替考拉宁的高效液相色谱分析方法
HPLC法测定替考拉宁组分和有关物质
种 >* 配成的流动相虽都能分离 !"#$% L !"#$/ 的五个 组分， 但要使前后杂质峰很好分离， 且峰形尖锐符合要 求， 选择 >*54 8 较适宜。 !" $" $ 流动相配比选择 配制流动相中乙腈含量为 试验结果证明选择 #/M 、 #?M 、 +8M 、 +#M 的不同比例， 乙腈配比为 +8M 较好。 !" $" % 磷酸二氢钠浓度选择 配制 DF*# C). 在流动 相 中 浓 度 分 别 为 84 8%、 84 8%/、 84 8#、 84 8#/、 84 8+/、 选 择 DF*# C). 浓 度 为 84 8/6:; < = 的 试 验 结 果 证 明 ，
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分析与质控
文章编号： /44/JBCBI 2 -44C 3 40J4/B1J40
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"#$% 法测定替考拉宁组分和有关物质
杨红 秦川萍
（中国医药集团四川抗菌素工业研究所， 成都 C/44*/ ） 摘 要：目的 建立 替考拉 宁组分和 有关物 质测定 的 9:;< 法。方 法 （-44>> O 1P C>>Q /4 #>） 使 用 M?N </B 柱 Q 流 动相为 替考拉宁在浓度 D4 7 104 #E F >’ 内与峰面 该方法快速、 简便、 准确， 可用于替考拉宁组
替考拉宁和万古霉素高效液相色谱手性固定相的研究
替考拉宁和万古霉素高效液相色谱手性固定相的研究
刘金月;苏鹏;祝金艳;艾萍;袁黎明
【期刊名称】《化学研究》
【年(卷),期】2022(33)2
【摘要】分别使用四种不同的方法将替考拉宁和万古霉素键合在硅胶表面,制备了八种不同的高效液相色谱柱固定相,并在反相模式和极性有机相模式下考察了这八种手性柱的性能。
实验表明,固定相制备方法的不同和色谱条件的改变对色谱柱拆分性能有一定的影响,不相同的键合臂,能拆分的对映异构体可能不一样,这些柱之间具有一定的互补性。
八种手性固定相均有一定的手性拆分效果,特别是对α-氨基酸及其衍生物具有较好的手性识别能力,所制备的手性柱可用在高效液相色谱法拆分手性化合物中。
【总页数】7页(P136-142)
【作者】刘金月;苏鹏;祝金艳;艾萍;袁黎明
【作者单位】云南师范大学化学化工学院
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7
【相关文献】
1.高效液相色谱-串联质谱测定猪肉中万古霉素、去甲万古霉素和替考拉宁
2.高效液相色谱手性固定相的研究Ⅴ——二肽叔丁酰胺型手性固定相拆分α-氨基酸、二茂铁基氨基酸及二肽衍生物对映异构体
3.替考拉宁高效液相色谱手性固定相的制
备研究4.高效液相色谱手性固定相的研究Ⅳ.(L,L)-二肽叔丁酰胺型手性固定相拆分α-氨基烃基膦酸衍生物对映异构体5.高效液相色谱手性固定相的研究Ⅵ.间隔基结构对L-缬氨酸叔丁酰胺型手性固定相拆分效果的影响
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高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用
Strait Phannaceaticgt Jouviat Vol33Nog2021菇多糖的临床抗肿瘤应用提供了一定的循证证据，然而由于研究存在一定的发表偏倚和文献质量不高的情况，本研究的结果还有待更大样本量和更高质量的RCT试验来验证。
参考文献51〕唐伏秋，涂颖，赵勇•TP与GP方案治疗老年国人晚期非小细胞肺癌疗效Mem分析〔〕•现代中西医结合杂志901592(22)：2314-24179-2〕汲晨锋,岳磊•香菇多糖的化学结构及抗肿瘤作用研究进展5〕；中国药学杂志,4015,48(18)：；39Q539.5〕陈建强•香菇多糖联合化疗对非小细胞肺癌的疗效观察〔〕•苏州大学学报(医学版)900898(2)266027.〔4〕代东•香菇多糖联合GP方案治疗非小细胞肺癌的近远期疗效及毒副反应〔J〕；现代中西医结合杂志，263,(15)：3270228, 336.5〕丁宁,黄治虎S长群，等；香菇多糖联合NP方案治疗中晚期非小细胞肺癌疗效观察5〕安徽医学961295(9)281085.-9〕蒋荣芳，谭晓明，刘卫，等.香菇多糖联合吉西他滨与顺铂治疗非小细胞肺癌效果5〕齐鲁医学杂志,4016,45(2)：；2A34.〔7〕马云,赵贤宝•香菇多糖在结直肠癌患者术后辅助化疗中的应用5〕中华中医药学刊,401591(65)：691-094.5〕石星，丁乾，杨勤•香姑多糖联合化疗在治疗晚期非小细胞肺癌的作用〔〕中国肿瘤,4067,16(11)：947048.5〕王加瑛，张元生,赵和平.香菇多糖联合化疗对非小细胞肺癌患者免疫功能的影响及疗效研究〔〕•中国医疗前沿,471069(4)：1507.〔3〕王钦，舒建波,李达君.香菇多糖联合化疗治疗晚期胃癌37例5〕当代医学907995(3)：；9A47.〔3王小红，余新民,沈祝苹，等.香菇多糖联合化疗对晚期结肠癌患者的临床疗效5〕中国医药导报,4014917)：95O9.〔2〕王小龙，徐彬•香菇多糖联合化疗治疗胃癌临床观察〔〕〕•现代中西医结合杂志,4016,16(9)：384A085.〔3〕汲晨锋，岳磊.香菇多糖的化学结构及抗肿瘤作用研究进展〔〕•中国药学杂志,20；98(；)：15370537.〔14〕吴雷元•香菇多糖联合长春瑞滨、顺铂治疗老年晚期非小细胞肺癌临床观察〔〕中外医疗,4079,48(35)：77O7.〔3〕翟艳.晚期结肠癌患者应用香菇多糖与化疗治疗的临床效果观察〔〕•中国实用医药,4015,(8):20-27.〔3〕张才友，谢传华,康昭洵，等•香菇多糖联合GP方案治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察〔J〕.齐齐哈尔医学院学报,2014,35(2)：164Q95.-3〕香菇多糖联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌5〕；中国肿瘤生物治疗杂志,4079,16(5)225025.〔3〕张华.香菇多糖联合化疗治疗中晚期老年NSCLC患者临床分析〔〕•深圳中西医结合杂志,473,40(4)2405.〔19〕张金江.香菇多糖联合化疗对结直肠癌术后患者的疗效观察〔〕•中外医学研究,4015,(27)2205.-27〕赵璐.香菇多糖联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察〔〕•安徽医药S712S9(3)：399A497.〔2；赵伟.香菇多糖联合化疗治疗晚期胃癌78例疗效分析5〕医药论坛杂志,4014,55(74)：O8A3.〔22〕赵文英，陈冬云,陈景华•香菇多糖联合吉西他滨+顺铂方案一线治疗晚期非小细胞肺癌近期疗效与不良反应观察〔〕中国临床药理学与治疗学S7；,；(；2107.〔25〕周娜伟，焦建辉.联用香菇多糖与XELOX化疗方案治疗晚期胃癌的效果探析〔〕•当代医药论丛,4016,14(8)：34046.〔24〕申杰，苏秀兰,徐桂华，等.香菇多糖对晚期胃癌患者免疫功能的影响及临床疗效与安全性评估5〕；中国循证医学杂志,4077, 7(1)：18-P9.〔25〕赵伟.香菇多糖联合化疗治疗晚期胃癌78例疗效分析5〕医药论坛杂志,263,35(24)：O8A3.高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用王石健，夏修远*(台州市立医院，浙江台州315002)摘要：目的建立高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁血药浓度，用于临床血药浓度监测，指导临床合理用药。
替考拉宁高效液相色谱手性固定相的制备研究
