了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA—2A)与谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)在1型糖尿病(DM)中的检出率及
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/118419369.html, 了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA—2A）与谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）在1型糖尿病（DM）中的检出率及其诊断价值
作者：薛勇
来源：《饮食与健康·下旬刊》2015年第10期
【摘要】目的：分析探讨蛋白酪氨酸磷酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体在1型糖尿病中的检出率及其诊断价值。方法：选择我院收治的1型糖尿病患者120例作为研究对象，收治时间在2013年3月至2014年3月期间，使用数字抽签法对这120例患者进行分组，分别为A组、B 组和C组，每组各40例，A组采取蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测，B组采取谷氨酸脱羧酶抗体检测，C组采取白酪氨酸磷酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体联合检测，并在检测结束后，对比三组的检出率。结果：A组的检出率为87.50%，B组的检出率为80.00%，C组的检出率为
100.00%，C组患者的检出率明显高于A、B两组，P
【关键词】白酪氨酸磷酸酶抗体;谷氨酸脱羧酶抗体;1型糖尿病
谷氨酸脱羧酶（GAD）是将谷氨酸转化成抑制性神经递质γ氨基丁酸（GABA）的限速酶，在胰岛β细胞中存在GAD，并也合成、分泌GABA。本文就蛋白酪氨酸磷酸酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体在1型糖尿病中的检出率及其诊断价值进行了研究分析，将我院确诊的120例1型糖尿病患者作为研究对象，并分别给予蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测、谷氨酸脱羧酶抗体检测及酸磷酸酶抗体检测联合谷氨酸脱羧酶抗体检测，现报告整理完毕，具体陈述如下。
1 研究资料和方法
1.1 研究资料
选择我院收治的1型糖尿病患者120例作为研究对象，收治时间在2013年3月至2014年3月期间，使用数字抽签法对这120例患者进行分组，分别为A组、B组和C组，每组各40例。
了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA—2A)与谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)在1型糖尿病(DM)中的检出率及
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/118419369.html, 了解蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA—2A）与谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）在1型糖尿病（DM）中的检出率及其诊断价值 作者：薛勇 来源：《饮食与健康·下旬刊》2015年第10期 【摘要】目的：分析探讨蛋白酪氨酸磷酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体在1型糖尿病中的检出率及其诊断价值。方法：选择我院收治的1型糖尿病患者120例作为研究对象，收治时间在2013年3月至2014年3月期间，使用数字抽签法对这120例患者进行分组，分别为A组、B 组和C组，每组各40例，A组采取蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测，B组采取谷氨酸脱羧酶抗体检测，C组采取白酪氨酸磷酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体联合检测，并在检测结束后，对比三组的检出率。结果：A组的检出率为87.50%，B组的检出率为80.00%，C组的检出率为 100.00%，C组患者的检出率明显高于A、B两组，P 【关键词】白酪氨酸磷酸酶抗体;谷氨酸脱羧酶抗体;1型糖尿病 谷氨酸脱羧酶（GAD）是将谷氨酸转化成抑制性神经递质γ氨基丁酸（GABA）的限速酶，在胰岛β细胞中存在GAD，并也合成、分泌GABA。本文就蛋白酪氨酸磷酸酶抗体与谷氨酸脱羧酶抗体在1型糖尿病中的检出率及其诊断价值进行了研究分析，将我院确诊的120例1型糖尿病患者作为研究对象，并分别给予蛋白酪氨酸磷酸酶抗体检测、谷氨酸脱羧酶抗体检测及酸磷酸酶抗体检测联合谷氨酸脱羧酶抗体检测，现报告整理完毕，具体陈述如下。 1 研究资料和方法 1.1 研究资料 选择我院收治的1型糖尿病患者120例作为研究对象，收治时间在2013年3月至2014年3月期间，使用数字抽签法对这120例患者进行分组，分别为A组、B组和C组，每组各40例。
