细胞生物学荧光染色实验
细胞生物学实验报告
实验一细胞的形态观察及其大小测量【实验目的】1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构；2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。
【实验用品】普通光学显微镜;目镜测微尺;镜台测微尺;载玻片;盖玻片等。
【实验材料】小白鼠肝细胞切片;鸡血红细胞;蚕豆叶片横切片;洋葱。
【实验内容和方法】(一)细胞形态观察l、动物细胞的观察（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。
注意肝细胞之间的界限、细胞的形状、细胞核的形状和数量、核仁的形状和数量、细胞质的形态构造以及细胞质和细胞核染色的区别。
（2）鸡血细胞涂片的观察：注意观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。
2、植物细胞的观察（1）取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。
（2）洋葱表皮细胞的形态观察：用镊子撕取洋葱表皮，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片。
在显微镜下观察的形态和结构。
（二）细胞的大小和测量1、测微尺的使用目镜测微尺是一块圆形玻片，中心刻有一尺，长5～10mm，分成50～100格。
每格的实际长度因不同物镜的放大率和不同镜筒长度而异。
镜台测微尺是在一块载玻片中央，用树胶封固一圆形的测微尺，长1mm或2mm，分成100格或200格，每格的实际长度0.01mm(10μm)。
当用目镜测微尺来测量细胞的大小时，必须先用镜台测微尺核实目镜测微尺每一格的长度。
方法如下：(1)卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，再旋上目镜的上透镜。
(2)将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。
调焦至能看清镜台测微尺的分度。
(3)小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线(如图所示)。
(4)记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。
按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm：123测定目镜测微尺每格实长的图解 上尺：目镜测微尺；下尺：镜台测微尺镜台测微尺的格数目镜测微尺每格的微米数= —————————×10 目镜测微尺的格数例如，图中镜台测微尺1格=目镜测微尺6格，代入公式得：目镜测微尺每格=1／6×10μm=1.66μm(5)取下镜台测微尺，换上需要测量的玻片标本，用目镜测微尺测量标本。
细胞生物学实验四 液泡系和线粒体的活体染色
细胞生物学实验四液泡系和线粒体的活体染色一、实验目的通过荧光活体染色观察液泡系和线粒体的形态结构及特点。
二、实验原理荧光活体染色法可以为我们提供高质量，高效率的细胞形态结构信息，其液泡系和线粒体都是细胞内非常重要的细胞器。
液泡系：是一种由膜包裹的小颗粒，由高度表达蛋白的外部囊泡和腺体细胞构成。
液泡系有多种类型，包括突触小泡、内分泌小体和溶酶体等，它们在细胞内部扮演着很重要的角色。
液泡系具有在荧光显微镜下能够显现的一些特定特征，如大小、形状、亮度和分布等。
活体染色可以提供很好的分辨率和细节，从而帮助我们更好地了解液泡系统的形态和功能。
线粒体：是一个直径约为1微米的双层膜结构，是细胞中的能量“发电厂”，在细胞内分解代谢物质，并生成ATP分子，以提供细胞各项生物学过程所需的能量。
可见线粒体可以帮助我们了解线粒体的数量、大小、形状和位置等特征，这有助于我们了解其功能和代谢状态。
三、实验材料激光共焦显微镜，激光荧光探针，放置在组织玻片上的细胞，PBS磷缓冲液，人工合成影响线粒体功能小分子等药物。
四、实验步骤1. 将细胞悬液滴在组织玻片上。
2. 添加荧光探针，荧光探针可以帮助我们区分液泡系和线粒体。
3. 给细胞注射小分子化合物，如人工合成影响线粒体功能小分子等，以研究药物对细胞器的影响。
4. 用激光共焦显微镜观察荧光探针和小分子化合物的荧光信号。
5. 分析显示出的细胞器信息，记录液泡和线粒体的数量、大小、形状和位置等特征。
五、实验注意事项1. 需要小心操作激光共焦显微镜，以避免损坏昂贵的设备或可能对人体存在危害的激光。
2. 荧光探针和小分子化合物需要在适当的浓度下添加，以避免对细胞的生长和存活产生不必要的影响。
3. 细胞的准确选择和应用荧光信号分析需要经验和技能支持，因此可能需要学习其他课程或培训活动，以便更好地完成任务。
六、实验结果正确的观察、检测和记录结果是实验的关键要求。
液泡系和线粒体的活体染色结果应包括液泡和线粒体的数量、亮度、位置和其它相关特征。
细胞实验细胞骨架组分的荧光染色观察
细胞生物学实验细胞骨架组分的荧光染色观察一、实验目的1、掌握细胞骨架的显示方法2、掌握荧光显微镜的使用方法3、了解荧光显微镜下细胞骨架的基本形态结构4、了解荧光探针Hoechst 33342（Ho.33324）与细胞成分的结合特性和光谱特性二、实验原理1、微丝股价是一种高度动态的三维网状结构，与细胞的多种生理活动如细胞运动、胞质分离、细胞器的定位、细胞内物质的运输、吞噬作用、细胞极性生长等密切相关。
2、鬼笔环肽(phalloidin) 是从一种毒性菇类中分离的剧毒生物碱，它同细胞松弛素的作用相反, 只与聚合的微丝结合, 而不与肌动蛋白单体分子结合。
它同聚合的微丝结合后, 抑制了微丝的解体, 因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡。