第３０卷第６期化㊀学㊀研㊀究Ｖｏｌ．３０㊀Ｎｏ．６２０１９年１１月ＣＨＥＭＩＣＡＬ㊀ＲＥＳＥＡＲＣＨＮｏｖ．２０１９替考拉宁高效液相色谱手性固定相的制备研究李㊀丹，李㊀倩，段爱红，袁黎明∗（云南师范大学化学化工学院，云南昆明６５０５００）收稿日期：２０１９－０８－０６．基金项目：国家自然科学基金（２１６６５０２８）．作者简介：李丹（１９９５－），女，硕士研究生，主要从事分析化学研究工作．∗通讯联系人，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｙｕａｎ＿ｌｉｍｉｎｇｐｄ＠１２６．ｃｏｍ．摘㊀要：替考拉宁属于大环抗生素，具有半篮状结构和多个手性中心，是常见的手性识别材料，广泛应用于对映体的色谱手性分离分析．本文研究了以替考拉宁为手性识别剂，采用键合的方法制备得到９种高效液相色谱手性固定相，用于苯甘氨酸和对羟基苯甘氨酸的拆分研究，并且考察了重现性和稳定性及进样量对拆分结果的影响．实验结果表明，９种手性固定相均具有拆分苯甘氨酸及对羟基苯甘氨酸的能力．关键词：替考拉宁；手性固定相；高效液相色谱；手性分离中图分类号：Ｏ６５７．７文献标志码：Ａ文章编号：１００８－１０１１（２０１９）０６－０５９３－０６ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｃｈｉｒａｌｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅｆｏｒＨＰＬＣＬＩＤａｎ ＬＩＱｉａｎ ＤＵＡＮＡｉｈｏｎｇ ＹＵＡＮＬｉｍｉｎｇ∗ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ＹｕｎｎａｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０５００ Ｙｕｎｎａｎ ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ Ｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎｉｓａｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｗｉｔｈｈａｌｆｂａｓｋｅｔｓｈａｐｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｍｕｌｔｉｐｌｅｃｈｉｒａｌｃｅｎｔｅｒｓ．Ｉｔｉｓａｃｏｍｍｏｎｃｈｉｒａｌｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎｍａｔｅｒｉａｌａｎｄｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｈｉｒａｌｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ．Ｉｎｔｈｉｓｗｏｒｋ，９ｋｉｎｄｓｏｆｃｈｉｒａｌｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎａｓｃｈｉｒａｌｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎａｇｅｎｔｂｙｂｏｎｄｉｎｇｍｅｔｈｏｄ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔｌｙｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅａｎｄｐ⁃ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔａｌｌｔｈｅ９ｃｈｉｒａｌｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅｓｐｏｓｓｅｓｓｃａｐａｂｌｅｏｆｓｅｐａｒａｔｉｎｇｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅａｎｄｐ⁃ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎ；ｃｈｉｒａｌｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅ；ｈｉｇｈ⁃ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｃｈｉｒａｌｓｅｐ⁃ａｒａｔｉｏｎ㊀㊀手性是自然界中一种普遍存在的现象，是自然界的基本属性之一［１］．手性问题主要涉及到材料㊁药物㊁催化剂㊁食品添加剂㊁农业化学等领域［２－４］．手性药物虽有相同的理化性质，但生物活性和药理作用等方面却存在差异，甚至表现出截然相反的效果［５］．例如，沙利度胺，其中的Ｒ构型具有镇静止呕的作用，而Ｓ构型则致使婴儿畸形．由此可见，将外消旋化的化合物拆分为单手性异构体，并研究其单一手性化合物的生理学㊁毒理学及药理学的工作是十分有必要的［６］．医药上，大部分药物都具有手性［７］．如对羟基苯甘氨酸㊁苯甘氨酸都属于外消旋药物，它们中的一种单体是生产头孢克罗㊁阿莫西林㊁苯咪唑青霉素等β⁃内酰氨类抗生素的重要中间体．抗生素具有抑菌或杀菌作用，且中国是抗生素类药物的消费大国，生产抗生素的厂家需要大量的苯甘氨酸和对羟基苯甘氨酸的对映体．因此拆分对羟基苯甘氨酸和苯甘氨酸会极大地推动医疗和化工科研水平．替考拉宁是一种糖肽类大环抗生素［８－９］，又称肽可霉素，其结构上含有羟基㊁羧基㊁氨基等多种官能团及孔穴结构，并具有良好的立体选择性．于１９７８年被ＰＡＥＮＴＩ发现，它是继万古霉素后一种非常有效的手性识别材料．目前已有文献［１０－１１］报道将异氰酸酯作为键合臂制备了替考拉宁手性固定相．随着手性药物工业的快速发展，研究专属型的手性色谱分离柱越来越重要．本文参照文献［１２－１４］制备万古霉素手性固定相的方法，分别使用１，６⁃己二异氰酸酯㊁２，４⁃甲苯二异氰酸酯㊁３⁃异氰酸酯基丙基三乙５９４㊀化㊀学㊀研㊀究２０１９年氧基硅烷㊁４，４ᶄ⁃二苯基甲烷二异氰酸酯㊁对甲基苯基异氰酸酯㊁间甲基苯基异氰酸酯为键合臂［１５］制得了９种高效液相色谱手性固定相，用于分离对羟基苯甘氨酸与苯甘氨酸［１６］，并与衍生物固定相进行了分离性能的比较，同时还研究考察了色谱条件对手性色谱柱分离性能的影响．１㊀实验部分１．１试剂和仪器１，６⁃己二异氰酸酯（ＨＤＩ）㊁２，４⁃甲苯二异氰酸酯（ＴＤＩ）㊁３⁃异氰酸酯基丙基三乙氧基硅烷（ＩＰＴＳ）㊁４，４ᶄ⁃二苯基甲烷二异氰酸酯（ＭＤＩ）㊁对甲基苯基异氰酸酯㊁间甲基苯基异氰酸酯㊁３⁃氨丙基三乙氧基硅烷（上海阿达马斯（Ａｄａｍａｓ）试剂公司）；甲苯㊁吡啶㊁Ｎ，Ｎ⁃二甲基甲酰胺（ＤＭＦ）㊁丙酮㊁乙醇㊁盐酸㊁甲醇㊁二氯甲烷㊁乙醚㊁正己烷（均为分析纯，风船化学试剂有限公司）；甲醇㊁乙醇（均为色谱纯，ＴＥＤＩＡ试剂公司）；对羟基苯甘氨酸㊁苯甘氨酸（美国Ｆｌｕｋａ公司和日本ＴＣＩ公司）；替考拉宁（苏州法母进出口有限公司）；ＹＱＧ型球形硅胶（粒径：５μｍ，中国青岛美高化工有限公司）；超纯水（由ＥＬＧＡＬａｂＷａｔｅｒ提供）．实验仪器列于表１中．表１㊀实验仪器Ｔａｂｌｅ１㊀Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ仪器名称仪器型号厂家高效液相色谱仪紫外⁃可见检测器ＵＶ２３０Ⅱ输液泵Ｐ２３０Ⅱ柱温箱ＡＴ⁃３３０ＥＣ２００６色谱工作站ＥＣ２００６依利特公司不锈钢液相色谱空柱２５０ｍｍˑ２．０ｍｍｉ．ｄ美国Ａｌｌｔｅｃｈ公司液相色谱匀浆法装主机１６６６型美国Ａｌｌｔｅｃｈ公司电子天平ＡＬ２０４梅特勒⁃利托多仪器有限公司电热鼓风干燥箱ＤＨＧ⁃９０３５Ａ上海一恒科学仪器有限公司台式低速离心机ＴＤＺ５⁃ＷＳ湘仪公司ｐＨ测量仪雷磁ＰＨＳ⁃２５上海精密科学仪器有限公司自动双重蒸馏水器ＳＺ⁃９３Ａ上海亚荣生化仪器厂超声波清洗仪ＡＳ３１２０天津奥特赛恩斯仪器有限公司１．２㊀手性固定相的制备１．２．１㊀活化硅胶将１０ｇ硅胶在Ｎ２保护下加入１０％的１２５ｍＬ盐酸，于１００ħ回流反应１２ｈ，产物用蒸馏水洗涤直至中性，于１００ħ干燥．１．２．２㊀氨丙基化硅胶将４ｇ已活化过的硅胶在Ｎ２保护下分别依次加入５０ｍＬ无水甲苯，１ｍＬ无水吡啶，１ｍＬ３⁃氨丙基三乙氧基硅烷，于１１０ħ回流反应２４ｈ，产物离心分离，依次用乙醚㊁丙酮㊁正己烷洗涤，最后在６０ħ下干燥．１．２．３㊀替考拉宁手性固定相制备替考拉宁手性固定相ＣＳＰ⁃Ａ㊁ＣＳＰ⁃Ｄ㊁ＣＳＰ⁃Ｇ㊁ＣＳＰ⁃Ｉ的合成具体步骤参考文献［１１－１３］合成．所有反应均在Ｎ２保护下进行．ＣＳＰ⁃Ａ的具体步骤：把１０ｍＬＤＭＦ加入到２．５ｇ氨丙基化硅胶中，再加入５．０ｍＬＭＤＩ，于１００ħ回流反应３．５ｈ．用ＤＭＦ洗涤３次并烘干，再与０．６ｇ替考拉宁（用２０ｍＬＤＭＦ溶解）混合，在１０５ħ反应２０ｈ．产物先用ＤＭＦ洗涤过滤，再依次用丙酮㊁乙醇㊁稀盐酸㊁体积比为１ʒ１的甲醇水混合液㊁甲醇洗涤，于６０ħ真空干燥．ＣＳＰ⁃Ｄ固定相制备过程和方法与ＣＳＰ⁃Ａ的制备原理相似，是将ＭＤＩ换成ＴＤＩ，制得ＣＳＰ⁃Ｄ．ＣＳＰ⁃Ｇ的具体步骤：把５０ｍＬ干燥甲苯加入到３．０ｇ氨丙基化硅胶中，置于冰浴中，再加入２．５ｍＬＨＤＩ搅拌１５ｍｉｎ，后于７０ħ条件下反应２ｈ．用干燥甲苯洗涤３次，再与１．０ｇ替考拉宁混合溶解在１００ｍＬ吡啶中，在７０ħ下反应１２ｈ．产物分别用５０ｍＬ吡啶㊁水㊁甲醇㊁乙腈㊁二氯甲烷离心洗涤，于７０ħ减压干燥２ｈ．替考拉宁ＣＳＰ⁃Ｉ的具体步骤：在１００ｍＬ干燥的吡啶中加入０．６ｇ干燥的替考拉宁，搅拌５ｍｉｎ，再滴加适量的ＩＰＴＳ，于７０ħ反应１ｈ．再把产物与２．２ｇ活化过的硅胶混合，于７０ħ反应１２ｈ，二次产物依次用吡啶㊁ＤＭＦ㊁甲醇㊁蒸馏水㊁丙酮离心洗涤数次，最后于８０ħ干燥．１．２．