电泳基础知识培训(1)
阴极电泳设备培训讲义
阴极电泳设备培训讲义一、仪器概述阴极电泳设备是一种用于蛋白质分离和分析的仪器,主要由电泳槽、电源、试样槽、电极和电泳缓冲液等部分组成。
其原理是利用电场作用下,不同电荷的蛋白质在凝胶中迁移的速度不同,从而实现蛋白质的分离和分析。
二、操作步骤1. 准备工作:首先检查设备是否正常运转,准备好所需的试样和电泳缓冲液。
2. 样品加载:将试样加载到电泳槽中的试样槽内。
3. 设置参数:根据试样的特性和分离要求,设置合适的电场强度、电泳时间和温度等参数。
4. 开始电泳:将电泳槽与电源连接,开启电源,开始电泳过程。
5. 完成电泳:根据实验需要,确定电泳时间,然后关闭电源,取出凝胶进行后续分析或染色等操作。
三、注意事项1. 操作前应仔细阅读设备说明书,了解设备性能和操作要求。
2. 操作过程中要小心轻放试样,避免损坏试样槽和凝胶。
3. 在操作时要注意安全,避免触电或其他意外事故发生。
通过本次培训,相信大家对阴极电泳设备有了更深入的了解,能够更熟练地操作该设备,为生物医学研究和临床诊断提供更好的支持和帮助。
希望大家能够将所学知识运用到实际工作中,取得更好的成果。
感谢大家的参与和配合!阴极电泳是一种常见的蛋白质分离技术,它能够快速、高效地分离复杂混合物中的蛋白质,广泛应用于生物学、生物医学研究、临床诊断、药物研发等领域。
本文将继续介绍阴极电泳设备的操作技术、应用注意事项和未来发展方向等内容,以帮助大家更好地了解和掌握这项重要技术。
四、应用注意事项1. 选择适当的凝胶类型:根据待分离蛋白的大小、电荷和亲和性等特性,选择合适的凝胶类型,如聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)、聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)或聚丙烯酰胺凝胶(2-DE)等。
2. 控制电场强度和时间:根据待分离蛋白的特性和分离要求,设置合适的电场强度和电泳时间,以避免蛋白质过度迁移或分离不完全。
3. 精细样品制备:在进行阴极电泳前,应充分准备样品,确保样品的纯度和浓度符合实验要求,以获得准确的分离结果。
电泳基础知识培训
• 灰分 •(%)
•凹陷•缩孔 •边缘遮盖力降低
• PH
•设备腐蚀•涂膜溶解•外观粗糙
•耐气孔性降低
• MEQ
•涂料稳定性降低
•(•meq/100gsolid•) •凝聚
• 电导率 •(μ•S/c•m)
• 溶剂量 •(%)
• 外观粗糙 •平滑性降低 • 膜厚降低 • 耐气孔性降低
第三章槽内涂料管理
•高的情况 •UF透过量降低 •带出量增大 •(回收率下降) • 两次流挂增加 • 外观粗糙 • 无光泽 • 段差 • 涂料稳定性降低 • 凝聚 • 设备腐蚀•·涂膜溶解 • 外观粗糙 • 耐气孔性降低 • 外观粗糙• 耐气孔性降低
•电泳涂料组成
•F-1 •F-2
• 颜料补给用涂料 • 为了保持涂料稳定,含有少量树脂。 • 通常NV=56%(灰色)、42%(黑色)
• 树脂补给用涂料 • 不含有颜料 • 通常NV大约36%
•F-1和F-2都含有溶剂 • 、水。
•配制槽液:将水、F-、F-1按规定比例进行混合
•添加剂E
•
• 添加剂Aຫໍສະໝຸດ •备注•NV表示 •
• 灰•(分%)
•颜料
•灰化残分/固体分•×100
•
•
※150℃×1H+600 ℃ ×1H
• PH
•氢离子 •-log[H+]
• 用PH计检测
• MEQ
•(meq/100gsolid)
• 电导率
•μS•/cm
•酸浓度 •电导度
•酸(毫克当量)/固体分×100
•用电导率计检测
•
• 溶剂量 •(%)
•将酸排到体系外这就是隔膜
系统。
•阳极槽
•+
电泳基础知识
电泳的基本原理
在一定pH条件下,每一种分子都具有特定的电荷 在一定pH条件下, pH条件下 种类和数量)、大小和形状, )、大小和形状 (种类和数量)、大小和形状,在一定时间内它 们在相同电场中泳动速度不同, 们在相同电场中泳动速度不同,各自集中到特定 的位置上而形成紧密的泳动带。 的位置上而形成紧密的泳动带。这就是带电粒子 可以用电泳技术进行分离、 可以用电泳技术进行分离、分析和鉴定的基本原 理。 -
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和 交联试剂N,N’-甲叉双丙烯酰胺 在有引发剂(如过硫酸铵) 在有引发剂(如过硫酸铵)和增 速剂( 速剂(如N,N,N’,N’-四甲基乙二 TEMED) 胺,TEMED)的情况下聚合而成 的。丙稀酰胺的聚合通常是由化 学催化或光化学过程完成的, 学催化或光化学过程完成的,常 用过硫酸铵、 用过硫酸铵、过硫酸钾或核黄素 来引发这个过程, TEMED、 来引发这个过程,用TEMED、3二甲胺丙腈等作为聚合过程中的 增速剂。 增速剂。
