牛布鲁氏杆菌病的间接酶联免疫快速检测
牛布病Brucellosis酶联免疫分析ELISA
牛布病(Brucellosis)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于检测牛血清,血浆及相关液体样本中布病(Brucellosis)水平。
实验原理:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中牛布病(Brucellosis)。
用纯化的牛布病(Brucellosis)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中布病(Brucellosis)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的布病(Brucellosis)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中牛布病(Brucellosis)的存在与否。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存阴性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存阳性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
牛布鲁氏杆菌斑点酶联快速诊断新技术的研究
地方病通报2008年第23卷第l期EndemicDiseasesBulletin2008V01.23,No.J・17・文章编号:1000-3711(2008)01-0017-03牛布鲁氏杆菌斑点酶联快速诊断新技术的研究‘吐尔洪・努尔1,谷文喜1,何倩倪1,热合木江2,刘丽娅1,钟旗1(1.新疆畜牧科学院兽医研究所,乌鲁木齐830000,2.新疆维吾尔自治区动物防疫监督总站,乌鲁木齐830063)摘要:目的建立一种快速诊断牛布鲁氏杆菌病抗原的新方法。
方法应用斑点酶联免疫吸附试验原理。
将牛布鲁氏杆菌单克隆抗体与待检样品集成于一张纤维素膜上,与酶标二抗反应,再与底物液作用,通过肉眼观察底物液的颜色变化来判断待检样品中是否含有布鲁氏杆菌。
结果该方法最低检测样品中活菌数为l万个菌落形成单位。
整个检测过程需4.5个小时。
结论牛布鲁氏杆菌斑点酶联快速诊断技术是一种简单、易行、特异(与标准大肠杆菌、沙门氏杆菌菌株没有交叉反应)、敏感(检测1万个单个菌)、省时(整个过程只需4.5个小时)的检测牛布鲁氏杆菌菌体的新方法,便于各级检验部门和基层广大农村牧区推广和应用。
关键词:DOT—EHSA;布鲁氏杆菌;单克隆抗体中图分类号:11378.5文献标识码:AStudyonNewTechnologyforRapidDiagnosisofBrucellaabortusbyDOT—ELISATuerhongNUERlIGUWen—xil,HEQian—nil-Rehemujan92ILIULi—yal,ZHONGQil(1.VeterinaryResearchInstitute。
XinjiangAcademy0厂AnimalScience。
Urumqi,Xinjiang830000,China;2GeneralStation旷Animal印池眺PreventionandSupervision旷XinjiangUygurAutonomousRegion-Urumqi-Xinjiang830063-China)Abstract:0bjectiveToestablishanewrapidmethodforthediagnosisofBrucellaabortus.MethodsAccordingtoDOT—ELISAprinciple。
布鲁氏菌病检测技术
布鲁氏菌病检测技术布鲁氏菌病检测技术1.概况布鲁氏菌病(简称布病),是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患的传染病。
临床主要特征是母畜流产、乳腺炎、不育和各种组织(如睾丸、关节)的炎症。
人类感染布病后,病程长,反复发作,长期不愈。
布病几乎遍及世界各地。
凡有牲畜的地区都有布病流行。
据不完全统计,在160个国家和地区中就有123个国家和地区有布病发生。
我国多见于内蒙古、东北,西北等牧区。
在北方农区也有散发,常呈地地方性流行。
在不良环境,如抗生素的影响下,本菌易发生变异,通常变异形成的布鲁氏菌可在机体内长期存在。
该菌对热抵抗力不强,63℃经7~10 min可被杀死,在鲜乳中可存活2天到18个月,在冻肉中可存活14~47天,在干燥土壤和胎儿体内可分别存活37天和6个月。
对常用消毒药敏感,如0.1%升汞数分钟,1%来苏儿或2%福尔马林15 min可将其杀死。
日光下曝晒4 h 可杀死本菌。
人和多种动物对布鲁氏菌易感。
