实验二血涂片的制备

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血涂片制备实验报告

血涂片制备实验报告

一、实验目的1. 掌握血涂片的制备方法;2. 了解血液细胞的形态及数量;3. 培养实验操作技能,提高显微镜观察分析能力。

二、实验原理血液细胞经涂片、固定和染色后,可体现出不同发育阶段及病理生理改变的白细胞,在细胞体积、细胞质成分及酸碱性、细胞核染色质含量及空间排列状态的差异。

借助显微镜对上述差异进行总体分析,从而将各种白细胞区别开来。

成熟红细胞不含细胞核,细胞质的主要成分是血红蛋白,略呈碱性。

制成血涂片经瑞-吉染色后,血红蛋白与染液中呈酸性的伊红结合而显桔红色或淡粉红色。

同时,红细胞的各种形态学特点也得以展现。

三、实验器材与试剂1. 器材:载玻片、盖玻片、血液涂片器、显微镜、细胞计数板、酒精灯、滴管、擦镜纸、剪刀、镊子、剪刀、烧杯、试管、试管架、显微镜载物台等。

2. 试剂:瑞氏染液、生理盐水、消毒酒精、双氧水、抗凝剂等。

四、实验步骤1. 采血:用消毒酒精消毒耳垂或手指尖,待干。

用剪刀剪去耳垂或手指尖一小部分皮肤,使血液自然流出。

如血流不畅,可用消毒棉轻轻挤压。

2. 制备血涂片:取一干净载玻片,用血液涂片器沾取少量血液,滴于载玻片中央。

用另一载玻片作为推片,将推片末端斜置于血液滴的左缘,成30°~40°角。

将推片稍向后退,使之与血液滴接触,血即向推片末端的两边伸展,并在两载玻片之间的斜角中充满。

此时把推片向前推动,血随推片而行,即涂成血片。

血片的厚薄可由血滴大小、推片速度和两片间的角度大小来调节。

3. 干燥与固定:将制备好的血涂片置于空气中自然干燥,或用酒精灯轻微烘烤。

待干燥后,滴加适量瑞氏染液,染色5~10分钟。

然后用蒸馏水冲洗,待自然干燥。

4. 观察与计数:将染好的血涂片置于显微镜载物台上,用低倍镜观察细胞分布均匀、染色良好的区域。

选用合适的计数板,进行红细胞和白细胞计数。

五、实验结果与分析1. 观察结果:通过显微镜观察,发现血涂片上红细胞呈椭圆形,无细胞核,细胞质略呈碱性,经瑞-吉染色后显桔红色或淡粉红色。

实验报告 血涂片的制备

实验报告 血涂片的制备

实验报告血涂片的制备实验报告:血涂片的制备引言:血涂片是一种常见的实验技术,用于观察和分析血液细胞的形态和数量。

通过制备血涂片,我们可以了解疾病的诊断和治疗过程中的重要信息。

本实验报告将介绍血涂片的制备过程和相关技术。

一、材料与设备:1. 血液样本:采集自健康人士或实验动物。

2. 血涂片玻片:具有一定的光学透明度和平整度。

3. 血涂片刮板:用于制备血涂片的工具。

4. 血涂片染色剂:如吉姆萨染色剂。

二、实验步骤:1. 准备工作:清洁实验台面,并确保材料和设备的无菌状态。

2. 血液采集:使用无菌针头采集血液样本,将血液缓慢抽入无菌注射器中。

3. 制备血涂片:a. 取一片无菌血涂片玻片,用无菌棉球蘸取适量的酒精擦拭玻片表面,使其干燥。

b. 用无菌血涂片刮板,将血液样本滴于血涂片玻片的一端。

c. 快速而均匀地将刮板从滴液处向另一端刮过,使血液在玻片上均匀分布。

d. 在刮板刮过的血液上方,迅速将另一片无菌玻片平放在上方,使血液与玻片接触。

e. 缓慢而均匀地将上方的玻片向下滑动,使血液在两片玻片之间形成薄膜。

f. 将制备好的血涂片放置在通风干燥的地方,待其完全干燥。

三、血涂片染色:1. 准备工作:将吉姆萨染色剂按照说明书的要求稀释至适当浓度。

2. 染色过程:a. 将制备好的血涂片放入染色盒中,使其与染色剂接触。

b. 根据需要,将血涂片浸泡在染色剂中的时间可调整为几分钟至几十分钟。

c. 取出血涂片,用清水轻轻冲洗,直至水清。

d. 将血涂片放置在通风处晾干。

四、结果与讨论:通过制备和染色的血涂片,我们可以观察到不同类型的血细胞,如红细胞、白细胞和血小板。

通过观察它们的数量、形状和结构,我们可以判断出是否存在异常情况,如贫血、感染或血液疾病等。

血涂片的制备和染色技术在临床诊断和科学研究中具有广泛的应用。

结论:通过本实验报告,我们了解了血涂片的制备过程和相关技术。

制备血涂片的步骤包括血液采集、血涂片制备和血涂片染色。

血涂片制备实验报告

血涂片制备实验报告

血涂片制备实验报告血涂片制备实验报告引言:血涂片制备是一项重要的实验技术,通常用于临床血液学检查和疾病诊断。

本实验旨在探究血涂片制备的步骤和技巧,以及其在血液学研究中的应用。

一、材料和方法1. 实验材料:- 血液样本:采用新鲜的全血样本。