若将带净电荷Q的粒子放入电场,则该粒子所受到的电荷引力为: 若将带净电荷Q的粒子放入电场,则该粒子所受到的电荷引力为: (1) F引=E Q 在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F 在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻 =6π V F阻=6πrηV (2) 2 当F引=F阻时 (3) 6π EQ= 6πrηV V
EQ V= 6πrη
(4)
由上式可以看出,粒子的移动速度(泳动速度V)与电场强度(E) 由上式可以看出,粒子的移动速度(泳动速度V)与电场强度(E) V)与电场强度 和粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子的半径(r) (Q)成正比 (r)及溶液的粘度 和粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子的半径(r)及溶液的粘度 DNA) (η)成反比。非球形分子(如线状DNA)在电泳过程中受到更大 )成反比。非球形分子(如线状DNA 的阻力,即粒子的泳动速度与粒子形状有关。 的阻力,即粒子的泳动速度与粒子形状有关。
电泳基础知识
6.2支持介质的分类 电泳的固体支持介质可以分为两类: (1)薄膜类: 薄膜类包括纸类,醋酸纤维素薄膜,聚酰胺薄 膜等. 这类支持介质化学惰性好,在电泳过程中产生的
固体支持物表面带正电荷,形成向正极移动的电渗流。电
渗流的大小受到Zeta电势,偶电层厚度和缓冲液粘度等因 素的影响,直观地看电渗流随着电解质浓度的增加而增加 ,随着pH值的增加而加大。
(6)相对迁移率(relative mobility):用mR表示蛋 白质样品的迁移距离与示踪染料的迁移距离之比即为相对 迁移率,即 蛋白质的迁移距离(cm) mR = ————————————— 示踪染料的迁移距离(cm)
5.1按电泳方式分类 (1)端电极电泳:有垂直式和水平式两种方式,多用于蛋
白质电泳。
(2)搭桥电泳:为水平式,水平板状电泳槽形式多样,凝
胶和缓冲液通过间接接触的方式,如用滤纸桥搭接,用缓
冲液制作的凝胶条或滤纸条搭接(图3-4),后两者即半
干技术,多用于免疫电泳、等电聚焦。
A
B
C
图4 水平板状电泳中凝胶与缓冲液的接触方式 A 滤纸桥 B 凝胶条 C 滤纸条
现象,如图。 A B
电渗流迁移速度(Vep)的表达式为: εξ 电渗流迁移速度Vep = ————— E 4πη 式中为电解常数,为支持物与表面平切面的Zeta电势
,为缓冲液粘度,E为电场强度。 通常情况下,电渗流总是由正极向负极移动,只有在特 殊情况下如分离碱性蛋白质的阴极电泳时溶液pH较低,
,与溶液的导电性K成反比。也就是说,电场强度越高电
泳速度越快;溶液的导电性越强,电泳速度越慢。因此电
泳速度随着电位梯度或溶液的导电性的变化而改变。
3电泳的分类 3.1按分离原理分类 (1)区带电泳(zone electrophoresis,ZEP):是在半固相或 胶状介质上加一个点或一薄层样品溶液,然后在介质上加 电场,带电颗粒在支持介质上或支持介质内迁移,在电泳 过程中,不同的离子成分在均一的缓冲液系统中分离成独 立的区带(图3-2a),这是当前应用最广泛的电泳技术。
电泳技术医学知识培训课件
电泳技术医学知识培训课件一、引言电泳技术是一种重要的生物化学分析方法,广泛应用于医学、生物学、生物技术等领域。
通过电泳技术,可以对生物样品中的蛋白质、核酸等分子进行分离、纯化和分析。
在医学领域,电泳技术被用于疾病诊断、基因检测、药物研发等方面。
本课件旨在介绍电泳技术的基本原理、分类、操作步骤及应用,帮助医学专业学生和研究人员更好地掌握电泳技术。
二、电泳技术的基本原理电泳技术是利用电场对带电粒子的迁移作用,实现样品中分子的分离和分析。
在电泳过程中,样品中的分子在电场作用下向相反电极移动,迁移速度与分子的电荷量、大小和形状有关。
根据分子的迁移速度和迁移距离,可以实现对样品中分子的分离和分析。
三、电泳技术的分类1. 凝胶电泳:以凝胶为电泳介质,根据分子的分子量、形状和电荷进行分离。
常见的凝胶电泳有聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、琼脂糖凝胶电泳(AGE)等。
2. 毛细管电泳:以毛细管为电泳通道,利用高压电场对样品进行分离。
毛细管电泳具有高效、快速、样品用量少等特点,广泛应用于生物大分子的分离和分析。
3. 无胶电泳:以液体为电泳介质,利用电场对带电粒子进行分离。
