乳酸菌培养基
双歧杆菌与乳酸菌筛选培养基
BBL培养基双歧杆菌选择性培养基成份蛋白胨15.0g酵母粉2.0g葡萄糖20.0g可溶性淀粉0.5g氯化钠5.0g5%半胱氨酸10.0mL西红柿浸出液400.0mL吐温80 1.0mL肝提取液80.0mL琼脂20.0g蒸馏水520.0mLpH7.0MRS培养基乳酸细菌培养基（MRS）蛋白胨10.0 g牛肉膏10.0 g酵母膏 5.0 g柠檬酸氢二铵[（NH4）2HC6H5O7] 2.0 g葡萄糖(C6H12O6·H2O) 20.0 g吐温80 1.0 mL乙酸钠（CH3COONa·3H2O） 5.0 g磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O） 2.0 g硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.58 g硫酸锰（MnSO4·H2O）0.25 g琼脂18.0 g蒸馏水 1 000 mLpH 6.2~6.6当乳酸菌生长代谢出乳酸后，会使pH下降而使颜色由绿变为黄绿，也由于pH 值降低再加上抗生素及厌氧培养的作用，所以一般的微生物不容易在此培养基上生长，因此十分容易鉴别乳酸菌。
2005-03-10 08:08 消息引用收藏分享奉上一篇实验，以供参考！厌氧菌的分离和培养目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有：厌氧箱培养技术；厌氧罐培养技术；厌氧袋培养技术；亨盖特厌氧滚管技术。
这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术。
亨盖特厌氧滚管技术是美国微生物学家亨盖特（Hungate）于1950年首次提出并应用于瘤胃厌氧微生物研究的一种厌氧培养技术。
以后这项技术又经历了几十年的不断改进，从而使亨盖特厌氧技术日趣完善，并逐渐发展成为研究厌氧微生物的一整套完整技术。
而且多年来的实践已经证明它是研究严格、专性厌氧菌的一种极为有效的技术。
亨盖特厌样滚管培养技术不仅可用于有益厌氧菌如双歧杆菌等的分离、与活菌培养计数，还可以用于有害***菌（如酪酸菌）或病原菌（如肉毒梭状芽孢杆菌）的分离与鉴定。
双歧杆菌与乳酸菌筛选培养基
BBL培养基双歧杆菌选择性培养基成份蛋白胨酵母粉葡萄糖可溶性淀粉氯化钠5%半胱氨酸西红柿浸出液吐温80肝提取液琼脂蒸馏水MRS培养基乳酸细菌培养基（MRS）蛋白胨 g牛肉膏 g酵母膏 g柠檬酸氢二铵[（NH4）2HC6H5O7] g葡萄糖(C6H12O6·H2O) g吐温80 mL乙酸钠（CH3COONa·3H2O） g磷酸氢二钾（K2HPO4·3H2O） g硫酸镁（MgSO4·7H2O） g硫酸锰（MnSO4·H2O） g琼脂 g蒸馏水 1 000 mLpH ~当乳酸菌生长代谢出乳酸后，会使pH下降而使颜色由绿变为黄绿，也由于pH值降低再加上抗生素及厌氧培养的作用，所以一般的微生物不容易在此培养基上生长，因此十分容易鉴别乳酸菌。
2005-03-10 08:08 消息引用收藏分享奉上一篇实验，以供参考！厌氧菌的分离和培养目前培养厌氧微生物的简便而又有效的技术包括有：厌氧箱培养技术；厌氧罐培养技术；厌氧袋培养技术；亨盖特厌氧滚管技术。
这里介绍的是亨盖特厌氧滚管技术。
亨盖特厌氧滚管技术是美国微生物学家亨盖特（Hungate）于1950年首次提出并应用于瘤胃厌氧微生物研究的一种厌氧培养技术。
以后这项技术又经历了几十年的不断改进，从而使亨盖特厌氧技术日趣完善，并逐渐发展成为研究厌氧微生物的一整套完整技术。
而且多年来的实践已经证明它是研究严格、专性厌氧菌的一种极为有效的技术。
亨盖特厌样滚管培养技术不仅可用于有益厌氧菌如双歧杆菌等的分离、与活菌培养计数，还可以用于有害***菌（如酪酸菌）或病原菌（如肉毒梭状芽孢杆菌）的分离与鉴定。
1材料样品双歧酸奶（液体）、双歧杆菌制剂（固体）。
培养基改良MRS培养基，PTYG 培养基。
仪器和器具亨盖特厌氧滚管装置一套，厌氧管，厌氧瓶，滚管机，定量加样器。
2 流程铜柱除氧→预还原培养基→稀释用液制备→稀释样品→滚管→培养→计数3方法铜柱系统除氧铜柱是一个内部装有铜丝或铜屑的硬质玻璃管。
常用乳杆菌培养基整理
用途
原理
改Hale Waihona Puke 番茄汁培养基用于食品中乳酸菌总数测定
番茄汁可提供碳源、蛋白质等营养物质；牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源；磷酸氢二钾为缓冲剂；吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌；琼脂是培养基的凝固剂。
MRS肉汤
用于乳酸菌增菌培养
蛋白胨、肉膏、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖为可发酵糖类；磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌。
MRS琼脂
用于食品中乳酸菌总数测定
蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖为可发酵糖类；磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌；琼脂是培养基的凝固剂。
APT琼脂
用于乳酸菌分离培养
