中药中香豆素类化学成分的提取分离技术
简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理,并说明提取分离时应注意的问
简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理,并说
明提取分离时应注意的问
碱溶酸沉法是一种常用的提取香豆素类成分的方法。
其基本原理是利
用香豆素类成分在碱性环境下发生酸碱中和反应，生成相对稳定的盐类物质，然后利用酸性沉淀物质将盐类分离出来，从而实现香豆素类成分的分
离和提取。
在进行碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分时，需要注意以下问题：
1.选择合适的溶剂和碱性条件。
香豆素类成分通常比较容易溶解在乙醇、甲醇等有机溶剂中。
在选择碱性条件时，需要考虑药材的性质和成分
的稳定性，一般选择适当的碳酸钠或氢氧化钠等碱性物质。
2.掌握合适的提取时间和温度。
提取时间和温度会对成分的提取效果
产生影响，一般来说，提取时间不宜过长，温度也应保持在适宜的范围内。
3.注意控制pH值。
在酸碱中和反应过程中，需要控制pH值的稳定，
避免过高或过低的环境影响提取效果。
4.注意沉淀的形成和分离。
在加入酸性沉淀物质后，需要注意搅拌和
过滤的操作，避免沉淀物质不充分分离或过度搅拌破坏沉淀物质。
总之，碱溶酸沉法是一种简单易行的提取分离香豆素类成分的方法，
在操作过程中需要注意以上几个方面，确保提取的成分的纯度和有效性。
中草药有效成分分离与精制常用方法的原理_理论说明
中草药有效成分分离与精制常用方法的原理理论说明1. 引言1.1 概述中草药是中国传统医学的重要组成部分，具有悠久的历史和丰富的资源。
中草药中含有许多有效成分，如生物碱、黄酮类、香豆素等，这些成分对人体具有治疗和保健作用。
然而，中草药中的有效成分通常存在于复杂混合物中，并且含量较低，因此需要进行分离与精制处理才能获得纯净的有效成分。
1.2 文章结构本篇文章将围绕中草药有效成分的分离与精制方法展开论述。
首先介绍了这些方法的原理，包括分离方法原理和精制方法原理。
随后，详细探讨了这两类方法在实际应用中的范围、关键步骤以及注意事项。
最后，从理论层面总结了分离方法原理和精制方法原理的重要性，并对未来中草药有效成分分离与精制领域提出展望和建议。
1.3 目的本文旨在全面介绍和解释中草药有效成分分离与精制常用方法的原理，并通过对应用范围、关键步骤和注意事项的讨论，帮助读者更好地理解和掌握这些方法。
同时，通过总结原理的重要性以及对未来的展望和建议，提升对中草药有效成分分离与精制领域的认识，并促进该领域的发展与创新。
2. 中草药有效成分分离与精制常用方法的原理：2.1 分离方法原理：中草药有效成分的分离是通过一系列化学、物理或生物学的方法将其中的有用成分与其他杂质进行分离，以达到纯化和提纯的目的。
下面介绍几种常用的分离方法原理：2.1.1 薄层色谱法（TLC）：薄层色谱法是根据不同化学物质在薄层固定相上表现出不同行为以实现它们之间的分离。
这种方法通常使用硅胶或其他固定相涂覆在玻璃或铝板上，并使用溶剂系统将混合物带上样。
随着溶剂前进，不同成分会显示出不同程度的移动性，从而实现它们之间的分离。
2.1.2 气相色谱法（GC）：气相色谱法利用了样品中化合物在气体载流子带动下通过固定相填充柱时发生吸附和解吸作用而分离。
该方法要求待测物质具有足够高的挥发性，并且需要选择适当的固定相来实现对样品的分离。
2.1.3 液相色谱法（HPLC）：液相色谱法基于样品中化合物在液体流动相与固定相之间的吸附分配行为而进行分离。
简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理并说明提取分离时应注意的问
简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理并说明提取分离时应注意的问碱溶酸沉法是一种常用的提取和分离香豆素类成分的方法。
其基本原理是通过使用碱性溶剂提取植物样品中的香豆素类化合物，然后使用酸性溶液将提取液中的香豆素类成分转化为可溶于有机溶剂的形态，从而实现对香豆素类成分的分离。
下面是具体的步骤和注意事项：1.样品制备：将香豆素含量高的植物材料进行研磨和筛选，得到均匀的样品粉末。
需要注意的是，样品的存储和处理应尽量避免光照和高温，以保护香豆素类成分的稳定性。
2.溶剂选择：在提取过程中，通常会使用乙醇或甲醇作为溶剂，因为它们具有较好的溶解性和提取能力。
添加适量的碱性溶液，如氢氧化钠溶液，以调整酸碱度并增加溶剂的提取效果。
3.提取操作：将样品粉末加入溶剂中，放置一段时间以实现香豆素类成分的溶解。
可以选择“浸提”或“超声波提取”等方法来促进成分的释放和提取效果的增强。
4.分离作用：在提取液中加入酸性溶液，如稀硫酸或盐酸，通过酸沉淀作用将香豆素类成分转化为更易溶于有机溶剂的形态。
酸性条件下，香豆素类化合物会在提取液中析出形成固体沉淀。