无胶电泳具有操作简便、分离速度快等优点,适用于生物大分子的快速检测。
四、电泳技术的操作步骤1. 样品制备:将待分析的生物样品进行处理,使其适应电泳条件。
常见的样品制备方法有蛋白质提取、核酸提取等。
2. 凝胶制备:根据实验需求,选择合适的凝胶类型和浓度,制备凝胶板。
凝胶制备过程中需注意凝胶的均匀性和稳定性。
3. 上样:将处理好的样品加入凝胶孔中,注意避免气泡产生。
4. 电泳:接通电源,使样品在电场作用下迁移。
根据实验需求,调整电压、电流等参数,以保证电泳过程的顺利进行。
5. 染色与观察:电泳结束后,对凝胶进行染色,使分离后的分子可视化。
常用的染色方法有蛋白质染色、核酸染色等。
染色后,可使用凝胶成像系统进行观察和分析。
五、电泳技术在医学领域的应用1. 疾病诊断:电泳技术可用于检测生物样品中的异常蛋白质、核酸等分子,为疾病的诊断提供依据。
电泳基础知识
Paint
Permeate
Ultrafilters
Bag Filters
Bag Filters
Paint
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第二章 电泳涂装设备
塗料側
濾液
塗料側
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第二章 电泳涂装设备
• UF水洗系统
原液(电泳槽液) 半透膜
半透膜施加的压力 水,离子,低分子物质 涂料离子
UF滤液 滤液
浓缩液
往滤液槽或UF水洗槽 往滤液槽或 (返回电泳槽)
F-1和F-2都含有溶剂 、水。
配制槽液:将水、F-、F-1按规定比例进行混合 按规定比例进行混合
添加剂E 添加剂E 添加剂A 添加剂A 混合溶剂,用来调整膜厚 用来调整膜厚。 醋酸水溶液, ,用来调整MEQ和阳极电导率。
根据槽液检测数据,补给添加剂 补给添加剂A和E。
7
第一章电泳涂料基础知识
• 电泳涂装结构学(1)
什么是电泳涂装? 将被涂物浸泡在带电荷涂料粒子的液体中 被涂物与对极之间通过直接电流,被涂物表面就会析出涂料粒子的涂装法 被涂物表面就会析出涂料粒子的涂装法。 涂料粒子带负电荷叫阴离子电泳,带正电荷叫阳离子电泳 带正电荷叫阳离子电泳。
2
第一章电泳涂料基础知识
• 1-2 电泳涂装特点(1) 电泳涂装特点(
④ 混合(溶剂、固化剂
纯水 环氧树脂 改性剂 溶剂 交联剂 添加剂
稀释 乳化锅 ④乳化 乳化 除油 ⑤除油
储存 储罐 ⑥储存
包装
1吨TANK或200L桶
⑦过滤 ⑧包装
过 滤
制造工程
过滤
过滤
27
P F F P
typeoven 典型烘炉 2nd 3rd
循环 4th recycle 1st Waste 废弃水 废弃水 water
电泳培训计划内容
电泳培训计划内容一、前言电泳是一种重要的生物技术方法,广泛应用于生物科学研究和临床诊断。
要想有效地应用电泳技术,必须具备一定的实验基础和操作技能。
因此,本电泳培训计划旨在为科研人员和临床医生提供一套全面的电泳实验培训方案,帮助他们掌握电泳技术的基本原理、操作步骤和常见问题的解决方法。
二、培训内容1. 电泳技术基础知识(1)电泳原理:介绍电泳的基本原理和作用机制,包括DNA/RNA蛋白质电泳的原理以及电泳在分子生物学和临床诊断中的应用。
(2)电泳仪器设备:介绍电泳实验中常用的仪器设备,包括电泳槽、电源、电泳槽冷却系统、电泳柜等,并详细介绍其结构和功能。
2. 样品制备和加载(1)样品制备:介绍常见的样品制备方法,包括DNA、RNA和蛋白质的提取、纯化和浓缩方法。
(2)样品加载:详细介绍样品在准备电泳样品时的操作技巧,包括样品混合、加荧光标记、样品乳化、制备电泳样品板。
3. 准备电泳缓冲液(1)缓冲液的选择:介绍在不同类型的电泳实验中所需的缓冲液种类、配制方法和作用机制。
(2)缓冲液的常见问题及解决方法:介绍电泳实验中常见的缓冲液问题及相应的解决方法,包括pH 值不足、i瓜体问题、管风机问题等。
4. 电泳分离操作(1)电泳条件设定:介绍电泳条件设定的基本步骤和要点,包括电压、电流、时间、温度等参数的合理选择和调节。
(2)电泳分离效果评定:介绍电泳分离效果的评定方法,包括凝胶染色、成像分析和结果解读。
5. 电泳实验操作技巧(1)电泳样品处理技巧:介绍电泳实验中样品的处理技巧,包括取样、稀释、冻存、运输等操作。
(2)电泳仪器操作技巧:介绍电泳仪器的操作技巧,包括电极装配、稳定电压、调整电流、温度控制等操作。
6. 电泳实验数据分析(1)电泳实验数据的获取:介绍电泳实验数据的获取方法,包括成像记录、数据导出、结果统计等操作。
(2)电泳实验数据的分析:介绍电泳实验数据的分析方法,包括峰值识别、泳线识别、峰宽测量、分子量测量、电荷测量等操作。
电泳培训计划怎么写
