血涂片制作
血涂片的制作实验报告
一、实验目的1. 掌握血涂片的制作方法。
2. 了解血细胞的形态结构及其分布。
3. 学习显微镜的使用技巧。
二、实验原理血涂片是血液学检查的基本方法之一，通过制作血涂片，可以在显微镜下观察血细胞的形态结构，了解血细胞的分布情况，为血液病的诊断提供依据。
三、实验器材与试剂1. 器材：显微镜、载玻片、盖玻片、采血针、酒精棉球、蒸馏水、瑞氏染液、生理盐水、吸管、滴管等。
2. 试剂：生理盐水、瑞氏染液。
四、实验步骤1. 采血：用采血针对指腹进行采血，注意采血时动作轻柔，避免出血过多。
2. 制备血涂片：a. 取载玻片，用酒精棉球擦拭干净；b. 将载玻片倾斜45°角，用滴管吸取少量生理盐水；c. 将采血针插入载玻片上的生理盐水中，使血液自然流出；d. 待血液流出后，将载玻片放平，使血液在载玻片上形成一薄层；e. 用盖玻片轻轻覆盖在血液上，避免产生气泡；f. 轻轻推动盖玻片，使血液均匀分布。
3. 固定与染色：a. 将制备好的血涂片放入固定液（瑞氏染液）中浸泡5-10分钟；b. 取出血涂片，用蒸馏水冲洗干净；c. 将血涂片放入染色液中染色，染色时间为30分钟；d. 取出血涂片，用蒸馏水冲洗干净。
4. 观察与记录：a. 将染色后的血涂片放置在显微镜载物台上；b. 调整显微镜的焦距，观察血细胞的形态结构及分布；c. 记录观察结果。
五、实验结果与分析1. 红细胞：红细胞呈两面凹的圆饼状，无细胞核，细胞质主要成分为血红蛋白。
在显微镜下观察，红细胞数量最多，分布均匀。
2. 白细胞：白细胞呈圆形、椭圆形或不规则形，有细胞核。
在显微镜下观察，白细胞数量较少，分布不均匀。
3. 血小板：血小板形状不规则，无细胞核，数量较多。
在显微镜下观察，血小板分布均匀。
六、实验结论通过本次实验，我们掌握了血涂片的制作方法，了解了血细胞的形态结构及其分布。
在显微镜下观察，红细胞数量最多，呈两面凹的圆饼状；白细胞数量较少，有细胞核；血小板数量较多，无细胞核。
血涂片制作与染色
姬姆萨染色法
总结词
姬姆萨染色法是一种高分辨率的血涂片染色方法，能够更好地显示出细胞的细节 和特征。
详细描述
姬姆萨染色法使用姬姆萨染料对血涂片进行染色，能够使细胞核呈蓝色，细胞质 呈红色，各种血细胞在染色后呈现出不同的颜色和形态，易于鉴别。该方法染色 效果较为稳定，但需要较长的染色时间。
苏木素-伊红染色法
05 血涂片制作与染色注意事项
CHAPTER
采血注意事项
采血部位
选择合适的采血部位，通常为手指或耳垂，确保 采血过程无菌操作，避免感染。
采血量
根据实验需求，控制采血量，确保足够用于制作 血涂片，同时避免过多采血造成浪费。
采血时间
选择合适的时间进行采血，避免在进食、运动后 等情况下采血，以免影响结果。
染色注意事项
染色剂选择
根据实验需求选择合适的染色剂，确保染色效果良好，能够清晰 显示细胞结构。
染色时间
控制染色时间，确保染色均匀，避免染色过度或不足。
冲洗与脱水
在染色完成后，进行充分的冲洗与脱水，去除多余的染色剂，使观 察效果更佳。
结果观察注意事项
观察方法
01
采用正确的观察方法，如显微镜观察，确保观察结果准确可靠。
观察指标
02
关注细胞形态、大小、染色情况等指标，综合分析结果，避免
片面解读。
结果解读
03
结合临床情况和其他检查结果，综合分析血涂片结果，为临床
诊断和治疗提供依据。
谢谢
THANKS
总结词
苏木素-伊红染色法是一种常用的组织学染色方法，常用于显 示组织结构和细胞形态。
详细描述
苏木素-伊红染色法使用苏木素染料和伊红染料对组织切片进 行染色，能够使细胞核呈蓝色，细胞质呈粉红色，便于观察 组织结构和细胞形态。该方法染色效果稳定，但对某些特殊 类型的细胞可能染色效果不佳。
血液一般检验—血涂片制备与染色(临床检验课件)
免疫学及临床检验教研室
良好的血涂片要求:
厚薄适宜, 头体尾分明, 细胞分布均匀, 边缘整齐, 血膜与载玻片的 两边和两端各留有0.3cm和0.5cm的空隙, 血膜长度占载玻片的2/3 左右。
免疫学及临床检验教研室
常见血涂片质量不佳的原因:
免疫学及临床检验教研室
2. 厚血膜涂片法
取新鲜血液1滴于载玻片的中央, 用推片 的一角将血滴由内向外旋转涂布, 制成厚薄均 匀、直径约1.5cm的圆形血膜, 待自然干燥后, 滴加数滴蒸馏水, 使红细胞溶解, 脱去血红蛋 白, 倾去水, 血涂片干燥后即可染色并用显微 镜检查。
免疫学及临床检验教研室
将推片与载 片保持30°-45° 夹角, 平稳向前 推进至载玻片的 另一端, 残片上 即留下一薄层血 膜。
