无菌检查方法验证告报告2015

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药典三部(2015版)-通则-1101微生物检查法

1101 无菌检查法

无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。

无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求.日常检验还需对试验环境进行监控。

培养基

硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌培养；胰酪大豆胨液体培养基用于真菌和需氧菌的培养。

培养基的制备及培养条件

培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基或成品培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2～25℃、避光的环境,若保存于非封闭容器中，一般在3周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。

1. 硫乙醇酸盐流体培养基

胰酪胨15.0g 氯化钠

2.5g

酵母浸出粉5。0g 新配制的0。1% 刃天青溶液1。0ml

无水葡萄糖5。0g 琼脂0.75g

L-胱氨酸0.5g 水

1000ml

硫乙醇酸钠0.5g

（或硫乙醇酸) （0。3ml）

除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH为弱碱性,煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH，使灭菌后在25℃的pH值为7。1±0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层(粉红色）不超过培养基深度的1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5,否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟），迅速冷却,只限加热一次，并防止污染。

无菌检验方法验证

按药典对样品无菌检查的规定和要求，或是微生物限度检查的规定和要求进行，对每一试验菌应逐一进行验证试验。微生物学的验证试验一般分 4个步骤进行：
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无菌检验方法验证
1、制备验证试验用菌液
按药典无菌检查法中培养基灵敏度检查项中试验用菌液制备的方法将规定需用的试验菌分别制成每毫升中含10～100个菌（CFU）的供试菌液。验证报告中应给出各种试验用菌液的制备和菌液含菌量计数的原始记录。
供试品中生长的微生物经鉴定后，确证是因无菌试验中所用的物品和（或）无菌操作技术不当引起的
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无菌检验阳性结果调查
实验室调查：一个合适的调查程序和记录是必要的
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无菌检验阳性结果调查
若产品不合格，必须通过该批生产过程回顾找出污染原因和污染源 –人 – 物料 – 环境 – 设备 – 方法和工艺
• 设备物料记录无菌室的记录• 设备校验维护记录
•隔离系统灭菌记录 •清洁记录
•测试数据
•环境监控记录
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•趋势分析
•无菌检验失败调查记录
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无菌检验阳性结果调查
结论:
在根本原因找出前，千万不能随意丢弃无菌检验结果

无菌检查法-2015版中国药典-电子版

无菌检查法-2015版中国药典

无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料、及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定,仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。

无菌检查应在环境洁净度B 级背景下的局部A 级洁净度的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度确认。隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。

无菌检查人员必须具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训。

培养基

硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需气菌培养；胰酪大豆胨液体培养基适用于真菌和需气菌的培养。培养基的制备及培养条件培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2～25℃、避光的环境，若保存于非密闭容器中，一般在3周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。

1. 硫乙醇酸盐流体培养基

酪胨 (胰酶水解) 15.0g 酵母浸出粉 5.0g

葡萄糖 5.0g 氯化钠 2.5g

L-胱氨酸 0.5g 新配制的 0.1% 刃天青溶液 1.0ml

硫乙醇酸钠 0.5g 琼脂 0.75g

(或硫乙醇酸) （ 0.3 ml) 纯化水 1000ml

药典三部(2015版)-通则-1101微生物检查法

1101 无菌检查法

无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。

培养基

硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌培养；胰酪大豆胨液体培养基用于真菌和需氧菌的培养。

培养基的制备及培养条件

培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基或成品培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2～25℃、避光的环境，若保存于非封闭容器中，一般在3周使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年使用。

1. 硫乙醇酸盐流体培养基

胰酪胨15.0g 氯化钠2.5g

酵母浸出粉新配制的0.1% 刃天青溶液

5.0g 1.0ml

无水葡萄糖5.0g 琼脂0.75g

L-胱氨酸0.5g 水1000ml

硫乙醇酸钠

0.5g

（或硫乙醇酸）

(0.3ml)

除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH，使灭菌后在25℃的pH值为7.1±0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止污染。