电泳培训计划怎么写一、培训目标1. 掌握电泳原理和技术操作要点;2. 能够熟练进行蛋白质电泳、DNA电泳等实验;3. 增强实验室技术人员的实验操作技能,提高实验效率和数据准确性。
二、培训内容1. 电泳原理解析1.1 电泳的基本原理1.2 电泳设备和仪器的结构和工作原理1.3 不同类型电泳的原理及应用2. 电泳实验操作2.1 样品的准备和处理2.2 凝胶的制备和浇注2.3 电泳条件的选择和设置2.4 实验中常见问题的解决方法3. 数据分析和结果解读3.1 电泳图的解读和分析3.2 数据的统计和绘图3.3 结果的判读和结论的提炼4. 实验室安全和质控4.1 实验室安全操作规范4.2 仪器设备的维护和保养4.3 实验室数据的准确性和可靠性保障5. 实战操作演练5.1 对蛋白质电泳、DNA电泳等常见实验进行现场操作演示5.2 实操训练,让学员每人都有机会亲自操作、实验、巩固所学技能三、培训对象1. 科研人员:包括研究生、博士后、科研院所的科研人员等;2. 实验室技术人员:包括实验员、技术员、工程师等。
四、培训形式1. 理论授课:通过讲解、PPT展示、案例分析等方式进行电泳原理和技术的系统讲解;2. 实验操作:组织现场真实的实验操作演练,让学员们能够亲自动手操作、巩固所学知识;3. 互动交流:培训过程中设置提问环节和讨论环节,帮助学员们更好地理解和掌握知识。
五、培训流程1. 培训前期准备1.1 制定培训大纲和教材1.2 确定培训时间和地点1.3 邀请专业讲师和实验室技术人员,准备实验所需材料和设备2. 培训进行阶段2.1 第一天:电泳原理讲解和操作要点讲解2.2 第二天:电泳实验操作演示和学员实操训练2.3 第三天:数据分析和结果解读讲解和学员讨论交流2.4 第四天:实验室安全规范和质控措施讲解及培训总结3. 培训结束和总结3.1 发放培训证书3.2 收集学员反馈意见3.3 形成培训总结报告六、培训师资力量1. 主讲老师:具有丰富的电泳实验教学和科研经验,能够深入浅出地讲解电泳原理和技术;2. 助教老师:熟悉电泳实验操作流程,能够协助学员们进行实操训练。
电泳培训教材ppg
根据工艺要求,调整电泳液的 浓度、PH值和温度等参数,确 保其符合工艺要求。
电泳涂装的操作流程和注意事项
01
02
03
浸渍
将预处理后的工件浸入电 泳槽中,确保完全浸没在 电泳液中。
通电
向电泳槽通电,进行电泳 涂装,控制电流和电压在 工艺规定范围内。
循环搅拌
保持电泳液的均匀混合, 促进涂装过程的稳定进行。
05
PPG电泳涂料的环保与安全问题
PPG电泳涂料的环保性能和可持续发展
PPG电泳涂料在生产过程中采用环保原料,减少对 环境的污染。
PPG电泳涂料具有低VOC(挥发性有机化合物)含量, 降低对大气的污染。
PPG电泳涂料可循环利用,符合可持续发展理念, 减少资源浪费。
PPG电泳涂料的安全性能和使用注意事项
电泳技术的发展历程
1930年代
电泳技术的初步探索和应用,主要应用于蛋白质的分离。
1950年代
电泳技术的改进和发展,出现了多种电泳技术和方法,如 淀粉凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。
1970年代至今
电泳技术的进一步发展和应用,出现了高效液相色谱-电 泳联用技术、毛细管电泳等高分离效能的方法,广泛应用 于生命科学、医学、环境科学等领域。
温控设备
用于控制电泳液的温度,保持恒温状态,以确保 电泳效果稳定。
电源设备
提供电泳所需的电流和电压,需确保稳定可靠, 易于调节和控制。
循环过滤设备
用于循环和过滤电泳液,保持其清洁度和稳定性 。
电泳涂装前的准备工作
清洗工件表面
去除工件表面的油污、锈迹和 其他杂质,确保表面干净无异 物。
预处理
根据工件材质和涂装要求,进 行适当的预处理,如磷化、除 锈等,以提高涂层附着力。
电泳技术的基础知识
⒉ 影响因素
(1) 电场强度大省时 , 但应配备冷却装置以维持恒温
电场强度是指单位长度( cm )的电位降,也称电势梯度。如以滤纸作支持物,其两端浸入到电极液中,电极液与滤纸交界面的纸长为 20cm ,测得的电位降为 200V ,那么电场强度为 200V/ 20cm = 10V/cm 。当电压在 500V 以下,电场强度在 2-10v/cm 时为常压电泳。电压在 500V 以上,电场强度在 20-200V/cm 时为高压电泳。电场强度大,带电质点的迁移率加速,因此省时,但因产生大量热量,应配备冷却装置以维持恒温。
二、电泳技术的分类
⒈ 按照分离原理分类
(1) 移届电泳( moving boundary eletrophoresis,MBE )
移届电泳只能起到部分分离的作用,最早的成分部分较纯,其他则互相重叠,各界面可用光学方法显示,这是 Tisulius 最早建立的方法。