此时，分离液中的沉淀可通过离心和滤纸等方法进行分离。
5.浓缩和纯化：离心后的沉淀可以用有机溶剂进行洗涤和浓缩，以去除杂质和溶剂，得到纯净的香豆素类成分。
可以使用色谱技术，如薄层色谱或柱层析等方法，对提取物进行进一步纯化和分析。
在进行碱溶酸沉提取分离时，还需注意以下几点：1.选择合适的溶剂：确保溶剂具有足够的溶解能力和提取效果，以获得高纯度的香豆素类成分。
2.严格控制温度：提取和分离过程中，温度的变化会对提取效果和成分稳定性产生影响。
因此，应严格控制温度，并避免暴露于高温和阳光直射。
3.酸碱度的调节：酸碱度的控制对提取和分离的效果至关重要。
应挑选适当的酸性和碱性溶液，并在提取过程中进行调节，以保证酸沉淀的有效发生。
4.分离液的处理：分离液中的沉淀需经过适当的处理，如离心或滤除。
各类化学成分的提取、分离与检识技术—香豆素类(中药化学课件)
系统溶剂提取法
药材粗粉
石油醚回流提取
回收至小体积
石油醚液
残渣 乙醚回流提取
浓缩液 放置、析晶
乙醚液
粗晶
回收分离
冷石油醚洗 单体
结晶（可能时混和物） （亲脂性较弱香
进一步分离
豆素）
残渣 乙醇提取
乙醇液 回收分离
香豆素苷类
单体
（亲脂性香豆素）
1.提取方法——水蒸气蒸馏法
某些小分子的香豆素类化合物具有挥发性，可用水蒸气 蒸馏法与不挥发性成分分离。
香豆素类化合物的检识技术
2.化学检识技术 酚羟基的检识
①三氯化铁反应：具有酚羟基取代的香豆素类在水溶液中可 与Fe3+络合而产生绿色至墨绿色沉淀。 ②重氮化反应：若酚羟基的邻对位无取代时，可与重氮化 试剂反应产生红色至紫红色。 ③Gibb’s反应：若C6位无取代基，在碱性条件（pH 9～ 10）与2，6－二氯苯醌氯亚胺（Gibb’s试剂）反应显蓝 色 ④。Emerson反应：若C6位无取代基，内酯环在在碱性条件 开 环与4－氨基安替比林和铁氰化（Emerson试剂）显红色。
2.分离方法
溶剂萃取法
利用香豆素苷类 和苷元类极性强 弱不同的特性， 用极性强弱不同 的溶剂顺次萃取， 分为不同极性的 部分。
成分A
成分F
成分B
香豆素类
成分E
成分C
成分D
色谱分离法
结构相似的香 豆素类成分采 用硅胶柱色谱 法进行分离纯 化
香豆素类化合物 -检识技术
香豆素类化合物的检识技术
1.荧光检识
香豆素类化合物的检识技术
3.色谱检识技术
薄层色谱检识
吸附剂：硅胶、纤维素或氧化铝薄层色谱。 展开剂：中等极性的混合溶剂或偏酸性的
2019年中药中香豆素类化合物的提取分离技术.ppt
O
O O O
O
O
异补骨脂
茴芹内酯
吡喃香豆素
由香豆素苯环上异戊烯基和邻位羟基环合形成2， 2-二甲基α-吡喃环结构。同呋喃香豆素类似，也 分成线型（6，7-吡喃香豆素）和角型（7，8-吡 喃香豆素）两种类型[根据酬和位置分]。
O
O
O
O
O
O
花椒内酯
邪蒿内酯
其他香豆素
主要包括指在α-吡喃酮环上有取代的一类香豆素（多在C3 或C4上，例如calanolide A）；双香豆素类（双七叶内脂）； 异香豆素类（茵陈内脂）。
掌握中药中香豆素 类化学成分的提取 分离原理及操作技 术。
学习目标
知识要求
能力要求
教学内容
学习 提示
香豆素类化学成分的结构、性 质及提取分离知识
任务一
秦皮中香豆素类化合物的提取 分离技术
实训
秦皮中香豆素类成分的的提取 分离及鉴定
学习提示
一
香豆素的结构与特点 香豆素的理化性质及检识
二
三
香豆素类化学成分的提取分离
内酯环的水解
【注】如果与碱液长时间加热，水解产物 顺邻羟桂皮酸衍生物则转变为反邻羟基桂 皮酸的衍生物，再经酸化也不能环合成内 酯，故颜色反应
“异羟肟酸铁反应” 在碱性条件下，内酯开环， 与盐酸羟胺中的羟基缩合生成异羟肟酸，然后 在酸性条件下再与三价铁盐络合而显红色。
O
O
O OH O O
O O
O
HO HO O O
CH2
CCH3
OH
OH
calanolide A
紫苜蓿酚
茵陈内酯
游离香豆素多为结晶性物质，有一 定熔点，多有芳香气味。分子量小 的有挥发性，能随水蒸气蒸出，并 能升华。 香豆素苷多数无香味和挥 发性，也不能升华。
《中药化学实用技术》课程标准
《中药化学实用技术》课程标准课程代码：650201建议课时数：84学时适用专业：中药专业或中药制剂专业先修课程：有机化学、无机化学、分析化学、药用植物学等学分：5学分一、课程描述(一)课程性质及功能《中药化学实用技术》是高职高专中药专业、中药制剂专业的一门专业核心技术课程，实践性强，是培养相关专业中药制剂提取分离专门人才的一个必备环节。
该课程主要介绍中药化学成分的结构、性质、有效成分的提取、分离、鉴定等基本知识，着重培养学生中药化学成分提取分离和鉴定的基本技术与技能，同时注意传授知识、培养技能、提高素质为一体，注重培养学生实践际操作能力、综合应用能力、团结协作能力、自主创新能力及终身学习能力。