酪蛋白胨、酵母浸粉、提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖为可发酵糖类；磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；柠檬酸钠、硫酸镁、盐酸硫胺素、氯化锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。
MC培养基
用于食品中乳酸菌检测的
APT肉汤
用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量盐酸硫酸胺素菌的培养。
酵母浸粉、蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子，葡萄糖是可发酵糖，氯化钠维持均衡的渗透压，磷酸盐是缓冲剂。
Rogosa琼脂（RogosaAgar）
大豆蛋白胨、牛肉浸粉和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源；乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解，以辨别乳酸菌；琼脂是培养基的凝固剂；中性红为pH指示剂。乳酸球菌和乳酸杆菌在本培养基上典型特征为红色,有明显溶钙环
乳酸菌基础培养基比较研究
２Ｘｉｙ ｎ ｇｉｕｔｒｌ ｒｉｉｇＳ ｈ ｏ ， ｎ ａ ｇ ６ ０ ０ ． ｎ ａ ｇＡ ｒｃ ｌ ａ Ｔ ａｎｎ ｃ ｏ ｌＸｉｙ ｎ ４ ０ ，Ｈｅ ａ ， ｈｎ ） ｕ ４ ｎ ｎ Ｃ ｉａ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔ ｅ ｏ ｔ ｍ ｏ ｄ ｔ ｎ ｏ ｚ ｍａｉ ｙ ｒ ｌ ｓｓ ｏ ｅ ｔａ ｒ ｔａ ｅ ｉ ｋ ｍｍｅ ｌ ｓ ｓｕ ｉｄ． ｓｒ ｃ ： ｈ ｐｉ ｍｕ ｃ ｎ ｉｉ ｆＥｎ ｙ ｔｃ ｈ ｄ ｏｙ ｉ ｎ ｎ ｕ ｒ ｐ ｏｅ ｓ ｎ ｓ ｉ ｏ ｌ ｄ ｍｉｋ ｗａ ｔｄ ｅ
Ｔ ｋ ｎ ｘ ｄＬａ ｔｂ ｃ ｌ ｓｂ ｌａ ｉｕ ｎ ｔｅ ｏ ｏ ｃ ｓｔ ｅ ｍｏ ｉｕ ，ｈ ｅ ｍｅ ｔｄ ａ ｄ ｆｅ ｚ －ｄ ｅ ｆ ｃ ｆ ａ ｉ ｇｍｉｅ ｃｏ ａ ｉ ｕ ｕ ｙ ｒｃ ｓａ ｄＳ ｒｐｔｃ ｃ ｕ ｈ ｒ ｐｈ ｌ ｔ ｅｆｒ ｎ ｅ ｎ ｅ ｅ ｒ ｄｅｆ ｔ ｌ ｓ ｒ ｉ ｅ ｏ ｔｒ ｅｂ ｓｃｍｅ ｉ ｍ ｈ ｅ ａ ｉ ｄ ｕ ＭＲＳ ｓ ｉ ． ｋ ｍｍｅ ｌ ｎ ｔ ｎ ｙ ｔ ｙ ｒｌ ｓ ｔ ｓｒ ｓ ａ ｃ ｅ ｒｈ ｅ ｕ ｈ ｗｅ ｈ ｔ ｄ ｍｉｋａ ｄｉｓｅ ｚ ｍａｉ ｈ ｄ ｏｙ ａ ｅｗａ ｅ ｅ ｒ ｈ ｄ．Ｉ ｅｒ ｓ ｈｓｓ ｏ ｄ ｔａ ： ｃ ＇
摘
要 ： 究 了脱脂乳 中性蛋 白酶的最适酶解条件 ， 以保加利 亚乳杆 菌和嗜热链球菌为混合发 酵菌种 ， ＭＲ 、 研 并 对 Ｓ 脱
乳酸菌培养及诱导培养基
嗜酸乳杆菌试验方法一株嗜酸乳杆菌产共轭亚油酸条件的优化[J]. 中国酿造，20091、基础培养基(脱脂乳培养基)12.0 g脱脂奶粉，蒸馏水100 mL，pH自然，115℃灭菌20 min。
2、MRS固体培养基葡萄糖20.0g，蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母浸膏5.0g，无水乙酸钠5.0g，磷酸氢二钾2.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，MgSO4·7H2O 0.58g，MnSO4·H2O 0.33g，琼脂15g，pH 6.8左右，加蒸馏水至1000mL，121℃灭菌20min。
3、产酶培养基：脱脂乳培养基，并加入一定浓度的亚油酸来诱导产酶。
1 出发菌株的活化及纯化保藏的嗜酸乳杆菌接种于液体MRS培养基，摇匀后置36℃恒温箱中培养12h，接种于液体培养基中活化2次。
划线接种到MRS固体培养基，36℃恒温培养36h，嗜酸乳杆菌在120r／min的状态下培养有利于嗜酸乳杆菌的繁殖*。
长出单个菌落后，挑取菌落进行革兰氏染色镜检，确定是否纯种。
嗜酸乳杆菌的形态与菌落特征在MRS琼脂培养基上需氧培养48h后，菌落微小，不规则，微隆起，有光泽，灰白色，呈透明的玻璃霜花样。
10倍显微镜观察表面凸凹不平，边缘为丝状或卷发样。
革兰氏染色后可见菌体呈短杆状，单个或短链状排列，革兰氏染色阳性。
肉眼观察，嗜酸乳杆菌菌落较小,平台状，不规则、圆形凸起、边缘整齐、质地柔软、灰白色、有光泽。
1）500mL MRS液体培养基2）5个250mL的三角瓶，橡胶塞，牛皮纸，绳子3）5个培养皿4）1个接种环，酒精灯，打火机，酒精2 种子的制备活化的菌种接种于基础培养基，于36℃恒温培养24 h，保藏备用。
增菌培养基最佳接种量为3%（活菌数为108个/mL）★3 产酶诱导培养用脱脂乳配成12%的产酶液体培养基，每250mL三角瓶中装入100mL(含12g脱脂乳、1.50‰亚油酸)，加入1mL吐温80，115℃灭菌30 min后，接入2 mL 种子液(每mL含菌体5×108个)，36℃培养36h。
乳酸菌分离鉴定及试验方法
乳酸菌分离鉴定及试验方法一、引言乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，具有重要的生物学功能和应用价值。
乳酸菌可以通过发酵作用，将葡萄糖、果糖等碳源转化为乳酸和其他有机酸，同时还会产生一些对人体有益的物质，如维生素、酶、抗生素等。
