银翘解毒丸的制备及质量检查

银翘解毒丸的制备及质量检查

【目的】

1. 自主查阅文献，设计实验方案

2. 掌握中药原料药的提取、丸剂的制备及检验方法，含量测定等分析方法

【实验材料】

1.处方：金银花50g，连翘50g，薄荷30g，荆芥20g，淡豆鼓25g，

牛蒡子（炒）30g，桔梗30g，淡竹叶20g，甘草25g

2.试剂：蒸馏水，炼蜜25g，硅藻土3g，石油醚50mL，乙醇50mL，

荆芥对照药材0.8g，薄荷脑对照品，羧甲基纤维素钠，正己烷-乙酸乙酯（17:3），茴香醛，连翘对照药材2g，醋酐-硫酸（20:1），牛蒡子对照药材 1.2g，甘草对照药材1g，三氯甲烷-甲醇-水（40:10:1），10%硫酸乙醇溶液。

3.仪器：加热套，2L圆底烧瓶，挥发油测定器，回流冷凝管，1L烧

杯，纱布，小型粉碎机，80~100目筛，喷湿器，显微镜，干燥箱，薄层板，层析缸。

【实验计划】

1.银翘解毒丸的提取方案

薄荷、荆芥提取挥发油，将30g薄荷和20g荆芥置于500ml圆底烧瓶中，加水200ml，数粒沸石，连接挥发油测定器及回流冷凝管，保持微沸5h。收集挥发油，用另一个玻璃仪器收集。药渣与连翘，淡豆鼓，牛蒡子，淡竹叶，甘草五味加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，过滤；滤液与上述水溶液合并，浓缩成稠膏。

2.银翘解毒丸的制剂方案

将金银花、桔梗粉碎成细粉，加入到上述稠膏中，混匀，干燥，粉碎成细粉，过筛，喷加薄荷、荆芥挥发油，混匀。每100g粉末加炼蜜80~90g制成浓缩丸，既得。

3.银翘解毒丸的质量控制方案

（1）鉴别

①取本品，置显微镜下观察：花粉粒类球形，直径约76μm，外壁有刺状雕纹，具3个萌发孔；草酸钙簇晶成片，直径5~17μm，存在于薄壁细胞中。联结乳管直径14~25μm，含淡黄色颗粒状物。

②取本品6g，切碎，加硅藻土1.5g，研细，加石油醚（60~90℃）

20ml，密塞，时时振摇，浸渍，过滤，滤液挥散至约1ml，作为共试品溶液。另取荆芥对照药材0.8g，加石油醚（60~90℃）20ml，同法制成对照药材溶液，再取薄荷脑对照品，加乙醇制成1ml含2ml的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法（药典附录ⅥB）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（17:3）为展开剂，展开，晾干，喷以茴香醛液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

③取本品6g，切碎，加硅藻土1.5g，研细，加乙醇20ml，加热回流1小时，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取连翘对照药材2g，加水40ml，置水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（药典附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（20:1）为展开剂，展开，取出，晾开，喷以醋酐-硫酸（20:1）混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，放冷，置紫外线光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，相同颜色的荧光斑点。

④取牛蒡子对照药材1.2g、甘草对照药材1g，分别加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法（药典附录ⅥB）试验，吸取（鉴别③）项下的供试品溶液及上述两种对照药材溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（40:10:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，分别在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

自制薄层板：将1份固定相和3份水（或加有黏合剂的水溶液）在研钵中按同一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入玻璃板上，振动玻璃板的一端，使固定相均匀的在玻璃板上展开，厚度为0.2~0.3mm，取下铺好薄层的玻板，置于水平台上于室温下晾干后，在110摄氏度烘干30分钟。使用前检查其均匀度，在反射光及透视光下检视，表面应均匀、平整、光滑、无麻点、无气泡、无破损及污染。

点样：在洁净干燥的环境，用专用的点样器点样于玻板上，一般

为圆点状或窄细的条带状，点样基线距底边10~15mm，接触点样时注意勿损伤薄层表面。点间距离可视斑点扩散情况以相邻斑点互不干扰为宜，一般不少于8mm。

（2）质量检查

A为500ml的短颈圆底烧瓶；

B为水分测定管；

C为直形冷凝管，外管长

40cm。

使用前，全部仪器应清洁，并

置烘箱中烘干。

①水分检查

取供试品适量（约相当于含水量1~4ml），精密称定，破碎成直径不超过3mm的颗粒，置A瓶中，加甲苯约200ml，必要时加入干燥、洁净的沸石或玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至B管的狭细部分。将A瓶置电热套中缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜的地方，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置，使水分与甲苯完全分离（可加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察）。检读水量，并计算供试品中的含水量（%）。所含水分不得过15.0%。

②重量差异检查

以一次服用量最高丸数为1份（丸重1.5g及1.5g以上的丸剂以1丸为1份；丸重0.015g以上的丸剂一次服用量最高丸数不足10丸

的，以10丸为1份）取供试品10份，分别称定重量，再与标示总量（每丸标示重量×称取丸数）或标示重量相比较（无标示重量的丸剂，与平均重量比较），按表1的规定，超出重量差异限度的不多于2份，

并不得有1份超出限度1倍。

（3）含量测定

供试品溶液的制备：精密称取银翘解毒丸适量各3份研碎后，分别装入纸筒放入索氏提取装置，各加入95%乙醇100ml，加热回流提取至无色，过滤。取滤液于100ml容量瓶中，稀释至刻度，得到3份供试品溶液备用。

芦丁标准溶液额制备：精密称取芦丁对照品5.4mg，加入甲醇使其溶解，然后转移至25ml容量瓶中，定容，摇匀即得芦丁标准溶液（0.216mg/ml）。

标准曲线的制备：精密量取芦丁标准液0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，按顺序依次分别入5%NaNO2溶液0.4ml混匀，放置6min，加10%AlCl3溶液0.4ml摇匀，放置6min，再加入4%NaOH溶液4ml，并加蒸馏水稀释至刻度摇匀放置15min。以0.0ml配制的10ml作为空白，在510nm波长处测定各标准溶液吸光度（A）值，然后以A值为纵坐标，标准溶液浓度C为横坐标绘制标准曲线，得到芦丁回归方程。