- 血液薄片:玻片、刮刀、洗净的无菌玻璃片。

- 染色剂:Wright染色液、甲醇、乙醇。

- 实验仪器:显微镜、离心机。

2. 实验步骤:- 步骤一:准备血液样本。

使用无菌针头采集新鲜全血样本,将其转移到干净的离心管中。

- 步骤二:制备血涂片。

取一块洗净的玻璃片,将其倾斜放置于离心管中的血液样本上,使血液与玻璃片接触,形成一条薄而均匀的血涂片。

- 步骤三:干燥血涂片。

将制备好的血涂片放置于通风处,使其自然干燥。

- 步骤四:固定血涂片。

将干燥的血涂片浸入甲醇中,使其固定。

- 步骤五:染色血涂片。

将固定的血涂片浸入Wright染色液中,保持一定时间,使细胞染色。

- 步骤六:洗净血涂片。

将染色后的血涂片放入乙醇中,轻轻摇晃,将多余的染色剂洗净。

- 步骤七:干燥血涂片。

将洗净的血涂片放置于通风处,使其自然干燥。

- 步骤八:观察血涂片。

将干燥的血涂片放置于显微镜下,调节倍率和焦距,观察细胞形态和结构。

二、结果与讨论通过血涂片制备实验,我们成功制备了一张血涂片,并进行了染色和观察。

观察结果显示,血涂片中可见红细胞、白细胞和血小板等细胞成分。

红细胞呈圆形或椭圆形,中间凹陷,具有较大的体积;白细胞则呈现不同的形态和大小,包括淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞等;而血小板则呈现为小而不规则的颗粒状结构。

血涂片制备的关键在于制备过程中的技巧和细节注意。

首先,采集血液样本时应使用无菌针头,以避免污染。

其次,在制备血涂片时,要保持玻璃片与血液的均匀接触,避免形成过厚或过薄的血涂片。

此外,干燥和固定过程中的时间和条件也会对血涂片的质量产生影响。

过长或过短的干燥时间都会导致血涂片的异常,而固定过程中甲醇的使用量和浸泡时间也要控制适当。

血涂片制备与染色

血涂片制备与染色

血涂片制备与染色一、血涂片制备【器材】清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片(25 mm x75 mm ,厚度为0.8-1.2mm) 。

【操作】血涂片制备方法很多,目前临床实验室普遍采用的是手工推片法,在玻片近端1/3 处,加一滴(约0.05 ml) 充分混匀的血液,握住另一张边缘光滑的推片,以30°- 45°角使血滴沿推片迅速散开,快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。

【附注】1. 血涂片通常呈舌状或楔形,分头、体、尾三部分。

2. 推好的血涂片应在空气中晃动,使其尽快干燥。

天气寒冷或潮湿时,应于37℃恒温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。

3. 涂片的厚薄、长度与血滴的大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度及红细胞比容有关。

一般认为血滴大、角度大、速度快则血膜厚;反之则血膜薄。

红细胞比容高于正常时,血液黏度较高,保持较小的角度,可得满意结果;相反,红细胞比容低于正常时,血液较稀,则应用较大角度、推片速度应较快。

4. 血涂片应在1 h 内染色或在1 h 内用无水甲醇(含水量<3% )固定后染色。

5. 新购置的载破片常带有游离碱质,必须用浓度约1 mol/LHCL浸泡24 h 后,再用清水彻底冲洗,擦干后备用。

用过的载玻片可放人含适量肥皂或其他洗涤剂的清水中煮沸20 min ,洗净,再用清水反复冲洗,蒸馆水最后浸洗,擦干备用。

使用时,切勿用手触及玻片表面。

二、血涂片染色(一)瑞氏( Wright) 染色法【原理】瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应,又有物理吸附作用。

各种细胞由于其所含化学成分不同,对染料的亲合力也不一样,因此,染色后各种细胞呈现出各自的染色特点。

【试剂】1.瑞氏染液(1)瑞氏染料0.1 g(2)甲醇(AR) 60.0 ml 。

瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料美蓝的氧化物(天青)组成。

将瑞氏染料放人清洁干燥研钵里,先加少量甲醇,充分研磨使染料溶解,将己溶解的染料倒人棕色试剂瓶中,未溶解的再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解,甲醇全部用完为止。