４㊀替考拉宁衍生物固定相的制备替考拉宁衍生物固定相为ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ㊁ＣＳＰ⁃Ｅ㊁ＣＳＰ⁃Ｆ㊁ＣＳＰ⁃Ｈ．ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ具体步骤：把替考拉宁ＣＳＰ⁃Ａ分别与过量的对氯苯基异氰酸酯㊁间甲基苯基异氰酸酯在第６期李㊀丹等：替考拉宁高效液相色谱手性固定相的制备研究５９５㊀１２０ħ的干燥吡啶溶液中反应２ｈ，冷却至室温，再分别用吡啶㊁水㊁甲醇㊁丙酮㊁二氯甲烷等洗涤，６０ħ干燥，制得替考拉宁衍生物ＣＳＰ⁃Ｂ与ＣＳＰ⁃Ｃ．ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ合成路线见图１：图１㊀ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ制备原理Ｆｉｇ．１㊀ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＣＳＰ⁃ＢａｎｄＣＳＰ⁃Ｃ㊀㊀ＣＳＰ⁃Ｅ㊁ＣＳＰ⁃Ｆ固定相制备过程和方法与图１中ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ制备原理相似，将其中的ＣＳＰ⁃Ａ换为ＣＳＰ⁃Ｄ与过量的对氯苯基异氰酸酯得到ＣＳＰ⁃Ｅ，与间甲基苯基异氰酸酯反应得到ＣＳＰ⁃Ｆ．ＣＳＰ⁃Ｈ固定相制备过程和方法与图１中ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ制备原理相似，将其中的ＣＳＰ⁃Ａ换为ＣＳＰ⁃Ｇ与过量的对氯苯基异氰酸酯反应得到．１．３㊀色谱柱的填充采用高压匀浆法对色谱柱进行填充，取制备好的替考拉宁或衍生物的固定相１．０ｇ，加入２３ｍＬ甲醇形成悬浮液，甲醇为顶替液，在５０ＭＰａ装柱．在接柱之前，高效液相色谱仪用甲醇为流动相在０．１ｍＬ／ｍｉｎ的流速冲洗色谱柱至基线平稳．１．４㊀色谱条件实验中所采用的流动相分别为：甲醇㊁甲醇⁃水（６ʒ４，体积比）㊁乙醇⁃水（６ʒ４，体积比）；流速：０．１ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：２５ħ；检测波长：２３０ｎｍ．２㊀结果与讨论２．１㊀手性固定相的元素分析表征为了观察９种手性固定相的键合情况，取一定量的活化硅胶㊁氨丙基化硅胶㊁９种手性固定相进行元素分析和傅立叶红外表征．元素分析结果列于表２中．表２㊀元素分析结果Ｔａｂｌｅ２㊀Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｅｌｅｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓ分析物Ｎ／％Ｃ／％Ｈ／％活化硅胶０＜０．５０．６４氨丙基化硅胶２．５０４．０９１．１４替考拉宁固定相Ａ３．７４１４．５１１．７４对氯苯基异氰酸酯衍生替考拉宁固定相Ｂ３．９３１５．３９１．７８间甲基苯基异氰酸酯衍生替考拉宁固定相Ｃ３．９２１５．４０１．７７替考拉宁固定相Ｄ３．０６９．２７１．５１对氯苯基异氰酸酯衍生替考拉宁固定相Ｅ３．２４１０．２２１．１９间甲基苯基异氰酸酯衍生替考拉宁固定相Ｆ３．７０１０．８１１．３２替考拉宁固定相Ｇ３．９２１３．１５２．２５对氯苯基异氰酸酯衍生替考拉宁固定相Ｈ３．９４１４．２７２．２５替考拉宁手性固定相Ｉ１．４７３．２３０．７３５９６㊀化㊀学㊀研㊀究２０１９年㊀㊀表２中氨丙基化硅胶中Ｎ㊁Ｃ㊁Ｈ元素的百分含量相比于活化硅胶都有所增加，说明氨丙基化硅胶制备成功；除了固定相Ｉ，其他的替考拉宁固定相相比于氨丙基化硅胶Ｎ㊁Ｃ㊁Ｈ元素的百分含量也增加，说明通过反应替考拉宁与氨丙基化硅胶键合成功；手性固定相Ｉ中Ｎ㊁Ｃ㊁Ｈ元素的百分含量与活化硅胶相比均有所增加，说明替考拉宁与硅胶键合成功．替考拉宁衍生物固定相的Ｎ㊁Ｃ㊁Ｈ元素的百分含量相比于替考拉宁固定相均有所增加，也说明衍生化成功．由图２红外光谱图可知，ＣＳＰ⁃Ａ㊁ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ㊁ＣＳＰ⁃Ｄ㊁ＣＳＰ⁃Ｅ㊁ＣＳＰ⁃Ｆ㊁ＣＳＰ⁃Ｇ㊁ＣＳＰ⁃Ｈ㊁ＣＳＰ⁃Ｉ与氨丙基化硅胶相比在２９３５ｃｍ－１处亚甲基的Ｃ－Ｈ伸缩振动加强，在１６５４ｃｍ－１处有很强的酰胺羰基特征吸收峰，并且吸收峰明显加强，同时在３４２２ ３５００ｃｍ－１处的峰也加强，再结合元素分析的结果可以说明替考拉宁已成功键合至硅胶上．ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ㊁ＣＳＰ⁃Ｅ㊁ＣＳＰ⁃Ｆ㊁ＣＳＰ⁃Ｈ与ＣＳＰ⁃Ａ㊁ＣＳＰ⁃Ｄ㊁ＣＳＰ⁃Ｇ㊁ＣＳＰ⁃Ｉ相比峰形变化不明显，这是因为衍生化后ＣＳＰ⁃Ｂ㊁ＣＳＰ⁃Ｃ㊁ＣＳＰ⁃Ｅ㊁ＣＳＰ⁃Ｆ㊁ＣＳＰ⁃Ｈ中产生的特征吸收峰均被替考拉宁的吸收峰掩盖了，但结合元素分析的结果说明替考拉宁固定相被成功衍生化了．ａ：活化硅胶；ｂ：氨丙基化硅胶；Ａ：ＣＳＰ⁃Ａ；Ｂ：ＣＳＰ⁃Ｂ；Ｃ：ＣＳＰ⁃Ｃ；Ｄ：ＣＳＰ⁃Ｄ；Ｅ：ＣＳＰ⁃Ｅ；Ｆ：ＣＳＰ⁃Ｆ；Ｇ：ＣＳＰ⁃Ｇ；Ｈ：ＣＳＰ⁃Ｈ；Ｉ：ＣＳＰ⁃Ｉ．图２㊀红外光谱图Ｆｉｇ．２㊀ＩＲｓｐｅｃｔｒａ２．２㊀手性柱的手性拆分能力为了测试９种替考拉宁及其衍生物的手性柱对苯甘氨酸㊁对羟基苯甘氨酸的色谱分离性能，实验主要采用甲醇㊁甲醇⁃水（６ʒ４，体积比，下同）㊁乙醇⁃水（６ʒ４）为流动相，柱温２５ħ，流速０．１ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２３０ｎｍ进行测试．实验结果表明，９种替考拉宁及其衍生物的手性柱对苯甘氨酸㊁对羟基苯甘氨酸均有一定的拆分能力，拆分结果列于表３中．主要采用甲醇㊁甲醇⁃水（８ʒ２）㊁甲醇⁃水（６ʒ４）㊁甲醇⁃水（２ʒ８）㊁乙醇㊁乙醇⁃水（８ʒ２）㊁乙醇⁃水（６ʒ４）㊁乙醇⁃水（２ʒ８）八种流动相，但甲醇⁃水（８ʒ２）㊁甲醇⁃水（２ʒ８）㊁乙醇㊁乙醇⁃水（８ʒ２）㊁乙醇⁃水（２ʒ８）这五种效果不明显，所以我们着重探究了甲醇㊁甲醇⁃水（６ʒ４）㊁乙醇⁃水（６ʒ４）三种流动相下柱Ａ㊁柱Ｂ㊁柱Ｃ㊁柱Ｄ㊁柱Ｅ㊁柱Ｆ㊁柱Ｇ㊁柱Ｈ㊁柱Ｉ拆分的情况．表３㊀苯甘氨酸㊁对羟基苯甘氨酸在柱Ａ㊁Ｂ㊁Ｃ㊁Ｄ㊁Ｅ㊁Ｆ㊁Ｇ㊁Ｈ㊁Ｉ的拆分结果Ｔａｂｌｅ３㊀Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅａｎｄｐ⁃ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅｏｎｃｏｌｕｍｎＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，ＨａｎｄＩ编号甲醇甲醇⁃水（６ʒ４）乙醇⁃水（６ʒ４）ｋ１ｋ２αＲＳｋ１ｋ２αＲＳｋ１ｋ２αＲＳ柱Ａａ１．８５４．７３２．５５２．７９１．０３２．３５２．２７２．３１１．６６３．３９２．０４２．１２柱Ａｂ１．５０３．９７２．６５２．６００．７７１．４６１．９０１．５１１．２１２．３５１．９３１．５５柱Ｂａ２．０３４．１４２．０４４．４１１．０３１．４９１．４５０．７９０．８５１．３７１．６２０．９０柱Ｂｂ１．５４３．２４２．１１２．０９０．７３１．０３１．４２０．６６０．７７１．１３１．４８０．５２柱Ｃａ１．８９４．９８２．６４２．８５１．０３１．７０１．６５０．８６０．８５１．５１１．７８１．００柱Ｃｂ１．４８５．５３３．６９１．４５０．７４１．４１１．９１１．２１０．６３１．２２１．９５０．８６柱Ｄａ１．８３４．４６２．４３４．１６０．８８１．６２１．８５２．１０１．４１２．８３２．３０２．６２柱Ｄｂ１．６０３．８２２．３９６．１５０．６１１．０３１．６８１．１５１．２７２．４９１．９６１．６０柱Ｅａ０．６８１．４０２．０７１．７０１．０４１．８１１．７３１．２６１．０８１．９０１．７６０．６４第６期李㊀丹等：替考拉宁高效液相色谱手性固定相的制备研究５９７㊀续表３编号甲醇甲醇⁃水（６ʒ４）乙醇⁃水（６ʒ４）ｋ１ｋ２αＲＳｋ１ｋ２αＲＳｋ１ｋ２αＲＳ柱Ｅｂ０．４７＿＿＿０．８１１．４０１．７３１．１４０．８９１．５０１．６８０．６４柱Ｆａ２．２３６．５０２．９２２．９５０．９２１．８７２．０４１．８００．９１２．０７２．２７１．３９柱Ｆｂ２．０９６．８２３．２５３．７９０．８０１．６２２．０１１．５８０．８３１．６８２．０３１．０５柱Ｇａ１．９６７．７４３．９５２．３１１．１０２．８８２．６２１．５７＿＿＿＿柱Ｇｂ２．６４１５．１０５．７１２．６９１．１１３．５７３．２２２．１３＿＿＿＿柱Ｈａ１．４８＿＿＿０．６６２．２３３．３９１．４４＿＿＿＿柱Ｈｂ１．５６＿＿＿０．６６２．３６３．５９１．９７＿＿＿＿柱Ｉａ３．０５８．４０２．７５３．８８１．１０１．６１１．４６１．５３１．１９２．６１２．２０２．６８柱Ｉｂ３．５１＿＿＿０．８９１．７０１．９０２．４３１．１３３．５２３．１１５．