对人体内超氧离子的除去方法的探究
超氧阴离子清除能力邻苯三酚法
超氧阴离子清除能力邻苯三酚法1 超氧阴离子的来源超氧阴离子(O2•-)是一种高活性自由基,是氧气分子失去一个电子后产生的。
在生物体内,超氧阴离子通常由线粒体电子传递链产生,同时也可以由细胞质中的NADPH氧化酶生成。
2 超氧阴离子的损害超氧阴离子是一种极其活泼的氧化剂,可以与细胞内的脂质、蛋白质和核酸等大分子发生氧化反应,并引起细胞的损害。
长期以来,科学家们一直在研究如何有效地清除超氧阴离子,以保护细胞免受其损害。
3 邻苯三酚法的原理邻苯三酚法是一种用于清除超氧阴离子的方法,该方法利用邻苯三酚的还原能力,将超氧阴离子还原成氧气分子,以达到清除超氧阴离子的目的。
邻苯三酚法的原理如下:① 邻苯三酚在氧气存在下被氧化成半醌,1C6H5-1C(OH)2-2C6H4 +O2 →C6H5-1C(O)2-2C6H4+H2O2② 半醌进一步被氧化成互相联结的二聚体,1C6H5-1C(O)2-2C6H4+C6H5-1C(O)2-2C6H4→(C6H5-1C(O)2-2C6H4)22③ 该反应同时产生超氧阴离子,1O2 +e-→O2•-2导致增加超氧阴离子的浓度。
④ 当邻苯三酚浓度超过一定程度时,它具有还原能力,可以将超氧阴离子还原为氧气分子,1O2•- + 2C6H5-1C(O)2-2C6H4→2C6H5-1C(OH)2-2C6H4 +O24 邻苯三酚法的应用邻苯三酚法已被广泛用于生物学、医学和环境科学等领域。
在生物学中,这种方法被用于研究超氧阴离子在细胞中的作用。
在医学中,邻苯三酚法被应用于治疗一些慢性气道疾病,如支气管哮喘。
在环境科学中,邻苯三酚法也被用于去除环境中的有害物质,如重金属离子。
5 邻苯三酚法的不足虽然邻苯三酚法是一种有效清除超氧阴离子的方法,但它也存在一些不足之处。
一方面,邻苯三酚的使用受到其毒性和生物可降解性的限制;另一方面,邻苯三酚的还原能力相对较弱,反应速度较慢,因此需要较长时间来消除超氧阴离子。
超氧阴离子清除实验
·O2ˉ自由基清除实验(1) 实验原理黄嘌呤氧化酶黄嘌呤+H2O+O2尿酸+H2O2+·O2¯即黄嘌呤氧化酶在有氧条件下催化黄嘌呤转化为尿酸,同时产生超氧阴离子自由基(·O2¯)。
·O2¯与NBT结合后呈蓝色,样品清除能力越大,与NBT结合的·O2¯越少,溶液的颜色越浅。
(2)试剂Xanthine(黄嘌呤): (C5H4N4O2 ), MW=152.1, 6.084mg/100mL(0.4mmol/l)实际配制:1.216mg/10mL,与NBT等体积混合使用Xanthine oxidase(黄嘌呤氧化酶)贮液: 1 unit/mL , (溶解酶的溶液要高压灭菌!防止蛋白酶对酶的降解!)0.05 unit/mL,每次取200uL稀释到4mL(PBS溶解)NBT: (Nitro blue tetrazolium chloride氯化硝基四氮唑蓝), MW=817.65,黄色19.6236mg/100mL(0.24mmol/l)实际配制3.925mg/10mL,与Xanthine等体积混合使用PBS(0.01mol/L,pH=8.0): NaCl 8g, KCl 0.2g, Na2HPO4(无水) 1.44g, KH2PO4 0.24g,800mL水,用NaOH(1M)调pH到8.0,定容到1000mL。
实际配制500mL。
高压灭菌,室温保存。
PBS(0.01mol/L,pH=7.4): 配制同上Ascorbic acid: MW=176.12 母液为1mg/mL 先两倍逐级稀释5个浓度实际配制见记录本!HCl(1M): MW=36.5 310ul/10ml.(36% HCl密度1.18g/ml)实际配制:800uL浓盐酸+9mL水,于塑料管中4℃保存。
NaOH(1M): MW=40 0.4g/10mL, 存于冰箱(3) 测定方法超氧阴离子自由基清除能力的测定参照Bae等人的方法略加改进。
[资料]超氧阴离子消除试验
·O2ˉ自由基清除实验(1) 实验原理黄嘌呤氧化酶黄嘌呤+H2O+O2尿酸+H2O2+·O2¯即黄嘌呤氧化酶在有氧条件下催化黄嘌呤转化为尿酸,同时产生超氧阴离子自由基(·O2¯)。
·O2¯与NBT结合后呈蓝色,样品清除能力越大,与NBT结合的·O2¯越少,溶液的颜色越浅。
