淋巴细胞亚群检测PPT参考幻灯片
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《医学免疫学实验课件——淋巴细胞亚群》
4
NK细胞
自然杀伤细胞，直接攻击病原体与癌细胞。
淋巴细胞亚群的检测方法
流式细胞术
通过细胞表面标记物的特异 性反应性，将淋巴细胞亚群 进行特异鉴定。
酶联免疫吸附法
通过酶标记物的活性，测定 血清、淋巴细胞上特定的淋 巴细胞亚群成分。
分子生物学技术
检测DNA/RNA基因亚型和表 达，以及mRNA的编码水平 等。
《医学免疫学实验课件— —淋巴细胞亚群》
淋巴细胞亚群是指免疫系统中基于适体受体组成和功能特点的淋巴细胞亚群。 本课件将为您详细介绍淋巴细胞亚群的定义、功能、检测与应用。
淋巴细胞亚群的分类
1
CD4 T细胞
协调免疫反应，对抗病原体和癌细胞。
2
CD8 T细胞
杀伤感染人体细胞的病原体和肿瘤细胞。
3
B细胞
产生和分泌抗体来对抗病原体。
1 深入了解淋巴细胞亚群的意义
可以更好地理解免疫系统的机制和调控。
2 未来研究发展方向
通过基因编辑技术和药物干预等手段，深入探讨淋巴细胞亚群的功能、 调控和临床应用。
通过检测淋巴细胞亚群水平的 变化，可指导诊断疾病类型和 预测疾病的预后。
免疫治疗策略
通过调节、增强或抑制淋巴细 胞亚群的功能，来治疗感染性 疾病、免疫性疾病和实体瘤。
淋巴细胞亚群与疾病的关系
CD4 T细胞下降
HIV/AIDS SLE 一些恶性肿瘤
疾病类型
免疫系统疾病 自身免疫疾病 肿瘤性疾病
总结与展望
淋巴细胞亚群的功能和特点
CD4 T细胞
协பைடு நூலகம்免疫反应，参与细胞免疫和 体液免疫。
CD8 T细胞
杀伤感染人体细胞的病原体和肿 瘤细胞。
淋巴细胞亚群.pptx
1) 免疫应答中发挥多种功能；
1
Killer T Lymphocyte) NKT 细胞 gdT gdT 细胞
CD3+TCRgd+CD4-CD8-
2)分泌：IFN-g/TNF 或 IL-4/IL-13
1) 参与上皮细胞免疫；2)细胞 毒作用；3)分泌：IFN-g, TNF
B 淋巴细胞亚群
淋巴细胞亚群 Naive B Cells 初始型 B 细胞 Memory B Cells 记忆型 B 细胞 Switched Memory 类别转换记忆型 B 细胞 Plasma Cells 奖细胞
Hale Waihona Puke IFN-g T-bet+ IL-4 GATA-3+
1) 细胞介导免疫；2)巨噬细胞 活化；3) 分泌：IFN-g, TNF 1) 辅助 B 细胞；2) 介导过敏 性炎症；3) 分泌：IL-4, IL-15,
IL-13
Th17
CD3+CD4+
(Th17 型细胞)
Treg (regulatory T CD3+CD4+CD25+
IL-17 RORgt+ Foxp3+
1)炎症反应；2) 机体防御；3) 分泌：IL-17, IL-17F, TNF 1) 接触依赖性抑制；2) 分泌：
cells) 调节性 T 细胞 Tr1 (regulatory T CD3+CD4+
IL-10
TGF-b, IL-10 1) 免疫调节；2)高分泌：IL-10
表型 CD19+IgM+IgD+ CD19+CD27+IgM+ CD19+CD27+IgMCD38+CD138+
1
Killer T Lymphocyte) NKT 细胞 gdT gdT 细胞
CD3+TCRgd+CD4-CD8-
2)分泌：IFN-g/TNF 或 IL-4/IL-13
1) 参与上皮细胞免疫；2)细胞 毒作用；3)分泌：IFN-g, TNF
B 淋巴细胞亚群
淋巴细胞亚群 Naive B Cells 初始型 B 细胞 Memory B Cells 记忆型 B 细胞 Switched Memory 类别转换记忆型 B 细胞 Plasma Cells 奖细胞
Hale Waihona Puke IFN-g T-bet+ IL-4 GATA-3+
1) 细胞介导免疫；2)巨噬细胞 活化；3) 分泌：IFN-g, TNF 1) 辅助 B 细胞；2) 介导过敏 性炎症；3) 分泌：IL-4, IL-15,
IL-13
Th17
CD3+CD4+
(Th17 型细胞)
Treg (regulatory T CD3+CD4+CD25+
IL-17 RORgt+ Foxp3+
1)炎症反应；2) 机体防御；3) 分泌：IL-17, IL-17F, TNF 1) 接触依赖性抑制；2) 分泌：
cells) 调节性 T 细胞 Tr1 (regulatory T CD3+CD4+
IL-10
TGF-b, IL-10 1) 免疫调节；2)高分泌：IL-10
表型 CD19+IgM+IgD+ CD19+CD27+IgM+ CD19+CD27+IgMCD38+CD138+
《淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中应用的专家共识》解读PPT课件
免疫荧光技术
利用荧光标记的抗体与细 胞内相应抗原结合，通过 荧光显微镜或流式细胞仪 进行检测。
基因表达谱分析
采用高通量测序技术，检 测淋巴细胞亚群的基因表 达谱，以揭示其功能和活 性状态。
检测指标与参考值范围
T细胞亚群指标
01
CD4+/CD8+比值、CD4+ T细胞绝对计数等，参考值范围因年
龄、性别等因素而异。
NK/T细胞淋巴瘤中NK细胞和T细胞功能受损：影响对肿瘤细胞的杀伤作用和免疫调 节功能。
多发性骨髓瘤中淋巴细胞亚群变化
T细胞亚群失衡