动物中羊、牛、猪的易感性最强。
母畜比公畜,成年畜比幼年畜发病多。
在母畜中,第一次妊娠母畜发病较多。
带菌动物,尤其是病畜、流产胎儿、胎衣是主要传染源。
消化道、呼吸道、生殖道是主要的感染途径,也可通过损伤的皮肤、粘膜等感染。
常呈地方性流行。
人主要通过皮肤、粘膜和呼吸道感染。
本病一年四季均可发病。
流行区在发病高峰季节(春末夏初)可呈点状暴发流行。
患病与职业有密切关系,如:兽医、畜牧工作者、屠宰工人、皮毛工等感染机会较高。
人类布鲁氏菌病的预防,首先要注意职业性感染,凡在动物养殖区、屠宰区、畜产品加工厂的工作者以及兽医、实验室工作人员等,必须严守防护制度(即穿着防护服装,做好消毒工作),尤其在仔畜大批生产季节。
更要特别注意。
病畜乳肉食品必须灭菌后食用。
必要时可用疫苗接种,接种前应行变态反应试验。
阴性反应者才能接种。
2.实验室监测技术概述(据布鲁氏菌病防治技术规范)2.1检测方法血清学实验或细菌分离。
初筛试验选用虎红平板凝集试验(RBPT)或乳牛布病全乳环状试验(MRT)(见GB/T 18646)。
奶牛布鲁氏杆菌病的血清学检查
集, 液体中等混浊, 与比浊管对比呈
血清最高稀释度为该血清的凝集价, 牛 血 清 凝 集 价 在 1 : 100 以 上 时 , 该 血 清 样 品 为 布 病 阳 性 。 血 清 凝 集 价 在 1: 50 时 , 该 血 清 样 品 为 疑 似 反 应 , 经 3~
50% 清 亮 , 管 底 呈 中 等 量 的 伞 状 沉 淀 ;
2.2 操作
张 金 峰 邵 云 龙 王 晓 霞 ( 黑 龙 江 省 龙 江 县 畜 牧 水 产 局
在玻璃板上滴加 0.03ml 琥红抗原 , 抗原旁边滴一滴等量待检血清, 并设 阴阳性血清对照, 充分混合血清和抗 原 , 在 室 温 20℃ 条 件 下 观 察 结 果 。 如 果环境温度低 , 可用酒精灯加热 。
2mL 。 母 猪 在 配 种 前 5 ~7d , 首 免 每 只
皮 下 或 肌 肉 注 射 4mL , 间 隔 20d 以 同 样剂量加强免疫 1 次, 以后 6 个月注 射 1 次。 应注意的是注射此苗时个别 猪会出现局部肿胀, 可在短时间内消 失。 对于育肥猪在屠宰前 3 周不得注 射此苗。 (5) 治 疗 。 本 病 目 前 尚 无 有 效的治疗方法, 只有采取对症治疗措 施。 为防止细菌继发感染, 可用抗菌 素和磺胺类药物进行治疗。 也可用安 乃近或安痛定解热镇痛。 同时注射葡 萄糖生理盐水及维生素等, 可减轻病 猪的病情 。
400 四 个 稀 释 度 稀 释 。 即 第 1 管 加 1.2 ml 稀 释 液 , 第 2~4 管 各 加 入 0.5ml 稀
释 液 , 然 后 用 移 液 器 吸 取 0.05ml 血 清 加入到第 1 个试管中, 反复吹打 3 次 吸 出 0.25ml 弃 之 , 再 吸 0.5ml 混 合 液 加入到第 2 个试管中, 反复吹打 3 次, 吸取第 2 试管混合液 0.5ml 放入第 3 试 管中, 直至倍比稀释第 4 试管, 反复 吹打 3 次后从第 4 试管弃去混合液
布鲁氏杆菌病多种检测方法的对比
布鲁氏杆菌病多种检测方法的对比布鲁氏杆菌病多种检测方法的对比发布时间:2011-11-08 作者:信息来源:布鲁氏杆菌病是由布鲁氏杆菌引起的一种人畜共患传染病,属于我国的二类传染病。
奶牛是布鲁氏杆菌最易感的动物,一旦在牛群中发生,将导致巨大的经济损失和严重的公共卫生问题。
近年来随着奶牛业在全国各地的迅猛发展以及奶牛流通的增加,原在牧区流行的布鲁氏杆菌病在内地也悄然上升。
为了有效遏制布鲁氏菌病对奶牛业的影响,确保公共卫生安全,加强对奶牛布鲁氏菌病的综合防治和净化的工作就显得极为重要。
定期检疫是奶牛场进行布鲁氏杆菌病的防治和净化的重要措施。
而布鲁氏菌病的检测方法是影响布鲁氏菌病检疫效果的重要因素。
目前国内普遍采用的方法是:虎红平板凝集试验初次筛选,然后利用试管凝集试验进行最终定性,而国际上采用的初次筛选的方法主要有:间接酶联免疫吸附试验(I-ELISA)和荧光偏振试验,为了对比这四种方法在布鲁氏杆菌病的检疫结果方面的差异性,进行了本次试验。
1 材料和方法1.1 试验血样收集88份奶牛血清样本,分别进行4种检测方法的对比试验。
1.2 试验试剂布鲁氏杆菌虎红平板凝集抗原中国兽药监察所提供;布鲁氏杆菌试管凝集抗原中国兽药监察所提供;布鲁氏杆菌荧光偏振测定法抗体检测试剂盒由哈尔滨平和生物技术有限公司提供;布鲁氏杆菌病间接酶联免疫吸附试验(I-ELISA)抗体检测试剂盒由哈尔滨平和生物技术有限公司提供。
1.3试验方法按照国家以及国际上通用的标准,用虎红平板凝集试验、荧光偏振测定法、I-ELISA及试管凝集试验四种方法分别对血清样品进行检测。