乳酸菌在食品工业、医药工业、农业等领域具有重要的应用前景。
乳酸菌的分离鉴定及试验方法对于深入研究乳酸菌菌种的特性、功能以及在不同领域中的应用具有重要意义。
本文将介绍乳酸菌的分离鉴定及试验方法，旨在为相关研究人员提供参考和指导。
二、乳酸菌分离方法1. 采样乳酸菌的分离首先需要进行采样工作。
可以从发酵食品、乳制品、蔬菜、水果、土壤、肠道等多种来源进行采样。
在采样过程中应注意样品的新鲜性和卫生性，避免外部污染对实验结果造成影响。
2. 培养基的选择乳酸菌可以利用多种培养基进行分离和培养，常用的培养基有MRS培养基、乳清培养基等。
根据具体的分离目的和需求选择适合的培养基。
3. 分离将采样得到的样品进行系列稀释，取适量的稀释液均匀涂布在含有适当培养基的琼脂平板上，培养温度一般在30-37摄氏度之间，培养时间约48-72小时。
4. 纯化观察培养基上的菌落形态，选择典型的菌落进行分离单菌培养，通过多次传代稀释可以纯化获得纯种的乳酸菌。
5. 形态观察利用显微镜对分离得到的菌株进行形态学观察，包括细胞形状、大小、排列方式等。
三、乳酸菌鉴定方法1. 生理生化鉴定通过对分离得到的菌株进行生理生化特性的研究，包括乳酸发酵能力、氧耐受性、温度、pH值的适应能力等，可以初步判断乳酸菌的种属。
2. 生化试剂法利用生化试剂对乳酸菌进行鉴定，如气体发生试验、氧化还原酶试验、酶活性试验等。
3. 分子生物学鉴定通过PCR扩增乳酸菌的16S rRNA基因序列，测序后与数据库比对，确定乳酸菌的种属分类。
四、乳酸菌试验方法1. 发酵活性测定通过测定菌株在不同条件下的发酵活性，如发酵速率、产酸速率、产酶能力等。
2. 抗菌活性测定测定乳酸菌对一些有害菌的抑菌作用，判断其在抗菌方面的潜力。
乳酸菌培养及诱导培养基
乳酸菌培养及诱导培养基嗜酸乳杆菌试验方法一株嗜酸乳杆菌产共轭亚油酸条件的优化[j].中国酿造，20211、基础培养基(脱脂乳培养基)12.0g脱脂奶粉，蒸馏水100ml，ph自然，115℃杀菌20min。
2、mrs固体培养基葡萄糖20.0g，蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母浸膏5.0g，浓硫酸乙酸钠5.0g，磷酸氢二钾2.0g，柠檬酸氢二铵2.0g，mgso47h2o0.58g，mnso4h2o0.33g，琼脂15g，ph6.8左右，加蒸馏水至1000ml，121℃灭菌20min。
3、产酶培养基：脱脂乳培养基，并加入一定浓度的亚油酸来诱导产酶。
1启程菌株的活化及提纯保藏的嗜酸乳杆菌接种于液体mrs培养基，摇匀后置36℃恒温箱中培养12h，接种于液体培养基中活化2次。
划线接种到mrs固体培养基，36℃恒温培养36h，嗜酸乳杆菌在120r／min的状态下培养有利于嗜酸乳杆菌的繁殖。
长出单个菌落后，挑取菌落进行革兰氏染色镜检，确定是否纯种。
嗜酸乳杆菌的形态与菌落特征在mrs琼脂培养基上需氧培养48h后，菌落微小，不规则，微隆起，有光泽，灰白色，呈透明的玻璃霜花样。
10倍显微镜观察表面凸凹不平，边缘为丝状或卷发样。
革兰氏染色后可见菌体呈短杆状，单个或短链状排列，革兰氏染色阳性。
肉眼观察，嗜酸乳杆菌菌落较小,平台状，不规则、圆形凸起、边缘整齐、质地柔软、灰白色、有光泽。
1）500mlmrs液体培养基2）5个250ml的三角瓶，橡胶塞，牛皮纸，绳子3）5个培养皿4）1个注射环路，酒精灯，打火机，酒精2种子的制备活化的菌种注射于基础培养基，于36℃恒温培育24h，中草药水泵。
增菌培养基最佳注射量为3%（活菌数为108个/ml）★3产酶诱导培养用脱脂乳硝酸锶12%的产酶液体培养基，每250ml三角瓶中放入100ml(含12g脱脂乳、1.50‰亚油酸)，重新加入1ml吐温80，115℃杀菌30min后，互连2ml种子液(每ml含菌体5×108个)，36℃培育36h。
乳酸杆菌培养
培养基配方如下"改良MRS培养基蛋白陈10g牛肉膏10g酵母提取物5g葡萄糖20个吐温80 1 g琼脂粉15g乙酸钠5g柠檬酸二铰2gK2HPO4 2g MgSO4.7H2O0 0.58g MnSO4.4HZO 0.25g碳酸钙20g蒸馏水1000 mL pH6.2 121 C x l0 min灭菌MRS培养基蛋白陈109牛肉膏109酵母提取物5g葡萄糖209吐温8019琼脂粉159乙酸钠5g柠檬酸二按2gKZHPO429MgSO4#7HzO0.589MnSO4#4HZO0.259蒸馏水1000mLpH6.212loCxlsmin灭菌明胶基础培养基蛋白陈lg酵母提取物lg葡萄糖0.19明胶129盐溶液4mL蒸馏水100mLpH值7.0115oCxlsmin灭菌蛋白陈水培养基蛋白陈109NaC巧g蒸馏水IO00mLpH值7.012loCX15mill灭菌冻干保护剂脱脂乳粉1209蒸馏水gsomL115oCxlsmin灭菌2.3.1.1酸菜中乳杆菌的分离与纯化取酸菜汁lmL,用无菌PBs缓冲液梯度稀释到10-,,分别从10一!10石!10一,三个稀释度的试管中各取0.2mL涂布于改良MRS琼脂培养基上,于37e!80%氮气!10%氢气和10%二氧化碳的厌氧环境下培养2小48小时后,挑取含钙培养基上具有明显钙溶圈的菌落,进行革兰氏染色!