附子中新乌头碱的含量测定

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附子理中丸中乌头碱的检查

实训十九附子理中丸中乌头碱的检查

一、实训目的

1.掌握中药制剂中乌头碱限量检查的一般操作步骤和技能。

2.理解乌头碱限量检查的原理。二、检验依据

附子理中丸药品标准 [《中国药典》2005年版（一部）正文部分484页] 【处方】附子（制） 100g 党参 200g 白术（炒） 150g 干姜 100g 甘草 100g

【检查】乌头碱限量取本品水蜜丸适量，研碎，取25g ，或取大蜜丸适量，剪碎，取36g ，加氨试液4ml ，拌匀，放置2小时，加乙醚60ml ，振摇1小时，放置24小时，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇溶解使成1ml ，作为供试品溶液。取乌头碱对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml 含1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液12ul 、对照品溶液5ul ，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以苯-乙酸乙酯-二乙胺（14:4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上出现的斑点应小于对照品的斑点，或不出现斑点。

三、检验原理

本品处方五味药中有附子，附子中含有多种生物碱，其中乌头碱型生物碱中C 14、C 8的羟基分别与乙酸、苯甲酸成双酯型（乌头碱型）生物碱存在，如乌头碱、美沙乌头碱等。这种双酯型生物碱亲酯性强，毒性大，因此附子需要经过炮制加工降低其毒性。为保证用药安全，《中国药典》采用薄层色谱法对乌头碱进行限量检查。

四、仪器与试剂

硅胶G 薄层板、展开槽、微升毛细管或微量注射器、分析天平、水浴锅、震荡器、量瓶等。

乌头类中药有效成分的含量测定及分析论文

乌头类中药有效成分的含量测定及分析论文乌头类中药有效成分的含量测定及分析

褚晶晶

(辽宁省阜新市药品检验所阜新 123000)

摘要:目的:了解乌头类中药中新鸟头碱、鸟头碱、次乌头碱、新-t头次碱四种有效成分的含量，为临床提供研究依据。方法:采用高效液相色谱法进行各种有效成分的测定，色谱柱为Agilent Zobax XDB C18(250.0×2.lmm，Sum)，流动相为O.Ol%氨水溶液一乙腈，流速Iml/min，检测波长240nm，采用LC- MSn法进行生物碱成分的初步鉴定，了解各种成分的含量，将4种生物碱进行加热，分析受热稳定曲线变化情况，给家兔灌服附子，测定入血成分。结果:新

鸟头次碱的热稳定性更好，更适合作为药效指标成分，以新鸟头次碱作为乌头类中药有效成分的测定指标，进样量在0.51,10.2ug范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9998)}平均回收率为102 .1%，RSD= 2.2%(n-6)。结论:新乌头次碱作为乌头类中药中的有效成分，具有热稳定性好，可作为入血成分，具有良好的检测价值，可作为乌头类中药含量检测、赝品区分的有效指标。

关键词:乌头类中药有效成分新鸟头次碱鉴别指标

乌头类中药是临床常用的一类中药材，包括乌头、附子等，此类中药的主要活性成分均为生物碱，同时也属于毒性成分，因此以炮制入药，药物的质量对疗效和安全性有着直接的影响。就此笔者以附子为对象进行了研究，以分析乌头类中药中目前已知的4种有效成分用于治疗和安全性检测的应用价值。

1材料与仪器

采用高效液相色谱法进行有效成分测定，Agilent1200，乙腈

RP-HPLC同时测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量

２２供试品溶液的制备．
取过４０目筛的附子地上部分药材
１１仪器Ａｉｎ１０．ｇｌｔ２０系列高效液相色谱系统（括在线ｅ包
脱气机，四元梯度泵，自动进样器，柱温箱和ＤＤ二极管阵列Ａ
粉末约ｔ０ｇ精密称定，１０ｍ具塞锥形瓶中，．，置５ｌ加入浓氨
（功率２０Ｗ，０工作频率４Ｈ）０Ｋｚ提取３ｉ，０ｍｎ过滤，再以１ｌ０ｍ甲醇分次洗涤药渣，过滤，合并滤液和洗液，Ｏ４ ℃水浴挥干，甲醇溶解残渣，定容至１ｌ摇匀，０４ｍ微孔有机滤并０ｍ，过．５膜，即得供试品溶液。２３色谱条件．色谱柱：ｅｕｉＡＳＣ８２０ａｘ４６ＶｎｓＢ】（５ｍ．ｌ
头碱、次乌头碱均得到较好分离，分别在１．０ｇ・～、１４２５～１０ｍＬ１．６～１１０ｍＬ呈良好的线性关系；２０ｇ・加样回收率分别为该方法简便、灵敏、准确，可用于附子中双酯型生物碱的定量分析。
ＤｅｅｍｉａｉｎｆｍｅａｏｉｉｅａｙｃｎｔｎｎｔｅａｒａａｔｏｔｒｎｔｏｏｓｃｎｔｎｎｄｈｐａｏｉｅｉｈｅｉｌｐｒｆｉＲａｉｏｉｉＬａｅａｉａｐｒｔｙＲＰ．ｄｘＡｃｎｔｔｒｌＰｒｅａａａｂｓＨＰＬＣ