2 结果2.1 琥红平板凝集试验结果:其中阳性33份,阴性55份,阳性率为37.5%;2.2 荧光偏振试验结果:其中阳性26份(包含在虎红平板凝集试验33份阳性样品中,具体结果见表1),阴性60份,可疑2份,阳性率为29.5%;2.3 I-ELISA试验结果:其中阳性31份(包含在虎红平板凝集试验33份阳性样品中,具体结果见表1),阴性57份,阳性率为35%;2.4 试管凝集试验结果:其中阳性25份(包含在虎红平板凝集试验33份阳性样品中,具体结果见表1),阴性58份,可疑5份,阳性率为28%。
牛布鲁氏菌四种血清学检测方法的比较
牛布鲁氏菌四种血清学检测方法的比较任璐;周晓翠;范伟兴;武瑞【摘要】In order to provide a reference for choosing an appropriate serological test method for bovine brucellosis in clinical detection,4 serological tests for bovine brucellosis detection were compared and analyzed. 294 bovine serum samples were tested by Rose Bengal Plate Agglutination Test(RBT),Serum Agglutination Test(SAT),Enzyme-Linked Immunosorbent Assay(ELISA)and Complement FixationTest(CFT),respectively. The coincidence rate and Kappa were compared between RBT and ELISA,SAT and CFT,respectively. The sensitivity and specificity of the 4 tests were compared using CFT as a standard. The coincidence rate of RBT and ELISA,SAT and CFT was over 95% as well as the Kappa values > 0.75. Taking CFT as a standard,the sensitivity of RBT and ELISA was better,but it exised a certain false positive. The specificity of SAT was better,but it existed a certain false negative. ELISA had better sensitivity and speci-ficity than RBT and SAT. RBT and ELISA were suitable for screening,and CFT was suitable for definite diagnosing in clinical detection. It was better to choose more than two tests for diagnosis of bovine brucellosis.%[目的]为在布鲁氏菌病临床检疫中选择可靠的血清学检测方法提供参考。
三种血清学布鲁氏菌检测方法在不同疫苗免疫奶牛中的比较
三种血清学布鲁氏菌检测方法在不同疫苗免疫奶牛中的比较张亮;王基隆;丁家波;解晓莉;刘来兴;谷祖烨;杨美;杨宏军【摘要】Brucellosis is a serious zoonosis that occurs in worldwide.Vaccine and sero-detection are two effective and common methods for its control in dairy herds.However,its sero-diagnosis is interfered by vaccine immunization,so it is important to know the dynamic changes of antibodies after being immunized with different vaccines based on various detection methods.Fifteen six-month-old healthy cows were randomly divided into five groups on average.Four treatment groups were inoculated by injection and oral immunization of 6 × 1010 unit A19 vaccine and 5 × 1010 unit S2 vaccine,respectively.Every group was separately