多发性骨髓瘤患者常出现CD4+/CD8+比值倒置，提示免疫功能 受损。
B细胞异常增生与功能异常
多发性骨髓瘤患者浆细胞异常增生，分泌大量异常免疫球蛋白，导 致正常免疫功能受损。
05 挑战与问题讨论
技术局限性及影响因素
样本质量
样本的采集、保存和处理过程可能影响淋巴细 胞亚群的检测结果。
检测方法
不同的检测方法（如流式细胞术、免疫组化等 ）在准确性、灵敏度和分辨率方面存在差异。
抗体选择
抗体的特异性、亲和力和交叉反应等因素可能影响结果的准确性。
结果解读差异性与标准化需求
参考范围
标准化与规范化
强调检测标准化和规范化对于提高检测准确 性和可比性的重要性。
检测方法选择
总结各种淋巴细胞亚群检测方法的优缺点， 提出适用场景和建议。
临床应用场景
回顾淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤临床应用 中的具体场景和案例。
对未来发展趋势进行展望
01
新技术与方法
关注新型检测技术与方法的发展 及其在淋巴细胞亚群检测中的应
根据淋巴细胞亚群检测结果，及 时调整治疗方案，提高治疗效果 。
《淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中应用的专家共识》解读PPT课件
指外周血中不同表型和功 能的淋巴细胞群体，包括T 细胞、B细胞、NK细胞等 。
T细胞亚群
包括CD4+T细胞、CD8+T 细胞等，参与细胞免疫应 答。
B细胞亚群
包括成熟B细胞、记忆B细 胞等，参与体液免疫应答 。
淋巴细胞亚群检测方法
流式细胞术
通过特异性抗体标记淋巴细胞表 面抗原，利用流式细胞仪进行检
01 引言
目的和背景
提高血液肿瘤诊疗水平
通过解读专家共识，帮助临床医生更深入地了解淋巴细胞亚群检 测在血液肿瘤中的应用，从而提高血液肿瘤的诊疗水平。
规范淋巴细胞亚群检测
明确淋巴细胞亚群检测的方法、指标及临床意义，推动其在血液肿 瘤领域的规范化应用。
推动个体化治疗
通过深入了解淋巴细胞亚群与血液肿瘤发生、发展的关系，为制定 个体化治疗方案提供依据。
白血病中淋巴细胞亚群变化
T细胞亚群失衡
急性白血病患者外周血中CD4+ T细胞比例下降，CD8+ T细胞比 例上升，导致CD4+/CD8+比值
倒置。
B细胞异常增生
慢性淋巴细胞白血病患者外周血 中成熟B细胞异常增生，CD19+ 、CD20+和CD23+ B细胞比例
升高。
NK细胞活性降低
白血病患者NK细胞数量减少， 活性降低，不能有效杀伤白血病
实验室应建立完善的质量控制体系，并定期进行室内质控和室间质评，以确保检测结果的准确性和可靠 性。
结果解读难点及对策
结果复杂多样
淋巴细胞亚群检测结果涉及多个指标和参数 ，解读难度较大，需要专业人员进行分析和 判断。
建立解读规范
为提高结果解读的准确性和一致性，应建立统一的 解读规范和标准，包括参考范围、异常值判定和临 床意义等方面。
T细胞亚群
包括CD4+T细胞、CD8+T 细胞等，参与细胞免疫应 答。
B细胞亚群
包括成熟B细胞、记忆B细 胞等，参与体液免疫应答 。
淋巴细胞亚群检测方法
流式细胞术
通过特异性抗体标记淋巴细胞表 面抗原，利用流式细胞仪进行检
01 引言
目的和背景
提高血液肿瘤诊疗水平
通过解读专家共识，帮助临床医生更深入地了解淋巴细胞亚群检 测在血液肿瘤中的应用，从而提高血液肿瘤的诊疗水平。
规范淋巴细胞亚群检测
明确淋巴细胞亚群检测的方法、指标及临床意义，推动其在血液肿 瘤领域的规范化应用。
推动个体化治疗
通过深入了解淋巴细胞亚群与血液肿瘤发生、发展的关系，为制定 个体化治疗方案提供依据。
白血病中淋巴细胞亚群变化
T细胞亚群失衡
急性白血病患者外周血中CD4+ T细胞比例下降，CD8+ T细胞比 例上升，导致CD4+/CD8+比值
倒置。
B细胞异常增生
慢性淋巴细胞白血病患者外周血 中成熟B细胞异常增生，CD19+ 、CD20+和CD23+ B细胞比例
升高。
NK细胞活性降低
白血病患者NK细胞数量减少， 活性降低，不能有效杀伤白血病
实验室应建立完善的质量控制体系，并定期进行室内质控和室间质评，以确保检测结果的准确性和可靠 性。
结果解读难点及对策
结果复杂多样
淋巴细胞亚群检测结果涉及多个指标和参数 ，解读难度较大，需要专业人员进行分析和 判断。
建立解读规范
为提高结果解读的准确性和一致性，应建立统一的 解读规范和标准，包括参考范围、异常值判定和临 床意义等方面。
淋巴细胞亚群检测的临床应用ppt课件
-发挥抗独特型抗体的免疫调节
-防御细胞外病原体(细菌)，以抗体介导，促使 巨噬细胞和补体系统活化，ADCC -Th2(IL-4,IL-5)
-T细胞活化先天性免疫系统的防御机制，如
巨噬细胞 -Th1(IFN-α)
何时检测“淋巴细胞亚群”？
•评价免疫功能（血常规、Ig、补体、淋巴细胞亚群）
术前； 新生儿筛查（原发性免疫缺陷病）； 体检
Surface immunoglobulin (sIg) for B-cells
流式细胞仪检测原理
Surface immunoglobulin (sIg) for B-cells
流式细胞术的特点
流式细胞术：利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参
数、快速的定量分析及分选的技术
•诊断免疫相关疾病（如HIV初筛有反应时） •免疫治疗疗效观察 •出现免疫功能低下症状时检测
1、经常感到疲劳； 2、经常感冒； 3、伤口容易感染； 5、易受到传染病的侵袭； 8、爱做梦（恶梦）
4、肠胃功能下降；自身保护能力差； 6、精神萎靡； 7、易昏睡