附子中3种双酯型生物碱含量测定方法建立

附⼦中3种双酯型⽣物碱含量测定⽅法建⽴

2 附⼦研究概况

附⼦为亚门⽑茛科(Ranunculaceae)植物乌头(AconitumcarmichaeliDebx．)侧根(⼦根)的加⼯品，其性⼤热、⾟、⽢，归⼼、肾，⽣品极毒。中医认为附⼦具有回阳救逆、补⽕助阳、散寒⽌痛、逐风通痹、温阳⾏⽔等功效。附⼦始载于《神农本草经》，主风寒咳逆邪⽓，温中，⾦疮，破症坚积聚，⾎瘕，寒湿，拘挛膝痛，不能⾏步[1]。

2.1 附⼦化学成分研究

国内外学者对附⼦化学成分的研究表明，附⼦的化学成分分为⽣物碱类物质、脂类物质和多糖类物质三⼤类。其中⽣物碱类物质为其主要成分，包括脂溶性⽣物碱：乌头碱（aconitine），中乌头碱（新乌头碱mesaconitine），次乌头碱（下乌头碱、海帕乌头碱hypaconitine），塔拉乌头胺（talatisamine），和乌胺（higeramine）棍掌碱氯化物（coryneine chloride）[2]，异飞燕草碱（isodelphinine），苯甲酰中乌头碱（benzoyl mesaconitine），新乌宁碱（neoline），北乌头碱（beiwutine），多根乌头碱（karakoline），去氧乌头碱（deoxyaconitine），准葛尔乌头碱（songorine）；⽔溶性⽣物碱：江油乌头碱（jiangyouaconitine），新江油乌头碱（neojiangyouaconitine）、尿嘧啶(Uracil)[3]、附⼦亭碱（fuzitine）、消旋去甲基衡州乌药碱（demethylcoclaurine）[4]、、附⼦宁碱（fuziline）、去甲猪⽑菜碱（salsolinol）[5]等。其中双酯型⽣物碱乌头碱（aconitine），中乌头碱（mesaconitine），次乌头碱（hypaconitine）为其主要成分，约占0.4%-0.8%，易溶于氯仿、苯、⽆⽔⼄醇和⼄醚，难溶于⽔，微溶于⽯油醚，既是附⼦的药效成分，⼜是毒性成分。三者易⽔解成为毒性较⼩的单酯型⽣物碱：苯甲酰乌头碱（乌头次碱Benzoylaconine)、苯甲酰中乌头碱(Banzoylmesaconine)、苯甲酰次乌头碱(Benzoylhypaconine)[6]。其毒性仅为双酯型⽣物碱的1/1000。单酯型⽣物碱如果进⼀步⽔解则变为毒性更⼩或⽆毒的醇胺类⽣物碱：乌头胺(乌头原碱Aconine)、中乌头胺(Mesaconine)、次乌头胺(Hypaco-nine)。其毒性仅为乌头碱的1/2000左右[7]。此外，附⼦还含有棉⼦油、蓖⿇油、附⼦脂酸等脂类物质和乌头多糖。

论成药中乌头类生物碱含量测定方法及铁牛七化学成分

二十世纪九十年代以来，世界形成回归大自然的一种潮流，天然植物草药年交易额在世界药品市场中已经突破300亿美元，并且还在持续地增长，但是在有着丰富中药资源的我国，则仅仅占据其中的5%左右。相关专家研究表明，造成我国中药国际地位不高的原因不仅有出口经营体制不健全、包装不完善、科技含量低以及剂型少等因素，最主要的是由于中药产品质量缺乏稳定性，欠标准化、规范化。本文结合我国中药市场的发展现状，深入论述了成药中乌头类生物碱含量测定方法及铁牛七化学成分。