2015版药典无菌检查法与微生物鉴定

－
D级 3520000 29000 不作规定不作规定 200 100 50
－
无菌隔离系统的使用及验证
9206 无菌检查用隔离系统验证指导原则 •1.操作验证 •2.完整性验证 •3.灭菌验证 •4.灭菌循环验证 •5.内部洁净度验证 •6.仪器仪表验证
培养基的修订
• 我国药典无菌检查法与欧美药典的差异 • 2015版药典的修订
Dextrose(葡萄糖)............................................5.0 g Sodium Chloride(氯化钠).....................................2.5 g L-Cystine( L-胱氨酸) .......................................0.5 g Sodium Thioglycollate (硫乙醇酸钠)..........................0.5 g Agar( 琼脂).................................................0.75 g Resazurin( 刃天青) .........................................1.0 mg Water（水）............................................. ...1000ml

无菌检验方法验证报告

编码：

无菌检验方法验证报告

药业有限公司

1. 概述：无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。本公司的无菌检查只是针对于灭菌注射用水的无菌检查。

灭菌注射用水灭菌工艺采用121℃ 30min 过度杀菌法，按照2005 年版《中国药典》的规定，注射剂的无菌检查应采用薄膜过滤法。制定的《无菌检查法标准操作规程》 (SOP4.14.038-B)应经过验证后，才能批准使用。

2. 验证目的：验证所采用的方法和条件是否适合于供试品的无菌检查。即确认供试品在该检验量、该检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性以被充分消除到可以忽略不计。

3. 验证范围：适用于灭菌注射用水无菌检查法的验证。

4. 验证人员及职责质量部负责该验证方案的起草及组织实施；验证小组负责验证方案的审批；质量部参与验证的实施及监督。

5. 文件准备和培训检查验证所需的各类文件资料，应齐全；相关的文件草案是否已具备。

6. 验证条件

6.1. 无菌检查室空气净化系统已经过验证并合格，仪器安装完成；仪表量器经过校验合格，且在有效期内。

6.2. 供试品：3批，批号：

批号：

6.3. 培养基及试剂：

6.3.1. 试剂试液：

氯化钠: 临用前配成0.9%浓度的溶液，配制记录见附件1 冲洗液：0.1%蛋白胨水溶液，配制记录见附件2

6.3.2. 培养基

硫乙醇酸盐流体培养基生产厂家：批号：

改良马丁培养基生产厂家：批号：

营养肉汤培养基生产厂家：批号：

改良马丁琼脂培养基生产厂家：批号：

蛋白胨生产厂家：批号：

培养基配制记录见附件3。

中国药典2015版无菌检查法与美、欧、日药典的差异分析与讨论_潘友文

中国药典2015版无菌检查法与美、欧、日药典的差异分析与讨论

潘友文

（罗氏/基因泰克，美国南旧金山，94080）

2016年07月29日

摘要目的：分析中国药典2015版无菌检查法与美、欧、日药典无菌检查法的之间的差异性，为评

价不同药典中无菌检查法的等效性提供参考。方法：对无菌检查法的主要实验步骤和参数进行一对

一比较，对有差异的步骤和参数进行科学论证和评价。结果：中国药典2015版无菌检查法与美、欧、日药典无菌检查法的主要参数和步骤是一致的，但中国药典无菌检查法还需要做阳性对照和厌氧需

氧菌的额外培养。并且，中国药典用大肠埃希菌代替美、欧、日药典中的铜绿假单胞菌参与无菌检

查法的适用性试验。结论：各药典的无菌检查法是等效的。在不影响方法等效性的前提下，中国药

典2015版无菌检查法在阳性对照和培养方法上还可以进一步简化。

关键词:无菌检查法；中国药典；美国药典；欧洲药典；日本药典

Gap Assessment and Discussion on Sterility Tests in Chinese Pharmacopoeia 2015, United States Pharmacopoeia, European Pharmacopoeia, and Japanese Pharmacopoeia