9、身心憔悴
Sheep erythrocyte rosetter ( E-rosettes) for T-cells
流式细胞术 = 细胞荧光化学技术+单克隆抗体技术+激光技术+流体力学+光
ห้องสมุดไป่ตู้
电测量技术+计算机技术
测量速度快：最快可在1秒种内检测上万个细胞 可进行多参数测量：可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测
量 具有明显的统计学意义：提供细胞群体的均值和分布情况 高分辨率(CV<2%)、高灵敏度(荧光检测灵敏度≤100MESF，前向角散射光检 测灵敏度(0.2∼0.5um) 既是细胞分析技术，又是精确的分选技术，分选纯度可达99%以上
TBNK淋巴细胞亚群的临床应用PPT课件
关键词：肝炎，乙型慢性；Ｔ淋巴细胞亚群；ＣＤ４＋Ｔ细胞；ＣＤ８ ＋Ｔ细胞
15
呼吸内科
肺结节病、原发性肺间质纤维化以及哮喘 等疾病中T淋巴细胞亚群检测也是有很大的 临床意义 儿科
小儿感冒、哮喘等患者 消化内科 研究发现疣状胃炎的发生与免疫系统紊乱 有关，HP、病毒感染可能是导致免疫紊乱 的病因 精神科 杭州第七人民医院常规开展
机
以使B淋巴细胞产生抗体为特征，抗
体
体是一种特异性地识别并结合外来物
免
质并将其清除出体内的免疫球蛋白
疫
系
细胞免疫系统
统
以使T淋巴细胞成为能特异性地识别并
直接攻击外来物质（包括病毒、细菌及
异体组织）的杀伤细胞为特征
8
体液免疫反应
9
细胞免疫反应（举例）
10
11
什么是淋巴细胞的活化状态
• 大部分淋巴细胞处于“休眠”状态(在细胞周期的 G0期)
着病情进展，由慢性肝炎→肝硬化→肝癌，细胞免疫功能逐渐衰退。慢性
HBV感染的不同阶段的细胞免疫紊乱各具特点，就不同类型患者应采用不
同的免疫调节治疗手段。
14
拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者后外周血Ｔ淋巴细胞亚群的 变化研究 2013年
杭双熊，申红玉△，陈 敏，王永忠，濮翔科（江苏省常州市第三人民 医院肝病研究所 213001）
T细胞表面抗原 CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD3+CD4+/CD3+CD8+ B细胞表面抗原 CD19+ NK细胞表面抗原 CD16+CD56+
TBNK各个亚群在各种临床疾病如病毒感染、自身免疫性 疾病、免疫缺陷性疾病、变态反应性疾病、再生障碍性 贫血、恶性肿瘤等都有异常改变
15
呼吸内科
肺结节病、原发性肺间质纤维化以及哮喘 等疾病中T淋巴细胞亚群检测也是有很大的 临床意义 儿科
小儿感冒、哮喘等患者 消化内科 研究发现疣状胃炎的发生与免疫系统紊乱 有关，HP、病毒感染可能是导致免疫紊乱 的病因 精神科 杭州第七人民医院常规开展
机
以使B淋巴细胞产生抗体为特征，抗
体
体是一种特异性地识别并结合外来物
免
质并将其清除出体内的免疫球蛋白
疫
系
细胞免疫系统
统
以使T淋巴细胞成为能特异性地识别并
直接攻击外来物质（包括病毒、细菌及
异体组织）的杀伤细胞为特征
8
体液免疫反应
9
细胞免疫反应（举例）
10
11
什么是淋巴细胞的活化状态
• 大部分淋巴细胞处于“休眠”状态(在细胞周期的 G0期)
着病情进展，由慢性肝炎→肝硬化→肝癌，细胞免疫功能逐渐衰退。慢性
HBV感染的不同阶段的细胞免疫紊乱各具特点，就不同类型患者应采用不
同的免疫调节治疗手段。
14
拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者后外周血Ｔ淋巴细胞亚群的 变化研究 2013年
杭双熊，申红玉△，陈 敏，王永忠，濮翔科（江苏省常州市第三人民 医院肝病研究所 213001）
T细胞表面抗原 CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD3+CD4+/CD3+CD8+ B细胞表面抗原 CD19+ NK细胞表面抗原 CD16+CD56+
TBNK各个亚群在各种临床疾病如病毒感染、自身免疫性 疾病、免疫缺陷性疾病、变态反应性疾病、再生障碍性 贫血、恶性肿瘤等都有异常改变
淋巴细胞亚群检测在儿科的应用免疫课件PPT资料
7《6医%学。综细述》胞2000表年第6面卷第出7期 现了来自病毒等病原体的小分子蛋白质 抗原，并与细胞表面的受体结合成复合物时，T细 ③此外，在传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、流行性出血热、麻疹急性期、水痘、猩红热和一些上呼吸道感染的患者均可表
现为CD4细胞下降，CD8细胞升高以及CD4 /CD8比值下降。 从作用方式上看，体液免疫是通过效应B细胞（浆细胞）分泌抗体，并与抗原发生特异性结合来清除抗原；
SARS患者T淋巴细胞亚群变化的初步研究 (中西医救治专题 陈文莉)
SARS患者早期出现CD3+，CD4+，CD8+明显降 低，且CD4+/CD8+比值下降甚至倒置，提示 SARS患者早期即存在免疫抑制现象，这一现象 提醒我们早期使用免疫抑制作用的治疗方法应 当慎重，用药时间不宜长，应避免用超大剂量 激素（如甲基强的松龙（MP）＞0.5g/d）冲击 疗法。
CD3+CD4+（Th/Ti细胞） 补体、吞噬功能等检查，也应注意有无顽固湿疹、血小板减少、共济失调、毛细血管扩张等异常。
毒等抗原，只有当病毒或胞内寄生菌侵入宿主细胞， 53% (27%~51% ), CD8+ 0.