3、由于鬼笔环肽非常特异地结合并稳定聚合态肌动蛋白, 因而对肌动蛋白的动态平衡造成严重影响. 此外, 较高浓度的鬼笔环肽对细胞有毒害作用. 因此, 用鬼笔环肽标记微丝并不是用于研究活体细胞的理想方法。
三、实验材料1、材料：CHO（中国仓鼠卵巢细胞）2、试剂：（1）PEM：50mM pipes (pH6.9), 5mM EGTA, 5mM MgSO4, 0.225M 山梨醇（2）0.5% Triton X-100溶于PEM缓冲液中。
（3）4%多聚甲醛溶于PEM缓冲液中。
四、实验步骤1、取出上次实验爬片于小盖玻片上的CHO细胞；2、取出培养有CHO细胞的盖片，于小平皿中37℃预温PEM洗3次(每次1mL)；3、37℃预温4%多聚甲醛固定细胞15min (1mL)4、37℃预温PEM洗3次5、加入0.5%Triton X-100处理约10min(1mL)；6、取一洁净的载玻片，按照其的大小在其上放置一条封口膜，在封口膜上滴加20μL 60nM Alex -phalloidin 10L湿盒中室温染色30min；7、在parafilm 膜上加PEM ，待盖玻片被冲起后，再轻轻揭下盖玻片；8、37℃预温PEM洗数3次；9、滴加10L Ho.33342复染色；10、荧光镜下观察。
细胞生物学实验技术
细胞生物学实验技术细胞生物学实验技术是现代生命科学研究中的关键环节，它为研究人员提供了深入了解细胞结构、功能和相互作用的途径。
本文将重点介绍一些常见的细胞生物学实验技术，包括细胞培养、染色技术、分离技术和显微镜观察等。
一、细胞培养技术细胞培养是一项基础性技术，它可以将细胞从体内取出并在适当的培养基中进行增殖和维持。
细胞培养的首要任务是提供适当的培养基，其中含有必需的营养物质、生长因子和适当的温度、湿度和气体条件。
细胞培养技术广泛应用于细胞生物学实验、组织工程、药物研发等领域。
二、染色技术染色技术是细胞生物学实验中常用的方法之一，它使研究者能够对细胞内各种结构和分子进行可视化观察。
常用的染色方法包括荧光染色、酶标染色和核酸染色等。
荧光染色利用荧光标记的抗体或染料，可使特定的细胞结构或分子在显微镜下发出荧光信号，从而观察其位置和表达水平。
酶标染色则通过酶与底物的反应，使细胞或组织显示出颜色等信号。
核酸染色则利用特定染料与细胞核酸结合，以观察DNA或RNA的分布情况。
三、分离技术分离技术在细胞生物学实验中具有重要作用，它可以将不同类型的细胞或细胞组分进行分离和纯化。
常用的分离技术包括细胞离心、流式细胞术和免疫磁珠分离等。
细胞离心是通过离心机将混合细胞悬液分离成上清液和沉淀，从而获得纯化的特定类型细胞。
流式细胞术则通过流式细胞仪测量细胞的大小、形态和表面标记物，从而实现对细胞的高通量分离和分析。
免疫磁珠分离则利用特定抗体结合在磁珠表面，以实现对需要纯化的细胞或细胞组分的选择性捕获。
四、显微镜观察显微镜观察是细胞生物学实验的重要手段，它使研究者能够观察到细胞内不同的结构和过程。
传统光学显微镜可实现对细胞形态和部分细胞器的观察，但其分辨率有限。
近年来，随着超分辨显微镜技术的发展，研究者们能够突破传统光学显微镜的分辨率极限，实现对亚细胞结构和分子过程的观察。
总结细胞生物学实验技术在现代生命科学研究中发挥着至关重要的作用。
细胞生物学的基本实验技术和方法
细胞生物学的基本实验技术和方法细胞生物学是现代生命科学的一个重要分支，研究细胞的结构、功能、遗传和分子机制，对于理解生命的本质、疾病的发生和治疗具有重大意义。
本文将介绍一些细胞生物学的基本实验技术和方法，包括细胞培养、荧光显微镜、免疫染色、蛋白质电泳和PCR等。
一、细胞培养细胞培养是细胞生物学中最基本的实验技术之一，它是将细胞放入含有营养物质、生长因子和抗生素等的培养基中，使其在适当温度、湿度和CO2浓度下生长、增殖、分化或转化的过程。
细胞培养的方法非常丰富，可以根据细胞来源、类型、培养条件等进行分类，常用的有原代培养、细胞系、肿瘤细胞和原生动物等。
细胞培养可以用于研究细胞形态、生长特性、细胞周期、信号转导和基因调控等方面，也是制备疫苗、生产蛋白质和细胞治疗等方面的基础技术。
二、荧光显微镜荧光显微镜是一种利用荧光探针和激光光源来照射样品并检测荧光信号的显微镜，在细胞生物学中起着至关重要的作用。
荧光探针可以有机会或无机盐的形式存在，它们可以与细胞的生物分子如蛋白质、核酸等结合并发生光学反应，发射出荧光信号。
荧光显微镜具有高分辨率、高灵敏度、多重标记和实时成像等优点，可以用于研究细胞形态、结构、功能、互作和代谢等方面，还可以用于细胞追踪、基因表达、蛋白质定位和药物筛选等方面。
三、免疫染色免疫染色是一种利用抗体与特定抗原相结合来检测或定位生物分子的技术，在细胞生物学和免疫学中广泛应用。
抗体是由 B 细胞产生的一类蛋白质，它可以通过特异性与异物（如细胞表面抗原、蛋白质、核酸等）结合，从而实现对它们的检测和定位。
免疫染色有直接和间接两种方法，前者是将荧光染料或酶标记直接连接在一级抗体上，后者是将荧光染料或酶标记连接到二级抗体上，再与一级抗体结合来增强信号。
免疫染色可以用于鉴定细胞类型、检测蛋白质表达、定位细胞器、分析信号通路和检测抗体反应等方面。
四、蛋白质电泳蛋白质电泳是一种利用电场和凝胶电泳技术来分离和检测蛋白质的方法，在细胞生物学和生物化学中起着重要作用。
细胞生物学实验材料
实验一荧光显微镜的原理和使用实验二叶绿体的分离与荧光观察实验三线粒体的活体染色与观察实验四细胞膜的通透性实验五 DNA的细胞化学——Feulgen反应实验六植物染色体标本的制备和观察实验七细胞计数实验八植物细胞骨架的光学显微镜观察实验九植物原生质体的分离和活性鉴定实验十环境因素诱变染色体改组的观察实验一荧光显微镜的原理和使用一、实验目的了解荧光显微镜的构造及其维护方法；掌握荧光显微镜的使用方法和使用中的注意事项。
二、实验原理荧光显微镜是选择由高压汞灯或类似光源发出一定波长的激发光，激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后，观察细胞某种特异成分的分布状态的显微镜。
