阿托品拮抗豚鼠回肠M受体的pA2值测定
《实验药理学》期末理论习题集
《实验药理学》理论与综合习题选一、名词解释1．对照 2.实验动物 3 ．近交系动物 4 ．SPF 动物 5 ．F1 动物6．急性毒性实验7.特殊毒性实验8. 生理盐液9. 前负荷10. 换能器二、A 型题1. 下列哪种动物便于进行胆汁引流，适用于胆汁药物浓度测定？A. 大鼠B. 小鼠C. 豚鼠D. 家兔E. 猫2. 鉴别未知药是否为阿片受体激动药，可选用以下何种标本进行实验？A. 兔离体血管条B. 豚鼠回肠纵行肌C. 大鼠膈神经－膈肌标本D. 蛙腹直肌E. 大鼠心乳头肌3. 为了得到可靠的实验结论，应选择足够的样本数。
下列有关描述错误的是A．药效强者样本数应大B．两组样本数相同时，实验效率最高C．同体实验比分组实验效率高。
D．小动物的例数应多于大动物E．变异系数大则样本数应大4. 临床疗程1－2 周的药物，长期毒性实验周期至少A. 2 个月B. 4 个月C. 半年D. 9 个月E. 1 年5．下列哪一种剂型不需做面部用药的毒性实验？A. 粘膜外用药B. 滴眼剂C. 口服片剂D. 滴鼻剂E. 腔道洗剂6. 对作用于N-型胆碱受体的药物进行药效学实验，应选用以下何种标本？A. 蛙腹直肌B. 小鼠输精管C.血管平滑肌D.支气管平滑肌E. 豚鼠回肠肌标本7．兔离体血管平滑肌实验，血管标本最好稳定多长时间？A. 15minB.30minC.10minD.5minE.60min 以上8.离体标本实验中浴槽内通入O2 的主要目的是A. 增加离体标本的O2 供应，保持其反应性B. 混匀加入的药液C.减少营养液成分的分解，维持溶液稳定性D. 以上都对E. 以上都不对三、X 型题1．下列哪一个实验属于特殊毒性实验？A. 微生物回复突变实验B. 哺乳动物培养细胞染色体畸变实验C. 致畸胎实验D. 眼刺激实验E. 致癌实验2．按统计学原理进行实验设计，可用较小的样本量获得可靠的实验结论。
下列有关描述错误的是A．两组样本数相同时，实验效率最高B．质反应指标比量反应指标效率高C．同体实验比分组实验效率高D．量反应资料的样本例数可用t 检验的逆运算来估算多少例数方能达到90％可信度E．质反应资料的样本例数可根据预实验或以往资料已知阳性率，测算达到90％可信度所需的样本数3．作用于阿片受体的药物进行生物检定，可选用以下哪些标本？.A. 蛙腹直肌B. 小鼠输精管C. 豚鼠回肠纵行肌D. 兔输精管E. 大鼠膈肌标本四、问答题1．实验设计应遵循哪些原则？2．放射性配体结合法有何实际应用价值？3．生殖毒性实验包括哪几种？4．实验动物按微生物学控制可分为哪几类？分别有何特点？5．实验动物按遗传学控制可分为哪几类？分别有何特点？6．对离体标本进行电刺激有哪几种方式？7．我国新药安全性评价中, 毒理实验基本要求包括哪四个部分?8．实验研究中设立对照的目的是什么？对照可分为哪些？9．检测下列药物：（1）α受体激动药；（2 ）M 受体激动药；（3）δ阿片受体激动药；（4 ）μ阿片受体激动药，应该分别选用何种组织器官实验标本？请简述选用理由。
组胺对受体亲和力常数(pD2)和拮抗剂对组胺拮抗参数(pA2)的测定
课程名称：药理学实验___________________指导老师：______丁玲__成绩：__________________ 实验名称：组胺对受体亲和力常数（pD2）和拮抗剂对组胺拮抗参数（pA2）的测定_实验类型：_验证型同组学生姓名：葛倩倩、张敏哲【实验目的】利用离体豚鼠回肠制备，观察组胺对受体亲和力及拮抗剂对组胺竞争性拮抗作用，并了解pD2和pA2值的测定方法及意义。
【实验原理】1、组胺作用于豚鼠的回肠H1受体，引起肠肌收缩2、根据不同浓度的组胺引起肠段收缩高度，求出pD2值3、加入拮抗剂，若提高组胺浓度，仍能达到先前的收缩高度，表明拮抗剂对组胺有竞争性拮抗4、在加入一定浓度的拮抗剂后，组胺浓度提高1倍就能产生原浓度的效应，而拮抗剂这个摩尔浓度的负对数即为pA2值5、本实验采用苯海拉明作为拮抗剂。
pD2是激动剂与受体亲和力的定量参数，称为亲和力指数。
