新版GMP与快速微生物检测鉴定技术
新版GMP对微生物的要求
耐热微生物调查1：
如经过热处理后检出的微生物是芽孢类微 生物，需要将其培养并收集芽孢，测定其 耐热性，将之与验证灭菌工艺所用的生物 指示剂的耐热性进行对比。
耐热微生物调查2：
如果所分类的污染菌耐热性高于生物指示 剂的耐热性，则必需使用耐热性更强的生 物指示剂对灭菌高于重新进行验证。
谢谢
高风险区洁净要求：气流形态
洁净室内气流组织的形式是在工业净化领 域最基本要求之一。
新GMP的要求： 1、洁净室验证和测试气流形态。 2、关注点：室内气体分布、温度分布、送 风和回风口的位置。
高风险区洁净要求：风速要求
新GMP的要求： GMP 第九条 A级 单向流系统在其工作区域必须均匀送风，风 速为。045±20%m/s（0.36-0.54m/s）。应 当有数据证明单向流的状态并经过验证。
50 100
5
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5
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环境监测频率：
A级环境要求在线监测
B级环境监测频率可以降低 C级、D级环境建议按照风险程度监测
环境监测频率：
A级 5μm粒子的限度从1变更为20。 A级 5μm粒子ISO 4.8级，安照ISO14644-1计算后 得到18.45个/m3 ，B级5μm粒子ISO 5级。 - 检测设备的误差 - 外界干扰因素 - FDA不测试5μm粒子
“B级”洁净环境
1、终端过滤器
2、房间和设备容易清洁 3、工艺过程和人员行为受控
4、足够的换气次数
“静态”百级， “动态”万级”。
“B级”与“C级”的异同
相同点
1、洁净室结构相同 2、都有终端HEPA 3、回风利用率低 4、与相邻低级别房间压差相同 5、依靠气锁维持压差 1、B级换气次数更多 2、B级人员服装要求更高 3、B级单位人员数量更少 4、B级环境清洁和维持的规格更高
新版GMP认证检查缺陷
新版GMP 认证检查缺陷现场检查时企业仅对202202202 批次20%的人血白蛋白进行了持续稳定考察留样，其他制品没有持续稳定考察留样。
企业稍后重新制定了稳定性考察方案，其他批次人血白蛋白及其他制品拟开展持续稳定性考察。
公司对原料、中间品和成品稳定性考察欠规范，如冻干静注人免疫球蛋白(pH4)原液、半成品的储存期确定，企业以三批成品合格为标准，以此来判断所确认原液、半成品在储存期内是否合格；新生产区试生产成品的稳定性留样方案不合理，仅选择性留样部份产品。
依据：第二百三十六条某些情况下，持续稳定性考察中应当额外增加批次数，如重大变更或者生产和包装有重大偏差的药品应当列入稳定性考察。
此外，重新加工、返工或者回收的批次，也应当考虑列入考察，除非已经过验证和稳定性考察。
物料取样间和无菌、微生物限度检查所使用的消毒剂未除菌过滤处理，无菌检查空调系统每次使用后停机，不易保持空气清洁度。
依据：第十二条质量控制的基本要求：(一)应当配备适当的设施、设备、仪器和经过培训的人员，有效、可靠地完成所有质量控制的相关活动；(二)应当有批准的操作规程，用于原辅料、包装材料、中间产品、待包装产品和成品的取样、检查、检验以及产品的稳定性考察，必要时进行环境监测，以确保符合本规范的要求；(三)由经授权的人员按照规定的方法对原辅料、包装材料、中间产品、待包装产品和成品取样；(四)检验方法应当经过验证或者确认；(五)取样、检查、检验应当有记录，偏差应当经过调查并记录；(六)物料、中间产品、待包装产品和成品必须按照质量标准进行检查和检验，并有记录；(七) 物料和最终包装的成品应当有足够的留样，以备必要的检查或者检验；除最终包装容器过大的成品外，成品的留样包装应当与最终包装相同。
轧盖、洗瓶等岗位人员对本岗位的关键控制参数不清晰。
依据：第二十七条与药品生产、质量有关的所有人员都应当经过培训，培训的内容应当与岗位的要求相适应。
除进行本规范理论和实践的培训外，还应当有相关法规、相应岗位的职责、技能的培训，并定期评估培训的实际效果。
GMP中洁净室尘埃数和微生物数的监测(药品生物检定技术课件)
沉降 菌 90mm CFU/ 4h
表面微生物
接触
55mm CFU/碟
5指手 套
CFU/ 手套
A级 3520
20
3520
20
1 1
1
1
ห้องสมุดไป่ตู้
B级 3520
29 352000 2900 10
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5
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C级 352000 2900 3520000 29000 100 50
25
－
D级 3520000 29000
不作规 不作规
