蔓茎堇菜总黄酮提取工艺初探

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蔓茎堇菜总黄酮和总三萜的含量测定

Chin JMAP, 2012 February, Vol.29 No.2
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干燥至恒重的芦丁对照品10.03 mg，置100 mL量瓶中，加60%乙醇适量，超声振荡使之完全溶解，冷却至室温，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，得浓度 0.100 3 mg·mL 的芦丁对照品溶液。 2.1.2 供试品溶液的制备称取药材粉末约1 g，加70%乙醇30 mL，超声30 min，过滤，将滤液挥干，用60%乙醇转移至100 mL量瓶中，并用60%乙醇定容至刻度，摇匀，备用。 2.1.3 测定波长的选择精密量取对照品溶液 3.0 mL和供试品溶液1.0 mL，分别置10 mL量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液0.4 mL，混匀，放置6 min；再加入10%硝酸铝溶液0.4 mL，放置6 min；最后加入4%氢氧化钠溶液1.0 mL，用60%乙醇定容至刻度，摇匀，放置15 min。以60%乙醇为空白，同
Content Determination of Flavonoids and Triterpenoids in Viola Diffusa Ging DAI Jiaojiao, TAO Huaming, ZHU Quanhong*, HAN Zonghua(School of Traditional Chinese Medicine, Southern
蔓茎堇菜总黄酮和总三萜的含量测定
戴娇娇，陶华明，朱全红*，韩宗华南方医科大学中医药学院，广州
摘要：目的建立蔓茎堇菜中总黄酮、总三萜含量的测定方法。方法
510515)
分别以芦丁、齐墩果酸为对照品，以 5%亚硝酸钠
-10%硝酸铝-4%氢氧化钠、5%香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色剂，检测波长分别为 408，555 nm，采用紫外分光光度法测定蔓茎堇菜中的总黄酮和总三萜含量。结果总黄酮在 0.010 03~0.060 18 mg·mL1 内与吸光度线性关系良好(r=0.999 8)，平均回收率为 108.0%，RSD 为 4.92%(n=9)；总三萜在 0.004~0.036 mg·mL1 内与吸光度线性关系良好(r=0.998 2)，平均回收率为 101.3%，RSD 为 4.42%(n=9)。蔓茎堇菜中总黄酮的平均含量为 55.25 mg·g1，总三萜的平均含量为 1.14 mg·g1。结论本方法准确、可靠、稳定，可用于蔓茎堇菜中总黄酮和总三萜的含量测定。文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2012)02-0166-04 关键词：蔓茎堇菜；总黄酮；总三萜；紫外分光光度法中图分类号：R284.1

蔓茎堇菜化学成分及体外抗乙型肝炎病毒的研究

蔓茎堇菜化学成分及体外抗乙型肝炎病毒的研究乙型肝炎病毒HBV(Hepatitis B Virus,HBV)是引起急、慢性病毒性肝炎、肝硬化、肝癌等疾病的主要病因。

慢性HBV感染最终可发展为肝硬化、肝细胞癌。

我国约有近2亿的HBV携带者,每年约有25万人死于与乙型肝炎有关的慢性肝病(肝癌与肝硬化),且发病率呈现持续上升的趋势。

目前HBV感染的治疗多以干扰素及核苷类药物为主,干扰素能够抑制病毒复制,但难以清除病毒;核苷类药物可抑制HBV-DNA逆转录酶活性,但易对药物产生耐药性,停药后易产生“反跳”现象,治疗效果均很有限。

中医药治疗乙型肝炎具有丰厚的民间基础及确切的临床疗效等独特优势,是我国特有的行之有效的一种治疗手段,许多中药制剂己被用作对乙型肝炎的治疗或辅助治疗,因此从中草药中寻找抗HBV有效成分是发现并研制抗HBV药物的一条有效途径。

1研究背景堇菜科(Violaceae)堇菜属(Viola)植物约有500余种,广布于温带、热带、及亚热带,以北半球的温带为主,我国约有111种,南北各省均有分布。

堇菜属植物一般以全草入药,多具有清热解毒、凉血消肿之功效,民间广泛用于痈疽疮疖,鲜品捣烂可散瘀消肿、排脓生肌;还可用于治疗风热咳嗽、肺痨、哮喘、鼻炎、角膜炎、咽炎、乳腺炎、风湿病等。

蔓茎堇菜(Viola diffusa Ging)为堇菜科(Violaceae)堇菜属(Viola)植物,又名七星莲、黄瓜香、匐伏堇、地百草、天芥菜等,广泛分布于我国长江以南各地。