免疫学及临床检验教研室
血膜的影响因素:
（1）血滴大小、 （2）推片与载玻片之间的角度、 （3）推片时的速度有关。
血滴愈大、角度愈大、推片时速度愈快, 则血膜愈厚；反之 血膜愈薄。
载玻片的清洁 血涂片的制备 常见问题处理
免疫学及临床检验教研室
血涂片的制备
• (一） 载玻片的清洁 • （二） 血涂片的制作
免疫学及临床检验教研室
（一） 载玻片的清洁
1. 新玻片 1mol/L HCl泡24小时→水洗→干燥。 2. 旧玻片 肥皂水或其他合成洗涤剂水中煮沸20分钟→热水洗→自 来水洗→干燥。(→95%乙醇泡1小时→蒸馏水洗→干后备用)。
染色时常用缓冲液（pH6.4～6.8）来调 节染色时的pH值，以达到满意的染色效 果（表1-11）。
免疫学及临床检验教研室
【染色方法】 1. 加瑞特染液,固定细胞0.5～1min。 2. 加等量或1.5倍量的缓冲液, 并与染液吹匀, 室温下染色 10min左右。 3. 冲洗待干。
血涂片的制作流程
血涂片的制作流程
血涂片是一种常见的临床检查方法，用于观察血液中的细胞形态和数量，以帮助医生诊断疾病。
下面将介绍血涂片的制作流程。
1.采集血液样本
首先需要采集患者的血液样本。
通常采用的方法是在患者的手臂上绑上一条绷带，使血管充血，然后用一根针头穿刺血管，将血液采集到一根试管中。
2.制作血涂片
将采集到的血液样本滴在玻片上，然后用另一根玻片将其涂开，使血液均匀地分布在玻片上。
这个过程需要非常小心，以避免血液样本的污染或损坏。
3.固定血涂片
将制作好的血涂片放在一个固定剂中，通常使用的是甲醛或乙醇。
这个过程可以固定细胞的形态和结构，以便更好地观察。
4.染色
将固定好的血涂片放在染色剂中，通常使用的是伊红染或吉姆萨染。
这个过程可以使细胞更加清晰地显示出来，以便更好地观察和分析。
5.观察和分析
将染好色的血涂片放在显微镜下观察和分析。
医生可以通过观察细胞的形态、大小、数量和排列方式来判断患者的健康状况，例如是否存在贫血、感染或癌症等疾病。
血涂片制作流程需要非常小心和精确，以确保获得准确的结果。
这个过程需要专业的技能和经验，只有经过专业的培训和实践，才能够熟练掌握。
制作血涂片实验报告
一、实验目的1. 掌握血涂片的制备方法。
2. 了解血液细胞的形态和数量。
3. 熟悉显微镜的使用技巧。
二、实验原理血涂片是临床检验中常用的一种方法，通过将血液涂抹在载玻片上，经过染色、固定等步骤，使血液中的细胞在显微镜下呈现出清晰的形态。
通过观察血涂片，可以了解血液中细胞的数量、形态及分布情况，从而辅助诊断疾病。
三、实验器材1. 显微镜2. 载玻片3. 盖玻片4. 刺血针5. 酒精棉球6. 瑞氏染液7. 滴管8. 烧杯9. 镜台10. 玻片夹四、实验步骤1. 采血：在耳垂或指尖部位用酒精棉球消毒，用刺血针刺破皮肤，使血液自然流出。
2. 涂片：用载玻片沾取第二滴血液，将载玻片倾斜45度，用另一载玻片的一端将血液均匀涂抹在载玻片上，形成薄层。
3. 干燥：将涂好的血涂片放在空气中自然干燥。
4. 固定：用酒精棉球轻轻擦拭血涂片边缘，固定细胞。
5. 染色：将瑞氏染液滴在血涂片上，染色时间为5-10分钟。
6. 冲洗：用蒸馏水冲洗血涂片，去除多余染液。
7. 吸干：用吸水纸轻轻吸干血涂片上的水分。
8. 观察显微镜：将血涂片放在显微镜载物台上，先用低倍镜观察，再用高倍镜观察细胞的形态和数量。
五、实验结果与分析1. 低倍镜观察：在低倍镜下观察到红细胞、白细胞和血小板，红细胞呈两面凹陷的圆饼状，白细胞呈球形或椭圆形，有细胞核，血小板较小，形态不规则。
2. 高倍镜观察：在高倍镜下观察到红细胞的形态、白细胞的大小、细胞核的形态及血小板的特点。
3. 统计分析：统计血涂片中红细胞、白细胞和血小板的数量，并计算百分比。
六、实验讨论1. 实验过程中，血液涂抹的厚度要适中，过厚会导致细胞重叠，过薄则不易观察到细胞。
2. 染色时间不宜过长，以免细胞变形。
3. 观察时，应先在低倍镜下找到细胞分布均匀、染色良好的区域，再进行高倍镜观察。
4. 通过本次实验，掌握了血涂片的制备方法，了解了血液细胞的形态和数量，提高了显微镜的使用技巧。
七、实验总结通过本次实验，我们对血涂片的制备方法有了更深入的了解，掌握了血液细胞的观察技巧。
血涂片制作的实验报告
一、实验目的1. 掌握血涂片的基本制作方法。
2. 了解血涂片在临床诊断中的应用。
3. 观察并分析血细胞形态学特点。
二、实验原理血涂片制作是血液学检查的基本技术之一，通过将血液涂抹在载玻片上，经过固定和染色，使血细胞在显微镜下呈现出不同的形态学特点，从而帮助医生进行疾病的诊断。