镜检"凡是革兰氏阳性的菌株,继续在MRS培养基上纯化培养,直至镜检为纯菌"2.3.1.3过氧化氢酶试验挑取固体培养基上培养24小时后的单个菌落,置于洁净玻片上,滴加3%过氧化氢溶液数滴(新鲜配制),在305内有大量气泡产生者为阳性(+),不产生气泡者为阴性(一)"其中过氧化氢酶试验阴性的杆菌初步确定为乳杆菌(敖敦格日勒等,2002)"将这些菌株编号后接种到MRS斜面培养基上,培养24小时后置4e冰箱中保存备用"2.3.1.4菌种保存将己经分纯的乳杆菌接入10mL液体MRS培养基中37e培养20小时后,离心(6000甲m离心10min)收集菌体,然后加入3mL冻干保护剂,对菌体进行悬浮,混匀后取分装至安瓶瓶中(600林F瓶),然后放入一20e的冰箱中预冻12小时"预冻结束后,立即放入冻干机中进行冷冻干燥,搁板温度均为一40干燥压力均为10Pa,干燥温度均为202.3.2.5部分分离株的糖发酵试验将分离自酸菜样品的分离株Ll一L10和分离自猪肠道样品的分离株L10一L20在MRS固体培养基上划线,37e恒温培养24h后,挑取单个菌落接入发酵管内,放入灭菌试管中,37e培养一周后观察试验结果,并记录,阳性用(十)表示,阴性用(一)表示"通过菌种对单糖!二糖!多糖以及糖普和糖醇类等碳水化合物的利用情况加以鉴定它们的种"其反应结果仅局限于保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌生产的普通酸奶, ,嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌发酵乳糖产生乳酸、醋酸、细菌素等健康促进成分,但是它们对酸及胆汁盐非常敏感，难以通过胃肠环境而在肠道中定植。
乳酸菌生长最佳培养基的筛选
乳酸菌生长最佳培养基的筛选Prepared on 22 November 2020乳酸菌生长最佳培养基的筛选摘要：文中通过检测乳酸菌在不同固体和半固体培养基中的菌落数、菌落大小及溶钙圈大小,以筛选出乳酸菌生长的最佳培养基。
实验表明,在添加胡萝卜汁的乳酸菌分离固体培养基上,乳酸菌生长最好,活菌数含量最高,菌落和溶钙圈最大。
同种培养基,半固体培养较固体培养更适于乳酸菌生长,前者出菌快,活菌数多。
关键词：乳酸菌固体培养基半固体培养基菌落乳酸菌是有益于人体健康的益生菌,主要存在于人体肠道,其有助于宿主调整正常菌群,维持肠道微生态环境的平衡。
乳酸菌的代谢产物能降低肠道内的pH值,抑制肠道中腐败菌的生长和减弱腐败菌在肠道的产毒作用,并有帮助消化、防止便秘,防止细胞老化,降低胆固醇,抗肿瘤以及调节人体生理机能等保健和医疗作用[1-5]。
在食品向天然型、功能型发展的今天,乳酸菌制品正愈来愈受到人们的重视,通过检测乳酸菌在不同固体和半固体培养基中的菌落数,菌落和溶钙圈的大小,以筛选出乳酸菌生长的最佳培养基,用于乳酸菌制品的研究与开发一、材料及方法111菌种及来源保加利亚乳杆菌(lactobacillusbulgaricus),由西北农业大学微生物室提供。
(以下简称乳酸菌)。
112培养基11211固体培养基的筛选RJP培养基(1号):牛肉膏3g;蛋白胨3g;酵母膏3g;乳糖20g;琼脂15g;蒸馏水1000ml;pH610。
LAB培养基(2号):牛肉膏10g;酵母膏10g;乳糖20g;琼脂15g;吐温80110ml;CaCO310g;KH2PO42g;蒸馏水950ml;pH616。
214号培养基(3号):牛肉膏3g,胰胨10g;NaCl5g;酵母膏6g;葡萄糖2g;半胱氨酸013g;琼脂15g;蒸馏水1000ml;pH714~715乳酸菌分离培养基(4号):牛肉膏1g;蛋白胨1g;酵母膏1g;葡萄糖1g;蕃茄汁20%;吐温800105%;CaCO32g;溴甲酚绿0101%;琼脂115g;蒸馏水100ml;pH615。
乳酸菌计算活菌数培养基国标
乳酸菌计算活菌数培养基国标乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的细菌，具有很高的益生作用。
在食品工业中，乳酸菌被广泛应用于发酵食品的制作中，如酸奶、乳酸菌饮料等。
为了保证发酵食品的品质和安全性，需要对乳酸菌进行活菌数的检测。
而乳酸菌活菌数的检测方法和标准在我国被统一为《乳酸菌活菌数测定方法》（GB 4789.38-2016）。
乳酸菌活菌数的测定方法主要包括直接计数法和间接计数法两种。
直接计数法是通过显微镜观察乳酸菌在培养基上的菌落数来进行活菌数的估计。
间接计数法则是通过测定乳酸菌产生的酸度或气体量来间接反映活菌数。
在进行乳酸菌活菌数测定之前，首先需要准备好培养基。
培养基的选择对乳酸菌的生长和繁殖起着至关重要的作用。
常用的培养基有MRS培养基、LBS培养基等。
这些培养基能提供乳酸菌所需的营养物质，并且能够抑制其他细菌的生长。
接下来是乳酸菌的接种和培养。
将待测样品接种到培养基上，并且在适宜的温度下进行培养。
乳酸菌的适宜生长温度一般在35℃左右。
在培养的过程中，乳酸菌会利用培养基中的营养物质进行生长和繁殖，最终形成可见的菌落。
乳酸菌活菌数的测定可以通过直接计数法进行。
将培养基上的菌落取出，制备菌悬液后，使用显微镜观察菌落中的乳酸菌数量。
在显微镜下观察时，可以使用乳酸菌特异性染色剂来染色，以便更好地观察和计数。
通过计算所观察到的菌落数和稀释倍数，最终可以得出乳酸菌活菌数的估计值。
除了直接计数法，间接计数法也是一种常用的测定乳酸菌活菌数的方法。
其中，酸度测定法是一种常用的间接计数法。
乳酸菌在发酵过程中会产生乳酸，从而使培养基的酸度增加。
通过测定培养基的酸度变化，可以间接反映出乳酸菌的活菌数。
利用酸度计或pH计进行测定，可以得到乳酸菌活菌数的近似值。
乳酸菌活菌数的测定方法在GB 4789.38-2016中还规定了一些其他的注意事项。