Youwen Pan (Genentech, a Member of Roche, South San Francisco, USA 94080)

Abstract Objective：Gap assessment and discussion on the sterility test methods in Chinese Pharmacopoeia 2015 edition (CP2015), United States Pharmacopoeia (USP), European Pharmacopoeia (EP), and Japanese Pharmacopoeia (JP). Method：The test procedures and key parameters in the sterility test methods in different pharmacopoeia were compared step by step and the differences were identified. The identified differences are scientifically evaluated for their impact to the equivalence of the methods. Result：The sterility test method in CP2015 is largely harmonized with that in USP, EP and JP except for a few differences. Positive control and extra incubation bacteria are required in CP2015 only, and Escherichia coli is used in method suitability test in CP2015 while Pseudomonas aeruginosa is used in USP/EP/JP. Conclusion：The Sterility Test Methods in CP2015, USP, EP, and JP are equivalent. The method in CP2015 could be simplified more without compromising the validity, accuracy and reliability of the method.

中国药典2015版无菌检查方法适用性试验(直接接种法)

*********公司

*********产品

无菌检查方法适用性试验

1、样品信息

2、培养基及试剂

3、菌种基本信息：

4、菌液制备：

2.1接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨培养基中或胰酪大豆胨脂培养基上，30～35℃培养18～24小时，培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。

2.2接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30～35℃培养18～24小时，培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。

2.3接种白色念珠菌的新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基或沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基上，20～25℃培养24～48小时，培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml 含菌数小于100cfu的菌悬液。

2.4接种黑曲霉菌的新鲜培养物接种至沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基上，20～25℃培养5～7天，加入3～5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌孢子悬液。

6、无菌检查直接接种法方法适用性试验

6.1供试品制备：描述供试品制备过程（主要为每个样品的取样部位及用量）。

6.2试验组：取装量为 ml硫乙醇酸盐流体培养基，接种规定的供试品量（同6.1），并接种小于100cfu的金黄色葡萄球菌；

大肠埃希菌、生孢梭菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉按照上述步骤操作，其中大肠埃希菌、生孢梭菌加入硫乙醇酸盐流体培养基，枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉加入胰酪大豆胨液体培养基。

2015版微生物限度检查方法验证方案

验证文件

扬子江药业集团

四川海蓉药业有限公司

一、验证概述 (2)

1.验证对象 (2)

2.验证原因 (2)

3.验证目的 (2)

4.验证要求 (2)

二、验证组织机构和职责 (3)

1.职责 (3)

2.组织机构 (4)

三、验证风险评估及范围 (6)

1.严重性（S） (6)

2.可能性（O） (7)

3.可检测性（D） (8)

4.风险优先数量等级判定（RPN） (9)

四、验证实施计划 (35)

五、验证准备 (36)

1.验证依据 (36)

2.验证条件 (36)

六、验证内容 ......................................... 错误!未定义书签。

七、验证异常情况处理 (54)

八、验证结论 (55)

九、再验证周期 (56)

十、附件 (56)