免疫重建的时间与预后的关系密切,如果在出生3个月内进行造血干细胞移植存活率接近95%,如果在出生3个月后进行移植则存活率降至
通过流式细胞仪对肾移植术后受者外周 血T细胞亚群进行动态监测，结果显示肾移植 术后发生排斥反应时，CD3 , CD4细胞及CD4 /CD8比值均升高，经激素冲击治疗有效的患 者CD3, CD4细胞及CD4 /CD8比值逐渐下降， 而CD3 , CD4细胞及CD4 /CD8比值居高不降 者说明激素冲击治疗无效。
(1)低碘组(LI):摄碘量<1μg/d; (2)适碘组(NI):摄碘量为6·15μg/d; (3)5倍碘组(5HI):摄 碘量为30·75μg/d; (4)10倍碘组(10HI):摄碘量为61·50μg/d; (5)50倍碘组(50HI):摄碘 量为307·50μg/d; (6) 100倍碘(100HI):摄碘量为615·00μg/d。
现为CD4细胞下降，CD8细胞升高以及CD4 /CD8比值下降。 从作用方式上看，体液免疫是通过效应B细胞（浆细胞）分泌抗体，并与抗原发生特异性结合来清除抗原；
SARS患者T淋巴细胞亚群变化的初步研究 (中西医救治专题 陈文莉)
SARS患者早期出现CD3+，CD4+，CD8+明显降 低，且CD4+/CD8+比值下降甚至倒置，提示 SARS患者早期即存在免疫抑制现象，这一现象 提醒我们早期使用免疫抑制作用的治疗方法应 当慎重，用药时间不宜长，应避免用超大剂量 激素（如甲基强的松龙（MP）＞0.5g/d）冲击 疗法。
CD3+CD4+（Th/Ti细胞） 补体、吞噬功能等检查，也应注意有无顽固湿疹、血小板减少、共济失调、毛细血管扩张等异常。
毒等抗原，只有当病毒或胞内寄生菌侵入宿主细胞， 53% (27%~51% ), CD8+ 0.
免疫重建的时间与预后的关系密切,如果在出生3个月内进行造血干细胞移植存活率接近95%,如果在出生3个月后进行移植则存活率降至
通过流式细胞仪对肾移植术后受者外周 血T细胞亚群进行动态监测，结果显示肾移植 术后发生排斥反应时，CD3 , CD4细胞及CD4 /CD8比值均升高，经激素冲击治疗有效的患 者CD3, CD4细胞及CD4 /CD8比值逐渐下降， 而CD3 , CD4细胞及CD4 /CD8比值居高不降 者说明激素冲击治疗无效。
(1)低碘组(LI):摄碘量<1μg/d; (2)适碘组(NI):摄碘量为6·15μg/d; (3)5倍碘组(5HI):摄 碘量为30·75μg/d; (4)10倍碘组(10HI):摄碘量为61·50μg/d; (5)50倍碘组(50HI):摄碘 量为307·50μg/d; (6) 100倍碘(100HI):摄碘量为615·00μg/d。
淋巴细胞亚群 ppt课件
3.4±2.96 10.2±5.14 48.8±11.6 15.1±8.8 44.9±12.5 41.9±16.7 22.3±14.8
2230±478 252±72 371±196
1543±358 849±288
579±175
483±200
368±162 368±162 785±265
31±39 86±50 291±101 99±79 271±114 356±203 146±109
1.6±1.3 1.8±1 1.536±0.589
结果分析： 1)淋巴细胞总数，
T淋巴细胞计数 NK细胞计数 B淋巴细胞 2）CD4＋T细胞比例及计数 CD8＋T细胞比例及计数 CD4＋T/CD8＋T比例 3) 第二信号受体CD28 4）细胞免疫异常激活：
5
外周血淋巴细胞亚群
外 T淋巴细胞
周
CD3+
20C2D08/+1K1i6/71+3/CD8+
CD4/CD8
测定值
百分比
绝对值 （细胞／mm3)
正常参考值 ( 平均值±标准差）
百分比
绝对值 （细胞／mm3)
32.6±4.68 11.5±3.02 16.5±7.00 69.7±7.06
38±8.0
26.4±7.23
57.0±11.41
43.0±11.41 43.0±11.41 93.1±8.08
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
报告单
白细胞 血淋巴细胞 Ｂ淋巴细胞 CD19+ 自然杀伤细胞 CD16+CD56+ Ｔ淋巴细胞 CD3+ Ｔ辅助细胞 CD3+CD4+ Ｔ抑制／细胞毒细胞 CD3+CD8+ 记忆T4细胞 CD4+CD45RA-/CD4+ Naive细胞 CD4+CD45RA+/CD4+ CD4+CD45RA+62L+/CD4+ CD4+CD28+/CD4+ CD4+CD25+/CD4+ CD4+DR+/CD4+ CD8+CD28+/CD8+ CD8+DR+/CD8+ CD8+CD38+/CD8+ CD4+CD95+/CD4+ CD8+CD95+/CD8+ CD8+CD57+/CD8+ CD4+Ki67+/CD4+
2230±478 252±72 371±196
1543±358 849±288
579±175
483±200
368±162 368±162 785±265
31±39 86±50 291±101 99±79 271±114 356±203 146±109
1.6±1.3 1.8±1 1.536±0.589
结果分析： 1)淋巴细胞总数，
T淋巴细胞计数 NK细胞计数 B淋巴细胞 2）CD4＋T细胞比例及计数 CD8＋T细胞比例及计数 CD4＋T/CD8＋T比例 3) 第二信号受体CD28 4）细胞免疫异常激活：
5
外周血淋巴细胞亚群
外 T淋巴细胞
周
CD3+
20C2D08/+1K1i6/71+3/CD8+
CD4/CD8
测定值
百分比
绝对值 （细胞／mm3)
正常参考值 ( 平均值±标准差）
百分比
绝对值 （细胞／mm3)
32.6±4.68 11.5±3.02 16.5±7.00 69.7±7.06
38±8.0
26.4±7.23
57.0±11.41
43.0±11.41 43.0±11.41 93.1±8.08
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