pA2是竞争性拮抗剂作用强度的参数【实验材料】豚鼠、离体器官恒温浴槽、张力换能器、Med Lab记录仪、剪刀等小型手术器械磷酸组胺溶液[3×10-7mol/L、3×10-6mol/L、3×10-5mol/L、3×10-3mol/L]盐酸苯海拉明溶液[3×10-7mol/L、3×10-6mol/L、3×10-5mol/L、3×10-3mol/L]【实验内容】1、取一段备用回肠，两端用缝针穿线，一端系在通气钩上，放入浴槽（台氏液30ml），另一端连张力换能器，通过记录仪描记肠段收缩；2、让回肠在浴槽内稳定10分钟，记录一段基线，在浴槽内加入药液，观察并记录（约2分钟），当肠段收缩达顶点，停止记录，冲洗2遍，再加台氏液30ml；3、待基线回到用药前水平，记录一段基线，在浴槽内加入下一个药液，开始记录，收缩曲线至顶点开始回落时，停止记录，冲洗2遍，再加台氏液20ml；4、如上依次加入不同量的磷酸组胺溶液：3×10-6mol/L 0.1ml，3×10-5mol/L0.1ml 、0.25及0.5ml，3×10-4mol/L 0.1、0.25及0.5ml，使浴槽中磷酸组胺的最终浓度为10-8mol/L、10-7mol/L、2.5×10-7mol/L、5×10-7mol/L、10-6mol/L、2.5×10-6mol/L，5×10-6mol/L，描记不同浓度磷酸组胺所致的肠段收缩曲线；5、如步骤4，每次加药均先在浴槽中加入3×10-5mol/L盐酸苯海拉明溶液0.1ml，使其终浓度为10-7mol/L，然后依次加入不同浓度的磷酸组胺溶液，描记当溶液中有10-7mol/L苯海拉明共存时不同浓度磷酸组胺所致的肠段收缩曲线；6、再依次试验盐酸苯海拉明终浓度为10-6mol/L和10-5 mol/L时，对磷酸组胺的拮抗作用；7、描记完毕，测量每次加入磷酸组胺后的收缩曲线高度，将加盐酸苯海拉明前，磷酸组胺引起的肠段收缩极限高度作为100%（Emax），计算不同组胺引起肠段收缩高度相当于极限高度的百分率。
药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及PA2、PD2测定的实验方案
2、PA2、PD2 值 PA2 是一种用以表示竞争性拮抗剂作用强度的指标， 其意义是能使激动剂 提高到原来的 2 倍时，可产生与原来浓度相同效应所需的拮抗剂克分子浓度的 负对数(-log(B))。PA2 的值越大说明拮抗剂的作用越强。pA2 是拮抗参数(ant agonism parameter)：当有一定浓度的拮抗药存在时，激动剂增加 2 倍时才能 达到原来效应，此时拮抗药的负对数即拮抗参数， pA2 = -log[I] = -logKI PD2：是激动剂与受体亲和力的定量表示。按照Ariens的定义，PD2是产 生50％最大效应(E=1／2Emax)的摩尔浓度的负对数(-log[D])。PD2值越大，说 明药物和受体的亲和力越大，药效越强。计算方法与PA2相似
实验名药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及pa2pd2测定项目背景实验的目的意义以及欲解决的问题和国内外研究现状实验的目的掌握pa2pd2值的测定方法实验意义掌握pa2pd2值的测定方法国内外研究现状分析一阿托品对胃肠道的研究状况阿托品可以抑制受体节后胆碱能神经支配的平滑肌与腺体活动并根据本品剂量大小有刺激或抑制中枢神经系统作用
实验名 称
药物对豚鼠离体肠平滑肌的作用及 PA2、PD2 测定
项目背景（实验的目的、 项目背景（实验的目的、意义，以及欲解决的问题和国内外研究现状） 以及欲解决的问题和国内外研究现状） 实验的目的 1. 建立豚鼠离体肠平滑肌实验模型； 2. 观察阿托品对乙酰胆碱的竞争性拮抗作用 3. 掌握 pA2、pD2 值的测定方法 实验意义 1 建立方法研究药物拮抗作用 2 掌握 pA2、pD2 值的测定方法 国内外研究现状分析 （一）阿托品对胃肠道的研究状况 阿托品可以抑制受体节后胆碱能神经支配的平滑肌与腺体活动，并根据 本品剂量大小，有刺激或抑制中枢神经系统作用。解毒系在 M-胆碱受体部 位拮抗胆碱酯酶抑制剂的作用, 如增加气管、肠道系粘液腺与唾液腺的分 泌，肠道平滑肌挛缩，以及植物神经节受刺激后的亢进。此外，阿托品能 兴奋或抑制中枢神经系统，具有一定的剂量依赖性。对心脏、肠和肠道平 滑肌作用比其他颠茄生物碱更强而持久。 （二）乙酰胆碱的研究状况 ACh 可明显兴奋胃肠道，使其收缩幅度、张力增加，胃、肠平滑肌蠕动增 加，并可促进胃、肠分泌，导致恶心、嗳气、呕吐、腹痛及排便等症状。Ach 还 可使泪腺、 气管和肠道腺体、 唾液腺、 消化道腺体和汗腺分泌增加， 使肠道收缩， 颈动脉和主动脉体化学受体兴奋。当 ACh 局部滴眼时，可致瞳孔收缩，调节于