蛋白酪氨酸磷酸酶
蛋白酪氨酸磷酸酶 本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！ 1988年Tonks等首次在人的胎盘细胞中分离和纯化了第一个37kDa的蛋白酪氨酸磷酸酶1B(ProteinTyrosinePhosphatase-1B，PTP-1B)。 PTP1B是一种胞内PTP，位于内质网，在人体的各种组织中都有表达;其与蛋白酪氨酸激酶(ProteinTyrosineKinases，PTK)共同维持着酪氨酸蛋白磷酸化的平衡，参与细胞的信号转导，调节细胞的生长、分化、代谢、基因转录和免疫应答等。 PTP1B属于蛋白质酪氨酸磷酸酶家族，专一水解芳香族磷酸，如磷酸化酪氨酸(phosphotyrosyl，pTyr)残基上磷酸根的酶，通过对胰岛素受体或其底物上的酪氨酸残基去磷酸化作用，对胰岛素信号转导进行负调节，组织细胞中PTP-1B过表达都会降低PTK的活性，使胰岛素受体无法与胰岛素结合，进而引起胰岛素抵抗，最终导致2型糖尿病。 PTP-1BDNA的启动子上有一个转录因子Y盒结合蛋白-1的结合位点，它的过度表达可使PTP-1B的表达水平增加。使用反义寡核苷酸技术减少其表达后，
PTP-1B的表达随之降低，呈正相关趋势。 PTP-1B在体内没有自身的特异性受体，而是在细胞信号传导过程中，与PTP家族中的其他成员以及蛋白酪氨酸激酶协同作用，调控蛋白底物中酪氨酸的磷酸化水平，进而对细胞的生长、分化、代谢、基因转录和免疫应答等功能进行调节。 1PTP-1B的生理功能 目前研究发现PTP-1B主要表现出以下几个方面的生理功能： (1)与胰岛素受体(insulinreceptor，IR)、胰岛素受体底物(insulinreceptorsubstrate，IRS)等信号蛋白作用，使这些蛋白调节区的酪氨酸残基去磷酸化，进而阻断胰岛素信号级联反应的下传，在胰岛素信号中起着负调控作用。与II型糖尿病的发生具有密切的联系。 (2)在瘦素信号传导过程中，通过降低转录激活子-3(STAT-3)和Janus激酶-2(JAK-2)的磷酸化水平，在瘦素信号中起负调控作用。与肥胖的发生具有密切的联系。 (3)PTP-1B通过与生长因子等底物相互作用，参与细胞生长周期的调节，与肿瘤的发生具有一定的联系。 除此之外，研究还发现PTP-1B在催乳素信号传
糖尿病抗体
糖尿病抗体四项检测的临床意义 1、抗谷氨酸脱羧酶抗体GAD-Ab 谷氨酸脱羧酶是抑制性神经递质γ氨基丁酸的关键限速酶，由GAD65和GAD67两种异构体所组成，其中抗GAD65抗体为1型糖尿病中抗GAD抗体主要的靶抗原。抗GAD抗体是胰岛素依赖型糖尿病（1型糖尿病）的重要免疫标志。抗GAD抗体在糖尿病前驱阶段和1型糖尿病中的阳性率为70-90%，在大龄儿童和迟发的1型糖尿病中的阳性率更高。 对于成人潜伏型自身免疫性糖尿病（LADA），因其起病隐匿，进展缓慢，尚存部分胰岛β细胞功能，口服降糖药有效，易被误诊为2型糖尿病。联合检测抗谷氨酸脱羧酶抗体和抗胰岛细胞抗体，有助于早期识别LADA。 此外抗GAD抗体还与僵人综合征相关，该抗体在此病症中的阳性率为60-100%。 参考值：<10.0IU/ml 2、抗酪氨酸磷酸酶抗体 IA2-Ab 抗酪氨酸磷酸酶抗体（IA2）是与1型糖尿病相关的抗体，在糖尿病前驱阶段和1型糖尿病中的阳性率为50-75%，是胰岛自身免疫活动的早期标志物，其出现通常预示着病情进展迅速。在年轻初发病者中的阳性率更高，与初发病进展速度有关。 参考值：<10.0IU/ml 3、抗胰岛素抗体IAA 1型糖尿病因内源性胰岛素分泌量的绝对不足，故需注射外源性胰岛素治疗。经常会刺激机体产生抗胰岛素抗体。检测抗胰岛素抗体可指导胰岛素的用量，为耐药性糖尿病治疗提供了依据。抗体滴度高时，可适度增加速效胰岛素，抗体滴度低时，则改用长效胰岛素。判断预后，胰岛素释放曲线低下而检测胰岛素抗体滴度偏高，说明患者不是胰岛功能衰竭，提示病情稳定。相反则表明胰岛素功能衰竭，预后较差。 参考值：阴性 4、抗胰岛细胞抗体ICA 抗胰岛细胞抗体属器官特异型抗体，抗原为胰岛细胞浆成分或微粒体组分，主要为lgG类，是胰岛细胞中β细胞损伤的标志物，是诊断胰岛依赖性糖尿病高敏感性和高特异性的指标。早期1型糖尿病患者ICA阳性率可达60%～80%，治疗数周后阳性率迅速下降至50%以下，2～3年后，约20％的患者仍为阳性，提示ICA的出现可能是暂时现象，似与1型糖尿病的起病时间紧密相关，可作为其早期诊断指标；少数患者ICA滴度可持续维持很高，数年不变；有个别患者起病时为阴性，以后转为阳性；糖尿病近亲阳性率可达19%，预示其家族成员患病的危险性较大。高效价ICA与胰岛β细胞功能破坏有关，可作为评价疾病严重程度的标志。 参考值：阴性 联合检测上述四项，有助于鉴别诊断1型糖尿病，判断疾病预后，并评估1型糖尿病的发病风险。
蛋白质酪氨酸磷酸化_免疫沉淀及Western印迹两种方法的比较_陈沙力