kept after vaccination and environmental disinfection.The serum samples were monthly collected in six months and detected byRBPT,iELISA and cELISA.The results showed that the injected groups had a higher antibody peak level and longer antibody duration time compared with oral groups,and the S2 groups had a higher antibody peak level and shorter antibody duration time than A19 groups.No antibody was detected for A19 oral group by three methods in six months.All the results showed that vaccine immunization had obvious interference effect on sero-diagnosis.But the influencing time on cELISA was short,thus the vaccine immunization and wild strain infection could be effectively distinguished by cELISA.For different vaccines with different modes of immunization,the appropriate time node should be selected.%布鲁氏菌病是一种世界范围内广泛分布的严重人畜共患病.疫苗免疫和血清学诊断是有效控制和净化该病的两种重要措施,但疫苗免疫对血清学诊断存在较大影响.因此,弄清楚不同疫苗免疫在不同检测方法下的抗体消减规律显得尤为重要.本研究选取15头6月龄健康母牛,随机分为5个试验组,每组3头,分别为600亿单位A19疫苗注射组、600亿单位A19疫苗口服组、500亿单位S2疫苗口服组、500亿单位S2疫苗注射组和对照组.对不同组试验牛进行隔离饲养,免疫完成后进行一次带牛环境消毒.免疫完成后每月采集牛血制备血清保存,连续采集6个月,分别使用RBPT(虎红平板凝集实验)、iELISA、cELISA进行检测.结果表明,相比口服免疫方式,注射免疫方式的疫苗抗体峰值水平更高,抗体持续时间更长;注射免疫方式下,S2疫苗的抗体峰值水平高于A19苗,但抗体持续时间较短;口服免疫A19疫苗,6个月内三种方法均未检测到抗体.可见,疫苗免疫对布鲁氏菌病血清学诊断有明显的干扰作用,但对cELISA检测的影响时间较短,采用cELISA可有效区分疫苗免疫和野毒感染.针对不同免疫方式的不同疫苗,应选择合适的时间节点.【期刊名称】《山东农业科学》【年(卷),期】2017(049)012【总页数】4页(P126-129)【关键词】布鲁氏菌病;疫苗;抗体消长规律;检测方法【作者】张亮;王基隆;丁家波;解晓莉;刘来兴;谷祖烨;杨美;杨宏军【作者单位】山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南250100;山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南250100;中国兽医药品监察所,北京100081;山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南250100;山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南250100;山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南250100;山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南250100;山东省农业科学院奶牛研究中心,山东济南250100【正文语种】中文【中图分类】S852.5布鲁氏菌病(brucellosis)是由布鲁氏菌(Brucella)引起的一种以流产和发热为特征的人兽共患传染病,对人类健康和公共卫生构成了巨大威胁。
奶牛布鲁氏菌病三种检测方法的比较
流 行 ,严 重 威 胁 人 类 健 康 和 影 响 畜 牧 业 发展 。动 物 布 病 主 要 由羊 种 布 鲁 氏 菌 、牛种 布 鲁 氏 菌 和 猪 种 布 鲁 氏 菌感
染 羊 、牛 和 猪 等 动 物 呈 急 性 和 慢性 经
认 可的布பைடு நூலகம் 氏菌检测 的血清学 方法 .