与普通光学显微镜一样，荧光显微镜也有物镜、目镜、调焦装置、光源、聚光器、载物台、镜身等组成部分。
所不同的是，荧光显微镜增加了激发光源和滤片系统，它投射到样品上的是特定波长的激发光而不是普通的可见光。
在激发光的作用下，样品中的荧光物质产生图1荧光显微镜发射光（即荧光）。
因此，荧光显微镜观察到的是样品中能产生荧光的部分所呈现的荧光映象，普通光学显微镜则是整个样品的可见光透射和折射影像。
某些物质在—定短波长的光（如紫外光）的照射下吸收光能进入激发态，从激发态回到基态时，就能在极短的时间内放射出比照射光波长更长的光(如可见光)，这种光就称为荧光。
若停止供能荧光现象立即停止。
有些生物体内的物质受激发光照射后直接发出荧光，称为自发荧光（或直接荧光），如叶绿素的火红色荧光和水质素的黄色荧光等。
有的生物材料本身不发荧光，但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光，这种荧光称为次生荧光（或间接荧光），如叶绿体吸附吖啶橙后可发桔红色荧光。
利用荧光显微镜对可发荧光物质进行检测时，将受到许多因素的影响，如温度、光、淬灭剂等。
因此在荧光观察时应抓紧时间，有必要时立即拍照。
三、实验用品荧光显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、解剖刀、0.01%吖啶橙染色液（acridine orange）、蒸馏水、水葫芦叶片四、实验内容与方法（一）荧光显微镜的构造1、基本装置荧光显微镜的基本装置是由普通光学显微镜加上一些附件（如荧光光源、激发滤片、二向色镜和阻断滤片等）的基础上组成的。
细胞生物学研究方法
细胞生物学研究方法细胞生物学是研究细胞结构、功能和行为的科学学科。
细胞是生物体的基本组成单位，研究细胞生物学可以帮助我们揭示生物体内部的复杂机制，并对疾病的发生和治疗提供重要的指导。
在细胞生物学的研究中，有许多重要的实验方法和技术。
下面将介绍几种主要的细胞生物学研究方法。
1. 细胞培养：细胞培养是一种最基本的细胞生物学实验方法。
它通过在培养基中提供适当的营养物质和条件，使细胞在体外生长和繁殖。
细胞培养可以用于研究细胞的生理功能、生长和分化等过程。
2. 细胞染色：细胞染色是观察和研究细胞结构和组成的重要方法。
常用的细胞染色方法包括荧光染色、核酸染色、蛋白质染色等。
例如，核酸染色可以使用荧光染料如荧光素染色DNA，观察细胞的染色体结构和DNA复制过程。
3. 细胞分离与纯化：细胞分离与纯化是将混合细胞群体中的细胞单独分离出来并获得纯净的细胞群体的方法。
常用的细胞分离与纯化方法包括离心、差速离心、密度梯度离心等。
这些方法可以帮助研究者获得纯净的细胞样本，便于后续的分析和实验。
4. 细胞显微镜观察：细胞显微镜观察是研究细胞结构和功能的主要方法之一。
通过使用显微镜，研究者可以观察到细胞的内部结构和细胞器。
随着光学显微镜和电子显微镜技术的发展，观察细胞的分辨率和细节越来越高。
5. 免疫学技术：免疫学技术在细胞生物学研究中扮演了重要的角色。
常用的免疫学技术包括免疫组织化学、流式细胞术、免疫沉淀等。
这些技术可以用来检测和定量细胞表面标记物、细胞内蛋白质和核酸等，以研究细胞的功能和代谢过程。
6. 分子生物学技术：分子生物学技术是研究细胞基因表达和遗传信息的重要工具。
常用的分子生物学技术包括PCR、蛋白质电泳、蛋白质质谱等。
这些技术可以帮助研究者检测和分析细胞中的DNA、RNA和蛋白质等分子成分，以了解细胞基因表达和调控的机制。
7. 基因编辑技术：基因编辑技术如CRISPR-Cas9已经成为细胞生物学研究中的重要工具。
实验二 生物样品的荧光观察
实验二生物样品的荧光观察一、实验目的1、初掌握荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜的结构、原理、使用方法及其在细胞生物学研究中的应用。
2、掌握生物材料的荧光染色和活体荧光蛋白的观察方法。
3、了解激光共聚焦的原理。
二、实验原理1、某些物质经短波光照射后，分子被激活，吸收能量后呈激发态。
其能量除部分转换为热量外，相当一部分则以波长较长的光能辐射出来，这种波长长于激发光的可见光称为荧光。
细胞内的某些物质经过短波光照射后，可以发出自发荧光。
在生物学研究中，能将发荧光的有机化合物-荧光染料与特定的细胞组分相结合，通过激发后产生的荧光对细胞组分进行定性和定位。
2、生物样品的荧光观察采用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
荧光显微镜以波长较短的光为光源，照射被检样品，激发被检物品内的荧光物质发出可见的荧光，通过物镜和目镜放大成像。
激光共聚焦显微镜也是来观察样品中荧光分布状况的。
激光共聚焦显微镜是以激光为光源，在某一瞬间只用很小一部分光照明，通过检测器的一个小孔或裂缝后成像，保证只有来自该焦平面的光成像，而来自焦平面外的散光则被小孔和裂缝挡住，成像异常清晰。
此外，激光共聚焦显微镜可以在同一样品的不同焦平面进行扫描得到不同焦平面的图像，然后通过计算机重构出样品的三维结构。
3、本实验中微丝的荧光观察采用荧光素标记的鬼笔环肽（phalloidin），鬼笔环肽可以专一的结合在聚合状态的肌动蛋白丝上，起到稳定微丝的作用。
细胞核的观察用DAPI（diamidino-2-phenylindole）染色。
DAPI 能与DNA双螺旋的凹槽部分相互作用，从而与DNA双链紧密结合。
结合后产生的荧光基团的吸收峰358nm，而散射峰是461nm。
而植物细胞的花粉管、筛板和胞间连丝含有胼胝质成分，经苯胺蓝染色后，用紫外光激发，可以发出黄绿色荧光。
4、激光共聚焦扫描显微镜（laser scanning confocal microscope，LSCM）原理：用激光作扫描光源，逐点、逐行、逐面快速扫描成像，扫描的激光与荧光收集共用一个物镜，物镜的焦点即扫描激光的聚焦点，也是瞬时成像的物点。
细胞生物学荧光染色实验.