(2)试剂Xanthine(黄嘌呤): (C5H4N4O2 ), MW=152.1, 6.084mg/100mL(0.4mmol/l)实际配制:1.216mg/10mL,与NBT等体积混合使用Xanthine oxidase(黄嘌呤氧化酶)贮液: 1 unit/mL , (溶解酶的溶液要高压灭菌!防止蛋白酶对酶的降解!)0.05 unit/mL,每次取200uL稀释到4mL(PBS溶解)NBT: (Nitro blue tetrazolium chloride氯化硝基四氮唑蓝), MW=817.65,黄色19.6236mg/100mL(0.24mmol/l)实际配制3.925mg/10mL,与Xanthine等体积混合使用PBS(0.01mol/L,pH=8.0): NaCl 8g, KCl 0.2g, Na2HPO4(无水) 1.44g, KH2PO4 0.24g,800mL水,用NaOH(1M)调pH到8.0,定容到1000mL。
实际配制500mL。
高压灭菌,室温保存。
PBS(0.01mol/L,pH=7.4): 配制同上Ascorbic acid: MW=176.12 母液为1mg/mL 先两倍逐级稀释5个浓度实际配制见记录本!HCl(1M): MW=36.5 310ul/10ml.(36% HCl密度1.18g/ml)实际配制:800uL浓盐酸+9mL水,于塑料管中4℃保存。
NaOH(1M): MW=40 0.4g/10mL, 存于冰箱(3) 测定方法超氧阴离子自由基清除能力的测定参照Bae等人的方法略加改进。
超氧阴离子自由基清除
一.实验原理:该方法利用NADH-PMS-NBT为超氧阴离子(O2·-)生成系统,超氧阴离子清除剂能减少NBT 的蓝色。
通过检测560nm处吸光值可判断体系中还原物质的还原能力。
二.实验仪器:分光光度计三.实验试剂:一:液体40mL×1瓶;二:液体1mL一瓶;三:粉剂一支;四:粉剂一支;五:1mg/mL芦丁标准品,1mL四.溶液配制:一工作液:用时加双蒸水360mL,也就是10倍稀释,得到400mL试剂一工作液;二工作液:用赠送的棕色瓶配制。
试剂二工作液由试剂二加上100mL试剂一工作液配得,现配现用,注意避光;三工作液:试剂三工作液由试剂三溶解于100mL试剂一工作液配得,现配现用;四工作液:粉剂一支。
用50mL双蒸水溶解,摇匀后,取10mL,加入90mL试剂一,配成试剂四工作液,现配现用,用赠送的棕色瓶盛装。
注意避光,配好的试剂请于2小时内用完。
五工作液:阳性对照,按需配制,-20℃保存。
五.实验步骤:充分混匀,室温避光静置5min使之充分反应。
560nm处,1cm光径比色杯,采用分光光度计测定吸光值。
六.清除能力计算:超氧阴离子自由基清除(%)=[空白孔吸光值-(测定孔吸光值-对照孔吸光值)]/空白孔吸光值*100注: 1 如未做对照孔,可以将其视作为0;2 阳性对照求值时将其视作测定孔进行计算即可。
七.注意事项:1. 如样品中色素物质不是分析对象,建议先通过SEP C18柱进行脱色处理,处理后样品可不做对照孔;2. 如不确定样品的超氧阴离子自由基清除能力,可先做不同浓度的稀释液进行摸索,并选择适宜浓度进行测定,高浓度下,浓度与清除率间并不线性相关。
3. 试剂三建议全程冰上操作。
试剂四切记避光保存,特别是配制后,且应尽快用完。
建议在做好一切其它准备工作后再配制试剂四应用液。
试剂四正常颜色为黄色,强光照射下,5-10分钟内会变为绿色,随后变为蓝色,变色后试剂不可再用!4. 试剂二、三应用液和样品混匀后再加入试剂四,次序颠倒会导致不显色。
细胞内超氧阴离子产生及清除机制的研究
细胞内超氧阴离子产生及清除机制的研究细胞内超氧阴离子的产生及清除机制一直是细胞生物学领域的一个热门研究方向。
超氧阴离子是氧分子还原后的一种活性氧自由基,它在人体内的大量积累会引起多种疾病和衰老过程。
在这篇文章中,我们将探讨细胞内超氧阴离子产生及清除的相关机制。
细胞内产生超氧阴离子的途径细胞内产生超氧阴离子的途径有多种,包括线粒体呼吸链、NADPH氧化酶、xanthine氧化酶等。
其中,线粒体呼吸链是超氧阴离子产生的主要来源之一。
当线粒体内电子转运链出现故障或者过载时,就会导致线粒体内链中的电子被还原成超氧阴离子。
此外,线粒体外膜和内膜之间的通道贡献了细胞内大约30%的超氧阴离子产生量。
另一种超氧阴离子产生的途径是NADPH氧化酶,在炎症反应和细胞功能活性中发挥着关键作用。
NADPH氧化酶是细胞膜上的一种酶类,能够将细胞内的氧分子和NADPH还原成超氧阴离子和NADP+。
此外,xanthine氧化酶也是产生超氧阴离子的一种途径。
当细胞内的某些物质被分解成xanthine时,xanthine氧化酶就会将其还原成尿酸和超氧阴离子。
细胞内清除超氧阴离子的途径由于超氧阴离子具有强氧化性,会对细胞内分子结构、DNA、蛋白质等造成损伤。
因此,细胞内必须有一套完备的清除机制来调节超氧阴离子的产生和积累。
这些机制包含了多种酶类、分子和细胞器。