6.沉降菌 用标准提及的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生 长条件下繁殖到可见的菌落数。 7.单向流 沿单一方向呈平行流线并且与气流方向垂直的断面上风速均匀的气流。与水平面 垂直的叫垂直单向流，与水平面平行的叫水平单向流。 8.置信上限（95%UCL） 从正态分布抽样得到的实际均值按给定的置信度（此处为95%） 计算得到的估计上限将大于此实际均值，则称计算得到的这一均值估计上限为置信上限。
定
定
200
100
50
－
GMP中洁净室（区）概述
GMP（good manufacturing practice for drugs），即药品生产质量管理规范，是当今国 际社会通行的药品生产和质量必须遵循的基本准则。
国家质量监督检验检疫总局和国家标准化管理委员会于2010年9月2日发布了医药工 业洁净室（区）悬浮粒子、沉降菌和浮游菌测试的国家标准－GB/T16292～16294－2010 ，该标准于2011年2月1日起正式实施。
一、基本概念
1.洁净室（区） 对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。 2.菌落 系微生物培养后，由1个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称cfu。 3.浮游菌 用标准提及的方法收集悬浮在空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长 条件下繁殖到可见的菌落数。 4.浮游菌浓度 单位体积空气中含浮游菌菌落数的多少，以计数浓度表示，单位是个/m3或个/L。 5.悬浮粒子 用于空气洁净度分级的空气悬浮粒子尺寸范围在0.1~1000μm的固体和液体粒子。
新版GMP检查的思路及检查重点
4
一、模拟检查情况
质量体系：负责质量管理、机构与人员、确认与验 证、文件管理、质量保证（第十章中除质量控制之外的 其他内容）、委托生产与委托检验、产品发运与召回、 自检。
新版GMP 检查思路及检查重点
1
2024/2/26
目录
此次模拟检查情况 申请资料的变化 现场检查方式的变化 各体系关注的重点
2
一、模拟检查情况
4月11-12日中诺接受了新版GMP的模拟检查 检查组由来自全国12个省/自治区/直辖市的 食品药品监督管理局和药检所18人组成
3
一、模拟检查情况
标明比例。应当标注出房间的洁净级别、相邻房间的压 间内所进行活动的
差并且能指示房间所进行的生产活动； 4 ◆简要描述申请认证范围所有生产线布局情况；
要求 有
◆仓库、贮存区域及特殊贮存条件进行简要描述。
有
4.1.1 空调净化系统的简要描述
无
◆空调净化系统的工作原理、设计标准和运行情况，如
进风、温度、湿度、压差、换气次数、回风利用率等。
11、灭菌后胶塞转运应采用密闭系统或装置。 12、分装用的设备要求所有接触药粉的设备附 件必须能拆卸与灭菌。
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三、现场检查方式的变化—标准变化
13、不再接受一条生产线多台分装机布局。 14、悬浮粒子监测应在线监控，历史数据可查， 具备报警装置。 15、对于高致敏性产品的生产厂房应有防止外 泄的防护措施和报警系统。产品离开洁净室应设置 外壁淋洗装置，避免带出微量青霉素。 16、要求高致敏性空调系统初、中效一次性使 用；空调系统采用自控报警系统；排至室外的空气 除安装高效过滤器外，还应配备碱液破坏措施。
新版GMP“确认与验证”条款解读3
新版GMP“确认与验证”条款解读2为确认与产品直接接触设备的清洁操作规程的有效性，新版GMP 要求对清洁方法(即清洁规程)进行验证，明确了清洁方法验证的目的(有效防止污染和交叉污染)、要点和技术要求(见第一百四十三条)。
设备污染和交叉污染主要源于理化污染(如活性物质残留、清洁剂残留、外来物质等)和生物污染(如微生物或内毒素等)。
进行清洁验证前应当合理地确定活性物质残留、清洁剂和生物污染的限度标准，要使用经验证的、足够灵敏的分析方法进行检测。
通过风险评估确定验证的产品以及设备的清洗最差条件，重点确认最难清洁的部位和产品的清洁效果。
基于对待清洁设备较长时间放置后可能加大清洁难度(待清洁物质附着力增加)，以及已清洁设备较长时间放置被生微生物污染的风险增加的考虑，应当通过验证确定已清洁设备保留时间(清洁后至再使用之间的间隔时间)和待清洁设备保留时间(设备使用后至清洁之间的间隔时间)。
清洁验证的运行次数和工艺验证类似，国内外GMP要求并未强制限定为必须进行连续三次。
我国新版GMP《确认与验证》附录明确指出：清洁验证次数应根据风险评估确定，但通常要进行至少连续三次成功的清洁程序并符合制订的可接受标准，方可认定该方法通过了验证。
另外，即使在生产过程中采用了经过验证的操作规程进行设备清洁，必要时，还应当对与物料直接接触的设备表面的残留物进行检测(新版GMP-第一百九十七条-㈥)，对设备的清洁效果进行持续确认。
对于处在研发阶段的药物(如临床试验样品)或不经常生产的产品，可采用每批生产后确认清洁效果的方式替代清洁验证(新修订的欧盟《确认与验证》附录采用了“清洁确证”这样一个新概念)。