二、实验原理
荧光显微技术是利用短波光照射被射物质，以激发其发射荧光而 在荧光显微镜下可以检视的方法。 荧光又可分为：自发荧光和次生荧光。自发荧光是指有些生物体 受到短波光照射后，直接发出的荧光。如经紫外光照射后，叶绿体 发出的红色荧光；木质素发出的黄色荧光等。次生荧光是指有些生 物材料受到短波光照射后并不发光，但当它吸附荧光染料后，也同 样产生荧光，这种荧光也称间接荧光。
1．取少许新鲜紫鸭趾草花粉或蚕豆 表皮放在玻片上，加二丙酸酯荧光素溶 液一滴，5-10分钟后，在荧光显微镜下 观察，时间不宜太长，以免细胞逐渐死 亡，影响效果 。
2．若着染是悬浮细胞，可将上述染色液数滴直接加 入细胞培养液5分钟后，可离心收集。再用无细胞和 无染料的培养液洗二次，即可收集观察。上述染过 的细胞可保存在4℃左右的冰箱中，直到细胞死亡前 故可观察。
盖玻片，在荧光显微镜下观察原生质体脱壁是否完 全，蓝紫光激发观察。
(二) DNA分布的观察 取洋葱内表皮细胞(1cm2)置于载玻片，以0.0l％吖啶橙 染色5分钟，生理盐水冲洗一次，加盖玻片，荧光显微镜下 蓝光激发观察。
（三) 蛋白质分布的观察 取洋葱内表皮细胞(1cm2)置于载玻片，以 0.02％异硫氰酯荧光素染色5—10分钟，生理盐 水冲洗一次，加盖玻片，荧光显微镜下蓝光激发 观察。
四、实验方法
(一 ) 细胞二丙酸酯荧光素分解酶的活性及细胞活力的测 定二丙酸酯荧光素是非荧光性的亲酯性化合物，很容易进 入细胞活力较强的细胞内，由于细胞内有较强的活性酯酶 而将二丙酸酯荧光素中的荧光素分解出来，从而在荧光显 微镜下发出了强烈的黄绿荧光，相反活力较弱的细胞，由 于酯酶的含量低，表现荧光较弱，而死亡的细胞，由于酯 酶活性丧失，不能分解二丙酸酯荧光素，而完全没有荧光， 具体方法如下：
细胞生物学实验汇总
细胞生物学实验汇总1.细胞培养实验：细胞培养是一种将细胞在人造环境下生长和繁殖的方法。
这种实验可以用来研究细胞的生长和增殖，观察细胞的形态变化，评估细胞的功能和活性等。
培养的细胞可以来自动物组织、植物组织或微生物等。
2.免疫荧光染色实验：这种实验可以用来观察细胞内特定的蛋白质、细胞器或DNA分布。
研究人员可以利用荧光染料或标记的抗体与目标分子结合，在显微镜下观察细胞瞬态或持久性标记。
这种实验可以帮助我们研究细胞的结构和功能，探索细胞中不同分子的相互作用。
3.转染实验：转染是将外源DNA或RNA引入细胞内的过程。
这种实验可以用来研究基因在细胞中的功能，或将外源基因导入到细胞中来改变其表达。
常见的转染方法包括酵母转染、细菌转染、质粒转染和病毒转染等。
转染实验可以帮助我们了解基因调控机制和研究细胞行为的变化。
4. 测定细胞增殖实验：这种实验可以用来测定细胞增殖速度和细胞生长的影响因素。
常见的细胞增殖实验包括MTT（3-（4,5-二甲基-2-苯唑基）-2,5-二苯基四氮唑）实验、BrdU（5-溴脱氧尿苷）实验等。
这些实验可以帮助我们了解细胞增殖的分子机制和影响细胞增殖的因素。
5.测定细胞凋亡实验：细胞凋亡是一种编程性死亡的过程，是维持细胞内稳态的重要机制。
测定细胞凋亡的实验可以帮助我们研究细胞死亡的调控机制，并评估不同因素对细胞凋亡的影响。
常见的细胞凋亡检测方法包括DNA损伤、细胞膜破裂和细胞色素释放等。
6.蛋白质分离和电泳实验：这种实验可以用来分离和鉴定细胞中的蛋白质。
常见的蛋白质分离方法包括凝胶电泳、二维凝胶电泳和西方印迹等。
这些实验可以帮助我们研究细胞中不同蛋白质的表达和功能，了解蛋白质调控的机制。
7. 实时荧光定量PCR（polymerase chain reaction）实验：PCR是一种在体外合成DNA的技术。
实时荧光定量PCR可以用来定量检测靶基因在细胞中的表达水平。
这种实验可以帮助我们研究细胞基因表达的调控机制和研究基因在不同生物学过程中的功能。
brdu细胞染色实验步骤
brdu细胞染色实验步骤引言：brdu细胞染色实验是一种常用的细胞生物学实验方法，用于研究细胞的DNA合成与细胞增殖。
本文将介绍brdu细胞染色实验的详细步骤。
一、实验前的准备工作1. 购买所需试剂：brdu、PBS缓冲液、甲醛、Tween-20、抗brdu 抗体、二抗（如荧光标记的二抗）、DAPI（荧光染料）等。
确保试剂的纯度和有效期。
2. 准备所需器材：离心管、离心机、显微镜、培养皿、移液器、滤纸等。
确保器材的清洁和完好。
二、细胞处理1. 培养细胞：将所需细胞培养在含有适宜培养基的培养皿中，以达到合适的细胞密度。
2. 处理细胞：根据实验设计，将细胞分为实验组和对照组。
实验组细胞处理brdu荧光标记溶液，对照组细胞处理无brdu的溶液。
三、brdu处理1. 添加brdu：将brdu溶液加入培养基中，使浓度达到实验要求。
一般浓度为10-100 μM，可根据实验需要进行调整。
2. 处理时间：将细胞培养在含有brdu的培养基中，根据实验要求处理适当的时间。
一般为4-48小时，也可根据实验需要进行调整。
四、细胞固定1. 收集细胞：将处理好的细胞用PBS缓冲液洗涤1-2次，以去除培养基中的brdu。
2. 细胞固定：将细胞用4%甲醛溶液进行固定，固定时间一般为10-30分钟。
固定后用PBS缓冲液洗涤1-2次。
五、细胞膜穿透1. 孔洞形成：用0.2% Triton X-100溶液处理细胞，使其膜变得透明。
处理时间一般为10-20分钟。
2. 洗涤：用PBS缓冲液洗涤1-2次。
六、抗体染色1. 阻断：用5%牛血清白蛋白（BSA）或5%鱼胶片阻断非特异性结合位点，防止假阳性信号。
2. 抗体处理：将抗brdu抗体加入含有1% BSA的PBS缓冲液中，按照规定的抗体浓度处理细胞。
处理时间一般为1-2小时。
3. 洗涤：用PBS缓冲液洗涤3-4次，每次洗涤时间为5分钟。
七、荧光标记1. 二抗处理：将荧光标记的二抗加入含有1% BSA的PBS缓冲液中，按照规定的浓度处理细胞。
细胞实验细胞骨架组分的荧光染色观察
