ｓＲ Ａ Ｒ ｐＡ Ｇ２
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形 成 实 验 。 结 果 ：５ ４ ｓ Ｎ １０ 一 ｉ Ａ能 抑 制 ＨＧ ２ 细 胞 的 Ｅ ｈ ３ 白水 平 ， 制 其 增 殖 、 板 克 隆 形 成 和 软 琼 脂 克 隆 的形 Ｒ Ｃ７ ｐＡ 蛋 抑 平
成 ， 制 ｐ Ｋ ｐ Ｔ Ｒ、 － — ａ 、 一 ｅ ｐ 等 信 号 分 子 的 表 达 。 结 论 ： ５ ４ ｓ Ｎ 抑 Ａ Ｔ、 ｍ Ｏ ｐ ｃ Ｒ ｆ Ｐ ４ ｂ ｌ １ ０ 一 ｉ Ａ可 能 通 过 抑 制 Ａ Ｔ信 号 通 路 ， 抑 Ｒ Ｋ 而 制 ＨＧ ２ 细 胞 的增 殖 、 活 能 力 和 恶 性 程 度 ， 可 以作 为 肿 瘤 治 疗 的 候 选 药物 。 Ｃ７ 存 它
ｔ ｒ ｅ ｉｇ ｐｈ ａ ｇ ｔｎ Ｅ Ａ３， ｏ ｐ ｏ ｉ ａｉ ｎ ｆ ａ ｔｉ ｅ ｎｅ ｎ ｍ ａ ｅｌ ＨＧＣ２７． Ｍ ｅ ｈｏｄｓ Ａｆｅｒ ｌ ｓ ｉ ｃ ｒｙｉ １ ４－ｓＲＮＡ ｎ ｒ ｌｆ ｔｏ ｏ ｇ ｓｒｃ ａ ｉ ｏ ｃ ｌｓ ｅｒ ｔ ： ｔ ｐ ａ ｍ ｄ ａ ｒ ｎｇ ５０ ｉ
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