比如，在进行直接计数法时，要求在菌落形成之前进行计数，以避免菌落过大或过小对计数结果的影响。
新型乳酸菌增菌培养基研究
Ｄ Ｕ ｉ Ｙ Ｕ ＡＮ Ｌｅ ， ｃｈａ ｏ， Ｙ Ａ Ｎ Ｇ ｉ ｏ．ｕ Ｘ ａ １
（ｃ ｏ ｌ ｆ ｉｔｃ ｎ ｌｇ ｎ ｏ ｄ Ａｎ ａ ｇＩｓ ｔｔ ｆ ｅ ｈ ｏｏ ｙ Ａ ｙ ｎ ４ ５ ０ ， ｈｎ ） Ｓ ｈ ｏ ｏｅｈ ｏｏ ｙａ ｄ ｏ ， ｙ ｎ ｔ ｕｅ ｃ ｎ ｌ ， ｎ ａ ｇ ｏＢ Ｆ ｎ ｉ ｏＴ ｇ ５ ０ ０ Ｃ ｉａ
１ ％ ｐｎａ ｐｅ ｅｌｕｃ， ５ Ｐｅ ｒｔ ｓ ｅ ｔｓ ｏ ｐａｄ２ ％ ｐ ｔｔ ｉｅＴ ｅｅｒ ｈ ｎ ｌ ｅ ｄｕ ｗ ｓ ｏ ｏ ｌ ０ ｉｅｐｌ ｅｊｉ ２ ％ ｌ ｏｕ ｏ ｔ ａｕ ｕ ０ ｏａ ｊ ｃ． ｈ ｉ ｍｅｔ ｕｔ ｉ ｐ ｅ ｕ ｓ ｒ ｓ ｎ ｏｕ ｎｃ ｃ ｕ ｍｅ ｍ ａ ｔ ｎｙ ｒ ｎ
有 利 的条 件 。
关 键 词 ：保 加利 亚乳 杆 菌 ；嗜 热链 球 菌 ；碳源 ；氮源 ；生长 因 子
Ｄｅ ｅｏ ｖ ｌｐｍｅ ｎ Ｅｎｒｃ ｎｔ ａ ｉｈｍｅ ｔ ｅ ｉ ｍ ｏ ｃｉ ｉ ｃ ｅ ｉ ｏｆ ｎ ｄ ｕ ｆ ｒＬａ ｔｃ Ａｃ ｄ Ｂａ ｔｒａ Ｍ
摘 要 ：通过单因素试验选 出乳酸菌增菌培养基 的最佳 的碳源 、氮源和生长 因子 ，然后利用 正交试验选 出最 佳的乳
酸菌的增菌培养基 。结 果表 明：１ ％ 菠萝皮汁、２ ％平菇浸汁 和 ２ ％ 马铃薯汁配制而成 的乳 酸菌培养基的增菌效 ０ ５ ０
果最佳 ，这种培养基不仅增菌效果 明显优越于 ＭＲ Ｓ培养 基，而且价格低廉 ，为乳酸菌 的工业化大规模 生产 提供 了
中 图分 类 号 ：Ｔ ２ ５５ ９ ９１７ Ｓ ０ ．；Ｑ ３ ．１
文 献 标 识 码 ：Ａ
文 章编 号 ：１７ —１７２ １）１０ ０ ． ６ １５ ８ （０ ２０ —０４０ ４
一种乳酸菌增菌培养基的优化
一种乳酸菌增菌培养基的优化摘要：备直投式乳酸发酵剂，通过综合运用复合生长培养基、缓冲盐法及化学中和法，利用正交实验的设计方法，对乳酸菌的增菌培养进行了研究。
试验结果表明，以1％的胡萝卜汁作为生长促进剂，加0．5％K：HPO。
作为缓冲盐，接种量为3％，培养温度37。
C，培养过程用30％Na：CO，溶液作中和剂，将pH值控制在6．3，培养7—8 h后，可使乳酸菌的活菌数达到109的数量极。
与普通的液体发酵剂相比，获得了显著的浓缩效果。
关键字：乳酸菌；增菌培养基引言：发酵乳制品在乳制品中占有重要地位。
随着我国人民消费水平的提高，对发酵乳制品中的酸奶有了新的认识，使得酸奶的产量以年平均25％的速度增长。
这对乳酸菌发酵剂品质、种类提出了新的要求。
目前酸奶生产厂家所采用的菌种发酵剂有2种，直投式粉末菌种发酵剂和继代式菌种发酵剂。
由于继代式发酵剂存在着种种弊端，所以直投式发酵剂使用普遍。
由于目前国内直投式发酵剂尚未产业化，尚需进口，所以直投式发酵剂的国产化越来越受到重视。
1、乳酸菌的简介与作用机理1.1乳酸菌的简介乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。
凡是能从葡萄糖或乳糖的发酵过程中产生乳酸菌的细菌统称为乳酸菌。
这是一群相当庞杂的细菌，目前至少可分为18个属，共有200多种。
除极少数外，其中绝大部分都是人体内必不可少的且具有重要生理功能的菌群，其广泛存在于人体的肠道中。
目前已被国内外生物学家所证实，肠内乳酸菌与健康长寿有着非常密切的直接关系。
1.2乳酸菌的作用机理乳酸菌在动物体内能发挥许多的生理功能。
大量研究资料表明，乳酸菌能促进动物生长，调节胃畅道正常菌群、维持微生态平衡，从向改善胃肠道功能；提高食物消化率和生物效价；降低血清胆固醇，控制内毒素；抑制肠道内腐败菌生长：提高机体免疫力等。
⑴提供营养物质，促进机体生长乳酸菌如果能在体内正常发挥代谢活性，就能直接为宿主提供可利用的必需氨基酸和各种维生素（维生素B族和K等)，还可提高矿物元素的生物活性，进而达到为宿主提必需营养物质、增强动物的营养代谢、直接促其生长的作用。
工业化生产乳酸菌的液体培养基的配方
工业化生产乳酸菌的液体培养基的配方工业化生产乳酸菌的液体培养基的配方产品要菌体,菌种是复合菌种,做进一步的发酵用的,十分感谢!其实工业培养基跟实验室培养基只是说原料粗糙度或者说是原料选择的区别,品级不一样而已,要看楼主对于乳酸菌培养的要求了,比如楼主是要做高密度培养呢,还是直接就获取代谢产物,菌体离心收集后洁净度是否要高,还有发达就是楼主选择的工艺是否时候使用低品级的工业培养基呢,这些问题需要综合考虑才能最后定论培养基的内容。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化钠0.5克,琼脂1.5克,水100毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。
待NDS烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。
等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2~7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟。
配方二马铃薯培养基取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。