本课程主要服务于中医药产业，为中医药行业培养岗位技能型人才，其在中药制剂人才培养方案中的主要作用是：培养从事中药调剂、中药制剂产品生产、检验等工作，掌握中药化学成分提取、分离和鉴定基本技能，能胜任中药提取工、中药制剂检验工等相关工作岗位，综合素质好的高技能人才。
因此，本课程的功能是：使学生具有中药制剂产品开发和生产等方面技能，为将来学生从事中药制剂产品的研究、开发、生产及中药及其制剂质量控制工作奠定基础，同时也为医药生产、药品营销企业以及医院中药房培养具有良好职业道德、较强专业技能，具有可持续发展能力的高级技术应用性专门人才。
二、设计思路（一）课程设计根据本课程在中药人才培养方案整个课程体系中的定位（课程衔接见图1），针对与课程密切相关的三大就业岗位群（中药制剂生产岗位群、研发人员的助手岗位群、药学服务岗位群）需求，基于工作过程的需要等等的职业能力和岗位要求分析的基础上确定完成工作所需要的知识点、专业技能和职业素质要求，并兼顾学生考取相关工种涉及到的基础知识和基本技能。
结合在中药化学成分提取和中药制剂生产的实际工作任务，设计课程的教学项目，选择教学内容，制定学习目标。
本课程在实践教学中设置了基本技能训练、中药成分的提取分离制备、中药制剂生产等实践教学项目内容。
中药中香豆素类化合物的提取分离技术
顺式邻羟基桂皮酸 苯骈α-吡喃酮
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
一、 香豆素的 结构类型
简单香豆素类
呋喃香豆素类
吡喃香豆素类
其他香豆素
简单香豆素
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
仅在苯核上具有取代基的香豆素。常见取代基为 羟基、甲氧基、亚甲氧基和异戊烯氧基等。这一类香 豆素多数在C7位上连有含氧基团，7-羟基香豆素（伞 形花内酯）可以认为是香豆素类成分的母体，其他如 在C5、C6、C8位上也会有含氧基团取代。异戊烯基常 连接在C6和C8上。
O
OO
花椒内酯
O
OO
邪蒿内酯
其他香豆素
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
主要包括指在α-吡喃酮环上有取代的一类香豆素（多在C3 或C4上，例如calanolide A）；双香豆素类（双七叶内脂）； 异香豆素类（茵陈内脂）。
O
O
OO
OH
calanolide A
O OO O
OH
OH
紫苜蓿酚
HO HO
性状
溶解性
二、香豆素
内酯环 的水解
的理化性质
显色 反应
香豆素母核本身无荧光，但 羟基香豆素类化合物在紫外 光下大多显蓝色或蓝绿色荧 光，在碱液中更加显著。香 豆素的荧光性质可用于香豆 素成分的检识鉴别。
色谱
荧光性
检识
1.薄层色谱法 2.纸色谱法
游离香豆素能溶 于沸水，易溶于 甲（乙）醇、氯 仿、乙醚等，可 溶于石油醚。 香 豆素苷类能溶于 水、甲醇、乙醇， 而难溶于乙醚、 苯等极性小的有 机溶剂。
1.内酯的颜色反应 （异羟肟酸铁反 应） 2.酚羟基的颜色反 应 3.Gibb’s反应 4.Emerson反应
中草药中各类化学成分提取分离方法
中草药有效成分的提取 一、溶剂提取法 二、水蒸汽蒸馏法 三、升华法
一、溶剂提取法
是根据天然药物中各种成分在溶剂 中的溶解性质，选用对有效成分溶 解度大，而对不需要溶出成分溶解 度小的溶剂，将有效成分从药材组 织中溶解出来的办法。
溶剂可分为： 水、亲水性和亲脂性有机溶剂 常用溶剂：极性由弱到强依次排序为 石油醚＜四氯化碳＜苯＜二氯甲烷＜ 氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜正丁醇＜丙 酮＜乙醇＜甲醇＜水
中草药中各类化学成分提取分 离方法
2.酸性化合物： 结构中含有酚羟基的化合物 ——黄酮、醌类、苯丙素（香豆素、
木脂素）及其苷类 结构中含有羧基的化合物 ——有机酸、葡萄糖醛酸
HO
O
OH OH
OH OH O
黄酮
HO
OO
香豆素
O
OH O
蒽醌
OH
OH
木脂素
3.两性化合物： 结构中既有碱性基团也有酸性基团 氨基酸、蛋白质
2.回流提取法：是用有机溶剂作为提取溶 剂，在回流装置中对药材进行加热回流 提取，该方法提取效率较高，但因为长 时间加热，所以不适合受热易破坏分解 的成分。
3.连续回流提取法：是回流提取法的发展， 具有消耗溶剂量更小，提取效率更高的 优点。常用索氏提取器或连续回流装置。
水－是一种强极性溶剂。无机盐、糖类、 分子不太大的多糖、鞣质、氨基酸、蛋 白质、有机酸盐、生物碱盐和极性苷类 等都能被水溶出。以水作为提取溶剂的 缺点是：提出的杂质多。
流动相：氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱极 性有机溶剂
洗脱顺序：极性小的化合物先出柱，极 性大的后出柱。
应用：适用于水溶性或极性较大的化合 物，如生物碱、苷、糖类、有机酸等。
反相色谱：
固定相：石蜡油，化学键合相（如 十八烷基硅胶键合相）
简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理