三个方法之间的区別是在于所使用固相材质有所不同。
固体支持介质可分为两类:
一类是滤纸、醋酸纤维素薄膜、硅胶、矾土、纤维素等; 另一类是淀粉、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶。
其中滤纸是首先被用于分离物质的电泳技术上,之后慢慢被第二类介质所取代。 1967 年最先提出在直径为 3mm 的毛细管中做自由溶液的区带电泳( Capillary Zone Electro-phoresis, CZE )。但他没有完全克服传统电泳的弊端。现在所说的毛细管电泳技术( CE )是由 Jorgenson 和 Lukacs 在 1981 年首先提出,他们使用了 75mm 的毛细管柱,用荧光检测器对多种组分实现了分离。近年来,将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中,又发展了电色谱,扩大了电泳的应用范围。
电泳漆基础知识
有机酸 助剂 消泡剂
中和树脂,使之成水溶或水乳 化状态
消泡性
如乳酸、醋酸、氨基磺酸 甲酸等
主要抑制喷淋产生的泡沫
表面活性剂
改善漆膜外观
润湿剂、抗缩孔剂等
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色浆部分
原料
预期作用与特性
备注
分散 树脂
季铵盐型或叔 胺盐型的改性 环氧分散树脂
钛白粉
炭黑 颜填料 防腐颜料
3 此时您正浏览在第3页,共74页。
阳极电泳漆(AED):所使用的成膜聚合物为阴离子型树 脂,常见的都是多羟基的聚合物,中和剂为有机胺,如一 乙醇胺、二甲基乙醇胺、三乙醇胺等;常用的有聚丁二烯、
酚醛、顺酐化油、环氧酯、丙烯酸类等阳极电泳漆。
4
此时您正浏览在第4页,共74页。
阴极电泳漆(CED) :所使用的成膜聚合物为阳离子型树脂,在 树脂骨架里含有氨基,中和剂为有机酸,如甲酸、乙酸、乳酸等; 最常用的树脂有环氧树脂、丙烯酸、聚氨酯类等。
副
主槽
槽
主槽
副
槽
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设计要求 1)电泳槽的容积、形状,由工件最大尺寸、生产量、生产节拍
来决定。 2)被涂物距液面、底部、电极在300mm左右。 3)槽底有2-3°的倾斜度,有利于清洗和除渣。 4)主、副槽之间有溢流堰,液位可调(液位差<100mm)。 5)槽底和转角都应设计呈弧型,尽量清除循环死角。 6)采用冷轧钢板,内衬环氧玻璃钢,耐电压≥2万伏,不允许有裸
超滤器是完成该系统的基础,它可以将槽液中的水、溶剂和低分子 物质,提取出来成为超滤液(UF液),利用超滤液对工件进行连 续性清洗,进行回收,同时可减少纯水的用量及排放废水的处理。
电泳培训资料
电泳培训资料第一部分:电泳基础知识电泳是一种生物技术实验手段,可以根据生物分子的大小和电荷差异来进行分离和分析。
在生物医学领域,电泳被广泛用于分离和检测蛋白质、核酸和其他生物分子。
在本部分中,我们将介绍电泳的基础知识,包括电泳原理、仪器设备和实验操作等内容。
1. 电泳原理电泳是利用电场的作用将带电的生物分子分离的一种技术。
在电泳过程中,样品溶液被置于一个电场中,带电的生物分子会在电场力的作用下向正电极(阳极)或者负电极(阴极)移动。
移动的速度取决于生物分子的大小、形状和电荷,从而实现分离的目的。
2. 电泳仪器设备电泳仪器主要由电源、电泳槽和电泳槽内的电泳芯片或凝胶等组成。
电源提供电场,电泳槽内的电泳芯片或凝胶则提供电场稳定的载体,使样品能够在电场中进行分离。
电泳芯片和凝胶的选择取决于实验目的和样品特性。
3. 实验操作在进行电泳实验时,首先需要将样品混合溶液加载到电泳槽中的凝胶内,然后打开电源,施加电场。
在电场作用下,样品会开始往电极方向移动,移动的速度取决于样品的特性。
完成电泳后,需要对凝胶进行染色和成像,以获取分离的生物分子图像。
第二部分:蛋白质电泳蛋白质电泳是电泳技术的一种,主要用于分离和检测蛋白质,可以分为聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和原位凝胶电泳(IEF)等类型,本部分将重点介绍SDS-PAGE和IEF的原理和实验操作。
1. SDS-PAGE原理SDS-PAGE是一种在聚丙烯酰胺凝胶中进行蛋白质分离的技术。
在SDS-PAGE中,蛋白质样品会在含有SDS(十二烷基硫酸钠)的样品缓冲液中被热性变性,并赋予了负电荷,使蛋白质的形状和电荷变得一致。
在加入电场后,蛋白质样品会在凝胶中根据分子大小和电荷进行分离。
2. SDS-PAGE实验操作进行SDS-PAGE实验时,首先需要准备含有SDS的样品缓冲液,并将蛋白质样品混合后进行加热变性。