过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。
配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。
2、放线菌培养基配方一淀粉琼脂培养基(高氏培养基)可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升先把淀粉放在烧杯里,用5毫升水调成糊状后,倒入95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。
在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。
乳酸菌在培养基上的菌落特征
乳酸菌在培养基上的菌落特征乳酸菌是一类广泛存在于自然界中的微生物，其在发酵及食品生产、医药制品等领域中具有重要的应用价值。
在分离纯化乳酸菌过程中，对乳酸菌在培养基上的菌落特征有一定的认识，可以帮助酸奶、营养酒等发酵产品的生产以及医药领域中相关药物的研究与改进。
一、形态特征乳酸菌在培养基上的菌落可以简单地分为平滑菌落和粗糙菌落两类。
平滑菌落的外形较为规则，表面光滑呈发亮状态，周缘清晰，直径一般在1-5 mm之间。
菌落的颜色主要与菌株的种类有关，有些为乳白色，有些为黄色、淡黄色甚至棕色。
粗糙菌落的外形不规则，菌落表面较为粗糙，常常呈现出海绵状，直径可达10 mm甚至更大，表面颜色也随菌株的不同而有所差异。
二、质地特征软质菌落质地松软，质地细腻，菌落表面光滑，易破碎。
中等质地菌落质地适中，表面较为平整，菌落周围的边缘明显。
三、透明度特征乳酸菌在培养基上的菌落透明度特征可分为透明、半透明和不透明三种。
透明菌落透光性强，看起来像透明的水滴，只在菌落边缘有色。
半透明菌落比较模糊，菌落中间清晰，边缘模糊。
不透明菌落透光性弱，没有看到菌落下的培养基颜色，高度浑浊。
四、边缘特征乳酸菌在培养基上的菌落边缘特征可以分为光滑边缘、锯齿状边缘和波浪状边缘三种。
光滑边缘菌落边缘清晰，呈现圆形或椭圆形，无凹凸突起。
锯齿状边缘菌落形态不规则，边缘有很多小锯齿状起伏，所以其边缘呈现出不规则的形状。
波浪状边缘菌落形状不规则，呈现出波浪状，边缘不明显，需要查看其下方培养基才能看得出来。
五、表面特征平滑表面菌落表面较为平滑，呈现圆形或椭圆形。
凹凸不平表面菌落表面凹凸不平，可能是由菌落内的气泡所致。
组织蒸发表面菌落呈现出较为光滑的环状，该现象主要是由于菌落内部的液体挥发形成的。
总结起来，乳酸菌在培养基上的菌落特征，包括形态、质地、透明度、边缘和表面特征。
这些特征可以通过肉眼或显微镜来观察，对乳酸菌的鉴别、区分、纯化以及乳酸菌的酸奶、营养酒等发酵产品的生产具有重要的参考价值。
怎样培养天然乳酸菌的方法
怎样培养天然乳酸菌的方法
要培养天然乳酸菌，可以按照以下步骤进行：
1. 准备材料：需要乳酸菌菌种和培养基。
乳酸菌菌种可以从天然的发酵食品中获得，如酸奶或酸菜。
培养基可以用牛奶、酸奶或乳酸菌培养基粉等准备。
2. 准备培养容器：选择一个干净的容器，最好是玻璃或塑料容器。
要确保容器在使用前已经彻底清洁和消毒。
3. 准备培养基：将培养基加热至40-50摄氏度，让其稍微变暖。
4. 加入乳酸菌菌种：将乳酸菌菌种加入培养基中。
要根据菌种和培养基的使用说明来确定加入的数量。
5. 摇晃或搅拌培养容器：将培养容器盖好，用手轻轻摇晃或用棒子轻轻搅拌，使培养基和乳酸菌菌种充分混合。
6. 存放和保温：将培养容器放置在温暖的地方，温度最好在35-40摄氏度之间。
可以使用保温箱或将容器包裹在保温材料中，以保持温度稳定。
7. 观察和维护：每天观察培养容器中的菌落，注意是否有任何变化。
如果需要，可以定期添加新的培养基来维持菌种的生存和繁殖。
8. 储存：一旦乳酸菌培养达到预期的水平，可以将其存储在冰箱中。
将培养物过滤，得到的滤液可以储存于冰箱中，并在之后使用。
需要注意的是，在培养乳酸菌的过程中要注意卫生，避免细菌污染。
另外，如果不具备培养乳酸菌的条件或技术，也可以选择购买乳酸菌制剂，以确保获得健康和安全的乳酸菌产品。
乳酸菌常用培养基M17
M17 Agar • M17 BrothIntended UseM17 Agar is used for isolating and enumerating lactic strepto-cocci in yogurt, cheese starters and other dairy products.M17 Broth is used for isolating lactic streptococci from yogurt, cheese starters and other dairy products. Summary and ExplanationLactic streptococci are acid-producing bacteria. They are nutritionally fastidious and require complex culture media for optimum growth. One study showed that in a synthetic medium, all strains had an obligate requirement for at least six amino acids and three vitamins.1 These homofermentative