蛋白质酪氨酸磷酸化-免疫沉淀及Wes tern 印迹两种方法的比较 * 预防医学院放射生物实验室 陈沙力 刘树铮 提 要 为了深入了解在细胞信息传递中蛋白质酪氨酸磷酸化研究的较佳方法,采用免疫 沉淀法及Western 印迹法对电离辐射诱导的小鼠胸腺细胞蛋白质磷酸化进行了比较分析。免疫沉淀结果表明,照射后17500、22000、28000、32000、40000、43000及53000蛋白分子发生酪氨酸磷酸化。Western 印迹结果表明,照射后28000、32000蛋白分子发生酪氨酸磷酸化。提示在蛋白质酪氨酸磷酸化的研究中,免疫沉淀法优于Western 印迹法。 关键词 蛋白质 磷酸化 免疫沉淀 免疫印迹中图号 R331 蛋白质酪氨酸磷酸化是多种刺激因素诱导激活基因表达的细胞信息传递通路中的基础步骤,也是电离辐射激活淋巴细胞PKC 信息传递 通路及转录因子N F -kB 最基本的步骤〔1〕。预先的研究表明,低剂量电离辐射可诱导小鼠胸腺细胞数种蛋白分子发生变化〔2〕,其中包括辐射刺激引起蛋白分子的甲基化、糖基化及磷酸化等化学修饰变化。研究蛋白质磷酸化在细胞信息传递中的作用具有重要的意义。本研究采用免疫沉淀及Western 印迹两种方法对辐射诱导的小鼠胸腺细胞蛋白分子磷酸化进行了比较研究,现将结果报告如下。 1 材料和方法1.1 动物及照射条件 健康雄性昆明小鼠,体重18～22g 。采用Philips 深部X 射线机照射动物,电压200kV ,电流10m A,滤板0.5mm Cu,1.0mm Al,靶皮距离212cm 。单次全身照射,剂量率为12.5m Gy /min ,剂量为75m Gy 。 1.2 小鼠胸腺细胞分离及金黄色葡萄球菌Cow an I 株(SAC )的活化、纯化、鉴定、增殖、回收及处理 * 国家自然科学基金资助课题(39270207)参见文献〔3,4〕。 1.3 免疫沉淀 1.3.1 H 332PO 4代谢标记胸腺细胞及细胞裂解 用无磷酸盐RPM I 1640培养液(Sig-ma )调细胞浓度至107个/ml ,加入H 332 PO 4(中科院原子能研究院)4.625×109 Bq /ml,37℃平缓摇动培养3h ,冷生理盐水洗涤2次并溶解于细胞裂解液(50mmol /L Tris,p H 7.5,150 mm ol /L Na Cl ,1 %N P -40,0.1mol /L NaF ,10mm ol /L Na 3VO 4,5mm ol /L EDT A,1mmol /L PM SF ,2U Aprotinin )中,冰浴30min ,间或振荡,反复通过22号针头,15000r /min 离心20min ,上清移至另一离心管中。 1.3.2 细胞裂解物的预清除 将S AC 置离心管中,7000r /min 离心15min,将沉淀悬于含0.05%N P -40的细胞裂解液中至原体积,加等体积的无关杂交瘤细胞培养上清,冰浴30min ,用细胞裂解液洗涤3次,再以1/2原体积裂解液悬浮,终浓度为20%。将等体积S AC 加到裂解上清中,冰浴2h,4℃12000r /min 离心15min ,小心取出上清保存备用。 1.3.3 抗原抗体复合物的形成 将细胞裂解上清(抗原)分为两等份,置于微量离心管中(3×106 细胞),各加入N ET-明胶缓冲液(50 — 678—第23卷 第6期1997年 白 求 恩 医 科 大 学 学 报J .N.BET HU N E U N IV.M ED.SCI. V ol.23 N o.6 1997
蛋白质酪氨酸磷酸酶SHP_1的中药抑制剂筛选
第46卷 第6期吉林大学学报(理学版) Vol .46 No .6 2008年11月JOURNAL OF J I L I N UN I V ERSI TY (SC I E NCE E D I TI O N ) Nov 2008 蛋白质酪氨酸磷酸酶SHP 21的中药抑制剂筛选 李婉南1 ,李 莹1 ,庄 妍1 ,李 贺1 ,陈颖丽2 ,赵志壮 1,3 ,付学奇 1 (1.吉林大学生命科学学院,长春130012;2.吉林省中医药科学院,长春130021; 3.美国俄克拉荷马大学健康科学中心,俄克拉荷马城73104,美国) 摘要:用含有蛋白质酪氨酸磷酸酶SHP 21催化结构域(ΔSHP 21)的质粒转化大肠杆菌,得到 ΔSHP 21的高效表达,经分离纯化后,以ΔSHP 21为靶标,通过体外酶反应动力学实验,对157种中药水提液的抑制效果进行研究,筛选出两种对ΔSHP 21具有显著抑制作用的中药:山茱萸和蒲公英,并对其I C 50及抑制类型做了进一步研究.为建立蛋白质酪氨酸磷酸酶抑制剂的筛选方法和中药在治疗免疫疾病和糖尿病上的开发和应用提供了理论依据.关键词:包含SH2结构域的蛋白质酪氨酸磷酸酶1(SHP 21);中药;抑制剂;筛选中图分类号:Q55 文献标识码:A 文章编号:167125489(2008)0621211206 Screen i n g Traditi onal Chi n ese M edi ci n es for I nhi bitors of Prote i n Tyrosi n e Phosphat ase SHP 21 L IW an 2nan 1 ,L I Ying 1 ,ZHUANG Yan 1 ,L I He 1 ,CHEN Ying 2li 2 ,ZHAO Zhi 2zhuang 1,3 ,F U Xue 2qi 1 (1.College of L ife Sciences,J ilin U niversity,Changchun 130012,China; 2.A cade m y of Traditional Chinese M edicine and Herbs of J ilin P rovince,Changchun 