然后将样品加载到凝胶中,打开电源进行电泳。
完成电泳后,可以对凝胶进行染色和成像,以获取蛋白质分离的图像。
电泳培训资料
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供电系统
PPG Confidential Material-E-Coat
37
电泳基理
PPG Confidential Material-E-Coat
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供电系统
PPG Confidential Material-E-Coat
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带电入槽
PPG Confidential Material-E-Coat
• 阳极 – 保持电导
PPG Confidential Material-E-Coat
14
PPG Confidential Material-E-Coat
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槽液循环
PPG Confidential Material-E-Coat
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槽液循环
PPG Confidential Material-E-Coat
B20加入浓缩的杀菌剂 机械剪切
解决方案
清洁树脂储存槽 专用加料系统加料 查明泡沫来源 控制水源电导小于 25 微欧 将杀菌剂加入超滤系统 事先稀释 提高流量
更换过滤袋
主槽金属
去除金属
修补槽衬
主槽PH值太高
加酸
PPG Confidential Material-E-Coat
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问题
过滤
问题解决 主槽脏粒
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超滤系统主要作用
• 提供闭环清洗超滤液 • 提供滤出水溶性污染物的方法
PPG Confidential Material-E-Coat
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超滤膜功能
• 提取水及小分子 • 保留大分子物质 (树脂和颜料)
PPG Confidential Material-E-Coat
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超滤系统
电泳基础
汽车涂装前处理、电泳基础知识
6、溶剂含量 作用:提高电泳涂料的水溶性和的稳定性、漆膜的流平性能。 槽液的有机溶剂含量高了,涂膜庸肿过厚,泳透力和破坏电压下降, 再溶解现象变重;含量低了,槽液的稳定性变差,涂膜干瘪,水溶性降 低。溶剂含量一般指槽液中除水以外的有机溶剂的百分含量。 7、电压:临界电压、工作电压、击穿电压 临界电压:低于泳涂电压下限的某一电压值时,几乎泳涂不上漆膜 (或沉积与再溶解涂膜量相抵消),这一电压称为临界电压。 工作电压:起始电压低一些,以减轻电极反应,也降低通电时间的脉 冲电流,随后电压高一些,以提高内腔缝隙表面的泳涂质量。在电泳涂 装场合能获得规定的外观优良的涂膜厚度,两极间通的电压称为电泳涂
应为质量比.体积比 是PVC值,在电泳 漆生产时用
关键是总量,而 非浓度.单车带 入量约10L
汽车涂装前处理、电泳基础知识
5、MEQ值 为使电泳涂料保持在一定的PH范围内,所需中和剂的总量包括化合 和游离两部分。电泳涂料的中和当量(MEQ)是表示使涂料水溶性 所需中和剂的中和程度,即化合部分的中和剂的耗量的当量值,游 离部分的氢离子浓度用PH值表示。
汽车涂装前处理、电泳基础知识
2、表面调整:表面调整的目的是促使磷化形成晶粒细致密实的磷化膜, 以及提高磷化速度。 原理:表面调整的主要成分是钛盐,是一种微碱性的胶体溶液。由于 胶体微粒表面能很高,对金属表面有极强的吸附作用,在被处理表面形 成很多的晶核,磷化初期就在晶核周围快速形成均与的磷酸盐结晶,限 制了大晶体的生长,促进磷化膜细化和致密。
汽车涂装前处理、电泳基础知识
培训人: 华 云 培训时间:1 h
汽车涂装前处理、电泳基础知识
概述
●涂装前处理目的 ●典型汽车涂装前处理工艺
电泳培训资料
2.2 电泳涂料的日常管理
2.电泳槽液参数的管理
➢ 电泳槽液参数的管理,最重要的是NV的管理,MEQ是以NV作为基准的参照数据; ➢ 确保槽液参数处于规格控制范围内; ➢ 实验分析检测数据准确性(可信度)确认:调整槽液参数(前/后),计算理
第Ⅷ代 地球环境
CED