蔓茎堇菜性凉味微苦,具消肿退热、排脓解毒、生肌接骨等功效。

主治肝炎、痈肿疮毒、风热咳嗽、眼睑炎、牙龈炎、烫伤、毒蛇咬伤等,以全草入药,民间使用历史悠久。

《福建药物志》记载蔓茎堇菜用于治疗肝炎,效果显著。

杭州市第四医院中医科肝炎病房用蔓茎堇菜合剂治疗急性黄疸型肝炎,黄疸指数恢复正常最快的仅3天。

民间常将新鲜的蔓茎堇菜全草捣碎外敷治疖及外伤出血等。

《福建植物志》记载该植物所含化学成分主要为黄酮、糖类及粘液质等。

蔓茎堇菜总黄酮含量的测定

蔓茎堇菜总黄酮含量的测定
陈由强;林国宇;代容春;朱锦懋;叶冰莹;林荣华
【期刊名称】《福建师范大学学报：自然科学版》
【年(卷),期】2000(16)4
【摘要】蔓茎堇菜样品经提取、净化后 ,用紫外分光光度法测定 .以芦丁为标准品 ,在 2 65nm处测定其总黄酮含量 .结果表明 ,植株总黄酮含量为 2 .39% ,根总黄酮含量为 1 .0 8% ,细胞悬浮物总黄酮含量为0 .76% .
【总页数】3页(P67-69)
【关键词】蔓茎堇菜;紫外分光光度法;总黄酮;芦丁
【作者】陈由强;林国宇;代容春;朱锦懋;叶冰莹;林荣华
【作者单位】福建师范大学生物工程学院;福建省药材公司
【正文语种】中文
【中图分类】R282.710.3;Q949.759.2
【相关文献】
1.黔产长萼堇菜中总黄酮的含量测定 [J], 龚元;姜艳萍;李咏梅
2.蔓茎堇菜总黄酮提取工艺初探 [J], 郭晋隆;陈由强;叶冰莹;林荣华
3.Ce(NH4)2(NO3)6对蔓茎堇菜悬浮细胞凋亡和总黄酮含量的影响 [J], 代容春;陈由强;黄儒珠;洪丽亚
4.水蔓菁总黄酮的含量测定 [J], 吴宿慧;王琳琳;李瑞琴;曹珊;左艇;史晶晶;苗明三
5.天山堇菜中总黄酮和多糖的微波提取与含量测定 [J], 吴建芳;李炳奇;薛梅;韦文珍
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茎菜类植物中黄酮成分的提取解析

茎菜类植物中黄酮成分的提取解析本文以芹菜和花椰菜为研究对象,利用加速溶剂萃取法(ASE)及大孔吸附树脂对其所含黄酮进行提取和纯化,建立了HPLC-ESI-MSn分离鉴定黄酮的方法,并对芹菜和花椰菜中的黄酮进行了鉴定。

通过单因素和正交实验,确定了芹菜黄酮的最佳提取工艺条件：预热时间：5 min,静态萃取时间：5 min,萃取压力：10.3 MPa,萃取温度：90℃,萃取剂：80%乙醇水溶液,冲洗体积：60%,N2吹扫时间：60s,循环3次。

研究了大孔树脂纯化芹菜黄酮的工艺条件,通过比较AB-8型、D101型、D4020型和NKA-9型4种树脂对芹菜黄酮的吸附、解吸附性能,最终选择D101型大孔树脂纯化芹菜黄酮,工艺条件为：黄酮上样量与所用干树脂的比例约为1.4 mg/g,洗脱剂：80%乙醇水溶液,收集4倍柱体积(BV)的洗脱溶液。

实验优化了液相色谱部分和质谱部分的各项仪器参数,建立了黄酮的液相色谱质谱联用分离鉴定方法。

色谱柱型号为ZORBAX Eclipse XDB-C18(2.1 mm×150 mm,3.5 μm Agilent)；柱温为40℃；流速为0.2 mL/min:流动相为甲醇(B)和含0.1%甲酸的水(A)；梯度洗脱条件如下：0-20 min 20%-30%B;20-30 min 30%-40%B；30-55 min 40%-55%B；55-65 min 55%B；65-66 min 55%-20%B；66.76 min 20%B,二极管阵列检测器(PDA)全扫描波长为230-500 nm。

离子源为ESI源；金属毛细管温度为300℃；金属毛细管电压为-15V；电喷雾电压为4.5 kV；鞘气流速为30 arb；辅助气流速为5 arb。

芹菜叶、芹菜茎和花椰菜叶黄酮的提取量分别为14.53 mg/g,1.80mg/g,6.35 mg/g。

经过D101大孔树脂纯化的黄酮粉末的纯度为66.42%,而未经大孔树脂纯化的黄酮粉末的纯度为25.03%。

天然植物黄酮类化合物提取工艺流程

天然植物黄酮类化合物提取工艺流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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天山堇菜中总黄酮的提取工艺研究

（２）：２３８－２４３．［１８］童黄锦，白发平，汪小莉，等．不同产地白芍药材的指纹图谱研
究［Ｊ］．中医学报，２０１４，２９（９）：１３２６—１３２９．
［１９］蒋晟是，彭小青．白芍药材薄层色谱鉴别和高效液相色谱特征图谱研究［Ｊ］．中国中医药信息杂志，２０１４，２１（１１）：９５－９７．
ห้องสมุดไป่ตู้
天山堇菜中总黄酮的提取工艺研究
安冬昊，冯理想，王蕾洁，张桔苹，张彤，李乐。（１．药学院２０１５级；２．药学院２０１４级；３．石河子大学
药学院石河子８３２０００）
摘要：目的以天山堇菜总黄酮含量为考察指标，优化天山堇菜总黄酮提取工艺。方法以亚硝酸钠比色法检测天山堇莱中黄酮含量，采取正交试验对影响因素进行优化，考察总黄酮的提取影响因素。结果天山堇菜最佳提取工艺条件为料液比１：１５，提取时间６０ｍｉｎ，乙醇浓度７０％，提取温度９０￣Ｃ。结论该方法准确，简便，可作为天山堇菜总黄酮提取工艺条件。关键词：天山堇菜；总黄酮；提取中图分类号：Ｒ２８４文献标识码：Ａ文章编号：１００６－３７６５（２０１８）－０７—１２１２９－００２７－０３
［２０］张强，杨玉琴，丁秦，等．不同产地白芍的指纹图谱对比研究［Ｊ］．微量元素与健康研究，２０１４，３１（１）：２０－２３．
［２１］金传山，蔡一杰，吴德玲．硫磺熏制对白芍中芍药苷含量的影响［Ｊ］．南京中医药大学学报，２０１１，２７（２）：１６１—１６４．