对于无法采用清洁验证的方式来评价设备清洁效果，则产品应当采用专用设备生产。
正如美国《清洁工艺验证检查指南》所指出的，围绕着“为什么要做清洗操作?怎么做?清洗的方法是什么?清洗到什么程度?怎么判断已经清洗干净?清洗的检测方法是什么?用什么方法判断已清洗好了?取样位置是什么?什么时间取样?取样的频率和方法?”这几个核心问题开展清洁验证工作，也就把握住了清洁验证的关键。
新旧版gmp的比较_司法考试_资格考试认证_教育专区幻灯片PPT
新增加了偏差处理一节，参照ICH的Q7、美国FDA 的GMP中相关要求，明确了偏差的定义，规定了偏差 分类管理的要求，为制止企业不认真严格制定文件规 定的随意行为提供了一个有效管理方法。
⑤ 纠正和预防措施（CAPA）
新增纠正和预防措施一节，要求企业建立纠正和 预防措施系统，对投诉、产品缺陷、召回、偏差、自 检或外部检查结果、工艺性能和产品质量监测趋势等 进行调查并采取充分和完整的纠正和预防措施。调查 的深度和形式应与风险的级别相适应。
（2）关于实施新版GMP硬件改造产生的问题
① 国内工程技术水平的差距:(B级区的设计理论盲区)
B级区的标准：静态1百级，动态1万级。
依据净化理论，静态1百级需用单向流气流流型。
作为B级，设计成单向流是不合适的，国外采用是 乱流的气流方式。但缺少乱流100级的理论依据，换 气次数的取用没有权威数据。
新版GMP实施难点
难点1：如何建立药品质量管理体系
1 确定QMS所需要的过程 2 确定过程顺序和相互作用 3 确定过程有效运行和控制的准则 4 提供资源，支持过程运行和监视 5 监视、测量和分析这些过程 6 保持QMS有效性，如CAPA
难点2、如何开展药品质量风险管理
1 进行风险源（危害）的识别
对于制药企业来说，改造无菌车间的B级区有不 确定的风险。
②国产设备达不到A级净化生产要求:
要达到洁净级别A级区的动态监测要求下生产的药 品和剂型，如无菌原料药的固液分离、粉碎工段，如 冻干粉针灌装、冻干、轧盖工段的设备而言，目前国 产的设备水平满足A级的动态监测要求很难，大部分 均需选用进口设备。给企业实施新版GMP技术改造带 来了经济和技术上的困难。
3.风险回避
在得知风险事件发生的概率较大且损失严重、又没有 其它方法来减轻时，采取主动放弃的预防措施来回避
新版GMP与快速微生物检测鉴定技术-浙江省药品认证中心原主任高鹃女士
A BCD高鹃 新版GMP 与快速微生物检测鉴定技术新版GMP 与快速微生物检测鉴定技术3.快速鉴定技术4.法规与药典要求第一部分引言无菌药品生产要求的大幅度提高新版GMP 无菌药品附录以上各级别空气悬浮粒子的标准规定如下表：洁净度级别悬浮粒子最大允许数静态≥0.5μm≥5.0μm A 级(1)352020B 级352029C 级3520002900D 级352000029000洁净级别浮游菌cfu/m 3沉降菌（φ90mm ）cfu /4小时表面微生物接触cfu /碟（φ55m m ）5指手套cfu /手套A 级<1<1<1<1B 级10555C 级1005025－D 级20010050－洁净区微生物监测的动态标准工业工程技术要求隔离装置隔离器Rabs RTP 公用工程水系统空调系统氮气压缩空气真空传送系统动态环境监测系统粒子监测沉降菌浮游菌动态环境监测带来的新课题 １、大量数据的管理和分析 ２、面对细菌培养阳性结果发生争执 是生产管理方面的问题？ 是QC 的OOS ？３、细菌培养阳性结果的后续处理明确what where who how革兰氏染色无法判定无菌药品生产要求的大幅度提高未污染？无菌药品生产要求的大幅度提高无菌药品附录：产品的无菌或其它质量特性绝不能只依赖于任何形式的最终处理或成品检验（包括无菌检查）。
微生物检测技术的飞跃发展快速检测技术（不需进行培养PAT ）快速鉴定技术（属种株）为无菌药品生产和质量管理提供了先进技术手段及时发现污染，追溯污染源 案例：爱吃桔子的员工一直难以去除的革兰氏阳性短棒状菌燃烧麦秸杆与无菌药品生产车间A BC D第二部分快速检测技术电阻抗检测•通过监测电导率或电极表面电荷数量，判定微生物生长情况培养过程中的快速检测技术培养过程中的快速检测技术二氧化碳监测•测定密闭容器中微生物液体培养时产生的二氧化碳含量，判定微生物生长情况生物发光检测技•测定发光量–判断是否存在微生物–找出发光量与实际细胞数的相关性培养过程中的快速检测技术不需培养的快速检测技术通过对细胞染色和/或标记进行微生物检测和定量，不需细胞培养流式细胞仪•被标记的细胞逐一通过流体腔时，细胞经激光束照射，发出荧光和光散射信号，依此计算细胞数•利用荧光染料和特异微生物探针，如抗体、rRNA 、肽核酸（PNA ），实现计数和目标有机物的同时检测不需培养的快速检测技术 流式细胞仪•系统的标记和检测过程能在15分钟内完成•样品量很少，不超过1 mL 分钟内完成活细胞的标在数小时内利用抗体和核酸探针完成特定不需培养的快速检测技术环境动态监测•当空气样品中的粒子通过系统时，粒子计数器将检测并定量记录粒径范围0.5-20µm 的粒子数•紫外激光器横切粒子束，含NADH 和核黄素的微生物会产生荧光，实现微生物的动态监测•能去除太小/太大粒子发荧光的假阳性结果，如烟雾/花粉快速鉴定技术快速鉴定技术 梅里埃API 系统 API 鉴定系统涵盖15个鉴定系列，约有1000种生化反应，目前已可鉴定超过750种的细菌。