血涂片的制备与染色实验报告

血涂片的制备与染色实验报告

血涂片的制备与染色实验报告血涂片的制备与染色实验报告简介本报告旨在介绍血涂片的制备与染色实验方法及步骤,以及相关注意事项和结果分析。

实验步骤1.准备所需材料:–血液样本–血涂片载玻片–血液涂片器–双氧水–细胞染色剂–拖尾液–显微镜片2.制备血涂片:–取一滴血液样本,滴于载玻片中。

–使用血涂片器,将血液涂片器顶端垂直贴附在载玻片上。

–慢慢向后移动血涂片器,使血液样本均匀地涂布于载玻片上。

3.干燥血涂片:–将制备好的血涂片放置于通风处,自然晾干。

4.染色处理:–将已干燥的血涂片浸入双氧水中,浸泡5分钟,用来溶解红细胞。

–用显微镊子夹取血涂片,轻轻晃动10次,使红细胞充分分散。

–轻轻将血涂片冲洗干净,以去除残留的双氧水。

–将血涂片浸入细胞染色剂中,染色1分钟。

–将血涂片冲洗干净,确保没有染色剂残留。

5.拖尾处理:–取适量拖尾液滴在盖玻片上。

–将染色好的血涂片倒置放在盖玻片上,使其与拖尾液接触。

–轻轻拖动血涂片,使细胞核进入拖尾液。

6.结果观察与分析:–将染色好的血涂片放置在显微镜下进行观察。

–分析细胞形态、染色程度等指标,记录结果。

注意事项•实验过程中需戴好实验手套,避免直接接触血液。

•制备血涂片时,务必将血液涂布均匀,以免影响结果。

•双氧水具有漂白作用,使用时需小心避免溅到衣物或皮肤上。

•染色剂使用过程中,应注意避免吸入或误食。

•结果分析时,应根据实验要求和标准参考范围进行判断。

结论通过本实验,我们成功制备了血涂片并进行了染色处理。

观察结果可为后续血液相关研究提供重要数据和参考。

在实验过程中,我们严格遵守实验室操作规程,并注意了安全事项。

希望本报告对今后的血涂片制备与染色实验有所帮助。

参考文献:无。

实验报告 血涂片的制备

实验报告 血涂片的制备

实验报告血涂片的制备实验报告:血涂片的制备引言:血涂片是一种常见的实验技术,用于观察和分析血液中的各种细胞和细胞形态。

本实验旨在探究血涂片的制备方法和技巧,以及观察和分析血涂片的步骤和注意事项。

材料与方法:1. 血液样本:采集新鲜的静脉血,使用无抗凝剂的试管收集。

2. 血涂片材料:玻璃片、洗净的玻璃滴管、无纺布、无纺布夹子、显微镜玻璃片、显微镜盖玻璃片。

3. 实验仪器:显微镜、离心机。

步骤:1. 准备工作:将玻璃片和显微镜玻璃片用去离子水和无纺布擦拭干净,保证表面无杂质。

2. 血液制备:使用无纺布夹子固定玻璃片,用洗净的玻璃滴管将血液滴在玻璃片上。

滴管与玻璃片的接触角度应适中,以保证血液均匀地分布在玻璃片上。

3. 血涂片制备:用另一块玻璃片将血液滴在玻璃片上的血液涂抹均匀,使血细胞分散均匀并形成单层。

4. 干燥处理:将血涂片放置在通风处晾干,或使用离心机低速离心,去除多余的液体。

5. 固定处理:将干燥的血涂片固定在95%乙醇中,浸泡2-3分钟,以保持细胞形态。

6. 染色处理:将固定的血涂片浸泡在Wright染料溶液中,浸泡时间根据染料浓度和需要的染色效果而定。

7. 清洗处理:用去离子水将染色过的血涂片洗净,去除多余的染料。

8. 干燥处理:将血涂片放置在通风处晾干,确保完全干燥。

9. 封片处理:将干燥的血涂片放在显微镜盖玻璃片上,用透明胶带固定。

结果与讨论:制备完毕的血涂片可用于显微镜观察。

通过血涂片,我们可以观察到血液中的各种细胞,如红细胞、白细胞和血小板,并且可以分析它们的数量、形态和结构。

在制备血涂片的过程中,有几个关键的步骤需要特别注意。

首先,血液的滴取和涂抹要均匀、细致,以避免细胞聚集和不均匀分布。

其次,血涂片在制备过程中要保持湿润,避免细胞干燥和变形。

此外,染色过程中的浸泡时间和染料浓度要控制好,以保证染色效果的准确性和清晰度。

血涂片的制备是一项基础实验技术,广泛应用于医学、生物学和病理学等领域。

血涂片制作的实验报告

血涂片制作的实验报告

一、实验目的1. 掌握血涂片的基本制作方法。

2. 了解血涂片在临床诊断中的应用。

3. 观察并分析血细胞形态学特点。

二、实验原理血涂片制作是血液学检查的基本技术之一,通过将血液涂抹在载玻片上,经过固定和染色,使血细胞在显微镜下呈现出不同的形态学特点,从而帮助医生进行疾病的诊断。

三、实验器材与试剂1. 器材:显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、载玻片、盖玻片、推片、瑞氏染液、0.9%NaCl溶液、蒸馏水等。

2. 试剂:瑞氏染液、0.9%NaCl溶液、蒸馏水等。

四、实验步骤1. 消毒与采血- 用70%酒精棉球消毒受试者的指腹,待酒精干燥后用采血针刺破指腹,使血液自然流出。

- 待第一滴血流出后,弃去,取干净载玻片,让血滴在离玻片一端中4-5mm处。

2. 推片- 取一块边缘光滑的载玻片作为推片,将其一端置于血滴前方,向后移动到接触血滴,使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40°角。

- 平稳地向另一端推出,使血液在载玻片上形成一层均匀的薄膜。

3. 干燥- 将推好的载玻片在空气中轻轻摇动,使血液自然干燥。

4. 固定- 用瑞氏染液将干燥的血涂片染色,放置约10分钟。

5. 洗涤- 用蒸馏水将染色的血涂片轻轻冲洗,去除多余的染液。

6. 吸水- 用吸水纸轻轻吸干血涂片上的水分。

7. 观察与记录- 在显微镜下观察血涂片,记录红细胞的形态、白细胞数量和类型等。

五、实验结果与分析1. 红细胞- 红细胞呈两面凹的圆饼状,边缘微暗,中间较宽,无细胞核。

2. 白细胞- 白细胞数量较少,体积比红细胞大,有细胞核。

根据细胞核的形态和染色特点,可将白细胞分为以下类型:a. 中性粒细胞:细胞核呈分叶状,染色较浅。

b. 嗜酸性粒细胞:细胞核呈2-3叶,染色较深。

c. 嗜碱性粒细胞:细胞核呈2-3叶,染色较深。

d. 淋巴细胞:细胞核呈圆形或椭圆形,染色较浅。

六、实验结论1. 通过本次实验,掌握了血涂片的基本制作方法。

2. 了解了血涂片在临床诊断中的应用。

血涂片制作实验报告

血涂片制作实验报告

血涂片制作实验报告血涂片制作实验报告一、引言在医学领域,血涂片是一项常见的实验技术,用于观察和分析血液中的各种细胞和成分。

本实验旨在探究血涂片制作的方法和步骤,并观察不同染色剂对细胞的影响。

二、材料与方法1. 实验材料:- 血液样本- 血涂片- 血涂片玻璃片- 血涂片染色剂(如吉姆萨染色液、伊昔洛尔染色液)- 显微镜2. 实验步骤:1)取一滴新鲜的血液样本,放在血涂片玻璃片的一端。