三、实验器材与试剂1. 器材：显微镜、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、载玻片、盖玻片、推片、瑞氏染液、0.9%NaCl溶液、蒸馏水等。
2. 试剂：瑞氏染液、0.9%NaCl溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 消毒与采血- 用70%酒精棉球消毒受试者的指腹，待酒精干燥后用采血针刺破指腹，使血液自然流出。
- 待第一滴血流出后，弃去，取干净载玻片，让血滴在离玻片一端中4-5mm处。
2. 推片- 取一块边缘光滑的载玻片作为推片，将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载玻片呈30-40°角。
- 平稳地向另一端推出，使血液在载玻片上形成一层均匀的薄膜。
3. 干燥- 将推好的载玻片在空气中轻轻摇动，使血液自然干燥。
4. 固定- 用瑞氏染液将干燥的血涂片染色，放置约10分钟。
5. 洗涤- 用蒸馏水将染色的血涂片轻轻冲洗，去除多余的染液。
6. 吸水- 用吸水纸轻轻吸干血涂片上的水分。
7. 观察与记录- 在显微镜下观察血涂片，记录红细胞的形态、白细胞数量和类型等。
五、实验结果与分析1. 红细胞- 红细胞呈两面凹的圆饼状，边缘微暗，中间较宽，无细胞核。
2. 白细胞- 白细胞数量较少，体积比红细胞大，有细胞核。
根据细胞核的形态和染色特点，可将白细胞分为以下类型：a. 中性粒细胞：细胞核呈分叶状，染色较浅。
b. 嗜酸性粒细胞：细胞核呈2-3叶，染色较深。
c. 嗜碱性粒细胞：细胞核呈2-3叶，染色较深。
d. 淋巴细胞：细胞核呈圆形或椭圆形，染色较浅。
六、实验结论1. 通过本次实验，掌握了血涂片的基本制作方法。
2. 了解了血涂片在临床诊断中的应用。
血涂片的制备
血涂片的制备
血涂片是一种常见的医学检查方法，它可以通过显微镜观察血液细
胞的形态和数量，从而帮助医生诊断疾病。
下面将从材料准备、制备
步骤和注意事项三个方面介绍血涂片的制备方法。
一、材料准备
制备血涂片需要的材料有：血液样本、玻璃片、无菌棉签、生理盐水、甲醇、乙醇、甲苯、染色剂（如吉姆萨染色液）等。
二、制备步骤
1.取一块干净的玻璃片，用无菌棉签在玻璃片上涂上一层薄薄的血液样本。
2.将玻璃片放在通风处晾干，使血液样本充分干燥。
3.将玻璃片浸泡在生理盐水中，轻轻摇晃，使血液样本充分溶解。
4.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
5.将玻璃片浸泡在甲醇中，固定细胞形态。
6.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
7.将玻璃片浸泡在乙醇中，使细胞脱水。
8.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
9.将玻璃片浸泡在甲苯中，使细胞透明。
10.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
11.将玻璃片浸泡在染色剂中，染色。
12.将玻璃片取出，用无菌棉签擦拭干净。
13.将玻璃片放在通风处晾干，制备完成。
三、注意事项
1.制备血涂片时要注意无菌操作，避免污染。
2.血液样本要新鲜，避免血液凝固。
3.制备过程中要注意时间控制，避免细胞形态变化。
4.染色剂的选择要根据需要进行，不同染色剂对细胞的染色效果不同。
5.制备完成后要注意保存，避免受潮和污染。
总之，血涂片的制备是一项细致的工作，需要严格按照步骤进行操作，才能得到准确的检查结果。
希望本文能对大家有所帮助。
血涂片制作和白细胞分类
血涂片制作和白细胞分类血涂片制作和白细胞分类是临床医学中常用的方法之一，它能够帮助医生准确诊断和评估一些血液疾病。
本文将介绍血涂片的制作过程以及白细胞的分类方法。
一、血涂片的制作过程血涂片的制作是通过将一滴新鲜的血液涂抹在载玻片上，并进行染色和固定处理后得到的。
这个过程主要包括以下几个步骤：1. 准备工作：在制作血涂片之前，需要准备好所需的材料，包括载玻片、血液采集器、消毒液、染色液等。
同时，需要确保工作台面整洁干净，以确保结果的准确性和可靠性。
2. 血液采集：使用消毒液消毒患者的指尖，并轻轻按压以促使血液涌出。
用血液采集器收集一滴新鲜的血液，并迅速将其滴在载玻片的一端。