其中,超氧化物歧化酶是细胞内最主要的超氧阴离子清除酶。
它可以将两个超氧阴离子逐步转化成氧分子和氢氧离子,并在此过程中释放能量。
此外,过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶也可以参与清除超氧阴离子。
细胞内一些小分子物质也能够清除超氧阴离子。
其中,维生素C和维生素E被广泛应用于细胞的氧化应激修复,它们可以直接参与清除细胞内的超氧阴离子,从而起到抗氧化的作用。
此外,一些微小RNA(miRNA)还被发现可以介导超氧阴离子的清除。
例如,miR-143被证明可以降低细胞内的超氧阴离子含量,从而保护细胞功能和健康。
清除超氧阴离子自出基能力的测定
清除超氧阴离子自出基能力的测定清除超氧阴离子自出基能力的测定?听起来好像高深莫测,但其实它就像是一次科学“侦探”游戏,目标是找到并消除体内的坏小子——超氧阴离子。
我们平时说的自由基,大家都知道吧?它们就像街头上的“坏蛋”,能引发一连串的麻烦,比如加速衰老、引发疾病等等。
超氧阴离子就是这种坏蛋的亲戚之一,它活跃得很,又特别“调皮”,一不小心就能对我们的细胞造成伤害。
所以,清除它的能力如何测定,关系着我们如何守护自己的健康,简直是生活中不可忽视的小细节!究竟该怎么测定这种能力呢?其实嘛,不是像侦探小说里的那种大案子,直接一上来就有个明确的线索。
而是得通过一系列的实验,逐步寻找蛛丝马迹。
最常见的一个方法,就是通过特定的化学试剂来“捉拿”这些超氧阴离子。
它们就像犯罪现场的指纹一样,只要你用对了方法,就能准确找到它们藏身的地方。
实验中,我们通常会使用一种叫做NBT的化学物质,超氧阴离子一旦和它接触,就会发生颜色变化。
这就好比是超氧阴离子自己暴露了行踪,白白地站在那儿,成了显眼的“嫌疑犯”。
这样一来,实验人员只需要观察颜色变化的程度,就能判断体内清除超氧阴离子自出基的能力强不强。
这时候你可能会想,为什么要通过NBT来测量呢?其实是因为NBT反应得很灵敏,它能迅速与超氧阴离子反应,形成一种沉淀物,产生蓝色的变化。
想象一下就像我们在画画时,画布突然冒出了几滴颜料,整个画面一下子就不一样了。
颜色越深,就说明超氧阴离子的清除能力越弱,反之,如果颜色很淡或者没有什么变化,那就说明清除能力比较强,毕竟超氧阴离子在实验中被清除得差不多了。
不过,话说回来,实验的结果就像打麻将,得靠点运气。
因为很多时候,清除超氧阴离子自出基能力不仅受化学反应影响,还和实验条件密切相关。
比如温度、时间、试剂浓度等等,都可能让实验结果出现偏差。
每个小细节都很重要,有时候稍不注意,实验结果就像那种“莫名其妙”的失败,怎么做都不对劲。
所以,这个测定的过程既考验技巧,也考验耐心,真的是需要一点点时间去琢磨。
超氧自由基清除
超氧自由基清除
超氧自由基在细胞内可以通过超氧化物歧化酶(SOD)被清除。
此外,人体摄入的抗氧化剂也可以清除超氧自由基,其清除能力常用连苯三酚法进行检测。
抗氧化剂分为酶类清除剂和非酶类清除剂两大类,其中酶类清除剂主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)等。
目前最常用的自由基清除测定方法包括ABTS法、DPPH法、ORAC法、羟自由基清除能力和超氧自由基清除能力。
这些方法可以用于评价样品清除超氧阴离子自由基的能力。
例如,邻苯三酚法是在弱碱性条件下,通过邻苯三酚的自氧化反应来测定超氧阴离子自由基的清除能力。
此外,芥子碱硫氰酸盐也被研究用于清除超氧阴离子自由基,并通过化学发光法进行了测定。
因此,超氧自由基的清除主要依赖于体内自身的抗氧化酶系统以及通过摄入抗氧化剂来实现。
tiron清除超氧阴离子的原理
Tiron清除超氧阴离子的原理超氧阴离子是一种高度反应性的自由基物质,在生物体内可以产生氧化应激,损害细胞结构和功能,导致多种疾病。
Tiron是一种有效的超氧阴离子清除剂,具有保护细胞免受氧化损伤的作用。
本文将从Tiron 清除超氧阴离子的原理入手,深入探讨其在生物体内的作用机制。
1. Tiron的结构和性质Tiron,化学名为4,5-二羟基苯磺酸,是一种含有羟基和磺酸基团的有机化合物。
这种结构使得Tiron具有较高的亲电性,能够与超氧阴离子快速结合而形成稳定的产物,从而减少其对细胞的损害。
2. Tiron清除超氧阴离子的原理Tiron清除超氧阴离子的原理主要有两个方面:化学反应和生物作用。
Tiron与超氧阴离子发生化学反应。
超氧阴离子是一种强氧化剂,具有较强的氧化能力,能够与生物分子相互作用,造成氧化损伤。
Tiron的羟基和磺酸基团能够与超氧阴离子发生加成反应,形成稳定的产物,从而中和了超氧阴离子的氧化能力,减轻了其对细胞的损害。