Ce(NH4)2(NO3)6对蔓茎堇菜悬浮细胞凋亡和总黄酮含量的影响

ａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｌａｆｖｏｎｏｉｄｓｉｎｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｃｕｌｔｕｒｅｄｃｅｌｌｓｗｅｒｅａｌｓｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ
能促进黄酮类化合物的合成。
关键词：蔓茎堇菜；硝酸铈铵；细胞凋亡；总黄酮；悬浮培养中图分类号：Ｑ９４５．１４文献标识码：Ａ文章编号：１００４— ０９７８（２００７）０１ — ００２３— （ＮＨ４）２（ＮＯ３）６ｏｎａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｌｆａｖｏｎｏｉｄｓｏｆｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎｃｕｌｔｕｒｅｄｃｅｌｌｓｏｆＶ／ｏ／ａｄｉｆｆｕｓａＧｉｎｇ．ＤＡＩＲｏｎｇ — ｃｈｕｎ，ＣＨＥＮＹｏｕ — ｑｉａｎｇ，ＨＵＡＮＧＲｕ — ｚｈｕ，ＨＯＮＧＬｉ — ｙａ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＦｕｊｉａｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ３５０００７，Ｃｈｉｎａ），Ｊ．ＰｌａｎｔＲｅｓｏｕｒ．＆Ｅｎｖｉｒｏｎ．２００７，１６（１）：２３—２７

单叶蔓荆总黄酮的提取工艺研究

单叶蔓荆总黄酮的提取工艺研究作者：代现平，班翠红来源：《湖北农业科学》 2015年第5期代现平，班翠红（滨州医学院药学院，山东烟台２６４００３）摘要：以提取温度、提取时间、固液比和乙醇体积分数为考察因素，以单叶蔓荆（ＶｉｔｅｘｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａＬ．）总黄酮得率为考核指标，应用正交试验对其提取工艺进行优化。

结果表明，单叶蔓荆中总黄酮的最佳提取工艺为提取温度７０℃、时间１ｈ、固液比１∶１２（ｍ∶Ｖ）、乙醇体积分数７０％。

该提取工艺简单、高效，适用于单叶蔓荆的总黄酮提取。

关键词：单叶蔓荆（ＶｉｔｅｘｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａＬ．）；总黄酮；正交试验；提取工艺中图分类号：Ｒ２８４．２文献标识码：A文章编号：0439－８114（２０15）05－1163-03DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2015.05.034收稿日期：２０１４－０７－２９基金项目：国家自然科学基金项目（３１１７０３２０）作者简介：代现平（１９７０－），男，河南鹤壁人，副教授，博士，主要从事天然活性成分研究，（电话）１３６２５３５７８３６（电子信箱）ｘｉａｎｐｉｎｇｄ＠１６３．ｃｏｍ。

牡荆属（ＶｉｔｅｘＬ．）植物为马鞭草科灌木或乔木，主要分布在热带及温带地区。

在我国有１４种，主要分布在长江以南地区，在东北、华北、西北等地也有少量分布［１］。

单叶蔓荆（ＶｉｔｅｘｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａＬ．）为牡荆属马鞭草科，辛苦微寒，具清利头目、疏散风热等功效，民间常用于头痛、眼痛、感冒等病症的治疗［２－７］。

研究表明，单叶蔓荆的化学成分主要包括黄酮类、倍半萜、二萜类、三萜类、苯丙素类、甾类等物质［３－７］，其中黄酮类化合物为其主要活性成分，具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒、镇痛等多种药理作用［５－１１］。