５８㊀㊀ａ代表苯甘氨酸㊁ｂ代表对羟基苯甘氨酸，ｋ１，ｋ２代表保留因子㊁α代表分离因子㊁Ｒｓ代表分离度实验㊀㊀从表３中的结果可以看出，纯有机溶剂甲醇在９根手性柱均有较好的分离能力，而随着有机溶剂的减少，分离因子相应减小，分离度有所改变．苯甘氨酸㊁对羟基苯甘氨酸在同一手性柱的同一流动相下进行分离时较为相似，但一般苯甘氨酸的保留更好，其主要是因为对羟基苯甘氨酸多了一个羟基的原因．图３是每种手性柱分别选取的一个代表性的色谱分离谱图，从拆分结果可以看出替考拉宁及其衍生物的手性柱均能有效拆分苯甘氨酸㊁对羟基苯甘氨酸．由于９种手性柱在结构及方法上的差异，所以在相同色谱条件下保留时间以及分离度都有一定的差别，于苯甘氨酸来说：ＣＳＰ⁃Ｂ（甲醇）＞ＣＳＰ⁃Ｃ（甲醇）＞ＣＳＰ⁃Ａ（甲醇）＞ＣＳＰ⁃Ｅ（甲醇）；于对羟基苯甘氨酸来说：ＣＳＰ⁃Ｄ（甲醇）＞ＣＳＰ⁃Ｉ（乙醇⁃水，体积比为６ʒ４）＞ＣＳＰ⁃Ｆ（甲醇）＞ＣＳＰＧ（甲醇）＞ＣＳＰ⁃Ｈ（甲醇⁃水，体积比为６ʒ４）．所以在实验中需要对不同的手性物质选用合适比例的流动相．（１）：苯甘氨酸；（２）：对羟基苯甘氨酸；ａ：甲醇；ｂ：甲醇⁃水（６ʒ４）；ｃ：乙醇⁃水（６ʒ４）．图３㊀拆分色谱图Ｆｉｇ．３㊀Ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ２．３㊀手性色谱柱的重现性和稳定性研究分别对柱Ａ㊁柱Ｂ㊁柱Ｃ进行重现性考察，每次进样２μＬ，手动进样４次，结果表明柱Ａ㊁柱Ｂ㊁柱Ｃ均具有好的重现性．柱Ａ㊁柱Ｂ㊁柱Ｃ的相对标准偏差对于出峰时间是０．１１％㊁０．１３％㊁０．１０％；对于峰面积是１．７３％㊁１．２１％㊁１．１６％．两个月后，再次使用该柱子分苯甘氨酸㊁对羟基苯甘氨酸的分辨率基本没有改变，说明具有好的稳定性．２．４㊀进样量对手性柱色谱分离的影响为了考察进样量对柱Ａ㊁柱Ｂ㊁柱Ｃ㊁柱Ｄ㊁柱Ｅ㊁柱Ｆ㊁柱Ｇ分离的影响，在保持其他色谱条件不变的基础上，探讨了苯甘氨酸㊁对羟基苯甘氨酸不同进样量对分离效果的影响．结果显示：随着进样量的增加，色谱峰的面积及峰高都有一定程度的增加，但是峰的保留时间会有一定的变化，当进样量大到一定程度时分离度会减小，有时也会造成色谱峰的重叠，所以实验过程中应该选择合适的进样量以达到最好的分离效果．３㊀结论以替考拉宁作为手性识别剂，通过 键合法 成功制得了９种替考拉宁及其衍生物的手性柱，它们对苯甘氨酸㊁对羟基苯甘氨酸表现出较好的分离能力．在手５９８㊀化㊀学㊀研㊀究２０１９年性分离苯甘氨酸时可以选用柱Ａ（甲醇）㊁柱Ｄ㊁柱Ｇ（甲醇⁃水，６ʒ４）㊁柱Ｉ（乙醇⁃水，６ʒ４）；手性分离对羟基苯甘氨酸时，可以选用柱Ａ（甲醇）㊁柱Ｇ（甲醇⁃水，６ʒ４）㊁柱Ｉ（乙醇⁃水，６ʒ４）．因此柱Ａ㊁柱Ｇ㊁柱Ｉ具有很大的实际应用价值．参考文献：［１］袁黎明．制备色谱技术及应用［Ｍ］．化学工业出版社，２０１１：１－１０．ＹＵＡＮＬＭ．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙＰｒｅｓｓ，２０１１：１－１０．［２］ＨＡＤＪＭＯＨＡＭＭＡＤＩＭＲ，ＨＡＳＨＥＭＩＭ．Ｃｈｉｒａｌｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｍｅｔｈａｄｏｎｅｕｓｉｎｇｓｏｌｉｄｍｅｍｂｒａｎｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｂａｓｅｄｏｎｃｈｉｒａｌｓｅｌｅｃｔｏｒ，ｓｏｌｉｄｍｅｍｂｒａｎｅ：ｓｈｅｅｐｓｋｉｎｌｅａｔｈｅｒ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＩｒａｎｉａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ，２０１９（４０）：１－６．［３］ＫＯＮＧＸＴ，ＫＨＯＳＲＡＶＩＫＬ，ＷＡＮＧＺ，ｅｔａｌ．Ｐｈｏｔｏｔｈｅｒｍａｌｃｉｒｃｕｌａｒｄｉｃｈｒｏｉｓｍｉｎｄｕｃｅｄｂｙｐｌａｓｍｏｎｒｅｓｏｎａｎｃｅｓｉｎｃｈｉｒａｌｍｅｔａｍａｔｅｒｉａｌａｂｓｏｒｂｅｒｓａｎｄｂｏｌｏｍｅｔｅｒｓ［Ｊ］．ＮａｎｏＬｅｔｔｅｒｓ，２０１８，１８（３）：２００１－２００８．［４］龚欢，葛庆华．敞开式离子化质谱及其在体内药物分析中的应用［Ｊ］．药物分析杂志，２０１７（１）：８－１９．ＧＯＮＧＨ，ＧＥＱＨ．Ａｍｂｉｅｎｔｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓ，２０１７（１）：８－１９．［５］ＷＯＩＷＯＤＥＵ，ＲＥＩＳＣＨＬＲＪ，ＢＵＣＫＥＮＭＡＩＥＲＳ，ｅｔａｌ．Ｉｍａｇｉｎｇｐｅｐｔｉｄｅａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｃｈｉｒａｌｉｔｙｖｉａａｍｉｎｏａｃｉｄａｎａｌｙｓｉｓｂｙｃｈｉｒａｌˑｃｈｉｒａｌｔｗｏ⁃ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１８，９０（１３）：７９６３－７９７１．［６］伍鹏，汤波，路振宇，等．冠醚固定相的制备及手性拆分［Ｊ］．化学研究，２０１５，２６（１）：４９－５３．ＷＵＰ，ＴＡＮＧＢ，ＬＵＺＹ，ｅｔａｌ．Ｃｒｏｗｎｅｔｈｅｒｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅｆｏｒｃｈｉｒａｌｓｅｐａｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｅｍｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１５，２６（１）：４９－５３．［７］ＢＯＵＡＮＩＮＩＭ，ＢＥＬＢＯＵＫＨＡＲＩＮ，ＭＥＮＥＮＤＥＺＪＣ，ｅｔａｌ．Ｃｈｉｒａｌｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌｉｍｉｎｏｎａｒｉｎｇｅｎｉｎｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ，２０１８，３０（４）：４８４－４９０．［８］ＡＬＢＯＲＺＩＳ，ＰＯＯＲＤＡＳＴＴ，ＡＳＫＡＲＹＥ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎｏｎｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｍａｒｋｅｒｓａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓｉｎｐｏｓｔｓｕｒｇｉｃａｌｆｏｌｌｏｗ⁃ｕｐｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ：ａｄｏｕｂｌｅ⁃ｂｌｉｎｄｅｄｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｐｌａｃｅｂｏ⁃ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌ［Ｊ］．ＡｒｃｈｉｖｅｓｏｆＧｙｎｅｃｏｌｏｇｙａｎｄＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓ，２０１９：１－８．［９］李缓，陈奎，王园，等．高效液相色谱法测定怀山药中反式Ｎ⁃ｐ香豆酰酪胺的含量［Ｊ］．化学研究，２０１８，２９（３）：２４１－２４４．ＬＩＨ，ＣＨＥＮＫ，ＷＡＮＧＹ，ｅｔａｌ．ＨＰＬＣｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓ⁃Ｎ⁃ｐ⁃ｃｏｕｍａｒｏｙｌｔｙｒａｍｉｎｅｉｎＤｉｏｓｃｏｒｅａｏｐｐｏｓｉｔａＴｈｕｎｂ［Ｊ］．ＣｈｅｍｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１８，２９（３）：２４１－２４４．［１０］施俊庆，段爱红，袁黎明．高效液相色谱的８种商品手性柱对５２种手性化合物的拆分研究［Ｊ］．分析试验室，２０１７，３６（６）：２９－３５．ＳＨＩＪＱ，ＤＵＡＮＡＨ，ＹＵＡＮＬＭ．Ｅｎａｎｔｉｏｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓｏｆ５２ｒａｃｅｍａｔｅｓｏｎｅｉｇｈｔｃｈｉｒａｌｃｏｌｕｍｎｓｉｎｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎａｌｙｓｉｓＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，２０１７，３６（６）：２９－３５．