2)将另一片玻璃片倾斜放在血涂片上,使血液沿着玻璃片的一侧均匀涂开。

3)将血涂片晾干,避免阳光直射。

4)将干燥的血涂片,分别放入吉姆萨染色液和伊昔洛尔染色液中浸泡,按照染色液说明书上的时间要求。

5)取出血涂片,用水轻轻冲洗,使多余的染色剂洗掉。

6)将血涂片晾干,然后放置在显微镜下观察。

三、结果与讨论1. 血涂片制作过程中,需要注意的细节:- 血液样本应新鲜,避免血液凝固。

- 血涂片制作时,玻璃片的倾斜角度要适中,以保证血液均匀涂开。

- 血涂片晾干时,应避免阳光直射,以免影响后续观察。

2. 不同染色剂对细胞的影响:- 吉姆萨染色液:吉姆萨染色液主要用于染色细胞核,使其呈现暗蓝色或紫色。

这种染色剂对红细胞、白细胞和血小板的染色效果较好,能清晰地显示细胞核的形态和细胞数量。

- 伊昔洛尔染色液:伊昔洛尔染色液主要用于染色红细胞,使其呈现橙红色。

这种染色剂对红细胞的染色效果较好,能够清晰地显示红细胞的形态和数量。

3. 观察结果:- 在吉姆萨染色液中染色的血涂片下,可以清晰地观察到红细胞、白细胞和血小板的细胞核,细胞核呈现暗蓝色或紫色。

- 在伊昔洛尔染色液中染色的血涂片下,可以清晰地观察到红细胞的形态和数量,红细胞呈现橙红色。

4. 结果分析:- 吉姆萨染色液和伊昔洛尔染色液分别适用于不同的细胞成分的观察和分析。

- 吉姆萨染色液适用于细胞核的染色,可以帮助研究者观察和计数细胞核的数量。

- 伊昔洛尔染色液适用于红细胞的染色,可以帮助研究者观察和计数红细胞的数量。

血涂片制作与染色

血涂片制作与染色

血涂片制作与染色1.血涂片的制备血涂片的制备需要用到标本采集工具如无菌化的注射器、针头、试管、硅化玻璃片以及一些实验室试剂如无菌生理盐水、巴氏溶液和电解溶液等。

具体步骤如下:(1)将患者指尖的表面清洁卫生。

(2)选择一个适合的静脉穿刺点,通常是患者的中指或无名指。

(3)用酒精棉球清洁穿刺点,使其干燥。

(4)将无菌化的注射器连接到无菌生理盐水的瓶口上,并抽取一定量的生理盐水。

(5)将针头插入穿刺点后,将生理盐水匀速注射入患者的静脉内。

(6)在生理盐水滴入试管的同时,用眼微观检查,如果有血液进入注射器和管道内,即可采集。

宜用自来水洗净试管外表面,先不带盖座放倾空液。

(7)用试管夹夹住注射针,将针头推入试管内,然后轻轻射入试管底部液面下,同时向上抽手,保持抽液缓慢,可避免气泡产生。

(8)将采集到的血液缓缓带走,同时注入试管内,让其与100ml巴氏溶液进行搅拌。

(9)将混合液倾入瓷漏斗中,从中取出干燥了的血细胞。

2.血涂片的染色血涂片染色可使用湿涂片法或干涂片法,其中湿涂片法应用更广泛。

下文将以湿涂片法为例进行介绍。

(1)取一根硅化玻璃片,用纸巾或棉球擦拭干净。

(2)用血涂片染色钳将准备好的血涂片床放在玻璃片上。

(3)将一滴适量的Wright液倒在血涂片的中段。

Wright液包含了染色剂和辅助剂,其中主要成分是吡啶基甲重氮盐和三氧二氮菲盐。

(4)用另一根玻璃片的尾部将液滴均匀地扩开,并迅速在血涂片上来回涂抹,在染液与血涂片上充分接触并混合。

(5)保持血涂片在室温下静置5-10分钟,以促进染色反应的进行。

(6)用蒸馏水冲洗玻璃片上的染料,并将其晾干。

3.血涂片的观察与分析观察血涂片需用光学显微镜,常规放大倍数为1000倍。

观察血涂片时,应注意血细胞的形态、大小、核形态、细胞质染色情况及相关细胞间的比例等。

根据各种细胞的数量和比例,可以初步评估出是否存在异常细胞,及其可能的病理性质,如感染、贫血等。

总结:血涂片制作与染色是血液检查中重要的步骤之一,它能够帮助医生判断病情,制定治疗方案。

实验二 血涂片及染色

实验二 血涂片及染色
600ml、甘油15ml。 • (2)Ⅱ液:磷酸盐缓冲液(pH6.4~6.8),含磷酸二氢
钾0.3g、磷酸氢二钠0.2g、蒸馏水加至 1 000ml。
【操作】
• (1)采血 • (2)推片,推片与载片夹角30-45度平稳地向前
移动,血膜应呈舌状,头、体、尾三部分,且 清晰可见。
• (3)干燥: 晃动。37℃温箱中促干。
• (4)染色: 将玻片平置于染色架上,滴加 (Ⅰ液)3~5滴,
约0.5~lmin后,滴加等量缓冲液(Ⅱ液),摇动玻片混匀。 • (5)冲洗: 5-10min后用流水冲去染液,待干。 • (6)观察结果: 将干燥后的血涂片置显微镜下观察。用低
倍镜观察血涂片体、尾交界处的血细胞。
一张良好血涂片的要求:
5. 注意事项
① 血膜要干透后才能染色,否则染色时易脱落; ② 染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关, 一般染液淡、染色时间长些效果好; ③ 染液不能过少,以防蒸发沉淀;
④ 冲洗时不能先倒掉染液,应以流水冲,防染料 沉着。冲洗时间也不能长; ⑤ 染色过淡时可复染,复染时先将染料稀释好; ⑥ 染色过深可用水冲洗或浸泡,还可用甲醇脱色; ⑦ 分类最佳区域为体、尾交界处。
4. 影响瑞氏染色效果的一些因素: A. 染料放置时间; B. 溶液的酸碱度; C. 染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关。
厚薄适宜 头体尾明显 细胞分布均匀 边缘整齐 两端和两边留有空隙
标准血涂片Leabharlann 血涂片分布不 均主要原因:
推片边缘不齐、 用力不均匀、 载片不清洁
pH 的影响:
H+:碱性染料亲和力下降,增强伊红着色,出现红染 OH-:酸性染料亲和力下降,增强美蓝着色,出现 蓝染 PBS缓冲液:pH 6.4-6.8 以维持恒定的pH环境