简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理
碱溶酸沉法是一种常用的提取分离香豆素类成分的方法，其基本原理是利用香豆素类成分的内酯结构，在碱性条件下开环，生成顺式邻羟基桂皮酸的盐溶于水，在酸性条件下又闭环恢复为内酯环结构，从而实现香豆素类成分的分离和提取。
香豆素是一类广泛存在于植物中的天然化合物，具有多种生物活性和药理作用，如抗氧化、抗炎、降血脂等。
由于香豆素类成分具有内酯结构，其在水中的溶解度较低，因此常用的提取方法包括碱溶酸沉法、有机溶剂提取法等。
其中，碱溶酸沉法是一种简单、高效的提取方法，被广泛应用于香豆素的提取分离。
碱溶酸沉法的基本原理是利用香豆素类成分的内酯结构，在碱性条件下开环，生成顺式邻羟基桂皮酸的盐溶于水，在酸性条件下又闭环恢复为内酯环结构，从而实现香豆素类成分的分离和提取。
具体步骤如下：
1. 样品处理：将含有香豆素的植物样品进行粉碎、过筛等处理，使其颗粒度较小，以便于后续的提取操作。
2. 碱性条件下开环：将处理好的样品与氢氧化钠等碱性溶液混合，使其在碱性条件下开环，生成顺式邻羟基桂皮酸的盐。
3. 水相提取：将开环后的样品与水混合，使其中的顺式邻羟基桂皮酸的盐溶于水，从而实现香豆素类成分的分离和提取。
4. 酸性条件下闭环：将提取液加入酸性溶液中，使其在酸性条件下闭环，恢复为内酯环结构，从而实现香豆素类成分的沉淀和分离。
5. 分离纯化：通过离心、过滤等方法，将分离出的香豆素类成分进行纯化，从而得到目标产物。
需要注意的是，在碱溶酸沉法的操作过程中，要注意控制温度、时间等因素，避免香豆素类成分的结构发生变化，从而影响其提取效率和纯度。
白芷香豆素类成分的提取分离和鉴定
白芷香豆素类成分的提取分离和鉴定二、实验目的1. 学习用有机溶剂提取香豆素类成分的方法。
2. 学习用柱层析色谱分离香豆素类化合物的方法。
三、实验操作（一）总提取物的制备取白芷生药粗粉200g，用石油醚-丙酮（4:1）回流提取3次，每次250ml，分别提取2,1,1h，合并提取液，回收溶剂至干，得总提取物月2.5g。
（二）柱层析色谱分离取总提取物1.5g，用5g硅胶吸附，在25×4cm的色谱柱上干法上样，进行低压柱层析色谱。
色谱条件：吸附剂：硅胶H 20g（薄层色谱用）洗脱剂：石油醚-丙酮8:1，6:1，4:1，3:1各80ml。
压力：0.5~0.7 kg/cm2收集：5~8ml/份用下述薄层色谱条件进行检识，将相同斑点的流分合并，用石油醚-乙酸乙酯（8:2）的溶剂重结晶1~2次，分别得到单体化合物，测定熔点。
（三）鉴定1. 薄层色谱吸附剂：硅胶（薄层色谱用）展开剂：（1）石油醚-丙酮8:2；（2）苯-乙酸乙酯8:2样品：白芷总提取物，异欧前胡素，欧前胡素标准品：异欧前胡素，欧前胡素显色：紫外灯（365nm）下观察荧光。
2. 光谱测定1H-NMR谱：用CDCl作为溶剂。
3一、实验目的1.掌握连续回流提取法的原理和方法；2.掌握重结晶的原理和方法二、实验原理白芷为伞型科植物白芷的干燥根。
具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功能。
白芷中的有效成分为香豆素类化合物。
用单位白芷的提取物（其中主要是香豆素类化合物）制成的制剂对功能性头痛、白癜风的临床疗效较好。
异欧前胡素和欧前胡素为白芷的主要有效成分。
常见的提取方法有：溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、升华法。
其中，溶剂提取法应用最广。
溶剂提取法的原理：根据相似相溶原理，选择与化合物极性相当的溶剂将化合物从植物组织中溶解出来，同时，由于某些化合物的增溶或助溶作用，其极性与溶剂极性相差较大的化合物也可溶解出来。
溶剂提取法一般包括浸渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法、连续回流提取法等，其实用反胃和特点各有所不同。
简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理
简述碱溶酸沉法提取分离香豆素类成分的基本原理碱溶酸沉法是提取和分离香豆素类化合物的常用方法之一。
香豆素是一类天然存在于植物中的化合物，具有芳香味和独特的风味，广泛应用于食品、香精、药物等领域。
碱溶酸沉法利用了香豆素类化合物在碱性溶液和酸性溶液中的不同溶解度差异，通过逐步调节溶液的pH值，实现对香豆素类成分的提取和分离。
香豆素类化合物在水中的溶解度较低，但在碱性溶液中可生成高溶解度的碱盐形式。
因此，碱溶酸沉法首先将原料样品与碱性溶液混合搅拌，使香豆素类化合物以其碱盐形式溶解于溶液中。
常用的碱溶液为氢氧化钠（NaOH）溶液，pH值一般控制在8-9左右。
提取完成后，可以通过酸化溶液将香豆素类化合物从碱盐状态转变为酸态，从而实现分离。
一般使用盐酸（HCl）作为酸化剂，将盐酸溶液逐渐滴加到碱溶液中，使pH值下降到2-3可以沉淀出香豆素类化合物的范围。