［１１］ＺＨＡＮＧＪＹ，ＳＵＮＪＹ，ＬＩＵＹＲ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄｃｅｌｌｕｌｏｓｅ⁃ｂａｓｅｄｃｈｉｒａｌｐａｋＩＣｃｈｉｒａｌｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅｆｏｒｅｎａｎｔｉｏｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｅｉｇｈｔｉｍｉｄａｚｏｌｅａｎｔｉｆｕｎｇａｌｄｒｕｇｓｉｎｎｏｒｍａｌ⁃ｐｈａｓｅ，ｐｏｌａｒｏｒｇａｎｉｃｐｈａｓｅａｎｄｒｅｖｅｒｓｅｄ⁃ｐｈａｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｕｓｉｎｇｈｉｇｈ⁃ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉａ，２０１９，８２（３）：６４９－６６０．［１２］孟晓荣，史玲，周华凤，等．万古霉素手性固定相的制备与对映体分离研究［Ｊ］．色谱，２００５，２３（３）：２４７－２５０．ＭＥＮＧＸＲ，ＳＨＩＬ，ＺＨＯＵＨＦ，ｅｔａｌ．ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＶａｎｃｏｍｙｃｉｎｃｈｉｒａｌｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅａｎｄｓｔｕｄｙｏｆｒａｃｅｍａｔｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，２００５，２３（３）：２４７－２５０．［１３］沈报春．大环抗生素及其衍生物手性固定相的研制［Ｄ］．杭州：浙江大学，２００６．ＳＨＥＮＢＣ．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｃａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｃｈｉｒａｌｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅｓａｎｄｓｔｕｄｙｏｆｅｎａｎｔｉｏｎｍｅｒｓｓｅｐａｒａｔｉｏｎ［Ｄ］．Ｈａｎｇｚｈｏｕ：ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００６．［１４］丁国生，丛润滋，王俊德．去甲万古霉素键合手性固定相在反相条件下拆分氨基酸类衍生物［Ｊ］．分析化学，２００４，３２（５）：６０６－６１０．ＤＩＮＧＧＳ，ＣＯＮＧＲＺ，ＷＡＮＧＪＤ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｎｏｒｖａｎｃｏｍｙｃｉｎｃｈｉｒａｌｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅｆｏｒｔｈｅｅｎａｎｔｉｏｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｄｅｒｉｖｅｄａｍｉｎｏａｃｉｄｓｏｎｒｅｖｅｒｓｅｄｐｈａｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００４，３２（５）：６０６－６１０．［１５］张美，张茶，刘涵，等．手性金属⁃有机骨架材料用于高效液相色谱手性分离性能的研究［Ｊ］．化学研究，２０１８，２９（３）：２６４－２６９．ＺＨＡＮＧＭ，ＺＨＡＮＧＣ，ＬＩＵＨ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｙｏｎｃｈｉｒａｌｍｅｔａｌ⁃ｏｒｇａｎｉｃｆｒａｍｅｗｏｒｋｆｏｒｅｎａｎｔｉｏｎｓｅｐａｒａｔｉｏｎｂｙｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＣｈｅｍｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１８，２９（３）：２６４－２６９．［１６］袁黎明，何红星，查欣，等．替考拉宁手性膜拆分对羟基苯甘氨酸的研究［Ｊ］．膜科学与技术，２０１７，３７（３）：８１－８４．ＹＵＡＮＬＭ，ＨＥＨＸ，ＺＨＡＸ，ｅｔａｌ．ＳｔｕｄｙｏｎｃｈｉｒａｌｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆＤ，Ｌ⁃ｐ⁃ｈｙｄｒｏｘｙｃｉｎｕｓｉｎｇａｎｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅｍｅｍｂｒａｎｅｏｆｔｅｉｃｏｐｌａｎｉｎ［Ｊ］．ＭｅｍｂｒａｎｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１７，３７（３）：８１－８４．［责任编辑：吴文鹏］。
注射用替考拉宁的组分分析
Ａｂ ｔａ ｔ ０ｂ ｅ ｔ ｅ Ｔ ｏ ａｅｔｅｃ ｍｐ ｎ ｎ ｏ ｔｎ ｆｔｉｏ ｌｎｎ ｆｒ ｎｅ ｔ ｎ ｐｏ ｉｅ ｙｆｕ ｓｒ ｅ ｊｃｉ ｏｃ ｍｐ ｒ ｏ ｏ ｅ ｔ ｎｅ ｔ ｃ ｐａ ｉ ｏ ｊｃｉ ｒｖｄ ｄｂ ｒ ｖ ｈ ｃ ｏ ｅ ｉ ｏ ｏ
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高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度
考拉宁的血药浓度的分析测定主要包括高效液相
色谱 (high performance liquid chromatography, HPLC )法、微生物检定法、液相色谱-串联质谱联用 法(liquid chromatography tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)和胶束电动毛细管色谱法，其中HPLC
第25卷3期
296
2019年5月
夭津医科丈芳修报
Journal of Tianjin Medical I niversitv
文章编号 1006-8147(2019)03-0296-04
高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度
\ <)1. 25. No. 3 Mav 2019
论著
张荣格S张瑞霞2，张弋2,张彦文' (1•天津医科大学药学院药物化学教研室，天津30007()；2天津市第一中心医院药学部，天津300192；3.天津 医学高等专科学校,天津300222)
关键词 替考拉宁；高效液相色谱法;血药浓度
中图分类号R9
文献标志码A
Determination of concentration of teicoplanin in plasma by HPLC
ZH AN(i Bong-ge1, ZHANC Rui-xici2. Zhang Yi2. ZHANG \ aii-wen' (1 .Department of Pharmaceutical Chemistry, School of Pharmac v,Tianjin Medical I niversitv, Tianjin 300070. Chiiui; 2.Department of Pharmacy . Tianjin First Center Hospital,Tianjin 300192. China: 3.Tianjin Medical college, Tianjin 300222. china)
超高效液相色谱法测定人血浆替考拉宁浓度
刘慧芳* ，王晓雪，陈文倩，秦 伟，张 丹，杜雯雯，李朋梅，张相林#（ 中日友好医院药学部，北京 100029）
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
中图分类号 Ｒ927. 2
文献标志码 A
DOI 10. 14009 / j．issn．1672－2124. 2020. 02. 009
文章编号 1672－2124（ 2020） 02－0166－03
Δ 基金 项 目： 中 国 药 理 学 会 药 物 研 发 与 合 理 应 用 专 项 （ No． 20170711）
* 药师。研究方向： 治疗药物监测。E-mail： liuhf22@ 126．com # 通信作者： 主任药师。研究 方 向： 治 疗 药 物 监 测，中 药临 床 药 学。E-mail： zryhyyzxl@ 126．com