一、验证概述

1.验证对象

本次验证的对象为阿戈美拉汀片（25mg）微生物限度检查法。

2.验证原因

对阿戈美拉汀片（25mg）微生物限度检查法进行适用性验证。

3.验证目的

确认阿戈美拉汀片（25mg)微生物限度检查法的可靠性。

4.验证要求

验证过程需严格按方案中规定的步骤进行。对于验证过程中出现的所有偏差，应查明原因并得到有效处理后，验证方可进入下一步骤。

二、验证组织机构和职责

1.职责

1.1.质量受权人

—验证文件的批准。

—组织验证工作的实施及各部门的协调，保证验证工作有序的进行。

1.2.质量管理部

—现场监督保证整个操作过程按照验证计划进行。

—负责验证方案的审核，及操作过程中对验证文件修订的审核工作。—验证文件的归档工作。

—按照验证方案要求对操作过程中的样品抽样检测。

无菌医疗器械现场检查指导原则20151001

附件2

医疗器械生产质量管理规范

无菌医疗器械现场检查指导原则

注解：

1.本指导原则条款编号的编排方式为：X1.X

2.X3，其中X1为章节的顺序号，如1.1.1的第一位X1表示“机构与人员”章节，2.1.1的第一位X1表示“厂房与设施”章节；X2为同一章节内条款的顺序号，如1.1.1的第二位X2表示“机构与人员”章节第一条要求，1.2.1的第二位X2表示“机构与人员”章节第二条要求；X3为同一条款内细化的检查指导的顺序号，如1.1.1的第三位X3表示“机构与人员”章节对第一条要求细化的第一个检查要点，1.1.2的第三位X3表示“机构与人员”章节对第一条要求细化的第二个检查要点。

其他章节编号规则相同。

2.每一章节的检查指导原则由前后两部分组成，每章的前半部分是按照《医疗器械生产质量规范》所规定条款制定的检查指导，每章的后半部是按照《医疗器械生产质量规范附录无菌医疗器械》所规定条款制定的检查指导。

R2A琼脂培养基适用性检查方案

R2A琼脂培养基适用性检查方案文件编号：VP-QC-2015-05

起草人：

审核人：

批准人：

批准日期：年月日

1 概述1

2 验证目的及范围1

3 验证小组人员组成及职责1

4 验证依据2

5 验证前准备2

6 验证的实施2

7 偏差处理5

8 验证数据及评估5

9验证报告及评审5

10 再验证及周期5

11 验证文件及归档5

12 附件5

1 验证目的及范围

2015版《中华人民共和国药典》中规定纯化水的微生物限度检查采用的培养基为R2A 琼脂培养基。为了保证纯化水微生物限度检查的准确性和可靠性，需对该R2A琼脂培养基进行适用性检查实验。

2 验证方法

照2015版药典非无菌产品产品微生物限度检查：微生物计数法（通则1105）中“计数培养基适用性检查”的胰酪大豆胨琼脂培养基的适用性检查方法进行，试验菌株为铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌，应符合规定。

3.验证小组人员组成及职责：

验证小组由以下部门人员组成：质量部、QC、生产部。

验证小组组成及职责列表

4 验证接受标准

被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在~2范围内，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致；

被检液体培养基管与对照培养基管比较，试验菌应生长良好。

5.验证前准备

验证人员培训：验证报告起草人有责任在方案批准后（且在验证实施前）对本次验证相关人员进行培训。培训人员记录见附件1。

将所有的平皿和稀释剂都应该严格按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没有影响。

确认仪器仪表设施经过确认和校验，并填写确认记录。

仪器设备

DHG型电热恒温鼓风干燥箱、BSC-100-II-B2生物安全柜、WXQI-S-18SI自动手提式灭菌器、DK型电热恒温水浴锅、HWS型恒温恒湿箱（30～35℃）、JA2003N电子天平、PHS-3C型PH计、SHP-3C型低温生化培养箱（20～25℃）、YJ-875SDB型净化操作台。

注射液无菌检查的方法学验证方案

注射液无菌检查的方法学验证方案注射液的无菌性是医疗领域中最为重要的质量指标之一。为了确保注射液的无菌性，需要进行方法学验证方案。本文将介绍一种常见的注射液无菌检查方法学验证方案，确保验证结果准确可靠。