香豆素类化合物在酸性条件下易生成无色或微黄色的沉淀，并与水相分离。
此时，可以通过离心或过滤的方式将香豆素类化合物沉淀物分离出来。
然后，可通过洗涤和干燥等处理步骤，获得纯净的香豆素类化合物。
除了基本的提取分离原理外，碱溶酸沉法还受到其他因素的影响，如温度、提取时间和溶液浓度等。
通常情况下，提取时间和温度越长、温度越高，提取效果越好。
另外，溶液浓度的选择也会影响提取效果和分离效率。
低浓度的碱性溶液可以增加化合物的溶解度，但过高的浓度可能导致一些杂质的提取和溶解。
碱溶酸沉法在实际应用中有良好的适用性和可行性，可以用于提取和分离不同来源的香豆素类化合物，甚至可以用于复杂基质中的香豆素类成分的提取。
此外，由于操作简单、成本低廉，并且在商业化生产中得到广泛应用，所以碱溶酸沉法在提取和分离香豆素类化合物过程中具有重要意义。
总之，碱溶酸沉法通过逐步调节溶液的pH值，利用香豆素类化合物在碱性溶液和酸性溶液中的不同溶解度差异，实现了香豆素类成分的提取和分离。
这种方法操作简单、成本低廉，并且在实际生产中应用广泛，对于香豆素类化合物的研究和产业化生产具有重要意义。
中药化学香豆素类化学成分的提取分离技术
一、提取 1、水蒸气蒸馏法 2、碱溶酸沉法 3、溶剂提取法
二、分离 1、酸碱分离法 2、色谱法
（一）香豆素的提取
溶剂提取法：
香豆素类 成分的极性不 同，各种溶剂 都有提出该成 分的可能。当 利用极性由小 到大的溶剂顺 次萃取时，各 萃取液浓缩后 都有可能获得 结晶，再结合 其他分离方法 进行分离。
（一）性状 游离苷元：无色至淡黄色结晶，具有芳香性和挥发性； 苷类：粉末状，多数无香味和挥发性。 （二）溶解性 游离苷元：溶于沸水，但不溶于冷水。溶于氯仿、乙醚、
醋酸乙酯、丙酮、甲/乙醇等有机溶剂。 苷：易溶于甲/乙醇，可溶于水，难溶于乙醚、氯仿、醋 酸乙酯等有机溶剂。
（三）内酯性质和碱水解反应
1、香豆素的α-吡喃酮环具有α，β-不饱和内酯性质，
三、检识方法
香豆素类分子中均具有内酯结构，通常还具有酚羟基或
内酯水解后产生的酚羟基，通过这些基团的显色反应，能 为检识与鉴别香豆素成分提供参考。
1、异羟肟酸铁试验（内酯的颜色反应） 具有内酯结构，在碱性条件下内酯开环，与盐
酸羟胺缩合成异羟肟酸，在酸性条件下再与Fe3+络 合生成异羟肟酸铁显红色。 2、酚羟基反应
• A.升华性
B.香味
• C.两者均无
D.两者均有
多项选择题
1、含有香豆素的中药有
A.秦皮
B.厚朴
D.补骨脂
E.大黄
2、游离的小分子香豆素提取可用
A.碱溶酸沉淀法 B.水蒸气蒸馏法
D.升华法
E.有机溶剂法
3、提取游离香豆素的方法有
不同技术香豆素类成分的提取
效应
特点
安全环 高效节
保
易于控 制
能
14
微波萃取技术影响因素
萃取溶剂 溶剂的极性对于萃取率影响很大 物料中的水分或湿度 物料的含水量对回收率影响也很大
、
萃取温度
萃取率随温度升高而增大的趋势仅表现在不太高 的温度范围内，且各物质的最佳萃取温度也不同
萃取时间
超临界CO2萃取白芷中香豆素类
香豆素的苯骈α -吡喃酮结构使其具有明显脂溶性，C-7位的羟基或烃基 让其有芳香气味，易挥发，用超临界萃取香豆素类物质有其他方法无法 比拟的优势。
超临界CO2流体萃取受很多因 素影响，包括萃取物的性质（ 样品粒度）和流体所处状态 （超临界CO2流体的温度、压 力、流量）及萃取时间等。
又非液态的物质，它兼有液体和气体的优点。
特点 其密度与液体接近，且密度与溶解能力基本成正比，所以
它和液体一样，很容易溶解其它物质；同时它的粘度和表面张力 很小只是略高于气体，这使得溶质在其中的扩散系数要比在液体 中大得多。
原理 在临界点附近，超临界流体的温度和压力发生微小变化即
可导致溶质的溶解度发生几个数量级的变化。 根据这一特性，可 通过控制体系的温度和压力，使各种待萃取组分按它们在超临界
流体中的溶解度大小先后提取出来，并得到初步分离。
7
超临界CO2萃取
最常用的超临界流体为CO2，它的化学性质不活泼， 无毒无味， 价 格适中且具有较低的临界温度和临界压力，是萃取小分子，低极性， 亲脂物质的理想溶剂。
超临界萃取化合物必须满作为溶剂，根据相似相溶原 理，被萃取物须为非极性或脂溶性物质 根据超临界萃取原理，被萃取物要有一定挥发性，才能够从质 中被萃取出来，进入超临界状态下的CO2中去
2013年中药士考试辅导：香豆素类的提取及分离
1.水蒸气蒸馏法：小分子的香豆素类因具有挥发性，可采用水蒸气蒸馏法进行提取。
2.碱溶酸沉法：由于香豆素类可溶于热碱液中，加酸又析出，故可用0.5%氢氧化钠水溶液（或醇溶液）加热提取，提取液冷却后再用乙醚除去杂质，然后加酸调节pH至中性，适当浓缩，再酸化，则香豆素类或其苷即可析出。
3.系统溶剂法：从中药中提取香豆素类化合物时，可采用系统溶剂提取法。
常用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇顺次萃取。