因此，研究单叶蔓荆中总黄酮的提取工艺具有重要意义。

本试验采用正交试验对单叶蔓荆提取工艺进行优化，对影响提取的各种因素及条件进行了探讨，旨在为单叶蔓荆的综合开发利用提供依据。

土家药黄瓜香的研究现状及土家医临床应用

土家药黄瓜香的研究现状及土家医临床应用ә佘永红(湘西土家族苗族自治州食品药品检验所ꎬ湖南㊀吉首㊀４１６０００)关键词㊀土家药ꎻ黄瓜香ꎻ研究现状ꎻ临床应用中图分类号:Ｒ２９７.２㊀文献标识码:Ｂ㊀文章编号:１００６－６８１０(２０１８)０９－００５５－０３㊀㊀土家医常用药黄瓜香ꎬ为堇菜科植物蔓茎堇Ｖｉｏｌａｄｉｆ￣ｆｕｓａＧｉｎｇ.的全草ꎬ又名蔓茎堇菜㊁七星莲㊁匍伏堇等ꎬ湘西地区亦称黄花草㊁毛毛香ꎮ性冷ꎬ味甜㊁微苦ꎬ具益精助孕ꎬ生血补虚ꎬ败毒消肿ꎬ中和药毒等的功效ꎮ黄瓜香作为土家药物收载于«土家族医药学»[１]㊁«土家族药学»[２]㊁«实用土家族药物»[３]等专著中ꎮ土家药匠在春末或秋末采集全草ꎬ晒干ꎮ笔者现将黄瓜香的研究现状及土家医的临床应用综述如下ꎮ１㊀生药鉴定林晓箐等[４]对黄瓜香的生药进行了鉴定研究ꎮ性状鉴定为:本品为全草入药ꎬ多皱缩成团ꎮ主根长圆锥形ꎬ直径２~５ｍｍꎻ淡黄色至黄棕色ꎬ有稀纵皱纹ꎬ具多条细小须根ꎮ叶基生ꎬ上表面深绿色ꎬ下表面灰绿色ꎬ展平后叶片呈卵形或卵状长圆形ꎬ长１.５~３.５ｃｍꎬ宽１~２ｃｍꎬ先端钝或稍尖ꎬ基部宽楔形或截形ꎬ下延于叶柄ꎬ边缘具钝齿ꎻ叶柄具明显的翅ꎮ对根㊁根茎㊁叶及粉末进行显微鉴别ꎬ结果蔓茎堇菜叶上表皮气孔轴式为不等式ꎻ下表皮气孔多见直轴式ꎬ少数不等式ꎮ根横切面可见维管束为有限外韧型ꎬ无髓ꎻ根茎横切面维管束外侧散在大量草酸钙簇晶ꎬ可见内皮层ꎬ有髓ꎬ髓内散在大量草酸钙簇晶ꎻ叶栅栏组织细胞过主脉ꎬ海绵组织细胞形态较大ꎬ细胞间隙发达ꎮ粉末中非腺毛㊁导管㊁草酸钙簇晶及方晶多见ꎮ２㊀化学成分戴娇娇等[５]分别以芦丁㊁齐敦果酸为对照品ꎬ采用紫外分光光度法测定蔓茎堇菜中的总黄酮和总三萜含量ꎬ黄瓜香含有黄酮类㊁三萜类化合物ꎻ黄美娥等[６]研究发现ꎬ４种堇菜属植物中含有绿原酸成分ꎬ林晓箐等[４]由薄层色谱图可见蔓茎堇菜中也含有绿原酸成分ꎬ黄瓜香含有苯丙素类化合物ꎮ３㊀含量测定戴娇娇等[５]对蔓茎堇菜中总黄酮㊁总三萜含量进行测定ꎬ分别以芦丁㊁齐墩果酸为对照品ꎬ以５％亚硝酸钠－１０％硝酸铝－４％氢氧化钠㊁５％香草醛－冰醋酸－高氯酸为显色剂ꎬ检测波长分别为４０８ｎｍꎬ５５５ｎｍꎬ采用紫外分光光度法测定蔓茎堇菜中的总黄酮和总三萜含量ꎬ蔓茎堇菜中总黄酮的平均含量为５５.２５ｍｇ.ｇ－１ꎬ总三萜的平均含量为１.１４ｍｇ.ｇ－１ꎮ陈由强等[７]采用紫外分光光度法测定法ꎬ以芦丁为对照品测定了其总黄酮含量ꎬ并对总黄酮的提取工艺进行了初步探讨ꎮ蔓茎堇菜样品经提取㊁净化后ꎬ用紫外分光光度法测定ꎬ以芦丁为标准品ꎬ在２６５ｎｍ处测定其总黄酮含量ꎮ结果表明ꎬ植株总黄酮含量为２.３９％ꎬ根总黄酮含量为１.０８％ꎬ细胞悬浮物总黄酮含量为０.７６％ꎮ研究结果可为利用蔓茎堇菜生产黄酮类药用成分提供科学根据ꎮ４㊀提取工艺闵庆喜等[８]优选蔓茎堇菜总三萜的提取工艺ꎬ以蔓茎堇菜总三萜量为考察指标ꎬ采用单因素及Ｌ９(３４)正交试验优选蔓茎堇菜总三萜的提取工艺ꎮ结果蔓茎堇菜总三萜的最佳提取条件为８０％乙醇提取２次ꎬ每次１.５ｈꎬ此条件下总三萜量达１６.８７ｍｇ/ｇꎮ结论筛选出的提取工艺稳定可行ꎬ适用于蔓茎堇菜总三萜的提取ꎮ郭晋隆等[９]分别采用热水浸提法㊁甲醇浸提法和乙醇浸提法来提取蔓茎堇菜样品的总黄酮ꎬ并以芦丁为标准品ꎬ用紫外分光光度法在２６５ｎｍ处测定各提取液的总黄酮含量ꎮ结果表明ꎬ甲醇浸提法和乙醇浸提法显著优于热水浸提法ꎬ而用７０％乙醇为提取溶剂时效果最佳ꎮ５㊀药理作用邓葵等[１０]对黄瓜香的临床应用及药理实验的研究ꎬ黄瓜香具有清热解毒之功ꎬ用于肝病的治疗㊁疮疡的治疗㊁感冒的防治㊁五官科疾病的治疗ꎻ具有活血化瘀ꎬ凉血止血之功ꎬ用于治疗骨外伤科㊁再生障碍性贫血ꎮ５.１㊀抗病毒㊀朱全红等[１１]利用蔓茎堇菜提取物对ＨｅｐＧ２.２.１５细胞株分泌ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ具有明显的抑制作用ꎬ可用于制备预防及治疗病毒性肝炎的药物ꎮ５.