特点 EL7000 EL9000
EL9400
No2000
GT-10
LB-20LF
LB-600
特殊 技术
湖南 关西 产品
初期的CED
高泳透性 防锈性 良好的槽液稳定性 防锈钢板适应性
厚膜型 HB-2000 赋于厚膜适应性
高外观 防锈钢板适应性
高泳透性 防锈性 良好的槽液稳定性 新防锈钢板应性 低温固化性 中厚膜
端面防锈型EL9700 端面防锈性良好
高泳透性 低温固化性提高
低加热减量 高防锈性 防锈钢板适应性
环境适合化 节省资源 节省能源 低成本 高性能
无铅化 薄膜、高抗针孔
耐石击
HS-88
HS-88-3 HB-2000
HB-2000LB
KT-10
LB-20LF NT-100C HG-350E
超高泳透力 良好的外观 节省资源 节省能源
1.6阴极电泳涂装的机理
阳离子水溶、水不溶原理
环氧 树 脂
O
O
+ HNR2
R2N
OH
环氧 树 脂
水 不溶
NR2
OH
电 沉 积 + OH
+ RCOOH
导 入 胺基 有 机酸 中 和
RCOO
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第一章 电泳涂料基础知识
• 电泳涂装结构学(4)~烘烤~
OH
HO
树脂
+
RO N CO H
C NH OR O
封闭异氰酸酯(BI)
加热
BI通过加热解封,和 OH发生反应。
O N CO H
CN O OH
电泳基础知识培训(1)
第一章电泳涂装设备
• 隔膜系统
+
电泳时,酸不断地从涂料中释
放、积蓄而导致酸浓度上升。
-log[H+]
用PH计检测
酸(毫克当量)/固体分×100
用电导率计检测
溶剂量/涂料量×100
备注
NV表示 ASH表示
COND表示
电泳基础知识培训(1)
• 槽内涂料管理(3)参数管理
第三章 槽内涂料管理
管理项目
加热残分 (%)
提高的方法
补给涂料 补给 F-1 F-2
管理方法 下降的方法
补给纯水 减少补给量
电泳涂料树脂结构
胺化
R N 非水溶性
R
环氧树脂
(非水溶液)
通过酸中和而带电(变成水溶性)
电泳涂料粒子结构图
酸-
酸-
酸- +
+
酸-
+
酸-
+
++
酸-
+ 酸+ 酸+
酸-
酸-
树脂
酸- 酸-
酸- + + +
酸-
+
+ 酸-
酸-
+ 酸- +
+
酸-
+
酸-
+
颜料 + 酸-
酸-
电泳基础知识培训(1)
• 电泳涂装结构学(2)
H+
将酸排到体系外这就是隔膜系
酸-
统。
阳极槽
OH-H+ OHH+-
阳极液槽
阳极液槽纯水 通过电导度控 制补给
纯水
只能通过酸根离子、带 负电的杂离子。 具有除出杂离子的作用。
隔膜(阴性膜)
电泳基础知识培训(1)
• UF水洗系统
原液(电泳槽液)
第二章 电泳涂装设备
半透膜
半透膜施加的压力 水、离子、低分子物质
1 确认最终的纯水量以及水质 2 调整空气吹干机(或实施)
5.吊具流挂物或输送链的掉落物
(颗粒、缩孔原因)
6.因化成淤渣粘着而造成的外观粗糙、无光泽 7. 杂离子被带入电泳槽
8. 细菌混入工业水或纯水(夏季) 粘附在车体上。
1 定期清扫
1 确认化成出槽喷淋(水平部)
1确认最终纯水量以及水质(喷淋、车体流挂水) 1 确认自来水、纯水过滤器的堵塞状况 2 确认、清扫纯水槽管道等
• 槽内涂料管理(2)电泳涂料参数
第三章 槽内涂料管理
管理项目
加热残分 (%)
检测对象
涂料固体分
计算方式
固体分/涂料量×100 ※105℃×3H
灰分(%)
PH
MEQ
(meq/100gsolid)
电导率
μS /cm
溶剂量 (%)
颜料 氢离子 酸浓度 电导度 溶剂量
灰化残分/固体分 ×100 ※150℃×1H+600 ℃ ×1H
Cond
膜厚 外观 耐缩孔 耐气孔 泳透率
是重要项目
电泳基础知识培训(1)
第四章 异常与处理
异常
1.因脱脂、化成变干形成的污垢
前处理区
处理
1.确认防止干燥用的喷淋状态
2.化成处理大理石花纹 3.从吊具上滴落的污水而造成的污垢 4.车体水干燥花纹而造成的污垢
1.调整表面流 2.使用钢板(确认批号是否变化) 1.调整吊具用的空气吹干机(方向、量) 2. 确认最终纯水量以及水质
阳离子电泳涂料电泳原理
+
树脂、颜料
酸-
H+
酸-
H+
O2 +
H+
OH-
+
H + 酸H + 酸--
OH- H + OHH-+
第一章 电泳涂料基础知识
槽液通电后,带正电的涂料粒 子向负极、带负电的酸根离子 向正极移动。
H2
同时发生水电解反应。
涂料粒子和酸根离子各自到达 正负极后,涂料粒子失去电荷 成为不溶物,析出到被涂物上。
(极液溢流、ED槽液面升高) 2. 确认裸电极是否劣化或通电不良 3.极液电导率计不良
主要是定期测量隔膜电流比率,掌握各电极的电流值
电泳基础知识培训(1)