Tiron能够作为抗氧化剂进入细胞内,清除细胞内的自由基,并参与细胞内的抗氧化反应。
在有氧呼吸的过程中,细胞内会产生一定量的超氧阴离子,如果不能及时清除,会导致氧化应激,造成细胞损伤。
Tiron能够进入细胞内,清除细胞内的超氧阴离子,调节氧化还原平衡,保护细胞免受氧化损害。
3. Tiron在生物体内的作用Tiron作为超氧阴离子清除剂,在生物体内发挥着重要的保护作用。
在许多疾病模型中,Tiron都能够减轻疾病的严重程度,延缓疾病的进展。
Tiron可以保护心血管系统免受氧化应激的损害,降低心脏病和动脉粥样硬化的风险;Tiron还可以减轻神经退行性疾病的病理进展,延缓细胞的氧化损伤和逝去。
这些研究表明,Tiron在生物体内具有广泛的应用前景,可以作为一种新型的抗氧化治疗剂。
4. 个人观点和总结作为一种有效的超氧阴离子清除剂,Tiron在生物体内的作用机制值得我们深入探讨。
人参皂甙等清除超氧阴离子自由基的研究
人参皂甙等清除超氧阴离子自由基的研究超氧阴离子自由基是一种高度反应性的溶解氧的化学物质,它在人体中可引起氧化应激反应,损伤细胞和组织。
因此,研究如何清除超氧阴离子自由基对于保护人体健康非常重要。
人参皂甙是一种具有多种药理作用的植物化合物,其中包括清除超氧阴离子自由基的作用。
人参皂甙可以通过以下几个方面清除超氧阴离子自由基:
1.增强细胞自身的抗氧化能力。
人参皂甙可以刺激机体内天然抗氧化酶如超氧化物歧化酶的活性,促进抗氧化剂的合成,有效抵御氧化应激对细胞的影响,从而清除超氧阴离子自由基。
2.抑制氧化应激反应的发生。
人参皂甙可以减少线粒体膜的脂质过氧化损伤,减轻氧化应激引起的内源性细胞毒性,通过降低氧化应激的程度来间接清除超氧阴离子自由基。
3.直接清除自由基。
人参皂甙中的活性成分具有直接清除自由基的特点,如能够与超氧阴离子自由基和其他氧化性自由基发生反应,使其变为较为稳定的分子,从而清除自由基。
综上所述,人参皂甙通过不同的途径清除超氧阴离子自由基,发挥了重要的保护细胞和组织,促进人体健康的作用。
对苯醌捕获超氧自由基原理
对苯醌捕获超氧自由基原理一、超氧自由基的概念及危害超氧自由基是一种常见的活性氧分子,它在人体内的产生主要来自于线粒体呼吸链和白细胞呼吸爆发。
虽然超氧自由基是正常代谢产物,但过量的超氧自由基会对细胞膜、蛋白质和核酸等生物分子造成氧化损伤,导致多种疾病的发生和加速衰老。
二、对苯醌的结构与性质对苯醌是一种芳香族化合物,其化学式为C6H4O2,分子量为108.1g/mol。
它是一种黄色晶体,具有较好的稳定性和溶解性。
对苯醌可以作为电子受体或电子给予者参与多种有机反应,并且可以与超氧自由基发生还原反应。
三、对苯醌捕获超氧自由基原理对苯醌通过与超氧自由基发生还原反应而被转化为单相态类似于苯并环己烷-1,4-二酮(PQ)的产物。
这个产物不仅可以作为电子给予者,还可以通过与其他自由基相互作用而继续清除自由基。
因此,对苯醌可以捕获超氧自由基并将其转化为无害的产物。
四、对苯醌捕获超氧自由基的途径1. 通过电子转移反应:对苯醌具有良好的电子受体性质,当超氧自由基与对苯醌接触时,对苯醌会接受超氧自由基上的一个电子而被还原为单相态类似于PQ的产物。
2. 通过共价键形成反应:在一些情况下,对苯醌与超氧自由基之间可以发生共价键形成反应,从而形成稳定的加合物。
这种加合物可以进一步与其他自由基相互作用而清除它们。
五、对苯醌捕获超氧自由基的应用1. 对苯醌可以作为一种抗氧化剂,在食品工业和医药工业中广泛应用。
2. 对苯醌也被广泛地应用于生命科学领域中的研究。
在这些研究中,对苯醌通常被用来评估抗氧化剂的活性或测定细胞中超氧自由基的含量。
3. 对苯醌还可以用于治疗多种疾病,如心脏病、癌症和神经退行性疾病等。
这是因为对苯醌可以通过捕获超氧自由基来减轻细胞的氧化损伤,从而起到保护细胞的作用。
六、对苯醌捕获超氧自由基的优点1. 对苯醌是一种天然产物,具有良好的生物相容性和安全性。
2. 对苯醌通过与超氧自由基发生还原反应而被转化为无害产物,不会对人体造成任何危害。
超氧负离子自由基
超氧负离子自由基,也被称为超氧阴离子,是氧分子获得一个电子后的产物,是一种典型的自由基。
这种自由基具有一定的还原作用,虽然历史上曾经认为它具有细胞毒性,但现代的自由基生物学已经证实它具有生理功能。
超氧负离子自由基具有自身氧化还原的特点,能够自身还原并产生氧气和过氧化氢。
在生物组织中,广泛存在的超氧化物歧化酶(SOD)就是专门催化这种反应的催化剂。
然而,需要指出的是,超氧负离子自由基并不是越多越好,高浓度的超氧负离子自由基有可能对人体健康产生负面影响。