２㊀抗炎㊀李春艳等[１２]利用黄瓜香提取物ꎬ采用４种急性炎症模型ꎬ包括角叉菜胶及蛋清诱导大鼠足趾肿胀㊁二甲苯致小鼠耳片肿胀㊁１％冰醋酸致小鼠腹腔渗出模型ꎬ观察黄瓜香提取物的抗炎作用ꎮ结果黄瓜香提取物组对二甲苯致小鼠耳片肿胀ꎬ对角叉菜胶和蛋清引起的大鼠足跖肿胀ꎬ对急性炎症导致的皮肤和腹腔毛细血管通透性均有不同程度抑制作用ꎬ其中黄瓜香提取物中㊁高剂量两个剂量组与模型组相比有显著性差异(Ｐ<０.０５或Ｐ<０.０１)ꎮ因此黄瓜香提取物具有较强的抗炎效应ꎮ５.３㊀增强免疫功能㊀李春艳等[１３]使用黄瓜香水提物ꎬ通过小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能测定㊁免疫器官重量法等方５５中国民族医药杂志㊀２０１８年９月㊀第２４卷㊀第９期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀ә基金项目:湖南省食品药品安全科技项目(湘食药科Ｒ２０１７２７)法ꎬ评价黄瓜香对小鼠免疫功能的影响ꎮ结果黄瓜香水提物０.８ꎬ０.４ｍｇ/ｍｌ剂量组与生理盐水组比较有显著性差异ꎬ能增加免疫器官重量ꎬ提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数ꎬ０.０４ｍｇ/ｍｌ剂量组无显著性差异ꎮ显示黄瓜香水提物对小鼠非特异性免疫功能有促进作用ꎮ５.４㊀保肝㊀陈娅萍等[１４]研究黄瓜香对Ｈ２Ｏ２诱导的肝损伤的保护作用ꎮ方法将ＨａｐＧ２细胞传代培养至对数生长期ꎬ将其分成对照组㊁模型组㊁干预组ꎮ对照组用细胞培养液培养ꎬ模型组加入细胞培养液及Ｈ２Ｏ２ꎬ制备氧化应激模型ꎻ干预组后加入不同浓度的黄瓜香(４个浓度)干预ꎬ并加入Ｈ２Ｏ２ꎮ荧光免疫法观察细胞活性(ＭＴＴ)ꎬ速率法检测细胞培养液谷丙转氨酶(ＡＬＴ)的水平ꎬ分光光度法检测细胞丙二醛(ＭＤＡ)水平ꎮ结果对照组ＭＤＡ㊁ＡＬＴ较模型组显著降低(Ｐ<０.０１)ꎬＭＴＴ较模型组增高(Ｐ<０.０１)ꎬ干预组ＭＤＡ㊁ＡＬＴ较模型组显著降低(Ｐ<０.０１)ꎬＭＴＴ较模型组高(Ｐ<０.０１)ꎮ证明黄瓜香对Ｈ２Ｏ２诱导的肝损伤有保护ꎮ５.５㊀抗氧化作用㊀李先辉等[１５]采用体外实验检测黄瓜香水提物对.ＯＨ自由基和ＭＤＡ的影响ꎬ结果表明:黄瓜香水提物３０ꎬ１５ꎬ７.５ｇ/Ｌ剂量组能显著清除ꎬ.ＯＨ自由基和降低ＭＤＡ水平(Ｐ<０.０１)ꎮ说明黄瓜香水提物具有较强的抗氧化作用ꎮ５.６㊀保护心肌㊁抗心肌缺血㊀何轩等[１６]观察黄瓜香水提物对自由基损伤的心肌细胞的作用ꎮ方法体外培养心肌细胞ꎬ以不同浓度的黄瓜香水提物进行干预ꎬ测定心肌细胞搏动频率及培养液中乳酸脱氢酶(ＬＤＨ)的活性ꎬ采用ＭＴＴ法观察黄瓜香水提物对心肌细胞存活率的影响ꎮ结果自由基对心肌细胞造成损伤ꎬ不同浓度的黄瓜香水提物可减少ＬＤＨ漏出ꎬ增加细胞存活率(Ｐ<０.０５)ꎮ证实黄瓜香对自由基损伤的心肌细胞具有保护作用ꎮ彭湘萍等[１７]观察黄瓜香(ＶＤＧ)对大鼠急性心肌缺血的影响ꎮ方法:建立异丙肾上腺素(ＩＳＯ)致急性心肌缺血模型ꎬ测定大鼠Ⅱ导联心电图变化ꎬ分光光度计测定血清中乳酸脱氢酶(ＬＤＨ)㊁肌酸激酶(ＣＫ)㊁超氧化物歧化酶(ＳＯＤ)和丙二醛(ＭＤＡ)含量ꎮ结果:与模型组比较ꎮ黄瓜香可降低异丙肾上腺素引起的急性心肌模型大鼠的血清中ＬＤＨ㊁ＣＫ和ＭＤＡ含量ꎬ升高血清中ＳＯＤ含量(Ｐ﹤０.０５)ꎮ证明黄瓜香对大鼠急性心肌缺血具有一定的保护作用ꎮ５.７㊀抗肿瘤㊀李先辉等[１８]采用血清药理学方法制备黄瓜香含药血清ꎬ以不同浓度的含药血清处理体外培养的Ｋ５６２白血病细胞ꎬ采用ＭＴＴ比色法观察黄瓜香含药血清对Ｋ５６２细胞增殖的影响ꎬ采用ｗｒｉｇｈｔ－Ｇｉｅｍｓａ染色观察肿瘤细胞形态学变化.采用ｃａｓｐａｓｅ－３活性检测试剂盒检测Ｋ５６２细胞内ｃａｓｐａｓｅ－３的酶活力水平ꎮ结果:不同浓度黄瓜香含药血清对Ｋ５６２细胞增殖具有抑制作用ꎬ并呈剂童依赖关系ꎮ高剂量黄瓜香含药血清对Ｋ５６２细胞形态学有明显的影响.在黄瓜香含药血清处理Ｋ５６２细胞２４ｈ后ꎬｃａｓｐａｓｅ－３活性均显著增加ꎬ随黄瓜香含药血清浓度的升高呈现较好的剂量依赖性ꎮ研究显示ꎬ黄瓜香含药血清具有抑制Ｋ５６２白血病细胞增殖及诱导凋亡的作用ꎬ其作用强度与时间一浓度呈正相关ꎬ其作用机理可能与其直接细胞毒作用及提高ｃａｓｐａｓｅ－３酶的活性有关ꎮ６㊀土家医临床应用６.