一、验证目的

本验证方案旨在验证注射液无菌性检查的方法学准确性和可靠性。通过验证，可以确保注射液无菌性检查的结果符合预期，并为其他类似检查提供参考。

二、验证对象

本验证方案适用于各类注射液无菌性检查方法，包括但不限于常规培养法、膜过滤法、试管法等。

三、验证步骤

1. 制定验证计划：明确验证的目标、方法和时间安排等。

2. 准备样品和试剂：收集需要验证的样品和所需试剂，并确认其质量符合要求。

3. 合理布局实验室：确保实验室环境符合无菌实验要求，避免干扰因素的存在。

4. 实验操作：

a) 样品准备：按照标准操作程序，制备样品，确保操作无菌。

b) 检测方法操作：按照所选的检测方法，依次进行实验，确保操

作无误。

c) 平行实验：为了验证结果的可重复性，进行平行实验，确保结

果一致。

5. 结果分析：根据实验结果进行数据统计和分析，得出结论。

6. 结果确认：将验证结果与预期目标进行比较，确认验证是否合格。

7. 编写验证报告：将整个验证过程、操作方法和结果总结编写成验

证报告。

四、验证要求

1. 严格遵守无菌技术操作规范。

2. 注射液样品的选择应具有代表性和典型性。

3. 实验室环境应符合无菌要求，避免外界干扰。

4. 检测方法的选择应根据实际情况和需求进行。

5. 实验操作过程要规范、准确，确保每个步骤符合方法要求。

6. 结果分析要科学、客观，数据统计要准确无误。

4无菌检验方法验证

无菌检验方法验证
溶解： —— 验证所用溶液、助溶剂和水浴助溶温度对微生物生长无影响。
乳化：—— 验证所用乳化剂和水浴助溶温度的有效性、使用量及对微生物生长无影响。
破乳：—— 验证所用破乳剂的有效性、使用量及对微生物生长无影响。
萃取：—— 验证有机相选择的合理性、有效性及对微生物生长无影响
稀释：—— 验证降低供试品相对抑菌浓度的有效稀释倍数。
离心：—— 验证所用转速、时间和微生物的分YO布UR情SIT况E H。ERE
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3、确定供试品是否有抑菌性、抑什么菌方法一：可通过查阅临床药物实验手册、文献资料（特别是杂志“Drug”，每一种新药上市，都有专门的综述）、申报资料中的药效学资料，关注其对不同细菌的MIC情况、参考已经验证过的品种、抗菌药物可根据抗菌谱确定其敏感菌、中成药如果抗菌谱不清楚，至少需选择一株细菌和一株真菌来试验等方法。也可直接通过验证实验确定之。
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无菌检验方法验证
1.ONE
开展验证的思路和程序
首先了解供试品是否具有抑菌性，抑什么菌
2.TWO
考虑和选择出适当的方法已消除或减低供试品的抑菌性
3.three 4.four
用实验证明你所用的方法已消除抑菌性——能使人工加入的各种菌生长良好。
将所作实验记录在案——即为确认该供试品在该检验量