ABSTＲACT OBJECTIVE： To evaluate and validate the method of ultra-high performance liquid chromatography for the determination of teicoplanin in human plasma． METHODS： Plasma samples were pretreated with 90% acetonitrileprecipitated protein，using methyl parahydroxybenzoate as an internal standard，the Waters Symmetry C18 column was adopted and 0. 01 mol / L NaH2PO4-acetonitrile （ V ∶V = 77 ∶23） was set as the mobile phase； the detection wavelength was 215 nm； the flow rate was 1. 0 ml / min； the column temperature was 35 ℃ ； the injector temperature was 4 ℃ ． ＲESULTS： Tecolanin had a good linear relationship in the range of 3. 23-103. 25 μg / ml （ r2 = 0. 999 7） ，the intra-day and inter-day precision measurements showed ＲSD were less than 15%． CONCLUSIONS： This method is fast，simple， accurate and reliable，with strong specificity and good reproducibility，which can be used for the determination of teicoplanin in plasma． KEYWOＲDS Teicoplanin； UPLC； Plasma concentration
HPLC-UV法测定人血浆中替考拉宁药物浓度的方法学研究及其临床应用
•实验研究-HPLC-UV法测定人血浆中替考拉宁药物浓度的方法学研究及其临床应用王彦改，沈芋，苏甦，王雪梅，姜德春，闫素英(首都医科大学宣武医院药学部，北京］00053)［摘要］目的：建立测定人血浆中替考拉宁浓度的高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)法，为临床个体化给药提供依据。
方法：以哌拉西林钠为内标，将400“L血浆样本采用600“L乙睛沉淀蛋白后，再用二氯甲烷萃取，采用HPLC测定，色谱柱为1{1011^［1柱(150mm x4.6mm,5|xm),流动相为水(含0.01mol-L'1磷酸二氢钾，用磷酸调pH至2.84)-乙睛(75:25,v/v),流速1.0mL-min1,柱温359,进样量20pL,检测波长为240nm。
结果：替考拉宁在3.12~100.00ng-mL-1范围内线性关系良好(疋=0.9999),定量下限为3.12ng-mL-1；日内、日间精密度的RSD为0.39%~&54%,相对偏差为-7.19%~7.00%。
血浆样岛在经历3次冻融(-209到室温)循环、49放置6d和冷冻(-409)放置21d等条件下均稳定，处理后样晶在自动进样器中(49)放置24h均稳定(RSD<15%)。
测定9例应用替考拉宁患者的血药浓度，仅有2例在有效血药浓度范围。
结论：该法操作简便、灵敏、准确，适用于替考拉宁血药浓度的测定。
［关键词］替考拉宁；HPLC-UV;方法学评价；血药浓度监测；临床应用［中图分类号］R969.4;R978.1［文献标识码］A［文章编号］1672-8157(2020)04-0226-05Validation and clinical application of HPLC-UV method for the determination of teicoplanin in human plasmaWANG Yan-gai,SHEN Qian,SU Su,WANG Xue-mei,JIANG De-chun,YAN Sxi-ymg(pepartment of P harmacy,Xuanwu Hospital,Capital Medical University,Beijing100053,China)[ABSTRACT]Objective：To establish a high performance liquid chromatography-ultraviolet(HPLC-UV)method for the determination of teicoplanin in human plasma,and provide evidence for individual therapy.Methods：The internal standard substance was piperacillin sodium.The pretreatment of plasma sample(400yL)included protein precipitation by600pL acetonitrile and extraction by dichloromethane(CH2C12).A kromasil column(150mm x4.6mm,5pm)was used.The mobile phase consisted of a mixture of0.01mol-L"1KH2PO4(pH was adjusted to2.84with H3PO4)-acetonitrile(75:25,v/v).The flow rate was1.0 mL-min1.The column temperature was set at35°C and the sample size was20pL,the detection wavelength was240nm.Results: The concentration of teicoplanin had good linear relation in the range of3.12-100.00p^g-mL'1(i?2=0.9999).The low limit of quantitation was3.12p-g-mL_1.RSD of the intra-day and inter-day precision was0.39%〜8.54%.The relative deviation was-7.19%〜7.00%.Plasma samples were stable after3freeze-thaw cycles(-20°C to room temperature),being laid at4for6days and—40七for21days.The pretreated samples were stable in the autosampler(4°C)for24h(RSD<15%).Among9patients who monitored the concentration of teicoplanin,only2of them had the concentration of teicoplanin within the effective range.Conclusion:This method was simple,sensitive and accurate,which was suitable for clinical therapeutic drug monitoring(TDM)of teicoplanin. [KEY WORDS]Teicoplanin;HPLC-UV;Method validation;Therapeutic drug monitoring;Clinical application替考拉宁对革兰阳性菌，特别是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)it成的感染有很好的疗效⑴。
高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度及其在重症感染患者中的应用
中国临床保健杂志 ２０１９年 １０月第 ２２卷第 ５期 ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＨｅａｌｔｈｃ，Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１９，Ｖｏｌ．２２，Ｎｏ．５
高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度 及其在重症感染患者中的应用
·论著·
晨迪１，杨昭毅２，沈爱宗２，张圣雨２，苏丹２，宁丽娟２，杨本军２
［１．安徽中医药大学药学院，合肥 ２３００３１；２．中国科学技术大学附属第一医院（安徽省立医院）药剂科］