１㊀治疗精亏不孕㊀民间常单用鲜品适量ꎬ与鸡蛋共炒食ꎬ有益精助孕之功ꎮ也可与藿麻蔸㊁小韭菜蔸㊁巴壁站㊁棕树根同用ꎮ６.２㊀治疗血虚证㊀民间常用鲜品１００ｇꎬ洗净ꎬ与猪腿前肢膝关节以下１只切块煮熟ꎬ吃肉喝汤ꎬ有生血补虚之功ꎬ对血虚有良效ꎬ对白血病也有较好效果ꎬ如瓜得有猪蹄汤ꎮ６.３㊀治疗痈疮诸毒㊀黄瓜香全草ꎬ捣敷患处ꎮ或与半边钱同用ꎬ加蜂蜜捣敷ꎬ治腰带疮ꎮ６.４㊀治疗药物中毒㊀黄瓜香㊁萝卜ꎬ煎水服用ꎬ治疗三步跳中毒ꎮ６.５㊀治疗癫狗咬伤㊀黄瓜香２０ｇ㊁钓鱼竿㊁梨头尖㊁豆豉各１５ｇꎬ紫竹马鞭４０ｇꎬ水煎服ꎬ并敷伤口ꎮ６.６㊀治烫火伤㊀鲜黄瓜香捣汁ꎬ外搽ꎮ６.７㊀治淋虫㊀鲜黄瓜香３０ｇꎬ水煎服ꎮ６.８㊀治蛇咬伤㊀黄瓜香鲜草ꎬ捣烂ꎬ外敷伤处ꎮ７㊀结束语黄瓜香含有黄酮类成分芦丁ꎬ三萜类成分齐墩果酸㊁熊果酸ꎬ苯丙素类成分绿原酸ꎬ具有极大的药用价值ꎮ现代临床上ꎬ浙江永嘉县中医院用匍伏堇等４味中药制成消痈解毒散治疗会阴侧切创口炎症性肿块ꎬ治愈率７１.４％[１９]ꎮ杭州市第四人民医院以匍伏堇等制成清热解毒利胆剂ꎬ治疗瘀阻型肝炎ꎬ修复肝细胞损害ꎬ加速减退黄疸[２０]ꎮ湘西土家族医院用鲜黄瓜香蒸鸡肉㊁瘦肉食ꎬ治疗再障ꎮ综上所述ꎬ黄瓜香作为新药研究开发ꎬ广泛应用于临床治疗ꎬ是值得重视的资源ꎮ参考文献[１]田华咏ꎬ潘永华ꎬ唐永佳ꎬ等.土家族医药学[Ｍ].北京:中医古籍出版社ꎬ１９９４:１４１.[２]杨德胜.土家族药学[Ｍ].西宁:青海人民出社ꎬ２００９:２９７－２９.[３]杨德胜ꎬ李利华ꎬ田向荣ꎬ等.实用土家族药物[Ｍ].北京:中国医药科技出版社ꎬ２０１６:１４６－１４７.[４]林晓菁ꎬ赖秀娣ꎬ龚雪ꎬ等.蔓茎堇菜的生药学研究[Ｊ].广东药科大学学报ꎬ２０１８ꎬ３４(１):２１－２４.[５]戴娇娇ꎬ朱全华ꎬ陶华明ꎬ等.蔓茎堇菜总黄酮和总三萜的含量测定[Ｊ].中国现代应用药学ꎬ２０１２ꎬ２９(２):１６６－１６９.[６]黄美娥ꎬ卓儒洞ꎬ晏丽.４种堇菜科植物中绿原酸含量的比较[Ｊ].安徽农业科学２００９ꎬ１７(３４):１６８５１－１６８５２.[７]陈由强ꎬ林国宇ꎬ代容春ꎬ等.蔓茎堇菜总黄酮含量的测定[Ｊ]ꎬ福建师范大学学报:自然科学版ꎬ２０００ꎬ１６(４):６７－６９.[８]闵庆喜ꎬ冯焕枝ꎬ张琳ꎬ等.蔓茎堇菜总三萜的提取工艺６５㊀㊀㊀㊀㊀ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＰｈａｒｍａｃｖｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｉｎｏｒｉｔｉｅｓ㊀Ｓｅｐｔｅｍｂｅｅｒ２０１８ꎬＶｏｌ.２４Ｎｏ.９优选[Ｊ]ꎬ中成药ꎬ２０１５ꎬ３７(２):４３３－４３５.[９]郭晋隆ꎬ陈由强ꎬ叶冰莹ꎬ等.蔓茎堇菜总黄酮提取工艺初探[Ｊ].生命科学研究.２００２ꎬ６(０３):２７７－２８０.[１０]邓葵ꎬ唐丁卯ꎬ等.黄瓜香的临床应用及药理实验研究概况[Ｊ]ꎬ中国民族民间医药ꎬ２０１０ꎬ１９(５):４０－４１.[１１]朱全红ꎬ戴娇娇.蔓茎堇菜在制备治疗病毒性肝炎药物中的应用[Ｐ].中国专利:ＣＮ１０３２３９５６９Ａꎬ２０１３－０１４.[１２]李春艳ꎬ钟飞ꎬ李先辉ꎬ等.黄瓜香在急性炎症动物模型中抗炎效应的研究[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２０１０ꎬ２１(４):８４４－８４５.[１３]李春艳ꎬ李先辉ꎬ吕江明ꎬ等.黄瓜香对小鼠免疫功能调节的实验研究[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２００８ꎬ１９(１):４０－４１.[１４]陈娅萍ꎬ史廷娇ꎬ高淞文ꎬ等.黄瓜香总黄酮对Ｈ２Ｏ２诱导的肝损伤的保护作用[Ｊ].中国民族民间医药ꎬ２０１２ꎬ１８(２):２３－２４.[１５]李先辉ꎬ李春艳ꎬ吕江明ꎬ等.黄瓜香水提物体外抗氧化活性实验[Ｊ].吉首大学学报(自科版)ꎬ２００６ꎬ２７(５):９５－９７.[１６]何轩ꎬ彭光勇ꎬ黄露ꎬ等.黄瓜香水提物对自由基损伤心肌细胞的作用[Ｊ]ꎬ吉首大学学报(自然科学版)ꎬ２０１３(０３):６６－６８.[１７]彭湘萍ꎬ彭振宇ꎬ彭英福ꎬ等.