第四章 异常与处理
异常
1.电流密度高部位的Zn气孔。
2. 槽液温度不稳定 3. UF透过量降低
ED区
(3)
处理
1.确认通电控制方法(投产时) 2. 确认电源波动率
电泳基础知识培训(1)
第一章电泳涂料基础知识
• 1-2 电泳涂装特点(1)
经济性
优点 涂装工艺自动化 涂料回收率高 涂装效率高
膜厚均匀, 减少不必要的浪费
槽液管理容易
缺点 投资成本高
电泳基础知识培训(1)
第 一章 电泳涂料基础知识
• 1-2 电泳涂装的特征(2)
操作性
优点
涂装条件容易控制和管理 膜厚均匀
处理
1.吊具和托盘的干涉 2. 定期清扫 ※ 特别要注意载移部分容易堆积
2.因残留水形成水痕(特别是水平部)
1. 确认吊具用空气吹干机 2.确认车体用空气吹干机 3. 确认因结露形成水的滴落位置 * 进入ED炉之前,原则上被涂物不能有水
· 排出UF滤液
添加剂A 1kg 提高MEQ=0.6 (醋酸中和的情况下)
添加添加剂E
· 排除UF滤液
15kg × 1罐 0.15 %提高
电泳基础知识培训(1)
• 槽内涂料管理(4)参数和异常
管理项目崁栚
加热残分 (%)
和异常关连
低的情况 涂料稳定性降低 外观粗糙 泳透性降低
灰分 (%)
凹陷 缩孔 边缘遮盖力降低
3. 来自输送链、托盘的掉落物(缩孔) 4.灰分的剧烈变化(包含N V) 5. 酸浓度MEQ急剧变化
1. 确认出槽喷雾状态 2.排气扇状态
空气流动状态。 1.定期清扫完全除去掉落物 。 2 确认吊具和托盘的干涉。 1. 调整补给装置(罐内的污垢)
调整F-1、F-2的补给比率。 1. 极液回流管道堵塞或隔膜破损
限程开关、计时器的并用。
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第四章 异常与处理
异常
1. 回收率降低
2. 来自输送链托盘的掉落物
3.因喷淋室的污染、腐蚀产生颗粒
回收水洗区(2)
处理
1. 确保、确认UF滤液透过量 2.以上喷淋量、时间(切断时间) 3.在各区设定上、下。 1.定期清扫 2. 对托盘的喷淋(压力、量) 3. 吊具和托盘的干涉 1.通过定期清扫除去
处理
1.确认喷淋压力、量、方向。 2.金属过滤器及精密过滤器的压差
回收区是ED工序颗粒主要产生地方 另外也是影响涂料带出量的地方,是最需要 留意的重要地方。
因喷淋状态而形成的碳酸铅以及涂料的凝聚 引起UF透过量降低。
置换率低的生产线,因为溶剂飞散增加,需要增加 溶剂添加量。
根据以上结果,回收喷淋应该根据被涂物,控制在最小限度 根据喷嘴种类,方向来决定个数。
涂料离子
UF滤液
往滤液槽或UF水洗槽
浓缩液
(返回电泳槽)
只有水、离子、低分子物质(溶剂等)可以通过半透膜 (UF膜) ,透过液叫UF滤液。 用UF滤液清洗车体,进行涂料回收。
电泳基础知识培训(1)
第三章 槽内涂料管理
• 槽内涂料管理(1) 涂料、涂膜组成概念图
槽内涂料 颜料
固
树脂
化
剂
溶
添中
剂
加和
剂酸
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第一章 电泳涂料基础知识
• 电泳涂装结构学(3)
电沉积现象
随着被涂物涂膜析出,涂膜电
阻也随之增大,膜厚增加速度
及电流值随之下降。
电流
电泳涂膜最先在被涂物电位最 高的表面生成,随着外板涂膜 电阻的上升,涂料粒子即在没 有生成涂膜的内板析出。
膜厚 湿膜电阻
通电时间
电泳基础知识培训(1)
缺点
必须注意高电流 含重金属(Pb,Sn等)
无重金属化
电泳基础知识培训(1)
第一章电泳涂料基础知识
·1 -3电泳涂料是怎样制造出来的?
主要形成涂膜。
树脂 带正电,移向被涂物并析出。
电 固化剂泳 颜料涂料 溶剂和树脂进行固化交联,赋予涂膜性能·物理性能
胺改性环氧树脂等
封闭异氰酸酯(BI)
和树脂一起形成涂膜,赋予防锈、着色、耐候、涂膜物理性质
泳透性高、内板防锈好
缺点
被涂物必须导电
更换涂料、颜色困难
不会发生漏涂、流痕等不良现象 必须注意杂离子、油等混入
电泳基础知识培训(1)
第一章 电泳涂料基础知识
·1-2 电泳涂装的特征(3)
优点
由于是水性涂料,几乎没有 安全 火灾危害的危险。
环境
环境负荷小 (因涂料回收率高,排放少·
溶剂挥发少、大气污染小
PH
设备腐蚀 涂膜溶解 外观粗糙
耐气孔性降低
MEQ
涂料稳定性降低
(meq/100gsolid ) 凝聚
电导率 (μS/cm)
溶剂量 (%)
外观粗糙 平滑性降低 膜厚降低 耐气孔性降低
第三章槽内涂料管理
高的情况 UF透过量降低 带出量增大 (回收率下降) 两次流挂增加 外观粗糙 无光泽 段差 涂料稳定性降低 凝聚 设备腐蚀 ·涂膜溶解 外观粗糙 耐气孔性降低 外观粗糙 耐气孔性降低