标签：铁牛七；乌头属；成分；测定

1.前言

毛茛科乌头属是一种多年生草本植物，是发展前景非常广阔的一类药用植物资源。绝大多数的乌头属基本上均是民间药用植物，具有代表性的药用植物主要包括乌头、附子和草乌，雪上一枝篙与铁棒锤近年来也经常性的作为药物应用在成药制剂中。铁棒锤又被称作是铁牛七，其生长于陕西太白山上，是陕西民间经常用到的一种草药，中药常常将铁牛七的根入药，有大毒，味辛苦，性热，具备着兴奋精神、祛瘀活血、败毒消肿、除湿祛风和镇痛消炎的等功效。因乌头属药材的有效成分主要是双酯型生物碱这类剧毒物质，并且其治疗剂量接近于中毒剂量，所以，为了充分的保证临床用药的有效及安全，研究成药中乌头类生物碱含量测定方法及铁牛七化学成分，其现实意义及临床价值是尤为重大的。

2.成药乌头类生物碱含量的测定方法

从总体上来看，成药乌头类生物碱含量的测定方法可以说是多种多样的，比如酸碱中和法、紫外分光光度法、比色分光光度法、高效液相色谱法、薄层扫描法以及气象色谱法等等，以下主要分析了酸碱中和法、紫外分光光度法和比色分光光度法。

乌头碱类生物碱的测定

乌头碱是一种含氮的生物碱，主要存在于乌头属植物中，如乌头、白附子等。测定乌头碱的方法有多种，常用的方法有以下几种：1. 酸碱滴定法：将待测样品加入酸性介质中，使乌头碱转变为酸性溶液，再加入酸性碘化钾溶液，溶液呈现深蓝色，用硫酸滴定至溶液颜色变浅为止，根据滴定所需的硫酸量计算乌头碱的含量。

2. 气相色谱法：将待测样品经过提取和洗涤，得到乌头碱的纯化样品。然后将样品注入气相色谱仪中，通过样品在色谱柱中的分离和检测，测定乌头碱的含量。

3. 高效液相色谱法：将待测样品经过提取和洗涤，得到乌头碱的纯化样品。然后将样品注入高效液相色谱仪中，通过样品在色谱柱中的分离和检测，测定乌头碱的含量。

4. 紫外分光光度法：将待测样品溶解于酸性溶液中，然后使用紫外分光光度计测定样品溶液的吸收光谱，根据乌头碱在特定波长下的吸光度值，计算乌头碱的含量。

以上是常用的几种乌头碱的测定方法，具体选择哪种方法可以根据实际情况和实验要求来确定。

附子不同组织中生物碱含量的测定

1 材料、方法与设备
1. 1 材料试验材料购于江油附子 GAP基地收获的新鲜附子全植株。附子各组织用纯水清洗 2次 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ装入牛皮纸袋
放入烘箱 ,在 105 ℃下烘 30 m in,再在 60 ℃～70 ℃下烘干至恒重 ,粉碎过 60目筛 , 4 ℃冰箱保存 ,备用。 1. 2 仪器与设备
Varian 1200 LC /M S液相色谱 —质谱联用仪 (带紫外检测器 ,美国 Varian公司 ) ;旋转蒸发仪 (B uchi公司 ) ;电子分析天平 ( Sartorius公司 ) ;优普超纯水制造系统 (上海优普实业有限公司 ) ;超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公司 ) ; T 6普析通用新世纪紫外分光光度计 (北京普析 ) ;中草药粉碎机 (天津泰斯特仪器有限公司 ) ;电热恒温鼓风干燥箱 (上海福玛实验设备有限公司 ) 。 1. 3 试剂
收稿日期 : 2008 - 11 - 17 基金项目 :国家“十一五 ”科技支撑计划重大专项课题 (NO. 2007BAD89B15) 。作者简介 :侯大斌 (1965 - ) ,男 ,博士 ,教授 ,主要从事植物分子生物学及药用植物学研究。 E - mail: dbhou@126. com。
乙腈 ,乙二胺为色谱纯 ,水为超纯水 ,其余试剂均为分析纯 ;乌头碱 (NO. 110797 - 200404) , 新乌头碱 (NO. 110799 - 200404) ,次乌头碱 (NO. 110798 - 200404)对照品购于中国药品生物制品检定所。