3. 血液涂布：将另一张载玻片斜放在已涂血的载玻片上，并以一个较小的角度连续向前推动。
这个过程会将血液均匀地涂布在载玻片上，并形成一薄层。
4. 染色和固定：待血涂片完全干燥后，将其浸入染色液中，一般常用的染色液包括吉姆萨染色液、伊昔色素等。
染色时间一般为几分钟到几十分钟不等。
染色完毕后，用水冲洗干净，并将载玻片放在空气中晾干。
5. 封片：待载玻片完全干燥后，将其与另一张空白玻片背靠背，使用封片胶进行封片。
这样可以保护血涂片并防止其受损。
二、白细胞的分类方法白细胞是我们体内的一类免疫细胞，其数量和种类的变化可以反映出我们身体内的疾病情况。
目前，临床上常用的白细胞分类方法主要有以下几种：1. 常规分类：常规分类是根据杆状核的形态特征将白细胞分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
这种分类方法可以通过染色液的颜色变化来识别不同的白细胞类型。
2. 流式细胞仪分类：流式细胞仪是一种高级的实验仪器，可以通过细胞的物理和化学性质来对其进行分类和鉴定。
它可以根据细胞的大小、形状、颜色和表面标记等特征来区分不同种类的白细胞。
3. 形态学分类：形态学分类是通过观察白细胞的细胞形态特征来判断其种类。
这需要经过专业的细胞学家或医生的鉴定，通过显微镜观察细胞的大小、形状、核型等特点来进行分类。
血涂片制作与染色
血涂片制作与染色1.血涂片的制备血涂片的制备需要用到标本采集工具如无菌化的注射器、针头、试管、硅化玻璃片以及一些实验室试剂如无菌生理盐水、巴氏溶液和电解溶液等。
具体步骤如下：（1）将患者指尖的表面清洁卫生。
（2）选择一个适合的静脉穿刺点，通常是患者的中指或无名指。
（3）用酒精棉球清洁穿刺点，使其干燥。
（4）将无菌化的注射器连接到无菌生理盐水的瓶口上，并抽取一定量的生理盐水。
（5）将针头插入穿刺点后，将生理盐水匀速注射入患者的静脉内。
（6）在生理盐水滴入试管的同时，用眼微观检查，如果有血液进入注射器和管道内，即可采集。
宜用自来水洗净试管外表面，先不带盖座放倾空液。
（7）用试管夹夹住注射针，将针头推入试管内，然后轻轻射入试管底部液面下，同时向上抽手，保持抽液缓慢，可避免气泡产生。
（8）将采集到的血液缓缓带走，同时注入试管内，让其与100ml巴氏溶液进行搅拌。
（9）将混合液倾入瓷漏斗中，从中取出干燥了的血细胞。
2.血涂片的染色血涂片染色可使用湿涂片法或干涂片法，其中湿涂片法应用更广泛。
下文将以湿涂片法为例进行介绍。
（1）取一根硅化玻璃片，用纸巾或棉球擦拭干净。
（2）用血涂片染色钳将准备好的血涂片床放在玻璃片上。
（3）将一滴适量的Wright液倒在血涂片的中段。
Wright液包含了染色剂和辅助剂，其中主要成分是吡啶基甲重氮盐和三氧二氮菲盐。
（4）用另一根玻璃片的尾部将液滴均匀地扩开，并迅速在血涂片上来回涂抹，在染液与血涂片上充分接触并混合。
（5）保持血涂片在室温下静置5-10分钟，以促进染色反应的进行。
（6）用蒸馏水冲洗玻璃片上的染料，并将其晾干。
3.血涂片的观察与分析观察血涂片需用光学显微镜，常规放大倍数为1000倍。
观察血涂片时，应注意血细胞的形态、大小、核形态、细胞质染色情况及相关细胞间的比例等。
根据各种细胞的数量和比例，可以初步评估出是否存在异常细胞，及其可能的病理性质，如感染、贫血等。
总结：血涂片制作与染色是血液检查中重要的步骤之一，它能够帮助医生判断病情，制定治疗方案。
血涂片制作SOP
血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。
2.试剂
瑞氏染液（伊红-亚甲基蓝）
3.操作
3.1取干净载玻片一张，手持玻片两端。
3.2用微量吸管取新鲜血液，将血液滴在距离载玻片一侧4-5毫米处。
3.4取一块边缘光滑的载玻片作为推片，将推片的一段至于血滴的前方，向血滴处移动，触碰到血液，使血液迅速均匀分布在推片与载玻片的接触处。
4.1使用玻片时手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁，干燥，中性，无油腻。
4.2一张良好的血片要求厚薄适宜，头体尾分明，分布均匀，边缘整齐，两侧留有空隙。
4.3血片制好后最好立即固定染色，以免细胞溶解和发生退行性变。
4.4血膜未干透，细胞尚未牢固附在玻片上,染色过程中容易脱落，因此血膜必需充分干燥。
3.5将推片与载片呈30-45°角，平稳地向载片另一端推出。
3.6将推好的血片在空气中摇，使之自然干燥。