lactic streptococci produce large amounts of acid and, in a culture medium without an adequate buffering system, the pH decreases and adversely affects growth. Lowrie and Pearce2 developed M16 Medium but it lacked a strong buffering system. Terzaghi and Sandine3worked with M16 Medium and demonstrated that the rapid drop in pH that accompanies lactic streptococcal growth can adversely affect colony size and phage plaque formation. They modified M16 Medium using disodium-β-glycerophosphate as a buffer and called it M17. Shankar and Davies4 found that disodium-β-glycerophosphate in M17 Broth suppressed Lactobacillus bulgaricus and selectively isolated Streptococcus thermophilus from yogurt. Similar results were achieved using M17 Broth solidified with agar. The International Dairy Federation recommends M17 Agar for isolating S. thermophilus from yogurt.5 M17 Agar is a standard methods medium for isolating lactic streptococci.6 Principles of the ProcedureM17 Agar and M17 Broth contain peptones and meat derivatives as sources of carbon, nitrogen, vitamins and minerals. Yeast extract supplies B-complex vitamins which stimulate bacterial growth. Disodium-β-glycerophosphate buffers the medium as acid is produced from fermentation of lactose. Ascorbic acid stimulates growth of lactic streptococci. Magnesium sulfate provides essential ions for growth. Agar is the solidifying agent in M17 Agar.FormulaeDifco™ M17 AgarApproximate Formula* Per 950 mLPancreatic Digest of Casein .........................................5.0 g Soy Peptone ................................................................5.0 g Beef Extract .................................................................5.0 g Yeast Extract ...............................................................2.5 g Ascorbic Acid ..............................................................0.5 g Magnesium Sulfate .....................................................0.25 g Disodium-β-glycerophosphate ...................................19.0 g Agar .........................................................................11.0 g Difco™ M17 BrothConsists of the same ingredients without the agar.