过 。另 外 , 是人布病的主要传染来源 。 其 临床 主 要 特 征 是母 畜 流产 、 乳腺炎 、 不 育和各种组织 ( 如睾丸 、 关节 ) 的炎 症 。世 界 卫 生 组 织 ( O I E) 将其 列 为 B 类 重 要 传 染 病 ,中 华 人 民共 和 国传 染 病 防治 法 将 其 列 为 乙类 传染 病 ,是 国 际 贸易 检 疫 中 必 检 的传 染病 。对 于布 鲁 氏菌 病 的 诊 断 。 相对病原学方法而言 . 血 清 学 方 法 因其 具 有 快 速 、 简便 、 费 用 低 等 优 点 . 目前 仍 然 是 动 物 布 鲁 氏菌
2 . 2 E L I S A 检 测 方 法 按 照 实 际 说 明书 进 行 检测 。 2 . 3 结果判定。试验有效性 : 阳 性 对 出 实验 结 果 ,减 少 了P B R T 和S A T 的人 为 主 观判 断 的不 确 定 性 ,适 用 于 大 批 量 的 复核 检 定 和 确 诊 P B R T 和S A T 方 法 虽 然 是 目前 国 内
摘 要 布鲁氏茵病是 由布鲁氏菌属细菌致人畜共患的传染病 .在世界 范围
内广 泛 流 行 , 严 重威 胁人 类 健 康 和 影 响 畜牧 业发 展 。 试验 对 目前 国 内常 用 的 几种 检 测
定 的 人 为 因素 。如 果 单 独 使 用 时 特异 性 较 差且 不能 区分 人 工 免 疫 和 自然 感
免疫奶牛群布鲁氏菌病的实验室诊断
养牛技术大全中国养牛网 免疫奶牛群布鲁氏菌病的实验室诊断养牛布鲁氏菌病(简称布病)是一种人畜共患传染病,可导致动物流产、不育和各种组织的局部病变,可引起人波浪热、关节炎、神经痛、肝脾肿大、睾丸炎、附睾炎和孕妇流产。
该病不仅给畜牧业生产造成巨大经济损失,而且给消费者带来严重的公共卫生威胁。
布鲁氏菌病难预防、难根除、易反复发作难治愈,人类对该菌易感,目前还尚无良好疫苗预防本病,该病受到各国政府及医学、兽医学工作者的高度重视,随着世界贸易市场的不断拓宽,世界优势品种动物的流通和交流逐步加深,这给该病的诊、检、防带来很大的挑战。
自2004年以来,该病畜间、人间的发病率均呈上升趋势。
2004上半年我国报告布病发病5 753例,已接近2003年全年发病人数,疫情形势十分严峻。
目前我国用于布病诊断的常规技术有病原分离、PCR检测和血清学诊断。
血清学诊断主要用虎红平板凝集试验(RBT,敏感性21%~98.3%,特异性68.8%~100%)、试管凝集试验(SAT,敏感性29.1%~98.3%,特异性99.2%~100%)和补体结合试验(CFT,敏感性23.0%~97.1%,特异性30.6%~100%)等。
前两种诊断方法都会出现一定比例的假阳性和假阴性,特别是SAT用于牛布病检测时结果不令人满意,OIE于2000年宣布不主张将其用于国际贸易。
自 2007年春季开始,我市使用猪型2号布病疫苗(S2)对牛、羊实行普防,免疫程序为1次/1.5年,为鉴别奶牛免疫抗体和感染抗体,我们进行了平板凝集、试管凝集、ELISA和PCR检测的对比试验,以便为当前布病诊断提供参考。
一、材料与方法(一)试验样品血清样本采自奶牛养殖场或散养户,共1028份;流产胎儿的羊水17份、抗凝血60份采自某奶牛场。
(二)诊断试剂琥红平板凝集、试管凝集试剂购自中国兽药监察所;布氏杆菌抗体竞争ELISA监测试剂(Brucella-Ab C-Elisa)购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司(为瑞典SV ANOVIR公司生产);布病PCR试剂购自索奥生物制品有限公司。