3.7将瑞氏染液(伊红-亚甲基蓝)滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染半分钟。加等量蒸馏水(或缓冲液)与染液混合再染5分钟。
3.8最后用蒸馏水把染液冲掉，用吸水纸
血涂片制作
• 嗜中性粒细胞 是白细胞中较多的一种，约占白细胞总数5070%。体积比红细胞大，主要的特征是胞质中的特殊颗粒细小， 分布均匀，着淡紫红色。胞核着深紫红色，一般分3—5叶，叶 间以染色质丝相连。核分叶的多少与该细胞年龄有关，如核为 杆状，则为嗜中性粒细胞的幼稚型。
• 嗜酸性粒细胞 比中性粒细胞略大，数量少，约占7%以下。核 常分两叶，着紫蓝色。主要特点是胞质内充满粗大、圆形的颗 粒，色鲜红或桔红。
• 单核细胞 数量少，约占2%-8%，是细胞中体积最大的一种， 胞核呈肾形、马蹄形，常在细胞一侧，着色比淋巴细胞浅。
• 血小板 为形状不规则的细胞小体，其周围部分为浅蓝色，中 央有细小的紫色颗粒，常聚集成群，分布于红细胞之间。高倍 镜下一般只能看到成堆的紫色颗粒，在油镜下才能看到颗粒周 围的浅色胞质部分。
普通生物学——
实验六 血涂片的制作和 血细胞的观察
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实验目的
• 掌握血涂片的制作，观察红血球的形态及 在不同环境下的反应。来自材料和用品• 材料
– 人血或鱼血
• 主要用品
– 显微镜 酒精 棉花 5﹪ NaCl 0.9% NaCl 盖玻片 蒸馏水 载玻片
• 嗜碱性粒细胞 数量很少，约占1%以下。在一般血涂片上不易 找到，体积比上述2种白细胞稍小。胞质中分散着许多大小不一 的深紫蓝色颗粒。胞核形状不定,圆形或分叶，也染成紫色，但 染色略浅，一般都被颗粒遮盖，形状不清。
• 淋巴细胞 数量较多，约占20%-40%，可见中、小型，淋巴细 胞。其中小淋巴细胞最多,略大于红细胞。核大而圆,几乎占据 整个细胞，染成深蓝紫色。胞质极少，仅在核的一侧出现一线 状天蓝色或淡蓝色的胞质。中淋巴细胞比红细胞大，胞质较小 淋巴细胞的稍多，着色较浅。核圆形或卵圆形，位于细胞中部， 也染成深蓝紫色。
血涂片制备的操作方法
血涂片制备的操作方法血涂片制备是一种用于检查血液细胞形态和计数的常见实验方法。
以下是血涂片制备的详细操作方法：1. 实验前准备：- 准备好所需的实验器材和试剂，包括玻璃刮片、镊子、培养皿、荧光显微镜片、血液采集管、无菌生理盐水、硝酸盐涂片、形态涂片、涂片染色试剂（Wright 染色液）等。
- 仔细阅读实验操作方法，并进行必要的安全措施。
2. 血液采集：- 选择一个合适的采集部位，一般为患者的指尖或耳垂侧面。
- 用无菌棉球或无菌纱布清洁采集部位，消毒使用无菌棉球沾取酒精擦拭。
- 使用无菌注射器或针头，通过轻轻按压患者的采集部位，采集足够的血液样品。
3. 血涂片制备：- 先将玻璃刮片清洗干净，并在一侧的一个角落上写上标签，以示采集来源。
- 取一滴血液样品，将其滴在玻璃刮片的一端，并迅速将另一张刮片斜放在接触点上。
- 刮片形成一个小角度，然后将两张刮片迅速向前移动，使血液样品均匀涂开。
- 在制备血涂片的同时，要注意控制制片速度和角度，以保证血液样品的均匀和适当稀释。
4. 干燥与固定：- 制片完成后，应将其垂直放置在一个干净、无尘的地方，以允许刮片的自然干燥。
在炎热的季节或高湿度的环境中，可以使用加温脱水槽，将温度设定在37-40摄氏度，以加速干燥过程。
- 干燥后，将血涂片固定，可使用60-70%乙醇或其他合适的固定液，将刮片浸泡在固定液中1-2分钟，然后取出并晾干。
5. 涂片染色：- 取出固定的血涂片，逐一浸泡在Wright染色液中，浸泡时间一般为3-5分钟，可根据需要调整。
- 取出血涂片，用流动自来水轻轻冲洗，将多余的染色剂冲洗掉，直至冲洗水流变为清澈。
- 将血涂片倒挂在流动自来水下自然干燥，避免用纸巾擦拭，以免造成细胞形态的破坏。
6. 显微镜检查：- 取一滴橄榄油滴于血涂片中心，并将其覆盖与荧光显微镜片。
- 将显微镜调至合适的倍数，放入血涂片下进行观察和分析。
- 观察细胞形态，计算细胞数目，评估红细胞形态、白细胞分类及数量、血小板计数等。
血涂片制作
四分之三区域）。
正确
分类计数细胞以一定方向有规律地
移动视野，一般以“城垛式”进行，避
免重复、遗漏、主观选择视野。
四、阅片
观察部位： • 体部：主要是体积较小、密度较大的淋巴细胞。 • 尾部和两侧：主要是体积较大、密度较小的单核细胞和粒细胞； 异常大的细胞也常分布在尾部。
体部 两侧
尾部
四、阅片