川乌、草乌、附子及其复方制剂中乌头类生物碱的含量测定研究概况

华西药学杂志

W C J・P S

　1999,14(2)∶114～116

川乌、草乌、附子及其复方制剂中乌头类生物碱的含量测定研究概况

陈巧玲

(华南农业大学生物技术学院　广州510642)

提要　综述了近年来国内外川乌、草乌、附子及其复方制剂中乌头类生物碱含量测定研究概况。

川乌、草乌、附子及其炮制品均为中国药典1995年版一部收载的常用中药。中医认为这些药具有祛风除湿、温经止痛的作用。现代药理研究证明,乌头类中药具有镇静、镇痛、强心、抗炎、抗肿瘤等作用。由于其主要有效成分为剧毒的双酯型生物碱,而且治疗量与中毒量接近。为确保临床用药安全有效,国内外学者在乌头类生物碱的含量测定方面做了大量工作。

1　分光光度法

111　酸性染料比色法　赵玉梅等[1]选择溴麝香草酚蓝作为酸性染料,比色法测定骨痹痛散中乌头总生物碱含量,以乌头碱(12106m g 50m l,0105mo l L H2SO4)作对照,提取液于波长412nm处测定吸光度并计算出乌头总碱含量。平均回收率为97154%。乌兰娜日等[2]选择溴甲酚绿为酸性染料,以乌头碱(10m g 100m l,氯仿)作对照,于波长(415±1)nm处测定附子理中丸中乌头总碱含量。平均回收率为9915%,R SD 为1143%。王海孙等[3]选择文献[2]的条件测定风湿骨痛酒中乌头总生物碱含量,平均回收率为98158%, R SD为1183%,因处方中有麻黄,所以提取液在水浴上挥去溶剂后应在105℃烘1h以使麻黄碱挥发,排除干扰。陶建生等[4]选择溴甲酚绿为酸性染料,以乌头碱做对照于波长416nm,处测定止痛酊中乌头总碱含量。平均回收率为9619%,R SD为310%。杨云[5]以溴麝香草酚蓝为酸性染料,波长408nm处测定附子理中口服液中乌头总生物碱含量,平均回收率96179%。112　一阶导数分光光度法　龙沛霞等[6]采用一阶导数光谱法测定制川乌、制草乌及附子中乌头生物碱含量。测得结果与中国药典(1995年版)方法的测定结果比较无显著差异,而该方法操作起来更简便。113　二阶导数分光光度法　徐思文[7]采用二阶导数光谱法测定三七伤药片中总生物碱含量,样品和标准品溶液在波长(238±2)nm和(246±2)nm处有相应的吸收谷和吸收峰,而阴性对照光谱呈近平行线,不干扰样品中乌头总生物碱的定量分析。所以选择此两波长谷峰之间的导数振幅值作为三七伤药片中总生物碱的定量依据。平均回收率为9913%。

HPLC法测定不同产地附子中主要成分的含量

目的考察不同产地的西南附子中新乌头原碱，次乌头原碱和乌头原碱的含量。方法采用HPLC进行测定，色谱柱为Diamonsil C18 柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相A为四氢呋喃-乙腈（15∶25）；流动相B为醋酸铵溶液（0.1 mol/L），检测波长λ=235 nm；流速1 ml/min；柱温25 ℃。结果不同产地的西南附子样品中生物碱类成分的含量有着明显差异，新乌头碱的含量以贵州小河的最高为0.17%，贵州兴义的最低为0.06%；次乌头碱的含量以四川江油的最高为0.28%，贵州花江的最低为0.13%；乌头碱的含量以云南腾冲与贵州水口寺的最高为0.04%，四川江油与贵州龙里的最低为0.01%。结论西南附子中三种乌头碱的总含量以四川江油和云南腾冲产者最高。另外，HPLC测定法简单、易行，可为附子的产区扩大研究提供科学依据。