细胞生物学实验细胞骨架组分的荧光染色观察一、实验目的1、掌握细胞骨架的显示方法2、掌握荧光显微镜的使用方法3、了解荧光显微镜下细胞骨架的基本形态结构4、了解荧光探针Hoechst 33342（Ho.33324）与细胞成分的结合特性和光谱特性二、实验原理1、微丝股价是一种高度动态的三维网状结构，与细胞的多种生理活动如细胞运动、胞质分离、细胞器的定位、细胞内物质的运输、吞噬作用、细胞极性生长等密切相关。
2、鬼笔环肽(phalloidin) 是从一种毒性菇类中分离的剧毒生物碱，它同细胞松弛素的作用相反, 只与聚合的微丝结合, 而不与肌动蛋白单体分子结合。
它同聚合的微丝结合后, 抑制了微丝的解体, 因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡。
3、由于鬼笔环肽非常特异地结合并稳定聚合态肌动蛋白, 因而对肌动蛋白的动态平衡造成严重影响. 此外, 较高浓度的鬼笔环肽对细胞有毒害作用. 因此, 用鬼笔环肽标记微丝并不是用于研究活体细胞的理想方法。
三、实验材料1、材料：CHO（中国仓鼠卵巢细胞）2、试剂：（1）PEM：50mM pipes (pH6.9), 5mM EGTA, 5mM MgSO4, 0.225M 山梨醇（2）0.5% Triton X-100溶于PEM缓冲液中。
（3）4%多聚甲醛溶于PEM缓冲液中。
四、实验步骤1、取出上次实验爬片于小盖玻片上的CHO细胞；2、取出培养有CHO细胞的盖片，于小平皿中37℃预温PEM洗3次(每次1mL)；3、37℃预温4%多聚甲醛固定细胞15min (1mL)4、37℃预温PEM洗3次5、加入0.5%Triton X-100处理约10min(1mL)；6、取一洁净的载玻片，按照其的大小在其上放置一条封口膜，在封口膜上滴加20μL 60nM Alex -phalloidin 10L湿盒中室温染色30min；7、在parafilm 膜上加PEM ，待盖玻片被冲起后，再轻轻揭下盖玻片；8、37℃预温PEM洗数3次；9、滴加10L Ho.33342复染色；10、荧光镜下观察。
线粒体荧光染实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解线粒体在细胞中的分布和形态；2. 掌握线粒体荧光染色的原理和方法；3. 观察线粒体在细胞中的动态变化。
二、实验原理线粒体是细胞内的能量工厂，其主要功能是通过氧化磷酸化产生能量。
线粒体荧光染色是一种常用的细胞生物学实验技术，通过特异性染色剂与线粒体结合，使线粒体在荧光显微镜下发出荧光，从而实现对线粒体的观察。
三、实验材料1. 细胞样本：小鼠成纤维细胞；2. 荧光染料：线粒体荧光染料（例如，MitoTracker Green FM、Mitochondria Red FM等）；3. 实验器材：荧光显微镜、离心管、移液器、吸管、培养皿、细胞培养箱等。
四、实验步骤1. 细胞培养：将小鼠成纤维细胞接种于培养皿中，置于细胞培养箱中培养至对数生长期。
2. 线粒体荧光染色：取对数生长期的细胞，用磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）洗涤2次，弃去上清液。
3. 加入线粒体荧光染料：向细胞中加入适量的线粒体荧光染料，轻轻振荡均匀，使染料充分与细胞结合。
4. 遮光处理：将细胞置于避光环境中，静置30分钟，使染料与线粒体充分结合。
5. 洗涤：用PBS洗涤细胞2次，弃去上清液。
6. 荧光显微镜观察：将细胞置于荧光显微镜下，使用适当波长的激发光和发射光，观察线粒体的荧光。
7. 数据采集：使用图像采集系统采集线粒体的荧光图像，并进行统计分析。
1. 在荧光显微镜下，观察到细胞内的线粒体呈绿色荧光，表明线粒体已被成功染色。
2. 通过图像采集系统，得到线粒体的荧光图像，可以进行线粒体形态、分布、数量的统计分析。
3. 观察线粒体在细胞中的动态变化，发现线粒体在细胞内不断运动，具有一定的流动性。
六、实验讨论1. 线粒体荧光染色是一种常用的细胞生物学实验技术，通过特异性染色剂与线粒体结合，使线粒体在荧光显微镜下发出荧光，从而实现对线粒体的观察。
2. 本实验中，使用线粒体荧光染料对小鼠成纤维细胞进行染色，成功观察到细胞内的线粒体。
细胞生物学实验报告_2
细胞生物学实验报告叶绿体的分离、纯化与荧光观察【实验目的】⒈通过植物细胞叶绿体的分离与纯化, 了解细胞器分离与纯化的原理和方法。
⒉熟悉荧光显微镜的使用方法, 观察叶绿体的自发荧光和间接荧光。
【实验原理】⒈叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器, 叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器, 光合作用就是在叶绿体中进行。
由于具有这一重要功能, 所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。
叶绿体是植物细胞中较大的一种的细胞器, 利用低速离心即可分离集中进行各种研究。
叶绿体结构模式图组织细胞的破碎方法很多, 包括机械法（研磨法、匀浆法、胶体磨法）和非机械法（超声波法、有机溶法、溶胀法、酶解法）。
除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外, 对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化, 都需要事先将细胞和组织破碎, 使生物大分子充分释放到溶液中, 并不丢失生物活性。
不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织, 其细胞破碎的难易不一, 使用的方法也不相同。
⒉细胞器分离的过程包括两个主要阶段：碎细胞和细胞组分的分离。
将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行离心, 差速离心和密度梯度离心是分离亚细胞组分的常用方法。
⑴差速离心①原理: 一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度, 也同离心力以及悬浮介质的粘度有关。