• 如何通过血涂片估算PLT？ – 无异常聚集或纤维蛋白丝时凝集的血涂片上，在细胞分布均匀的 位置，PLT（×10 9 /L）=10个油镜视野中PLT平均个数×15×10 9 /L。
二、染色
瑞氏（Wright）染色
Ⅰ液（A液）：Wringht染料1g，由伊红（酸性染料）和亚甲蓝（碱性染料） 溶解于甲醇500ml而成。
Ⅱ液（B液）：磷酸盐缓冲液（pH6.8）。无水磷酸二氢钾（KH2PO4） 6.64g、无水磷酸氢二钠（HNA2O4P）2.56g、蒸馏水加至1000ml。
二、染色
一、涂片
血涂片制备的质量保证项目与评价
（1）载玻片 保持中性、洁净、无油腻
（2）制备血涂片 a) 良好的血涂片的“标准”为血膜由厚到薄逐渐过渡。应厚薄事宜，头、
体、尾分明，分布均匀，两侧留有空隙，边缘整齐。 b) 血膜厚度、长度与血滴的大小、推片与载玻片之间的角度、推片速度及
HCT有关。血滴大、角度大、推片速度快则血膜厚；反之，则血膜薄。 c) HCT增高时，血液黏度较高，宜保持较小的角度，可得满意血涂片；相
4
3
2
1
五、扩展
吉姆萨染色法 染液稀释：吉姆萨染液+磷酸盐缓冲液（pH7.0）,比例：1： 10（约1ml缓冲液加2滴吉姆萨染液）。 染色：将稀释的吉氏染液铺满厚、薄（固定）血膜上，室 温染15-30分钟。 冲洗：以自来水冲洗（注：勿先将染液倾倒掉）。 镜检：血片晾干油镜检查 由于用蒸馏水破坏红细胞的时候经常会使厚血膜难以着色， 因此现在都将这一步骤省略。
血涂片制作实验报告
一、实验目的1. 掌握血涂片的制作方法。
2. 熟悉血细胞的基本形态和分布特点。
3. 了解血涂片染色技术。
二、实验原理血涂片是血液学检查的基本方法，通过将血液涂布在载玻片上，经过固定、染色等步骤，使血液中的各种细胞在显微镜下呈现出不同的颜色和形态，便于观察和分析。
血涂片制作的关键在于血液的涂布、固定和染色。
三、实验器材与试剂1. 器材：载玻片、推片、采血针、酒精棉球、生理盐水、瑞氏染液、蒸馏水、显微镜等。
2. 试剂：10%甲醛溶液、95%乙醇、甘油等。
四、实验步骤1. 消毒与采血（1）取一支采血针，用酒精棉球消毒皮肤。
（2）将采血针对准皮肤，轻轻刺入，使血液自然流出。
（3）用生理盐水湿润载玻片，取少量血液滴在载玻片中央。
2. 推片（1）将推片的一端放在血滴上方，另一端紧贴载玻片。
（2）以30-40°角将推片平稳地推出，使血液均匀分布在载玻片上。
3. 固定（1）将血涂片在空气中晾干。
（2）将血涂片浸入10%甲醛溶液中固定5-10分钟。
4. 染色（1）将固定好的血涂片浸入95%乙醇中脱色2-3分钟。
（2）将脱色后的血涂片浸入瑞氏染液中染色3-5分钟。
（3）将染色的血涂片浸入蒸馏水中分化1-2分钟。
5. 观察（1）将染色的血涂片放在显微镜下观察。
（2）低倍镜下观察红细胞、白细胞和血小板的形态和分布特点。
（3）高倍镜下观察白细胞和血小板的细节结构。
五、实验结果与分析1. 红细胞：呈两面凹的圆饼状，无细胞核，细胞质内充满血红蛋白，略呈碱性。
2. 白细胞：分为三种类型：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
中性粒细胞呈圆形或椭圆形，细胞核分叶；嗜酸性粒细胞呈椭圆形，细胞核为2-3叶；嗜碱性粒细胞呈圆形或椭圆形，细胞核为2-3叶。
3. 血小板：呈不规则形状，无细胞核，细胞质内含有血小板颗粒。
六、实验总结本次实验成功制作了血涂片，并观察到了红细胞、白细胞和血小板的形态和分布特点。
通过本次实验，我们掌握了血涂片的制作方法，提高了对血液细胞形态学知识的认识，为今后的临床诊断工作打下了基础。
实验一血涂片的制备
实验二、血涂片的制备和血细胞的观察目的要求1. 掌握血涂片的的制备方法2. 认识红细胞及各种白细胞的典型形态基本原理涂片技术是制备血液样品最常用的技术。
将血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、细胞大小测量等工作。
实验用品1. 器材：医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、经脱脂洗净的载玻片；2.试剂：Wright's染液：Wright's色素粉末0.1g，溶于60 ml甲醇。
方法与步骤1 ．采血采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹或耳垂，干后用采血针刺破指腹或耳垂的皮肤；动物采血时先将耳部剪毛，酒精消毒后，刺破动物耳部皮肤，挤去第一滴血不要（因含单核白细胞较多）。