因此,对超氧负离子自由基的生成和清除机制的研究,对于理解其生理和病理作用,以及开发基于超氧负离子自由基的治疗策略具有重要意义。
此外,负氧离子是指带负电荷的氧分子或氧离子,其电子外层拥有超过8个电子,导致分子极化,从而吸引周围的电子,形成了带负电荷的离子。
负氧离子在自然界中广泛存在,如海浪、瀑布、山泉等地方都含有较高的负氧离子浓度。
以上内容仅供参考,建议查阅关于超氧负离子自由基的专业书籍或咨询该领域的专家以获取更准确的信息。
怎样减少体内活性氧
怎样减少体内活性氧
北京电力医院急诊科副主任医师肖青告诉记者,人的寿命长短,与体内的活性氧(氧与人体某些物质发生化学反应产生)有关。
人体内活性氧过剩会对细胞造成伤害,甚至导致细胞死亡,诱发各种心血管疾病、神经性疾病及肿瘤等200多种疾病。
还可使组织器官衰老,90%以上的老年性疾病是由它引起的。
清除体内过多的活性氧是防病延寿的关键:
慢呼吸人体正常呼吸摄入的氧气中,98%被人体有效利用,约有2%转化为活性氧。
放慢并深呼吸可增加氧的利用率,减少活性氧的产生。
平时呼吸尽量放慢,增大呼气和吸气的量。
蜂蜜泡姜生姜里含有的辛辣成分“姜辣素”具有很强的清除活性氧的效果,还可抑制体内脂质被活性氧攻击后产生的有害物质,明显减少体内活性氧。
蜂蜜中也含有大量的抗活性氧物质等,对活性氧有很强的“杀伤力”。
坚持服用1年以上,可使脸、手背等处的老年斑不同程度地缩小或颜色变浅,甚至消失。
把洗好的鲜姜切成细丝,放入玻璃瓶中,按1:2的比例加入蜂蜜浸泡一周后,即可食用。
柚子皮关节肌肉痛为常见的老年病,是关节肌肉中活性氧增加,导致关节软骨及肌肉组织受损或炎症所致。
柚子皮中含92%以上的柚皮苷,柚皮苷可清除关节肌肉中的活性氧,保护软骨细胞,缓解骨关节炎症状。
柚子皮还可治疗足跟痛。
足跟痛也与足跟部活性氧增多有关。
将新鲜柚子皮捣烂,敷在关节或足跟患处,外用保鲜膜包好,胶布固定,每天换1次。
运动体内活性氧的产生与运动量大小有关。
运动量适中并持续坚持时,体内清除活性氧的能力提高15%~50%,每周坚持3~4次,即可收到减少体内活性氧的效果。
但运动量过大到精疲力竭的程度,作用相反。
超氧自由基
超氧自由基自由基是人体衰老和许多疾病的重要原因。
但是它又是如何发生的呢?有没有办法可以阻止或者减少自由基的生成呢?今天,我们就来看一下自由基是怎么产生的吧。
自由基会对人体细胞膜、 DNA造成破坏,导致皮肤起皱纹、变得粗糙,更容易患癌症,还会引发心血管疾病,增加人们的死亡率。
但是,近年来研究人员也找到了阻止自由基侵害的方法——通过清除自由基。
13世纪,人们发现火药爆炸之后能留下火星似的黑色残渣,就用它来消除在冶炼过程中出现的赤色金属氧化物,这就是最早的燃烧弹。
自从人类开始使用火药,每个人都在不知不觉地制造自由基,而现代社会生活节奏快、压力大,所以我们比以往任何时候都需要清除自由基,抵御自由基带来的伤害。
到底是什么清除了自由基呢?有一种被称为“超氧阴离子自由基”的东西很有趣,只要吃下去几分钟后就可以把身体里的自由基全部清除掉,不管是白细胞还是脑细胞,或是肿瘤细胞,或是肝脏,都可以被它清除掉。
研究表明,清除超氧阴离子自由基可以延缓衰老。
日本大阪市立大学生命理工学研究科小山敬太郎教授及其同事发现,除了蛋白质中含有该自由基外,动物体内器官的自由基氧化程度与动物的年龄成正比。
而自由基导致器官组织中细胞衰老的机理,可能是因为在自由基与DNA相互作用下,损害了DNA结构与功能,引发DNA复制错误或错误修复,使得DNA突变增加。
而清除自由基,可以修复或维持正常的DNA结构与功能,从而延缓细胞衰老。
英国剑桥大学科学家在研究衰老机制时,发现进入老年期的老鼠有大量的脂褐素,也就是老年斑,并且已经证实:老年斑在表皮层的细胞中,而且细胞功能失调,因此该项研究成果在衰老领域具有革命性意义。
如果可以用药物控制自由基,那么就能解决一系列医疗问题,甚至改善人体衰老的现象。
通过一系列的实验,他们发现:阿司匹林可以保护细胞免受自由基侵害。
阿司匹林是水杨酸的衍生物,水杨酸是抗血凝剂。
它能抑制血小板聚集,降低血液黏稠度,防止血栓形成,而且有助于预防心肌梗死和脑卒中等疾病。
芥子碱硫氰酸盐清除超氧阴离子自由基作用的研究