黄瓜香提取物对大鼠急性心肌缺血的实验研究[Ｊ].中国民族民间医药ꎬ２０１１ꎬ１７(２２):３６－３７.[１８]李先辉ꎬ胡昔奇ꎬ龙颖ꎬ等.黄瓜香含药血清对ｋ５６２白血病细胞增殖及凋亡的影响[Ｊ].中国民族民间医药ꎬ２００９ꎬ１５(１５):２７－２９.[１９]滕雪影.消痈解毒散治疗会阴侧切创口炎症性肿５６例[Ｊ].实用中医药杂志ꎬ２００３ꎬ５(１９):２５８.[２０]施维群.６５４－２加疏肝活血利胆中药治疗淤胆型肝炎７４例[Ｊ].中国中西医结合杂志.１９９６ꎬ９(１６):５５７－５５８.２０１８年６月２６日收稿㊀ә基金项目:新疆维吾尔自治区中医民族医药管理局新疆地产中药民族药新药研发项目ꎬ(Ｑ２０１５－０２－１７)ꎻ新疆阿克苏地区人才项目(２０１７－０９)㊀∗通讯作者简介:阿米尔艾力ꎬ男ꎬ主任医师ꎬ从事中药民族药药事管理及研究ꎮ维吾尔医习用药材菝葜的研究进展ә阿布来提阿布力孜㊀伊敏奥斯曼㊀阿米尔艾力∗(新疆维吾尔族自治区阿克苏地区维吾尔医医院药物研究所ꎬ新疆㊀阿克苏㊀８４３０００)摘㊀要㊀菝葜是维吾尔医习用药材ꎮ本文章从菝葜的化学成分㊁药理作用㊁临床应用等方面论述使用情况ꎬ阐述近年菝葜的研究成果ꎬ为深入研究该药提供参参考ꎮ关键词㊀维吾尔医ꎻ菝葜ꎻ研究进展中图分类号:Ｒ２９１.２㊀文献标识码:Ｂ㊀文章编号:１００６－６８１０(２０１８)０９－００５７－０４㊀㊀菝葜为百合科植物菝葜ＳｍｉｌａｘｃｈｉｎａＬ.的根茎ꎬ作为药用的记载ꎬ始载于«名医别录»ꎮ菝葜的研究和应用渊源流长ꎬ国外在１６世纪就已用洋菝葜(Ｓａｒｓａｐａｒｉｌｌａ)制造非酒精性饮料ꎬ我国在４００多年前也有菝葜(Ｓ.ｃｈｉｎａ)作药用的记载[１]ꎮ菝葜味甘㊁微苦㊁涩ꎬ性平ꎮ归肝㊁肾经ꎮ具有利湿祛浊㊁祛风除痹ꎬ解毒散瘀之功效ꎬ临床广泛应用于小便淋浊㊁带下量多ꎬ风湿痹痛ꎬ疔疮痈肿[２]ꎮ维吾尔医认为菝葜性为二级湿热ꎬ功能纯化异常血液质ꎬ凉血止痛ꎬ开通阻滞㊁强筋健肌㊁利尿通经㊁清热解毒㊁祛风止痒等ꎻ主治血液质性疾病ꎬ如头痛㊁偏头痛㊁热性忧郁症㊁失眠㊁湿性瘫痪㊁肌肉抽紧㊁闭尿闭经㊁湿热性关节疼痛㊁梅毒㊁淋病㊁皮肤瘙痒㊁颈淋巴结核㊁脓疮㊁湿疹㊁癣症等各种皮肤疾病和性病等ꎮ本品可入蜜膏剂㊁散剂㊁糖浆剂㊁汤剂等制剂[３~４]ꎮ现代药理学研究揭示ꎬ菝葜属植物具有抗炎㊁抗风湿㊁抗肿瘤㊁抗动脉粥样硬化㊁降血糖等作用[５~８]ꎮ为了有效地对其进行综合开发和利用ꎬ本文对菝葜的化学成分㊁药理学研究进行综述ꎮ１㊀化学成分１.１㊀皂苷类㊀徐燕等[９]从８０％乙醇提取物的正丁醇部位分离得到６个甾体皂苷ꎬ分别鉴定为ｂｏｒａｓｓｏｓｉｄｅＢꎬ薯蓣皂苷ꎬ原薯蓣皂苷ꎬ２２－Ｏ－甲基原薯蓣皂苷ꎬｉｓｏｎａｒｔｈｏｇｅｎｉｎ３－Ｏ－α－Ｌ－ｒｈａｍｎｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ(１－２)－Ｏ－[α－Ｌ－ｒｈａｍ￣ｎｏｐｙ－ｒａｎｏｓｙｌ－(１－４)]－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅꎬｄｉｏｓｇｅ￣ｎｉｎ－３－Ｏ－[α－Ｌ－ｒｈａ(１－３)－α－Ｌ－ｒｈａ(１－４)－α－Ｌ－ｒｈａ(１－４)]－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅꎮＨｉｒａｉＹ等[１０]研究发现菝葜中还含有①２６－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖－(２５Ｒ)－呋甾－５ꎬ２０－二烯－３βꎬ２６－二醇－３－Ｏ－α－Ｌ－鼠李糖－(１－２)－Ｏ－[α－Ｌ－鼠李糖(１－４)]－β－Ｄ－葡糖苷ꎬ②２６－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖－２２－Ｏ－甲基－(２５Ｒ)－呋甾－５－烯－３βꎬ２２ꎬ２６－三醇－３－Ｏ－[α－Ｌ－鼠李糖(１－４)]－β－Ｄ－葡糖苷ꎬ③薯蓣素(２５Ｒ)螺甾烷－５－烯－３β－醇－３－Ｄ－α－Ｌ－鼠李糖－(１－２)－Ｏ－[α－Ｌ－７５中国民族医药杂志㊀２０１８年９月㊀第２４卷㊀第９期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀。