2．涂片挤出第二滴血置于载玻片的一端，再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状，两玻片的角度以45 ° 为宜（角度过大血膜较厚，角度小则血膜薄），轻轻将载玻片向前推进，即涂成血液薄膜（图2-2 ）。
推进时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀，初学者可把玻片放在桌上操作。
3．染色待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴Wright 's 染液盖满血膜为止，染色1〜3 min。
然后滴加等量的缓冲液（pH6.4）或蒸馏水，使其与染液均匀混合，静置2〜5 min。
用蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干。
4．镜检显微镜观察可见人红细胞为凹圆盘形，无核，淡红色，缘部分染色较深，中心较浅，直径7-8 微米。
白细胞数目少，为圆形。
颗粒白细胞（1）嗜中性颗粒白细胞：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5 叶，直径10-12 微米；（2）嗜酸性颗粒白细胞：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为2 叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色，直径10-15 微米；（3）嗜碱性颗粒白细胞：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核1-2 叶，染成淡蓝色，直径10-11 微米。
血涂片的制备
血涂片的制备
血涂片是一种常用的医学检查方法，它可以用于诊断各种疾病和病理状态。
制备血涂片是血液学和临床检验中最基本的技术之一。
下面将介绍血涂片的制备步骤和注意事项。
1.采集血液样本：血涂片的制备需要采集一定量的新鲜血液样本。
通常使用静脉采血或割破手指采血的方法。
2.涂片处理：将采集到的血液样本滴在干净无菌玻璃片上，并用另一个无菌玻璃片将血液样本压扁，使其均匀地覆盖整个玻璃片。
3.烘干和固定：将血涂片在通风干燥处晾干，或者使用电热板加热干燥，直到血液完全干燥。
然后在草酸钠溶液或其他固定剂中固定片子。
4.染色：将固定后的血涂片浸泡在适当的染液中，如吉姆萨染液。
一般染色时间为5-10分钟，然后用水洗净。
5.干燥和观察：将染色后的血涂片在通风干燥处晾干，然后使用显微镜观察。
通常可以观察到血细胞、白细胞、红细胞和血小板等。
注意事项：
1.严格遵守无菌操作规范，防止污染。
2.血液样本需新鲜，避免凝块。
3.制备血涂片的过程要快，以避免血液样本干燥和变形。
4.固定血涂片的时间和染色时间要控制好，否则会影响结果。
总之，制备血涂片是一项基本的、重要的技术，需要严格按照操作规范进行操作，以确保检测结果的准确性和可靠性。
血涂片的制作流程和注意事项
血涂片的制作流程和注意事项
嘿呀！今天咱们来聊聊血涂片的制作流程和注意事项呢！
首先，咱们说说制作流程哇！第一步，准备好干净的载玻片和推片呀！这可重要得很呢！第二步，用微量吸管吸取血液，轻轻滴在载玻片的一端，哎呀呀，可别滴多了！第三步，拿着推片，让它与载玻片成30 到45 度的角，然后从血滴的前沿开始，平稳地向前推，哇，这样血涂片的雏形就有啦！第四步，把做好的血涂片放在空气中自然干燥，记住，千万别用嘴去吹或者用火烤呀！
接下来，讲讲注意事项啦！第一，采血的时候要保证血液的新鲜和干净呢，要是血不干净，那可就麻烦啦！第二，滴血液的时候，量一定要控制好，太多或者太少都会影响涂片的质量哟！第三，推片的速度和力度要均匀，不然涂片会厚薄不均，这可不行呀！第四，干燥的时候一定要自然干燥，不能心急呀！第五，制作过程中要保持操作环境的清洁，不能有灰尘啥的捣乱呢！第六，推片使用完要及时清洗和消毒，为下一次使用做好准备哦！第七，操作人员要注意自身的安全，别不小心弄伤自己啦！第八，制作好的血涂片要妥善保存，避免损坏和污染呀！
哎呀呀，这血涂片的制作流程和注意事项是不是还挺多的？不过只要咱们认真仔细，按照步骤来，肯定能做出满意的血涂片呢！哇，大家都记住了吗？。
涂片的制作流程
涂片的制作流程
血涂片的制作步骤：1、用毛细吸管吸取edta抗凝的外周血5-7ul，或者直接采集患者末梢血，将血滴滴至载玻片的一端约1cm处或整片的3/4端。