药物的量效关系及PD2、PA2的测定
• 7.加维库溴铵：0.1ml，5min； • 8.第二次测定：同第5步 • 9.数据处理
注意事项
• 标本制备： • ①标本不宜取过大，宁窄勿宽； • ②手不碰标本，不可夹，不牵拉； • ③先绑好丝线再剪下来。
注意事项
• 加药过程： • ①枪头不碰到标本； • ②枪头不碰浴槽； • ③枪头不伸入液面。
lgC 肌张力（g） E%=E/Emaxx100%
-7
0
0
-6.5
0
0
-6
0.1
1
-5.5
1.0
10
-5
2.04
8.0
80
-3.5
9.0
90
-3
10.0
100
-2.5
数据处理
• ①在坐标纸上作图：
• ②求回归直线：在E%为20%~80%间取3点 求得y=a+bx，再代入y=50%，得lgEC50；
注意事项
• 洗脱过程： • ①第一次测定完要赶紧进行洗脱； • ②除了排水的出口，其它都不能碰。
数据处理
药物
2x10-5x0.1 2x10-5x0.3 2x10-4x0.1 2x10-4x0.3 2x10-3x0.1
2x10-3x0.3 2x10-2x0.1 2x10-2x0.3 2x10-1x0.1 2x10-1x0.3
• PA2：拮抗参数，竞争性拮抗药对受体/激 动药的拮抗能力的大小。
• EC50*=2EC50，此时拮抗药浓度的负对数。
实验步骤
• 1.RM6240系统设量； • 2.标本制备：长1.5~2cm，宽0.5cm； • 3.安装标本，加前负荷2~4g，基线走平
15~30min； • 4.配制Ach：10倍梯度稀释； • 5.第一次测定：先快速归零，浓度从低到高 • 6.洗脱：冲洗1次；浸洗3次，5min/次；平
豚鼠离体回肠实验报告
一、实验目的1. 了解离体豚鼠回肠实验的基本原理和方法。
2. 观察不同药物对豚鼠离体回肠平滑肌张力的影响。
3. 掌握绘制量效曲线、分析量效关系、认识竞争性拮抗剂和非竞争性拮抗剂等概念。
二、实验原理豚鼠离体回肠实验是一种常用的生物学实验方法，通过在体外模拟豚鼠回肠平滑肌生理状态，观察不同药物对回肠平滑肌张力的影响，从而研究药物的药理作用。
实验过程中，豚鼠回肠平滑肌的收缩与舒张反应受到多种因素的影响，如神经递质、激素、药物等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：豚鼠离体回肠、生理盐水、乙酰胆碱、阿托品、组胺、扑尔敏等。
2. 实验仪器：恒温浴槽、肌力换能器、显微镜、培养皿、微量注射器、缝衣针、缝线、洗瓶、RM6240多媒体化生物信号记录分析系统等。
四、实验方法1. 豚鼠离体回肠标本的制备：取豚鼠离体回肠约2cm，对角结扎，一端固定在浴槽的通气钩上，另一端垂直连接于肌力换能器的感应片上，调节基础张力约为0.5g。
2. 实验分组：将实验分为以下几组：（1）对照组：加入生理盐水；（2）乙酰胆碱组：加入不同浓度的乙酰胆碱；（3）阿托品组：加入不同浓度的阿托品；（4）组胺组：加入不同浓度的组胺；（5）扑尔敏组：加入不同浓度的扑尔敏。
3. 观察指标：观察并记录不同药物对豚鼠离体回肠平滑肌张力的变化，绘制量效曲线。
4. 数据处理：采用统计学方法对实验数据进行处理，分析量效关系。
五、实验结果1. 生理盐水组：豚鼠离体回肠平滑肌张力基本稳定，无显著变化。
2. 乙酰胆碱组：随着乙酰胆碱浓度的增加，豚鼠离体回肠平滑肌张力逐渐增强，呈剂量依赖性。
3. 阿托品组：随着阿托品浓度的增加，豚鼠离体回肠平滑肌张力逐渐减弱，呈剂量依赖性。
4. 组胺组：随着组胺浓度的增加，豚鼠离体回肠平滑肌张力逐渐增强，呈剂量依赖性。
5. 扑尔敏组：随着扑尔敏浓度的增加，豚鼠离体回肠平滑肌张力逐渐减弱，呈剂量依赖性。
六、实验结论1. 乙酰胆碱对豚鼠离体回肠平滑肌具有兴奋作用，呈剂量依赖性。