血涂片的制备

血涂片的制备

血涂片的制备血涂片是一种常见的实验室技术,用于观察和分析血液中的细胞形态和数量。

它是一种简单而有效的方法,广泛应用于临床诊断、疾病监测和科学研究等领域。

下面将详细介绍血涂片的制备过程。

准备好所需的材料和设备,包括血液样本、玻片、洗涤液、染色剂和显微镜。

确保所有设备和材料的清洁和无菌。

接着,取一滴新鲜的全血样本,通常是从患者的指尖或静脉采集。

使用无菌的针头或采血针,在无菌条件下采集血液样本,并将其滴在玻片的一个端面上。

然后,迅速将另一片玻片倾斜放置在滴在玻片上的血液样本上。

保持两片玻片之间的角度,使血液在两片玻片之间均匀分布。

接下来,用轻而均匀的压力将两片玻片滑动开,使血液在玻片上均匀分布。

这个过程需要快速进行,以避免血液凝固。

然后,将制备好的血涂片立即在通风处晾干。

这个过程一般需要几分钟时间,取决于环境的温度和湿度。

血涂片晾干后,可以进行染色。

常用的染色剂有Wright染料和Giemsa染料。

将血涂片浸入染色剂中,按照染色剂的说明进行染色,一般需要数分钟至数十分钟。

染色完成后,用洗涤液轻轻冲洗血涂片,以去除多余的染色剂。

然后,用纸巾轻轻擦干血涂片,并将其放在通风处晾干。

使用显微镜观察血涂片。

将血涂片放在显微镜载物台上,调整倍率和焦距,以获得清晰的图像。

通过观察血涂片中的细胞形态和数量,可以进行疾病诊断、治疗监测或科学研究。

总结起来,血涂片的制备包括采集血液样本、制备涂片、晾干、染色和观察等步骤。

正确的制备过程和技术操作对于获得准确的结果至关重要。

血涂片的制备是一项简单但非常重要的实验室技术,它为疾病的诊断和治疗提供了有力的支持。

制作血涂片的实验报告

制作血涂片的实验报告

制作血涂片的实验报告制作血涂片的实验报告引言:血涂片是一种常用的实验技术,用于观察和分析血液中的细胞形态和数量。

本实验旨在探索制作血涂片的方法,并观察不同染色方法对细胞结构的影响。

通过本实验,我们可以更好地理解血液细胞的特征和功能。

材料与方法:1. 血液样本:本实验采用新鲜的人类全血样本。

2. 血涂片制备:使用无菌玻璃片和无菌血液涂片,将血液样本滴于玻璃片上,迅速涂开成薄膜。

3. 固定与染色:将血涂片在室温下晾干,然后进行固定和染色。

本实验采用两种不同的染色方法:吉姆萨染色和偏碱性甲苯胺蓝染色。

4. 显微镜观察:将制备好的血涂片放置在显微镜下,使用高倍镜进行观察和记录。

结果与讨论:1. 血涂片制备:制备血涂片时,关键是要迅速涂开血液样本,以获得均匀薄膜。

过程中需要注意手法的稳定性和技巧性,以避免产生空隙或过厚的细胞层。

2. 吉姆萨染色:吉姆萨染色是一种常用的染色方法,可以同时染色细胞核和细胞质。

观察结果显示,细胞核呈现紫色至深蓝色,细胞质呈现粉红色至橙红色。

该染色方法能够清晰地显示细胞核的形态和细胞质的颜色区分,有利于细胞的分类和计数。

3. 偏碱性甲苯胺蓝染色:偏碱性甲苯胺蓝染色主要用于染色白细胞,对红细胞的染色效果较差。

观察结果显示,白细胞呈现深蓝色至紫色,而红细胞呈现浅蓝色。

该染色方法有助于区分白细胞和红细胞,并可更好地观察白细胞的形态和数量。

4. 细胞形态观察:通过显微镜观察,我们可以清晰地看到不同类型的血细胞,如红细胞、白细胞和血小板。

红细胞呈现典型的圆盘状,白细胞则具有较大的细胞核和不同形状的细胞质。

血小板呈现为小而不规则的细胞片状结构。

通过观察细胞形态,我们可以初步判断细胞的健康状况和功能。

结论:本实验通过制备血涂片和不同染色方法的应用,成功观察和分析了血液中的细胞结构和数量。

吉姆萨染色和偏碱性甲苯胺蓝染色都是常用的染色方法,各有其适用的细胞类型。

通过显微镜观察,我们可以更好地了解血细胞的形态和功能,为进一步的研究提供了基础。

制作血涂片的实验报告

制作血涂片的实验报告

制作血涂片的实验报告
《制作血涂片的实验报告》
实验目的:
本实验旨在通过制作血涂片的过程,观察和学习血液的结构和特点,以及掌握制作血涂片的方法和技巧。

实验材料:
1. 血液样本
2. 血涂片
3. 血涂片制作工具(包括玻璃片、涂片钳、涂片刷等)
4. 显微镜
5. 染色剂(如甲苯胺蓝)
实验步骤:
1. 取一滴血液样本滴在玻璃片上,用另一块玻璃片将其涂抹开。