有磨砂片的玻片，可在接近磨砂头的部位来水反复冲洗，然后擦干备用。
2、左手持载玻片，右手持玻片，将推片接近血滴处，然后轻轻接触血滴并压在血滴上，使血液呈“￣”字型展开，充满推片宽度。
3、将推片与载玻片构成30度夹角，用光滑的速度将血向载玻片的另一端促进。
红细胞压积发生变化时，应适当的调整推片与载玻片的角度以及促进血液就是的速度。
标准的血涂片应当努力做到头、体、尾分野，两边和两端存有空隙。
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血涂片制作
将血标本均匀地涂抹在清洁干燥的载玻片上，经染色后在显微镜下检查，这是血细胞形态学检查的基本方法，临床应用很广，特别是对各种血液病的形态学诊断很有价值。
但是，如果血徐片制备不良，染色不佳，常使血细胞的形态学鉴别和诊断发生困难，甚至导致错误的结论。
如血膜过厚，细胞重叠缩小；血膜太薄，白细胞多集中于边缘。
因此，制备厚薄适宜、分布均匀的血涂片是血液学检验的基本技术之一。
一、载玻片的清洁
新载玻片上常有游离碱质，必须用约lmol／L HCI浸泡24h 后，再用清水彻底冲洗，干燥备用。
用过的载玻片可放入含适量肥皂或合成洗涤剂的清水中煮沸20min，再用热水将肥皂和血膜洗净，用清水反复冲洗，干燥备用。
如急用载玻片，可将其置0、9乙醇中浸泡lh，用蒸馏水洗净后，擦干或烘干备用。
使用载玻片时，只能手持玻片边缘，切勿用手触及玻片表面，以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。
二、制作血涂片的标本
血涂片既可由非抗凝的静脉血和毛细血管血制备，也可由
EDTA抗凝血制备。
EDTA抗凝血中，钙离子被螫合后，能阻止血小板聚集，推片时血小板均匀平铺，显微镜下易于对血小板进行观察评价。
但有时可观察到因EDTA引起的红细胞皱缩及白细胞丛集现象。
但随着血液分析仪的逐步普及，血标本多为EDTA抗凝血，除作全血细细胞计数及多参数分析外，制备血涂片也非常方便，虽有上述弊端，但显微镜下易于发现。
三、血涂片的制备
血涂片的制备方法很多，如手工推片法、自动推片法、载（盖）玻片压拉法、旋转涂片法、棕黄层（buffy－coat）涂片法及厚血膜涂片法等，现介绍如下。
1、手工推片法取血标本一滴置载玻片的一端，以边缘平滑的推片一端，从血滴前沿方向接触血液，使血液沿推片散开，推片与载玻片保持25～30o的平面夹角，平稳地将血向前推动，血液即在载玻片上形成一薄层血膜。
将制成的血膜在空气中挥动，使迅速干燥，以免血细胞皱缩。
一张良好的涂片，要求厚薄适宜，头体尾分明，边缘整齐，两侧应留有空隙。
玻片的一端应留有贴标签的地方。
涂片的好坏与血滴大小、推片与载片之间角度、推片时的速度有关。
血滴大、角度大、速度快，则血膜厚；反之则血膜薄。
血膜分布不匀，主要是推片边缘不齐、用力不匀或载玻片不清洁
所致。
2、载玻片压拉法取两张贴有标签的载玻片备用，将血液滴于一张载玻片的近中央处，立即将另一载玻片于之贴合，四角对齐，标签一端一个，使贴合后的玻片间留下如标签一样厚的间距。
先将血滴沿纵向轻压展开，再将两玻片横向均匀拉开，得到两张血膜。
此法最适用于血细胞的活体染色，预先将染料滴加在玻片上，干燥后备用。
涂制时先将血液与染料混染一段时间，再按上述方法制成血涂片，显微镜下检查，如网织红细胞的检验。
3、旋转器涂片法旋转涂片器的基本结构是：在与电动机转轴垂直的方向装一水平转盘，正中夹置载玻片。
徐制时将血标本滴加在载玻片的中央，开动旋转涂片机，在规定的时间内即可制备一张良好的血涂片。
对该仪器的要求应具有低惯性高转矩，开动时能立即加速（5000r／min），关机时能迅速停止（O、25s内）。
使用这种仪器涂片，白细胞及红细胞能均匀分布在玻片上，且形态保持完好。
4、棕黄层涂片法为了获得较多的有核细胞，使用离心的方法，将EDTA 抗凝血作分层离心（RCF—2260g，5min），取红细胞层上的棕黄层（有核细胞和血小板集中层，）作标本，用手工推制成涂片供检查用。
5、厚血膜涂片法从指尖或耳垂取血1滴（约20ul）于载玻片中央，用推片的一角将血由内向外旋转涂布，制成厚薄均
匀、直径约1、5cm的圆形血膜，自然干燥后，滴加数滴蒸馏水，使红细胞溶解，脱去血红蛋白。
倾去水后血膜呈灰白色，干后染色镜检。
厚血膜片因取血量多，待检成分较集中，因此特别适合于疟原虫、丝虫的微丝蚴等的检查。
本篇文章来源于检验在线/ 原文链接：/article/know/wMMDAwMDAwNDQw Mg.html。