gmp微生物检查要点
gmp微生物检查要点GMP微生物检查要点GMP（Good Manufacturing Practice）是一种符合药品生产质量管理标准的规范，旨在确保药品的质量、安全和有效性。
在药品生产过程中，微生物检查是不可或缺的环节，它可以帮助制药企业及时发现和控制微生物污染，保证药品的质量。
以下是GMP微生物检查的要点。
1. 检测方法选择：根据药品类型和生产工艺的不同，选择适合的检测方法。
常用的微生物检测方法包括传统培养法、快速培养法、分子生物学方法等。
根据具体情况选择合适的方法，并确保该方法符合相关法规和规范的要求。
2. 样品采集：在进行微生物检查前，必须正确采集样品。
样品应该代表性，避免污染和损坏。
采集前应进行充分的准备工作，包括消毒工作台和手套、使用合适的采样容器等。
采集时应注意避免外界环境的污染。
3. 培养基选择：根据待检测的微生物种类选择合适的培养基。
常用的培养基有营养琼脂、选择性培养基和富营养培养基等。
培养基的选择要考虑微生物的生长要求和特性，以确保能够有效地检测到微生物的存在。
4. 培养条件：培养条件的设置是确保微生物能够在培养基上生长和繁殖的关键。
包括温度、湿度、光照等因素的控制。
根据待检测微生物的生长要求，设置合适的培养条件，并严格控制培养过程中的环境因素。
5. 培养时间：培养时间的长短直接影响到微生物检测的结果。
不同的微生物需要不同的培养时间才能够形成可见的菌落。
根据微生物的生长速度和特性，设定合适的培养时间，确保能够准确、可靠地检测到微生物的存在。
6. 微生物限度：微生物限度是指药品中能够接受的微生物污染水平。
根据药品的性质和用途，制定合理的微生物限度，并对待检样品进行定量检测。
同时，还要对不同微生物的限度要求有清晰的认识，确保检测结果符合相关标准和要求。
7. 检测设备和仪器：微生物检测需要使用一系列的设备和仪器，如培养箱、显微镜、菌落计数器等。
这些设备和仪器要在使用前进行校准和验证，确保其准确性和可靠性。
新版GMP验证培训资料2
新版GMP验证培训资料2*绿色准用标签：说明本次校准结果符合规定要求，可在至下次校准日期前使用。
*红色禁止使用标签：校准结果有一项以上参数不符合规定或者因故障暂时停用。
*红绿限用标签：说明仪经确认虽有个别量程超出同意差范围，但不影响使用要求，按规定仅可在限定的范围内使用。
*准予使用标签：该仪表只进行安装前一次进行校准，准予使用。
在故障或者损坏使予以更换，更换前执行校准检查。
第九十四条不得使用未经校准、超过校准有效期、失准的衡器、量具、仪表与用于记录与操纵的设备、仪器。
*新增条款*根据计量管理基本原则，强调不得使用失效失准的设备仪器。
第九十五条在生产、包装、仓储过程中使用自动或者电子设备的，应当按照操作规程定期进行校准与检查，确保其操作功能正常。
校准与检查应当有相应的记录。
*新增条款*针对新增的自动或者电子设备提出了有关的管理要求。
-水是最广泛使用的物质/原辅料-用于生产、加工、配制、清洁与质量检验-具有特殊的化学性质-能溶解，汲取，吸附，悬浮各类化合物与污染物-在制药业，务必分级管理与使用-水是一经需要则立即使用*无法在使用前按批检验并放行，因此务必保证在其需要时既符合质量标准。
-关注点*微生物污染（生产、储存、配送）第九十六条制药用水应当适合其用途，并符合《中华人民共与国药典》的质量标准及要求。
制药用水至少应当使用饮用水。
*完善条款*根据98版规范第七十一条的有关内容修订时拆分为第九十六条、第一百条等二个条款进行编写。
*规范制药用水质量标准的基本原则，明确生产用水选择的根据为《中国药典》。
*98版第七十一条根据产品工艺规程选用工艺用水。
工艺用水应符合质量标准，并定期检测、检验有记录。
应根据验证结果，规定检验周期。
第九十七条水处理设备及设备及其输送系统的设计、安装、运行与保护应当确保制药用水达到设定的质量标准。
水处理设备的运行不得超出其设计能力。
*新增条款*将98版规范第三十四条的有关内容修订时拆分为九十七条、九十八条、九十九条、一百零一条等四个条款进行编写。
新版GMP附件2确认与验证
附件2确认与验证第一章范围第一条本附录适用于在药品生产质量管理过程中涉及的所有确认与验证活动。
第二章原则第二条企业应当确定需要进行的确认或验证工作，以证明有关操作的关键要素能够得到有效控制。
确认和验证的范围和程度应根据风险评估的结果确认。
确认与验证应当贯穿于产品生命周期的全过程。
第三章验证总计划第三条所有的确认与验证活动都应当事先计划。
确认与验证的关键要素都应在验证总计划或同类文件中详细说明。
第四条验证总计划应当至少包含以下信息：（一）确认与验证的基本原则；（二）确认与验证活动的组织机构及职责；（三）待确认或验证项目的概述；（四）确认或验证方案、报告的基本要求；（五）总体计划和日程安排；（六）在确认与验证中偏差处理和变更控制的管理；（七）保持持续验证状态的策略，包括必要的再确认和再验证；（八）所引用的文件、文献。