2. 将涂有血液的玻璃片放在涂片钳上,用涂片刷轻轻拭去多余的血液。

3. 将涂有血液的玻璃片在空气中晾干,或用吹风机吹干。

4. 将干燥的血涂片放入染色剂中浸泡片刻,然后取出晾干。

5. 将制作好的血涂片放在显微镜下观察,记录所见的血液结构和特点。

实验结果:
通过显微镜观察,我们可以清晰地看到血细胞的形态和数量。

红细胞呈现出圆形或椭圆形,中间凹陷,颜色鲜艳;白细胞呈现出不同的形态和大小,有的呈现出颗粒状,有的呈现出光滑的形态。

血小板呈现出颗粒状,大小不一。

实验结论:
通过本次实验,我们成功地制作了血涂片,并通过显微镜观察到了血液的结构
和特点。

通过观察,我们了解到了血细胞的形态和数量,对血涂片的制作方法
和技巧也有了更深入的理解。

这对我们日后的实验和研究工作具有重要的意义。

总结:
制作血涂片的实验过程虽然简单,但需要细心和耐心。

通过这次实验,我们不
仅学习到了血涂片的制作方法,还对血液的结构和特点有了更深入的了解。


望通过今后的实验和学习,我们可以进一步掌握更多的实验技巧和知识,为科
学研究和医学工作做出更大的贡献。

血涂片的制作实验报告

血涂片的制作实验报告

血涂片的制作实验报告血涂片的制作实验报告一、引言血涂片是一种常见的实验技术,用于观察和分析血液中的各种细胞和细胞成分。

本实验旨在探究血涂片的制作方法和步骤,并观察其在显微镜下的特征。

二、材料与方法1. 实验材料- 血液样本:采用新鲜的全血样本,可以是人体血液或动物血液。

- 血涂片玻片:清洁、无尘的玻片。

- 血涂片刷:用于涂抹血液样本的细长刷子。

- 血涂片染色剂:常用的有Wright染料、Giemsa染料等。

2. 实验步骤- 准备血液样本:将新鲜的全血样本采集到干净的试管中,避免污染。

- 制作血涂片:将玻片持斜角度放于血液滴上,使血液自然流动,形成薄膜。

- 干燥血涂片:将制作好的血涂片放置于通风处,自然晾干。

- 染色处理:将干燥的血涂片浸泡于染色剂中,时间根据染色剂的要求进行。

- 清洗与干燥:将染色后的血涂片用水冲洗,然后晾干。

三、实验结果与讨论1. 血涂片的特征经过制作和染色处理后,观察血涂片下显微镜,可以看到以下特征:- 红细胞:呈现圆形或略扁平的红色细胞体,中央凹陷,边缘光滑。

- 白细胞:大小不一,核质比较大,核型多样,染色深浅不一。

- 血小板:呈现小而圆的形状,染色颗粒均匀。

2. 实验注意事项- 血涂片制作过程中要注意操作的卫生和无菌,避免污染。

- 制作血涂片时,要控制好血液的流动速度和涂抹厚度,以保证制片的质量。

- 在染色处理过程中,要严格按照染色剂的要求和时间进行处理,避免过度染色或染色不均匀。

3. 实验结果分析通过观察血涂片下显微镜的特征,可以对血液样本中的细胞和细胞成分进行分析和判断。

例如,红细胞的数量和形态可以反映贫血或其他疾病的情况;白细胞的数量和核型可以提示炎症或感染的存在;血小板的数量和形态可以反映出凝血功能的异常等。

四、结论本实验通过制作血涂片并进行染色处理,成功观察到了血液样本中的红细胞、白细胞和血小板等细胞和细胞成分。

血涂片技术是一种简单而有效的方法,可以用于血液学研究、临床诊断和疾病监测等方面。

二、血涂片制备

二、血涂片制备


图1-8
涂制血片的方法
推好的血片
2.血片的染色 血片的染色有多种方法,但常用瑞特氏染色法。 瑞特氏染色法: 先用玻璃铅笔在血膜两端各划一线,以防染液外 溢,将血片平放于水平支架上;滴加瑞氏染液于 血片上,直至将血膜盖满为止;待染色1~2min后, 再加等量磷酸盐缓冲液,并用洗耳球轻轻吹动, 使染色液与缓冲液混合均匀,再染色3~5min;最 后用蒸馏水冲洗血片,待自然干燥或用吸水纸吸 干后镜检。所得血片呈樱红色者为佳。
二、血涂片的制备
一般分血液涂片制作、染色、镜检分类计数三步进行。 1.血片的制作 选取一边缘光滑平整的载玻片作推片,用左手的拇指 和中指夹持一洁净载玻片,取被检血液一滴(最好是新鲜 的未加抗凝剂的血液),置于其右端,右手持推片置于血 滴前方,并轻轻向后移动推片,使与血液接触,待血液扩 散开后,再以30°~40°角度向前均速推进涂抺,即形成 一血膜,迅速自然风干(图1-8)。 涂片时,血滴越大,角度(两玻片之间的锐角)越大, 推片速度越快,则血膜越厚;反之则血膜越薄。血液分布 应均匀,厚度适当,对光观察呈霓虹色,血膜位于玻片中 央,两端留有适当空隙,以便注明动物类别、编号及日期, 即可染色。反之,重行制作,直至合格后,再行染色。
染色
பைடு நூலகம்
冲 洗