石油醚对香豆素的溶解度并不大，其萃取液浓缩后即可得结晶。
乙醚是多数香豆素的良好溶剂，但亦能溶出其他可溶性成分，如叶绿素、蜡质等。
其他极性较大的香豆素和香豆素苷，则存在于甲醇或水中。
4.色谱方法：结构相似的香豆素混合物最后必须经色谱方法才能有效分离，柱色谱吸附剂可用中性和酸性氧化铝以及硅胶，碱性氧化铝慎用。
其他色谱方法还有制备薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱等。
中药中香豆素类化学成分的提取分离技术
二、理化性质
（一）性状
游离苷元：无色至淡黄色结晶，具有芳香性和挥发性；
苷类：粉末状，多数无香味和挥发性。 （二）溶解性 游离苷元：溶于沸水，但不溶于冷水。溶于氯仿、乙醚、 醋酸乙酯、丙酮、甲/乙醇等有机溶剂。
苷：易溶于甲/乙醇，可溶于水，难溶于乙醚、氯仿、醋 酸乙酯等有机溶剂。
（三）内酯性质和碱水解反应
一、结构与分类
1、基本母核：苯骈α -吡喃酮（色原酮的异构体）
（邻羟桂皮酸内酯）
一、结构与分类
2、分布
香豆素类在动植物及微生物中均有分 布，如致癌成分黄曲霉素类及发光真菌中 的亮菌素类均属于香豆素类。这类成分分 布得最广的还是高等植物中，其中芸香科 和伞形科中分布最多。它们在植物体内以 游离状态或与糖结合成苷的形式存在，苷 酶解可环合成游离的内酯状态。
酯（七叶素）、秦皮苷、秦皮素、紫丁香苷等。
知识链接
以95%乙醇为溶剂提 取； 浓缩液加热后用氯仿 洗涤，除去脂溶性杂 质； 利用七叶苷和七叶素 在醋酸乙酯中的溶解 度不同而分离。
思考题
1、香豆素类化合物具有哪些理化性质？ 2、简述薄层色谱中展开剂的PH值对弱酸性香豆素Rf的影 响。
3、通过提取分离秦皮中的七叶素和七叶苷，试述两相溶 剂萃取法的原理是什么？操作时要注意哪些问题？萃 取操作中若已发生乳化应如何处理？
一、结构与分类
3、香豆素的结构类型
香豆素母核的苯环或α-吡喃酮环上常有羟基、烷氧 基、苯基、异戊烯基等取代，其中异戊烯基的活泼双 键又可与邻位酚羟基环合成呋喃或吡喃环结构，根据 其取代基及连接方式不同，把香豆素分成几类：
（一）简单香豆素类
苯环上 指只有在苯环上有取代基的香豆素类。如 白蜡树枝皮 有取 代基
香豆素的分离方法
如该>C=O附近存在羟基或羧基，将使吸收位 置移至1670cm-1左右。 2、1625～1645cm-1
—— 芳环双键吸收带，常表现为1～3个较 强峰。
（四）1H-NMR
1、香豆素母核上的质子受内酯羰基吸电子共 轭效应影响，质子信号特征如下：
OMe
五味子 甲 素 (+)-deoxyschizandrin
（七）苯骈呋喃类
MeO
O
O
MeO
OMe
海风 藤酮 kadsurenone
MeO
O
O
O O
山蒟素
（八）双环辛烷类
MeO
O
MeO
O
O
OMe
macrophyllin
（九）苯骈二氧六环类
HO
O HO
HOCH2
O
O
猫 眼草素 maoyancaosu
（三）芳基萘类
4 3
O
2 1
O
1-苯代萘内酯
O
1
2O
3 4
4-苯代萘内酯
OH H
O O
O H HO
CH3O
CH3O
CH3O
鬼臼毒素
（四）四氢呋喃类
O
O
7-O-7'
7-O-9'
O
9-O-9'
（五）双四氢呋喃类
O
O O
H
H
O
O
O
(+)-细辛脂素
（六）联苯环辛烯类
MeO
OMe
MeO MeO
MeO
etoh不同浓药材回收溶剂加水水溶液有机溶剂萃取石油醚乙醚乙酸乙酯酸碱分离法乙醚萃取液nahco萃取酸性成分萃取香豆素类内酯成分naoh洗脱剂已烷和乙醚乙醚和乙酸乙酯等混合溶剂可观察荧光一荧光性质1香豆素在紫外光下显示蓝色荧光oh被醚化荧光将减弱
香豆素的提取实验报告
一、实验目的1. 了解香豆素类化合物的性质和提取方法；2. 掌握碱溶酸沉法提取香豆素的原理；3. 学会利用该方法从植物材料中提取香豆素。
二、实验原理香豆素类化合物是一类具有内酯环结构的天然有机化合物，广泛存在于多种植物中。
碱溶酸沉法是提取香豆素的一种常用方法，其原理是利用香豆素类化合物在碱性条件下可水解开环，生成顺式邻羟基桂皮酸的盐溶于水，在酸性条件下又闭环恢复为内酯环结构。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：植物材料（如菊科植物、伞形科植物等）、蒸馏水、乙醇、氢氧化钠、盐酸、活性炭、层析纸、硅胶、三氯甲烷等。
2. 实验仪器：天平、烧杯、玻璃棒、漏斗、布氏漏斗、旋转蒸发仪、层析缸、层析仪、真空泵、显微镜等。
四、实验步骤1. 植物材料预处理：将植物材料干燥、粉碎，过40目筛，备用。
2. 水提法：取一定量预处理后的植物材料，加入适量蒸馏水，煮沸30分钟，过滤，滤液备用。
3. 醇提法：取一定量预处理后的植物材料，加入适量乙醇，煮沸30分钟，过滤，滤液备用。
4. 碱溶酸沉法：取适量水提液或醇提液，加入氢氧化钠溶液调节pH值为10，加热煮沸30分钟，冷却后过滤，滤液备用。
5. 中和：将滤液用盐酸调节pH值为5，冷却后加入活性炭脱色，过滤。