第五条对于大型和复杂的项目，可制订单独的项目验证总计划。
第四章文件第六条确认与验证方案应当经过审核和批准。
确认与验证方案应当详述关键要素和可接受标准。
第七条供应商或第三方提供验证服务的，企业应当对其提供的确认与验证的方案、数据或报告的适用性和符合性进行审核、批准。
第八条确认或验证活动结束后，应当及时汇总分析获得的数—10—据和结果，撰写确认或验证报告。
企业应当在报告中对确认与验证过程中出现的偏差进行评估，必要时进行彻底调查，并采取相应的纠正措施和预防措施；变更已批准的确认与验证方案，应当进行评估并采取相应的控制措施。
确认或验证报告应当经过书面审核、批准。
第九条当确认或验证分阶段进行时，只有当上一阶段的确认或验证报告得到批准，或者确认或验证活动符合预定目标并经批准后，方可进行下一阶段的确认或验证活动。
上一阶段的确认或验证活动中不能满足某项预先设定标准或偏差处理未完成，经评估对下一阶段的确认或验证活动无重大影响，企业可对上一阶段的确认或验证活动进行有条件的批准。
第十条当验证结果不符合预先设定的可接受标准时，应当进行记录并分析原因。
欧盟发布新版GMP附录一《无菌产品生产》
附录1 无菌产品生产文件日期：2020-02-20目录•文件结构图• 1 范围• 2 原则• 3 药品质量体系（PQS）• 4 厂房• 5 设备• 6 公共设施•7 人员•8 生产和具体技术•9 活性微粒及非活性微粒的环境监测和工艺监测•10 质量控制（QC）•11.术语1 范围无菌产品的生产涵盖多种无菌产品类型（原料药，无菌辅料，内包装材料和成品制剂），包装规格（单剂量到多剂量），工艺（从高度自动化系统到手动工艺）和技术（如生物技术，传统小分子生产和密闭系统）。
本附录提供了运用质量风险管理（QRM）原则的所有无菌产品生产应施用的一般性指导，以确保最终产品中无微生物、微粒和热原污染。
QRM缩写适用于本文件全文，不会在具体段落中加以说明。
在列出具体限度或频率时，这些限度或频率应视为最低要求。
这些陈述是由于监管历史经验，即曾出现这些问题并影响了患者的安全。
本附录的目的是为无菌产品的生产提供指导。
然而，一些原则和指导，例如污染控制策略、厂房设计、洁净室分类、确认、监测和人员更衣，可用于支持其它非无菌、但有必要控制和减少微生物、微粒和热原污染的产品（例如某些液体、乳膏、软膏和低生物负荷的生物中间体）的生产。
如果生产商选择将本指南应用于非无菌产品，生产商应清楚地记录已施用了哪些原则，并应证明符合这些原则。
2 原则2.1 无菌产品的生产应符合特殊要求，以尽量降低微生物、微粒和热原污染的风险。
应考虑以下关键领域：i.应按照药品生产质量管理规范（GMP）指南的相关章节优化、确认和验证设施、设备和工艺设计。
应考虑使用适当的技术（例如，限制进入隔离系统（RABS），隔离器，自动系统，快速微生物检测和监测系统），以增强对产品的保护，防止潜在的外来微粒和微生物污染源（例如人员、物料和周围环境），并帮助快速检测环境和产品中的潜在污染物。
ii.人员应具备合适的资质和经验，培训和态度，尤其是生产、包装和发运过程中无菌产品保护所涉及的原则。
GMP认证检查评定标准
30、（1206）原料药中间产品的质量检验与生产环 境有交叉影响时，其检验场所不应设置在该生产 区域内。
原料药中间产品检验不宜设在生产区内（影响生 产环境特别是灭菌原料药）
31、（1207）贮存区应有与生产规模相适应的面积 和空间用于存放物料、中间产品、待验品和成品， 避免差错和交叉污染。
33、（*1209）中药材的库房应分别设置原料库与净 料库，毒性药材、贵细药材应分别设置专库或专 柜。
34、（1301）洁净室（区）内各种管道、灯具、风 口以及其他公用设施应易于清洁。
GMP认证检查评定标准
一、机构与人员
检查项目*0301—0701共17项 其中关键项目8项，一般项目9项
GMP的机构人员原则 人员是建立并保持良好的质量体系，实施GMP的第一要素。
1）、足够的具有实践经验的合格人员（具有相应资力、 经过培训）
2）、明确职务分工及自身职责（职务授权、订立书面岗 位职责）
29、（1205）净选药材的厂房应有必要的通风除尘设 施。
78、（2401）厂房必要时应有防尘及捕尘设施。
79、（2402）中药材的筛选、切制、粉碎等生产操 作的厂房应安装捕尘设施。
对中药材前处理及提取生产区的厂房设施要求： 1）、（2401）产尘量大的生产操作间（区）应设 置防尘或捕尘设施。 2）、（1204、1205）药材净选厂房须设置拣选工 作台，其台面平整不产生脱落物（金属台面、水 泥台面、木台面），产尘量大时应安装通风除尘 系统（排风机、收尘罩、除尘风管+除尘机）。
厂房面积空间应适应批生产操作并能避免差错和交 叉污染；
应具备按工艺要求安置设备的操作间，面积应便于 生产操作及清洁、维护能避免发生交叉污染。
应具备安置物料、半成品及成品的中间站和辅助区， 面积应足够物料分类、分批存放，能避免发生差错。