在一给定的离心场中, 同一时间内, 密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。
依次增加离心力和离心时间, 就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部, 分批收集即可获得各种亚细胞组分。
②事例: 叶绿体的分离应在等渗溶液（0.35mol/L 氯化钠或 0.4mol/L 蔗糖溶液）中进行, 以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤。
将匀浆液在1000r/min 的条件下离心 2min, 以去除其中的组织残渣和一些未被破碎的完整细胞。
然后, 在 3000r/min 的条件下离心 5min, 即可获得沉淀的叶绿体（混有部分细胞核）。
细胞染色实验的收获与思考
细胞染色实验的收获与思考引言细胞染色实验是一种重要的实验方法，通过染色剂对细胞进行染色，能够显示细胞内各种结构与分子的位置和形态，进而帮助我们研究细胞的生理、生化和结构特点。
本文将深入探讨细胞染色实验的收获与思考。
细胞染色实验的基本原理细胞染色实验的基本原理是利用染色剂与细胞内特定成分的亲和性，使其着色，进而通过显微镜观察，并根据着色情况做出相关结论。
常用的细胞染色实验方法包括荧光染色、DNA染色、核仁染色等。
荧光染色荧光染色是利用荧光染料对细胞进行标记，通过荧光显微镜观察标记后的细胞。
这种方法在细胞生物学研究中得到广泛应用，可以实现对细胞内蛋白质、细胞器、细胞骨架等分子的定位与观察。
DNA染色DNA染色是利用染料对细胞内DNA进行染色的方法。
通过DNA染色实验，我们可以观察细胞的有丝分裂过程、核型的变化、染色体异常等。
常用的DNA染色剂有乙锭溴、草酰绿等。
核仁染色核仁染色是利用染色剂对细胞内核仁进行染色，从而观察核仁的位置和形态。
核仁染色实验可用于研究核仁在细胞内的功能以及与细胞发育、分化等的关系。
常用的核仁染色剂有AgNOR、Giemsa染料等。
细胞染色实验的收获细胞染色实验在细胞生物学研究中具有重要价值，可以为科研人员提供丰富的信息和数据，从而使研究更加深入和全面。
获取细胞结构信息细胞染色实验能够直观地显示细胞内的结构和形态，包括细胞器、蛋白质定位等。
通过观察染色后的细胞，我们可以获取细胞的大小、形状、分裂情况等信息，进一步了解细胞的结构特点。
分析细胞功能和代谢状态细胞染色实验可以通过染色剂选择性地标记细胞内的特定分子或结构，从而帮助我们研究细胞的功能和代谢状态。
比如，荧光染色可用于观察细胞内蛋白质的定位与表达水平，DNA染色可用于分析细胞的有丝分裂过程，核仁染色可用于研究核仁与细胞分化的关系。
发现细胞异常细胞染色实验在研究细胞异常情况时具有重要作用。
通过染色剂的染色效果，我们可以观察到细胞染色体的数目、形态等异常情况，从而对细胞的遗传异常进行分析和诊断。
细胞生物学实验实验报告
细胞生物学实验实验报告nThis XXX。
cytochemistry。
XXX。
cell culture and analysis。
cell cycle analysis。
cell n and analysis。
XXX to study the structure。
n。
and us laws of life of animal and plant cells.Chapter 1 Overview1.1 XXXXXX and structure of cells。
study cell logical processes。
conduct cell culture and analysis。
and study cell XXX.Chapter 2 Experimental PrinciplesIn this experiment。
XXX cells。
XXX。
cytochemistry。
XXX。
cell culture and analysis。
cell cycle analysis。
cell n and analysis。
XXX processes。
cell culture and analysis。
and cell XXX.2.1 实验流程和应用实验方法在本研究中，我们使用了多种实验方法来研究细胞的生理和遗传学特性。
其中，细胞器活体染色和显微观察是我们最常用的方法之一。
我们使用荧光染料来标记不同的细胞器，如线粒体、内质网和高尔基体，并使用显微镜观察它们在细胞中的位置和分布。
此外，我们还观察了细胞骨架的形态和组成，并使用冷冻保存技术来保存细胞的样本。
2.2 细胞器活体染色与显微观察为了观察细胞器在活体细胞中的分布和位置，我们使用了多种荧光染料。
例如，我们使用MitoTracker Red来标记线粒体，使用ER-Tracker Green来标记内质网，使用BODIPY FL C5-ceramide来标记高尔基体。
细胞生物学实验②荧光显微镜——生物样品的荧光观察
细胞生物学实验②荧光显微镜——生物样品的荧光观察荧光显微镜是一种专门用于观察荧光的显微镜。
它利用荧光标记的生物样品在特定波长的光激发下发出荧光信号，从而能够观察和分析生物样品的细胞结构和功能。
在细胞生物学研究中，荧光显微镜被广泛应用于观察细胞内的各种分子和结构，如蛋白质、核酸、细胞器、细胞骨架和细胞分裂等。
为了能够进行荧光观察，首先需要对生物样品进行荧光标记。
荧光标记是通过将荧光染料或荧光蛋白质与待观察的分子或细胞结构结合，从而使它们发出荧光信号。
荧光染料通常有多种颜色可供选择，可以根据需要选择适合的染料。
在进行荧光显微镜观察前，还需要对生物样品进行染色。
荧光染料通常需要在生物样品中固定和渗透处理，以确保荧光染料可以进入到被观察物质内部，并发出强而清晰的荧光信号。
在固定和渗透处理过程中，需要使用一些生物化学试剂，如缓冲液和渗透剂，以保持细胞的形状和结构完整性。
在进行荧光显微镜观察时，需要调整荧光显微镜的参数。