6. 结晶：将滤液加入三氯甲烷，充分振荡，静置，取上层有机相，加入少量硅胶，过滤，滤液旋转蒸发至干，得到粗提物。
7. 层析分离：将粗提物进行硅胶柱层析，选择合适的洗脱剂进行梯度洗脱，收集香豆素类化合物。
8. 核磁共振（NMR）鉴定：将分离得到的香豆素类化合物进行NMR分析，鉴定其结构。
五、实验结果与讨论1. 实验结果：通过碱溶酸沉法从植物材料中成功提取出香豆素类化合物，经NMR鉴定，确认其结构。
2. 讨论与分析：（1）植物材料的选择：不同植物中香豆素类化合物的含量差异较大，选择合适的植物材料对提高提取效率至关重要。
（2）提取方法：水提法和醇提法均可用于香豆素的提取，但醇提法提取效率更高。
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乙醇液
回收分离
结晶（可能时混和物）
香豆素苷类
单体（亲脂性香豆素）
2、酸碱分离法
此系经典方法。 1.具酚羟基的香豆素类溶于碱液加酸后可析出。 2.香豆素的内酯环性质，于碱液中皂化成盐而加酸后恢复成内 酯析出。 碱液加热开环时，要注意碱液 的浓度和加热时间，否则将引起降 解反应而使香豆素破坏，或者使香 豆素开环而不能合环。 对酸碱敏感 的香豆素用此法可能得到次生产物。
1、香豆素的α-吡喃酮环具有α，β-不饱和内酯性质， 在稀碱液中会逐渐水解生成顺邻羟桂皮酸的盐，而顺 邻羟桂皮酸不易游离存在，其盐的水溶液经酸化即闭 环恢复成内酯。这个闭合过程极易发生，即使在很弱 的酸溶液中，如通入CO2也能促使其内酯化而闭环。
2、香豆素如果和碱液长时间加热，水解产物顺邻羟桂皮 酸衍生物则发生异构化，转变成反邻羟桂皮酸的盐， 再经酸化也不再发生内酯化闭环反应。 （1）香豆素内酯环发生碱水解的速度主要与C7位取代基 的性质有关。其水解难易为： C7-OH香豆素﹤C7-OCH3香豆素﹤香豆素 （2）C8的适当位置有羰基、双键或环氧结构时，其水解
异香豆素可认为是邻羧基苯乙烯醇的内酯， 香豆素的异构体。
（五）其它香豆素类
α-吡喃环上有取代基的 香豆素类。C3、C4上常有苯 基、羟基、异戊烯基等取代。 C3苯代香豆素生源同黄酮。
三、生理活性
1.毒性：肝毒性 。必要结构：呋喃环上的双键和不饱和内酯环。
2. 抗菌作用：秦皮中的七叶内酯和七叶内酯苷具抑制痢疾杆菌的
系统溶剂分离法
1、定义
按极性由小到大的顺序选用不同极性的溶剂组 成溶剂系统，依次提取分离提取液中各种不同成分， 使各溶解度有差异的成分得到分离。
2、该法的特点：可分离不同极性 的有效成分（初始研究阶段） 3、该法的缺点：繁琐，分离纯化 度不高，灵敏性下降
知识链接
3、中药化学成分及其较适用范围的提取溶剂
一、结构与分类
1、基本母核：苯骈α -吡喃酮（色原酮的异构体）
（邻羟桂皮酸内酯）
一、结构与分类
2、分布
香豆素类在动植物及微生物中均有分 布，如致癌成分黄曲霉素类及发光真菌中 的亮菌素类均属于香豆素类。这类成分分 布得最广的还是高等植物中，其中芸香科 和伞形科中分布最多。它们在植物体内以 游离状态或与糖结合成苷的形式存在，苷 酶解可环合成游离的内酯状态。
白蜡树的枝皮或干皮的主要 成分：七叶内酯和七叶苷
（二）呋喃香豆素类
香豆素核上的异戊烯基与邻位酚基环合 异戊烯基与邻位酚羟基环合
成呋喃环，成环后常伴随着降解失去三个碳原子。
（1）直线型：C6-异戊烯基与C7羟基环合而成（6、7呋喃骈香豆 素型）如：补骨脂内酯 （2）角型：C8-异戊烯基与C7-羟 基环合而成（7、8呋喃骈香豆素 型）如：异补骨脂内酯
作用。补骨脂内酯具抗真菌及抗结核活性。 3.平滑肌松弛作用：血管扩张作用。
伞形科凯刺-----------冠状动脉扩张 茵陈蒿滨蒿内酯-----解痉利胆
4.抗凝血作用和止血作用：
双香豆素----防血栓及消血块 泽兰内酯----止血
5.光敏作用 补骨脂内酯治疗白癜风。 呋喃香豆素多有该作用。很多香豆素可以吸收紫外 光，放出在可见区（近470nm）的荧光，故可用做增 白剂，如7-OH香豆素。由于吸光性，七叶内酯和七叶 苷可用于保护皮肤防止辐射的药物。
情境四
中药中香豆素类化学成分的提 取分离技术
• 理论基础 •任 务
理论基础
一、结构与分类
二、理化性质
三、检识方法
四、提取与分离方法
一、结构与分类
香豆素是顺式邻羟基桂皮 酸的内酯，具有芳香气味， 广泛分布于高等植物中， 在生物体内以邻羟基桂皮 酸苷的形式存在，酶解后 苷元邻羟基桂皮酸内酯化 成香豆素，具有荧光性及 多种生物活性。
2）分离因子（β值）与分离难易的关系
β = KA / KB β值越大，越易分离； β值 → 1时，无法分离
分配色谱法
分配色谱法
正 相 分 配 色 谱 反 相 分 配 色 谱 正相 色谱
基本原理
极性物质吸附强 非极性物质吸附弱 后出 先出
反相 色谱
极性物质吸附弱 非极性物质吸附强
先出 后出
• （一）基本原理 • （二）支持剂 • （三）分配色谱种类 正相分配色谱 反相分配色谱 • （四）操作方式 1.纸色谱 2.分配薄层色谱 3.分配柱色谱