牛患布鲁氏杆菌病怎么治疗
牛患布鲁氏杆菌病怎么治疗布鲁氏杆菌病是一种由布鲁氏杆菌引起的感染性疾病,常见于牛和其他哺乳动物。
该疾病可对畜牧业和人类健康造成严重威胁,因此,治疗布鲁氏杆菌病非常重要。
本文将分为四个章节介绍布鲁氏杆菌病的治疗方法。
第一章:布鲁氏杆菌病的诊断方法布鲁氏杆菌病的早期诊断是成功治疗的关键。
常用的诊断方法包括血清学和分子生物学。
血清学检测通常通过酶联免疫吸附试验(ELISA)来检测抗布鲁氏杆菌特异性抗体。
分子生物学技术例如PCR(聚合酶链反应)可检测布鲁氏杆菌的DNA。
这些诊断方法可以快速、准确地确定患者是否感染了布鲁氏杆菌。
第二章:抗生素治疗抗生素是治疗布鲁氏杆菌病的主要方法之一。
常用的抗生素包括多西环素、强力霉素和链霉素等。
治疗时应根据具体情况选择合适的抗生素,并遵循医生的建议进行治疗。
通常情况下,治疗持续4-6周,但可能需要更长的时间才能完全恢复。
抗生素治疗可以减轻症状,清除病原体并预防疾病的复发。
第三章:免疫治疗布鲁氏杆菌病的免疫治疗是一种增强机体免疫力以帮助抵抗病原体的方法。
这种治疗方法通常用于慢性感染或复发性感染的患者。
免疫治疗包括多疫苗接种和利用胸腺素和干扰素等免疫调节剂。
免疫治疗可以提高机体对布鲁氏杆菌的抵抗力,减少疾病的复发风险。
第四章:预防措施预防是阻止布鲁氏杆菌病传播的关键。
养殖牛只应进行定期的布鲁氏杆菌检测,并隔离感染牛只。
良好的管理和饲养条件、卫生防疫措施和合理的消毒措施也是预防布鲁氏杆菌病传播的重要手段。
此外,人们在处理患病动物或接触可能污染物的场所时应采取必要的防护措施,如佩戴手套和口罩等。
综上所述,治疗布鲁氏杆菌病的方法包括诊断、抗生素治疗、免疫治疗和预防措施。
早期诊断对于成功治疗非常重要,抗生素治疗能够有效清除病原体,免疫治疗有助于提高机体免疫力,预防措施可预防疾病的传播。
通过综合应用这些方法,可以有效治疗和控制布鲁氏杆菌病的传播,保护牛群和人类的健康。
第五章:综合治疗策略尽管抗生素治疗和免疫治疗是治疗布鲁氏杆菌病的核心方法,但综合治疗策略的应用可能进一步提高治疗效果。
牛羊布鲁氏菌cELISA与RBT、SAT检测方法比较
化创建场”(以下简称“两场”)评估认证工作,
95
技术支撑
并于 2015 年和 2021 年先后对“两场”评估标准进 行了修订。
2014 年以来,为做好布鲁氏菌净化工作,山 东省日照市开展了检测方法优化筛选等净化关键技 术研究。根据国标 GB/T 18646—2018 中规定,虎 红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、 竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)等方法为我国 动物布鲁氏菌病血清学诊断技术。在现阶段大规模 检疫检测中,血清学方法仍是最常用的诊断技 术 [7]。RBT 因操作简单,敏感性高,在实际应用 中常作为初筛手段;SAT 则适用于牛种、羊种和猪 种布鲁氏菌病血清学确诊。目前,市场上 cELISA 商品试剂盒种类繁多,为筛选敏感性高、可靠性好 的试剂盒,本试验拟将 2 种布鲁氏菌 cELISA 试剂 盒与 RBT、SAT 方法进行检测比较分析,以期为 快速、准确诊断牛羊布鲁氏菌病提供参考。 1 材料与方法 1.1 试剂
RBT、SAT, 参 照 动 物 布 鲁 氏 菌 病 诊 断 技 术 (GB/T 18646—2018)步骤开展试验;cELISA 试