130021,China; 3.Health Sciences Center ,O klaho m a U niversity,O klaho m a C ity 73104,USA ) Ab s trac t:W ith pT7as a vect or,ΔSHP 21,a recombinant p r otein containing the catalytic domain of p r otein tyr osine phos phatase SHP 21,was highly exp ressed in E .coli cells .The enzy me was further purified t o near homogeneity .W ith the purified recombinant enzy me as a target,aqueous extracts of 157traditi onal Chinese herb medicines were analyzed f or their abilities t o inhibit SHP 21.T wo most potent inhibit ors,na mely,cornel and dandeli on,were identified,and their I C 50values and inhibit ory types were further analyzed .This study thus established a good syste m t o screen inhibit ors of SHP 21and de monstrated the potential of traditi onal Chinese medicines in treat m ent of i m munol ogical diseases and diabetes . Key wo rd s:SH22containing tyr osine phos phatase 1(SHP 21);traditi onal Chinese herb;inhibit or;screening 收稿日期:2008201215. 作者简介:李婉南(1975～),女,汉族,博士,讲师,从事蛋白质酪氨酸结构与功能的研究,E 2mail:wyshshk@https://www.360docs.net/doc/118419369.html,.联系人:付学奇(1960～),男,汉族,博士,教授,博士生导师,从事细胞信号传导与药物筛选的研究,E 2mail:fxq@jlu .edu .cn . 基金项目:吉林省科技发展计划项目基金(批准号:20060563;200705394;20080434). 蛋白质酪氨酸磷酸酶(Pr otein Tyr osine Phos phatase,PTPs )与蛋白质酪氨酸激酶(Pr otein Tyr osine Kinases,PTKs )协同作用,控制着蛋白质酪氨酸的磷酸化过程,调节细胞生长发育,并在细胞信号传导过程中发挥重要作用 [1] ,许多生理和病理现象都与此相关 [2] .研究表明,一些疾病如某些癌症、糖尿 病、白血病、免疫缺陷病、努南氏综合症等正是由于PTPs 的基因突变或异常表达导致的[3,4] ,因此 PTPs 已经成为继PTKs 之后又一个热门的研究领域.SHP 21(SH22Containing Tyr osine Phos phatase 1),又称为HCP,SHPTP1或PTP1C,是含有SH2结构域的具有高度保守序列的蛋白质酪氨酸磷酸酶的亚家
蛋白酪氨酸磷酸酶
蛋白酪氨酸磷酸酶 蛋白酪氨酸磷酸酶（protein tyrosine phosphatase，PTP）是细胞增殖和信号传导的调节过程中，调节蛋白酪氨酸残基磷酸化水平的酶家族。PTP 和蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinase，PTK）及其各自相应的底物协同作用，形成一个复杂的信号传导网络，通过调控蛋白氨基酸残基的磷酸化水平，调节生物体内细胞的生长、分化、代谢过程，参与细胞周期调控、细胞迁移、基因转录和免疫应答等过程。目前的研究发现人类共有112 种PTPs，依据它们的结构分为酪氨酸特异性、双特异性和低分子量磷酸酶，其中蛋白酪氨酸磷酸酶-1B （Protein Tyrosine Phos－phatase-1B，PTP-1B）于1988 年由Tonks 等首次在人的胎盘细胞中分离和纯化得到，属于酪氨酸特异性磷酸酶，依据受体结构可分为受体样PTP-1B 和胞内PTP-1B。PTP-1B 专一水解芳香族磷酸，由435 个氨基酸残基组成，分子量约50ku。其结构中有一个氨基末端催化区和两个富含脯氨酸的模序。PTP-1B 在肌肉、心、肝、睾丸、肾、脾、脑和脂肪等组织中广泛表达，主要集中在细胞浆的内质网的表面。PTP-1B 的N 端为包含半胱氨酸和精氨酸残基的催化中心，朝向胞浆方向；C 端通过35 个特异性氨基酸与内质网相结合，羧基末端水解断裂后从内质网释放出有活性的PTP1B；N 端和C 端之间为两段富含脯氨酸的区域，在PTP1B 与其他蛋白之间的相互作用上发挥重要作用。 PTP-1B DNA 的启动子上有一个转录因子Y 盒结合蛋白-1 的结合位点，它的过度表达可使PTP-1B 的表达水平增加。