【CN109879846A】一种蕨菜中黄酮的提取方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910111280.6(22)申请日 2019.02.12(71)申请人黑龙江八一农垦大学地址 163000 黑龙江省大庆市高新技术开发区新风路5号(72)发明人吴海涛　(74)专利代理机构大庆禹奥专利事务所 23208代理人朱士文　杨晓梅(51)Int.Cl.C07D 311/30(2006.01)C07D 311/40(2006.01)A23L 3/3544(2006.01)(54)发明名称一种蕨菜中黄酮的提取方法(57)摘要本发明的一种蕨菜中黄酮的提取方法，涉及黄酮提取方法技术领域，具体操作包括预处理、除蛋白、除纤维、浸提、浓缩和冻干六个步骤。

利用本发明的方法提取蕨菜中的黄酮，其黄酮得率高达9.0%，利用酶解法将蛋白和纤维素依次去除，一方面去除了杂质对于提取的影响，另一方面可以将多余的结构打开，更加利于提高黄酮的提取率。

同时，除去蛋白和纤维素能够提高产品的抗氧化活性，同时成品与Vc的抗氧化活性差别不大，可用于食品的抗氧化剂。

权利要求书1页说明书3页附图1页CN 109879846 A 2019.06.14C N 109879846A权　利　要　求　书1/1页CN 109879846 A1.一种蕨菜中黄酮的提取方法，其具体操作方法如下：a、预处理：将蕨菜洗净，80℃～85℃烘干后，粉碎至100目，制成蕨菜粉末待用；b、除蛋白：将a步骤制得的蕨菜粉末与水混合，水与蕨菜粉末的质量比为1:5～15，在50℃～60℃、pH8.0～8.5条件下，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:30～50，恒温搅拌30～60min后，95℃灭酶5min，得酶解液Ⅰ；c、除纤维：将b步骤制得的酶解液Ⅰ，在40℃～60℃、pH4.0～5.5条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:30～50，恒温搅拌30～60min后，95℃灭酶5min，得酶解液Ⅱ；d、浸提：将c步骤制得的酶解液Ⅱ与有机溶剂混合，使有机溶剂的体积分数为60%～80%，将混合液在60℃下、进行500w超声处理20min，取液体得到浸提液；f、浓缩：将d步骤制得的浸提液在50℃真空旋转蒸发，得到浓缩液；g、冻干：将f步骤制得的浓缩液于-50℃冷冻干燥12h，即得蕨菜黄酮。

蔓茎堇菜总三萜的提取工艺优选

蔓茎堇菜总三萜的提取工艺优选
闵庆喜;冯焕枝;张琳;曹丽萍;戴娇娇;朱全红
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2015(037)002
【摘要】目的优选蔓茎堇菜总三萜的提取工艺.方法以蔓茎堇菜总三萜量为考察指标,采用单因素及L9(34)正交试验优选蔓茎堇菜总三萜的提取工艺.结果蔓茎堇菜总三萜的最佳提取条件为80％乙醇提取2次,每次1.5h,此条件下总三萜量达16.87 mg/g.结论筛选出的提取工艺稳定可行,适用于蔓茎堇菜总三萜的提取.【总页数】3页(P433-435)
【作者】闵庆喜;冯焕枝;张琳;曹丽萍;戴娇娇;朱全红
【作者单位】南方医科大学中医药学院,广东广州510515;南方医科大学中医药学院,广东广州510515;南方医科大学中医药学院,广东广州510515;南方医科大学中医药学院,广东广州510515;南方医科大学中医药学院,广东广州510515;南方医科大学中医药学院,广东广州510515
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.蔓茎堇菜的生药学研究 [J], 林晓菁;赖秀娣;龚雪;李思凡;姬生国;
2.蔓茎堇菜基因组DNA 3种提取方法的比较研究 [J], 代容春;陈由强;朱锦懋
3.蔓茎堇菜总黄酮提取工艺初探 [J], 郭晋隆;陈由强;叶冰莹;林荣华
4.改进的CTAB法提取蔓茎堇菜基因组DNA [J], 代容春;朱锦懋;陈由强
5.蔓茎堇菜和柔毛堇菜多糖的抑菌抗氧化活性 [J], 林雄平;姚小芳;彭彪;周逢芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

三七茎叶中黄酮类化合物初步研究

三七茎叶中黄酮类化合物初步研究阐述了黄酮类化合物的药理作用、提取、含量测定、分离及结构鉴定的方法,介绍了中药三七中的化学成分及其研究进展,对三七茎叶中的黄酮类化合物进行了系统的研究。

(1)用乙醇作溶剂,用索氏提取器进行提取,采用硝酸铝—亚硝酸钠比色法测定总黄酮含量,以总黄酮的提取率为指标,确定了三七茎叶中黄酮类化合物的最佳醇提工艺条件即:用70%乙醇溶剂提取4h 总黄酮提取率最高,三七叶中的黄酮含量为13.55 mg/g DW,茎中的含量为7.28 mg/g DW,茎和叶所含的黄酮类物质的成分有差异。

通过硝酸铝—亚硝酸钠显色稳定性试验,确定显色后15~40 分钟之间是三七叶片总黄酮含量测定的最佳时段。

此外,本实验还对三七茎叶黄酮提取液进行了各种定性颜色反应,初步确定其中的黄酮类物质主要为黄酮醇及其甙类。

(2)采用正交试验方法,确定了碱水法和微波—碱水法提取三七茎叶总黄酮的最佳工艺即:碱水法的提取工艺为:用pH=10 的稀碱液作溶剂,液料比30 :1,浸提温度80℃,提取2 次,每次40 分钟。

微波-碱水法提取三七茎叶总黄酮的最佳工艺为:pH 为8,微波功率为中档,料液比为1g :40ml, 微波作用时间为10min。

提取2 次。

由于微波-碱水法用于三七叶总黄酮的提取具有省时、高效、节能的优点,提取率高于醇提法和碱水法,所以本文采用该法作为最佳提取方法。

(3)首先用壳聚糖对三七茎叶的水提取液进行澄清处理,其最佳工艺为:壳聚糖配制的澄清剂的添加量为提取液体积的0.9%,静置2 小时,pH 值调节为6,温度为室温。

然后用AB-8 树脂进行纯化,其工艺参数为:70%乙醇水溶液作洗脱剂,洗脱速度为2BV/h,洗脱剂用量为5 倍量树脂体积。

(4)总黄酮用聚酰胺柱进行分离,得到三个三七茎叶黄酮组分,经过硅胶薄层色谱、显色法及紫外光谱的鉴定,结合相关的文献分析,初步确定三七茎叶中所含的黄酮类化合物分别是槲皮素、槲皮素—3—O—糖甙和山奈酚—3—O—糖甙。