Abstract：Objective To investigate the content of new aconitine，sub aconitine and aconitine in Aconitum monkshood from different habitats.Methods The chromatographic column is determined by HPLC，the column is Diamonsil C18 column（150mm×4.6 mm，5μm），the mobile phase A is tetrahydrofuran acetonitrile （15：25），the mobile phase B is ammonium acetate solution（0.1mol/L），the detection wavelength is λ=235 nm，the velocity is 1 ml/min，and the column temperature is 25℃.Results The contents of alkaloids in the samples from different habitats were significantly different.The content of neoaconine was 0.17% in Guizhou Xiaohe and 0.06% in Guizhou Xingyi.The content of sanaconine was Sichuan Jiangyou.The highest was 0.28%，and the lowest in Guizhou Huajiang was 0.13%；the content of aconitine was 0.04% in Yunnan Tengchong and Guizhou Shuikou Temple，and the lowest in Sichuan Jiangyou and Guizhou Longli was 0.01%.Conclusion The total content of three aconitines in Aconite in the southwest is highest in Sichuan Jiangyou and Yunnan Tengchong.In addition，the HPLC assay is simple and easy to perform，which can provide scientific basis for the expansion of aconite production areas.

新乌头碱、乌头碱与次乌头碱在附子不同炮制法中含量变化的实验研究

新乌头碱、乌头碱与次乌头碱在附子不同炮制法中含量变化的

实验研究

赵永堂

【期刊名称】《中国医药导报》

【年(卷),期】2012(9)14

【摘要】目的探讨不同炮制方法的炮制品中新乌头碱、乌头碱与次乌头碱含量变化.方法分别采用江西建昌帮法、樟树帮法与<中国药典>2005年版法制备附子炮制品,通过HPLC色谱法测定其中新乌头碱、乌头碱与次乌头碱含量.结果 3种炮制方法的炮制品中新乌头碱、乌头碱与次乌头碱的平均质量分数分别为:建昌帮法:(2.13±0.26),(6.78±0.18),(11.26±0.97)μg/g;樟树帮

法:(2.35±0.39),(3.23±0.88),(8.09±0.92)μg/g;中国药典

法:(1.43±0.18),0,(1.68±0.23)μg/g.结论建昌帮煨制附子中新乌头碱、乌头碱与次乌头碱总含量比另外两种方法的总含量要高,这为建昌帮炮制技术的研究提供了科学根据.%Objective To explore the content of new aconitinc. Aconitine and hypoaconitine in products processed by different approaches. Methods Aconite processed products were prepared with Jiangxi Jianchangbang method, Zhangshubang method and method provided in Chinese Pharmacopeia (2005 edition). And the content of new aconitine, aconitine and hypoaconitine in the products were detenrimed with chromatography (HPLC) method. Results Average quality scores of new aconitine, aconitine and hypoaconitine processed with the three methods were as follows: With jianchangbang method, the contents were (2.13±0.26), (6.78±0.18),

附子理中口服液中乌头类生物碱的含量测定

・科研交流・

附子理中口服液中乌头类生物碱的含量测定

杨　云　(河南中医学院　郑州450003)

附子理中口服液是由中国药典1990年版收载的附子理中丸通过剂型改革研制的新药。由附子、白术、党参、干姜、甘草五味药组成,具有温中健脾的功效,对脾胃虚寒、脘腹冷痛、呕吐泄泻、手足不温有显著的疗效。附子为方中主药,其有效成分为乌头类生物碱。为提高产品质量,保证临床用药安全有效,我们对附子理中口服液中乌头类生物碱的含量测定方法进行了探讨,现将结果报道如下。1　实验方法及结果

111　仪器、药品与试剂　日本岛津UV -240分光光度计;上海第二分析仪器厂721

型分光光度计;附子理中口服液(河南宛西制药厂);附子、党参、白术、干姜、甘草等药材购自河南中医学院校医院;乌头碱对照品由中国药品生物制品鉴定所提供,德国产;所用试剂均为分析纯。112　供试液的制备

11211　对照品溶液的配制　精密称取乌头

碱对照品约6m g ,置100m l 量瓶中,加2m l 0105m o l L 硫酸溶液,使溶解,并加水稀释至刻度,摇匀,即得。

11212　供试品溶液的制备　精密量取本品10m l 置分液漏斗中,加水8m l 稀释,再加氢

氧化钠试液调节pH 值至11,用氯仿提取5次(20、15、10、10、10m l ),合并氯仿液;分出乳化层,加无水硫酸钠适量,搅拌,脱水,分出氯仿液;无水硫酸钠用氯仿洗涤2次,每次5m l ,合并以上3种氯仿溶液,蒸干,残渣加硫酸液(0105m o l L )012m l 搅拌,溶解,加少