使用反义寡核苷酸技术减少其表达后，PTP-1B 的表达随之降低，呈正相关趋势。 PTP-1B 在体内没有自身的特异性受体，而是在细胞信号传导过程中，与PTP 家族中的其他成员以及蛋白酪氨酸激酶协同作用，调控蛋白底物中酪氨酸的磷酸化水平，进而对细胞的生长、分化、代谢、基因转录和免疫应答等功能进行调节。 1 PTP-1B 的生理功能 目前研究发现PTP-1B主要表现出以下几个方面的生理功能： （1）与胰岛素受体（insulin receptor ，IR）、胰岛素受体底物（insulin receptor substrate，IRS）等信号蛋白作用，使这些蛋白调节区的酪氨酸残基去磷酸化，进而阻断胰岛素信号级联反应的下传，在胰岛素信号中起着负调控作用。与II 型糖尿病的发生具有密切的联系。 （2）在瘦素信号传导过程中，通过降低转录激活子-3（STAT-3）和Janus 激酶-2（JAK-2）的磷酸化水平，在瘦素信号中起负调控作用。与肥胖的发生具有密切的联系。 （3）PTP-1B 通过与生长因子等底物相互作用，参与细胞生长周期的调节，与肿瘤的发生具有一定的联系。 除此之外，研究还发现PTP-1B 在催乳素信号传导、血小板凝集等方面具有一定的影响。 2 PTP-1B 与糖尿病之间的关系 糖尿病是一类慢性代谢性疾病，随着生活水平的提高，糖尿病的发病率呈逐年上升趋势，成为继心脑血管疾病及癌症之后，威胁人类健康的第三大类疾病。目前已有约 3 亿糖尿病患者，到2030 年，预计患者人数将突破5 亿。根据糖尿病的发病机制，糖尿病可分为I 型糖尿病和II 型糖尿病，其中II 型糖尿病患者超过糖尿病患者总数的80%，主要表现为胰岛素抵抗或胰岛素受体不敏感，分泌胰岛素的胰腺B 细胞数量减少，功能障碍，从而导致糖代谢障碍，血糖水平升高。对PTP-1B 生理功能的研究已经证实，其与胰岛素及瘦素信号传导呈负调节关系，因此PTP-1B 与II 型糖尿病的发病原因关系密切，是开发II 型糖尿病治疗药物的重要靶点之一。 2.1 PTP-1B 胰岛素抵抗：代谢过程中，胰岛素可与脂肪、骨骼肌、肝细胞等细胞的细胞膜上的胰岛素受体胞外亚基结合，进而使受体胞内亚基酪氨酸激酶活化，导致自身及其底物
谷氨酸脱羧酶抗体
谷氨酸脱羧酶抗体 文章目录*一、谷氨酸脱羧酶抗体的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、谷氨酸脱羧酶抗体的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、谷氨酸脱羧酶抗体的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、谷氨酸脱羧酶抗体的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状* 五、谷氨酸脱羧酶抗体的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群 2. 不良反应 谷氨酸脱羧酶抗体的基本信息 1、定义谷氨酸脱羧酶(GAD)是将谷氨酸转化成抑制性神经递质γ氨基丁酸(GABA)的限速酶,在胰岛β细胞中存在GAD,并也合成、分泌GABA。谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)是1型糖尿病发病初期的免疫标志,也作为1型糖尿病患者接受治疗时的疗效监测指标。 谷氨酸脱羧酶(GAD)是将谷氨酸转化成抑制性神经递质γ氨基丁酸(GABA)的限速酶,在胰岛β细胞中存在GAD,并也合成、分泌GABA。谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)是1型糖尿病发病初期的免疫标志,也作为1型糖尿病患者接受治疗时的疗效监测指标;1型糖尿病合并Graves病的患者GADA阳性率明显高于不伴有Graves 病的1型糖尿病患者,Graves病患者GAD水平可明显升高,非糖尿病患者GADA的出现并不总是预测1型糖尿病的发生。
2、专科分类神经 3、检查分类免疫检查 4、适用性别男女均适用 5、是否空腹非空腹 谷氨酸脱羧酶抗体的正常值和临床意义 1、正常值ELISA法:阴性。 2、临床意义异常结果: 阳性:GADA在1型糖尿病发病的早期阳性率为38-76%,I级亲属中的阳性率达78-81%,几乎都是GADA65。而GADA67分布很少,2型糖尿病阳性率仅0-4%。 需要检查的人群:若患突然间患有糖尿病“三多一少”的症状,建议去医院检查谷氨酸脱羧酶抗体。 谷氨酸脱羧酶抗体的检查过程及注意事项 1、检查过程备齐用物,标本容器上贴好标签,核对无误后向患者解释以取得合作。露出患者手臂,选择静脉,于静脉穿刺部位上方约4～6cm处扎紧止血带,并嘱患者握紧拳头,使静脉充盈显
蛋白酪氨酸磷酸酶-1B与糖尿病之间的关系研究