报告单
白细胞 血淋巴细胞 Ｂ淋巴细胞 CD19+ 自然杀伤细胞 CD16+CD56+ Ｔ淋巴细胞 CD3+ Ｔ辅助细胞 CD3+CD4+ Ｔ抑制／细胞毒细胞 CD3+CD8+ 记忆T4细胞 CD4+CD45RA-/CD4+ Naive细胞 CD4+CD45RA+/CD4+ CD4+CD45RA+62L+/CD4+ CD4+CD28+/CD4+ CD4+CD25+/CD4+ CD4+DR+/CD4+ CD8+CD28+/CD8+ CD8+DR+/CD8+ CD8+CD38+/CD8+ CD4+CD95+/CD4+ CD8+CD95+/CD8+ CD8+CD57+/CD8+ CD4+Ki67+/CD4+
淋巴细胞亚群PPT参考课件
•
• 继发：肿瘤、药物、营养不良
9
理想的B细胞靶向治疗应为清除病理性B细胞和/或促进保护性B细胞的 扩增和功能。
10
Anti-CD20
抗CD20单抗治疗
11
淋巴细胞亚群监测在抗CD20单抗治疗中的临床 指导意义
初始治疗 B细胞显著增多→应用价值； CD4+T细胞显著减少→应用风险；
表面标志物：CD3-CD16+CD56+；
13
T淋巴细胞 －从基础到临床
T淋巴细胞：CD3-TCR复合体→识别MHC-抗原肽复合物 CD3+/CD4+：辅助性T细胞（Th）
→分泌细胞因子，调节免疫应答 CD3+/CD8+：细胞毒T细胞（Ts）→杀伤靶细胞、抑制功能
• 双重识别：MHC限制性： MHC-II / CD4；MHC-I / CD8； • I类分子表达于所有有核细胞表面—提呈内源性抗原（病毒、胞内病原体、肿瘤） II类分子表达于专职APC、胸腺上皮细胞－提呈外源性抗原
活提示微生物感染（如HIV、CMV和EBV等），激 活的程度与感染的严重程度密切相关。
19
CD3+T淋巴细胞
CD3增高，见于甲状腺功能亢进、甲状腺炎、重症
肌无力、器官移植后排斥反应、慢性活动性肝炎、 瘤型麻风、恶性肿瘤、ALL、SLE等
X连锁无丙种球蛋白血症 XLA 外周血和淋巴组织中B 细胞减少或缺失，Ig缺乏 男性婴幼儿，6~9月发病，反复化脓性感染 普通变异性免疫缺陷病CVID IgG显著低下，B细胞减少或正常，naïve T减少 青壮年，反复化脓性呼吸道感染 选择性IgA缺陷、选择性IgG亚类缺陷 高IgM综合征
X连锁重症联合免疫缺陷SCID T细胞和NK细胞减少，B细胞可正常 新生儿、婴幼儿，病毒、PCP、念珠菌、败血症
淋巴细胞及其亚群检测的临床意义ppt课件
淋巴细胞具有多种功能，包括细胞免疫、体液免疫和信号传 导等。它们通过释放细胞因子、抗体和其他化学物质来调节 免疫反应，并与其他免疫细胞相互作用，共同维护机体的免 疫平衡。
淋巴细胞的分类和特点
淋巴细胞主要包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等。T淋巴细胞主要 负责细胞免疫，B淋巴细胞主要负责体液免疫，NK细胞主要负责非特异 性免疫。
VS
跨学科合作
加强免疫学、肿瘤学、病理学等多个学科 之间的合作，推动淋巴细胞亚群检测与其 他生物标志物的联合应用研究，以实现更 广泛的临床应用和转化。
THANKS
案，确保患者的安全和疗效。
感染性疾病的辅助诊断
• 感染性疾病是指由病原体感染引起的疾病，如细菌、病毒、真菌等引起的感染 。淋巴细胞亚群检测可以为感染性疾病的辅助诊断提供有价值的信息。
• 在感染性疾病中，淋巴细胞亚群检测可以反映机体对病原体的免疫应答反应。 通过检测不同淋巴细胞亚群的数目和功能变化，可以了解感染的严重程度、病 程进展和预后情况。这些信息有助于医生制定合适的治疗方案，提高感染性疾 病的治愈率。
免疫组织化学检测是一种利用抗原-抗体反应原理，对组织 或细胞内的抗原进行定位和定性分析的方法。通过免疫组 织化学检测，可以了解淋巴细胞亚群的分布和表达的分子 标志物，进而评估其在疾病发生和发展中的作用。
免疫组织化学检测具有高特异性、高灵敏度和可定量分析 等优点，因此在病理学诊断和研究中广泛应用。
基因表达谱检测
淋巴细胞及其亚群检测的临床意义
$number {01} 汇报人：可编辑
2024-01-11
目录
• 淋巴细胞概述 • 淋巴细胞亚群的检测方法 • 淋巴细胞亚群检测的临床意义 • 淋巴细胞亚群检测的未来展望
《淋巴细胞亚群》课件
免疫组织化学检测方法
总结词
直观、特异性好、可定位
详细描述
免疫组织化学检测方法是一种通过抗体与抗原的特异性结合，对淋巴细胞亚群进 行定位和定量的检测方法。该方法可以将淋巴细胞亚群定位在组织切片中，并对 其表达的特定抗原进行检测，具有直观、特异性好、可定位等优点。
基因表达谱检测方法
总结词
全面、深入、高通量
淋巴细胞亚群与肿瘤
肿瘤免疫逃逸机制
肿瘤通过多种机制逃避身体的免疫攻击，其中淋巴细胞亚 群的异常功能和分布发挥了重要作用。
肿瘤微环境中的淋巴细胞亚群
不同类型的淋巴细胞亚群在肿瘤微环境中具有不同的功能和作用 。例如，肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）可以促进或抑制肿瘤的生长，
具体取决于其亚型和功能状态。
免疫治疗策略
详细描述
基因表达谱检测方法是一种通过对淋巴细胞亚群基因表达谱进行分析的检测方法。该方 法可以对淋巴细胞亚群在不同生理和病理状态下基因表达情况进行全面、深入的研究， 具有高通量、高分辨率的特点。通过基因表达谱检测，可以深入了解淋巴细胞亚群的功
能和分化过程，为淋巴细胞相关疾病的诊断和治疗提供有力支持。
05
淋巴细胞亚群在自身免疫性疾病中的角色
不同类型的淋巴细胞亚群在自身免疫性疾病中发挥不同的作用。例如，辅助性T细胞17和 调节性T细胞在类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病中的功能和平衡被破 坏，导致疾病的发生和发展。
治疗策略的探索
针对淋巴细胞亚群的靶向治疗是当前研究的热点，旨在调节异常的免疫反应并控制自身免 疫性疾病的进展。
B淋巴细胞亚群