荧光显微镜通常具有多种滤光片和激发/发射波长选择器，可以选择适合的激发波长和发射波长来观察荧光信号。
此外，还可以调整显微镜的焦距和光源强度，以获得清晰的荧光图像。
荧光显微镜观察的结果可以通过数码相机或荧光显微镜的图像获取系统进行记录和保存。
利用图像处理软件，可以对荧光图像进行增强、合成和分析。
例如，可以对荧光信号进行颜色反转、亮度调整和合并，以获得更清晰和美观的图像。
此外，还可以进行荧光信号的定量分析，如荧光强度的测量和荧光分布的统计。
荧光显微镜在细胞生物学实验中具有广泛的应用。
例如，在细胞分子定位研究中，可以利用荧光显微镜观察和分析蛋白质在细胞内的分布和运动。
在免疫细胞化学研究中，可以利用荧光染色技术观察和分析细胞表面蛋白的表达和定位。
在细胞功能研究中，可以通过观察荧光染料的变化来研究细胞的代谢、运动和增殖过程。
总之，荧光显微镜是现代细胞生物学研究中不可或缺的工具之一、它能够提供高分辨率和高灵敏度的荧光观察，从而帮助研究人员深入了解细胞内的结构和功能。
细胞生物学实验②荧光显微镜——生物样品的荧光观察
生物样品的荧光观察生物122 祝洪晨1202040220目的：①初步掌握荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜的结构、原理使用方法及其在细胞生物学研究中的应用。
②掌握生物材料的荧光染色和活体荧光蛋白的观察方法。
原理：本实验中微丝的荧光观察采用荧光素标记的鬼笔环肽(phalloidin)，鬼笔环肽专一的结合聚合状态的肌动蛋白丝上，起到稳定微丝的作用。
花粉细胞核的观察采用DAPI染色。
DAPI(4，6—联眯—2—苯基吲哚)是一种荧光染料，它与DNA双螺旋的凹槽部分相互作用，从而与DNA双链紧密结合，结合后产生的荧光基团的吸收峰是358nm。
植物细胞的花粉管、筛板、和胞间连丝含有胼胝体成分，其经过苯胺蓝染色后，用紫外线激发，可发出黄绿色荧光。
实验内容及结果（一）荧光标记观察烟草花粉管内微丝骨架的分布1）烟花新鲜花粉萌发液已由教师完成。
2）固定：取200ul萌发液放入离心管中，静置沉降，3000rpm离心30秒，吸出培养基，加入200ul 3.6%多聚甲醛（50 mmol/L Pipes配制）固定20分钟。
再吸出固定液，用Pipes 缓冲液清洗三次，每次5分钟。
3）染色:3000rpm离心1分钟，吸净缓冲液，加入100nm Alexa Fluo 488 phalloidin 50ul，37度染色20分钟，洗去染液，加入50ul缓冲液，吸取10ul直接进行封片。
4）荧光显微镜观察（激发光波长：蓝光激发，检测的发射光波长:510-530nm）5）观察结果如下表所示：花粉管微丝呈荧光绿（二）DAPI染色观察花粉细胞核1）DAPI 染色液的配置：2）制作装片：用镊子夹住拟南芥的花，将花粉粘在载玻片上，加入20ul DAPI染色液染液，3-5分钟后，临时封片。
3）激发光：紫外光,发射光461nm。
花粉(白色箭头所指)内有2个生殖核(1)和1个营养核(2)（三）苯胺蓝染色观察豌豆下表皮胞间连丝撕取蚕豆叶片表皮，放在载玻片上，加入20ul 0.1% 苯胺蓝染色3-5分钟，紫外激发光下镜检。
核酸荧光染色技术在细胞生物学研究中的应用
核酸荧光染色技术在细胞生物学研究中的应用细胞是生命的基本单位，对于细胞内的生物过程了解越多，对于整个生命的了解就越深入。
细胞的结构、功能和代谢过程等都是细胞生物学的研究范畴。
在细胞生物学研究中，核酸荧光染色技术是一种非常常用的技术手段之一。
一、核酸的结构与功能核酸是构成生命体的基础物质之一。
DNA和RNA是两种重要的核酸。
DNA是脱氧核糖核酸，包含脱氧核糖和磷酸基团，通过氢键连接两条互补的核苷酸链。
RNA是核糖核酸，它由核糖和磷酸基团构成，是一条单链的核苷酸。
DNA是生物体内存储遗传信息的主要分子，RNA则负责将DNA存储的信息转录成蛋白质。
DNA和RNA两者之间的相互作用可以使一个生物体的遗传信息得以流通和传递。
二、核酸荧光染色技术的概念核酸荧光染色技术是指使用荧光染料标记核酸的方法。
通过核酸荧光染色技术，可以快速、准确地检测和区分DNA或RNA的位置和形态，进而揭示细胞化学、结构和功能等方面的信息。
荧光染料可与DNA或RNA结合，发出荧光颜色并可以激活图像。
分子荧光显微镜和流式细胞术等成像技术，以及扫描电镜和电子显微镜技术可以帮助研究人员观察花粉、胚胎、细胞、细胞细节和组织中的核酸染色体。
三、1. 发现细胞核酸含量和分布核酸荧光染色技术可以帮助研究人员识别DNA或RNA的位置和形态。
例如，荧光染料可以用于染色细胞核和染色体，并用于观察细胞核酸含量和分布。
这有助于研究人员发现细胞核酸的基本结构和组成方式。
2. 分析细胞的有丝分裂和减数分裂过程有丝分裂和减数分裂是生物体进行细胞分裂的过程。
荧光染料可以用于观察染色体的位置和数量，从而帮助研究人员理解有丝分裂和减数分裂的基本过程。
3. 分析细胞凋亡细胞凋亡是细胞程序性死亡的一部分，它是维持生物体健康的一种重要清除机制。
核酸荧光染色技术可以帮助研究人员观察凋亡细胞和细胞核结构，从而揭示细胞凋亡路线和引起这些细胞凋亡的真正原因。
4. 研究细胞生命周期细胞生命周期包括细胞增殖、分裂、分化等多个阶段和过程。
荧光染色技术在细胞分析中的应用
荧光染色技术在细胞分析中的应用荧光染色技术是一种利用荧光分子对生物样品进行标记和可视化的方法，广泛应用于细胞分析领域。
通过与荧光染料的结合，可以实现对细胞结构、代谢活性以及相互作用等方面的研究。
本文将详细介绍荧光染色技术在细胞分析中的应用。
一、荧光染色技术的原理和方法荧光染色技术的原理是利用荧光染料在吸收能量后发出特定波长的荧光信号。
常用的荧光染料包括荧光素（Fluorescein）、罗丹明B （Rhodamine B）等。
荧光染色技术主要有直接染色和间接染色两种方法。
直接染色是将荧光染料直接与待研究的细胞样品接触，通过渗透作用或共价结合等方式将荧光染料标记在细胞结构上。
这种方法操作简单、效率高，适用于细胞内结构的可视化。