新乌头碱、乌头碱与次乌头碱在附子不同炮制法中含量变化的实验研究

新乌头碱、乌头碱与次乌头碱在附子不同炮制法中含量变化的实验研

究

目的探讨不同炮制方法的炮制品中新乌头碱、乌头碱与次乌头碱含量变化。方法分别采用江西建昌帮法、樟树帮法与《中国药典》2005年版法制备附子炮制品，通过HPLC色谱法测定其中新乌头碱、乌头碱与次乌头碱含量。结果3种炮制方法的炮制品中新乌头碱、乌头碱与次乌头碱的平均质量分数分别为：建昌帮法：（2.13±0.26），（6.78±0.18），（11.26±0.97）μg/g；樟树帮法：（2.35±0.39），（3.23±0.88），（8.09±0.92）μg/g；中国药典法：（1.43±0.18），0，（1.68±0.23）μg/g。结论建昌帮煨制附子中新乌头碱、乌头碱与次乌头碱总含量比另外两种方法的总含量要高，这为建昌帮炮制技术的研究提供了科学根据。

标签：炮制；附子；生物碱

附子是临床常用的急救类中药材，性味辛、甘、大热，有毒，功能为回阳救逆、补火助阳、散寒止痛，具有“回阳救逆第一品药”之称[1]，药物分类学中属于毛莨科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的子根加工品，临床上多用其炮制后的产品。因为附子的炮制方法有很多种，加工工艺也各有不同，形成了附子饮片质量参差不齐的现象，临床应用的安全性与有效性得不到保证。为了研究不同附子炮制方法对双酯型生物碱含量的影响，笔者应用建昌帮法、樟树帮法与《中国药典》2005年版方法炮制附子并进行比较，现报道如下：

1 仪器与试药

1.1 实验仪器

色谱仪采用日本岛津生产的LC高效系列液相仪，分光计采用日立的T系列紫外可见光光度计，色谱数据参考浙江大学色谱数据库。

反相高效液相色谱法测定附子中乌头碱等3种成分的含量（精）

反相高效液相色谱法测定附子中乌头碱等3种成分的含量

（精）

反相高效液相色谱法测定附子中乌头碱等3种成分

的含量

作者：邓雅琼，刘荣华，邵峰，卢锋【摘要】目的测定附子中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量。方法采用反相高效液相色谱（PR-HPLC）法，使用UltimateTM XB-C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)；流动相为乙腈-0.2%冰醋酸（浓氨水调节pH值为7.29）；检测波长：230 nm；流速1.

作者：邓雅琼，刘荣华，邵峰，卢锋

【摘要】目的测定附子中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量。方法采用反相高效液相色谱（PR-HPLC）法，使用UltimateTM XB-C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)；流动相为乙腈-0.2%冰醋酸（浓氨水调节pH值为7.29）；检测波长：230 nm；流速1.0 ml·min-1；柱温为35℃。结果乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的回归方程分别为：Y=31.258X+5.794，r=0.999 9；Y=17.418X+5.236 9，r=0.999 8；Y=18.989X+6.186 6，r=0.999 7。三者的线性范围分别为：

3.3125～106μg/ml；0.735 7～23.541 9μg/ml；1.966 1～62.916 4μg/ml。结论该方法简便、准确、分离效果好、灵敏度高,可用于附子的质量控制。

【关键词】附子反相高效液相色谱乌头碱新乌头碱次乌头碱

Abstract：ObjectiveTo develop a high performance liquid chromatography (HPLC) method for the determination of three principal alkaloids in aconite root. Methods（4.6mm×250mm, 5μm）column by isocratic elution using Acetonitrile -0.2%Glacial acetic acid （adjusted to pH 7.29 with concentrated ammonia）.ResultsThe average recovery of the three alkaloids were analyzed simultaneously with UltimateTM XB-C18 rates