芥子碱硫氰酸盐清除超氧阴离子自由基作用的研究李默影;齐洁;吴秋月;刘丽芳【摘要】目的:研究芥子碱硫氰酸盐清除超氧阴离子自由基的作用.方法:用化学发光法测定芥子碱硫氰酸盐清除超氧阴离子自由基的能力,并以抗坏血酸的清除能力做为对照,以IC50值(清除率为50%时的浓度值)作为评价指标.结果:芥子碱硫氰酸盐和抗坏血酸的IC5o值分别为0.135 mmol/L和18.74 mmol/L,后者的IC50值约为前者的140倍.结论:芥子碱硫氰酸盐具有良好的抗氧化作用,可以作为天然抗氧化剂进行开发.【期刊名称】《中国野生植物资源》【年(卷),期】2012(031)003【总页数】2页(P11-12)【关键词】芥子碱硫氰酸盐;超氧阴离子自由基;清除率;IC50值【作者】李默影;齐洁;吴秋月;刘丽芳【作者单位】中国药科大学天然药物活性物质与功能国家重点实验室,江苏南京210009;中国药科大学天然药物活性物质与功能国家重点实验室,江苏南京210009;中国药科大学天然药物活性物质与功能国家重点实验室,江苏南京210009;中国药科大学天然药物活性物质与功能国家重点实验室,江苏南京210009【正文语种】中文【中图分类】R285芥子碱硫氰酸盐(Sinapine cyanide sulfonafe)是芥子碱(Sinapine)存在于十字花科植物中的一种常见形式[1]。
近年来的研究揭示了芥子碱是一种非常有价值的天然抗氧化剂[2],在抗衰老药物的研究中具有重要意义。
研究已经证实,体内多余的超氧阴离子自由基(·O2-)严重危害人类的健康。
超氧阴离子自由基(·O2-)主要损害细胞膜包括血管内皮细胞膜及亚微结构,并引起一系列有害的生化反应[3]。
对于清除超氧阴离子自由基的测定,文献报道的方法较多,有化学发光法[4]、极谱法[5]、电泳法[6]等。
其中化学发光测定法是仪器分析中灵敏度最高的方法之一,已在医学、环境以及工业分析等许多领域里得到广泛的应用。
清除自由基研究方法汇总
电子自旋共振法(ESR)、高效液相色谱法、化学发光法、比色法、分光光度法自由基清除剂也称为抗氧化剂,可清除体内多余的自由基,减轻它们对机体的损伤。
目前常用超氧阴离子自由基体系(O2-·)、羟基自由基体系(·OH)、二苯代苦味酰基自由基体系(DPPH·)对某抗氧化剂的体外清除自由基能力进行了研究。
其中ESR法和气相色谱法、HPLC 法对自由基的检测灵敏度高,但对设备要求较高,操作复杂,无法在一般实验室普及。
而其中的分光光度法、化学发光法、荧光分析法等不需要昂贵的仪器,易于被一般实验室所采用,但测定过程中的干扰因素较多,容易对测定的准确性和灵敏度造成影响。
分光光度法最常用。
原理部分:1.DPPH·法测试机理DPPH·(二苯代苦味脐基自由基)的甲醇溶液呈深紫色,可见光区最大吸收峰为492nm。
当自由基清除剂加入到DPPH·溶液中时,DPPH·的单电子被配对而使其颜色变浅,在最大吸收波长处的吸光度减少,而且颜色变浅的程度与配电子数成化学计量关系,因此,可通过吸光度减弱的程度来评价自由基被消除的情况。
2. 羟基自由基(·OH)1)邻二氮菲法[70]实验原理:邻二氮菲可与Fe2+形成络合物,此络合物在510nm 处有最大吸收峰,是一常用的氧化还原指示剂,其颜色变化可敏锐地反映溶液氧化还原状态的改变。
H2O2/ Fe2+体系可通过Fenton 反应产生羟自由基,邻二氮菲-Fe2+水溶液被羟自由基氧化为邻二氮菲-Fe3+后,其510nm 最大吸收峰消失。
如果反应体系中同时存在羟自由基清除剂,则Fenton 反应产生的羟自由基将被此清除剂全部或部分清除,邻二氮菲-Fe2+络合物受到的破坏将会随之减少。
根据这一原理,可建立以A510变化反映自由基清除剂对羟自由基清除作用的比色测定法。
2)水杨酸法[71]实验原理:羟自由基易攻击芳环化合物产生羟基化合物,因此可用水杨酸捕集Fenton 反应体系中的·OH,生成的2,3-二羟基苯甲酸用乙醚萃取,用钨酸钠和亚硝酸钠显色,然后用分光光度计测定其在510nm 处的吸光值,此吸光值可反映体系中的羟自由基浓度。
P-26如何用捕获剂-DMPO检测超氧阴离子和羟自由基
info@ 400-823-9388 800-988-0083P -26同仁化学研究所 (Dojindo) 的DMPO没有杂质 (*) 检出 以羟自由基的Fenton反应(黑色)和空白(蓝色)为例同仁化学研究所(Dojindo)的峰更清晰,S/N比例更高Ⅰ. 概述活性氧具有调节许多重要细胞功能的作用,它和人体衰老、多种人类疾病,如癌症、糖尿病有关。
自旋捕捉ESR技术是一种检测活性氧的最可靠的办法,它能提供具有特征的ESR信号。
DMPO采用一种特殊的敏感方法,可以捕捉超氧阴离子和羟自由基等,分别产生独特的ESR光谱。
因此它是探测生物系统内ROS的强有力工具。
同仁化学研究所的DMPO具有很高的纯度,和其他产品相比,它的最大优点是使用前不需要再纯化,使您的ESR检测变得更容易。