中国药典微生物限度检查方法验证方案
中国药典微生物限度检查方法验证方案一、引言药品的质量与安全性是保障患者用药安全的重要方面。
微生物限度检查是药品质量控制的重要环节，用于评价药品中微生物的污染情况。
为确保检测结果的准确性和可靠性，本文旨在制定中国药典微生物限度检查方法验证方案。
二、背景微生物限度检查方法验证是指确定某一方法在特定条件下的适用性，方法验证的结果直接影响到药品生产和品质控制。
为了保证方法验证的可靠性，必须按照一定的规范和要求进行操作。
三、验证目的验证中国药典中所规定的微生物限度检查方法在实际应用中的准确性和可靠性，以确保药品的微生物限度符合国家及相关法规的要求。
四、验证程序1. 确定验证方法：根据中国药典中规定的微生物限度检查方法，选择合适的验证样品和验证条件。
2. 准备验证样品：从实际生产过程中随机选取药品样品，确保样品的代表性。
3. 执行验证实验：按照中国药典中的方法操作，对验证样品进行微生物限度检查。
4. 数据分析和评估：根据验证实验的结果，进行数据分析和评估，评估方法的准确性和可靠性。
5. 结果判定：根据数据评估结果，对微生物限度检查方法进行判定，判断方法是否适用于实际生产中的微生物限度检查。
6. 验证报告编制：根据验证实验的结果和结论，编制验证报告。
五、验证内容本次验证主要包括如下内容：1. 对选择的验证样品进行微生物限度检查。
2. 对验证样品进行菌落计数。
3. 对验证样品进行培养方法的验证。
4. 对不同微生物种类的检查方法进行验证。
5. 对不同微生物菌株的适应性进行验证。
六、风险评估在验证过程中，存在一定的风险因素，需进行风险评估，确保验证结果的可靠性和准确性。
风险评估主要包括验证样品来源的可靠性、实验操作的准确性、验证条件的合理性等。
七、验证结果与讨论根据验证实验的结果和数据分析，可以得出下列结论：1. 所验证的微生物限度检查方法在实际应用中的准确性和可靠性较高。
2. 所验证的微生物限度检查方法适用于不同药品制剂类型的微生物限度检查。
中国GMP资深专家邓海根和钟光德(两位起草组专家)解读新版GMP
中国GMP资深专家邓海根和钟光德（两位起草组专家）解读新版GMP几度风雨，几番革新，一个政策的本身，如果与民众安全用药的利益福祉息息相关，那么它的酝酿出台，就必然是一个缜密细致，反复推敲磨练的科学历程。
作为一份风行30年的主流行业媒体，适逢此番GMP重大修订，我们力求多元化对政策关键点进行深刻而专业化地解读。
因此我们策划了“新版GMP全聚焦”与“中国新版GMP编写专家独家访谈”两个系列的专题报道。
出于对政策发布时间与本报出版周期的综合考量，我们此次先行推出独家访谈系列，我们将关注的目光落到了新版GMP起草小组的专家身上。
毫不恭维地说，他们是起草新版GMP的骨干力量，是中国制药工业的智囊，是产业升级的践行者。
我们将直观的呈现他们对新版GMP的理解与思考，与您共同感受专家心目中的产业升级愿景。
本期对邓海根与钟光德两位起草组专家的访谈将作为开篇。
政策发布之后，本报将第一时间启动政策解读性的系列策划“新版GMP全聚焦”，届时将由政策出台的“设计师”——相关官员为您权威讲解政策要点，并汇聚专家、企业届的多种关注与评价，让你我一同感受中国医药主流力量的强国梦想。
邓海根：确保上市药品安全为使命作为中国GMP资深专家，原无锡华瑞制药的质量部负责人邓海根从上个世纪80年代无锡华瑞的建厂开始就在推动中国GMP的历程，在新版GMP即将正式颁布之际，他欣然接受了《医药经济报》的专访。
采访伊始，邓海根向记者详细地阐述了即将出台的新版GMP的修订背景，他对本报记者说，国际上近二三十年内，药品监管标准一体化的趋势明显加速，药品注册是药品质量保证的源头，1990年欧盟、日本、美国创建ICH人用药品技术标准国际协调会，这样，形成了先进工业国的“三驾马车”来决定国际认可的注册申报资料的格式和指导原则。
邓海根认为，我国制药行业吸纳了国际注册的先进经验，正在不断取得进展，至于GMP 与注册，只是药品生命周期的两个不同段阶，两者密不可分，顺应全球经济及时代的发展，走国际化的道路，这是必然的选择。
新版GMP检查评定标准(大输液)
药品GMP认证检查评定标准
一、药品GMP认证检查项目共259项,其中关键项目（条款号前加“＊”)92项，一般项目167项.
二、药品GMP认证检查时,应根据申请认证的范围确定相应的检查项目，并进行全面检查和评定。
三、检查中发现不符合要求的项目统称为“缺陷项目”.其中，关键项目不符合要求者称为“严重缺陷”，一般项目不符合要求者称为“一般缺陷”。
四、缺陷项目如果在申请认证的各剂型或产品中均存在,应按剂型或产品分别计算。
五、在检查过程中，企业隐瞒有关情况或提供虚假材料的，按严重缺陷处理.检查组应调查取证并详细记录.
六、结果评定
（一)未发现严重缺陷，且一般缺陷≤20％,能够立即改正的,企业必须立即改正;不能立即改正的,企业必须提供缺陷整改报告及整改计划，方可通过药品GMP认证。
(二)严重缺陷或一般缺陷>20％的，不予通过药品GMP认证.