附子中新乌头碱的含量测定

希望能够为其在质量控制方面提供一定的依据。１仪器与试药１１仪器岛津Ｌ．Ｃ一２Ａ高效液相色谱仪，Ｓ０６Ｄ超声洗洁０Ｉ１２０－Ｉ器，Ｓ０Ｘ２５电子天平（万分之一）ＪＩ０十，ＴＯ３电子天平（分之千
关键词：附子；新鸟头碱；高效液相色谱法
中图分类号：２４２Ｒ８．
文献标识码：Ｂ
文章编号：０８００（０００一１２１０－８５２１）５ｌ０１
附子为毛茛科植物乌头Ａｏｉｍｃｒ＆ａＥＤｂ．ｃｎｕｍｈｅｅｘ子根的加１５％。结果表明仪器精密度良好。ｔａ．２工品，有回阳救逆、火助阳、风寒湿邪的功效。附子的具补逐主要成分是乌头类生物碱，可分为单酯类、双酯类和胺基醇类生物碱。其中以双酯型类生物碱如乌头碱、次乌头碱、新乌头碱成分毒性较大，但又同时是附子的药性成分。历代医家都非常重视附子的毒性及其用量。为保证用药的安全性，文在参考有本关文献的基础上［４，附子生品中的新乌头碱进行含量测定，３１对，
结果新鸟头碱在Ｏ０６４～．２ｇ范围内呈良好线性关系，：．９；均回收率为１０７，Ｓ．４０３４８ｒ０９９９平０．％ＲＤ＝２１％。结论．９该方法操作简便、准确、重复性好，用于附子中新鸟头碱的含量测定。可

不同产地附子含量测定

0.1%溴甲酚绿的配制：0.2 g溴甲酚绿加0.05 mol/L NaOH溶液3.2ml溶解，用水稀释200 ml。
【设备与玻璃仪器】
紫外分析仪（华南国家计量测试中心，型号：UV-6112424）
超声波清洗仪（上海科导超声仪器有限公司，型号：250H）
十万分之一分析天平（赛默飞世尔科技公司，型号:CP225D）
仪器校正用的标准缓冲液的配制：
磷酸盐标准缓冲液：精密称取在115℃±5℃干燥2~3小时的无水磷酸氢二钠3.55 g与磷酸二氢钾3.40 g，加水使溶解并稀释至1000 ml。
硼砂标准缓冲液：精密称取硼砂3.81 g（注意避免风化），加水使溶解并稀释至1000 ml，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免空气中二氧化碳进入。
表6加样回收实验结果
Table.6 Experiment results of recovery ratio
序号
样品量/g
原有量/mg
加入量/mg
测得量/mg
回收率/%
平均回收率/%
RSD/%
1
1.0117
0.2226
0.2368
0.4581
99.46
99.73
1.8
2
1.0027
0.2206
0.2368
表1线性关系试验结果
序号
乌头碱对照品量（mg/10ml）X

川乌、草乌、附子及其复方制剂中乌头类生物碱的含量测定研究概况

提要综述了近年来国内外川乌、草乌、附子及其复方制剂中乌头类生物碱含量测定研究概况。

川乌、草乌、附子及其炮制品均为中国药典1995年版一部收载的常用中药。中医认为这些药具有祛风除湿、温经止痛的作用。现代药理研究证明，乌头类中药具有镇静、镇痛、强心、抗炎、抗肿瘤等作用。由于其主要有效成分为剧毒的双酯型生物碱，而且治疗量与中毒量接近。为确保临床用药安全有效，国内外学者在乌头类生物碱的含量测定方面做了大量工作。

1 分光光度法

1.1酸性染料比色法赵玉梅等［1］选择溴麝香草酚蓝作为酸性染料，比色法

测定骨痹痛散中乌头总生物碱含量，以乌头碱(12.06mg/50ml，0.05mol/L H

2SO

)

作对照，提取液于波长412nm处测定吸光度并计算出乌头总碱含量。平均回收率为97.54%。乌兰娜日等［2］选择溴甲酚绿为酸性染料，以乌头碱

(10mg/100ml，氯仿)作对照，于波长(415±1)nm处测定附子理中丸中乌头总碱含量。平均回收率为99.5%，RSD为1.43%。王海孙等［3］选择文献［2］的条件测定风湿骨痛酒中乌头总生物碱含量，平均回收率为98.58%，RSD为1.83%，因处方中有麻黄，所以提取液在水浴上挥去溶剂后应在105℃烘1h以使麻黄碱挥发，排除干扰。陶建生等［4］选择溴甲酚绿为酸性染料，以乌头碱做对照于波长416nm，处测定止痛酊中乌头总碱含量。平均回收率为96.9%，RSD为3.0%。杨云［5］以溴麝香草酚蓝为酸性染料，波长408nm处测定附子理中口服液中乌头总生物碱含量，平均回收率96.79%。