组胺对受体亲和力常数(pD2)和拮抗剂对组胺拮抗参数(pA2)的测定
课程名称：药理学实验___________________指导老师：______丁玲__成绩：__________________ 实验名称：组胺对受体亲和力常数（pD2）和拮抗剂对组胺拮抗参数（pA2）的测定_实验类型：_验证型同组学生姓名：葛倩倩、张敏哲【实验目的】利用离体豚鼠回肠制备，观察组胺对受体亲和力及拮抗剂对组胺竞争性拮抗作用，并了解pD2和pA2值的测定方法及意义。
【实验原理】1、组胺作用于豚鼠的回肠H1受体，引起肠肌收缩2、根据不同浓度的组胺引起肠段收缩高度，求出pD2值3、加入拮抗剂，若提高组胺浓度，仍能达到先前的收缩高度，表明拮抗剂对组胺有竞争性拮抗4、在加入一定浓度的拮抗剂后，组胺浓度提高1倍就能产生原浓度的效应，而拮抗剂这个摩尔浓度的负对数即为pA2值5、本实验采用苯海拉明作为拮抗剂。
pD2是激动剂与受体亲和力的定量参数，称为亲和力指数。
pA2是竞争性拮抗剂作用强度的参数【实验材料】豚鼠、离体器官恒温浴槽、张力换能器、Med Lab记录仪、剪刀等小型手术器械磷酸组胺溶液[3×10-7mol/L、3×10-6mol/L、3×10-5mol/L、3×10-3mol/L]盐酸苯海拉明溶液[3×10-7mol/L、3×10-6mol/L、3×10-5mol/L、3×10-3mol/L]【实验内容】1、取一段备用回肠，两端用缝针穿线，一端系在通气钩上，放入浴槽（台氏液30ml），另一端连张力换能器，通过记录仪描记肠段收缩；2、让回肠在浴槽内稳定10分钟，记录一段基线，在浴槽内加入药液，观察并记录（约2分钟），当肠段收缩达顶点，停止记录，冲洗2遍，再加台氏液30ml；3、待基线回到用药前水平，记录一段基线，在浴槽内加入下一个药液，开始记录，收缩曲线至顶点开始回落时，停止记录，冲洗2遍，再加台氏液20ml；4、如上依次加入不同量的磷酸组胺溶液：3×10-6mol/L 0.1ml，3×10-5mol/L0.1ml 、0.25及0.5ml，3×10-4mol/L 0.1、0.25及0.5ml，使浴槽中磷酸组胺的最终浓度为10-8mol/L、10-7mol/L、2.5×10-7mol/L、5×10-7mol/L、10-6mol/L、2.5×10-6mol/L，5×10-6mol/L，描记不同浓度磷酸组胺所致的肠段收缩曲线；5、如步骤4，每次加药均先在浴槽中加入3×10-5mol/L盐酸苯海拉明溶液0.1ml，使其终浓度为10-7mol/L，然后依次加入不同浓度的磷酸组胺溶液，描记当溶液中有10-7mol/L苯海拉明共存时不同浓度磷酸组胺所致的肠段收缩曲线；6、再依次试验盐酸苯海拉明终浓度为10-6mol/L和10-5 mol/L时，对磷酸组胺的拮抗作用；7、描记完毕，测量每次加入磷酸组胺后的收缩曲线高度，将加盐酸苯海拉明前，磷酸组胺引起的肠段收缩极限高度作为100%（Emax），计算不同组胺引起肠段收缩高度相当于极限高度的百分率。
实验15药物对离体豚鼠回肠的作用 (2)
2 2.810.1032.230.564
3 3.430.1253.070.111
4 3.260.1873.460.394
5 1.340.2712.160.776
62.150.1202.980.230
7 3.34-0.083.010.418
8 3.460.1542.590.103
3.讨论
3.1M受体激动药及拮抗药对平滑肌的药理作用
M胆碱受体激动药可分为两类，即胆碱酯类和天然形成的拟胆碱生物碱。乙酰胆碱属于胆碱酯类药物[2]，小剂量时为M胆碱受体激动作用。Ach与M胆碱能受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流增加，肌浆Ca2+浓度增大，平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有N胆碱受体激动作用，使胃肠道平滑肌兴奋。Atropine为M胆碱受体阻断药，其与平滑肌细胞膜M-受体结合，本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断乙酰胆碱与M-受体结合，阻断乙酰胆碱与M-受体的激动作用[3]。