根据功能和表型的不同， 可分为浆细胞、记忆B细 胞和未成熟B细胞等。
NK细胞亚群
根据表型和功能的不同， 可分为CD56bright和 CD56dim等。
流式淋巴细胞亚群检测技术原理ppt课件
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5
检测原理
免疫荧光染色主要有两种方法。间接标记的方法难以进 行多色标记，而且操作复杂，所以一般首选直接荧光染 色
荧光抗体
第一抗体
荧光二抗
直接标记
间接标记
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6
常用荧光素
<499nm 蓝色荧光（Blue） 500-549nm，绿色荧光（Green） 550-584nm，黄色荧光（Yellow） 585-615nm，橙色荧光（Orange） 616-700nm，红色荧光（Red） ≥700nm，远红外荧光（Far-Red）
3
检测方法
采用流式细胞术（FCM） 是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个
细胞(或生物学颗粒)的理化特性进行多参数定量分析和分 选的技术
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4
FCM
检测对象：单细胞悬液或生物颗粒； 检测参数：多参数； 检测特点：单细胞水平分析； 检测速度：高速，最高达上万个细胞/秒； 检测结果：精度高、准确性好； 可对目标细胞进行分选；
B 细胞
GM-CSF, TGF-
CD8+ 抗原肽+ 感染病毒的 FasL 穿孔素, 粒酶，IFN-, -细胞免疫
CTL I 类分子 靶细胞
TNF-, TNF-
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19
可编辑课件PPT
20
T4细胞增高
提示体内存在细菌等病原微生物感染，主要见于临床各种 细菌性感染性疾病。
器官移植发生排斥反应 支气管哮喘 SLE活动期 某些免疫增强药物的有效结果 注意:昼夜变化（傍晚的峰值可为上午的两倍）
淋巴细胞亚群检测
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1
目录
1 淋巴细胞的分类 2 淋巴细胞亚群检测方法 3 淋巴细胞亚群检测原理 4 淋巴细胞亚群的免疫功能 5 淋巴细胞亚群的临床意义
淋巴细胞亚群及其临床意义-PPT
一、初始T细胞、效应T细胞与记忆T 细胞
• 初始T细胞 – 表型:CD45RA+、 CD62L+、CD25-(IL-2R) – 特点:未接触抗原得成熟T细胞,有分化潜能
• 效应T细胞 – 迁往炎症部位,执行细胞免疫效应
• 记忆性T细胞 – 表型:CD45RO+、CD25+(IL-2R) – 特点:存活期长,接受抗原刺激后可迅速活化
大家学习辛苦了,还就是要坚持
继续保持安静
抑制性T细胞(Ts)
• 主要表面标志:CD8+CD28• 功能:对免疫应答有重要得负调节功能,抑制
性T细胞功能得异常,常与T自身免疫性疾病 、第I型超敏反应等疾病发生有关。
调节性T细胞(Treg)
• 主要表面标记:CD4+CD25+ • 功能:抑制免疫应答 • 可能得机制有:
CD4+/CD8+得比值
• 评价那些自身免疫失调或被怀疑就是免疫 失调或已知患有免疫缺陷得病人得免疫状 态,此外,这一比值还可用来监测骨髓移植病 人以免受到急性GVHD得攻击 CD4/CD8 升高:自身免疫性疾病,如类风湿性 关节炎、SLE。 CD4/CD8 降低:病毒感染、恶性肿瘤、再生 障碍性贫血等。
淋巴细胞亚群及其临床意义
分类方法
• 按其抗原识别受体(TCR)
– T细胞得特有标志(TCR):TCRαβT细胞、 TCRγδT细胞
– T细胞重要表面标志(CD4/CD8):CD4+T细胞 、CD8+T细胞
• 按活化状态
初始T细胞、效应T细胞、记忆T细胞
• 按T细胞免疫效应功能
辅助性T细胞(Th)、细胞毒性T细胞(Tc/CTL)、 调节性T细胞(Treg)、抑制性T细胞(Ts)、迟发 型超敏反应性T细胞(TDTH)等。
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15
如何解读“淋巴细胞亚群”报告
16
解读原则：
1、综合判断， CD4+%、CD8+%、CD4+/CD8+：初步评估机体免疫状态，快速便利
2、结合血常规结果，同时关注百分比和绝对数
3、当CD4+/CD8+比例倒置时，一定要确认是CD4+细胞绝对数降低， 还是CD8+细胞绝对数增加所致，两种情况的临床意义不同
B淋巴细胞针对细胞外的细菌病原体，引发吞噬作用，介导体液免疫 T淋巴细胞抵抗细胞内复制的病原体（病毒、结核菌），介导细胞免疫
5
T细胞与B细胞系统的特性(共性：产生记忆细胞）
T细胞系统（cell mediated mmunity,CMI) B细胞系统(humoral immunity)
-介导细胞免疫，自身分化效应细胞 -来源于胸腺 -巨噬细胞处理后的抗原识别 -分两大类：细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells,CTL)和调节T细胞（regulatory T cells,T reg),Treg=辅助性T细胞Th + 抑制 性T细胞Ts -Th:识别特异性抗原,正反馈免疫调节； Th=Th1+Th2+Th0 -Ts:负反馈免疫调节； -CTL：杀伤表达特异抗原的靶细胞，如病毒 、结核菌等感染的靶细胞或肿瘤细胞 -T细胞活化先天性免疫系统的防御机制，如 巨噬细胞 -Th1(IFN-α)
4、（CD3+%）+（CD19+%）+（CD16/56+%）=100%±5%，如相差过于 悬殊，临床具有一定提示意义。研究表明感染和血液肿瘤最易出 现等式严重偏离
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解读原则：