［摘要］ 目的 建立高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定替考拉宁血药浓度的方法，为重症感染患者合理使用替 考拉宁，制定个体化抗感染给药方案奠定基础。方法 建立及采用高效液相色谱法测定重症患者替考拉宁血 药浓度，以谷浓度为参考值分析浓度分布情况。结果 替考拉宁在 ３．１１４～９９．６５０μｇ／ｍＬ范围内线性良好，标 准曲线回归方程为 ｙ＝０．０３Ｘ＋０．００４，ｒ＝０．９９９８。批内、批间精密度 ＲＳＤ均小于 １５％；准确度均在 ９８．２６％ ～ １１１．５４％之间，定量下限为 ３．１１４μｇ／ｍＬ。共 ２３例患者，４６例次监测结果纳入研究；两次采血点的达标率分别 为 ５６．５２％和 ４７．８３％。结论 替考拉宁在实际临床中谷浓度达标率低，个体差异大，建议在必要时通过血药浓 度监测，使其维持安全有效的血药浓度。
替考拉宁属于糖肽类抗菌药物，可用于治疗各 种严重的革兰阳性菌感染，包括不能用青霉素类及 头孢菌素类抗生素治疗或用上述抗生素治疗失败的 严重葡萄球菌感染，或对其他抗生素耐药的葡萄球 菌感染。替考拉宁于 ２０００年 １２月进入国内，因其 抗菌作用强、肾毒性低等优势，临床应用日益增多， 特别是肾功能不全的老年严重感染患者。但由于其
［关键词］ 危重病人医疗；血药浓度；色谱法，液相；替考拉宁 ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２６７９０．２０１９．０５．０１１
发酵液中替考拉宁含量的HPLC法测定
发酵液中替考拉宁含量的HPLC法测定【摘要】目的建立用HPLC 法测定替考拉宁含量的方法。
方法采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)，流动相为0.02 mol/L的磷酸缓冲液(pH6.0)乙腈(75∶25)，流速1.0 ml/min，检测波长为254 nm，进样量10 μl。
结果替考拉宁在500.0~5000.0 μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9988),平均回收率为100.2% (RSD=0.14%,n=6)。
结论方法简便，结果准确，适用于该产品的质量控制。
【Abstract】ObjectiveTo establish the determination on the content of Teicoplanin in fermented broth.Methods An HPLC method was developed,C18column (250 mm×4.6 mm,5 μm) was used, and the mobile phase consisted of phosphate buffer(pH 6.0)and acetonitrile(75：25)at the flow rate of 1.0 ml/min. The detection wavelength was 254nm, and the injection volume was 10 μl. Results The linear range of Teicoplanin was 500.0~5000.0 μg/ml(r=0.9988),and the average recovery was 100.2% (RSD=0.14%, n=6). Conclusion This method is convenient and accurate,which is suitable for the quality control of this preparation.【Key words】Teicoplanin; HPLC;Content determination替考拉宁(Teicoplanin)为新型糖肽类抗生素，抗菌谱及抗菌活性与万古霉素相似，对金黄色葡萄球菌的作用比万古霉素更强，不良反应更少。
替考拉宁的高效液相色谱分析方法
替考拉宁的高效液相色谱分析方法
杨红
【期刊名称】《国外医药：抗生素分册》
【年(卷),期】1998(019)004
【摘要】替考拉宁(teicoplanin)是一个新的糖肽类抗生素,主要由5个结构近似的化合物(TA2-1、TA2-2、TA-3、TA2-4、TA2-5)组成的混合物.第 6个活性组份(TA3-1)在发酵液中未发现,但在粗品及精制品中有少量存在,该化合物是TA2的降解(水解)产物,另外替考拉宁还存在有两个亲脂性较大的类似物(RS-1,RS-2)及两个亲脂性较小的类似物(RS-3,RS-4).由于替考拉宁复杂的化学组成,建立准确、简便、快速的HPLC分析方法难度较大,有关的HPLC分析方法报道较多,以下将对HPLC 分析方法有关的实验条件及应用进行归纳总结.
【总页数】4页(P278-281)
【作者】杨红
【作者单位】国家药管理局四川抗菌素工业研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R978.12
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1.高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度 [J], 张荣格;张瑞霞;张弋;张彦文
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5.高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用 [J], 王石健;夏修远因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度
超高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度王艳红;任秋霞;赵庆国【期刊名称】《中国药物应用与监测》【年(卷),期】2018(015)004【摘要】目的:建立超高效液相色谱测定人血浆中替考拉宁的方法,为临床监测替考拉宁血药浓度调整给药方案提供方法学依据.方法:色谱柱为Zorbax SB-C18柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.1％三氟乙酸水溶液(24.2:75.8,v/v),流速0.4 mL·min-1,柱温30℃,检测波长220 nm.取患者稳态谷浓度血样,经乙腈沉淀蛋白,三氯甲烷萃取,Agilent 1290超高效液相色谱仪进行测定.结果:替考拉宁五个成分10 min内全部出峰,保留时间分别为:3.2 min、4.4 min、5.2 min、8.9 min、9.9 min,峰形对称与血浆中其它组分分离良好,线性范围2.0～80.0μg·mL-1(r=0.9998,n=7),平均提取回收率88.53％,平均方法回收率97.3％,日内和日间精密度的相对标准偏差(RSD)均小于6％.测定14例应用替考拉宁的患者,其中4例低于有效血药浓度范围.结论:该检测方法简单、快速,具有较高的灵敏性和准确性,可满足临床替考拉宁血药浓度的监测和药动学研究的要求.同时,该法有效避免了内标法合并用药时内标干扰及内标不稳定,磷酸盐作流动相对色谱柱损害大、清洗耗时等问题.【总页数】4页(P207-210)【作者】王艳红;任秋霞;赵庆国【作者单位】解放军302医院药学部,北京 100039;解放军302医院药学部,北京100039;解放军302医院药学部,北京 100039【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度 [J], 张荣格;张瑞霞;张弋;张彦文2.高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度及其在重症感染患者中的应用 [J], 晨迪;杨昭毅;沈爱宗;张圣雨;苏丹;宁丽娟;杨本军3.超高效液相色谱法测定人血浆替考拉宁浓度 [J], 刘慧芳; 王晓雪; 陈文倩; 秦伟; 张丹; 杜雯雯; 李朋梅; 张相林4.高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的血药浓度及其应用 [J], 王石健;夏修远5.全自动二维液相色谱测定替考拉宁血药浓度 [J], 马爱玲;王漪檬;张伟;马培志因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法检测替考拉宁组分及其有关物质
高效液相色谱法检测替考拉宁组分及其有关物质
付靖;刘崧;暴娜;郑煜
【期刊名称】《河北化工》
【年(卷),期】2006(29)8
【摘要】建立了替考拉宁组分及其有关物质的HPLC测定方法.色谱柱为Agilent Extend-C18柱(5 μm,4.6mm×25 0 mm),流动相为20mmol/L醋酸铵-乙腈,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254 nm.该方法对替考拉宁的5种主要组分及其有关物质能够较好地分离.该方法稳定、准确,可用于替考拉宁及其有关物质的测定.