【关键词】乙酰胆碱组胺阿托品扑尔敏M胆碱受体 H1受体
胃肠道平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道平滑肌。Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合，从而产生抗胆碱作用。Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用，豚鼠尤其敏感。Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂，能阻断histamine与H1受体的结合，从而产生抗histamine作用。BaCl2为肌肉兴奋剂，能够使平滑肌强烈收缩[1]。
如上histamine同样具有使回肠平滑肌收缩的能力，作用前后其张力变化幅度为2.76±0.618，经扑尔敏作用后，再加入histamine平滑肌的收缩幅度变为0.37±0.213，用t检验得P<0.01，两者差异显著。说明扑尔敏具有对抗histamine的作用，主要是阻断了肠道上的H1受体。
药物对离体豚鼠回肠的作用
药物对离体豚鼠回肠的作用摘要目的观察胆碱能神经递质乙酰胆碱，炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。
观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和H1受体阻断剂扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的阻断作用。
方法以离体豚鼠回肠为材料，研究乙酰胆碱、组胺对肌张力的影响及阿托品、扑尔敏对其的阻断作用。
结果在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时（P<0.01）；加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时（P<0.01）；BaCl2 处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降结论阿托品具有强抗胆碱作用；扑尔敏具有部分拮抗组胺作用；阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。
关键词豚鼠回肠肌张力乙酰胆碱阿托品组胺扑尔敏BaCl21.材料和方法1.1实验动物Dunkin-Hartley 豚鼠1.2 药品0.01g/L氯化乙酰胆碱溶液1g/L硫酸阿托品溶液0.01g/L磷酸组织胺溶液0.001g/L氯苯那敏溶液10g/L BaCl2溶液台氏液1.3 器材双层玻璃浴槽（20ml）张力换能器恒温水浴箱多通道生理信号采集处理系统RM6240生物信号采集处理系统1.4 制备豚鼠离体回肠标本取豚鼠一只，以木槌击打头部致昏死，立刻剖开腹腔，在离回盲部1cm处剪断，取长约10cm左右的回肠一段，置于氧饱和的台氏液中，沿肠壁去除肠系膜，将回肠剪成1-1.5cm左右的小段，用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。
1.5 仪器连接和参数清洗浴槽后,将台氏液装至刻度，调节水浴箱温度为37℃±0.5 ℃，通气管接95% O2+5%CO2混合气体，调节至浴槽中气泡一个个溢出为止。
将回肠标本一端固定在通气钩上置于浴槽中，另一端固定在换能器上与多通道生理信号采集处理系统连接。
连接RM6240生物信号采集处理系统，仪器参数：通道时间常数直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1s/div。
1.6 测定药物影响快速归零后调节前负荷为1g。
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实验十阿托品拮抗豚鼠回肠M受体的pA2值测定
071232001 陈小凤2010/5/9
【目的】1．掌握pA2值的测定方法及其意义。
2．观察阿托品对豚鼠回肠M受体的竞争性拮抗作用。