Ⅱ. 常规参数名称:5,5-Dimethyl -1-pyrroline N -oxide 性状:无色液体纯度:≥99% (GC)分子量:113.16,C 6H 11NO保存条件:-20℃,防潮,避光运输条件:蓝冰CAS:3317-61-1Ⅲ. 纯度对比Ⅳ. 操作步骤常规检测步骤 (*本数据仅供参考,具体参数可能因仪器厂家的不同而适当调整)SOD清除超氧阴离子的活性检测1. 将15 μl的DMPO溶液和 50 μl的5 mM的次黄嘌呤加入到35 μl的0.1 M的磷酸盐缓冲液 (pH 7.8) 中。
2. 加入50 μl的待测SOD标准品或待测样品,涡旋振荡 1-2 s。
3. 加入50 μl的0.4 U/ml的黄嘌呤氧化酶之后立即涡旋振荡。
4. 放置一段时间 (例如 1 min) 将溶液转入ESR样品管中检测。
5. 通过峰值计算相对强度(DMPO-O 2-/Mn 2+)。
V. 实验例C -,N -,S -基自由基的检测1. 制备100 mM含有25 μM Diethylenetriaminepentaacetic Acid (DTPA)的磷酸盐缓冲液 (pH 7.4),作为过渡金属螯合剂。
中草药清除超氧自由基的极谱法研究
中草药清除超氧自由基的极谱法研究【摘要】比较了几种自氧化体系产生超氧自由基的效果,选定邻苯三酚自氧化体系产生超氧自由基,用单扫描示波极谱法扫描,研究8种中草药对超氧自由基的清除作用。
【关键词】中草药; 单扫描示波极谱法; 超氧自由基; 清除作用Abstract:The effects of producing the superoxide free radicals by the several of oxidation system have been studied. The pyrogallol acid was used by single-sweep oscillopolarography to determine the scavenging superoxide free radical activity against of ght Chinese drugs.Key words:Chinese drugs; Single sweep oscillopolarography; Superoxide free radical; Scavenging effect自由基在人体内能引起机体氧化,损害细胞,导致机体衰老和各种疾病。
自由基是一种外层轨道含有未配对电子的特殊状态分子或原子团,其中超氧自由基(O-2·)与人体最为密切。
一些物质,如超氧化物歧化酶(SOD)、维生素C、维生素E、胡萝卜素等能清除人体的自由基。
但体内的O-2·浓度随年龄的增长而增加,自由基清除能力则随年龄的增加而减少,有时不能提供足够的量来消除O-2·。
因此研究和寻找外源性O-2·清除剂在人体保健、治病方面具有重要意义,从天然动植物,尤其是从具有悠久历史的中草药中寻找高效的超氧自由基清除剂,已引起了国内外学者的极大兴趣[1~5]。
分子氧在单电子还原时有超氧阴离子自由基O-2·中间体生成。
超氧化过氧离子
超氧化过氧离子超氧化过氧离子,简称O2-. 它是一种存在于生物体内的一氧化氮和其他活性氧物质反应产生的有害物质。
超氧化过氧离子可以通过电子转移来捕获电子,从而与其他分子发生反应,并引发一系列的细胞损伤和炎症反应。
超氧化过氧离子在人体内的生成和清除是一个动态平衡过程。
在正常情况下,细胞内的一氧化氮和其他活性氧物质的生成和清除是相互平衡的。
然而,当细胞内的抗氧化系统受到损伤或超氧化过氧离子的产生过多时,这个平衡就会被打破,导致超氧化过氧离子的积累。
超氧化过氧离子的积累会引发一系列的病理反应。
首先,超氧化过氧离子可以与细胞膜的脂质发生反应,导致脂质过氧化和细胞膜的结构和功能的改变。
其次,超氧化过氧离子可以与DNA、蛋白质和其他细胞组分发生反应,导致细胞的损伤和死亡。
此外,超氧化过氧离子还可以激活炎症反应,引发炎症细胞的聚集和介质的释放,进一步加剧细胞损伤和组织炎症。
为了保护细胞免受超氧化过氧离子的损伤,人体内有一套复杂的抗氧化系统。
这些抗氧化物质可以与超氧化过氧离子发生反应,将其转化为无害的物质。
其中,超氧化物歧化酶是一种重要的抗氧化酶,它能够将超氧化过氧离子转化为氧气和过氧化氢。
此外,维生素C、维生素E等抗氧化物质也能够与超氧化过氧离子发生反应,保护细胞免受损伤。
虽然超氧化过氧离子在正常生理条件下对细胞具有一定的作用,但当其积累过多时,就会引发一系列的病理反应。
因此,保持正常的抗氧化平衡对维持机体健康非常重要。
通过饮食调理、适量运动、减少压力等方式,可以增强机体的抗氧化能力,减少超氧化过氧离子的损伤。
同时,科学合理地使用抗氧化剂也是保护细胞免受超氧化过氧离子损伤的重要手段。