5、NK细胞：
天然免疫系统的一个重要组成部分，约占外周血单核细胞的15-30%，可通过非 MHC性限制性途径识别并在多数情况下杀伤被病毒感染细胞。
免疫系统：由免疫器官、免疫细胞及免疫分子组成，遍布全身、相互制约的 网络
免疫相关疾病： 应答过高:变态反应(过敏性疾病,四型)
不平衡: 应答不足:感染、肿瘤、放射病、血液病、免疫缺损症 自身组织应答：自身免疫疾病（SLE、类风湿性关节炎）
4
Байду номын сангаас
免疫应答类型：二种 1、固有性免疫应答：识别多种病原体的共有成分（多糖），非特异性应答。
应用抗CD（cluster of differentiation,CD)单抗将免疫细胞区分 得更细、更科学、更能描述免疫细胞的机能状态
由于流式细胞仪将静态的、显微镜下肉眼观察改为动态的、 计算机信号处理，因此，在流式细胞仪上T细胞亚群统计方 式已从传统的荧光显微镜下计数200个细胞成为几秒钟内计 数上万个，因此，结果更真实、更具有统计意义。
机械性防御机制：皮肤、粘膜（口腔、呼吸道、消化道、泌尿）； 体液免疫机制：补体系统；急性相蛋白（CRP等）；吞噬细胞（单核-巨噬细胞、 粒细胞）；NK（肿瘤、病毒感染细胞、异源）；ADCC。感染早期数分或96h内执行防卫。
2、适应性免疫应答：识别特异的病原体，特异性应答
T及B淋巴细胞，感染后4-5天对识别的病原体进行杀伤清除，发生在固有 性免疫应答之后。
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流式细胞术的特点
流式细胞术：利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参 数、快速的定量分析及分选的技术
流式细胞术 = 细胞荧光化学技术+单克隆抗体技术+激光技术+流体力学+光 电测量技术+计算机技术
测量速度快：最快可在1秒种内检测上万个细胞 可进行多参数测量：可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测
•评价免疫功能（血常规、Ig、补体、淋巴细胞亚群）
术前； 新生儿筛查（原发性免疫缺陷病）； 体检
•诊断免疫相关疾病（如HIV初筛有反应时）
•免疫治疗疗效观察
•出现免疫功能低下症状时检测
1、经常感到疲劳；
2、经常感冒；
4、肠胃功能下降；自身保护能力差；
6、精神萎靡；
7、易昏睡
9、身心憔悴
3、伤口容易感染； 5、易受到传染病的侵袭； 8、爱做梦（恶梦）
7
Sheep erythrocyte rosetter ( E-rosettes) for
T-cells
8
Surface immunoglobulin (sIg) for B-cells
9
流式细胞仪检测原理
Surface immunoglobulin (sIg) for B-cells
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淋巴细胞亚群流式术的基本内容
荧光染料标记的单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合，结合多色荧光 分析，即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来，进而得到各亚群的 相对比例。
淋巴细胞为CD45阳性，颗粒度较低的一群细胞 淋巴细胞主要分为T淋巴细胞（CD3+）、B淋巴细胞（CD19+）和 NK细 胞（CD16+56+） T淋巴细胞又分为 T helper/T inducer（CD3+CD4+）， (ThCD29+ /Ti CD45RA+) 、 T suppressor/ T cytotoxic（CD3+CD8+） (TsCD28-/Tc CD28+)
淋巴细胞亚群检测的临床应用
检验科 梁红萍 2012-5
1
主要内容
为何要检测“淋巴细胞亚群”？ 何时检测？ 如何解读？ 如何应用？（肿瘤、自身免疫、感染、儿科） 案例分析 标本要求
2
为何要检测“淋巴细胞亚群”？
3
关键词：免疫（拉丁文，免…)
免疫基本功能: 识别自己与非己---》动态平衡
-介导体液免疫，经Ab执行免疫功能
-来源于骨髓 -识别天然蛋白质抗原 -增殖时需要T辅助细胞Th的刺激 -分化成浆细胞 -合成抗原特异性抗体 -发挥抗独特型抗体的免疫调节 -防御细胞外病原体(细菌)，以抗体介导，促使 巨噬细胞和补体系统活化，ADCC -Th2(IL-4,IL-5)
6
何时检测“淋巴细胞亚群”？
量 具有明显的统计学意义：提供细胞群体的均值和分布情况 高分辨率(CV<2%)、高灵敏度(荧光检测灵敏度≤100MESF，前向角散射光检
测灵敏度(0.2∼0.5um) 既是细胞分析技术，又是精确的分选技术，分选纯度可达99%以上
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流式细胞术的应用使得过去应用E-玫瑰花结试验或EAC-花环 试验检测T或B淋巴细胞成为历史
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如何解读“淋巴细胞亚群”报告
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解读原则：
1、综合判断， CD4+%、CD8+%、CD4+/CD8+：初步评估机体免疫状态，快速便利
2、结合血常规结果，同时关注百分比和绝对数
3、当CD4+/CD8+比例倒置时，一定要确认是CD4+细胞绝对数降低， 还是CD8+细胞绝对数增加所致，两种情况的临床意义不同
B淋巴细胞针对细胞外的细菌病原体，引发吞噬作用，介导体液免疫 T淋巴细胞抵抗细胞内复制的病原体（病毒、结核菌），介导细胞免疫
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T细胞与B细胞系统的特性(共性：产生记忆细胞）