国家局2007年10月29日网上公布
备注:对于化学制剂共有178项检查条款,其中关键项目57项，一般条款121条（原化学药品大容量注射液认证检查项目共138项,关键项目27项，一般项目111项）。
本标准从2008年1月1日实施。
药品GMP认证检查项目。
新版GMP微生物限度检查法验证报告
*******微生物限度检查法验证报告文件编号：VMP-VV-502REP-00起草人：审核人：批准人：批准日期：年月日通过验证以确认所采用的方法适合于该药品的细菌、霉菌及酵母菌的测定；确认所采用的方法适合于该药品的控制菌的检查，根据样品特性制订检验方法和检验条件，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。
若符合，按验证的方法和条件进行药品的微生物限度检查；若不符合，重新建立制订检验方法和检验条件，再进行验证，直至验证结果符合设立的验证标准。
2.验证目的及范围确认所采用的细菌、霉菌及酵母菌计数方法和控制菌检查方法适合该品种药品的微生物限度检查，以保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。
本次验证为试验组和对照组的菌回收率试验；控制菌检验方法的灵敏性、检出率及专属性试验。
3.验证风险评估对于本次验证的执行进行了如下的风险分析：4.验证前准备4.1验证人员培训：验证报告起草人有责任在方案批准后（且在验证实施前）对本次验证相关人员进行培训。
培训人员记录见附件1。
4.2将所有的平皿和稀释剂都应该严格按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没4.3仪器与器具：恒温培养箱、生化培养箱、电子天平、高压蒸汽灭菌器、净化工作台、无菌培养皿、无菌移液管。
5.验证内容5.1测试环境条件要求所有检查在环境洁净度C级下的局部A级洁净度的单向流空气区域内隔离系统内进行，其全过程严格遵守无菌操作，能防止微生物污染。
5.2试验样品*******批号：；规格：）5.3验证用菌种及培养基：5.3.1来源：食品药品检验所5.3.2菌落计数用菌种注：编号由菌种首字母-传代代数-配制日期组成。
5.3.3培养基及其制备方法：取市售的脱水培养基，分别按照规定方法进行配制后灌装于洁净的三角烧瓶中，然后加塞灭菌，在实验前加温熔化备用。
5.4细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证：按照中国药典2010年版微生物限度检查法中的平皿法进行细菌、霉菌及酵母菌计数的方法学验证试验及菌落计数。
新版GMP培养基适用性检查验证方案
新版GMP培养基适用性检查验证方案导言：为了确保药品的安全性和有效性，广泛应用的GMP（Good Manufacturing Practice）准则规定了药品生产过程中的各个环节的要求。
其中，培养基是药品生产过程中重要的组成部分，为菌种的培养提供了必要的营养物质。
因此，对于新版的GMP培养基的适用性进行检查和验证是至关重要的。
本文将针对新版GMP培养基适用性检查验证方案进行详细介绍。
一、目的本方案的目的是确保新版GMP培养基在菌种的培养中具有适用性，并满足GMP准则中对培养基的要求，以确保药品生产过程的安全性、有效性和一致性。
二、检查和验证内容1.培养基的配方和成分检查通过检查新版GMP培养基的配方和成分，确认其是否与GMP准则中的要求相符。
包括但不限于：（1）培养基主要成分是否符合GMP准则的规定；（2）培养基配方中的添加剂的使用是否符合GMP准则的规定；（3）培养基中可能存在的致病菌、毒素或其他有害物质是否符合GMP准则的规定。
2.培养基的物理和化学指标检查通过检查新版GMP培养基的物理和化学指标，确认其是否符合GMP准则中的要求。
包括但不限于：（1）培养基的pH值和渗透压是否符合GMP准则的规定；（2）培养基的可溶性是否符合GMP准则的规定；（3）培养基的凝胶化能力、均匀性和稳定性是否符合GMP准则的规定；（4）培养基的透明度和色泽是否符合GMP准则的规定。
3.培养基的无菌性检查通过对新版GMP培养基进行无菌性检查，确认其是否符合GMP准则中的要求。
包括但不限于：（1）对培养基进行菌检，确认是否存在任何细菌、真菌或其他微生物的污染；（2）对培养基进行代菌试验，确认培养基对于不同种类的菌株是否具有适用性。
4.培养基的性能验证通过对新版GMP培养基进行性能验证，确认其在菌种的培养中的表现是否符合预期。
包括但不限于：（1）通过验证试验确认培养基的培养时间、生长速度和最终菌落数量是否符合预期；（2）通过对不同种类的菌株进行培养，并对培养基的表现进行评估，确认其在不同菌株的培养中的适用性。
2023版GMP指南微生物实验室质量管理和检验思维导图
生化反应试剂条鉴定
由微生物芽孢和载体经包装而成
载体和内层包装不得含有物理、化学或微生物的污染物，避免影响生物指示剂的性能和稳定性
不得被特定的灭菌工艺降解
载体和包装的设计应保证生物指示剂不受污染、并使其所含的微生物在贮存及运输中损失最小，且方便取样、转移和接种
表12-11微生物分类中常用的表型特征（见上表）
现多采用市售的鉴定试剂条，该鉴定系统由试剂条、添加试剂及检索工具等配套形成完整的微生物鉴定体系
试剂条一般由多个微管组成，内含干燥生化基质
常用的生化反应有：发酵试验、同化试验、同化或发酵抑制试验、酶试验
纯化、分离待鉴定菌。
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高鹃 新版GMP 与快速微生物检测鉴定技术新版GMP 与
快速微生物检测鉴定技术
3.快速鉴定技术
4.法规与药典要求
第一部分引言无菌药品生产要求的大幅度提高
新版GMP 无菌药品附录
以上各级别空气悬浮粒子的标准规定如下表：
洁净度级别
悬浮粒子最大允许数静态
≥0.5μm
≥5.0μm A 级(1)
352020B 级352029C 级3520002900D 级
3520000
29000
洁净级别
浮游菌cfu/m 3
沉降菌（φ90mm ）cfu /4小时
表面微生物
接触cfu /碟（φ55m m ）
5指手套cfu /手套A 级<1<1<1<1B 级10555C 级1005025
－
D 级
200
100
50－
洁净区微生物监测的动态标准
工业工程技术要求隔离装置隔离器Rabs RTP 公用工程
水系统空调系统氮气压缩
空气真空传送系统动态环境监测系统粒子监测沉降菌浮游菌