血涂片制作实验报告

血涂片制作实验报告

一、实验目的1. 掌握血涂片的制作方法。

2. 熟悉血细胞的基本形态和分布特点。

3. 了解血涂片染色技术。

二、实验原理血涂片是血液学检查的基本方法,通过将血液涂布在载玻片上,经过固定、染色等步骤,使血液中的各种细胞在显微镜下呈现出不同的颜色和形态,便于观察和分析。

血涂片制作的关键在于血液的涂布、固定和染色。

三、实验器材与试剂1. 器材:载玻片、推片、采血针、酒精棉球、生理盐水、瑞氏染液、蒸馏水、显微镜等。

2. 试剂:10%甲醛溶液、95%乙醇、甘油等。

四、实验步骤1. 消毒与采血(1)取一支采血针,用酒精棉球消毒皮肤。

(2)将采血针对准皮肤,轻轻刺入,使血液自然流出。

(3)用生理盐水湿润载玻片,取少量血液滴在载玻片中央。

2. 推片(1)将推片的一端放在血滴上方,另一端紧贴载玻片。

(2)以30-40°角将推片平稳地推出,使血液均匀分布在载玻片上。

3. 固定(1)将血涂片在空气中晾干。

(2)将血涂片浸入10%甲醛溶液中固定5-10分钟。

4. 染色(1)将固定好的血涂片浸入95%乙醇中脱色2-3分钟。

(2)将脱色后的血涂片浸入瑞氏染液中染色3-5分钟。

(3)将染色的血涂片浸入蒸馏水中分化1-2分钟。

5. 观察(1)将染色的血涂片放在显微镜下观察。

(2)低倍镜下观察红细胞、白细胞和血小板的形态和分布特点。

(3)高倍镜下观察白细胞和血小板的细节结构。

五、实验结果与分析1. 红细胞:呈两面凹的圆饼状,无细胞核,细胞质内充满血红蛋白,略呈碱性。

2. 白细胞:分为三种类型:中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。

中性粒细胞呈圆形或椭圆形,细胞核分叶;嗜酸性粒细胞呈椭圆形,细胞核为2-3叶;嗜碱性粒细胞呈圆形或椭圆形,细胞核为2-3叶。

3. 血小板:呈不规则形状,无细胞核,细胞质内含有血小板颗粒。

六、实验总结本次实验成功制作了血涂片,并观察到了红细胞、白细胞和血小板的形态和分布特点。

通过本次实验,我们掌握了血涂片的制作方法,提高了对血液细胞形态学知识的认识,为今后的临床诊断工作打下了基础。

实验二血涂片制备白细胞分类计数

实验二血涂片制备白细胞分类计数

单核细胞(Mo):在瑞氏染色涂片上为12~
20µm,胞体圆形、椭圆形或不规则形;核形多种 多样,最重要的特点是染色质较细致疏松,呈丝 网状或条缕状,着色较淡胞浆较多,淡兰色,含
大量细小尘土样颗粒。
实验二血涂片制备白细胞分类计数
中性粒细胞
血小板
嗜酸性粒细胞
淋巴细胞
嗜碱性粒细胞(右)
单核细胞
实验二血涂片制备白细胞分类计数
试剂: Wright’s(瑞氏)染液:Wright’s色素 粉末0.1g,溶于60 ml甲醇。
实验二血涂片制备白细胞分类计数
瑞氏染色原理
瑞氏粉是由伊红和美蓝混合后组成的一种中性盐染料。伊红是 一种酸性染料,为伊红钠盐,其有色部分为阴离子;美蓝是一种碱 性染料,为氯化美蓝,有色基团为阳离子。如以M+代表美蓝,以 E-代表伊红。将适量的ME溶解在甲醇中,即成为瑞氏染液。
实验二血涂片制备白细胞分类计数
瑞氏染色原理
甲醇的作用可使ME溶解,解离为M+和E-,这两种有色离 子可以选择性地吸附血细胞内的不同成分而着色。
各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同,对各种染 料的亲和力也不一样,因此,在血片上可以见到不同的着色。细 胞中碱性物质与酸性染料伊红结合染成红色 ;细胞中的酸性物质 可与染液中的碱性染料美蓝结合染成蓝色 ;当细胞含酸、碱性物 质各半时,它们既与酸性染料作用,又与碱性染料作用,染成淡 紫红色。
实验二血涂片制备白细胞分类计数
嗜酸性粒细胞(Eo):较中性粒细胞稍大,胞 核多为两叶,呈眼镜、八字形,核染色质粗糙 染深紫红色,胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗 粒,瑞氏染色时呈桔红色,有折光性。
实验二血涂片制备白细胞分类计数
嗜碱性粒细胞(Ba):胞浆中含有大小不等

血涂片的制备-干货分享

血涂片的制备-干货分享
目的要求 1.掌握血涂片的制备方法; 2.认识红细胞及各种白细胞的典型形态; 3.掌握显微测微尺的使用方法。
1
实验原理 • 涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本,染色后可
对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片 、
8
再取另一张边缘光滑的双凹片,斜置于血滴的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿 玻片端展开成线状。
9
两玻片的角度以30~45°为宜,轻轻将双凹片向前匀速推进,即涂成 血液薄膜。
30~45°
10
染色 • 待涂片在空气中完全干燥后,滴加数
滴Wright’s染液盖满血膜为止,染色 1~3 min。然后滴加等量蒸馏水,使 其与染液均匀混合,静置10~15 min。 用蒸馏水冲去染液,吸水纸吸干,镜 检。
台测微尺的刻度; 3.移动镜台测微尺,同时转动目镜,使目镜测微尺与镜台测微尺平行靠近,
并将两尺的“0”点刻度线或某刻度线对齐.然后从左向右查看两尺刻度 线另一重合处,记录重合线间目镜测微尺与镜台测微尺的格数.按下式 计算目镜测微尺每格等于多少微米。
21
目镜测微尺的标定
n×a X=
M
X:目镜测微尺每格的实际长度 a:镜台测微尺每格的实际长度 n:镜台测微尺的刻度数。 M:目镜测微尺的刻度数。
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共分为10格 总长1mm
镜台测微尺
每个大格又可分为10个小格, 每小格的实际长度为0.01mm
总长0.1mm
19
目镜测微尺
可以通过旋转旋钮移动 目镜测微尺中交叉线的
位置
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使用方法
1.取下目镜,将目镜测微尺的刻度面向下放入目镜中,旋上透镜; 2.将镜台测微尺盖片面朝上放在载物台上,用低倍镜观察,调节焦距看清镜

血涂片的制备

血涂片的制备
适宜,头体尾分明,细胞分布均匀,边缘整齐,血膜与载玻片的两边和两端各留有0.3cm和 0.5cm的空隙,血膜长度占载玻片的2/3左右。
● 常见血涂片质量不佳的原因:
● 2.厚血膜涂片法
● 取新鲜血液1滴于载玻片的中央,用推片的一角将血滴由内向外旋转涂布,制成厚薄均匀、直径约 1.5cm的圆形血膜,待自然干燥后,滴加数滴蒸馏水,使红细胞溶解,脱去血红蛋白,倾去水, 血涂片干燥后即可染色并用显微镜检查。
● 本方法特别适合检查疟原虫、微丝蚴等。
血涂片的制备
●(一)载玻片的清洁●(二)血涂片的制作
● (一) 载玻片的清洁
● 1.新玻片 1mol/L HCI泡24小时→水洗→干燥。
● 2.旧玻片 肥皂水或其他合成洗涤剂水中煮沸20分钟→ 热水洗→自来水洗→干燥。(→95%乙醇 泡1小时→蒸馏水洗→干后备用)。
● 血涂片的制作 ● 1.薄血膜法
● 方法: ● ● ● ● ●
(1) 取血滴。 (2)散开血滴。 (3) 推片。 (4)干燥。
● 取血液一滴,置于载玻片一端.以边缘平滑的推片(推片两端应平整光滑,比载玻片稍窄或磨去两 角)的一端,放在血滴前方,逐渐后移接触血滴,血液立即沿推片散开。
● 血膜的影响因素: ● (1)血滴大小、 ● (2)推片与载玻片之间的角度、 ● (3)推片时的速度有关。 ● 血滴愈大、角度愈大、推片时速度愈快,则血膜越厚;反之血膜越薄。