*Adjusted and/or supplemented as required to meet performance criteria. Directions for Preparation from Dehydrated Product1. Suspend the powder in 950 mL of purified water.Difco™ M17 Agar – 48.25 g;Difco™ M17 Broth – 37.25 g.Mix thoroughly.2. Heat with frequent agitation and boil for 1 minute to com-pletely dissolve the powder.3. Autoclave at 121°C for 15 minutes. Cool to 50°C.4. Add 50 mL sterile 10% lactose solution and mix well.5. Test samples of the finished product for performance usingstable, typical control cultures.Difco™ & BBL™ Manual, 2nd EditionDifco™ & BBL™ Manual, 2nd EditionProcedureSee appropriate references for specific procedures.Expected resultsRefer to appropriate references and procedures for results.references1. Reiter and Oram. 1962. J. Dairy Res. 29:63.2. Lowrie and Pearce. 1971. J. Dairy Sci. Technol. 6:166.3. Terzaghi and Sandine. 1975. Appl. Microbiol. 29:807.4. Shankar and Davies. 1977. J. Soc. Dairy Tech. 30:28.5.International Dairy Federation. 1981. Identification and enumeration of microorganisms in fermented milks. Joint IDF/ISO/AOAC Group E44.6. Richter and Vedamuthu 2001. In Downes and Ito (ed.), Compendium of methods for the microbiologi-cal examination of foods, 4th ed. American Public Health Association, Washington, D.C.Availability™Dehydrated – 500 gDifco ™ M17 BrothCat. No. 218561 Dehydrated – 500 g。
乳酸菌计数培养基和培养方法的筛选
$ 材料和方法
$"$ 材 料 %&!菌 种’保 加 利 亚 乳 杆 菌 ()*+,-)*.//01-0/2
3)4.*01#嗜 热 链 球 菌 5+467+,*,**01+8649,78./01#皆 为实验室保存菌种"
%:!培养基’共有 &;种" &!<=>?@AB:!CDE?FABG!培 养 基 <?HAB;!自 配 培 养 基’蛋白胨 IJ#胰 胨 &KJ#牛 肉 膏 &KJ#酵 母 膏 I J#西 红 柿 汁 :KKLM#麦 芽 膏 :J#吐 温 HK&LM#葡 萄糖 GJ#乳糖 ;J#CJEN;OFP:N ;J#QP:>N;K"I J#CREN;O;P:N K"KIJ#醋酸钠 :J#琼脂 :J#柠檬 酸三铵 :J#乳清粉 &KJ#加水至&KKKLM#SP @"IB &&IT#GKLURBI!西 CDE’在 CDE培 养 基 中 加 入 :KV 的 西 红 柿 汁 B @!改 进 CDE?WABF!奶 溴’脱 脂 乳 中 加 入 K"KKG :V溴甲酚紫和 :V琼脂而制得BH!保 加利 亚 乳 杆菌 选择培养基?&KABW!嗜 热 链 球 菌 选 择 培 养 基?&KAB&K!西 奶 CDE’CDE中 加 入 :KV西 红 柿 汁 和 &V的 脱 脂 乳B&&!西奶’西红柿汁中加 入 :KV的脱 脂 奶B&:!乳 酸菌平板 计 数 培 养 基?&&AB&G!伊 利 培 养 基?&&AB&;!酸 化 CDE’即 将 CDE培 养 基 调 SP 值 至 I"I左 右 而 制得" $"X 方 法 用 全 脂 鲜 乳 加 入 &"IV乳 糖 灭 菌 后#以 &KV的 接 种 量将保存菌 种 活 化 G次#即 得 试 验 用 的 活 化 菌 种 #活 化 后 置 冰 箱 中 保 存 备 用 " &":"& 单层平板法 选 用 CDE#改 进 CDE#<=>#培 养 基 <#奶 溴 和 西 奶 等 @种培养 基#将 活 化 后 的 菌 种 分 别 无 菌 操 作 稀 释 至 &KY;ZLM后#吸 取 &LM的 稀 释 菌 液 加 入 无 菌培养皿中#再倒入灭菌后冷却至 IKT左右的培养 基#摇动培 养 皿#使 菌 液 与 培 养 基 混 合 均 匀#然 后 静 置#待其凝固后入 ;K[;:T恒温培养箱中进行有氧 培 养 F:\#菌 落 长 出 后 挑 取 菌 落 制 片 作 革 兰 氏 染 色 #观 察 菌 的 形 态 " &":": 厌氧培养方法 在 一 较 大 的 盆 中 放 入 G个 小 烧 杯#杯 中 装 有 焦 性 没 食 子 万酸方和数]据^NP 的 混 合 溶 液#然 后#向 盆 中 加 入 一 定 量 水 #使 盆 内 水 面 至 小 烧 杯 高 度 的 一 半 左 右 #