动态环境监测带来的新课题 １、大量数据的管理和分析 ２、面对细菌培养阳性结果发生争执 是生产管理方面的问题？ 是QC 的OOS ？３、细菌培养阳性结果的后续处理明确what where who how
革兰氏染色无法判定
无菌药品生产要求的大幅度提高
未污染
？
无菌药品生产要求的大幅度提高
无菌药品附录：
产品的无菌或其它质量特性绝不能只依赖
于任何形式的最终处理或成品检验（包括无菌检查）。
微生物检测技术的飞跃发展
快速检测技术（不需进行培养PAT ）快速鉴定技术（属种株）为无菌药品生产和质量管理提供了先进技术手段及时发现污染，追溯污染源 案例：
爱吃桔子的员工
一直难以去除的革兰氏阳性短棒状菌燃烧麦秸杆与无菌药品生产车间
A B
C D
第二部分
快速检测技术
电阻抗检测•通过监测电导率或电极表面电荷数量，判定微生
物生长情况培养过程中的快速检测技术培养过程中的快速检测技术
二氧化碳监测
•测定密闭容器中微生物液体培养时产生的二氧化碳含量，判定微生物生长情况
生物发光检测技
•测定发光量
–判断是否存在微生物–找出发光量与实际细胞数的相关性培养过程中的快速检测技术
不需培养的快速检测技术
通过对细胞染色和/或标记进行微生物检测
和定量，不需细胞培养
流式细胞仪
•被标记的细胞逐一通过流体腔时，细胞经激光束照射，发出荧光和光散射信号，依此计算细胞数•利用荧光染料和特异微生物探针，如抗体、rRNA 、肽核酸（PNA ），实现计数和目标有机物的同时检测不需培养的快速检测技术 流式细胞仪•系统的标记和检测过程能在15分钟内完成•样品量很少，不超过1 mL 分钟内完成活细胞的标在数小时内利用抗体和核酸探针完成特定不需培养的快速检测技术
环境动态监测•当空气样品中的粒子通过系统时，粒子计数器将检测并定量记录粒径范围0.5-20µm 的粒子数•紫外激光器横切粒子束，含NADH 和核黄素的微生物会产生荧光，实现微生物的动态监测•能去除太小/太大粒子发荧光的假阳性结果，如烟雾/花粉快速鉴定技术
快速鉴定技术 梅里埃API 系统 API 鉴定系统涵盖15个鉴定系列，约有
1000种生化反应，目前已可鉴定超过750种的细菌。
鉴定过程中，可根据细菌所属类群选择适当的生理生化鉴定系列，人工或通过软件将待测细菌与数据库参比，得出鉴定结果。
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B
C D
•BioMérieux VITEK2 （Pincus, 2005一个光学系统的不同波长可见光监测每个井的变化，以检测微生物生长的浊度或代谢产物的颜色•结果用“+/-”响应表示，与内部数据库或相关图书馆提供的特殊平台和微生物鉴定数据库比对
快速鉴定技术快速鉴定技术 Enzyme linked immunosorbent assay （ELISA ）•利用免疫反应，检测特定细胞成分，如抗体或抗原
通过分析脂肪酸含量进行微生物鉴别
微生物培养提取的脂肪酸通过气相色谱进行分离，其色谱峰可与内部数据库比对
快速鉴定技术
质谱
Matrix-assisted Laser Desorption
Ionization, Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF-MS)
快速鉴定技术
Waters MicrobeLynx
TM System •将原代培养细胞与具有紫外吸收的基质在不锈钢
靶标盘中共晶，干燥后，将该盘放入质谱仪的氮激光器下•基质吸收激光器能量，高分子从微生物表面解吸下来，离子化，进行质谱分析，产生的质谱图与
内部数据库比对，进行微生物鉴别
快速鉴定技术
芯片+质谱
Surface Enhanced Laser Desorption Ionization, Time of Flight Mass Spectrometry (SELDI-TOF-MS)
快速鉴定技术核酸技术RMM 领域普遍采用基因扩增技术聚合酶链反应（PCR ）
转录介导扩增技术（TMA /或菌株
快速鉴定技术核酸技术 Transcription-Mediated Amplification
（TMA ）
•采用单链RNA ，通过T7 RNA 聚合酶，每个周
期可产生数千个RNA 扩增子，即在15-30分钟
内可完成10亿次复制
•一个PCR 周期只能进行
2次DNA 复制序列在属和种水平上高度保守序列的间隔区和侧翼区）的非保守片段可用于辨别特定种的菌株快速鉴定技术核酸技术
Millipore 和Gen-Probe 正在合作研发的MilliPROBE 系统，用molecular torches 作为
扩增检测探针，通过磁珠捕获目标物
•bioMérieux 正在研发的Nucleic Acid Sequence Based Amplification （NASBA ）技术，用molecular beacons 作为目标物的检测器
法规与药典要求
法规和药典
FDA 于2004年9月发布无菌工艺指南鼓励采用新的微生物检测方法和系统
A B
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法规和药典
USP：
2003年6月，USP建立项目组
探讨PAT的目的、应用及存在的实施障碍,如果工业实现PAT，则USP标准也必须•含“USP <1225>”中的分析概念及与之相关的替代定性定量系统验证
微生物质量控制替代法”
描述定性、定量、鉴别测试方法及验证指南包括准确度、精密度、专属性、检测限、
定量限、线性及范围、耐用性的验证方法
凡发生与产品无菌检测和环境监测有关
RMMs技术支持法规和药典
PDA33#技术报告-
阐明验证方案的设计、测试及可接受标准；安装、运行和性能确认方案
•可指导企业进行新快速检测和鉴定系统的验证或
确认
第五部分结语
结语技术上：
•和常规微生物检测相比，RMMs 间
•自动化、微型化、高通量的技术平台•提高灵敏度、准确度、精密度和重现性•无需细胞培养就能检测到单一的、活的微生物•提高对应激有机体的检测
结语
商业上
•和当前生产周期相比，明显减少测试时间，加快产品放行速度
•减少库存，包括原料、中间体和成品
•防止拖欠订单
•减少复试、偏差、OOS 调查及产品拒绝
进行微生物工艺监测和产品放行
生物发光平台进行非无菌鼻喷雾剂的快速放行
利用固相细胞仪进行纯化水的快速检查，能在2小时内获得检查利用二氧化碳监测技术实现细胞培养产品的3日内放行批准，可在2小时内获得无菌
敬请关注”2013弗戈制药工程及工艺验证培训会——武汉站”（5
月30~31日）。