【总页数】2页(P62-63)
【作者】付靖;刘崧;暴娜;郑煜
【作者单位】华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,050015;华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,050015;华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,050015;华北制药集团新药研究开发有限责任公司,河北,石家庄,050015
【正文语种】中文
【中图分类】O6
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2.HPLC法测定替考拉宁组分和有关物质 [J], 杨红;秦川萍
3.一种用于检测麦考酚钠含量及有关物质的高效液相色谱法 [J], 张莹;张晓梅;徐建
国;付静
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HPLC法快速检测发酵液中替考拉宁含量
HPLC法快速检测发酵液中替考拉宁含量蒋沁;倪会敏;石磊;刘进怀【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2006(18)2【摘要】目的:采用高效液相色谱法检测发酵液中的替考拉宁含量.方法:色谱柱为Discovery R C18,流动相为乙腈-0.02 mol/L乙酸铵,梯度洗脱,柱温30℃, 检测波长为277 nm.结果:替考拉宁的5个主要成分T-A2-1, T-A2-2, T-A2-3, T-A2-4和T-A2-5在0.2～1.0 mg/ml浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)分别为0.999 6、0.999 2、0.999 0、0.999 4和0.999 3.结论: 该方法具有测定方便、快捷、结果准确等特点.【总页数】3页(P21-23)【作者】蒋沁;倪会敏;石磊;刘进怀【作者单位】微生物药物国家工程研究中心,华北制药集团新药研究开发中心,石家庄,050015;微生物药物国家工程研究中心,华北制药集团新药研究开发中心,石家庄,050015;微生物药物国家工程研究中心,华北制药集团新药研究开发中心,石家庄,050015;微生物药物国家工程研究中心,华北制药集团新药研究开发中心,石家庄,050015【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.福林试剂法快速检测藤仓赤霉发酵液中赤霉酸含量 [J], 周圣骄;宋志远;聂志奎2.发酵液中透明质酸含量快速检测方法研究 [J], 陈永浩;王强3.发酵液中替考拉宁含量的HPLC法测定 [J], 张波4.SPE-HPLC法快速检测发酵液中紫杉醇的含量 [J], 李勇超;许桂芳;杨靖;孟丽5.发酵液中甘油和丁醇含量的近红外快速检测方法 [J], 赵昇; 王晓荣; 张进明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
替考拉宁血药浓度测定方法学初步方案
替考拉宁血药浓度测定方法学初步方案
1．色谱条件：流动相二水合磷酸二氢钠：乙腈=72:28，pH=2.05 流速1ml/min
柱温30度
监测波长240nm
2. 标准品配置：替考拉宁标准溶液2.2mg/L
3.血浆样本前处理：精密吸取血清样品0.20ml，加入300μl乙腈，混悬20s，离心（10000r/min,5min）,取上清液300μl，加入氯仿200μl，混漩20s，离心（10000r/min,5min），取上清液20μl进样
4.专属性实验：分别取空白血清，患者血清+内标，替考拉宁标准品+内标+空白血浆三类样本，考察血清内杂质峰对替考拉宁的干扰
5.建立标准曲线
按样品预处理的方法，加入不同浓度的替考拉宁溶液_______，使其血清浓度为5，10,20,40,80,100mg/L，加入空白血清______μl，加内标（）,总体积____-μl
6.提取回收率
取高、中、低3个浓度标准品，分别加入空白血浆+内标，稀释溶剂+内标，配置成终浓度__________________样品，每个浓度各5份，进行记录峰面积，计算回收率
回收率=
7.精密度实验
取高、中、低3个浓度标准品，分别加入空白血浆+内标配置成终浓度_______________样品，重复测定5次，连续3天，进行日内及日间精密度计算
8.稳定性实验将浓度为5,20,80的替考拉宁血清样品若干份，分别置于室温放置稳定性（12H），长期冷冻稳定性（-20度保存15,30天），
冻融稳定性（反复冻融3次），9,。
检测限和定量限。
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国外医药抗生素分册１９ 年７ ８ 月第ｌ 卷第４ ９ ９ 期
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替考拉宁及水解产物混合物的Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ梯度
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组分 ， 有时只对２ 个主峰作测定， ～３ 但仍在临床 药动学研究中广泛采用。
４ 检测 器
主要用 紫外 检测器， 长范围 在２ Ｏ ５ 波 １ ～２ ４ ｎ 为提高方法灵敏度 ． ｍ。 降低检测极限， 在低浓度 样时亦使用荧光检测器 （ ）方法是柱前用荧光 表２ ， 剂衍生化后， 提高梭测化 台钧的疏水性 ， 使相互问 极性降低 ， 更易分离 。 荧光检测方法灵敏度比紫外 检测提高１ 倍 ， Ｏ 检测限为０ ５ ｇｍ ， ． ￣ ／ ｌ缺点是 回收 率较低， 原因是样品中血浆蛋 白或未完全反应的 衍生试剂影响， 因而又必须用血清标准作空白较
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固相 住法
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测定血、 、 尿 发酵 液样品， Ｐ Ｃ分析前需 在Ｈ Ｌ 纯化处理 ， 除去其中的蛋白质、 碳水化合物和脂肪 等。纯化方法有亲和色谱纯化法、 固相柱 （ 法 ｃ）
和 乙腈 沉淀蛋 白质 法 。 １１ 亲和 色谱纯 化法 ．
柱 内 Ｄ— ａ ｙ — ｌｎｎ — — ｍ［ｏａ ｐｏ ｌ Ａｌｎ ｌ ａａ ［ｅ Ｅ ａ ｎ ｃ — ｒｙ
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／７ ｚ ｚ
１３ 乙腈 沉淀 蛋 白法 ．
１０ ｌ ０ｔ 血清液￣２ ０ｌ ￣ ］ ０ｉ 乙腈混合均匀沉淀蛋 ［ Ｌ １ 白质后， 离心分离 （００／ ｉ）ｍ ｎ １０ ｌ ５０ｒｍ ｎ ５ ｉ，０ｔ 上清 ￣
第 ６ 活性组份（ Ａ３１在发酵液中未发现， 个 Ｔ 一） 但 液ｂ３ Ｉ １ ｏ 硼酸盐缓冲液（．ｍ ｌ ｐ １ １稀 Ｏ ２ ｏ Ｌ，ＨＩ． ） ／ 在粗品及精制 品中有少量存在 ， 该化合物是ＴＡ 释待测“ 。 ２ ］ 的降解（ 水解） 产物 ． ］另外替考拉宁还存 在有两 ２ 固定 相
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时。在后期临床药学研究中则要求快速 、 ， 简便 由 Ｓ ｐａｏｅ Ｌ ６ ｅｈｒｓ 一Ｂ填料 先用 １ｍｌ Ｃ ０ 磷酸盐 缓冲液 此而建立了一些等度洗脱Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ方法（ ）等度 表２ （Ｈ ． ） ｐ ７ ５ 平衡 ． 随后加入２ ｌ ｍ 样品（ 标准溶液， 外 洗脱法分离度虽较差， 不能定量测定Ａ３ Ｓ等 和Ｒ 标法中产生信号峰的生物液 ， 供分析的血、 尿液样
品）再以１ Ｉ ． ｍ 磷酸盐缓冲液（Ｈ ．） ｐ ７ ５冲洗， 倍 用３ 柱体积氦（．ｒｌ ５ 的Ｎ ． Ｈ） ０５ １ ｏ ． Ｈ Ｏ 溶液解嗳替考 拉宁． 收集洗脱液 ， ．ｍｌ ８ Ｃ 调酸性。该 加Ｏ １ Ｈ Ｉ １ 溶液贮存于２ ￣２ ℃至少稳定２ｈ ℃可保存１ ０ １ ４ 于４ 周。此纯化样品可直接供Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ使用 。
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周扫拄法
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国外医药抗生素分册１９ 年７ ９８ 月第ｌ 卷 第４ ９ 期
替考拉宁的高效液相色谱分析方法
杨 红 综 述
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替考拉宁（ ｉ ｐ ｎ ） ｔ ｅ ｌ ｉ 是一个新的糖肽类抗 ｅｏ ａ ｎ 生素 ， 主要 由５ 结构 近 似 的化 合物 （ Ａ —、 个 Ｔ ２１ Ｔ ２２Ｔ ２３Ｔ ２４Ｔ ２５ 组成的混合物。 Ａ — 、 Ａ —、 Ａ —、 Ａ —）
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个亲脂性较大的类似物（ Ｓ １Ｒ 一） Ｒ 一， Ｓ２ 及两个亲脂 性较小的类似物（ Ｓ３ Ｒ 一） ］ Ｒ 一 ， Ｓ４ 。由于替考拉宁 复杂的化学组成 ， 建立准确、 简便、 快速的Ｈ Ｌ ＰＣ 分析方法难度较大， 有关的ＨＰ Ｃ分析方法报道 Ｌ 较多， 以下将对Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ分析方法有关的实验条件 及应用进行归纳总结。