可获得顺邻羟桂皮酸的衍生物，而不再闭环成内酯。
（四）荧光性
香豆素母体本身即无取代的香豆素并无荧光。羟 基香豆素类化合物在紫外光下大多显蓝色或蓝绿色荧 光，在碱液中更加显著，尤其是C7羟基香豆素，甚至
在日光下也可辨认。若在C8或C6再引入羟基，则荧光
减弱。引入甲氧基后荧光也将减弱，颜色转变为紫色。
三、检识方法
亲水性较强 亲水性强
两相溶剂萃取法
1、原理 ：利用混合物中各种成分在两相互不相溶的溶
剂中分配系数的差异而达到分离的目的。
1）分配系数（K值）与萃取次数的关系
K=C u/C l K值与萃取次数成反比， K值越大，
萃取次数越少，反之越多 各种成分在两相当中溶质的浓度相差越大，即分 配系数K差异越大，则分离效果就越好。
一、结构与分类
3、香豆素的结构类型
香豆素母核的苯环或α-吡喃酮环上常有羟基、烷氧 基、苯基、异戊烯基等取代，其中异戊烯基的活泼双 键又可与邻位酚羟基环合成呋喃或吡喃环结构，根据 其取代基及连接方式不同，把香豆素分成几类：
（一）简单香豆素类
苯环上 指只有在苯环上有取代基的香豆素类。如 白蜡树枝皮 有取 代基
二、理化性质
（一）性状
游离苷元：无色至淡黄色结晶，具有芳香性和挥发性；
苷类：粉末状，多数无香味和挥发性。 （二）溶解性 游离苷元：溶于沸水，但不溶于冷水。溶于氯仿、乙醚、 醋酸乙酯、丙酮、甲/乙醇等有机溶剂。
苷：易溶于甲/乙醇，可溶于水，难溶于乙醚、氯仿、醋 酸乙酯等有机溶剂。
（三）内酯性质和碱水解反应
香豆素类分子中均具有内酯结构，通常还具有酚羟基或 内酯水解后产生的酚羟基，通过这些基团的显色反应，能 为检识与鉴别香豆素成分提供参考。 1、异羟肟酸铁试验（内酯的颜色反应）
具有内酯结构，在碱性条件下内酯开环， 与盐酸羟胺缩合成异羟肟酸，在酸性条件下 再与Fe3+络合生成异羟肟酸铁显红色。 2、酚羟基反应
3、色谱检识
1、TLC
• 常用的吸附剂是硅胶，其次是纤维素和氧化铝； • 一般采用中等极性的混合溶剂或偏酸性的混合溶剂。 • 显色方法：首选观察荧光，或用氨熏，喷10%氢氧化钠后再观察。
2、PC
• 常用水饱和的正丁醇、异戊醇、氯仿为展开 剂； • 展开剂的PH值可影响弱酸性香豆素的Rf值。
四、提取与分离方法
酯（七叶素）、秦皮苷、秦皮素、紫丁香苷等。
知识链接
以95%乙醇为溶剂提 取； 浓缩液加热后用氯仿 洗涤，除去脂溶性杂 质； 利用七叶苷和七叶素 在醋酸乙酯中的溶解 度不同而分离。
思考题
1、香豆素类化合物具有哪些理化性质？ 2、简述薄层色谱中展开剂的PH值对弱酸性香豆素Rf的影 响。
3、通过提取分离秦皮中的七叶素和七叶苷，试述两相溶 剂萃取法的原理是什么？操作时要注意哪些问题？萃 取操作中若已发生乳化应如何处理？
3）纸色谱（PC）
支持剂：滤纸 固定相：滤纸上吸附的水 流动相：一定的溶剂系统。
（1）与三氯化铁的乙醇液反应，产生绿色 现象，取代基越多，颜色越深。
（2）若酚羟基邻、对产生的酚羟基对位无取代 基，或水解后基，可与一些试剂缩合显色。
1）重氮化试剂（如重氮化对硝基苯 胺）缩合显红至紫红色。
2）与Gibbs试剂（2、6-二氯苯醌氯 亚胺）缩合显蓝色。 3）与Emerson试剂缩合显红色。 Emerson试剂：4-氨基安替比林和铁 氰化钾。
3、水蒸气蒸馏法
某些小分子的香豆素类具挥发性可用蒸馏法与不
挥发性成分分离，常用于纯化过程。
任务 秦皮中香豆素类化学成分的提取 分离技术
• 秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树、白蜡树、尖叶白蜡树、
宿柱白蜡树的干燥枝皮或干皮。 • 味苦，性寒。归肝、胆、大肠经。有清热解毒、收涩、 明目之功效。 • 秦皮中主要含有香豆素类化合物：七叶苷及七叶树内
植物成分结构类型 亲脂性强 亲脂性较强 适于提取溶剂 叶绿素、脂肪油、挥发油 石油醚 游离生物碱、苷元、甾类、 乙醚、氯仿 萜类、某些有机酸
中偏小 某些苷类 (如强心苷等)
中等 极性 中 等 某些苷类 (如黄酮苷类)
氯仿-乙醚 (2:1)
乙酸乙酯
某些苷类 (如蒽醌苷、皂 中偏大 正丁醇 苷等)
极性大的苷、糖类、氨基 丙酮、乙醇、甲 酸等 醇 蛋白质、粘液汁、糖类、 氨基酸、无机盐、苷类 水
（三）吡喃香豆素类
香豆素的C6或C8异戊烯基与邻酚羟基环合 而成2、2-二甲基-α-吡喃环结构。
直线型： C6-异戊烯基与C7-羟基环 合而成（6、7吡喃骈香豆素）如： 美洲花椒根皮 角型： C8-异戊烯基与C7-羟基环合 而成（7、8吡喃骈香豆素）如：印 度邪蒿的果实
美洲花椒
茵陈蒿
（四）异香豆素类
（一）提取 1、溶剂提取法 2、酸碱提取法 （二）分离 1、分步结晶法 2、真空升华或蒸馏法
1、系统溶剂法： 用石油醚、苯、乙醚、乙酸 乙酯、丙酮和甲醇依次提取样品。
药材粗粉
石油醚回流提取 回收至小体积
石油醚液 浓缩液
放置、析晶
残渣
乙醚回流提取
乙醚液离
冷石油醚洗 单体（亲脂性较弱香豆素） 进一步分离