蛋白酪氨酸磷酸酶-1B与糖尿病之间的关 系研究 本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！ 1988年Tonks等首次在人的胎盘细胞中分离和纯化了第一个37kDa的蛋白酪氨酸磷酸酶1B(ProteinTyrosinePhosphatase-1B，PTP-1B)。 PTP1B是一种胞内PTP，位于内质网，在人体的各种组织中都有表达;其与蛋白酪氨酸激酶(ProteinTyrosineKinases，PTK)共同维持着酪氨酸蛋白磷酸化的平衡，参与细胞的信号转导，调节细胞的生长、分化、代谢、基因转录和免疫应答等。 PTP1B属于蛋白质酪氨酸磷酸酶家族，专一水解芳香族磷酸，如磷酸化酪氨酸(phosphotyrosyl，pTyr)残基上磷酸根的酶，通过对胰岛素受体或其底物上的酪氨酸残基去磷酸化作用，对胰岛素信号转导进行负调节，组织细胞中PTP-1B过表达都会降低PTK的活性，使胰岛素受体无法与胰岛素结合，进而引起胰岛素抵抗，最终导致2型糖尿病。
PTP-1BDNA的启动子上有一个转录因子Y盒结合蛋白-1的结合位点，它的过度表达可使PTP-1B的表达水平增加。使用反义寡核苷酸技术减少其表达后，PTP-1B的表达随之降低，呈正相关趋势。 PTP-1B在体内没有自身的特异性受体，而是在细胞信号传导过程中，与PTP家族中的其他成员以及蛋白酪氨酸激酶协同作用，调控蛋白底物中酪氨酸的磷酸化水平，进而对细胞的生长、分化、代谢、基因转录和免疫应答等功能进行调节。 1PTP-1B的生理功能 目前研究发现PTP-1B主要表现出以下几个方面的生理功能： (1)与胰岛素受体(insulinreceptor，IR)、胰岛素受体底物(insulinreceptorsubstrate，IRS)等信号蛋白作用，使这些蛋白调节区的酪氨酸残基去磷酸化，进而阻断胰岛素信号级联反应的下传，在胰岛素信号中起着负调控作用。与II型糖尿病的发生具有密切的联系。
糖尿病抗体三项临床意义
糖尿病抗体三项 糖尿病抗体三项分为：胰岛素自身抗体(IAA)、抗胰岛细胞抗体(ICA)和血清抗谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)三个项目。 1、抗胰岛素自身抗体（IAA）： IAA应为未曾用过外源性胰岛素的病人体内检出可与胰岛素相结合的自身抗体。IAA的产生与I型糖尿病的发生有显著相关性。 2、抗胰岛细胞抗体（ICA）: 在胰岛素依赖型糖尿病患者中，抗胰岛细胞抗体的发生率在90%以上。通常在确诊一年后该抗体水平下降。ICA可更早期发现I型糖尿病。非胰岛素依赖型糖尿病患者出现抗胰岛细胞抗体阳性，可能以后会发生胰岛素依赖型糖尿病（IDDM）。胰岛素依赖型糖尿病（IDDM）或称I～型糖尿病是一种渐进的慢性疾病，IDDM具有一个独特的无症状糖尿病前期，该期甚至可持续多年，在此期间，患者胰岛素的早期释放在静脉注射或口服葡萄糖时表现较弱。对于多数病例来说，这些患者血液中含有胰岛细胞自身抗体（ICA）及/或是胰岛素自身抗体（IAA）。ICA能够在临床表现IDDM症状八年前被检测，所以它可作为IDDM的早期指标及防治手段。ICA阳性的患者表明胰岛功能呈进行性下降，当胰岛素早期释放过程完全终止时，临床出现IDDM病症。在IDDM高发病率的人群中及IDDM患者的亲属中进行ICA的早期检
测是非常重要的。 3、血清抗谷氨酸脱羧酶抗体（GAD）: GAD是使谷氨酸转变为神经质γ-氨基丁酸的生物合成酶，广泛存在于动物及人的脑和胰岛组织中，并认为GAD可能是糖尿病自身免疫反应的始动靶抗原，用于Ⅰ型糖尿病的鉴别诊断和预测。 总之糖尿病为β细胞群高危人群做这三种自身抗体（ICA、IAA和GAD）的筛查，有助于防止或减慢该疾病的发生，血清GADA、ICA和IAA的联合检测对早期、准确诊断1型糖尿病,及时规范治疗、预测B 细胞功能衰竭、预测疗效及在高危人群中筛查1型糖尿病有重要临床意义。
重组植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶活力测定实验
重组植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶活力测定实验 一、实验目的 了解原核表达系统 熟悉并掌握粗酶液的制备方法 熟悉并掌握谷氨酸脱羧酶活力的测定方法 熟悉并掌握超声破碎仪及U-V1100紫外可见分光光度计使用方法 二、实验原理 γ-氨基丁酸（GABA）作为一种非蛋白氨基酸，是目前研究较为深入的哺乳动物脑组织一种重要的抑制性神经递质，具有一系列的生理功能，例如降血压功能、治疗癫痫、抗疲劳、提高免疫力等。 谷氨酸脱羧酶（GAD,EC4.1.1.15）是一种磷酸吡哆醛（PLP）类酶，能专一催化L-谷氨酸脱羧成为γ-氨基丁酸（GABA）和CO2。催化效率——即酶的活力是酶的重要参数，研究酶的活力是研究酶性质及应用的基础。本实验通过测定谷氨酸脱羧酶催化产物γ-氨基丁酸产率来定义谷氨酸催化活力。谷氨酸脱羧酶催化反应式如下： L-谷氨酸谷氨酸脱羧酶（GAD）γ-氨基丁酸（GABA）GAD现行测定方法及优缺点 测定方法优点缺点 HPLC法准确灵敏度高操作复杂、测定时间较长氨基酸自动分析仪法稳定操作简单仪器使用复杂、昂贵 纸层析和薄层层析法方便简单稳定性差、适合定性测量 Berthelot比色法灵敏度高、方便简单有游离氨干扰 毛细管电泳法耗材少，环境污染小重现性较差 根据样品的特性及实验的需要，本实验采用Berthelot法测定反应液中GABA。 GABA的测定方法 采用Berthelot法，该方法利用苯酚和次氯酸钠与氨基反应生成蓝绿色物质(次氯酸钠氧化苯酚生成醌，醌和氨基反应生成蓝绿色物质)。Berthelot法对GABA（ω-氨基酸）的响应高，而对L-谷氨酸（α-氨基酸）响应低，所以用Berthelot法可以快速、高灵敏度测定出催化反应产物中的GABA。通过测定一定时间反应液中的GABA的吸光度值从而得到GABA的浓度，最终计算出谷氨酸脱羧酶的活力。 三、实验材料和主要仪器 1、仪器 MIKRO 220R 2205型低温冷冻离心机