3. 了解离体平滑肌基本实验方法。
【动物】豚鼠
【药物】①乙酰胆碱（2X10-5、2X10-4、2X10-3 、2X10-2 、2X10-1 、2mol/L）
②阿托品（5×10-5、5×10-4 、5×10-3 mol/L ）
③台氏液
【器材】： 100μl微量注射器、量筒、培养皿、缝衣针、缝线、洗瓶、RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、肌力换能器、HSS-1（B）型恒温浴槽、GW-3G恒温平滑肌槽。
【方法】
1.仪器安装调试：
（1）搭建好仪器后，打开水浴锅电源，使浴槽温度保持在37℃。
清洗浴槽，加台氏液20ml。
通气，使气泡呈碎花状释放。
（2）启动计算机，双击RM6240生物信号采集处理系统，打开“阿托品拮抗豚鼠回肠M受体的pA2测定”，设置实验参数，示波。
2.标本制备：
豚鼠回肠由教师制备提供。
取豚鼠回肠约2cm，对角结扎，一端固定在浴槽的通气钩上，另一端垂直连接于肌力换能器的感应片上，调节基础张力约为0.5g（记录过程中张力持续变大并出现波动）。
肠管在槽内稳定十五分钟后，记录正常收缩活动。
3.观察项目
（1）未加阿托品时每个Ach累积（ml/L）引起的肠管最大收缩幅度。
（2）分别加入阿托品（3个浓度）后，每个Ach累加浓度引起的肠管最大收缩幅度。
4.给药方案（给药量如表一所示）
（1）用微量注射器向麦氏浴槽内从低到高加入Ach溶液，当每个浓度引起的肠管收缩反应达到最大时，立即累加另一个浓度，直到收缩反应不再增加。
（2）用台氏液冲洗标本3～5次，回肠恢复正常后，加入5×10-5mol/L阿托品20ul后，重复步骤⑴。
（3）用台氏液冲洗标本3～5次，回肠恢复正常后，加入5×10-4mol/L阿托品20ul后，重复步骤⑴。
（4）用台氏液冲洗标本3～5次，回肠恢复正常后，加入5×10-3mol/L阿托品20ul后，重复步骤⑴。
5.数据处理
【结果】
由于我们组实验过程中，未能在每个浓度引起肠管收缩反应达到最大时及时加入药品，并且实验过程中时不时碰到悬挂的吊线，造成实验结果有较大偏差。
因此，我们借鉴了周三第3组的实验数据进行分析。
图一乙酰胆碱累积给药及张力变化汇总
以下分别就各阿托品浓度（0、5*10-8、5*10-7、5*10-6 mol/L）的拮抗作用分别分析。
图二 Ach累积给药张力变化
（阿托品=0 mol/L）
图三 Ach累积给药张力变化
（阿托品=5*10-8 mol/L）
图四 Ach累积给药张力变化
（阿托品=5*10-7 mol/L）
图五 Ach累积给药张力变化
（阿托品=5*10-6 mol/L）
首先，区域测量导出结果绘制下表。
表一乙酰胆碱累积给药及张力变化
Ach浓度加药量Ach终浓度
负对数加入阿托品后肠管最大收缩高度（g）
（mol/L）（ul）（mol/L）05×10-85×10-75×10-6 2×10-51010-880.87 1.1090.2360.042 203×10-87.5 1.01 1.5330.0730.01
7010-77 1.266 3.230.0550.012 2×10-4203×10-7 6.5 1.4710.9080.0590.02 7010-66 2.110.8730.1360.013 2×10-3203×10-6 5.5 2.570.8650.2250.04 7010-55 2.940.8530.2260.014 2×10-2203×10-5 4.5 2.72 1.1910.0550.261 7010-44 3.15 1.603 2.070.067 2×10-1203×10-4 3.5 3.08 2.280.7990.013 7010-33 2.8 2.570.6810.014 2203×10-3 2.5 3.06 3.3 2.070.645
由上表可知乙酰胆碱引起最大收缩高度Emax=3.3g。
然后，计算每个Ach浓度下收缩高度与最大收缩高度的比值E/Emax，列于表二中。
表二阿托品对乙酰胆碱引起豚鼠回肠平滑肌收缩量效曲线的影响Ach浓度加药量Ach终浓度加入阿托品后张力变化E/Emax(%)
