尿生成实验

影响尿生成的因素

【目的和原理】

学习从输尿管和膀胱引流尿液的方法，观察影响尿生成的若干因素。

尿的生成包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收及分泌排泄三个过程。凡能影响上述过程的因素都可影响尿的生成，从而引起尿量的改变。

【器材与药品】

D-95微机化实验教学系统，兔手术台，哺乳动物手术器械，气管插管，动脉插管，细塑料管（或膀胱插管），血压换能器，计滴器，保护电极，注射器，培养皿。20%氨基甲酸乙酯溶液，肝素，29%葡萄糖液，班氏试剂，1:10000去甲肾上腺素，呋塞米（速尿），垂体后叶素。

【实验对象】

兔。

【步骤和方法】

（1）手术操作：

1）耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯溶液（耳缘静脉注射进行麻醉，仰卧位固定于兔手术台上。

2）颈部剪毛，做颈部正中切口，分离气管并插入气管插管。

3）分离左侧颈总动脉，按常规将充满肝素生理盐水的动脉插管（已连接血压换能器）插入颈总动脉内。

4）分离右侧迷走神经，在其下方穿两条线备用。手术结束后，用浸有38℃生理盐水的纱布覆盖创面。

5）腹部剪毛，于耻骨联合上方正中做一3~5cm长的切口，沿腹白线切开腹壁，将膀胱向尾侧移出体外，暴露膀胱三角，确认输尿管后，将靠近膀胱处的输尿管用止血钳做钝性分离，穿线备用。将近输尿管端的输尿管穿线结扎，在靠近结扎线处剪一斜向肾脏的小口，将充满生理盐水的细塑料管向肾脏方向插入输尿管，备用线结扎固定。此后，可看到尿液从细塑料管中慢慢逐滴流出。

也可从膀胱引流尿液。同样切开腹壁后，将膀胱向尾侧移至腹外。先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位，用线结扎膀胱颈部，以阻断它同尿道的通路。然后，在膀胱顶部选择血管较少处，剪一纵行小切口，插入膀胱插管（可用一弯头滴管代替），插管口最好正对着输尿管在膀胱的入口处，但不要紧贴膀胱后壁而赌塞输尿管。用线沿切口结扎两道，将切口边缘固定在管壁上。手术结束后，用浸有38℃生理盐水的纱布覆盖创面。

（2）实验装置的连接与使用：将血压换能器连至D-95微机化实验教学系统的3通道，描记血压。将插入输尿管内的细塑料管或插入膀胱内的插管所引流出的尿液，滴在记滴器上，记滴器与系统的4通道连接，描记尿滴数。刺激电极与系统的刺激输出连接。

进入计算机系统

（3）观察项目：

1)正常血压及尿量。

2)由耳缘静脉注射37℃生理盐水20 ml（1min内注射完），观察血压及尿量的变化。

3)由耳缘静脉注射1:10000去甲肾上腺素0.5ml，观察血压及尿量的变化。

4）收集尿液2滴作尿糖定性试验的对照。然后经耳缘静脉注射20%葡萄糖液5ml，观察血压及尿量的变化。当尿量增多时，再取2滴尿液做尿糖定性试验。

尿糖定性试验：试管中加入1ml班氏试剂，再加尿液2滴，在酒精灯上加热煮沸，观

察试剂和沉淀的颜色，如试剂的颜色由蓝色转为绿色或黄色或砖红色，均表示尿中有糖，只是含糖量有所不同。都称为尿糖试验阳性；如不变色则为阴性。

5）结扎并剪断右侧迷走神经，用中等强度的电流刺激迷走神经的外周端20~30s，使血压降至6.67kpa（50mmHg）左右，观察尿量的变化。

6）自耳缘静脉注射呋塞米（5mg/kg），观察血压及尿量的变化。

7）自耳缘静脉注射垂体后叶素2U，观察血压及尿量的变化。

【注意事项】

（1）为保证动物在实验时有充分的尿液排出，实验前给兔多食菜叶或给兔用水灌胃。（2）手术操作应尽量轻柔。腹部切口不可过大，避免损伤性闭尿。剪开腹膜时，注意勿伤及内脏。

（3）实验中需多次静脉注射，故需保护好兔耳缘静脉。应尽量从静脉远端开始注射，逐步移向根部，以免反复注射时造成困难。

（4）输尿管插管时，应仔细辨认输尿管，要插入输尿管腔内，勿插在管壁与周围结缔组织间，插管应妥善固定，防止滑脱。同时，注意输尿管切勿扭曲，否则将会阻碍尿液排出。（5）每项实验必须在上一项实验作用消失、血压和尿量基本恢复到正常水平时再进行。做每一项实验时，要观察全过程，这样可以了解药物作用的潜伏期、最大作用期及恢复期等各个阶段。

（6）刺激迷走神经时，注意刺激的强度不要过强，时间不要过长，以免血压急剧下降，心脏停跳。

（6）分析结果时要注意血压和尿量之间的关系。

仅供参考