人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA
人谷氨酸脱羧酶自身抗体（GAD-Ab）ELISA试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用 预期应用 ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中GAD-Ab含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中GAD-Ab水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入GAD-Ab抗原、生物素化的抗人GAD-Ab 抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的GAD-Ab呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1.酶联板：一块（96孔） 2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为20000pg/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成2000pg/mL，10000pg/mL，5000pg/mL，2500pg/mL，1250pg/mL，625pg/mL，312pg/mL，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0pg/mL，临用前15分钟内配制。 如配制5000pg/mL标准品：取0.5ml10000pg/mL的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3.样品稀释液：1×20ml/瓶。 4.检测稀释液A：1×10ml/瓶。 5.检测稀释液B：1×10ml/瓶。 6.检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如1ul
抗酪氨酸磷酸酶抗体IgG测定试剂盒(直接化学发光法)产品技术要求北京乐普医疗科技
抗酪氨酸磷酸酶抗体IgG测定试剂盒（直接化学发光法） 适用范围：用于体外定量测定人血清样本中抗酪氨酸磷酸酶抗体（Anti-IA2）IgG 的含量。 1.1 包装规格 25测试/盒、2×25测试/盒、50测试/盒、2×50测试/盒、100测试/盒、200测试/盒。 1.2 主要组成成分 试剂盒主要组分见表1。 表1 试剂盒组成及主要成分
批特异性：各批校准品浓度、质控品的质控范围具有特异性，详见瓶签。
以上校准品（选配1）、校准品（选配2）须选择一项获取校准信息。 2.1 物理性状 2.1.1外观 本试剂盒中的组分齐全、完整，液体试剂澄清，无异物、沉淀物、絮状物和无渗漏；磁分离试剂摇匀后，应为均匀悬浊液，无明显凝集；各组分标签字迹清晰、无破损。校准品、质控品应为淡黄色至无色液体。 2.1.2 装量 液体装量应不少于标示值。 2.2 检出限 检出限应不大于2 IU/mL。 2.3线性 在[2，100]IU/mL范围内，线性相关系数(r)应不低于0.9900。 2.4 准确度 用抗酪氨酸磷酸酶抗体国际标准品(编号：NIBSC 97/550)作为样本进行检测，测定结果与靶值的相对偏差应在±15.0%范围内。 2.5 重复性 检测高、低两个浓度的样本，每个样本各重复检测10次，变异系数（CV）应不大于10.0%。 2.6批间差 用3个批号试剂盒分别检测高、低两个浓度的样本，则3个批号试剂盒之间的变异系数（CV）应不大于15.0%。 2.7 特异性
检测如表2中相应浓度的交叉反应物，抗酪氨酸磷酸酶抗体测定浓度应小于 2 IU/mL。 表2 交叉反应物浓度 2.8 校准品、质控品重复性 2.8.1 校准品变异系数（CV）应不高于10%。 2.8.2 质控品变异系数（CV）应不高于10%。 2.9 质控品赋值有效性 质控品测定结果应在本试剂盒规定的范围内。 2.10 溯源性 应根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》提供所用校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，本产品校准品溯源至抗酪氨酸磷酸酶抗体国际标准品（编号：NIBSC 97/550）。 2.11 稳定性 2.11.1 效期稳定性 将试剂盒在2℃～8℃的环境中放置12个月后，取到期后的试剂盒分别检测2.2、2.3、2.4、2.5、2.7、2.8、2.9项，结果应符合各项目的要求。 2.11.2 校准品、质控品开瓶稳定性
抗谷氨酸脱羧酶抗体抗GAD