间接染色则是通过抗原抗体反应，将荧光染料标记在特定的抗原上。
先将待研究的细胞样品与特异性抗体结合，再与荧光标记的二抗结合，实现对细胞结构和代谢活性的研究。
这种方法具有高度的特异性和灵敏性，适用于细胞内蛋白质、核酸等组分的定位和研究。
二、荧光染色技术在细胞结构分析中的应用1.细胞器标记荧光染色技术可用于细胞器的标记和定位，通过针对特定蛋白质的荧光标记来研究细胞器的形态和功能。
例如，用荧光染料标记微管蛋白可以观察细胞中微管的分布情况；用荧光标记的高尔基体蛋白可以揭示高尔基体在蛋白质合成和分泌过程中的作用。
2.膜蛋白定位荧光染色技术在细胞膜蛋白的定位研究中发挥了重要作用。
通过将荧光染料与膜蛋白特异性结合，可以标记和可视化膜蛋白的分布情况。
例如，荧光标记的GFP（Green Fluorescent Protein）可以被用于观察膜蛋白在细胞膜上的定位，揭示细胞膜的功能和调控机制。
三、荧光染色技术在细胞代谢活性分析中的应用1.细胞增殖与凋亡荧光染色技术可用于细胞增殖和凋亡的研究。
例如，利用荧光标记的脱氧核苷酸（BrdU）可以检测细胞的DNA合成活性，从而评估细胞增殖的程度；利用荧光标记的染料如Annexin V可以检测细胞的凋亡程度，研究凋亡的调控机制。
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四、实验方法
(二) 吖啶橙鉴定细胞死活
细胞经吖啶橙染色，在激发光作用下，活细胞核呈黄绿 色或亮绿色荧光，而细胞质为淡红色，但含有粘多糖的细胞 在其细胞质中出现桔黄色颗粒，或整个细胞质呈桔黄桔红色 荧光，死细胞其核呈红色荧光其操作方法如下： 用牙签取少许口腔粘膜上皮细胞，涂在载玻片上，滴 加1-2滴0.01％吖啶橙生理盐水溶液，加盖玻片，待染色5分 钟后于荧光显微镜下观察，注意细胞核所呈荧光颜色。
(一)利用荧光增白剂观察植物细胞壁 植物细胞壁有强烈的吸附染料的能力，因此很 多荧光染料都能着染细胞壁，但近年来最常用的还 是荧光增白剂，以此来鉴别细胞壁的状况，并常用 于检查原生质体细胞壁是否分解完全，以及原生质 体再生细胞壁的鉴别。
1．取洋葱表皮细胞(1cm2)置于载玻片，以 荧光增白剂染色5分钟，加盖玻片，荧光显微 镜下观察其细胞壁。 2．取以酶液游离出来的原生质体悬液l滴于 载玻片上，加荧光增白剂一滴，染色 5分钟，加
1．取少许新鲜紫鸭趾草花粉或蚕豆 表皮放在玻片上，加二丙酸酯荧光素溶 液一滴，5-10分钟后，在荧光显微镜下 观察，时间不宜太长，以免细胞逐渐死 亡，影响效果 。
ห้องสมุดไป่ตู้
2．若着染是悬浮细胞，可将上述染色液数滴直接加 入细胞培养液5分钟后，可离心收集。再用无细胞和 无染料的培养液洗二次，即可收集观察。上述染过 的细胞可保存在4℃左右的冰箱中，直到细胞死亡前 故可观察。
五、荧光的细胞化学测定
单成彬制作
一、实验目的
学习荧光显微镜的使用，了解荧光 显微技术原理和方法，以及荧光技术在 细胞化学方面的应用。
二、实验原理
荧光显微技术是利用短波光照射被射物质，以激发其发射荧光而 在荧光显微镜下可以检视的方法。 荧光又可分为：自发荧光和次生荧光。自发荧光是指有些生物体 受到短波光照射后，直接发出的荧光。如经紫外光照射后，叶绿体 发出的红色荧光；木质素发出的黄色荧光等。次生荧光是指有些生 物材料受到短波光照射后并不发光，但当它吸附荧光染料后，也同 样产生荧光，这种荧光也称间接荧光。
四、作业
说明你所检查的细胞活力状况。
三、实验用品
(一) 材料：新鲜紫鸭趾草花粉或蚕豆原生质体悬液，人口腔上皮细 胞。 (二) 用品：荧光显微镜，载玻片，盖玻片，镊子，烧杯，牙签等。 (三) 试剂： 1．二丙酸酯荧光素溶液：取l0mg二丙酸荧光素于5ml丙酮中，将 此溶液逐滴加入 5ml PH5-6生理盐水或0.65M的甘露醇溶液中，直到 出现永久性乳白沉淀为止。 2．0.01％吖啶橙的生理盐水溶液。
二、实验原理
荧光显微技术是利用短波光照射被射物质，以激发其发射荧光而 在荧光显微镜下可以检视的方法。 荧光又可分为：自发荧光和次生荧光。自发荧光是指有些生物体 受到短波光照射后，直接发出的荧光。如经紫外光照射后，叶绿体 发出的红色荧光；木质素发出的黄色荧光等。次生荧光是指有些生 物材料受到短波光照射后并不发光，但当它吸附荧光染料后，也同 样产生荧光，这种荧光也称间接荧光。
四、实验方法
(一 ) 细胞二丙酸酯荧光素分解酶的活性及细胞活力的测 定二丙酸酯荧光素是非荧光性的亲酯性化合物，很容易进 入细胞活力较强的细胞内，由于细胞内有较强的活性酯酶 而将二丙酸酯荧光素中的荧光素分解出来，从而在荧光显 微镜下发出了强烈的黄绿荧光，相反活力较弱的细胞，由 于酯酶的含量低，表现荧光较弱，而死亡的细胞，由于酯 酶活性丧失，不能分解二丙酸酯荧光素，而完全没有荧光， 具体方法如下：
（四) 线粒体观察 取洋葱内表皮细胞 (1cm2)置于载玻片，以 0.0l％罗丹明染色5分钟生理盐水冲洗一次，加盖 玻片，荧光显微镜下绿光激发观察。
五、作业
分别描述DNA，蛋白质及线粒体在细胞内的 分布与颜色。
实验六 细胞活力的测定
一、实验目的
学习荧光显微镜的使用，了解荧光 显微技术原理和方法，以及荧光技术在 细胞化学方面的应用。
作为荧光的激发光源可分别采用紫外，紫、蓝、绿等 波段的光；而获得的荧光为紫、蓝、绿、黄、橙、红等波 段的光。不同生理活性的细胞，发射荧光(或次生荧光)的 能力有很大差别，不同组份对荧光染料反应产生的荧光颜 色也不同，所以利用这一特性，通过荧光显微镜可以测定 某些组分的含量。以及细胞的生理活性。
三、实验用品
盖玻片，在荧光显微镜下观察原生质体脱壁是否完 全，蓝紫光激发观察。
(二) DNA分布的观察 取洋葱内表皮细胞(1cm2)置于载玻片，以0.0l％吖啶橙 染色5分钟，生理盐水冲洗一次，加盖玻片，荧光显微镜下 蓝光激发观察。
（三) 蛋白质分布的观察 取洋葱内表皮细胞(1cm2)置于载玻片，以 0.02％异硫氰酯荧光素染色5—10分钟，生理盐 水冲洗一次，加盖玻片，荧光显微镜下蓝光激发 观察。