（mol/L）（ul）（mol/L）05×10-85×10-75×10-6 2×10-51010-826.433.67.2 1.3
203×10-830.646.5 2.20.3
7010-738.497.9 1.70.4 2×10-4203×10-744.627.5 1.80.6
7010-663.926.5 4.10.4 2×10-3203×10-677.926.2 6.8 1.2
7010-589.125.8 6.80.4 2×10-2203×10-582.436.1 1.77.9
7010-495.548.662.7 2.0 2×10-1203×10-493.369.124.20.4
7010-384.877.920.60.4 2203×10-392.710062.719.5由RM6240生物信号采集系统药理分析工具箱中的激动药pD2和pA2工具，绘制量效曲线及计算EC50。
I.阿托品=0 mol/L 时PD2计算结果：y——张力百分率(％)；
x——乙酰胆碱浓度(－㏒mol/L)
回归曲线方程：
y＝138.92－13.45x
pD2:当y＝50时,对应的x值。
pD2＝6.61(－㏒mol/L)
II．阿托品=5*10-8mol/L 时PD2计算结果：
y——张力百分率(％)；
x——乙酰胆碱浓度(－㏒mol/L)
回归曲线方程：
y＝86.03－6.61x
pD2*:当y＝50时,对应的x值。
pD2*＝5.45(－㏒mol/L)
III. 阿托品=5*10-7 mol/L 时PD2计算结果：
y——张力百分率(％)；
x——乙酰胆碱浓度(－㏒mol/L)
回归曲线方程：
y＝62.12－8.62x
pD2*:当y＝50时,对应的x值。
pD2*＝1.41(－㏒mol/L)
IV. 阿托品=5*10-6mol/L 时PD2计算结果：
y——张力百分率(％)；
x——乙酰胆碱浓度(－㏒mol/L)
回归曲线方程：
y＝11.39－1.62x
pD2*:当y＝50时,对应的x值。
pD2*＝-23.88(－㏒mol/L)
V. PA2计算结果:
A1＝㏒^-1(pD2):表示未加入阿托品前乙酰胆碱产生50％最大效应所需的克分子浓度。
A2＝㏒^-1(pD2*):表示拮抗剂阿托品存在时激动剂产生相同效应所需的克分子浓度。
(A2－A1)／A1:表示达到原有效应所需增加激动药乙酰胆碱额浓度占原用激动药浓度的百分比。
y —— ㏒(A2／A1－1);x —— 阿托品浓度(－㏒mol/L) 回归曲线方程：y ＝104.76－14.68x
pA2:当A2＝2*A1时;即y ＝0时,对应的x 值。
pA2＝7.14(－㏒mol/L)
-20
20406080100120-10
-8
-6
-4
-2
logAch
E /E m a x
阿托品为0
阿托品为5*10-8阿托品为5*10-7阿托品为5*10-6
多项式 (阿托品为0)
多项式 (阿托品为5*10-8)多项式 (阿托品为5*10-7)多项式 (阿托品为5*10-6)
图六 Ach 的量效曲线
【思考】
1、拮抗药(antagonist)：与受体有亲和力，而无内在活性的药物（α= 0）。
①竞争性拮抗药(competitive antagonist)与激动药竞争同一受体的拮抗药。
激动药的量效反应曲线可以被竞争性拮抗药平行右移。
如果增加竞争性激动药浓度，仍可达到Emax。
②非竞争性拮抗药（noncompetitive antagonist）与激动剂作用于同一受体，结合牢固，分解慢或是不可逆的，或作用于相互关联的不同受体。
2、PA2值
PA2是一种用以表示竞争性拮抗剂作用强度的指标，其意义是能使激动剂提高到原来的2倍时，可产生与原来浓度相同效应所需的拮抗剂克分子浓度的负对数(-log(B))。
PA2的值越大说明拮抗剂的作用越强。
pA2是拮抗参数(antagonism parameter)：当有一定浓度的拮抗药存在时，激动剂增加2倍时才能达到原来效应，此时拮抗药的负对数即拮抗参数，pA2 = -log[I] = -logKI
3、药物作用
乙酰胆碱作用于豚鼠回肠的M受体，引起肠肌收缩，当加入M受体拮抗剂阿托品后，若提高乙酰胆碱浓度，仍能达到未加拮抗剂前的最大反应，并可使剂量反应曲线平行右移，则表明阿托品对乙酰胆碱呈竞争性拮抗。