2015版药典培养基适用性验证

培养基验证文件

验证文件名称验证文件编码计数培养基适用性检查验证方案TS-YZ-2522-01

制药有限公司

验证立项申请表

验证立项题目计数培养基适用性检查的验证立项编号TS-YZ-2522-01验证形式验证

立项部门质量部申请日期年月日验证对象计数培养基适用性

验证目的及验证内容

需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌数测定。

主管部门

审核意见

同意对计数培养基适用性检查试验方案进行验证。

年月日

对验证方案的编制及实施要求验证方案编制应科学，合理，方法应切实可行，实施必须按照方案进行。

验证总负

责人批准

经审核批准对计数培养基适用性检查进行验证。

签字：年月日

验证方案的审批

起草部门签名日期化验室

质量部

批准部门签名日期质量部

验证总负责人

验证方案目录

1、概述

2、验证目的

3、验证范围

4、验证项目小组成员及职责

5、验证合格标准

6、试验材料

7、菌液制备

8、适用性检查

9、验证记录

10、验证结论及综合评价

计数培养基适用性检查的验证方案

1. 验证目的：

需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌总数测定。

2. 参照标准：《中国药典》2015年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。

3. 验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。

4.验证小组人员及职责：

2015年版中国药典微生物限度检查方法验证

人工牛黄甲硝唑胶囊微生物限度检查方法验证方案起草部门：QC组签名：日期：

审核

部门：QC组签名：日期：

部门：质量部签名：日期：

批准质量负责人签名：日期：

质量部颁发本文件根据需要应分发于以下部门：

01 质量部

下表用于记录修订/变更主要内容及历史。

文件编号修订原因修订日期TS-VP-4201-00 按GMP（2010年修订版）要求新制定2015.10.22

1. 概述

2. 验证目的和范围

3. 组织及职责

4. 验证进度计划表

5. 验证所需要的仪器设备及相关文件的确认

6. 验证所需要的菌种、培养基、检验样品的确认

7.验证项目和验证方法

7.1试验菌株

7.2需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌总数检查方法验证的菌液制备

7.3需氧菌总数检查、霉菌和酵母菌总数检查方法验证--常规倾注平皿法7.4需氧菌总数检查方法验证—离心沉淀-薄膜过滤法

7.5控制菌检查方法验证—离心沉淀-薄膜过滤法

8.偏差与漏项控制

9.验证报告会审

1. 概述

我公司生产品种人工牛黄甲硝唑胶囊，产品微生物限度检查项目为需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、以及大肠埃希菌检查和沙门菌检查。参照《中国药典》2015版四部附录1105：微生物计数法，以及1106：控制菌检查法的规定，本公司对该产品的微生物限度检查方法予以验证。通过验证以确认所采用的微生物限度检查方法适用。

人工牛黄甲硝唑胶囊处方中含有甲硝唑、人工牛黄以及常用辅料成分，文献资料介绍甲硝唑对细菌有抑菌特性，对霉菌和酵母菌无抑菌活性。甲硝唑在水中微溶，可以通过离心沉淀-薄膜过滤法去除其对微生物生长的影响。本验证方案通过试验菌株的回收率测试，首先确认常规倾注平皿法是否适用于本品的微生物限度检查；如常规倾注平皿法不适用，则进一步验证可去除供试品抑菌物质的离心沉淀-薄膜过滤法是否适用于本品的微生物限度检查。

医疗器械生产质量管理规范附录-无菌医疗器械（2015年第101号公告）

医疗器械生产质量管理规范附录-无菌医疗器械（2015年第

101号公告）

附件

医疗器械生产质量管理规范附录

无菌医疗器械

第一部分范围和原则

1.1 本附录是对无菌医疗器械生产质量管理规范的特殊要求。

1.2 无菌医疗器械生产须满足其质量和预期用途的要求，最大限度地降低污染，并应当根据产品特性、生产工艺和设备等因素，确定无菌医疗器械洁净室（区）的洁净度级别，以保证医疗器械不受污染或能有效排除污染。

第二部分特殊要求

2.1 人员

2.1.1 凡在洁净室（区）工作的人员应当定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业等方面培训。临时进入洁净室（区）的人员，应当对其进行指导和监督。

2.1.2 应当建立对人员的清洁要求，制定洁净室（区）工作人员卫生守则。人员进入洁净室（区）应当按照程序进行净化，并穿戴工作帽、口罩、洁净工作服、工作鞋。裸手接触产品的操作人员每隔一定时间应当对手再次进行消毒。裸手消毒剂的种类

应当定期更换。

2.1.3 应当制定人员健康要求，建立人员健康档案。直接接触物料和产品的人员每年至少体检一次。患有传染性和感染性疾病的人员不得从事直接接触产品的工作。

2.1.4 应当明确人员服装要求，制定洁净和无菌工作服的管理规定。工作服及其质量应当与生产操作的要求及操作区的洁净度级别相适应，其式样和穿着方式应当能够满足保护产品和人员的要求。洁净工作服和无菌工作服不得脱落纤维和颗粒性物质，无菌工作服应当能够包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物。

2.2 厂房与设施

2.2.1 应当有整洁的生产环境。厂区的地面、路面周围环境及运输等不应对无菌医疗器械的生产造成污染。行政区、生活区和辅助区的总体布局应当合理，不得对生产区有不良影响。厂区应当远离有污染的空气和水等污染源的区域。