超氧化过氧离子在维持机体正常生理功能方面具有重要作用,但当其积累过多时,会引发一系列的病理反应。
了解超氧化过氧离子的生成和清除机制,保持抗氧化平衡,对维持机体健康至关重要。
通过科学的饮食和生活方式,可以减少超氧化过氧离子的损伤,保护细胞健康。
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对人体内超氧离子的除去方法的探究
超氧离子普遍存在于生物体内,氧化性强,具有一定的细胞毒性。
根据研究,随着年龄增长,人体自身去除超氧离子的能力逐渐下降,因而造成人体的衰老。
我对抑制人体衰老的方法产生了兴趣,因此选择了此题。
本文将主要讨论人体内超氧离子的一些相关背景以及其去除的方法。
一、超氧离子在人体内的作用机理
自1900年,摩西•冈伯格在密歇根大学发现了历史上第一个被发现和证实的自由基——三苯甲基自由基以来,人类对自由基的理解与研究在一天天地发展着。
接下来就浅谈一下超氧离子在人体内的作用机理及其危害。
需氧生物细胞中含有特异清除超氧阴离子自由基的酶——SOD。
1968年,Mc Cord 和Fridovich发现SOD,在研究它的生物学作用的过程中,发现其对超氧阴离子自由基的清除作用,并由此提出了氧毒性的超氧化物自由基学说,一石激起千层浪。
可以说,是SOD 的发现直接导致超氧阴离子自由基氧毒性理论的提出。
根据此理论,超氧阴离子自由基本身、超氧阴离子自由基的衍生物等都具有细胞毒性。
就目前看来,超氧阴离子自由基能引起的疾病有:肺气肿、肺型氧中毒、自身免疫性疾病、老年白内障、辐射病等等。
二、去除人体内超氧离子的方法
通过对众多文献的查找,我找到了许多有去除超氧离子的作用的物质,它们大多是通过研究植物体和生物体去除超氧离子机理而发现和提取的,我将这些物质整理如下:(1)超氧化物歧化酶(SOD)去除超氧离子
诞生于1990年的明星产品大宝SOD蜜护肤品正是运用的这一原理,其广告语所称“经常使用大宝SOD蜜,能延缓皮肤衰老”,在理论上,也并不无道理。
但是,SOD成分是否真的能被肌肤良好吸收,进而起到延缓衰老的作用,还需进一步的研究。
(2)黄酮类化合物去除超氧离子
人们观察到中草药的抗氧化作用,近年来相关研究逐渐引起重视。
天然中草药中有效成分黄酮类化合物有芦丁、槲皮素、柚皮苷、桑色素、粗毛豚草素、橙皮苷等等,对它们清除O2-的研究相对较多,其中前三种清除O2-的能力较强。
(3)稀土元素去除超氧离子
随着稀土这一微量元素肥料在农业生产中的广泛应用,人们对稀土离子抑制超氧阴离子自由基的作用逐渐关注起来。
研究发现稀土硝酸盐与超氧化物歧化酶(SOD)具有相似的性质,对肾上腺素自氧化生成的O2-有明显的抑制作用,其中体系中稀土硝酸盐的浓度与其对O2-的抑制率之间有明显的剂量效应关系。
据了解,目前市面上已经出现了以稀土元素为主要成分的面膜,但还未得到广泛的普及。
(4)人参皂苷去除超氧离子
近年来国内外学者纷纷对人参进行一系列研究。
其中一项为人参皂苷,实验表明,人参皂苷确实在一定程度上起到清除自由基的作用;另外人参水提液也引起学者们的兴趣。
许多爱美人士都会经常性食用人参相关的产品,来延缓衰老,保持青春,市面上也出现
了许多含人参成分的美容护肤产品,均受到追捧。
(5)余甘果粗提液去除超氧离子
余甘果具有保健作用和药用价值,为进一步开发和充分利用余甘果的价值,科学家们进一步研究余甘果是否含有清除O2-的酶类物质。
通过临床研究表明,余甘果粗提液能抑制肾上腺素自氧化,且含有能清除O2-物质的活性。
(6)菜籽多酚与Vc去除超氧离子
自2002年以来,对菜籽多酚抗氧化能力的相关研究表明菜籽多酚在体内外清除自由基的能力。
研究表明,在化学模拟体系中,菜籽多酚与维生素C均能起到清除自由基的能力,且菜籽多酚、Vc及菜籽多酚与Vc的混合物清除O2-都不呈剂量—效应关系。
经过对市场上商品的研究,我发现,实际上,这些对去除超氧离子的方法的研究大都已经有了广泛的实际应用。
但如上所列举的最后两种尚未有成型的产品,可见,科学研究成果与应用成果之间还是存在着很大障碍的,期望科研成就能最终真正地造福人类。
三、总结与展望
超氧离子虽然是生物体内最重要的活性氧,但是超过正常的浓度范围是,它的强氧化性对人体具有较强的毒害作用,它是人类衰老的主要原因。
虽然现在的实验研究已经比较成熟,相应的产品也已经得到广发的应用,但目前的去除方法都是集中在如何对抗它的强氧化性,有没有可能从另外的角度去解决这一问题?保留它的氧化性而避免它对细胞膜,对DNA的伤害,让我们能利用它的氧化性。
也许关于超氧离子的更多奥秘,还有待我们去发现。
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