T细胞系统（cell mediated mmunity,CMI) B细胞系统(humoral immunity)
-介导细胞免疫，自身分化效应细胞 -来源于胸腺 -巨噬细胞处理后的抗原识别 -分两大类：细胞毒性T细胞（cytotoxic T cells,CTL)和调节T细胞（regulatory T cells,T reg),Treg=辅助性T细胞Th + 抑制 性T细胞Ts -Th:识别特异性抗原,正反馈免疫调节； Th=Th1+Th2+Th0 -Ts:负反馈免疫调节； -CTL：杀伤表达特异抗原的靶细胞，如病毒 、结核菌等感染的靶细胞或肿瘤细胞 -T细胞活化先天性免疫系统的防御机制，如 巨噬细胞 -Th1(IFN-α)
4、（CD3+%）+（CD19+%）+（CD16/56+%）=100%±5%，如相差过于 悬殊，临床具有一定提示意义。研究表明感染和血液肿瘤最易出 现等式严重偏离
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解读原则：
5、NK细胞：
天然免疫系统的一个重要组成部分，约占外周血单核细胞的15-30%，可通过非 MHC性限制性途径识别并在多数情况下杀伤被病毒感染细胞。
免疫系统：由免疫器官、免疫细胞及免疫分子组成，遍布全身、相互制约的 网络
免疫相关疾病： 应答过高:变态反应(过敏性疾病,四型)
不平衡: 应答不足:感染、肿瘤、放射病、血液病、免疫缺损症 自身组织应答：自身免疫疾病（SLE、类风湿性关节炎）
4
Байду номын сангаас
免疫应答类型：二种 1、固有性免疫应答：识别多种病原体的共有成分（多糖），非特异性应答。
应用抗CD（cluster of differentiation,CD)单抗将免疫细胞区分 得更细、更科学、更能描述免疫细胞的机能状态
由于流式细胞仪将静态的、显微镜下肉眼观察改为动态的、 计算机信号处理，因此，在流式细胞仪上T细胞亚群统计方 式已从传统的荧光显微镜下计数200个细胞成为几秒钟内计 数上万个，因此，结果更真实、更具有统计意义。
机械性防御机制：皮肤、粘膜（口腔、呼吸道、消化道、泌尿）； 体液免疫机制：补体系统；急性相蛋白（CRP等）；吞噬细胞（单核-巨噬细胞、 粒细胞）；NK（肿瘤、病毒感染细胞、异源）；ADCC。感染早期数分或96h内执行防卫。
2、适应性免疫应答：识别特异的病原体，特异性应答
T及B淋巴细胞，感染后4-5天对识别的病原体进行杀伤清除，发生在固有 性免疫应答之后。
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流式细胞术的特点
流式细胞术：利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参 数、快速的定量分析及分选的技术
流式细胞术 = 细胞荧光化学技术+单克隆抗体技术+激光技术+流体力学+光 电测量技术+计算机技术
测量速度快：最快可在1秒种内检测上万个细胞 可进行多参数测量：可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测
•评价免疫功能（血常规、Ig、补体、淋巴细胞亚群）
术前； 新生儿筛查（原发性免疫缺陷病）； 体检
•诊断免疫相关疾病（如HIV初筛有反应时）
•免疫治疗疗效观察
•出现免疫功能低下症状时检测
1、经常感到疲劳；
2、经常感冒；
4、肠胃功能下降；自身保护能力差；
6、精神萎靡；
7、易昏睡
9、身心憔悴
3、伤口容易感染； 5、易受到传染病的侵袭； 8、爱做梦（恶梦）
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Sheep erythrocyte rosetter ( E-rosettes) for
T-cells
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Surface immunoglobulin (sIg) for B-cells
9
流式细胞仪检测原理
Surface immunoglobulin (sIg) for B-cells
13
淋巴细胞亚群流式术的基本内容
荧光染料标记的单克隆抗体与淋巴细胞表面的抗原结合，结合多色荧光 分析，即可以把各种不同功能的淋巴亚群区分开来，进而得到各亚群的 相对比例。
淋巴细胞为CD45阳性，颗粒度较低的一群细胞 淋巴细胞主要分为T淋巴细胞（CD3+）、B淋巴细胞（CD19+）和 NK细 胞（CD16+56+） T淋巴细胞又分为 T helper/T inducer（CD3+CD4+）， (ThCD29+ /Ti CD45RA+) 、 T suppressor/ T cytotoxic（CD3+CD8+） (TsCD28-/Tc CD28+)
淋巴细胞亚群检测的临床应用
检验科 梁红萍 2012-5
1
主要内容
为何要检测“淋巴细胞亚群”？ 何时检测？ 如何解读？ 如何应用？（肿瘤、自身免疫、感染、儿科） 案例分析 标本要求
2
为何要检测“淋巴细胞亚群”？
3
关键词：免疫（拉丁文，免…)
免疫基本功能: 识别自己与非己---》动态平衡
-介导体液免疫，经Ab执行免疫功能
-来源于骨髓 -识别天然蛋白质抗原 -增殖时需要T辅助细胞Th的刺激 -分化成浆细胞 -合成抗原特异性抗体 -发挥抗独特型抗体的免疫调节 -防御细胞外病原体(细菌)，以抗体介导，促使 巨噬细胞和补体系统活化，ADCC -Th2(IL-4,IL-5)
6
何时检测“淋巴细胞亚群”？
量 具有明显的统计学意义：提供细胞群体的均值和分布情况 高分辨率(CV<2%)、高灵敏度(荧光检测灵敏度≤100MESF，前向角散射光检
测灵敏度(0.2∼0.5um) 既是细胞分析技术，又是精确的分选技术，分选纯度可达99%以上
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流式细胞术的应用使得过去应用E-玫瑰花结试验或EAC-花环 试验检测T或B淋巴细胞成为历史