抗谷氨酸脱羧酶抗体(抗GAD) 货号:QY-JB015 产品名称:抗谷氨酸脱羧酶抗体（抗GAD） 标本:血清 规格:24T/48T 抗谷氨酸脱羧酶抗体（抗GAD）公司服务：试剂盒免费代测 产品范围:人,小大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽,自身抗体,血栓与止血,骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌,自身抗体科研ELISA检测试剂盒. 待检样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 抗谷氨酸脱羧酶抗体（抗GAD）【检验结果的解释】 1.测定标本OD值≥临界值时为抗体阳性。测定标本OD值<临界值时为抗体阴性。 2.阳性对照OD值不低于1.0且阴性对照OD值不高于0.1时的实验结果有效。否则需重新试验。 【检验方法的局限性】该试验方法仅适用于定性检测和辅助诊断。 【产品性能指标】应使用企业参考品进行检测，其中阴性参考品血清、阳性参考品血清应符合阴阳性参考品血清要求，最低检出限应符合最低检出限血清的检出要求，精密度CV（%）不高于15%，37℃放置6天产品性能稳定。 抗谷氨酸脱羧酶抗体（抗GAD）【注意事项】 1.检测标本尽量避免反复冻融、溶血或长菌，否则可能影响检测结果。 2.不同批号、不同品种试剂不能混用；封板膜不能重复使用。 3.各种试剂使用前要混匀；部分溶液（如洗液等）如有结晶析出，轻微加热或摇匀溶解后不影响使用。 4.请严格按说明书操作，严格控制反应时间和反应温度，各种反应液均需用加液器加注，并经常校对其准确性。 5.反应板开封后不能一次用完时，将剩余板条和干燥剂同时放入塑料袋内封好，置2－8℃可短期保存。 QY-JB053弓形虫抗体(IgG/IgM)规格:24T/48T QY-JB054风疹病毒抗体(IgG/IgM)规格:24T/48T QY-JB055巨细胞病毒抗体(IgG/IgM)规格:24T/48T QY-JB056单纯疱疹病毒I抗体(IgG/IgM)规格:24T/48T QY-JB057瘦肉精(盐酸克伦特罗)规格:24T/48T QY-JB058单纯疱疹病毒I抗体IgG规格:48T/96T QY-JB059单纯疱疹病毒I抗体IgM规格:48T/96T QY-JB060单纯疱疹病毒II抗体IgG规格:48T/96T QY-JB061单纯疱疹病毒II抗体IgM规格:48T/96T QY-JB062巨细胞病毒IgG规格:48T/96T QY-JB063巨细胞病毒IgM规格:48T/96T
2540例糖尿病患者谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、酪氨酸磷酸酶抗体(IA―2A)测定及分析
2540例糖尿病患者谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、酪氨酸磷酸 酶抗体(IA―2A)测定及分析 摘要：目的：研究谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）和酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）在糖尿病诊断分型中的意义。方法：采用酶联免疫吸附试验法检测273例1型糖尿病 （T1DM）（DM ）和2267例2型DM（T2DM）患者的血清GADA和IA-2A表达水平。结果：1型DM患者中的GADA 和IA-2A两种抗体阳性率分别为55.3%（151/273）和49.8%（136/273）。至少一种抗体为阳性的比例为79.1%（216/273），其比例明显高于仅单一抗体阳性的比率（P15岁者的39.0%（106/273）（P0.05）。2型DM患者中的GADA和IA-2A两种抗体阳性率分别为11.8%（267/2267）和4.9%（112/2267）。至少一种抗体为阳性的比例为14.1%（320/2267），两种抗体均为阳性的比例为16.3%（369/2267）。T1DM组患者的两种抗体阳性率及联合检测的阳性率均明显高于T2DM组。结论：GADA和IA-2A是筛查及诊断T1DM患者的主要血清学指标。GA DA主要适用于1型DM及成人自身免疫性胰岛炎患者，而IA-2A主要适用于<15岁的年幼T1DM患者的诊断。 关键词：糖尿病；谷氨酸脱羧酶抗体；蛋白酪氨酸磷酸
酶抗体 经研究发现，1型DM患者的血液中可检测出谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗体（IA-2A）等多种自身免疫抗体，而这些自身抗体的异常表达可损伤人体胰岛β细胞，导致其不能正常分泌胰岛素。本研究分析了2540例DM患者GADA和IA-2A的表达水平，旨在探讨不同类型DM患者血清中上述两种抗体的分布特征及其临床意义，现报道如下。 1资料与方法 1.1一般资料选择2010年1月-2014年6月于我院内分泌科诊治的DM患者2540例，其中，男1130例，女1410例，年龄6-82岁。所有患者均根据1996年WHO糖尿病诊断标准确诊。根据类型不同，分为两组：1型DM组273例和2型DM组2267例。排除特异性和继发性的糖尿病患者及相关内分泌疾病。两组患者在性别构成比较无统计学差异。 1.2研究方法抽取受试者空腹肘静脉血，离心获得血清后，-20℃冻存备用。采用酶联免疫吸附法检测GADA和 IA-2A的表达水平，所有操作步骤均严格按照试剂盒说明书进行。 1.3 统计学方法采用SPSS 13.0统计软件包进行数据分析。P<0.05为差异有统计学意义。。