剂盒检测,严格按照相应说明书进行操作。 1.5 cELISA、RBT 以及 SAT 方法比较分析
为 更 好 地 评 价 3 种 检 测 方 法 的 可 靠 性, 将 cELISA 检 测 结 果 分 别 与 RBT、SAT 进 行 比 较, 4 种分析指标为假阴性率、假阳性率、符合率和 Kappa 值。 假 阴 性 率 是 指 cELISA 检 测 为 阴 性 用 RBT/SAT 检测为阳性与 RBT/SAT 检测所有阳性之 和的百分比;假阳性是指 cELISA 检测为阳性用 RBT/SAT 检测为阴性与 RBT/SAT 检测所有阴性之 和的百分比;符合率是指 cELISA 检测的阳性与阴 性样本与两种检测方法(RBT、SAT)结果相一致 的总和与所有检测样本的百分比。
奶牛布鲁氏菌抗体检测常用方法的筛选
示红 色 色带 ,无论 T 线是 否显 示红 色色 带 ,该试 纸均判 为无 效 。
1 材料与方法
1 . 1 标准阳性血清 厂 家 :青 岛 易邦 公 司 ,批 号 :2 0 1 6 0 4 0 2 。 1 . 2 标准阴性血清 厂 家 :青 岛 易邦 公 司 ,批 号 :2 0 1  ̄2 0 1 。
用G I C A、E I L S A 组合 较 为合 适 。
[ 关键词 ] 布病
E L I S A G I C A
布 鲁 氏 菌病 是 由 布 鲁 氏 菌 引 起 的人 畜 共 患 传 染 病 。 以生 殖 器 官 和 胎 膜 发 生 炎 症 ,引起 流 产 、不 孕 和 关 节 炎 、睾 丸 炎 等 为 特 征 。患 病 动 物 长 期 带 菌 ,成 为 世 界 性 分 布 ,有 不 同程 度 的流 行 ,给畜 牧业 和 人 类健 康 带 来严 重 危 害 。本病 在 我 国分 布 较广 , 在 某些 地 区 的流 行 相 当严 重 。在 自然 条件 下 ,布 鲁 氏 菌病 的 易感 动 物范 围很 广 ,其 中 主要 是 羊 、牛 、猪 。本病 在 流 行病 学 、临床 症 状 、病 理 变化 均 缺乏 明显 特征 ,而且 多 数病 畜 呈 隐性 感 染 ,因 此 ,在 诊 断 时 ,应 采取 多 种 方法 互 相 配合 ,才 能 得 出 正确 诊 断结 果 。 目前 ,我 国布 病最 常 用 的检 疫 技术 是 血 清学 诊 断 , 国标方 法 有虎红平板凝集试验 、试管凝集试验和补体结合试验以及乳牛全 乳 环状 试 验 。但 在 临床 上 用 得最 多 的是 虎 红平 板 凝 集试 验 ,该 方 法 虽然 时 间 短 ,操作 简 便 ,但 容 易 出现 假 阳性 、假 阴性 等 情况 , 给诊 断 带 来一 定 困难 ,因此 ,为 挑选 出操 作简 便 、准确 率 高 的方 法 ,我 们 对 目前 国 内外使 用 较 多 的虎 红 平 板凝 集 试 验 ( R B T)、 试管凝集试 验 ( S A T)和 酶 联 免 疫 法 ( E I L S A)、金 标 试 纸 法 ( G I C A)四种方 法进 行 了 比较 ,检测 数据 如 下 :
三种血清学方法检测牦牛布鲁氏菌病的比较