实验二血涂片的制备

实验二血涂片的制备

实验二血涂片的制备Preparation of Blood Smear实验原理使用推片将血液在载玻片制成血膜。

试剂器材载玻片(清洁、干燥、无尘、无油脂、25cm×75cm,厚度0.8mm~1.2mm)、推片。

操作步骤(1)采血静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴(约0.05ml)抗凝血,如果使用手指采血则直接用洁净玻片蘸 1 滴血。

坦地方,右手持推片从后方或前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈30。

~45。

角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片(图1-6),血涂片应呈舌状,头、体、尾清晰可见。

(3)干燥将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。

天气寒冷或潮湿时,应于37 ℃温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。

图1-6 推片(4)标记在载玻片的一端用记号笔编号。

注意事项1.要制备良好的血细胞涂片,玻片必须干净。

新购置的载玻片常带有游离碱质,必须用约1mol/L HCl浸泡24h后,再用清水彻底冲洗,擦干后备用。

用过的载玻片可放入含适量肥皂或其他洗涤剂的清水中煮沸20min,洗净,再用清水反复冲洗,蒸馏水最后浸洗后擦干备用。

边缘破碎、玻面有划痕的玻片不能再用。

使用玻片时,只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。

2.最好使用非抗凝血制备血涂片,也可用EDTA抗凝血制备。

使用抗凝血标本时,应充分混匀后再涂片。

抗凝血标本应在采集后4h内制备血涂片,时间过长可引起中性粒细胞和单核细胞的形态学改变。

制片前标本不宜冷藏。

涂片的厚度、长度与血滴的大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度及红细胞比容有关。

一般认为血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚,反之则血膜薄。

故针对不同病人应有的放矢,对血细胞比容高、血粘度高的病人应采用小血滴、小角度、慢推;而贫血患者则应采用大血滴、大角度、快推。

3.血膜应厚薄均匀适度,头尾及两侧有一定的空隙。

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实验二血涂片的制备
Preparation of Blood Smear
实验原理
使用推片将血液在载玻片制成血膜。

试剂器材
载玻片(清洁、干燥、无尘、无油脂、25cm×75cm,厚度0.8mm~1.2mm)、推片。

操作步骤
(1)采血静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴(约0.05ml)抗凝血,如果使用手指采血则直接用洁净玻片蘸 1 滴血。

坦地方,右手持推片从后方或前方接近血滴,使血液沿
推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈
30。

~45。

角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血
涂片(图1-6),血涂片应呈舌状,头、体、尾清晰可见。

(3)干燥将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅
速干燥。

天气寒冷或潮湿时,应于37 ℃温箱中保温促
干,以免细胞变形缩小。

图1-6 推片(4)标记在载玻片的一端用记号笔编号。

注意事项
1.要制备良好的血细胞涂片,玻片必须干净。

新购置的载玻片常带有游离碱质,必须用约1mol/L HCl浸泡24h后,再用清水彻底冲洗,擦干后备用。

用过的载玻片可放入含适量肥皂或其他洗涤剂的清水中煮沸20min,洗净,再用清水反复冲洗,蒸馏水最后浸洗后擦干备用。

边缘破碎、玻面有划痕的玻片不能再用。

使用玻片时,只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。

2.最好使用非抗凝血制备血涂片,也可用EDTA抗凝血制备。

使用抗凝血标本时,应充分混匀后再涂片。

抗凝血标本应在采集后4h内制备血涂片,时间过长可引起中性粒细胞和单核细胞的形态学改变。

制片前标本不宜冷藏。

涂片的厚度、长度与血滴的大小、推片与载玻片之间的角度、推片时的速度及红细胞比容有关。

一般认为血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚,反之则血膜薄。

故针对不同病人应有的放矢,对血细胞比容高、血粘度高的病人应采用小血滴、小角度、慢推;而贫血患者则应采用大血滴、大角度、快推。

3.血膜应厚薄均匀适度,头尾及两侧有一定的空隙。

如血膜面积太小,可观察的部分会受到局限,故应以在离开载玻片另一端2cm的地方结束涂抹为宜。

一些体积特大的特殊细胞常在血膜的尾部出现,因此画线应注意保存血涂片尾部细胞。

4.血涂片必须充分干燥后方可固定染色,否则细胞尚未牢固地吸附在玻片
上,在染色过程中容易脱落。

实验评价
血涂片制备是血液学检查的重要基本技术之一。

一张良好的血片,厚薄要适宜,头体尾要明显,细胞分布要均匀,膜的边缘要整齐,并留有一定的空隙。

血涂片制备时手工推片法用血量少、操作简单,是最广泛应用的方法。

除可
获得满意的血涂片外,抗凝的血液病标本离心后取其灰白层涂片,可提高阳性检出率。

此外,还可根据不同需要(如疟原虫、微丝蚴检查等)采用厚血涂片法。

随着当今的自动化的发展,出现了自动血液涂片和染色装置。

自动的血液涂抹装置主要有两类,一类是离心法,可以将少量细胞浓缩涂片;另一类是机械涂片法,其模拟手工涂片,适用于大量血涂片的制备。

一般来说自动血液涂片装置可获得细胞分布均匀、形态完好的血片,但尚未普遍推广。

思考题
从外观来判断,一张好的血涂片有哪些特征?。

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