三种血清学方法检测牦牛布鲁氏菌病的比较李金平;郭会玲;薛晓波;薛晶;吐尔洪·努尔;马俊杰;易新萍【摘要】采集牦牛血清237份,用虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)进行布鲁氏菌病抗体检测.结果表明,RBPT和SAT与iELISA检测法阳性符合率分别为64.3%和57.1%,但iELISA与SAT和RBPT检测法总符合率达95%以上.本结果表明iELISA试剂盒检测法快速、简便,敏感性和特异性高于RBPT和SAT法.【期刊名称】《草食家畜》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】3页(P52-54)【关键词】布鲁氏菌病;牦牛;iELISA;SAT;RBPT【作者】李金平;郭会玲;薛晓波;薛晶;吐尔洪·努尔;马俊杰;易新萍【作者单位】新疆维吾尔自治区动物卫生监督所,新疆乌鲁木齐830063;新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐830000;新疆畜牧科学院科技信息研究所,新疆乌鲁木齐830000;新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐830000;新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐830000;新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐830000;新疆畜牧科学院兽医研究所,新疆乌鲁木齐830000【正文语种】中文【中图分类】S852.5+3布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌引起的人畜共患传染病,本病严重危害养殖业,并影响人类健康,具有重要的公共卫生安全意义。
我国农业部将其列为二类动物传染病,是动物引进和种畜检疫中必检的传染病。
对于布鲁氏菌病的诊断,相对病原学方法而言,血清学方法因其具有快速、简便、费用低等优点,目前仍然是动物布鲁氏菌病检疫最常用的诊断方法。
我国用于布病血清学诊断的国家标准方法主要有:虎红平板凝集试验(RBPT)、试管凝集试验(SAT)和补体结合试验(CFT)等传统布鲁氏菌抗体检测技术。
前两种方法都会出现一定的假阳性及假阴性,特别是SAT,因其检测结果不令人满意,OIE于2000年宣布不主张将其用于国际贸易[1]。
快速免疫诊断牛布鲁氏菌病新方法的研究
快速免疫诊断牛布鲁氏菌病新方法的研究
洪林娣;朱明东
【期刊名称】《中国人兽共患病学报》
【年(卷),期】2007(023)001
【摘要】目的建立一种牛布鲁氏菌病快速免疫诊断方法.方法斑点金免疫渗滤法(DIGFA)以硝酸纤维素膜为载体,胶体金标记蛋白为显示剂,抗原、抗体及胶体金标记蛋白通过渗滤发生反应,阳性结果在膜上显示红色斑点.结果 DIGFA快速检测牛布鲁氏菌病具有很好的重现性和稳定性;敏感性、特异性分别达到97%和100%.结论 DIGFA快速检测牛布鲁氏菌病,方法快速简便,测试过程1~2 min内完成,试剂敏感、特异、稳定,非常适合于布鲁氏菌病的诊断及流行病学调查.
【总页数】3页(P74-75,93)
【作者】洪林娣;朱明东
【作者单位】浙江省医学科学院,杭州,310013;浙江省医学科学院,杭州,310013【正文语种】中文
【中图分类】R3
【相关文献】
1.血吸虫病快速免疫诊断--胶体染料免疫渗滤法的初步研究 [J], 肖祥;汪天平
2.胶体金免疫层析法快速诊断牛布鲁氏菌病的研究 [J], 朱明东;洪林娣
3.疟原虫的形态学及快速免疫诊断研究与临床应用 [J], 栗绍刚; 李丹; 李静宜; 郭东星; 吴赵永
4.疟疾快速免疫诊断技术的应用研究进展 [J], 王敬军
5.乳牛布鲁氏菌病病原DNA快速检测技术的研究 [J], 邱昌庆;曹小安;杨春华;周继章;高双娣;程淑敏
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